JPH01503537A - β‐ラクタミン類の効果を減少させるための、経口投与可能な治療用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 β−ラクタミン類の効果を減少させる ための、経口投与可能な治療用組成物 不発明は腸内菌相（１ｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｆｌｏｒａ　）　に対するβ−ラク タミン類（β−１ａｃｔａｍｉｎｅｓ　）　の好ましくない作用を減少させるだ めの、経口投与可能々治療用組成物に関する。特に本発明はヒトに対して非病原 性である、選択された細Ｍを含有する組成物に関する。

担汁路（ｂｉｌｉａｒｙ　ｒｏｕｔｅ　）によって冥質的に除去されるβ−ラク タミンが使用された場合、広範囲のβ−ラクタミンに：る処置を行う間に、正常 な微生物相（ｍ１ｃｒｏｂｉａｌ　ｆｌｏｒａ　）　、％に、腸内薗相に重大な 異変（ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　）　が出現することは周知である。

この異変は、特に、腸内菌相Ｏ主体をなす個体群（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　）　 であシかつその存在によシ、通常、腸内細菌（ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａ　 ）、　プソイドモナス（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　）、ブドウ球菌（５ｔａｐｈ ｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　）　％酵母菌のごとき潜在的に病原体である微先物の侵入 （ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　）　と増殖（ｄｅｖｅｌｏｐｒｎｅｎｔ　）　が 阻止される偏性嫌気性ｌｆＢ菌（５ｔｒｉｃｔｌｙ　ａｎａｅｒｏｂｉｃ　ｂａ ｃｔｅｒｉａ　）に関係がある。従って、上記の主体となっている腸内菌相の少 なくとも一部が破壊されることによシ、感染性の微生物が増殖するという好まし くない結果を生ずるが、こＯことはある８ｉの患者には極めて危険である。

種々の細菌又は酵母菌を同時に経口投与することがすでに提案されている：しか しながら、この方法は腸内に通常存在する菌相（ｆｌｏｒａ　）であってかつ抗 生物質による処ｔＧｃよって破項された微生物群と置換するために行われてｂる に過ぎない。

本発明は腸内薗相と置換するためＯものではなく、自然に発生する腸内菌相Ｏ破 壊を防止するための細菌を含有する新規な組成物を提供することを目的とする。

従って不発明によれば、β−ラクタアーゼを産生すｂことができるかつヒト（２ ）ＦＪｋ内国相に対するβ−ラクタミン■好ましく力い作用を減少させることの できる、以下に示すごとき偏性嫌気性紅菌を含有する経口投与可能な治療用組成 物が提供される： バクテロイデス　メチシリン （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ）バクテロイデス　メラニノグニ クス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃｕｓ）バクテロイデス 　インテルメデイウス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）バクテロイデス　ノン７ ラギリス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｎｏｎｆｒａｇｉｌｉｓ）バクテロイデス　アサツ カロリテイクス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ ）ハ／テロイデス　ビビウス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｂｉｖｉｕｓ）バクテロイデス　ディ７ェンス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｄｉｓｉｅｎｓ）バクテロイデス　オラリス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｏｒａｌｉｓ）バクテロイデス　ルミニ；う （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）バクテロイデス　カヒロス ス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｃａｐｉｌｌｏｓｕｓ）バクテロイデス　ユニフォ ルミス （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ）クロストリジウム　プチリク ム （Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）フンバクテリウム　ヌクレア タム （Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）（上記ＯｇＷ　ｌ：　Ｎ ｏｒｄ　Ｃ，Ｅ、　１９Ｂ６　Ｒｅｖ、　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ、　８−５　５ ４３、５４８に記載されている）これらＯ細菌は健康なヒトの個体群の一部の腸 内菌相中に存在しかつこれらの細菌が失われた被検体（ヒト）の胎内に導入した 場合に何ら毒性を示すことがない。

不発明によれば、こＯ治療用組成物はβ−２クタミンに二る通常の処ｔ′５ｒ行 う数時間前又はこの処ｔを行うのと同時に８口投与される。こ０投与はβ−ラク タミンに２る処置を行う間、反復して行い得る。

こＯ治療用組成物は、特に、下記Ｏごときβ−ラクタミンに：る処置と同時に使 用すべきであるニーペニシリン類 すなわち、ペニシリンＧ及び７ニノキシメテルはニジリン、メチシリン及びイン キサゾリルベニシ’）７Ｃ例、ｔはオキサシリン及びクロキサシリン）、アミノ ズニシリン（例えばアンピシリン及びアモキシリン）、アミジノにニジリン（例 えばビプメシリナム）、カルボキシはニジリン（例えばカルベニシリン、テカル クリン）、メトキシカルボキシペニシリン（例えばテモシリン）、アシルウレイ ドにニジリン（例えばメズ；シリン、アモキシリン、ピ５ラシリン）、アシルに ニジリン（例えばアモキシリン）。

一セファロスポリン類 例えばセファロテン、セファゾリン、セファマンドール、セフ０キシム、セフ０ キシム、セフ０キシム、セフタジジム、セ７トリアクノン。

−モノバクタム煩（アゼチジン環を有するもの）、例えばアズトセナム。

本発明に従って使用される偏性嫌気性細菌菌株は例えばバクテロイド属に属する β−ラクタマーゼ産産性性菌株下記のごとき試験管内試験を使用し得る。この試 験においてはβ−ラクタマーゼ活性を有すると考えられる溶液と接触させつめで β−ラクタミンの残存量を測定する（　Ｒｏｌｆｅ　ＲＤ及びＣｏ１１．　Ｊ、 　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ、　１４７．２２７．　ｔ９ｓｓ参照）。

この試験の後、少なくとも０．０２μｍｏｌ　のセファロリジン（ｃｅｐｈａＪ ｏｒｉｄｉｎ　）／分／蛋白質１．９Ｃ，酵素活性を示す菌株が選択される。

β−−ラクタマーゼ生性菌株はヒトの便から単離し得る。

β−−ラクタマーゼ産生する偏性嫌気性でかつ非病原性の菌株は投与前に、経口 的に吸収され得る担体にその場で添力するために凍結乾燥した形で提供し得る。

この菌株は、また、必要ならば逼に）な担体と混合されたゼラチンカプセル、錠 剤等の形でらシ得る。胃中でのバクテリアの破壊を防止するためには、上記製剤 は耐酸性担体及び／又は腸溶皮を含有し得る。

ヒトの場合、通常の経口にニジ投与する投与薬剤は約１０８〜１ｏ”　個の生存 バクテリア細胞を含有し得る。

本発明によれば、治療用組成物の活性はセフ）　ＩＪアクンンで処理された多宿 主性（ｈｅｔｅｒｏｘｅｎｉｃ　）マウスについて示される。β−ラクタマーゼ 産生性嫌気性細Ｍを予めヒトの便試料から採取し、このａ菌から生じた培養株（ ｃｕｅｔｕｒｅ　）を投与に使用する。この実験を以下で詳述する： １、　β−２クタマ−ゼ産生性偏性嫌気性細菌株の採取健康な被検者の便を厳密 に嫌気性の条件下で単離した。

各々の被検者にお込て主要なりローン（（ｌｏｎｅ　）を同定しかつ単離された 菌株のβ−ラクタマーゼ活性を試験管内で測定した。

β−ラクタマーゼｕ　Ｒｏｌｆｅ　ＲＤ　等によシ報告されている早足量的微生 物学的方法（Ｊ、　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ、　１４７．２２７゜１９８３　）　 にニジ検呂した。活性番−〇＋〜４＋の任意的な尺度で評価する。最大β−ラク タマーゼ活性は４＋で示される。３＋、２＋、１＋で示される中間の活性は抗生 物質の部分的加水分解か生じたことに対応する。０＋の場合はβ−ラクタマーゼ 活性がないものと考えられる。

この試旅ではグロース　メジウム（Ｇｅ１ｏｓｅ　Ｍｅｄｉｕｍ　）　５（Ｄｉ ｆｃｏ　）及びＢ、スプテリス（Ｂ、　５ｕｂｔｉｌｉｓ　）　ＡＴＣＣ６６３ ３対照菌株を使用した。

便試料を濃度既知の抗生物質：アモキシシリン、アモキシシリン＋クラグラン酸 （Ｃ１ａｖｕｌａｎｉｃ　ａｃｉｄ　）、チカルシリン、セ７オタキシム、セフ トリアクノン又はセ７オベラゾンと共に３７°Ｃで３０分間、保温しついで残留 抗生物質活性を測定した。

選択された菌株の活性を第１表に示す。表中の数字は種々のβ−ラクタミン抗生 物質の仄水分解兆（支）を表わす。

第　■　表 第１表 β−ラクタマーゼ活性を更に分光測光法（Ｏ″Ｃａｌ　ｌａｇｈａｎ等、Ａｎｔ ｉｍｉｃｒｏ　ｂｉａｌ　ＡＨｅｎｔｓ　Ｃｈｅｒｎｏｔｈｅｒａｐｙ　１．２ ８３．１９７２参照）に＝９測定した。得られた結果を第■表に示す。

無ＳマウスＣ３Ｈ（Ｃｅｎｔｒｅ　ｄｅ　５ｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｄｅｓバクテリ ア抽出物のβ−ラクタマーゼ活性（セファロリジンＯμｍｏ　Ｉ　ｅ／分／蛋臼 質ＩＦ）Ａｎｉｍａｕｘ　ｄｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ、フランス　オルレ アン所在ニジ入手）を軟質ヲラステツクアイソレーター千に収容した。飲料とし てマウスに熱殺菌したｐ８３０水だけを与倍に稀釈しついで得らり、た調製液を 無菌マウスを収容したアイソレーター中に放置した。この細菌溶液が酸素と接触 することを防止するために、上記溶液を嫌気室同に装入するのに密閉チューブを 使用した。前記の場合と同様に、予め水だけを与えたマウスに胃及び直腸経由で 投餌した。投餌は２４時間後に繰返した。ヒト（便提供者）におけると同様Ｏ腸 内のバランスとバリヤー効果（ｂａｒｒｉｅｒ　ｅｆｆｅｃｔ　）　を得るのに １０〜１５１３を要した。

ヒトの面相を保有するマウスに５．１０８ｃｆｕ　／ｒＪ０４ＳＯβ−ラクｐ　 ？　−セｇ生性菌株（Ｃ１，Ｃ６，Ｅ９．　Ｖ４Ｅ３）を含有する、１−のＴＧ Ｙグロス（トリプチケース３０１／ｌ　、酵母抽出物２０　ｉ／ｌ　、グルコー ス５　Ｊ７　／　ｔ　。

チオグリコール酸ナトリウム１　ｇ／　Ｌ　、　ｐＨ＝　７．４　）を胃内に接 種し、そ（ＤＨ後にセフトリアクンン（飲料水中、２１１Ｐ／ゴ）を経口投与し た。得られた結果を第ｍ表に示す。

処理中、抗生物質ａ糞中に認められなかった。セフトリアクノンに対するβ−ラ クタツーゼ活性は処世の１４日後に認められた（１千〜４＋の間）。

セフトリアクノン耐性腸内紀菌は排除された。二ンテ′：ｌ′ツシ数（Ｅｎｉｅ ｒｏｃｏｃｃｉ　ｃｏｕｎｔ　）は非処理対象と同一であった。セントリアクン ンに耐性の外来性微生物（Ｅｎｔ、ｃｏｌｏａｃａｅ、　ＩＧＲ６７、Ｃ，ａｌ ｂｉｃａｒｓ　ＩＧＲ６６）による転移増殖（ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ　）　 は活性バクテロイド菌株を予め接種したマウスにおいて保持された。

バクテロイドを接種した群で＃′ｉ嫌気性細菌が依然として存在し、そして嫌気 性震内で得られた全菌株数は、対照と比較して、これらのバクテロイドの存在に よシ著しく変化しなかった。これらの細菌０ＭＩＣ５０及び９０は、それぞれ、 １−当り、セ７トリアクノン５１２及び１０２４μ２以上であった。グラム陰性 バチルヌがこの菌相の８４％を形成しそして１６％の胞子形成ダラム陽性／ぐテ ルスと己チＯコツシが存在した。

Ａｐｉ　２０Ａ系を使用する同定法によシ、セ７トリアクンンに２る処理の開始 直前トて投与されたものと同一〇性質を有するＣ、クロストリシフ万ルミスとム ユニホルミスの菌株の間で検出を行うことができる。

第　ｍ　派 ヒト菌相を保有するマウスにおけるセ７トリアクノン（飲料水２岬／ｍ）　の生 態学的性質に対する、β−ラクタマーゼ産生性嫌気性障の効果６個の採取物につ いて０便（’ｔｏｙ）ｏ平均−！＝ＳＥＭｕｆｃ／に’アンダーラインを引いｆ ｃ結来：顕著な差ｐ　＞　ｏ、、ｓ＊極端な値 Ｓ＝供試マウス０数 ｎ＝試験した便試料 ヒトの治療においては投与′ｊｋけ、腸溶皮を有する耐胃酸性（ｇａｓｔｒｏ− ｓｅｓｉｓｔａｎｔ　）　ゼラチン　カプセル（各ゼラチンカプセルは５　ｘ　 １０　＠（Ｄ−＜クチリアを含有する）の場合、抗生物質処理１日当９、・ぐク チリア約１０〜約１０１１個でちる。

ｍｌ　ｍ　ｍ、　ＰＣ？／Ｔ−ＲεＢ１００１７２

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. １．ヒトに対して非病原性でありかつβ−ラクタマ−ゼを産生することのできる 偏性嫌気性細菌を含有することを特徴とする、ヒトの腸内菌相に対するβ−ラク タミンの作用を減少させるための経口投与可能な治療用組成物。
2. ２．細菌はβ−ラクタマ−ゼ産生性のクロストリジウム及びバクテロイデスの菌 株から選ばれる、請求項１記載の組成物。
3. ３．細菌はβ−ラクタマ−ゼ産生性のクロストリジウムから選ばれる、請求項２ 記載の組成物。
4. ４．細菌はβ−ラクタマ−ゼ産生性のバクテロイデスユニフオルミスから選ばれ る請求項２記載の組成物。
5. ５．細菌はβ−ラクタマ−ゼ産生性のバクテロイテステタイオタオミクロンから 選ばれる請求項２記載の組成物。
6. ６．選択された細菌は少なくとも０．０２μｍｏｌｅのセフアロリジン／分／全 細菌蛋白質１ｍｇのβ−ラクタマ−ゼ活性を提供する。請求項１〜５のいずれか に記載の組成物。
7. ７．約１０８〜１０１１個の非病原性でかつβ−ラクタマ−ゼ産生性の偏性嫌気 性細菌を含有する、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。