JPH0153038B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPH0153038B2 JPH0153038B2 JP56138879A JP13887981A JPH0153038B2 JP H0153038 B2 JPH0153038 B2 JP H0153038B2 JP 56138879 A JP56138879 A JP 56138879A JP 13887981 A JP13887981 A JP 13887981A JP H0153038 B2 JPH0153038 B2 JP H0153038B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- sam
- monophosphoric acid
- producing
- monophosphoric
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は醗酵法によるＳ−アデノシルメチオニ
ン（以下、SAMと略称する）の製造方法に関し、
更に詳しくは、特定な化合物を添加したメチオニ
ン含有液体培地中で酵母を培養し、SAMを効率
的に製造する方法に関する。 SAMは生体内において脂肪、蛋白質、糖類な
どの代謝に関与する重要な物質である。而して近
時かかるSAMに肝血症、過度脂血症、動脈硬化
症、抑うつ病および神経病形の精神病発現、変性
関接症神経病痛覚、不眠症などに対する治療効果
のあることが見い出されており、その大量生産が
期待されている。 従来、SAMの製造方法としては種々の微生物
を用いる培養法が知られているが、なかでも酵母
を用いる方法が好ましいとされており、その具体
例としてサツカロマイセス属またはキヤンデイダ
属の微生物を用いる方法（例えばJournal of
Bacteriology、vol121、267頁（1975年）など）、
ピヒア属、ロドトルラ属、クリプトコツカス属、
ハンゼヌラ属、トリコスポロン属、クレケラ属、
ハンゼニアスポラ属、スポロボロミセス属、リポ
ミセス属またはデバリオミセス属の微生物を用い
る方法（特公昭52−17118号）などが知られてい
る。しかしながら、これらの方法においても
SAMの蓄積量は必ずしも充分満足できるものと
はいえず、より一層の改良が求められていた。 そこで本発明者らは醗酵法によるSAMの蓄積
向上につき鋭意検討を加えた結果、SAMの前駆
体であるメチオニンとともに特定な化合物を添加
した培地を用いることが有効であることを見い出
し、本発明を完成した。 すなわち本発明の目的は生産能に優れた発酵法
によるSAMの製造方法を提供することにあり、
かかる本発明の目的は、SAM生産能を有する酵
母をメチオニン含有培地で培養してSAMを製造
する方法において、培地中に(A)ウラシル、チミン
及びプリンからなる群から選択された少なくとも
一種の塩基類、(B)イノシン、グアノシン、キサン
トシン、ウリジン、シチジン、チミジン、デオキ
シアデノシンからなる群から選択された少なくと
も一種のヌクレオシド類、(C)イノシン−5′−モノ
リン酸、グアノシン−5′−モノリン酸、キサント
シン−5′−モノリン酸、ウリジン−5′−モノリン
酸、シチジン−5′−モノリン酸、アデノシン−
2′−モノリン酸、アデノシン−3′−モノリン酸、
デオキシアデノシン−5′−モノリン酸及びデオキ
シチミジン−5′−モノリン酸からなる群から選択
された少なくとも一種のヌクレオチド類、(D)リボ
核酸または(E)デオキシリボ核酸を0.01ｇ／dl以
上、好ましくは0.02ｇ／dl以上の濃度で存在せし
めることにより達成される。 本発明において用いられる酵母はメチオニン含
有培地中でSAMを蓄積する能力を有するもので
あればいずれでもよく、サツカロマイセス
（Saccharomyces）属、キヤンデイダ（Candida）
属、ハンゼヌラ（Hansenula）属、ピヒア
（Pichia）属、ロドトルラ（Rhodotorula）属、
クリプトコツカス（Cryptococcus）属、トリコ
スポロン（Trichosporon）属、クレケラ
（Kloeckera）属、ハンゼニアスポラ
（Hanseniaspora）属、スポロボロミセス
（Sporobolomyces）属、リポミセス
（Lipomyces）属、デバリオミセス
（Debaryomyces）属などに属する酵母が挙げら
れ、その具体例としてサツカロマイセス・セレビ
ジエIFO2346、キヤンデイダ・マセドニエンシス
IFO0960、ハンゼヌラ・フアビアニイIFO1370、
ピヒア・フアリノサIFO0193、ロドトルラ・グル
チニスIFO0389、クリプトコツカス・アルビダス
IFO0385、トリコスポロン・カピタタム
IFO0743、クレケラ・アピキユラタIFO0151、ハ
ンゼニアスポラ・バルバイエンシスIFO0115、ス
ポロボロミセス・サルモニカラーIFO0374、リポ
ミセス・リポフエルIFO0673、デバリオミセス・
ハンゼニイIFO0026などが挙げられる。またこれ
らの天然及び人工変異菌であつてもSAM生産能
を有するかぎり同様に使用することができる。 本発明においては前記のごとき特定な化合物を
単独または２種以上の併用の形で存在せしめるこ
と以外、常法に従つて培地が調整される。例えば
炭素源としてグルコース、シユクロース、フラク
トース等の糖類、酢酸などの有機酸類、炭化水素
類、メタノール、エタノールなどのアルコール類
などを用いることができ、更に通常の窒素源、無
機塩、有機微量栄養素が必要に応じて使用され
る。 培養は好気的条件が良く、培養温度は20℃から
40℃の範囲が好ましい。培養の際、培地のPHを３
から８の範囲に調節すれば通常最も望ましい結果
が得られる。かくして培養２日から10日後には菌
体中および／又は培養液中にSAMが生成蓄積す
るので、これを常法に従つて処理することにより
SAMを取得することができる。 例えばSAM含有菌体を過塩素酸で抽出し、抽
出液を氷冷下に炭酸水素カリウムで中和したの
ち、必要に応じて強酸性カチオン交換樹脂に接触
させ、次いでSAMを吸着したのち硫酸で溶出し、
溶出液にリンタングステス酸を加えてSAMを沈
澱させることによつて単離することができる。 以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明はこれに限定されるものでは
ない。なお、実施例におけるSAMの定量は次の
ようにして行つた。すなわち、培養終了後、遠心
分離にて菌体と培養液を分離し、菌体を約５倍量
の1.5N過塩素酸で抽出した。次いで得られた抽
出上澄液を培養液と混合したのち、ペーパークロ
マトグラフイー（展開溶媒：エタノール／１−ブ
タノール／水／酢酸／１％ピロリン酸ナトリウム
水溶液＝35／30／30／１／１）で分離し、紫外線
検出器でSAM相当のスポツトを検出し、これを
0.1N塩酸で抽出して、その260nｍの吸光度より
試料中のSAM量を検出した。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に２日間生育させたサツカロマイセス・セレビジ
エIFO2346の１白金耳を、サツカロース10ｇ／dl
カザミノ酸１ｇ／dl、トリプトン（Bacto
tryptone）１ｇ／dl、KH2PO4、0.4ｇ／dl、
K2HPO41ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.04ｇ／dl、Ｌ
−メチオニン0.75ｇ／dl及び所定量のプリンから
なりPH6.0に調整、加熱滅菌した培地５mlに植菌
し、28℃で５日間振盪した。次いでSAMの蓄積
量を測定し、結果を第１表に示した。
ン（以下、SAMと略称する）の製造方法に関し、
更に詳しくは、特定な化合物を添加したメチオニ
ン含有液体培地中で酵母を培養し、SAMを効率
的に製造する方法に関する。 SAMは生体内において脂肪、蛋白質、糖類な
どの代謝に関与する重要な物質である。而して近
時かかるSAMに肝血症、過度脂血症、動脈硬化
症、抑うつ病および神経病形の精神病発現、変性
関接症神経病痛覚、不眠症などに対する治療効果
のあることが見い出されており、その大量生産が
期待されている。 従来、SAMの製造方法としては種々の微生物
を用いる培養法が知られているが、なかでも酵母
を用いる方法が好ましいとされており、その具体
例としてサツカロマイセス属またはキヤンデイダ
属の微生物を用いる方法（例えばJournal of
Bacteriology、vol121、267頁（1975年）など）、
ピヒア属、ロドトルラ属、クリプトコツカス属、
ハンゼヌラ属、トリコスポロン属、クレケラ属、
ハンゼニアスポラ属、スポロボロミセス属、リポ
ミセス属またはデバリオミセス属の微生物を用い
る方法（特公昭52−17118号）などが知られてい
る。しかしながら、これらの方法においても
SAMの蓄積量は必ずしも充分満足できるものと
はいえず、より一層の改良が求められていた。 そこで本発明者らは醗酵法によるSAMの蓄積
向上につき鋭意検討を加えた結果、SAMの前駆
体であるメチオニンとともに特定な化合物を添加
した培地を用いることが有効であることを見い出
し、本発明を完成した。 すなわち本発明の目的は生産能に優れた発酵法
によるSAMの製造方法を提供することにあり、
かかる本発明の目的は、SAM生産能を有する酵
母をメチオニン含有培地で培養してSAMを製造
する方法において、培地中に(A)ウラシル、チミン
及びプリンからなる群から選択された少なくとも
一種の塩基類、(B)イノシン、グアノシン、キサン
トシン、ウリジン、シチジン、チミジン、デオキ
シアデノシンからなる群から選択された少なくと
も一種のヌクレオシド類、(C)イノシン−5′−モノ
リン酸、グアノシン−5′−モノリン酸、キサント
シン−5′−モノリン酸、ウリジン−5′−モノリン
酸、シチジン−5′−モノリン酸、アデノシン−
2′−モノリン酸、アデノシン−3′−モノリン酸、
デオキシアデノシン−5′−モノリン酸及びデオキ
シチミジン−5′−モノリン酸からなる群から選択
された少なくとも一種のヌクレオチド類、(D)リボ
核酸または(E)デオキシリボ核酸を0.01ｇ／dl以
上、好ましくは0.02ｇ／dl以上の濃度で存在せし
めることにより達成される。 本発明において用いられる酵母はメチオニン含
有培地中でSAMを蓄積する能力を有するもので
あればいずれでもよく、サツカロマイセス
（Saccharomyces）属、キヤンデイダ（Candida）
属、ハンゼヌラ（Hansenula）属、ピヒア
（Pichia）属、ロドトルラ（Rhodotorula）属、
クリプトコツカス（Cryptococcus）属、トリコ
スポロン（Trichosporon）属、クレケラ
（Kloeckera）属、ハンゼニアスポラ
（Hanseniaspora）属、スポロボロミセス
（Sporobolomyces）属、リポミセス
（Lipomyces）属、デバリオミセス
（Debaryomyces）属などに属する酵母が挙げら
れ、その具体例としてサツカロマイセス・セレビ
ジエIFO2346、キヤンデイダ・マセドニエンシス
IFO0960、ハンゼヌラ・フアビアニイIFO1370、
ピヒア・フアリノサIFO0193、ロドトルラ・グル
チニスIFO0389、クリプトコツカス・アルビダス
IFO0385、トリコスポロン・カピタタム
IFO0743、クレケラ・アピキユラタIFO0151、ハ
ンゼニアスポラ・バルバイエンシスIFO0115、ス
ポロボロミセス・サルモニカラーIFO0374、リポ
ミセス・リポフエルIFO0673、デバリオミセス・
ハンゼニイIFO0026などが挙げられる。またこれ
らの天然及び人工変異菌であつてもSAM生産能
を有するかぎり同様に使用することができる。 本発明においては前記のごとき特定な化合物を
単独または２種以上の併用の形で存在せしめるこ
と以外、常法に従つて培地が調整される。例えば
炭素源としてグルコース、シユクロース、フラク
トース等の糖類、酢酸などの有機酸類、炭化水素
類、メタノール、エタノールなどのアルコール類
などを用いることができ、更に通常の窒素源、無
機塩、有機微量栄養素が必要に応じて使用され
る。 培養は好気的条件が良く、培養温度は20℃から
40℃の範囲が好ましい。培養の際、培地のPHを３
から８の範囲に調節すれば通常最も望ましい結果
が得られる。かくして培養２日から10日後には菌
体中および／又は培養液中にSAMが生成蓄積す
るので、これを常法に従つて処理することにより
SAMを取得することができる。 例えばSAM含有菌体を過塩素酸で抽出し、抽
出液を氷冷下に炭酸水素カリウムで中和したの
ち、必要に応じて強酸性カチオン交換樹脂に接触
させ、次いでSAMを吸着したのち硫酸で溶出し、
溶出液にリンタングステス酸を加えてSAMを沈
澱させることによつて単離することができる。 以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明はこれに限定されるものでは
ない。なお、実施例におけるSAMの定量は次の
ようにして行つた。すなわち、培養終了後、遠心
分離にて菌体と培養液を分離し、菌体を約５倍量
の1.5N過塩素酸で抽出した。次いで得られた抽
出上澄液を培養液と混合したのち、ペーパークロ
マトグラフイー（展開溶媒：エタノール／１−ブ
タノール／水／酢酸／１％ピロリン酸ナトリウム
水溶液＝35／30／30／１／１）で分離し、紫外線
検出器でSAM相当のスポツトを検出し、これを
0.1N塩酸で抽出して、その260nｍの吸光度より
試料中のSAM量を検出した。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に２日間生育させたサツカロマイセス・セレビジ
エIFO2346の１白金耳を、サツカロース10ｇ／dl
カザミノ酸１ｇ／dl、トリプトン（Bacto
tryptone）１ｇ／dl、KH2PO4、0.4ｇ／dl、
K2HPO41ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.04ｇ／dl、Ｌ
−メチオニン0.75ｇ／dl及び所定量のプリンから
なりPH6.0に調整、加熱滅菌した培地５mlに植菌
し、28℃で５日間振盪した。次いでSAMの蓄積
量を測定し、結果を第１表に示した。
【表】
実施例 ２
プリンのかわりに第２表に示す化合物を0.05
ｇ／dlの濃度で培地に添加すること以外は実施例
１と同じ条件で培養を実施した。結果を第２表に
示した。
ｇ／dlの濃度で培地に添加すること以外は実施例
１と同じ条件で培養を実施した。結果を第２表に
示した。
【表】
実施例 ３
サツカロマイセス・セレビジエIFO2346の代り
に第３表に示す菌株を用い、かつ0.05ｇ／dlの各
種化合物を培地に添加すること以外は実施例１と
同じ条件で培養を行つた。結果を第３表に示し
た。
に第３表に示す菌株を用い、かつ0.05ｇ／dlの各
種化合物を培地に添加すること以外は実施例１と
同じ条件で培養を行つた。結果を第３表に示し
た。
【表】
【表】
実施例 ４
実施例１と同様な寒天斜面培地に２日間生育さ
せたサツカロマイセス・セレビジエIFO2346の１
白金耳をシユクロース10ｇ／dl、酵母エキス１
ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.01
ｇ／dl、Urea（別滅菌）1.8ｇ／dl、Ｌ−メチオ
ニン0.75ｇ／dl、CaCl2・2H2O0.02ｇ／dl、
ZnSO4・7H2O0.25mg／dl、FeSO4・7H2O0.25
mg／dl、プリン0.05ｇ／dl及びキサントシン−
5′−モノリン酸0.05ｇ／dlからなりPH6.0に調整、
加熱滅菌した培地５mlに植菌した。28℃で５日間
振盪した後、SAMの蓄積量を測定すると0.36
ｇ／dlであつた。また、プリン及びキサントシン
−5′−モノリン酸を添加しないで同様な培養を実
施したところ、SAM蓄積量は0.19ｇ／dlであつ
た。 実施例 ５ サツカロマイセス・セレビジエIFO2346の代わ
りに第５表に示す菌株を用い、かつ0.05ｇ／dlの
プリンを培地に添加すること以外は実施例１と同
じ条件で培養を行つた。結果を第５表に示した。
せたサツカロマイセス・セレビジエIFO2346の１
白金耳をシユクロース10ｇ／dl、酵母エキス１
ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.01
ｇ／dl、Urea（別滅菌）1.8ｇ／dl、Ｌ−メチオ
ニン0.75ｇ／dl、CaCl2・2H2O0.02ｇ／dl、
ZnSO4・7H2O0.25mg／dl、FeSO4・7H2O0.25
mg／dl、プリン0.05ｇ／dl及びキサントシン−
5′−モノリン酸0.05ｇ／dlからなりPH6.0に調整、
加熱滅菌した培地５mlに植菌した。28℃で５日間
振盪した後、SAMの蓄積量を測定すると0.36
ｇ／dlであつた。また、プリン及びキサントシン
−5′−モノリン酸を添加しないで同様な培養を実
施したところ、SAM蓄積量は0.19ｇ／dlであつ
た。 実施例 ５ サツカロマイセス・セレビジエIFO2346の代わ
りに第５表に示す菌株を用い、かつ0.05ｇ／dlの
プリンを培地に添加すること以外は実施例１と同
じ条件で培養を行つた。結果を第５表に示した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ Ｓ−アデノシルメチオニン生産能を有する酵
母をメチオニン含有培地で培養してＳ−アデノシ
ルメチオニンを製造する方法において、培地中に
(A)ウラシル、チミン及びプリンからなる群から選
択された少なくとも一種の塩基類、(B)イノシン、
グアノシン、キサントシン、ウリジン、シチジ
ン、チミジン及びデオキシアデノシンからなる群
から選択された少なくとも一種のヌクレオシド
類、(C)イノシン−5′−モノリン酸、グアノシン−
5′−モノリン酸、キサントシン−5′−モノリン
酸、ウリジン−5′−モノリン酸、シチジン−5′−
モノリン酸、アデノシン−2′−モノリン酸、アデ
ノシン−3′−モノリン酸、デオキシアデノシン−
5′−モノリン酸及びデオキシチミジン−5′−モノ
リン酸からなる群から選択された少なくとも一種
のヌクレオチド類、(D)リボ核酸又は(E)デオキシリ
ボ核酸を0.01ｇ／dl以上の濃度で存在せしめるこ
とを特徴とするＳ−アデノシルメチオニンの製造
方法。 ２ 酵母がサツカロマイセス属、キヤンデイダ属
またはハンゼヌラ属に属するものである特許請求
の範囲第１項記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56138879A JPS5840096A (ja) | 1981-09-03 | 1981-09-03 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56138879A JPS5840096A (ja) | 1981-09-03 | 1981-09-03 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5840096A JPS5840096A (ja) | 1983-03-08 |
| JPH0153038B2 true JPH0153038B2 (ja) | 1989-11-10 |
Family
ID=15232241
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56138879A Granted JPS5840096A (ja) | 1981-09-03 | 1981-09-03 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5840096A (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6078594A (ja) * | 1983-10-05 | 1985-05-04 | Yamasa Shoyu Co Ltd | Ｓ−アデノシル−ｌ−メチオニンの製造法 |
| EP1038951A1 (en) * | 1999-03-23 | 2000-09-27 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Synthetic medium for cultivating lactobacillus and/or bifidobacteria |
| JP5989319B2 (ja) * | 2011-10-06 | 2016-09-07 | ライオン株式会社 | 睡眠の質改善剤 |
| WO2019160059A1 (ja) * | 2018-02-14 | 2019-08-22 | 国立大学法人大阪大学 | Ｓ－アデノシルメチオニンのリサイクル方法 |
-
1981
- 1981-09-03 JP JP56138879A patent/JPS5840096A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5840096A (ja) | 1983-03-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Green et al. | Interactions of vinyl chloride with rat-liver DNA in vivo | |
| Holmgren et al. | Enzymatic synthesis of deoxyribonucleotides, 8. The effects of ATP and dATP in the CDP reductase system from E. coli. | |
| US6387667B1 (en) | Process for producing cytidine diphosphate choline | |
| HK1000604B (en) | Process for producing cytidine diphosphate choline | |
| KR101311571B1 (ko) | 시티딘이인산 콜린의 정제 방법 | |
| US4562149A (en) | Yeast culture containing S-adenosyl methionine in high concentrations, and process for production of S-adenosyl methionine | |
| US3535207A (en) | Method of converting heterocyclic bases into the corresponding nucleosides by bacterial action | |
| JPH0153038B2 (ja) | ||
| DE69027154T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Nukleosiden durch Verwendung von aus Bacillus stearothermophilus erhältlichen Phosphorylasen | |
| JP3651036B2 (ja) | ヌクレオシド−５’−燐酸エステルの製造法 | |
| JPH0153037B2 (ja) | ||
| Ishiyama et al. | Cyclic-AMP Production by Corynebacterium murisepticum No. 7 (ATCC 21374) and Microbacterium sp. No. 205 (ATCC 21376) | |
| Isono et al. | Purification and reaction of a new enzyme, nucleoside oxidase | |
| US5008188A (en) | Process for producing S-adenosyl-L-homocysteine | |
| MITSUDA et al. | Fluctuation of the nucleotide pools of flavinogenic and nonflavinogenic strains of Eremothecium ashbyii grown in the presence of purines | |
| US4371613A (en) | Method for producing purine arabinosides | |
| US3879260A (en) | Process for production of ribosides of nucleic acid base derivatives and analogues thereof | |
| JPH0378117B2 (ja) | ||
| IMADA et al. | DEGRADATION OF PYRIMIDINE NUCLEOTIDES BY ENZYME SYSTEMS OF STREPTOMYCES I. RIBOSE-5-PHOSPHATE FORMATION FROM PYRIMIDINE NUCLEOTIDES | |
| Fujimoto et al. | Conversion of Hypoxanthine to Xanthosine by a Guanineless Mutant of Bacillus subtilis | |
| Tanaka et al. | Production of Nucleic Acid-related Substances by Fermentative Processes: Part XXXIX. Production of Ribotides of 6-Azauracil and Some Pyrimidines by Brevibacterium ammoniagenes | |
| JPH1028593A (ja) | ヒポキサンチンの製造方法 | |
| Rosenberg et al. | Conversion of D-mannitol to D-ribose: a newly discovered pathway in Escherichia coli | |
| JP4021945B2 (ja) | 酵母中の酸化型β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの回収方法。 | |
| Lynn | Nucleic Acid Metabolism of Pleuropneumonialike Organisms |