JPS639835B2 - - Google Patents
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- JPS639835B2 JPS639835B2 JP58234295A JP23429583A JPS639835B2 JP S639835 B2 JPS639835 B2 JP S639835B2 JP 58234295 A JP58234295 A JP 58234295A JP 23429583 A JP23429583 A JP 23429583A JP S639835 B2 JPS639835 B2 JP S639835B2
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungi isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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-
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- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
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- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
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- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
本発明はカニンガメラ属に属するγ−リノレン
酸(以下GLAという)含量の高い脂質生産菌を
炭素源濃度の高い培地で培養し、集めた菌体より
GLA含量の高い脂質(中性脂質、極性脂質など)
を製造する方法に係る。 これまでに報告されたGLA含有微生物につい
てはR.O.Mumma〔Lipids、6、584(1971)〕、R.
Shaw〔Biochem.Biophys.Acta.98、230(1965)〕、
鈴木ら〔油化学、30、863、(1981)〕などの文献
に記されているが、全脂質でのGLA含量は全体
に低く、十数%にすぎない。また、最近公告され
た鈴木らの発明(特公昭58―22199号)ではモル
テイエレラ属の糸状菌を用い、培地に炭化水素を
添加することによりGLA含量が全脂質の脂肪酸
組成の20%以上になると報告されている。しかし
モルテイエレラ属の糸状菌が一般のものと比較
べ、生育が遅く、特に低温域(低温培養の方が
GLA含量は高くなる)における生育は著しく遅
いため、生産性の悪さが問題であつた。 そこで本発明者らはGLA含量が高い、油
分含量が高い、生育速度が早いなどの条件を満
す菌株のスクリーニングを行つた結果、カニンガ
メラ・エレガンス(Cunninghamella elegans以
下C.elegansと記す)〔NRRL−1378、1379、
1380、1381〕が、これにほぼ適合することを見出
し、本発明を完成するに至つた。本発明で使用す
る菌は、上述のC.elegansが適当であるが、カニ
ンガメラ属に属するものであればすべての菌が使
用できる。例えば、カニンガメラブラケスリアナ
(Cunninghamella Blakesleeana)〔NRRL−
1373〕やカニンガメラ・エチニユレート
(Cunninghamella echinulata)〔NRRL−1383〕
などである。これらの菌はいずれも米国ノーザン
リージヨナルリサーチラボラトリー(Northern
Regional Research Laboratory)に保存され、
カタログに記載されている糸状菌である。 即ち、本発明はカニンガメラ属に属するγ−リ
ノレン酸含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高
い培地で培養し、培養物からγ−リノレン酸含量
の高い脂質を採取することを特徴とする脂質成分
の製造方法である。 培養する際の培地組成については、特に規定す
るものではないが、グルコース、酢酸ナトリウム
などの有機炭素源が好ましい。またその使用量は
3〜20重量%程度用いるのが望ましい。窒素源
は、酵母エキス、麦芽エキス等の有機窒素源のほ
か、硝酸塩などの無機窒素源も使用できる。ま
た、これらの組成分の他、ビタミンB6のような
ビタミン類の添加も、生育を早めるのに効果的で
ある。 上記糸状菌の培養は、通常液体培地で静置培
養、振とう培養、通気撹拌培養などにより行う。
培地のPHは微酸性乃至中性が良い。培養温度は15
〜30℃程度が好ましく、培養期間は4〜15日間程
度が必要である。このようにして得られた培養物
より菌体を集め、その菌体より脂質抽出を行う。
GLAを含む脂質が培地中に分泌されることはな
いので、培地を回収する必要はない。脂質の抽出
法については、湿菌体とガラスビーズを混合して
n−ヘキサンなどの溶剤とともにホモジナイズす
る方法や、湿菌体を凍結乾燥後、n−ヘキサン:
イソプロパノール混合溶剤などで抽出する方法な
どで行われる。また、必要により得られた総脂質
を常法によりケン化分解すれば、GLA含量の高
い脂肪酸混合物が得られる。 GLAは、リノール酸から動物体内において合
成される脂肪酸であり、GLAとなつた後にもビ
スホモ−γ−リノレン酸を経由してプロスタグラ
ンジンE1、F1およびE2、F2などに変換されると
いう非常に重要な役割を持つ物質である。最近に
なり、リノール酸からGLAへの変換反応が、老
化、アルコール摂取、ビタミン不足などの要因に
より若しくは阻害されることが見出され、GLA
の不足による体内プロスタグランジンバランスの
変化がアレルギー疾患、血栓症、ガンなどの原因
の1つにあげられるようになつている。 GLAは、月見草種子などのような植物種子中
にも微量存在することが知られているが、総脂質
の脂肪酸組成のせいぜい10%どまりである。ま
た、このような植物種子油はGLA以外の脂肪酸
主成分として70%ほどのリノール酸を含むためケ
ン化分解した後の脂肪酸混合物よりGLAを精製
する合、溶剤分別などの手法を用いても、両者が
非常によく似た挙動を示すため分離が困難であつ
た。これに対し、本発明によるGLA高含量油は
表―1に示すようにGLAに対し、リノール酸の
ような物理的性質のよく似た脂肪酸が比較的少な
く、GLAの精製も容易である。
酸(以下GLAという)含量の高い脂質生産菌を
炭素源濃度の高い培地で培養し、集めた菌体より
GLA含量の高い脂質(中性脂質、極性脂質など)
を製造する方法に係る。 これまでに報告されたGLA含有微生物につい
てはR.O.Mumma〔Lipids、6、584(1971)〕、R.
Shaw〔Biochem.Biophys.Acta.98、230(1965)〕、
鈴木ら〔油化学、30、863、(1981)〕などの文献
に記されているが、全脂質でのGLA含量は全体
に低く、十数%にすぎない。また、最近公告され
た鈴木らの発明(特公昭58―22199号)ではモル
テイエレラ属の糸状菌を用い、培地に炭化水素を
添加することによりGLA含量が全脂質の脂肪酸
組成の20%以上になると報告されている。しかし
モルテイエレラ属の糸状菌が一般のものと比較
べ、生育が遅く、特に低温域(低温培養の方が
GLA含量は高くなる)における生育は著しく遅
いため、生産性の悪さが問題であつた。 そこで本発明者らはGLA含量が高い、油
分含量が高い、生育速度が早いなどの条件を満
す菌株のスクリーニングを行つた結果、カニンガ
メラ・エレガンス(Cunninghamella elegans以
下C.elegansと記す)〔NRRL−1378、1379、
1380、1381〕が、これにほぼ適合することを見出
し、本発明を完成するに至つた。本発明で使用す
る菌は、上述のC.elegansが適当であるが、カニ
ンガメラ属に属するものであればすべての菌が使
用できる。例えば、カニンガメラブラケスリアナ
(Cunninghamella Blakesleeana)〔NRRL−
1373〕やカニンガメラ・エチニユレート
(Cunninghamella echinulata)〔NRRL−1383〕
などである。これらの菌はいずれも米国ノーザン
リージヨナルリサーチラボラトリー(Northern
Regional Research Laboratory)に保存され、
カタログに記載されている糸状菌である。 即ち、本発明はカニンガメラ属に属するγ−リ
ノレン酸含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高
い培地で培養し、培養物からγ−リノレン酸含量
の高い脂質を採取することを特徴とする脂質成分
の製造方法である。 培養する際の培地組成については、特に規定す
るものではないが、グルコース、酢酸ナトリウム
などの有機炭素源が好ましい。またその使用量は
3〜20重量%程度用いるのが望ましい。窒素源
は、酵母エキス、麦芽エキス等の有機窒素源のほ
か、硝酸塩などの無機窒素源も使用できる。ま
た、これらの組成分の他、ビタミンB6のような
ビタミン類の添加も、生育を早めるのに効果的で
ある。 上記糸状菌の培養は、通常液体培地で静置培
養、振とう培養、通気撹拌培養などにより行う。
培地のPHは微酸性乃至中性が良い。培養温度は15
〜30℃程度が好ましく、培養期間は4〜15日間程
度が必要である。このようにして得られた培養物
より菌体を集め、その菌体より脂質抽出を行う。
GLAを含む脂質が培地中に分泌されることはな
いので、培地を回収する必要はない。脂質の抽出
法については、湿菌体とガラスビーズを混合して
n−ヘキサンなどの溶剤とともにホモジナイズす
る方法や、湿菌体を凍結乾燥後、n−ヘキサン:
イソプロパノール混合溶剤などで抽出する方法な
どで行われる。また、必要により得られた総脂質
を常法によりケン化分解すれば、GLA含量の高
い脂肪酸混合物が得られる。 GLAは、リノール酸から動物体内において合
成される脂肪酸であり、GLAとなつた後にもビ
スホモ−γ−リノレン酸を経由してプロスタグラ
ンジンE1、F1およびE2、F2などに変換されると
いう非常に重要な役割を持つ物質である。最近に
なり、リノール酸からGLAへの変換反応が、老
化、アルコール摂取、ビタミン不足などの要因に
より若しくは阻害されることが見出され、GLA
の不足による体内プロスタグランジンバランスの
変化がアレルギー疾患、血栓症、ガンなどの原因
の1つにあげられるようになつている。 GLAは、月見草種子などのような植物種子中
にも微量存在することが知られているが、総脂質
の脂肪酸組成のせいぜい10%どまりである。ま
た、このような植物種子油はGLA以外の脂肪酸
主成分として70%ほどのリノール酸を含むためケ
ン化分解した後の脂肪酸混合物よりGLAを精製
する合、溶剤分別などの手法を用いても、両者が
非常によく似た挙動を示すため分離が困難であつ
た。これに対し、本発明によるGLA高含量油は
表―1に示すようにGLAに対し、リノール酸の
ような物理的性質のよく似た脂肪酸が比較的少な
く、GLAの精製も容易である。
【表】
また本発明方法によれば、炭素源はグルコース
などの安全性の確認された有機炭素源を使用でき
るから、このような場合は、炭化水素を炭素源と
する場合に比べ安全性が高いというメリツトもあ
る。またカニンガメラ属の菌は、これまでにアフ
ラトキシンなどの有毒物質を生産しないことが確
認されている。 実施例 1 表―2に示すような有機栄養培地(1)にC.
elegans(NRL−1378)を接種し、27℃、5日間、
100rpmで振とう培養した。培養後、ロ過にて菌
体を回収し凍結乾燥した。これにより、培地1
あたり2.5gの乾燥菌体を得た。この菌体より、
n−ヘキサン:イソプロノール=3:2(v/v)
の混合溶剤で総脂質を抽出したところ、0.4gの
脂質が得られた。次に脂質の一部を常法により、
ケン化分解し、不ケン化物を除去した後、脂肪酸
を得、これをメチルエステル化して脂肪酸組成を
分析した。結果を表―3に示す。
などの安全性の確認された有機炭素源を使用でき
るから、このような場合は、炭化水素を炭素源と
する場合に比べ安全性が高いというメリツトもあ
る。またカニンガメラ属の菌は、これまでにアフ
ラトキシンなどの有毒物質を生産しないことが確
認されている。 実施例 1 表―2に示すような有機栄養培地(1)にC.
elegans(NRL−1378)を接種し、27℃、5日間、
100rpmで振とう培養した。培養後、ロ過にて菌
体を回収し凍結乾燥した。これにより、培地1
あたり2.5gの乾燥菌体を得た。この菌体より、
n−ヘキサン:イソプロノール=3:2(v/v)
の混合溶剤で総脂質を抽出したところ、0.4gの
脂質が得られた。次に脂質の一部を常法により、
ケン化分解し、不ケン化物を除去した後、脂肪酸
を得、これをメチルエステル化して脂肪酸組成を
分析した。結果を表―3に示す。
【表】
(水で1にする)
【表】
実施例 2
表―4に示す(1)にC.elegans(NRRL−
1378)を接種し23℃、6日間100rpmで振とう培
養した。培養後、実施例1と同様に処理した結
果、乾燥菌体3.2g、総脂質0.55gが得られた。
このものの総脂肪酸組成を表―5に示す。
1378)を接種し23℃、6日間100rpmで振とう培
養した。培養後、実施例1と同様に処理した結
果、乾燥菌体3.2g、総脂質0.55gが得られた。
このものの総脂肪酸組成を表―5に示す。
【表】
【表】
実施例 3
表―6に示す培地(30)を50のジヤーフア
ーメンターに入れ、加熱加圧殺菌後、C.elegans
(NRRL−1378)を接種し、28℃、5日間の通気
撹拌培養を行つた。なお、培地のPHは、常に4.0
以上となるよう調節した。
ーメンターに入れ、加熱加圧殺菌後、C.elegans
(NRRL−1378)を接種し、28℃、5日間の通気
撹拌培養を行つた。なお、培地のPHは、常に4.0
以上となるよう調節した。
【表】
培養後、実施例1と同様に処理した結果、乾燥
菌体1480g、総脂質520gが得られた。このもの
の総脂肪酸組成を表―7に示す。
菌体1480g、総脂質520gが得られた。このもの
の総脂肪酸組成を表―7に示す。
【表】
このようにして得られた総脂質を常法によりケ
ン化分解し、不ケン化物を除去した後、脂肪酸を
集めたところ、400gの総脂肪酸が得られた。
ン化分解し、不ケン化物を除去した後、脂肪酸を
集めたところ、400gの総脂肪酸が得られた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 カニンガメラ属に属するγ−リノレン酸含量
の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養
し、培養物からγ−リノレン酸含量の高い脂質を
採取することを特徴とする脂質成分の製造方法。 2 カニンガメラ属に属するγ−リノレン酸含量
の高い脂質生産菌がカニンガメラ・エレガンス
(Cunninghamella elegans)である特許請求の範
囲第1項記載の製造方法。 3 培地の炭素源が有機炭素源である特許請求の
範囲第1項記載の製造方法。 4 γ−リノレン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の
20%以上である特許請求の範囲第1項又は第2項
記載の製造方法。 5 特許請求の範囲第1項、第2項又は第3項記
載の方法で得られた脂質成分をケン化分解するこ
とを特徴とするγ−リノレン酸含量の高い脂質成
分の製造方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58234295A JPS60126091A (ja) | 1983-12-14 | 1983-12-14 | γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造方法 |
| GB08431200A GB2152042B (en) | 1983-12-14 | 1984-12-11 | Process for preparing a lipid composition having a high y-linolenic acid content |
| DE19843445445 DE3445445A1 (de) | 1983-12-14 | 1984-12-13 | Verfahren zur herstellung einer lipoid-mischung mit einem hohen gehalt an (gamma)-linolensaeure |
| US07/403,791 US5026644A (en) | 1983-12-14 | 1989-09-06 | Process for preparing a lipid composition having a high γ-linolenic acid content |
| CA 2038947 CA2038947A1 (en) | 1983-12-14 | 1990-09-05 | Liquid lubricants from alpha-olefin and styrene copolymers |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58234295A JPS60126091A (ja) | 1983-12-14 | 1983-12-14 | γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60126091A JPS60126091A (ja) | 1985-07-05 |
| JPS639835B2 true JPS639835B2 (ja) | 1988-03-02 |
Family
ID=16968748
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58234295A Granted JPS60126091A (ja) | 1983-12-14 | 1983-12-14 | γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5026644A (ja) |
| JP (1) | JPS60126091A (ja) |
| DE (1) | DE3445445A1 (ja) |
| GB (1) | GB2152042B (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3354582B2 (ja) * | 1991-09-30 | 2002-12-09 | サントリー株式会社 | オメガ9系高度不飽和脂肪酸およびこれを含有する脂質の製造方法 |
| WO1998029558A1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Suntory Limited | Media for culturing microorganisms and process for producing unsaturated fatty acids or lipids containing the same |
| JP4088097B2 (ja) | 2002-04-26 | 2008-05-21 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸含有脂質の製造方法 |
| EP2497477B1 (en) * | 2011-03-09 | 2013-08-07 | King Saud University | Use of a Cunninghamella alcoholic extract as antimicrobial |
| CN104195049A (zh) * | 2014-06-04 | 2014-12-10 | 南京工业大学 | 一种γ-亚麻酸产生菌及其应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5822199A (ja) * | 1981-07-31 | 1983-02-09 | 尾ケ井 慶三 | 安全カ−ド |
| JPS6137096A (ja) * | 1984-07-31 | 1986-02-21 | Nisshin Oil Mills Ltd:The | γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造法 |
-
1983
- 1983-12-14 JP JP58234295A patent/JPS60126091A/ja active Granted
-
1984
- 1984-12-11 GB GB08431200A patent/GB2152042B/en not_active Expired
- 1984-12-13 DE DE19843445445 patent/DE3445445A1/de active Granted
-
1989
- 1989-09-06 US US07/403,791 patent/US5026644A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2152042B (en) | 1987-07-29 |
| GB8431200D0 (en) | 1985-01-23 |
| DE3445445C2 (ja) | 1987-07-23 |
| JPS60126091A (ja) | 1985-07-05 |
| DE3445445A1 (de) | 1985-11-07 |
| GB2152042A (en) | 1985-07-31 |
| US5026644A (en) | 1991-06-25 |
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