JPH0153037B2 - - Google Patents
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- JPH0153037B2 JPH0153037B2 JP56134561A JP13456181A JPH0153037B2 JP H0153037 B2 JPH0153037 B2 JP H0153037B2 JP 56134561 A JP56134561 A JP 56134561A JP 13456181 A JP13456181 A JP 13456181A JP H0153037 B2 JPH0153037 B2 JP H0153037B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sam
- medium
- glycylglycine
- producing
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は発酵法によるＳ−アデノシルメチオニ
ン（以下、SAMと略称する）の製造方法に関し、
さらに詳しくは、グリシルグリシンを0.04ｇ／dl
以上添加したメチオニン含有液体培地中で酵母を
培養し、SAMを効率的に製造する方法に関する。 SAMは生体内において脂肪、蛋白質、糖類等
の代謝に関与する重要な物質である。しかして近
時かかるSAMに肝血症、過度脂血症、動脈硬化
症、抑うつ病および神経病型の精神病発現、変性
関節症神経病痛覚、不眠症等に対する治療効果の
あることが見いだされており、その大量生産が期
待されている。 従来、SAMの製造方法としては種々の微生物
を用いる培養法が知られているが、なかでも酵母
を用いる方法が好ましいとされており、その具体
例としてはサツカロマイセス属またはキヤンデイ
ダ属の微生物を用いる方法（例えばJournal of
Bacteriology、vol.121、267（1975）等）、ピヒア
属、ロドトルラ属、クリプトコツカス属、ハンゼ
ヌラ属、トリコスポロン属、クレケラ属、ハンゼ
ニアスポラ属、スポロボロミセス属、リポミセス
属またはデバリオミセス属の微生物を用いる方法
（特公昭52−17118号）等が知られている。しかし
ながら、これらの方法においてもSAMの蓄積量
は必ずしも充分満足できるものとはいえず、より
一層の改良が求められていた。 そこで本発明者らは発酵法によるSAMの蓄積
量向上につき鋭意検討を加えた結果、SAMの前
駆体であるメチオニンとともにグリシルグリシン
を0.04ｇ／dl以上添加した培地を用いることが有
効であることを見いだし、本発明を完成した。 すなわち本発明の目的は生産能に優れた発酵法
によるSAMの製造方法を提供することにあり、
かかる本発明の目的は、SAM生産能を有する酵
母をメチオニン含有培地で培養してSAMを製造
する方法において、グリシルグリシンを0.04ｇ／
dl以上培地に添加することにより達成される。 本発明において用いられる酵母はメチオニン含
有培地中でSAMを蓄積する能力を有するもので
あればいずれでもよいが、なかでもサツカロマイ
セス（Saccharomyces）属、キヤンデイダ
（Candida）属、ハンゼヌラ（Hansenula）属に
属する酵母が好ましく、その具体例としてサツカ
ロマイセス・セレビジエIFO2346、キヤンデイ
ダ・マセドニエンシスIFO0960、ハンゼヌラ・フ
アビアニイIFO1370等が上げられる。またこれの
天然及び人工変異菌であつてもSAM生産能を有
するかぎり同様に使用することができる。 本発明においては、メチオニン含有培地中にグ
リシルグリシンを添加することが必須の要件であ
る。グリシルグリシンは通常培地中に0.04ｇ／dl
以上の濃度で添加される。 本発明で用いる培地の他の条件は常法に従えば
よく、例えば炭素源としてグルコース、シユクロ
ース、フラクトース等の糖類、酢酸などの有機酸
類、炭化水素類、メタノール、エタノール等のア
ルコール類などを用いることができる。また培地
中にはさらに通常の窒素源、無機塩、有機微量栄
養素が必要に応じて使用される。 培養は好気的条件が良く、培養温度が20℃から
40℃の範囲が好ましい。培養の際、培地のPHを３
から８の範囲に調節すれば通常最も好ましい結果
が得られる。かくして培養２日から10日後には菌
体中および／または培養液中にSAMが生成蓄積
するので、これを常法に従つて処理することによ
りSAMを取得することができる。 例えばSAM含有菌体を過塩素酸で抽出し、抽
出液を氷冷下に炭酸水素カリウムで中和した後、
必要に応じて強酸性カチオン交換樹脂に接触さ
せ、次いでSAMを吸着した後、硫酸で溶出し、
溶出液にリンタングステン酸を加えてSAMを沈
澱させることによつて単離することができる。 いかに実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明はこれに限定されるものでは
ない。なお、実施例におけるSAMの定量は次の
ようにして行つた。すなわち、培養終了後、遠心
分離にて菌体と培養液を分離し、菌体を約５倍量
の1.5N過塩素酸で抽出した。次いで得られた抽
出上澄み液を培養液と混合した後、ペーパークロ
マトグラフイー（展開溶媒：エタノール／１−ブ
タノール／水／酢酸／１％ピロリン酸ナトリウム
水溶液＝35／30／30／１／１）で分離し、紫外線
検出器でSAM相当のスポツトを検出し、これを
0.1N塩酸で抽出して、その260nｍの吸光度より
試料中のSAM量を検出した。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に２日間生育させたサツカロマイセス・セレビジ
エIFO2346の１白金耳を、シユクロース10ｇ／
dl、酵母エキス１ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.01ｇ／dl、尿素（別滅菌）1.5
ｇ／dl、Ｌ−メチオニン0.75ｇ／dl、CaCl2・
2H2O0.25mg／dl、ZnSO4・7H2O0.25mg／dl、
FeSO4・7H2O0.25mg／dl、MnSO4・４〜
6H2O1.25mg／dl、CuSo4・5H2O2μｇ／dl、
H2BO32μｇ／dl、CoCl2・6H2O0.2μｇ／dl、
Kl1μｇ／dl及び所定量のグリシルグリシンから
なり、PH6.0に調整、加熱滅菌した培地５mlに植
菌し、28℃で５日間振盪した。次いでSAMの蓄
積量を測定し、結果を第１表に示した。 この結果から、グリシルグリシンを0.04ｇ／dl
以上添加することにより、SAMの生成量を向上
させうることがわかつた。
ン（以下、SAMと略称する）の製造方法に関し、
さらに詳しくは、グリシルグリシンを0.04ｇ／dl
以上添加したメチオニン含有液体培地中で酵母を
培養し、SAMを効率的に製造する方法に関する。 SAMは生体内において脂肪、蛋白質、糖類等
の代謝に関与する重要な物質である。しかして近
時かかるSAMに肝血症、過度脂血症、動脈硬化
症、抑うつ病および神経病型の精神病発現、変性
関節症神経病痛覚、不眠症等に対する治療効果の
あることが見いだされており、その大量生産が期
待されている。 従来、SAMの製造方法としては種々の微生物
を用いる培養法が知られているが、なかでも酵母
を用いる方法が好ましいとされており、その具体
例としてはサツカロマイセス属またはキヤンデイ
ダ属の微生物を用いる方法（例えばJournal of
Bacteriology、vol.121、267（1975）等）、ピヒア
属、ロドトルラ属、クリプトコツカス属、ハンゼ
ヌラ属、トリコスポロン属、クレケラ属、ハンゼ
ニアスポラ属、スポロボロミセス属、リポミセス
属またはデバリオミセス属の微生物を用いる方法
（特公昭52−17118号）等が知られている。しかし
ながら、これらの方法においてもSAMの蓄積量
は必ずしも充分満足できるものとはいえず、より
一層の改良が求められていた。 そこで本発明者らは発酵法によるSAMの蓄積
量向上につき鋭意検討を加えた結果、SAMの前
駆体であるメチオニンとともにグリシルグリシン
を0.04ｇ／dl以上添加した培地を用いることが有
効であることを見いだし、本発明を完成した。 すなわち本発明の目的は生産能に優れた発酵法
によるSAMの製造方法を提供することにあり、
かかる本発明の目的は、SAM生産能を有する酵
母をメチオニン含有培地で培養してSAMを製造
する方法において、グリシルグリシンを0.04ｇ／
dl以上培地に添加することにより達成される。 本発明において用いられる酵母はメチオニン含
有培地中でSAMを蓄積する能力を有するもので
あればいずれでもよいが、なかでもサツカロマイ
セス（Saccharomyces）属、キヤンデイダ
（Candida）属、ハンゼヌラ（Hansenula）属に
属する酵母が好ましく、その具体例としてサツカ
ロマイセス・セレビジエIFO2346、キヤンデイ
ダ・マセドニエンシスIFO0960、ハンゼヌラ・フ
アビアニイIFO1370等が上げられる。またこれの
天然及び人工変異菌であつてもSAM生産能を有
するかぎり同様に使用することができる。 本発明においては、メチオニン含有培地中にグ
リシルグリシンを添加することが必須の要件であ
る。グリシルグリシンは通常培地中に0.04ｇ／dl
以上の濃度で添加される。 本発明で用いる培地の他の条件は常法に従えば
よく、例えば炭素源としてグルコース、シユクロ
ース、フラクトース等の糖類、酢酸などの有機酸
類、炭化水素類、メタノール、エタノール等のア
ルコール類などを用いることができる。また培地
中にはさらに通常の窒素源、無機塩、有機微量栄
養素が必要に応じて使用される。 培養は好気的条件が良く、培養温度が20℃から
40℃の範囲が好ましい。培養の際、培地のPHを３
から８の範囲に調節すれば通常最も好ましい結果
が得られる。かくして培養２日から10日後には菌
体中および／または培養液中にSAMが生成蓄積
するので、これを常法に従つて処理することによ
りSAMを取得することができる。 例えばSAM含有菌体を過塩素酸で抽出し、抽
出液を氷冷下に炭酸水素カリウムで中和した後、
必要に応じて強酸性カチオン交換樹脂に接触さ
せ、次いでSAMを吸着した後、硫酸で溶出し、
溶出液にリンタングステン酸を加えてSAMを沈
澱させることによつて単離することができる。 いかに実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明はこれに限定されるものでは
ない。なお、実施例におけるSAMの定量は次の
ようにして行つた。すなわち、培養終了後、遠心
分離にて菌体と培養液を分離し、菌体を約５倍量
の1.5N過塩素酸で抽出した。次いで得られた抽
出上澄み液を培養液と混合した後、ペーパークロ
マトグラフイー（展開溶媒：エタノール／１−ブ
タノール／水／酢酸／１％ピロリン酸ナトリウム
水溶液＝35／30／30／１／１）で分離し、紫外線
検出器でSAM相当のスポツトを検出し、これを
0.1N塩酸で抽出して、その260nｍの吸光度より
試料中のSAM量を検出した。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に２日間生育させたサツカロマイセス・セレビジ
エIFO2346の１白金耳を、シユクロース10ｇ／
dl、酵母エキス１ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.01ｇ／dl、尿素（別滅菌）1.5
ｇ／dl、Ｌ−メチオニン0.75ｇ／dl、CaCl2・
2H2O0.25mg／dl、ZnSO4・7H2O0.25mg／dl、
FeSO4・7H2O0.25mg／dl、MnSO4・４〜
6H2O1.25mg／dl、CuSo4・5H2O2μｇ／dl、
H2BO32μｇ／dl、CoCl2・6H2O0.2μｇ／dl、
Kl1μｇ／dl及び所定量のグリシルグリシンから
なり、PH6.0に調整、加熱滅菌した培地５mlに植
菌し、28℃で５日間振盪した。次いでSAMの蓄
積量を測定し、結果を第１表に示した。 この結果から、グリシルグリシンを0.04ｇ／dl
以上添加することにより、SAMの生成量を向上
させうることがわかつた。
【表】
比較例 １
グリシルグリシンの代わりに第２表に示す添加
物を0.1ｇ／dlの濃度で培地に添加すること以外
は実施例１と同じ条件で培養を行つた。結果を第
２表に示した。
物を0.1ｇ／dlの濃度で培地に添加すること以外
は実施例１と同じ条件で培養を行つた。結果を第
２表に示した。
【表】
加した。
実施例 ２ サツカロマイセス・セレビジエIFO2346の代わ
りに第３表に示す菌株を用いること及び第３表に
示す低級ペプチドを0.1ｇ／dlの濃度で培地に添
加すること以外は、実施例１と同じ条件で培養を
行つた。結果を第３表に示した。
実施例 ２ サツカロマイセス・セレビジエIFO2346の代わ
りに第３表に示す菌株を用いること及び第３表に
示す低級ペプチドを0.1ｇ／dlの濃度で培地に添
加すること以外は、実施例１と同じ条件で培養を
行つた。結果を第３表に示した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ Ｓ−アデノシルメチオニン生産能を有する酵
母をメチオニン含有培地で培養してＳ−アデノシ
ルメチオニンを製造する方法において、グリシル
グリシンを培地に0.04ｇ／dl以上添加することを
特徴とするＳ−アデノシルメチオニンの製造方
法。 ２ 酵母がサツカロマイセス属、キヤンデイダ属
またはハンゼヌラ属に属するものである特許請求
の範囲第１項記載の方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13456181A JPS5836397A (ja) | 1981-08-27 | 1981-08-27 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
| CH5083/82A CH648864A5 (en) | 1981-08-27 | 1982-08-26 | Process for the preparation of S-adenosylmethionine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13456181A JPS5836397A (ja) | 1981-08-27 | 1981-08-27 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5836397A JPS5836397A (ja) | 1983-03-03 |
| JPH0153037B2 true JPH0153037B2 (ja) | 1989-11-10 |
Family
ID=15131205
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13456181A Granted JPS5836397A (ja) | 1981-08-27 | 1981-08-27 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5836397A (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6881837B2 (en) | 2001-06-07 | 2005-04-19 | Orchid Chemicals & Pharmaceuticals Ltd. | Chemical synthesis of S-adenosyl-L-methionine with enrichment of (S,S)-isomer |
| RU2007102295A (ru) | 2004-06-23 | 2008-07-27 | Орчид Кемикалз Энд Фармасьютикалз Лимитед (In) | Способ химического синтеза s-аденозил-l-метионина с обогащением (s, s)-изомером |
| JP5641192B2 (ja) * | 2010-03-02 | 2014-12-17 | 独立行政法人酒類総合研究所 | Ｓ−アデノシルメチオニン高蓄積酵母の取得方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5217118B2 (ja) * | 1973-11-27 | 1977-05-13 |
-
1981
- 1981-08-27 JP JP13456181A patent/JPS5836397A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5836397A (ja) | 1983-03-03 |
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