JPH01265029A - 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 - Google Patents
人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤Info
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- JPH01265029A JPH01265029A JP63091768A JP9176888A JPH01265029A JP H01265029 A JPH01265029 A JP H01265029A JP 63091768 A JP63091768 A JP 63091768A JP 9176888 A JP9176888 A JP 9176888A JP H01265029 A JPH01265029 A JP H01265029A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤に関する。
従来の技術
人の悪性ＩＩ！瘍細胞を３０℃〜３７℃でグルコースを
添加した培地で培養し、該培地から悪性腫瘍細胞を除い
て抽出したものからなる人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤が
特開昭５９−１６２８８９号として知られている。
添加した培地で培養し、該培地から悪性腫瘍細胞を除い
て抽出したものからなる人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤が
特開昭５９−１６２８８９号として知られている。
発明が解決すべき課題
本発明は、前記従来技術に示されたものより遥かに大き
な悪性腫瘍ｍ胞に対する増殖抑制作用を有する人の悪性
腫瘍細胞増殖抑制剤を提供することを目的とするもので
ある。
な悪性腫瘍ｍ胞に対する増殖抑制作用を有する人の悪性
腫瘍細胞増殖抑制剤を提供することを目的とするもので
ある。
課題を解決するための手段
この発明は人の悪性腫瘍細胞を通常の高等動物細胞の培
養条件で培養増殖させ、血清を含まない培養液で一度洗
い、血清弁を除き、血清不含のグルコース濃度３〜５ｇ
＃！（培養液）に調製した培養液を用いて３４°〜３６
℃（好ましくは３５±１℃）、相対湿度１００％、５％
炭炭酸ガス型の大気中で培地交換することなく悪性１ｉ
ｍ細胞が死ぬまで培養（約１週間）した後、１０，００
０ ＲＰＭで１０分遠心分離して、悪性腫瘍ｌＩｌ胞を
除くことによって悪性腫瘍増殖抑制剤原液を得る。
養条件で培養増殖させ、血清を含まない培養液で一度洗
い、血清弁を除き、血清不含のグルコース濃度３〜５ｇ
＃！（培養液）に調製した培養液を用いて３４°〜３６
℃（好ましくは３５±１℃）、相対湿度１００％、５％
炭炭酸ガス型の大気中で培地交換することなく悪性１ｉ
ｍ細胞が死ぬまで培養（約１週間）した後、１０，００
０ ＲＰＭで１０分遠心分離して、悪性腫瘍ｌＩｌ胞を
除くことによって悪性腫瘍増殖抑制剤原液を得る。
この発明は、大きな悪性Ｈ瘍ＩＩｌ胞増殖抑制能を持た
せるためには、腫瘍細胞を培地交換せず死ぬまで培養す
ることが必要条件で、腫瘍細胞の死なくしては得られな
いことを発見し、これを悪性腫瘍細胞増殖抑制剤に利用
したものである。
せるためには、腫瘍細胞を培地交換せず死ぬまで培養す
ることが必要条件で、腫瘍細胞の死なくしては得られな
いことを発見し、これを悪性腫瘍細胞増殖抑制剤に利用
したものである。
悪性腫瘍細胞を培地交換しながら培養しても、悪性腫瘍
細胞増殖抑制能をもつものはほとんど生成せず、センダ
イウィルス等で感作して生理活性物質を生成させること
は出来ても感作することなく生成させることは出来ない
ものである。又、本発明による悪性腫瘍増殖抑制剤原液
には、培養の除用いる栄養源のアミノ酸、ビタミン、グ
ルコース、ミネラルそれに微Ｒの牛胎児血清成分及び悪
性腫瘍細胞より放出された物質しか含まれていず、正常
細胞に悪影響を及ぼすような物質は特に含まれていない
。
細胞増殖抑制能をもつものはほとんど生成せず、センダ
イウィルス等で感作して生理活性物質を生成させること
は出来ても感作することなく生成させることは出来ない
ものである。又、本発明による悪性腫瘍増殖抑制剤原液
には、培養の除用いる栄養源のアミノ酸、ビタミン、グ
ルコース、ミネラルそれに微Ｒの牛胎児血清成分及び悪
性腫瘍細胞より放出された物質しか含まれていず、正常
細胞に悪影響を及ぼすような物質は特に含まれていない
。
培養液中のグルコース濃度は、安定した最大の抗腫瘍活
性を得るためには少なくとも２ （１＃！必要であり、
別の実験（実験２）で抑制剤原液中のグルコース濁度の
残量を測定することによりグルコース消費量は２．５（
１＃！であることが確かめられているので、グルコース
濃度は４〜５ｇ／ｌに調製して用いる。
性を得るためには少なくとも２ （１＃！必要であり、
別の実験（実験２）で抑制剤原液中のグルコース濁度の
残量を測定することによりグルコース消費量は２．５（
１＃！であることが確かめられているので、グルコース
濃度は４〜５ｇ／ｌに調製して用いる。
又、培養時の温度も３５℃での培養が最も高い活性を示
す。
す。
本悪性腫瘍細胞増殖抑制剤は糖蛋白質より構成される高
分子量物質サイト力イン等とは異なり、高分子量３００
０以下の悪性腫瘍細胞死後の抽出物質である。
分子量物質サイト力イン等とは異なり、高分子量３００
０以下の悪性腫瘍細胞死後の抽出物質である。
本発明の人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤は試験管内で悪性
腫瘍細胞を死滅させるが正常細胞に対しては増殖を抑制
こそすれ致死効果は認められないし、分子堡が小さいの
で生体内で抗原として作用する恐れもなく、在来の抗腫
瘍剤のような副作用は殆んどないものと思われる。
腫瘍細胞を死滅させるが正常細胞に対しては増殖を抑制
こそすれ致死効果は認められないし、分子堡が小さいの
で生体内で抗原として作用する恐れもなく、在来の抗腫
瘍剤のような副作用は殆んどないものと思われる。
本発明で用いる悪性腫瘍細胞は特に限定する必要はない
。
。
実施例１
市販の合成培地、例えばイーグルのＭＥＭに１０％牛脂
児血清を添加した培地で悪性腫瘍細胞、例えば人のＢｅ
ｔａ Ｃｅ１ｌｓ （子宮癌株化細胞）を容器が飽和
状態になるまで培養した復、無血清培地で一度洗い、血
清分を除く。
児血清を添加した培地で悪性腫瘍細胞、例えば人のＢｅ
ｔａ Ｃｅ１ｌｓ （子宮癌株化細胞）を容器が飽和
状態になるまで培養した復、無血清培地で一度洗い、血
清分を除く。
次いで、グルコースを５Ｑ／ｆｌ（培地〉濃度になるよ
うに市販合成培地イーグルのＭＥＭに添加した無血清培
地を加え、３５℃、１００％湿度、５％ＣＯ２濃度の空
気中で培地交換せず細胞が死滅するまで約−週間培養す
る。
うに市販合成培地イーグルのＭＥＭに添加した無血清培
地を加え、３５℃、１００％湿度、５％ＣＯ２濃度の空
気中で培地交換せず細胞が死滅するまで約−週間培養す
る。
培地を集め１０．００ＯＲＰＭで１０分間遠心し、悪性
腫瘍細胞を分離除去して悪性腫瘍ｍ胞増殖抑制剤原液を
得る。
腫瘍細胞を分離除去して悪性腫瘍ｍ胞増殖抑制剤原液を
得る。
実施例２
イーグルのＭＥＭなどの合成培地にまたはそれにグルコ
ースを濃度５ｇ／ｌになるように添加した培地に１０％
牛脂児血清を添加した培地で悪性腫瘍細胞を容器が飽和
状態になるまで培養した後、無血清培地で一度洗い、血
清分を除く。
ースを濃度５ｇ／ｌになるように添加した培地に１０％
牛脂児血清を添加した培地で悪性腫瘍細胞を容器が飽和
状態になるまで培養した後、無血清培地で一度洗い、血
清分を除く。
次いで、グルコースを５１１１＃！（培地）１１度にな
るように市販合成培地イーグルのＭＥＭに添加した無血
清培地を加え、３５℃、１００％湿度、５％ＣＯ２１１
度の空気中で培地交換せず細胞が死滅するまで約−週間
培養する。
るように市販合成培地イーグルのＭＥＭに添加した無血
清培地を加え、３５℃、１００％湿度、５％ＣＯ２１１
度の空気中で培地交換せず細胞が死滅するまで約−週間
培養する。
培地を集め１０．００ＯＲＰＭで１０分間遠心分離し、
悪性腫瘍細胞を分離除去して悪性腫瘍細胞増殖抑制剤原
液を得る。
悪性腫瘍細胞を分離除去して悪性腫瘍細胞増殖抑制剤原
液を得る。
実験１
無血清培地培養時の培地交換の有無による悪性腫瘍細胞
増殖抑制能の違い。
増殖抑制能の違い。
Ａ、比較抑制剤
■ 実施例１及び２の方法で培地交換せずｍ胞が死ぬま
で培養した抑制剤。
で培養した抑制剤。
■ 実施例１及び２において、細胞が死ぬまでは培養せ
ず、１日おきに培地交換し１０日間培養した抑制剤。
ず、１日おきに培地交換し１０日間培養した抑制剤。
Ｂ、検定
１５１１１１１１径のプラスチックシャーレに１０％牛
脂児血清を添加した市販の合成培地、例えばイーグルの
ＭＥＭ１１１ｊ！とＨｅ１ｌａ Ｃｅ１ｌｓ１×１０４
ケとを入れ、３５℃で２４時間培養後、■、■の各抑制
剤を含む培地と交換し、以後１日おきに同培地で培地交
換を行いｍ堕の増殖状態を６白目に測定し、１ｌｅｌｌ
ａ Ｃｅｌｌｓの生存細胞数を数えた。
脂児血清を添加した市販の合成培地、例えばイーグルの
ＭＥＭ１１１ｊ！とＨｅ１ｌａ Ｃｅ１ｌｓ１×１０４
ケとを入れ、３５℃で２４時間培養後、■、■の各抑制
剤を含む培地と交換し、以後１日おきに同培地で培地交
換を行いｍ堕の増殖状態を６白目に測定し、１ｌｅｌｌ
ａ Ｃｅｌｌｓの生存細胞数を数えた。
又、コントロールとして抑制剤を含まない同一組成の培
地を用い同様な操作を行った。
地を用い同様な操作を行った。
表１
表１はその結果を示し、抑制率は
で示される。
実験２
悪性腫瘍細胞培養時の最適グルコース濃度Ａ、抑制剤の
製法 培養増殖した１ｌｅｌｌａ Ｃｅ１ｌｓを無血清培地で
一度洗って血清分を除き、１５０ｃｎ＋２の底面積をも
つ培養ビンに２Ｘ１０７ケ以上の１１ｅｌｌａ Ｃｅ１
ｌｓと培地１１当り１，２及び５ｇの濃度になるように
グルコースを添加した無血清培地を夫々５０１１１Ｊ！
加え、３７℃、１００％湿度、５％Ｃ０２空気中で細胞
が死滅するまで培地交換することなく約−週間培養した
。
製法 培養増殖した１ｌｅｌｌａ Ｃｅ１ｌｓを無血清培地で
一度洗って血清分を除き、１５０ｃｎ＋２の底面積をも
つ培養ビンに２Ｘ１０７ケ以上の１１ｅｌｌａ Ｃｅ１
ｌｓと培地１１当り１，２及び５ｇの濃度になるように
グルコースを添加した無血清培地を夫々５０１１１Ｊ！
加え、３７℃、１００％湿度、５％Ｃ０２空気中で細胞
が死滅するまで培地交換することなく約−週間培養した
。
夫々の培地を１０．００ＯＲＰＭで１０分間遠心分離し
、腫瘍Ｈ胞を除き、グルコース濃度１゜２及び５ Ｑ１
０で、培養して試料原液を得た。
、腫瘍Ｈ胞を除き、グルコース濃度１゜２及び５ Ｑ１
０で、培養して試料原液を得た。
Ｂ、抑制剤の検定法
１５ｍｍ径のプラスチックシャーレに１０％牛脂児血清
を添加した市販の合成培地、例えばイーグルのＭＥＭＩ
１１１ｊ！とＨｅ１ｌａ Ｃｅ１ｌｓ１ Ｘ １０４ケ
とを入れ、３７℃で２４時間培養後、Ａで製作した抑制
剤を含む培地と交換し、以後１日おきに同培地で培地交
換を行い、生存細胞の数を６日目に測定した。
を添加した市販の合成培地、例えばイーグルのＭＥＭＩ
１１１ｊ！とＨｅ１ｌａ Ｃｅ１ｌｓ１ Ｘ １０４ケ
とを入れ、３７℃で２４時間培養後、Ａで製作した抑制
剤を含む培地と交換し、以後１日おきに同培地で培地交
換を行い、生存細胞の数を６日目に測定した。
又、コントロールとし抑制剤を含まない同一組成の培地
を用い同様な操作を行った。
を用い同様な操作を行った。
Ｃ４結果
表２はその結果を示すもので、
抑制剤を添加しない場合をコントロールで抑制率を示し
ている。市販の合成培地のグルコース濃度１ｇ７１時を
基準にすると、細胞生存数では２ｇ／ｊ！時で１／３．
５ｇ７１時で１／４．抑制率では夫々３倍、４倍になる
。
ている。市販の合成培地のグルコース濃度１ｇ７１時を
基準にすると、細胞生存数では２ｇ／ｊ！時で１／３．
５ｇ７１時で１／４．抑制率では夫々３倍、４倍になる
。
又、別な実験でグルコース必要量は２．５ｇ／ｌ培地で
あることが確かめられているので４ｇ／ｌを最適準とす
る。
あることが確かめられているので４ｇ／ｌを最適準とす
る。
表２
実験３
悪性ＩＩ！瘍細胞培養時の最適温度
Ａ、２５℃、３５℃及び４２℃における悲性腫瘍抑制剤
の製造 培養増殖した１ｌｅｌｌａ Ｃｅ１ｌｓを無血清培地で
一度洗って血清分を除き、１５０ｃ１２の底面積をもつ
培養ビンに市販の無血清合成培地としてイーグルのＭＥ
Ｍ５０ｍ １と共に１ｌｅｌｌａＣＯＩＩＳ２ ｘ １
Ｑ ７ケ以上を入れ、実験群は４２℃、３５℃及び２５
℃の３群、コントロールは３７℃で相対湿度９０〜ｉｏ
ｏ％、５％ＣＯ２の空気中で培地交換することなく細胞
が死滅するまで約１週間培養した。
の製造 培養増殖した１ｌｅｌｌａ Ｃｅ１ｌｓを無血清培地で
一度洗って血清分を除き、１５０ｃ１２の底面積をもつ
培養ビンに市販の無血清合成培地としてイーグルのＭＥ
Ｍ５０ｍ １と共に１ｌｅｌｌａＣＯＩＩＳ２ ｘ １
Ｑ ７ケ以上を入れ、実験群は４２℃、３５℃及び２５
℃の３群、コントロールは３７℃で相対湿度９０〜ｉｏ
ｏ％、５％ＣＯ２の空気中で培地交換することなく細胞
が死滅するまで約１週間培養した。
各群から夫々培地を集め、１０．０００８ＰＨで１０分
間遠心分離して腫瘍細胞を除き、４２℃、３５℃、２５
℃及び３７℃で培養した試料原液を得た。
間遠心分離して腫瘍細胞を除き、４２℃、３５℃、２５
℃及び３７℃で培養した試料原液を得た。
Ｂ、抑制剤の検定法
１５１ｍ径のプラスチックシＩ！−レにＨｅ１ｌａＣｅ
ｌｌｓｌ Ｃ４ケを植え込み、１０％牛脂児血清添加の
ＭＥＭ培地で２４時間培養後、試料液に培地ＭＥＭと同
組成になるようにアミノ酸、ビタミン類、グルコース等
を添加（粉末として市販されている）した培地と交換し
、以後１日おきに培地交換し、６日間１００％湿度、３
７℃、５％ＣＯ２の空気中で培養し、生存１［１１ｔｌ
の数を数え、 で増殖阻止率を計算した。
ｌｌｓｌ Ｃ４ケを植え込み、１０％牛脂児血清添加の
ＭＥＭ培地で２４時間培養後、試料液に培地ＭＥＭと同
組成になるようにアミノ酸、ビタミン類、グルコース等
を添加（粉末として市販されている）した培地と交換し
、以後１日おきに培地交換し、６日間１００％湿度、３
７℃、５％ＣＯ２の空気中で培養し、生存１［１１ｔｌ
の数を数え、 で増殖阻止率を計算した。
Ｃ４結果
表３は３つの抑制剤のサンプルに対する各培？ｆＪＷ度
での増殖阻止率を示すものであり、表４は培養温度３７
℃での増殖阻止率に対する他の温度での増殖阻止率を示
すものであり、３５℃近辺が悪性腫瘍細胞」８差時の最
適温度であることがわかる。
での増殖阻止率を示すものであり、表４は培養温度３７
℃での増殖阻止率に対する他の温度での増殖阻止率を示
すものであり、３５℃近辺が悪性腫瘍細胞」８差時の最
適温度であることがわかる。
表３
表４
実験４
抑制剤の各種細胞に対する抑制作用
第１図〜第４図は各種細胞の培養後培地における細胞増
殖の経口的変化を成長曲線に表わしたものである。いず
れの実験においても、実験群は各種悪性腫瘍細胞の培地
ＢＭＥによる培養後培地をアミコンＹＭ５ （Ｍ、Ｗ、
１０３）で限外濾過後、栄養源としてグルコース、アミ
ノ酸、ビタミン、血清１０％を添加した培地を用い、対
照群は新鮮培地ＢＭＥに実験群と同様の栄養源を添加し
たものを用いた。細胞の初期濃度は１ Ｘ １０４ｃｅ
ｌｌｓとし、第１図の実験では直径３５ｍｍの培？ａ器
を、第２図〜第５図の実験では直径１５１１１１１（７
）培ａ器を用いた。
殖の経口的変化を成長曲線に表わしたものである。いず
れの実験においても、実験群は各種悪性腫瘍細胞の培地
ＢＭＥによる培養後培地をアミコンＹＭ５ （Ｍ、Ｗ、
１０３）で限外濾過後、栄養源としてグルコース、アミ
ノ酸、ビタミン、血清１０％を添加した培地を用い、対
照群は新鮮培地ＢＭＥに実験群と同様の栄養源を添加し
たものを用いた。細胞の初期濃度は１ Ｘ １０４ｃｅ
ｌｌｓとし、第１図の実験では直径３５ｍｍの培？ａ器
を、第２図〜第５図の実験では直径１５１１１１１（７
）培ａ器を用いた。
第１図の実験はヒト腎細胞癌由来＃ｌ立株細胞ＨＲＣの
経日的変化を調べたもので、対照群の細胞は増加してい
るのに比べ、ヒト腎細胞癌由来樹立株＠胞ＨＲＣ培養後
培地より抽出した物質を含む実験群は、増殖が抑制され
ていることが明らかに示されている。
経日的変化を調べたもので、対照群の細胞は増加してい
るのに比べ、ヒト腎細胞癌由来樹立株＠胞ＨＲＣ培養後
培地より抽出した物質を含む実験群は、増殖が抑制され
ていることが明らかに示されている。
第２図は正常ヒト２倍体皮膚線帷芽ｍ胞Ｎ ＡＳ６３の
経日的変化を調べたもので、実験群にはヒト胃癌由来樹
立株細胞ＭＫの培養後培地より抽出した培地を用いてい
る。これらの成長曲線から、正常細胞に比ベヒト胃癌由
来樹立株細胞ＭＫの実験群は、明確に成長阻止効果が表
われている。
経日的変化を調べたもので、実験群にはヒト胃癌由来樹
立株細胞ＭＫの培養後培地より抽出した培地を用いてい
る。これらの成長曲線から、正常細胞に比ベヒト胃癌由
来樹立株細胞ＭＫの実験群は、明確に成長阻止効果が表
われている。
実験５
抑制剤と新鮮培地との混合物による抑制作用第３図、第
４図は、ヒト腎細胞癌由来樹立株細胞ＨＲＣの培養後培
地から作られた新鮮培地の各種混合比における濃度反応
を調べたもので、第３図はヒト腎１０胞癌由来樹立株細
鞄ＨＲＣの濃度反応曲線を、第４図は正常ヒト２倍体皮
膚線雑芽ＩＩＩ胞ＮＡＳ６３の濃度反応曲線を表わして
いる。いづれも培養後培地を分子ｆｆ１１００の分子を
篩い分ける膜であるアミコン社！ＦＪＹＭ ２により濾
過した抑制剤を使用し、百分比は抑制剤と新鮮培地との
和に対して抑制剤培地の含まれる割合を示している。こ
れらの図より、抑制剤は正常細胞にも増殖抑ｉｌ１反応
を示すが、悪性種湯の一例であるヒト腎細胞癌由来樹立
株細胞ＨＲＣには増殖抑制効果がより強く認められる。
４図は、ヒト腎細胞癌由来樹立株細胞ＨＲＣの培養後培
地から作られた新鮮培地の各種混合比における濃度反応
を調べたもので、第３図はヒト腎１０胞癌由来樹立株細
鞄ＨＲＣの濃度反応曲線を、第４図は正常ヒト２倍体皮
膚線雑芽ＩＩＩ胞ＮＡＳ６３の濃度反応曲線を表わして
いる。いづれも培養後培地を分子ｆｆ１１００の分子を
篩い分ける膜であるアミコン社！ＦＪＹＭ ２により濾
過した抑制剤を使用し、百分比は抑制剤と新鮮培地との
和に対して抑制剤培地の含まれる割合を示している。こ
れらの図より、抑制剤は正常細胞にも増殖抑ｉｌ１反応
を示すが、悪性種湯の一例であるヒト腎細胞癌由来樹立
株細胞ＨＲＣには増殖抑制効果がより強く認められる。
Ｄ、急性毒性試験
第２図、第４図で用いている細胞、即ち［正常ヒト２倍
体皮膚線維芽細胞ＮＡＳ６３Ｊは６３才の正常男子の前
胸部皮膚より採取した正常細胞で、第２図で明らかなよ
うにある程度増殖抑制を受けるが致死効果は示さない。
体皮膚線維芽細胞ＮＡＳ６３Ｊは６３才の正常男子の前
胸部皮膚より採取した正常細胞で、第２図で明らかなよ
うにある程度増殖抑制を受けるが致死効果は示さない。
第１図は、本発明の抑制剤と新鮮培地とのヒト腎細胞癌
由来樹立株細胞ＨＲＣの増殖を示す図、第２図は、本発
明の抑制剤と新鮮培地との正常ヒト２倍体皮膚線維芽細
胞ＮＡＳ６３の増殖を示す図、第３図は、抑制剤と新鮮
培地との各種混合比におけるヒト腎細胞癌由来樹立株細
胞ＨＲＣの濃度反応を示す図、第４図は、第３図と同様
の正常ヒト２倍体皮膚線維芽細胞ＮＡＳ６３の濃度反応
を示す図である。 第１図 日数□ 第２図 日数□ 第３図 ”／。 Ｊ杏ｔ６シ昆０几
由来樹立株細胞ＨＲＣの増殖を示す図、第２図は、本発
明の抑制剤と新鮮培地との正常ヒト２倍体皮膚線維芽細
胞ＮＡＳ６３の増殖を示す図、第３図は、抑制剤と新鮮
培地との各種混合比におけるヒト腎細胞癌由来樹立株細
胞ＨＲＣの濃度反応を示す図、第４図は、第３図と同様
の正常ヒト２倍体皮膚線維芽細胞ＮＡＳ６３の濃度反応
を示す図である。 第１図 日数□ 第２図 日数□ 第３図 ”／。 Ｊ杏ｔ６シ昆０几
Claims (3)
- （１）悪性腫瘍細胞を無血清培地で前記細胞が死ぬまで
培養した培地より成ることを特徴とする人の悪性腫瘍細
胞増殖抑制剤。 - （２）培地はそのグルコース濃度が培地１ｌ中３〜５ｇ
ｈであることを特徴とする請求項（１）記載の人の悪性
腫瘍細胞増殖抑制剤。 - （３）培養温度が３５±１℃であることを特徴とする請
求項（１）または（２）記載の人の悪性腫瘍細胞増殖抑
制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63091768A JP2691557B2 (ja) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63091768A JP2691557B2 (ja) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01265029A true JPH01265029A (ja) | 1989-10-23 |
| JP2691557B2 JP2691557B2 (ja) | 1997-12-17 |
Family
ID=14035744
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63091768A Expired - Fee Related JP2691557B2 (ja) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2691557B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1382346A1 (en) * | 1996-04-03 | 2004-01-21 | The Rogosin Institute | Conditioned medium and diffusible biological product produced by incubating entrapped cells |
| WO2019070069A1 (ja) * | 2017-10-05 | 2019-04-11 | 医療法人社団市川クリニック | 殺細胞活性を有する細胞抽出成分又は組成物の調製方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5933223A (ja) * | 1982-08-20 | 1984-02-23 | Koken Kk | 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
-
1988
- 1988-04-15 JP JP63091768A patent/JP2691557B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
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|---|---|---|---|---|
| JPS5933223A (ja) * | 1982-08-20 | 1984-02-23 | Koken Kk | 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
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