JPH0146118B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPH0146118B2
JPH0146118B2 JP55049106A JP4910680A JPH0146118B2 JP H0146118 B2 JPH0146118 B2 JP H0146118B2 JP 55049106 A JP55049106 A JP 55049106A JP 4910680 A JP4910680 A JP 4910680A JP H0146118 B2 JPH0146118 B2 JP H0146118B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
hyaluronidase
dye
hyaluronic acid
precipitant
parts
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
JP55049106A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS55141197A (en
Inventor
Tooto Teibooru
Girusu Rainaa
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Siemens Healthcare Diagnostics GmbH Germany
Original Assignee
Behringwerke AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Behringwerke AG filed Critical Behringwerke AG
Publication of JPS55141197A publication Critical patent/JPS55141197A/ja
Publication of JPH0146118B2 publication Critical patent/JPH0146118B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2400/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates
    • G01N2400/10—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • G01N2400/38—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence, e.g. gluco- or galactomannans, Konjac gum, Locust bean gum or Guar gum
    • G01N2400/40—Glycosaminoglycans, i.e. GAG or mucopolysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate, hyaluronic acid, heparin, heparan sulfate, and related sulfated polysaccharides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/975—Kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/808—Automated or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ヒアルロニダーゼに対する抗体であ
る抗ヒアルロニダーゼの測定方法、そしてそのた
めに使用され得る診断剤に関する。
ヒアルロニダーゼはランスフイルド
（Lancefild）によればＡ群の連鎖球菌の細胞外新
陳代謝生成物である。ヒアルロニダーゼは人間に
おいて特異的な抗体を誘起させる抗原である。人
間の血液中における抗体濃度を知ることは診断上
重要である。
連鎖球菌により惹き起されるリウマチ熱に際し
ては、抗ストレプトリジンカ価の上昇とならんで
また患者の血液中における抗ヒアルロニダーゼの
上昇がしばしば確認される。大抵これらの値の間
には良好な一致がある。しかしながらＡ群の連鎖
球菌に感染している患者の約20％は何な抗ストレ
プトリジン−Ｏ力価の有意な上昇を示さず、しか
しながら抗ヒアルロニダーゼ力価の明瞭な上昇を
示す。それゆえに抗ヒアルロニダーゼを診断上測
定する必要が存する。
抗ヒアルロニダーゼの測定方法については多数
の記載がある。主なものは以下の通りである。
１ キン（Quinn）氏によるムチン凝血塊減少試
験〔「J.clin.Invest.」第27巻第463頁（1948）参
照〕、 ２ フアーバー（Faber）氏による混濁減少試験
〔「Acta Path.Microbiol.Scand.」第31巻第345
頁（1952）参照〕、 ３ キベル（Quibell）氏による粘度低下試験
〔「Biochem.J.」第34巻第625頁（1940）参照〕。
キン氏による方法では、特異的にヒアルロン酸
（Ｎ−アセチルグルコサミンおよびグルクロン酸
から構成される酸性ムコ多糖類）を分解するヒア
ルロニダーゼの抑制が測定される。ヒアルロニダ
ーゼに対する抗体の存在は酸性PH値で生じるヒア
ルロン酸の凝固の抑制−この凝固抑制はヒアルロ
ニダーゼが存在すると出現する−が起らなくなる
ことによつて示される。
混濁減少試験およびその変形はヒアルロニダー
ゼの存在下に出現するヒアルロン酸溶液の混濁抑
制が抗ヒアルロニダーゼによつて起らなくなるこ
とを利用する。
粘度低下試験ではヒアルロニダーゼの存在下に
出現するヒアルロン酸溶液の粘度低下の抗ヒアル
ロニダーゼによる中止を測定する。
これらの方法は診断上の実験室にとつて一連の
欠点がある〔Bergmeier氏著「Methoden
derenzymatischen Analyse」第１巻第984頁参
照〕。
ムチン凝血塊減少試験は感度が低く、その試験
を実施するには大量の酵素を必要とする。微量力
価プレートではこの試験は不正確である。
混濁測定は精製ヒアルロニダーゼに対してのみ
適していて、特別に清浄な基質を必要とする。こ
の測定は細部にわたつて非常に細心に行われねば
ならず大きな装置上の出費（光度計）を必要とす
る。
粘度測定法の結果は基質の純度次第であり、酵
素外反応に基づく粘度の減少はもう一つの問題で
ある。
他の方法は感度があまりに低いかあるいはその
試験を実施するには大量の酵素を必要とする。
本発明によれば、抗ヒアルロニダーゼ力価の測
定を高感度で非常に特異的に行うのを可能にする
方法が見出された。本方法のもう一つの利点はそ
の迅速な実施可能性である。
本発明は抗ヒアルロニダーゼを含む水溶液の系
列希釈物にはじめに定められた量の連鎖球菌ヒア
ルロニダーゼ次いで所定量のヒアルロン酸を作用
させ、次いで連鎖球菌ヒアルロニダーゼにより分
解されなかつたヒアルロン酸を沈殿させるために
沈殿剤−色素複合体を加え、そして沈殿を生成さ
せるために要する沈殿剤−色素複合体の最低濃度
を測定することを特徴とする、水溶液中の抗ヒア
ルロニダーゼの測定法にある。
本発明の方法は、ヒアルロニダーゼにより分解
されないヒアルロン酸があらかじめ染色されてい
る沈殿剤を用いて非常によく視認できる有色沈殿
を形成して沈殿され得るという知識に基づいてい
る。
本方法の最も重要な要素は陽イオン洗浄剤およ
び酸性色素からなる沈殿剤−色素複合体である。
本発明の意味における陽イオン洗浄剤として特
にセチルトリメチルアンモニウムハロゲン化物な
かんずくブロミドあるいはクロリドのような第四
級アンモニウム化合物の群から選択されるような
ものが適している。ヒアルロン酸を沈殿させる他
の陽イオン洗浄剤はセチルピリジニウムハロゲン
化物なかんずくクロリドのようなピリジニウム化
合物である。しかしながら好ましくはセチルトリ
メチルアンモニウムブロミドである。
色素成分として特に酸およびクロム染料特に例
えばジス−アゾ色素のようなアゾ色素、なかんず
くコンゴー赤が適している。
色素混合物を使用することにより沈殿限界の読
みとり可能性がさらに改良され得る。例えばトル
イジン青溶液を使用する場合、淡青色下地上もし
くは淡青色下地中に橙赤色沈殿が得られる。しか
しまた例えばメチルグリーンあるいはブロムフエ
ノール青のような他の色素も使用され得る。青色
下地の形成に特に良好に適しているのはトルイジ
ン青である。
本発明による色素試薬は以下の割合の成分から
構成されている。10重量部の陽イオン洗浄剤に１
〜10重量部の酸性色素を加える。二つの成分、場
合によつてはまたそれ以上の成分の混合は、水溶
液中20〜100℃なかんずく60〜70℃で行われる。
本発明の実施に適したヒアルロン酸基質は例え
ば以下のようにして製造され得る。１重量部のヒ
アルロン酸を50〜250重量部のアミノ酸例えばグ
リシンあるいはβ−アラニンと水1000ml中に懸濁
する。この混合物をヒアルロン酸が完全に溶解す
るまで０〜50℃で放置し、続いて過し且つ凍結
乾燥する。マンニツトあるいはアルブミンが凍結
乾燥添加物として同様に適している。
沈殿剤−色素複合体の製造は例えば以下のよう
にしてとり行われ得る。１重量部のセチルトリメ
チルアンモニウムブロミド（CTA）および１〜
２重量部のNaOHをエレンマイヤーフラスコ中
で蒸留水を用いて懸濁させ、そして一定して振盪
下に60〜70℃に加温する。続いてこの溶液を室温
に冷却しそして溶液のPH値を酢酸を用いて3.5〜
10に調整する。過後溶液の１容量部に対して撹
拌下に２〜10容量部のコンゴー赤溶液、所望に応
じて0.02〜0.5容量部の0.1Mトルイジン青溶液お
よび20〜40容量部の蒸留水を加える。
本発明の目的はまた、10重量部の陽イオン洗浄
剤および１〜10重量部（特に好ましくは４重量
部）の酸性色素からなる複合体を含有する、水溶
液中の抗ヒアルロニダーゼの測定方法のためのヒ
アルロン酸の沈殿剤−色素複合体それ自体にあ
る。
前記酸性色素としては第四級アンモニウム化合
物およびジス−アゾ色素からなる成分が好まし
く、特にセチルトリメチルアンモニウムハロゲン
化物およびジス−アゾ色素コンゴー赤からなる成
分が好ましい。そして前記酸性色素は水溶液中あ
るいは凍結乾燥形態で含有させていることが好ま
しい。
本発明による方法はその簡単さのゆえに連続分
析に適している。これには合目的々には、以下の
試薬からなるいわゆる試験用キツトが作成され
る。
１ 乾燥形態あるいは溶液状態にヒアルロン酸お
よびグリシンから本質上なるヒアルロン酸基質
（蒸留水１ml中にヒアルロン酸0.35mg、および
グリシン50mg）。ヒアルロン酸基質には商業上
入手し得るヒアルロン酸あるいはその塩が有用
である。
２ 連鎖球菌ヒアルロニダーゼ、例えば「ジヤー
ナル・オブ・エクスペリメンタル・メデイスン
（J.exp.Med.）」第126巻第475頁（1967）記載
の方法により製造されるＡ群の連鎖球菌の培養
液から調製される酵素製剤。
この溶液は活性度20IU／ml〜300IU／ml、な
かんずく約75〜150IU／mlで使用できる。商業
上入手し得るヒアルロニダーゼはこの試験にほ
とんど適合しない。抗連鎖球菌ヒアルロニダー
ゼと、連鎖球菌以外のものから得られたヒアル
ロニダーゼとの交叉反応は全くないかあるいは
非常に限られているからである。従つて抗連鎖
球菌ヒアルロニダーゼの試験のためには、連鎖
球菌ヒアルロニダーゼを使用しなければならな
い。好ましくはＡ群の連鎖球菌の培養液から
得られる連鎖球菌ヒアルロニダーゼである。
３ 水溶液中の沈殿剤−色素複合体からなる色素
試薬。好ましい実施形態においては10：４の割
合におけるセチルトリメチルアンモニウムブロ
ミドおよびコンゴー赤である。この複合体は水
溶液中に１〜２ｇ／なかんずく約1.4ｇ／
の濃度で存在している。
４ 抗連鎖球菌ヒアルロニダーゼ標準は、試験を
指示通り実施する際、力価256を生じるような
所定濃度の連鎖球菌抗ヒアルロニダーゼを有す
る人間の血清である。
本方法は好ましくは系列分析によつて実施さ
れ、その際、抗ヒアルロニダーゼの濃度が測定さ
れねばならない溶液の系列希釈物が用いられる。
血清が使用される場合、これを約56℃に短時間加
温することが合目的的である。このことによつ
て、測定誤差を生じる非特異的反応が防止され
る。試料の各希釈物に既知量のヒアルロニダーゼ
を加え、これを抗ヒアルロニダーゼと反応させ
る。次いで試料にヒアルロン酸を加え、これには
抗ヒアルロニダーゼにより固定されていないヒア
ルロニダーゼのみが作用をし得る。ヒアルロニダ
ーゼにより分解されていないヒアルロン酸は終り
に沈殿剤−色素複合体を用いて沈殿される。それ
ぞれの系列希釈物を抗ヒアルロニダーゼおよびヒ
アルロン酸の標準系列と関連ずける。
反応の実施にはマイクロ力価プレートが特に適
している。何故ならこの上に血清の系列と並んで
抗ヒアルロニダーゼならびに酵素および基質につ
いての相当する対照の標準系列が同時に置かれる
からである。
以下の実施例により本発明を説明する。
実施例 １ 試薬の準備 1.1 凍結乾燥したヒアルロン酸（1.7mg）を蒸留
水５ml中にとる。
1.2 凍結乾燥した連鎖球菌ヒアルロニダーゼ
（4.3mg）を蒸留水３ml中に溶解させる。
1.3 セチルトリメチルアンモニウムブロミド−
色素複合体は水５ml中のセチルトリメチルア
ンモニウムブロミド5.7mgおよびコンゴー赤
2.1mgの水溶液である。
1.4 抗連鎖球菌ヒアルロニダーゼ標準である血
清は指示通りの試験の実施に際して抗ヒアル
ロニダーゼ−力価300を有する液状の安定化
された人間の血清である。
２ 血清希釈系列物の調製 1.5 検査すべき血清のおのおのを予め30分間水
浴上56℃に保持する。これには血清0.1ml＋
蒸留水1.5mlである患者血清の１：16希釈物
が使用される。
1.6 抗ヒアルロニダーゼ標準血清は同様に１：
16希釈物である。
1.7 数系列のくぼみを有し且つ１系列に少くと
も８個のくぼみを有する試験用プレートに
種々の試験されるべき血清試料の種類と血清
希釈倍数の表示を書きつける。
1.8 血清または標準希釈物のために予め備えら
れている系列ならびに酵素対照の系列の各く
ぼみ中に蒸留水35μをピペツトで加える。
基質対照用のくぼみに50μの蒸留水を充た
す。
1.9 血清系列の第１のくぼみに１：16血清希釈
物25mlをピペツトで入れ、もう一つの系列に
標準物の１：16希釈物を入れる。
1.10 25μの微小希釈用ピペツトを用いて１：
16から始めて１：4096まで２段階で25μの
最終容量を有する希釈系列物を調製する。
３ 試験物質 希釈系列（標準および患者血清）の各くぼみは
はじめ25μの血清希釈段階物を有している。
1.11 各くぼみ（基質対照以外）に25μの連鎖
球菌ヒアルロニダーゼ溶液をミクロピペツト
で加える。振盪装置で混合したのち試験用プ
レートをおおい少くとも15分間室温で放置す
る。
1.12 続いてすべてのくぼみ（酵素および基質対
照）に25μのヒアルロン酸基質溶液を充填
し、よく混合し、プレートをおおい、そして
20分間37℃で放置する。
1.13 次いで各くぼみに50μのセチルトリメチ
ルアンモニウムブロミド−コンゴー赤複合体
をピペツトで加え、振盪装置を用いて30秒間
振湯する。続いて沈殿の限界濃度を可視的に
測定する。適当な測定用の微小力価プレート
を使用する場合はここではまた短時間の遠心
分離および引続いての読みとりが行われ得
る。
４ 評 価 結果を読みとるには、プレートを合目的々に
は下から照らされ得る乳白ガラス板上に置くか
あるいはまた読みとり鏡の上に置く。橙色の沈
殿がまだ可視的に認められ得る標準血清および
患者血清の希釈段階を記録する。
抗ヒアルロニダーゼ力価は、患者血清の希釈
倍率を、例えば力価段階１：256で沈殿限界を
示す標準血清の抗ヒアルロニダーゼ濃度と乗
じ、標準血清中の希釈倍率で除すことにより得
られる。例えば標準血清が希釈度１：512にお
いて沈殿し、そして患者血清が希釈度１：1024
において沈殿する場合患者血清中の抗ヒアルロ
ニダーゼ力価として 1024×256／512＝512 が得られる。
1.13項の上記色素複合体の代りにセチルトリ
メチルアンモニウムブロミド溶液が試験物にピ
ペツトで加えられる比較研究においては、沈殿
は希釈度１：16ですでにもはや認知され得ない
が、他方沈殿剤−色素複合体を用いると沈殿は
希釈度１：256でもなお確認され得る。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 抗ヒアルロニダーゼを含む水溶液の系列希釈
    物にはじめに定められた量の連鎖球菌ヒアルロニ
    ダーゼ、次いで所定量のヒアルロン酸を作用さ
    せ、次いで連鎖球菌ヒアルロニダーゼにより分解
    されなかつたヒアルロン酸を沈殿させるために沈
    殿剤−色素複合体を加え、そして沈殿を生成させ
    るために要する沈殿剤−色素複合体の最低濃度を
    測定することを特徴とする、水溶液中の抗ヒアル
    ロニダーゼの測定方法。 ２ 沈殿剤−色素複合体が陽イオン洗浄剤および
    酸性色素からなることを特徴とする、前記第１項
    記載の方法。 ３ 沈殿剤−色素複合体がセチルトリメチルアン
    モニウムハロゲン化物およびジス−アゾ色素から
    なることを特徴とする、前記第１項および第２項
    のいずれかに記載の方法。 ４ 沈殿剤−色素複合体がセチルトリメチルアン
    モニウムブロミドあるいはクロリドとコンゴー赤
    からなることを特徴とする、前記第１〜３項のい
    ずれかに記載の方法。 ５ 10重量部の陽イオン洗浄剤および１〜10重量
    部の酸性色素からなる複合体を含有することを特
    徴とする、水溶液中の抗ヒアルロニダーゼの測定
    方法のためのヒアルロン酸の沈殿剤−色素複合
    体。 ６ 10重量部のセチルトリメチルアンモニウムハ
    ロゲン化物および４重量部のジス−アゾ色素から
    なる成分を含有することを特徴とする、前記第５
    項に記載のヒアルロン酸の沈殿剤−色素複合体。 ７ 10重量部のセチルトリメチルアンモニウムク
    ロリドあるいはブロミドおよび４重量部のコンゴ
    ー赤を含有することを特徴とする、前記第５項に
    記載のヒアルロン酸の沈澱剤−色素複合体。
JP4910680A 1979-04-14 1980-04-14 Measuring of antii hyalonidase Granted JPS55141197A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19792915309 DE2915309A1 (de) 1979-04-14 1979-04-14 Verfahren zur bestimmung von anti-hyaluronidase und hierfuer verwendbares mittel

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS55141197A JPS55141197A (en) 1980-11-04
JPH0146118B2 true JPH0146118B2 (ja) 1989-10-05

Family

ID=6068408

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP4910680A Granted JPS55141197A (en) 1979-04-14 1980-04-14 Measuring of antii hyalonidase

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4411988A (ja)
EP (1) EP0017909B1 (ja)
JP (1) JPS55141197A (ja)
AT (1) ATE8079T1 (ja)
DE (2) DE2915309A1 (ja)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3038286A1 (de) * 1980-10-10 1982-05-19 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur bestimmung der streptokokken-desoxiribonuclease b nach der toluidinblau o-methode
JPH01140067A (ja) * 1987-11-26 1989-06-01 Tetsuo Tomiyama 抗ヒアルロニダーゼ抗体価測定法
IT1251151B (it) * 1991-08-05 1995-05-04 Fidia Spa Materiale spugnoso essenzialmente costituito da acido ialuronico,o suoi derivati
US5528521A (en) * 1994-05-27 1996-06-18 Hoffmann-La Roche Inc. Titration emulation system and method
RO110124B1 (ro) * 1995-04-11 1997-09-30 Ioan Manzatu Concentrat bioactiv, procedeu de obtinere a acestuia si compozitii medicamentoase

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5413510B2 (ja) * 1973-08-28 1979-05-31
US4152212A (en) * 1976-02-25 1979-05-01 Biorex Laboratories Limited Process for the purification of glucuronoglycosaminoglycan hyaluronate lyase
NL8000173A (nl) * 1980-01-11 1981-08-03 Akzo Nv Toepassing van in water dispergeerbare, hydrofobe kleurstoffen als label in immunochemische testen.

Also Published As

Publication number Publication date
JPS55141197A (en) 1980-11-04
EP0017909A3 (en) 1981-01-14
ATE8079T1 (de) 1984-07-15
US4411988A (en) 1983-10-25
EP0017909A2 (de) 1980-10-29
DE3068291D1 (en) 1984-07-26
EP0017909B1 (de) 1984-06-20
DE2915309A1 (de) 1980-10-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
McCaman et al. Fluorimetric method for the determination of phenylalanine in serum
CN107907690A (zh) 一种超敏c反应蛋白检测试剂盒及其使用方法
CA1247523A (en) Method for reducing non-specific interferences in agglutination immunoassays
JPS6367864B2 (ja)
CN109187971A (zh) 神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法
CN107966432A (zh) 一种测定可溶性生长刺激表达基因2蛋白含量的试剂盒及其测试方法
JPS62100660A (ja) 高分子のイムノアツセイ法
US4301245A (en) Chromogenic method of detecting endotoxins in blood
CN106970226A (zh) 一种测定人血清中her‑2 ecd浓度水平的试剂盒
CN106771152A (zh) 一种快速检测钙卫蛋白的试剂盒
JPH03500925A (ja) タンパク質のグリコシル化のアツセイ
CN108226464A (zh) 一种测定甲状腺球蛋白含量的试剂盒及其测试方法
CN109187972A (zh) 一种定量检测血浆肾素含量的磁微粒化学发光试剂盒及其制备方法
EP2309265B1 (en) Method of assaying complex and kit to be used therefor
JPS61234797A (ja) マクロ分子ヒドロラ−ゼ用螢光偏光アツセイ、このアツセイに使用する試薬及びこれら試薬の製法
US4411988A (en) Process for the determination of anti-hyaluronidase and an agent suitable for this purpose
US3694318A (en) Substrate and method for alpha-amylase assay
US4481291A (en) Process for determining streptococcal desoxyribonuclease B according to the toluidine blue O method
US3990946A (en) Substrate for the determination of desoxy-ribonuclease
JPH07509058A (ja) ｄｓＤＮＡ抗体の化学発光アッセイ法
JP3713901B2 (ja) 破骨細胞由来酸性ホスファターゼの測定方法
JP3618797B2 (ja) 免疫測定法
CN108196056A (zh) 一种测定糖类抗原50含量的试剂盒及其测试方法
RU2097762C1 (ru) Набор реактивов для определения первичных ароматических аминов в растворах и биологических жидкостях
JPH04229198A (ja) 歯周疾患検査方法