JPH0126024B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、試料血液を遠心分離操作に付してそ
の液体成分である血清または血漿を赤血球を主と
する固体成分から分離する際に使用される分離用
組成物に関する。

近年、臨床検査部門における血液成分の検査が
極めて重要視され、検査件数は増加の一途をたど
つている。その中で生化学検査等においては試料
として血清又は血漿のみを用いる項目が多く、検
査の為の予備操作として血清又は血漿を固体成分
から分離する事が必要とされている。この為従来
は、遠心分離操作により血球部分を沈澱せしめた
後、ピペツトにて吸い上げる方法で血清又は血漿
を採取していた。しかしながら、この方法は、分
離が不十分である上にたいへん手間がかかり、最
近になつて、この分取操作を簡便かつ高収率で行
なえるよう種々の方法が工夫されるようになつ
た。

その一つには、試料血液中に血清又は血漿と固
体成分との中間の比重を有する物質を加え、遠心
分離操作によつて該物質を両者の中間に位置させ
て隔壁を形成せしめる方法がある。この方法によ
れば、デカンテーシヨンのみにより、血清又は血
漿を分取する事が可能であり、時間及び労力の削
減を図り得るが他方次の様な欠点も有していた。

即ちこの隔壁形成用材料の形態としては、現在
までに固体形態、試料形態及びそれらの混合物の
３種類のものが提案されている。

固体形態のものは、例えば、ポリスチレンの粉
末状材料あるいはペレツト状材料等があるが、こ
れらを用いた場合には、隔壁としての機能が不十
分であるため、血球の血清または血漿への混入が
起つたり、隔壁自体が破壊され易いなどの種々の
欠点を有する。

又、液体形態のものとしてはアクリル系重合体
が知られているが、一般にアクリル系重合体等の
ように単量体から高粘度の液状重合体を得ようと
する場合には、反応の制御および反応方法によつ
ては、不純物の除去等製造上難しい問題が多い。
しかも液体形態のものは流動性がある為に使用前
の輸送、保存が面倒であるという欠点も有してい
る。

又、固体と液体の混合物のものとしてはシリコ
ーンにシリカ粉末を加えたものや変成液状ポリブ
タジエンにアルミナを加えたもの等のチキソトロ
ピー性を有する組成物が知られているが、これら
は一般に経時によつて粘度が増加したり減少した
りするという欠点があつた。即ち粘度が増加する
場合は、前記組成物をスピツツの底部に長期間保
存した後に、遠心分離により血清又は血漿と血球
部との中間位置に前記組成物を移動させるには強
力な遠心力を長時間必要とし、時には、通常、病
院や検査センター等で用いられる500乃至2000G
の遠心力を与えても前記組成物が流動しない為に
隔壁が形成されない場合もあり、逆に粘度が経時
により低下する場合は、前記組成物をスピツツに
充填して長期間保存したものを使用し、血液を入
れて遠心分離を行なつた後、血清を注ぎ出す為に
スピツツを傾けた際に隔壁が崩れ落ち、血清中に
血球が混入する等の支障をきたすことになる。

本発明者等は上記のような血清または血漿分離
用組成物の現状に鑑みて鋭意研究を重ねた結果、
チキソトロピー性付与剤、粘性液状物に水不溶性
アミン化合物を混合することにより粘度の経時変
化が生じない組成物が得られることを発見し、斯
かる知見を基にして通常の遠心分離条件で容易に
安定した隔壁が形成され、血清または血漿の分取
が簡単かつ精度よく行なえると同時に輸送、保存
にも特に工夫を必要としない血清または血漿分離
用組成物を完成させた。

本発明の要旨は、(1)シリカ、ガラス、タルク及
びベントナイトからなる群から選ばれる少くとも
１種であり、平均粒径が１ｍμ〜100μのチキソ
トロピー性付与剤２乃至15重量部、(2)アクリル樹
脂オリゴマー、動植物油のエポキシ変成物及び液
状塩素化ポリブテンからなる群から選ばれた20℃
における粘度が1000cps以上である粘性液状物100
重量部および(3)炭素数８以上のアルキル基を分子
内に１個以上有する水不溶性アミン化合物0.02乃
至５重量部が混合されたものからなり、比重が
1.03〜1.08であることを特徴とする、血清または
血漿分離用組成物に存する。

次に本発明血清または血漿分離用組成物につい
て更に詳細に説明する。

血清又は血漿分離用組成物は、血清または血漿
と固体成分を分離する隔壁を形成するものであつ
て、血清または血漿と固体成分とが分離後混り合
うことのないように隔壁を安定化することが要求
される。例えばスピツツ内に組成物及び検査用血
液を入れて分離操作を行なつた後持ち運びした
り、血清または血漿を分取するためにスピツツを
傾けた際に隔壁が流動して崩れないようにする必
要がある。このためにチキソトロピー性付与剤が
使用される。

チキソトロピー性付与剤としては、シリカ、ガ
ラス、タルク、ベントナイト等の無機質粉末、更
にこれらの、グラフト反応或いはカツプリング反
応による親水化処理或いは疎水化処理がされた表
面処理物等が挙げられ、これらは単独で又は２種
類以上が混合されて用いられる。

これらのチキソトロピー性付与剤のうち、シリ
カ微粉末が最も好結果を示す。シリカ微粉末とは
無水ケイ酸を主成分とし必要に応じてグラフト反
応或いはカツプリング反応による疎水化処理がな
されたものを含む微粉末であり、原料の天然にお
ける産出状態が粉末状であるか塊状であるかは問
わない。

しかしてこれらチキソトロピー性付与剤の平均
粒径は１ｍμ〜100μのものが用いられる。１ｍ
μより小さいと取扱いが困難である上に後述する
粘性液状物と混合した際に凝集して二次粒子を形
成し易く均一な分散が困難であり、又100μより
も大きいと粘性液状物中での分散安定性が劣り、
分離用組成物全体としての均一な流動性に欠ける
からである。

チキソトロピー性付与剤により、分離用組成物
がチキソトロピー性を生ずるようにするために、
粘性液状物が使用される。

粘性液状物は、チキソトロピー性付与剤と強い
相互作用を有するものであつてもよいし、チキソ
トロピー性付与剤と強い相互作用を有しないもの
であつてもよいし、又、良好な相溶性を有する両
者を併用するものであつてもよい。

チキソトロピー性付与剤と強い相互作用を有す
るとは、あるチキソトロピー性付与剤をある粘性
液状物と混合し均一に分散させた後、腕長10cmの
遠心分離機で回転数4000r.p.mにて30分間遠心分
離を行つても前記混合物の成分の分布状態に偏り
が見られない場合を言う。かかる相互作用の生ず
る原因は末だ明らかではないが、親水性基を有す
る材料間では主として水素結合による作用が、又
親水性基を有しない材料間では分子構造から引き
起される凝集力が原因しているものと推測され
る。

チキソトロピー性付与剤と強い相互作用を有す
る粘性液状物としては、アクリル樹脂オリゴマー
や、大豆油、アマニ油、サフラワー油、魚油等動
植物油のエポキシ変成物等が挙げられ、粘度（20
℃）が1000cps以上のものが用いられる。

かゝる粘性液状物を使用する場合は、チキソト
ロピー性付与剤と粘性液状物が、分離してしまう
ことがないものとなる。

チキソトロピー性付与剤と強い相互作用を有し
ない粘性液状物も、本発明における水不溶性アミ
ン化合物の存在下で使用できる。かゝる粘性液状
物としては液状塩素化ポリブテンが挙げられ、粘
度（20℃）が1000cps以上のものが用いられる。

更にチキソトロピー性付与剤と強い相互作用を
有する粘性液状物及びこれと良好な相溶性を有し
チキソトロピー性付与剤と強い相互作用を有しな
い粘性液状物との混合物を使用することもでき
る。この場合の良好な相溶性とは、両方の粘性液
状物を混合し、均一に分散させた後常温にて一週
間放置しても相分離が生じない場合をいう。

チキソトロピー性付与剤と強い相互作用を有す
る粘性液状物及びこれと良好な相溶性を有しチキ
ソトロピー性付与剤と強い相互作用を有しない粘
性液状物との混合物を使用する場合には、経時的
な粘度の安定性をすぐれたものとなしうる。そし
てこの場合、両方の粘性液状物の混合比率はそれ
ぞれのチキソトロピー性付与剤との相互作用の強
さを考慮して好適な範囲が設定されるが、一般に
チキソトロピー性付与剤と強い相互作用を有する
粘性液状物100重量部に対してチキソトロピー性
付与剤と強い相互作用を有しない粘性液状物が10
〜200重量部用いられる。

ところでかゝる経時的な粘度の安定性は水不溶
性アミン化合物によつて著しくすぐれたものとな
ることが確認された。

水不溶性アミン化合物としては炭素数８以上の
アルキル基を分子内に１個以上有するものが用い
られ、例えばドデシルアミン、テトラデシルアミ
ン、ヘキサデシルアミン、オクタデシルアミン、
ドデシルジメチルアミン、テトラデシルジメチル
アミン、オクタデシルジメチルアミン、トリオク
チルアミン等である。

前記のアミン化合物が使用されるのは、チキソ
トロピー性付与剤の表面に吸着しやすい性質を有
し、チキソトロピー性付与剤と粘性液状物のいず
れに対しても相互作用を有しこれが経時的な粘度
の安定性に働くことによる。とり分け、炭素数が
８以上のアルキル基を有するアミンが好適なの
は、単に水不溶性が高く分離された血清や血漿中
に溶けこまない性質がすぐれていることによるだ
けでなく、チキソトロピー性付与剤の表面に吸着
したアミン化合物の長鎖アルキル基がチキソトロ
ピー性付与剤同志の相互作用を安定化する働きを
有すると推測されることによる。

前記アミン化合物が使用されることによつて、
継時的な粘度の安定性が著しくすぐれたものとな
り、その結果遠心分離性、隔壁の安定性がすぐれ
た血清又は血漿分離用組成物が得られる。遠心分
離性がすぐれているとは、臨床検査に際し通常
500乃至2000G程度で遠心分離が行なわれるが、
この範囲の遠心力で移動し隔壁を形成しうる性質
がすぐれていることを意味する。又隔壁安定性が
すぐれているとは、遠心分離により形成された隔
壁が強度的にすぐれており、スピツツを傾けた際
にも崩壊しない性質がすぐれていることを意味す
る。経時的に粘度が上昇するものは、長期間保管
すると遠心分離性が悪くなり、通常の遠心力500
乃至2000Gでは隔壁を形成できなくなり、又逆に
経時的粘度が低下するものは、長期間保管すると
隔壁安定性が悪くなり、スピツツを傾けた際にも
隔壁が崩れたりするものとなるが、本発明によれ
ばかゝる問題を生じないものとなる。

チキソトロピー性付与剤、粘性液状物、水不溶
性アミン化合物の使用割合は、粘性液状物100重
量部当りチキソトロピー性付与剤が２乃至15重量
部、水不溶性アミン化合物が0.02乃至５重量部と
なされ、かゝる割合で使用される場合は遠心分離
による隔壁形成が短時間でなされるものとなる。

本発明における血清又は血漿分離用組成物は比
重が1.03乃至1.08とされる。これは隔壁を形成す
るには血清又は血漿と固形成分との中間的な比重
であることを必要とすることによる。比重1.03乃
至1.08は常温における比重であり、標準的には20
℃における値である。常温での比重を基準にする
のは臨床検査が常温で行なわれるのが通常である
ことによる。しかしながら本発明における血清又
は血漿分離用組成物が常温以外の温度条件下に使
用される場合については、常温での比重に換算し
て1.03〜1.08となるものであればよい。例えば40
℃における比重が1.02〜1.07の場合、又０℃にお
ける比重が1.04〜1.09の場合であつても20℃にお
ける比重が1.03〜1.08となれば、本発明における
比重の範疇である。

本発明分離用組成物を用いて血清または血漿と
血球等の固体成分とを分離するには、試料血液に
該分離用組成物を添加して遠心分離操作を行えば
よく、その結果、血清または血漿と血球等の固体
成分との界面に本発明組成物による隔壁が形成さ
れるので、デカンテーシヨン等により血清又は血
漿を簡単に精度良く取り出すことが出来る。

本発明血清または血漿分離用組成物によれば、
適当なチキソトロピー性を有し、経時による粘度
の増加が無い為、製造直後は勿論長期間保存され
た後に用いても特別に強力な遠心力を必要とせ
ず、通常の遠心分離条件にて容易に採血管内に隔
壁が形成され血清又は血漿を簡単に精度よく取り
出すことが出来る。又経時による粘度の低下が無
い為、長期間の保存後に用いても隔壁が安定して
形成され、一旦形成された隔壁は長期間の経過後
も採血管を傾けた程度では崩れ落ちることがない
ものとなる。

以下本発明の実施例について説明する。

実施例 １ チキソトロピー付与剤として平均粒径10ｍμ、
20℃における比重2.2シリカ粉末10重量部、粘性
液状物20℃における比重1.00、粘度8000cpsの液
状塩素化ポリブテン90重量部、及びオクタデシル
ジメチルアミン0.1重量部を準備した。

これらの各成分を３本ロール混練機で混練し、
20℃における比重が1.06の分離用組成物を得た。

次いで該組成物を、容量10mlのガラス製スピツ
ツ管４本に１ｇずつ注入した。組成物作成直後、
このうちの１本に試料血液を加え血液凝固後に
2500r・ｐ・ｍ（1160G）で３分間遠心分離を行な
つたところ、前記組成物は血清と血餅の中間に隔
壁を形成し、デカンテーシヨンによつて容易に血
清を分取出来た。

又、被検者から採取した血液を用いて蛋白質、
脂質、血清、酵素、無機イオン等32項目について
生化学的血清検査を前記組成物を血清分離剤とし
て使用した場合と使用しなかつた場合について行
ないこれらの血清検査値を比較したところ、同一
と見なしうる結果が得られ、前記組成物の使用が
血清検査値に何等影響しないことが分つた。

又、前記組成物のみを入れた他のスピツツを倒
立させ、水平面に対し60℃の角度をなすように傾
ける倒立試験を行なつたが、組成物は流動しなか
つた。更に前記組成物を常温下に30日間保管した
後、同様の試験を行なつたが、隔壁の形成、血清
検査値への影響はなく、倒立試験での組成物の流
動もみられなかつた。

実施例 ２ 20℃における比重が1.0で粘度が25000cpsの２
−エチルヘキシルアクリレートオリゴマー90重量
部、20℃における比重が2.2のシリカ粉末10重量
部、トリオクチルアミン0.2重量部の各成分を３
本ロール混練機にかけて混練し、20℃における比
重が1.06の分離用組成物を得た。

次いで、該組成物を、容量10mlのガラス製スピ
ツツに１ｇ注入し、試料血液を加え、血液凝固後
に2500r・ｐ・ｍ（1160G）で10分間遠心分離を行
なつたところ、前記組成物は血清と血餅の中間に
隔壁を形成した。この血清を分取するために、ス
ピツツを傾けたが隔壁の崩壊を生ずることなく血
清を取出すことができた。又実施例１と同様に倒
立試験を行なつたが、組成物の流動はなかつた。
更に前記組成物を常温下に30日間保管した後、同
様の試験を行なつたが、隔壁の形成への影響はな
く、倒立試験での組成物の流動もみられなかつ
た。

実施例 ３ 20℃における比重が1.02で粘度が10000cpsの塩
素化ポリブテン70重量部、20℃における比重が
1.0で粘度が1700cpsのエポキシ化大豆油21重量
部、20℃における比重が2.2のシリカ粉末９重量
部、トリオクチルアミン0.2重量部の各成分を３
本ロール混練機にかけて混練し、20℃における比
重が1.06の分離用組成物を得た。

次いで該組成物を、容量10mlのガラス製スピツ
ツに１ｇ注入し、試料血液を加え、血液凝固後に
2500r・ｐ・ｍ（1160G）で３分間遠心分離を行な
つたところ、前記組成物は血清と血餅との中間に
隔壁を形成した。この血清を分取する為に、スピ
ツツを傾けたが隔壁の崩壊を生ずることなく血清
を取出すことができた。又実施例１と同様に倒立
試験を行なつたが、組成物の流動は生じなかつ
た。更に前記組成物を40℃で30日間保管した後、
同様の試験を行なつたが、隔壁の形成への影響は
なく、倒立試験での組成物の流動もなく、経時安
定性がきわめてすぐれているものであることがわ
かつた。

比較例 20℃における比重が1.0で粘度が25000cpsの２
−エチルヘキシルアクリレートオリゴマー90重量
部、20℃における比重が2.2のシリカ粉末10重量
部の各成分を３本ロール混練機にかけて混練し、
20℃における比重が1.06の組成物を得た。

次いで該組成物を、容量10mlのガラス製スピツ
ツに１ｇ注入し、試料血液を加え、血液凝固後に
2500r・ｐ・ｍ（1160G）で10分間遠心分離を行な
つたところ、前記組成物は血清を血餅との中間に
隔壁を形成した。

しかしながら組成物を常温で30日間保管した後
のものは、2500r・ｐ・ｍ（1160G）、3000r・ｐ・
ｍ（1660G）、3500r・ｐ・ｍ（2260G）で各10分間
の遠心分離を行なつた場合スピツツの底部より移
動せず、隔壁が形成されなかつた。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ (1)シリカ、ガラス、タルク及びベントナイト
   からなる群から選ばれる少くとも１種であり、平
   均粒径が１ｍμ〜100μのチキソトロピー性付与
   剤２乃至15重量部、(2)アクリル樹脂オリゴマー、
   動植物油のエポキシ変成物及び液状塩素化ポリブ
   テンからなる群から選ばれた20℃における粘度が
   1000cps以上である粘性液状物100重量部および(3)
   炭素数８以上のアルキル基を分子内に１個以上有
   する水不溶性アミン化合物0.02乃至５重量部が混
   合されたものからなり、比重が1.03〜1.08である
   ことを特徴とする、血清または血漿分離用組成
   物。