JPH01269432A - 植物苗条の育成発根方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野］ 本発明は植物苗条の育成発根方法に関する。更に詳しく
は、組織培養の手法を用いてバラ属植物等の植物の植物
体切片から植物体である種苗を再生する方法に関する。

〔従来技術〕

バラ属植物の種苗の増殖は従来挿し木によって行われて
きた。しかし、このような増殖方法は多くの人手と土地
を必要とするばかりでなく、根が損傷を受けやずいとい
う問題点がある。また近年植物組織培養技術を利用した
種苗の増殖法も行われているが、培養中に発根するため
に、土壌への移植時に根が損傷を受けることが多い。

〔発明が解決しようとする課題〕

従来知られている植物種苗の生産方法では、生産工程に
おいて根が損傷を受は易く、そのためこのような根部に
損傷のある幼種苗を育成してもその後の成育が悪く歩留
りが低いという問題がある。

また全般的にみて、従来の種苗生産方法では人手がかか
り生産効率が低い。

本発明者等はかかる状況のもとに種苗の生産工程におい
て、発根させた根が損傷を受けることのないような種苗
生産方法を探索し、これによって活力のある生育安定性
の高い種苗を効率良く生産する方法について検討した。

〔課題を解決するための手段〕

その結果、本発明者等は下記方法を用いれば前記目的を
達成できることを見出し本発明を完成するに到った。す
なわち本発明の方法によれば、植物生育用培養槽の中で
、植物の器官または組織片等の切片を液体培養して前記
植物体切片を実質的に根をもたない苗条に育成し、次に
この育成された苗条を発根用培床に移して培養して該苗
条を発根せしめて植物体にすることを特徴とする植物苗
条の育成発根方法が提供される。

本発明の植物苗条の育成発根方法が適用される植物とし
ては、本発明では特に限定はされず植物一般に適用でき
る。便宜上、以下の説明では代表例としてバラ属植物の
苗条についてその育成発根方法について説明する。

バラ属に含まれる植物として具体的には、ハイブリッド
ティーローズ、グランシフローラ、フロリブンダなどの
犬、中輪バラやクライミングハイブリッドティーローズ
、ランブラ−などのツルバラおよびマリーアントワネッ
ト、ハイジー、シンブレラなどのミニバラに属する植物
を例示できる。

本発明では植物の器官または組織片等の切片はタンク等
の植物成育用培養槽の中で液体培養されて、この植物体
切片は実質的に根をもたない苗条に育成される。この場
合、本発明では植物苗条を育成するに当たっては、例え
ばバラ属植物については器官の中でも側芽ないしは側芽
を含む組織片を組織培養の材料に用いることが好ましい
。側芽以外の他の器官、組織を用いた場合には苗条を形
成させることが通常できない。本発明では液体培地が用
いられるが、これは寒天のような固体培地を用いて側芽
を含む組織片を培養しても、苗条の成育速度が遅く生産
効率が悪いためである。

本発明では、液体培養は培地に酸素含有ガスを通気して
行うことが特に好ましい。通気しないで培養した場合に
は苗条の育成速度が遅い。この場合の酸素含有気体とし
ては例えば酸素や空気を単独に用いたり、酸素、空気、
チッ素、二酸化炭素などのうちの２種類以上の気体を混
合した気体を用いることができる。本発明ではこれらの
気体中の酸素含有量は通常５〜１００Ｖｏ１％、より好
ましくは２（１”、１００Ｖｏ１％である。本発明では
該気体の液体培地中への通気速度としては、培養槽の形
状によって多少異なるが、一般に酸素移動容量係数（Ｋ
Ｌａ）で表示して通常は０．１〜３０程度、特に好まし
くは１〜３程度になるように調節して組織培養が行われ
る。

本発明では培養物に加えられる外力をできるだけ小さく
するために、ＫＬａの値を大きくして培養を行う場合に
は酸素含有ガス中の酸素濃度を高めて、該ガスの単位時
間当たりの通気量を大きくしないようにすることが好ま
しい。本発明では酸素含有ガスの通気量としては液体培
地の単位容積（り、単位時間当たり通常１００ないし３
００００　Ｉｎｌ／ｆｆ１−ｈｒ、特に好ましくは１０
００〜５０００ｍｆ　／　Ｑ　−ｈｒの範囲にあるよう
にされる。通気量が３００００以上の場合には苗条が損
傷し易いので、又１００以下の場合にはＫＬａＯ値を前
記０．１〜３０程度にすることが困難であることから通
気量を前記の範囲とすることが好ましい。

本発明では例えば側芽のような植物体切片が液体培養さ
れて苗条にまで育成されるが、この場合の育成されて得
られる苗条には実質的に根が無いように、すなわちこの
液体培養期間中には発根しないようにして植物体切片か
ら構成される装置を適宜大きさの苗条にまで育成される
。そのため本発明に係わる液体培地には植物ホルモンと
してはオーキシンは通常用いられない。又オーキシンを
使用することがあってもその濃度は通常１０−　”Ｍ／
Ｐ以下であり、オーキシン濃度は実質的に苗条から根が
形成されない濃度に制限される。本発明では植物ホルモ
ンとしてサイトカイニンを添加した液体培地が用いられ
る。サイトカイニンとして具体的にはカイネチン９１、
セニルアミノプリン９２、フェニルアミノプリン、ヘン
シルアデニン（ＢＡ）”、ペンチルアミノプリン、２−
ナフチルメチルアミノプリン、シクロへキシルアミノプ
リン、０−クロロベンジルアミノプリン、０−メチルベ
ンジルアミノプリンなどの合成サイトカイニン、６−イ
ツペンテニルアミノプリン、トランス−ゼアチン、シス
−ゼアチン、２−メチルチオ−６−イツベンテニルアミ
ノプリン、プリン−６−カーバモイルスレオニン、０−
ヒドロシキベンジルアミノ−９−β−リボフラノシルプ
リンなどの天然サイトカイニンを例示できる。

本発明では、これらの中ではヘンシルアデニンが好まし
い。サイトカイニンの使用割合としては通常は１０−”
Ｍ／　ｆｉ　〜１０−５Ｍ／　ｆｆｉ、好ましく　ハ１
Ｏ−７？Ｉ／ｉ！。

〜１０−６Ｍ／Ｉ！、の範囲にある。

本発明で使用される培地は、無機成分および炭素源を必
須成分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン類を添加
し、更に必要に応じてアミノ酸類を添加した培地である
。該培地の無機成分としては、窒素、リン、カリウム、
ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、イオウ、鉄、
マンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、
コバルト等の元素を含む無機塩を挙げることができ、具
体的には硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニ
ウム、塩化アンモニウム、塩化カリウム、塩化カルシウ
ム、リン酸１水素カリウム、リン酸２水素ナトリウム、
硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硫酸ナトリウム
、硫酸第１鉄、硫酸第２鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、モ
リブデン酸すトリウム、三酸化モリブデン、ヨウ化カリ
ウム、硫酸亜鉛、ホウ酸、塩化コバルト等の化合物を例
示できる。

該培地の炭素源としては、ショ糖等の炭水化物とその誘
導体、脂肪酸等の有機酸およびエタノール等の１級アル
コールなどを例示できる。

該培地の植物ホルモン類については前述した通りである
。

該培地のビタミン類としては、ビオチン、チアミン（ビ
タミンＢｌ）、ピリドキシン（ビタミンＢ６）、ピリト
キザール、ピリドキサミン、パントテン酸カルシウム、
アスコルビン酸（ビタミンＣ）、イノシトール、ニコチ
ン酸、ニコチン酸アミドおよびリボフラビン（ビタミン
Ｂ２）などを例示できる。

該培地のアミノ酸類としては、例えばグリシン、アラニ
ン、グルタミン酸、システィン、フェニルアラニンおよ
びリジンなどを例示できる。

本発明の前記培地は、通常は、前記無機成分を約０．１
μ門ないし約１００ｍＭ、前記炭素源を約１ｇ／ｊ２な
いし約１００ｇ／ρ、前記植物ホルモン類を約０．０１
ｍｇ／Ｉ！、ないし約１０ｍｇ／ｉ！、、前記ビタミン
類を約０．１　ｍｇ／　Ｉ！、ないし約１５０ｍｇ／４
２および前記アミノ酸類を０ないし約１０００ｍｇ／ｆ
ｆｉ含ませて使用されることが望ましい。

本発明に係わる組織培養に用いられる前記培地として具
体的には、従来から知られている植物の組織培養に用い
られている培地、例えば、ムラシケ・スクーグ（’６２
）　ＣＭｕｒａｓｈｉｇｅ　＆　Ｓｋｏｏｇ）の培地、
リンスマイヤー・スクーグ（ＲＭ−１９６５）　（Ｌｉ
ｎｓｍａｉｅｒ＆　Ｓｋｏｏｇ〕の培地、ホワイト　（
’６３）　（Ｗｈｉｔｅ　）の培地、ガンボルグ（Ｇａ
ｍｂｏｒｇ　）のＢ−５培地、三片のト９培地、ニッチ
・ニッチの培地（Ｎ１ｔｃｈ　＆Ｎ１ｔｃｈ　３等に前
記した炭素源および植物ホルモンを添加し、更に必要に
応じて前記したビタミン類、アミノ酸類を添加して調製
される培地を例示できるが、本発明ではこの中でも特に
エッチ・ニッチ、リンスマイヤー・スクーグ又はムラシ
ゲ・スクーグの培地を用いて調製される培地が好ましい
。なお、上記した従来公知の培地の組成に関しては、例
えば、行内、中島、古谷著の「新植物組織培養ｊｐ３８
６〜ｐ３９１、朝倉書店、１９７９年に記載されている
。

本発明では前記した液体培養においては、前述の如く実
質的に根を発根させないように苗条が育成されるが、こ
れは以下に述べる理由からである。

液体培養中に苗条から発根した場合には、苗条は培養液
中に懸だくして動きまわっているので苗条から長く伸び
た根が互いに絡まって成育するため、液体培養終了後に
培地から苗条を取り出そうとすると、苗条がいくつか集
まって塊状になっているので取り出しにくく、しかも１
つ１つの根を有する画状に分離するのが困難であり、は
とんどの場合、根の一部が切断され、根部はもとより他
の部位も損傷を受けた状態にある種苗しか得られない。

かかる損傷を受けた幼種苗ではこれを育成してもその活
力は弱く、その後の成育安定性は悪（歩留りが低い。本
発明者等は液体培地を用いて植物体切片から種苗を生産
しようとする場合にはかかる問題のあることを認め、前
記した如く液体培養の期間中には実質的に発根しないよ
うにして苗条のみが育成されるようにした。

本発明で行われる前記液体培養は通常光照射下で行われ
る。この場合の光強度としては通常１００〜１０，００
０ルツクス、好ましくは１　、０００〜５，０００ルツ
クスの範囲である。本発明では光照射下に培養すると葉
が良く展開し、また葉色が濃くなるなど良質の苗条が得
られるので好ましい。また本発明では光照射下に培養を
行う場合には、１　、０００〜５゜０００ルツクスの明
期を通常１２〜１６時間、０〜１００ルツクスの暗照が
通常８〜１２時間となるようにして培養すると成育速度
が速く活力の高い安定な苗条が得られるので好ましい。

本発明では、前記液体培養によって得られた苗条は１つ
１つの苗条に分離され、この苗条を支持材が充填されて
なる発根用培床に移して培養して発根させて充分に大き
な植物体（種苗）に育成される。

この場合の支持材として具体的には滅菌処理したパーラ
イト、バーミキュライト、ロックウール、ポリエステル
、土、吸水性ポリマ粒子、セラミックウール等を例示で
きる。該支持材は苗条を支えることのできるものであれ
ば通常どのような形のものでも、又どのような材質のも
のでも構わない。

本発明では支持材が充填されてなる発根用培床に苗条を
適宜間隔を保って１つ１つ挿して発根が行われる。この
場合ナフタレン酢酸等のオーキシンを含有する培養液を
発根用培床に含浸させて行うと発根が促進されるので好
ましい。この場合の培養液中のオーキシン濃度としては
通常１０−３〜１Ｏ−ＩｌとＩｌの範囲である。また本
発明では発根を、炭酸ガスを発根用培床に供給しく通常
５００〜Ｌ　ＯＯＯｐｐｍ）光照射下に行うと馴化が早
く途中で枯死することの少ない安定性に優れた種苗を得
ることができるので好ましい。

〔発明の効果〕

本発明に係わる植物種苗の育成発根方法によれば、培養
育成の過程において根が損傷を受けていないので成育速
度が速く、しかも活力の強い安定性に優れた種苗を効率
良く生産することができる。

〔実施例〕

以下、本発明の方法を実施例に基づいて具体的に示す。

実施例１〜６ ミニパラのマリーアントワネットの茎を滅菌して側芽を
採取し、ショ糖３％を含むムラシゲ・スクーグの培地に
ヘンシルアデニン１μＨを添加したｐＨ５，７の無菌の
液体培地を調製しこの培地をガラス製の培養槽に入れ、
これに先のバラの側芽を加えて、２５°Ｃで１６時間明
期（照度４０００１ｕｘ）　８時間暗期の光条件下で、
酸素を通気して４週間培養して根をもたない苗条を再生
させ、これを材料として用いた。表１に示した濃度のナ
フタレン酢酸（ＮＡＡ）　ｉｇ液を各種の支持材中に加
え、これに苗条を挿して、湿度１００％の発根・馴化装
置内で２週間、その後湿度を７５％として２週間育成し
た後に屋外で１週間生育させた。２週間口に発根率を測
定し、屋外で１週間生育させた後に生存率を測定した。

その結果を表１に示した。

ここで、発根率、生存率は以下の方法で算出した。

発根率−発根した苗条数÷処理した苗条数×１００生存
率−生存した植物数÷処理した植物数×１００実施例７ 実施例１においてナフタレン酢酸を含む溶液のかわりに
蒸留水を用いること以外は該実施例と同様にして発根・
馴化させた結果を表１に示した。

（来夏以下余白） 表　　　１ 比較例１〜３ 実施例１〜６において液体培地に植物ホルモンとしてヘ
ンシルアデニン１μ門及びナフタレン酢酸０．１μ門を
含有させた培地を用いた以外は該実施例と同様にして４
週間培養した所、苗条がら多数の根がで、これが絡まり
合っているため、根を傷つけないように培地がらこの苗
条を１つ１つ分離して取り出すことは困難であった。根
が一部切れたりして損傷のある苗条を実施例１〜６と同
様にしてナフタレン酢酸溶液を含浸させたあるいはオー
キシンを含まない水溶液を含浸させた支持材中に挿して
同様に生育させた結果を表２に示す。

この場合の生存率は実施例に比べて低下した。

表　　　２ 出願人　三井石油化学工業株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、植物生育用培養槽中で、植物の器官または組織片等
   の切片を液体培養して前記植物体切片を実質的に根をも
   たない苗条に育成し、次にこの育成された苗条を発根用
   培床に移して培養して該苗条を発根せしめて植物体にす
   ることを特徴とする植物苗条の育成発根方法。 ２、植物生育用培養槽中での植物体切片の液体培養を、
   所要濃度のサイトカイニンを含有し、オーキシンを全く
   含有しない培地中で行い、発根用培床での苗条の培養を
   所要濃度のオーキシンを含有する培地中でおこなうこと
   を特徴とする請求項１記載の植物苗条の育成発根方法。 ３、植物生育用培養槽中でのサイトカイニンの所要濃度
   が１０＾−＾８Ｍ／ｌ〜１０＾−＾５Ｍ／ｌであり、発
   根用培床でのオーキシンの所要濃度が１０＾−＾３〜１
   ０＾−＾８Ｍ／ｌであることを特徴とする請求項２記載
   の植物苗条の育成発根方法。 ４、発根用培床が培養液を含浸させた支持材が充填され
   てなり、前記発根用培床における苗条の培養を、苗条を
   前記支持材に適当間隔で挿した状態で行うことを特徴と
   する請求項１乃至３のいずれかの項記載の植物苗条の育
   成発根方法。 ５、植物がバラ属植物であることを特徴とする請求項１
   乃至４のいずれかの項記載の記載の植物苗条の育成発根
   方法。