JPH0160455B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 従来、リウマチ様関節炎は、感染性病因を有す
ると普通考えられていた。リウマチ様関節炎の炎
症特徴および構成的発現―滑液膜炎および内芽腫
症病変、熱、頻摶、白血球症、リンパ腺症および
折々のスペルノメガリー（spelnomegaly）、加速
された赤血球沈降速度および「鋭敏な相反応体」
の他の変化―はすべて感染過程と相容れるもので
あるが、この見解は今日一般的でない。相当な繰
り返えしの細菌学的研究により、血液、滑膜液、
滑膜組織または皮下小節から単一の感染作因を終
始一貫して取り出すことは出来なかつた。リウマ
チ様関節炎にかかつた患者からの関節液を他の被
検者の関節に注入することにより疾病を移す試み
は不成功であつた。皮下小節は相同性移植後生存
し続けることが出来なかつた（Bauer、他1951）。 感染過程は、相当数の患者においてリウマチ様
関節炎の攻撃を促進するようであり、かつ疾病が
すでに確立されている場合は疾病の過程に有害な
影響を及ぼし得る。この臨床的結果を支持する統
計的証拠がある（Lewis―Faning、1950）。 リウマチ様関節炎に類似の疾病を動物に発生さ
せようとする多くの試みがなされた。種々のバク
テリアが動物に関節炎を発生させ得るが、それら
はリウマチ様関節炎の臨床的および病理学特徴、
特に増殖性関節炎の自己永続的特徴を再生するこ
とが出来ない。人間の疾病とある類似性を有する
関節炎が胸膜肺炎様菌により二十日鼠に
（Sabin、1939）および豚丹毒菌により豚に
（Sikes、他、1955）発生せしめられた。これらの
細菌は過敏性機構を開始させ得るという概念が仮
定された（Sikes、他、1955）。 それでも、リウマチ様関節炎の研究者は感染と
関節疾病間の関係を示唆するある循環テーマに関
心をもち続けている。たとえば、淋疾は典型的な
淋疾性関節炎を発生させ得るばかりでなく、時に
は典型的なリウマチ様関節炎に発展する慢性関節
炎を導き得る。これが発生する割合についての統
計は入手出来ない。したがつて、その関係をどれ
だけ強調してよいかわからない。また扁桃炎また
は咽頭炎の後に多発関節炎を伴うことがあるが、
これはまずリウマチ熱として現われ、リウマチ様
関節炎に発展する。急性ウイルス性感染、特に若
い婦人の風疹の後に大きな関節はもちろん小さな
関節を包含する持続性多発関節炎を伴うことがあ
り、これらの関節炎は一般にリウマチ様関節炎に
似た持続性関節疾病の数ケ月の過程を経過し、そ
の後徐々におさまる。 未知の作因による慢性的感染が、リウマチ様関
節炎の病因に対する一般的仮定のままであるが、
しかしこの仮定を支持する公開データは全く存在
しない。この疾病のある研究者は、もし感染が要
因であればそれは特定の種類の微生物による感染
ではなく、むしろその疾病に対して責任ある感染
により発生する変質されたホスト（host）応答を
有する種々の普通の微生物による感染であるかも
知れないと疑つている。本発明は、リウマチ様関
節炎の起源に対するこの理論に基づいている。 感染性病因は決して確立されていないけれど
も、幾つかの最近の進展はこの理論の支持に関連
しているようである。 これらのうちのあるものは次のようである： １ リウマチ様関節炎を有する患者は、胃腸管の
分泌物に見出される免疫グロブリンのクラスで
あるIgAが普通の水準より低い。 ２ 唾液腺を経て免疫化に応答して生産される免
疫グロブリンＡは、唾液はもちろん血清初乳お
よび乳汁に見出される。IgAは胃腸管およびリ
ンパ系を経てこれらの種々の液体に輸送され
る。 （Michelok、他、1975）。 ３ 病的肥満症に対する腸管バイパス手術後、あ
る患者はリウマチ様関節炎と実際に同一である
徴候を示す。関節炎の開始は、血清において
IgG，IgM，IgA、補足成分C₃，C₄，C₅および
大腸菌およびビー・フラギリス（B.fragilis）
に対するIgG抗体からなる循環寒冷蛋白質
（cryop―rotein）の出現を伴う。腸管バイパス
を除去すると症状が完全におさまる（Woods，
etal、1976）。 ４ 連鎖状球菌グループＢに属する複連鎖状球菌
無乳の一つの種類は、リウマチ様関節炎の病因
として包含されている（Svartz、1972）。この
連鎖状球菌は、ほとんどの市販の低温殺菌ミル
クに存在するが、しかし免疫ミルクには存在し
ない。 ５ リウマチ疾病に対する素質は、組織適合性抗
原（HL―Ａ）を介して遺伝されるようであ
る。これらの抗原は恐らく感染作因に対するホ
スト応答を決定するであろう。 この証拠に基いて、リウマチ様関節炎は感染源
を有し；感染側が消化管に起り；多数の異なるバ
クテリア株が感染に包含され；感染は恐らくホス
トの免疫防御機構の欠陥のために起り；および上
記疾病を治療する最も有効な方法は、消化管で感
染作因に対する免疫保護を再確立することである
と結論される。 感染の治療 感染の治療に使用出来る二つの方法が基本的に
存在する。すなわち、感染病原体に対する能動的
または受動的免疫化を包含する免疫法および抗生
物質たとえば、ペニシリン、テトラサイクリン、
アンピシリン等の使用である。抗生物質は、活性
に特異性がなく、広範囲の有害なバクテリアはも
ちろん有利なバクテリアも殺す。他方、免疫法は
非常に特異的である。バクテリアの特定の菌株に
対して生じる殺菌性抗体はその菌株に対してのみ
作用し、他の種類のバクテリアに有害な影響を及
ぼさない。さらに、抗生物質と違つて抗体は天然
身体生成物であり、公知の副作用を有しない。本
発明の目的は特定群のバクテリアにより消化管中
の有利なバクテリアを害することなく感染を抑制
することであるから、免疫法はより抜きの方法で
ある。 能動および受動免疫 免疫保護を達成するには二つの異なる方法があ
る。能動免疫は、ホストの免疫系を刺激してワク
チンに含まれる因子に対する保護抗体を生じさせ
るワクチンでホストを能動的に免疫化する方法で
ある。能動免疫は、ホストを感染病原体にさらし
た際自然の条件下で起る。受動免疫は、能動的に
免疫化された一つの個体から得られる抗体を第二
の個体に与える方法である。この方法によれば、
保護抗体は免疫ホストから受容者に移される。受
動免疫保護は一時的であり、受動的に獲得された
抗体が受容者の系で持続する間だけしか続かな
い。たとえば、破傷風毒素に対して免疫化された
馬から集めた抗体を、破傷風バクテリアにより生
じる毒素に対して一時的な免疫保護を得るために
破傷風に感染した人間に与えることが出来る。従
来の特許（米国特許第3626057号明細書）には、
乳汁中で破傷風抗毒素を製造する方法が記載され
ている。この特許には、牛を破傷風毒素に対して
能動的に免疫化することが出来ること；牛により
生ずる毒素に対する抗体は、牛乳から得ることが
出来ること；およびこれらの抗体は破傷風バクテ
リアに感染した動物を抗体が毒素を中和する方法
で治療するのに使用することが出来ることが教示
されている。この特許には、受動的に投与された
抗体は、バクテリアにより生じる生命を脅かす毒
素を中和し、それによつて毒素に対する一時的免
疫を与えることが教示されている。 受動免疫は、免疫保護が一時的でありかつ保護
抗体が存在する間のみしか持続しないという点で
能動免疫と異なる。能動免疫はより永久的であ
る。何となれば、ホストの免疫系は刺激抗原の存
在下で保護抗体を生産し続けるからである。 消化管免疫学の分野における最近の研究によれ
ば、消化管に局部的免疫機構が存在することが示
された。消化管のこの免疫系は、消化管の管腔で
バクテリアの侵入を抑制する働きをする特殊の抗
体を生じる。分泌免疫グロブリンまたはIgAと呼
ばれる抗体は、抗原により消化管粘膜の局部的能
動免疫に応答して生産される。消化管の分泌免疫
系は、この環境において有害なバクテリア種の転
移増殖および増殖を防止する働きをする。消化管
の局部的免疫系が衰弱すると未知の有害なバクテ
リアが定着し、このバクテリアはリウマチ様関節
炎を引き起すと考えられている。この理論によれ
ば、リウマチ様関節炎は有害バクテリアに対する
保護抗体を生産し分泌する消化管の局部免疫系の
不足から生じる。したがつて、ホストが能動免疫
に応答することが出来ないためにこの方法はリウ
マチ様関節炎の治療方法としては排除される。 本発明は、特に人間の胃腸管の環境で有害なバ
クテリア病原体の成長および増殖を制御する方法
を述べる。上記方法は、牛で製造された保護抗体
の経口摂取による受動免疫の方法である。本方法
は、抗体の生産に使用されるバクテリア種に対し
て高度に特異性がありかつ消化管に住む普通の有
利なバクテリアに害を有さない一時的免疫保護を
提供する。本発明の方法で使用される抗体は本発
明の独特で有用な生成物を構成する。 牛乳は本発明の抗体生成物の好ましい供給源で
ある。それは公知の範囲のバクテリアと反応する
乳汁中の抗体（IgGタイプ）の独特な集団を画成
し、この反応はリウマチ様関節炎の治療および予
防である有利な効果をもたらすという点で非常に
特異性がある。 免疫グロブリンの種類は、本発明の特許性に関
して重要な考慮すべき事である。何となれば、
IgG，IgM，IgA，IgDおよびIgEと称される五つ
の公知の種類の免疫グロブリンが存在するからで
ある（Nisonoff、他、1971）。各種の免疫グロブ
リンは構造が異なつており（Waldman、他、
1970）、体内で異なる生物学的機能を有する
（Waldman、他、1971およびFranklin、1964）。
さらに、体内において免疫グロブリンの場所に驚
くべき変化がある。たとえば、免疫グロブリンの
種類IgAおよびIgGの分布は明確に異なる。IgA
の最も驚くべき特徴は、胃腸液を含む身体の外部
分必液において高濃度で存在するということであ
る。IgAを胃腸液に与える免疫系はIgGを生産す
る系と別の異なつた系である。 人間において、IgGは主として身体の脈管およ
び細胞内空間に生じ（Waldman、他、1970）、胃
腸液にはほとんど発見されない。免疫グロブリン
の種類間の他の重要な差異は、代謝速度に関連す
る。各種の免疫グロブリンの減成は体内の場所と
は無関係に別の制御下にあるようである。機能的
な異化速度は、IgGの6.5％の低さからIgEの90％
の高さに変化し、他の種類の免疫グロブリンは間
に入る（Waldman、他、1970）。さらに、異なる
免疫グロブリン種は抗原に結する結合性および生
きているバクテリア細胞を殺すための必要条件の
１つである補体と結合する能力も異なる
（Heremans、1960）。免疫効果は包含される抗体
の種類に応じて変動し得るので抗体の種類におけ
るこれらの差異を強調することは重要である。 最も普通に考えられている理論は、異なる種類
の免疫グロブリンは体内の異なる環境で機能を展
開するということである。たとえば、消化管の環
境で機能する抗体の生産に対して特殊の独特な免
疫系が存在することが知られている。さらに、消
化管の免疫機能はIgGではなくIgA抗体により特
定的に制御されることは一般に認められている。
したがつて、自然条件下でIgAは人間の胃腸空洞
に起るバクテリア感染に対する免疫制御を規制す
る免疫グロブリンの種類である。IgG，IgM，
IgDおよびIgEは普通腸分泌物に見出されないの
で、これらの種類の抗体のいずれも消化管の環境
で感染を治療するのに有効であると期待すること
は論理的でない。 牛乳の主要な免疫グロブリンは、IgAではな
く、IgGである（Sullivan、他、1969）。したが
つて、牛乳はIgG濃度が高くかつIgA濃度が低い
ために人間の消化管のバクテリア感染を治療する
ための抗体源でないことは明らかである。 免疫法は異なる種類の免疫グロブリンを考慮す
る際に他の重要なパラメータである。異なる免疫
法は異なる種類の抗体を選択的に生産することは
当業者に良く知られている。たとえば、分泌組織
を抗原にさらすことにより達成される分泌組織の
局部的免疫はIgA型の免疫グロブリンの選択的製
造および分泌を刺激する。米国特許第3376198号
明細書に記載されているような乳腺内環流技術は
局部的免疫法の一例である。この方法は、IgA抗
体の製造および分泌を刺激し、IgGの有効な製造
方法ではない。 本発明によれば、筋肉注射を用いて本発明の生
成物が製造される。何となれば、IgAではなく
IgGが牛乳の主要な免疫グロブリンであり、牛に
おいては、全身免疫法が乳汁中でIgG型抗体を発
生させる好ましい方法である。IgGとIgA型免疫
グロブリン間のこの差は重要である。何となれば
それは局部免疫法でなく全身免疫法が高い力価の
乳汁抗体を得るための好ましい方法であることを
教示しているからである。さらに、この差異はワ
クチンの乳腺環流により製造される免疫生成物は
同一のワクチンの筋肉注射により製造される免疫
生成物と明確に異なることを教示している。した
がつて、本発明の生成物（IgG抗体）は、米国特
許第3376198号明細書に記載の方法により得られ
る生成物と明確に異なる。 本発明の免疫生成物は、IgG型の抗体濃度が
IgA型の抗体濃度よりかなり大きいので上記特許
の生成物に対する改良である。IgG抗体を抗原の
乳腺内環流により製造出来るという主張を支持す
る証拠は上記文献に存在しない。さらに、IgA免
疫グロブリンの水準は牛乳に残存していないかま
たは著しく低いので、上記米国特許の教示は本発
明の特許請求の範囲に何らかの関連を有すると考
えられるのは不合理である。これに反して、上記
米国特許の教示はIgAは潜在的な治療応用を有す
る牛乳中の生物学的活性因子であることを意味し
ているので、本発明の発見と離れた所へ導くもの
である。 発明の概要 本発明によれば、バクテリア種の独特の組合せ
がワクチンに配合され、このものが健康な乳牛に
投与される。免疫化された牛の乳汁から得られた
IgG抗体は、本発明の生成物を構成する。本発明
の方法は、IgG免疫グロブリンの経口注入による
患者の受動免疫化を包含し、これによつて胃腸管
に住む混合範囲の感染バクテリアに対して受動的
に免疫にされる。この治療によりリウマチ様関節
炎を引き起す胃腸管内の条件が除去される。 具体的な説明 本発明の生成物は、表１に示すバクテリア種に
作用する天然IgG型抗体の集団を含有する低脂肪
粉末乳である。 【表】 【表】 ＊ アメリカンタイプカルチヤーコ
レクシヨン
抗菌性乳汁は、低脂肪粉末乳に普通見出される
物質すべてを含有する。抗菌性乳汁を構成する主
要な成分を表２に示す。 表 ２ 抗菌性乳汁の定量および定性分析 蛋白質 35.6％ 脂肪 1.0％ 炭水化物 52％ ミネラル 7.8％ 水分 3.5％ 非脂肪乾燥乳の３〜４オンスの各再液化クオル
トは近似的に下記ものを含有する： 1200mgカルシウム 157％ 935mg燐 125％ 0.3mgチアミン 32％ 1.78mgリボフラビン 140％ 1.04mgナイアシン 10％ 324カロリー 抗菌性乳汁および普通の牛乳は同一の近似的重
量％濃度の成分を含有する。さらに、抗菌性乳汁
および普通の乳汁中のIgG型免疫グロブリン濃度
は同一である。したがつて、普通の乳汁と区別す
るのは抗菌性乳汁を構成する抗体の特異性のみで
ある。免疫グロブリンの特異性とは、抗体が作用
するバクテリア種の範囲を意味する。 抗菌性乳汁は、医薬添加剤または牛の自然食品
生成物でない他の成分を含有しない。 本発明の免疫乳汁は、胃腸管でバクテリア発生
（invention）により引き起されるかまたは悪化さ
れる自己免疫病たとえば紅斑性狼瘡等の抑制にも
有効である。 抗菌性乳汁の誘導に使用される多価抗原は次の
ようにして調製される。 ワクチンの調製 表１に示したバクテリア菌株はバクテリア菌株
の真正および入手出来る最高水準の純度を保証す
るザ・アメリカン・タイプ・カルチヤー・コレク
シヨンから得られた。受け取つた後、各々のバク
テリア菌株を血液寒天プレート上で成長させ、培
養の生育性をテストしそして成長パターンが問題
のバクテリアに典型的または非典型的なものであ
るかどうかを決定した。テスト培地の各々からの
単一集落を取つて組織学検査を行い、培養の真正
および純度をさらに確認した。各培地の単一集落
を用いて500mlの標準培養肉汁を接種した。ザ・
アメリカン・タイプ・カルチヤー・コレクシヨン
により推奨された標準肉汁を用いて表１に挙げた
特定バクテリアの各々を成長させた。 すべての細菌を撹拌を与えるために振盪機に接
種した12，13，14および60を除いて静止培地とし
て接種した。バクテリア菌株およびアメリカン・
タイプ・カルチヤー・コレクシヨン・カタログ・
ナンバーの同一性を表１に示す。各培地では37℃
で48時間培養した。接種後、培地を60℃で２時間
加熱して殺した。殺したバクテリアのサンプルを
用いて新しい肉汁に接種し、次いで37℃で24時間
培養し、殺菌法が完全であつたかどうかを確め
た。この手法により滅菌されたことが判明した培
地のみを用いてさらに処理を行つた。次に、滅菌
培地を蒸留水で５回洗浄し、遠心分離により細胞
を回収した。バクテリア細胞を液体窒素に浸漬し
て凍結させ、凍結乾燥法により凍結乾燥した。凍
結乾燥した細胞を多価ワクチンの製造に使用する
まで無菌小瓶に貯蔵した。バクテリア菌株各々の
１ｇ量を秤り取つて多価ワクチンを調製した。乾
燥細胞を互いに混合し、この混合物を無菌生理的
食塩水に懸濁した（500ml食塩水当り20ｇのバク
テリア）。 濃縮溶液のサンプルを食塩水で順次希釈して４
×10⁸ml／c.c.の濃度を与える希釈度を測つた。原
濃縮多価ワクチンを複数の容器に分散し、凍結し
て貯蔵した。50頭の牛を免疫化するのに十分量の
濃縮抗原が各容器に含まれた。濃縮液の最終希釈
は免疫法の直前に行つた。好ましい手法は処理さ
れる牛の数を免疫化するのに十分な数の小瓶を除
去することである。たとえば、小瓶は免疫法の計
画時間の前に24時間除去され、次いで濃縮液のサ
ンプルは無菌容器で４×10⁸細胞／mlの最終濃度
まで希釈される。下記の免疫法により20×10⁸バ
クテリア細胞または４×10⁸細胞／mlである無菌
調製液５c.c.を注射することにより牛で最大応答が
得られる。 牛の好ましい免疫法 本発明の抗体生成物は、前述のように調製した
多価抗原で牛を免疫化することにより製造され
る。牛に20×10⁸バクテリア細胞を含有する多価
抗原５c.c.が注射される。注射は後脚の臀筋最大筋
に行う。この方法を分娩の予定日前２―３週間か
ら４つの連続週間にわたつて一週間間隔で繰り返
えす。第１免疫の後、同じ濃度の抗原を用いて増
強注射を14日毎に与える。この免疫法は最大抗体
力価を与える。 乳汁の捕集、取扱いおよび処理 近代的な搾乳場で免疫化した牛から乳牛を捕集
する。完全自動化搾乳系により完全な衛生状態下
で牛乳を捕集し貯蔵する。搾乳系はパイプの閉鎖
系により冷凍貯蔵タンクに直接連結された自動機
械からなる。各搾乳後系全体をきれいにしかつ滅
菌して最大の衛生状態を確保する。処理中免疫乳
にバクテリアが成長するのを防止するように注意
することが重要である。何となれば、そのような
バクテリアは牛乳中の抗体の力価を低下させる可
能性があるからである。 牛乳は冷凍貯蔵タンクから製酪プラントに牛乳
輸送トラツクにより毎日輸送される。製酪プラン
トでは、抗菌性牛乳を殺菌するために高温度短時
間系を使用する。特別の製酪機は、牛乳の連続流
を155〓に15秒以下フラツシユ加熱させる。温度
および時間は臨界的である。何となれば、抗体は
熱減成に敏感であるからである。牛乳抗体は165
〓以上の温度に１分以上保持されると分解する。
殺菌後、牛乳全体を直ちに冷却し、遠心分離によ
り脂肪を除去し、脱脂した抗菌性牛乳全体をスプ
レー法により粉末にする。スプレー法は、熱空気
（350〓）を高速度で吹き込む大きな乾燥室からな
る。脱脂乳をその室に噴霧化し、そこで微粉乳粒
子をそれがタンクの底に落下するにつれて直ちに
乾燥する。乾燥乳を機械的装置により自動的に除
去し、乳粉末を衛生状態下で包装する。噴霧化前
に、脱脂乳を真空室で沸騰させる（100―110〓）
ことにより濃縮する。各段階で、バクテリアが牛
乳を汚染しないようにすることが臨界的である。
何となれば、この汚染は抗体の力価を低下させる
からである。 試験法 同血統交配によるホルスタイン牛で免疫牛乳を
調製した。牛は、表に示すバクテリア抗原の混
合物を筋肉注射することにより免疫化した。前述
した方法によりワクチンを調製した。牛の免疫学
的応答をワクチンの１週間に２回の注射により増
強した。これらの牛からの牛乳をプールし、脂肪
を除去し、非脂肪牛乳を160〓に16秒さらして殺
菌し、その後牛乳温度が85〓を超えないスプレー
乾燥法にかけた。この牛乳を１クオルトポリエチ
レン容器に包装した。対照牛乳（プラセボ
（placebo））は地方製造者から購売した非脂肪粉
末乳であつた。 赤血球沈降速度を新しく集めた血液についてウ
エスターグレン法により測定し、ウイントローフ
アンドランズバーグ法（1935）によりヘマトクリ
ツトについて補正した。リウマチ様因子力価をシ
ンガー―プロツツ（1966）肉眼的チユーブテスト
により測定した。 患者は高い赤血球沈降速度およびプラスのリウ
マチ様因子力価に基いて研究のために受け入れ
た。９人の患者を12ケ月研究し、11人の患者を18
ケ月研究した。患者群は平均年令50.4才の32〜69
才の13人の白人女性および平均年令58.1才の43〜
70才の７人の白人男性から構成された。関節炎の
平均期間は女性では10.8年であり、男性では11.0
年であつた。患者を無作為に免疫牛乳または非免
疫牛乳（プラセボとして働くデイトン地方で購売
された商業製品）に配置した。両牛乳製品共同一
の容器に包装し、各々充填時に各容器に取り付け
た青または赤の感圧ラベルで免疫牛乳またはプラ
セボであることが確認された。牛乳を患者に分配
する直前にこのラベルを取り外した。したがつ
て、患者が免疫牛乳を受け取つたかまたはプラセ
ボを受け取つたかを知る時は存在しなかつた。患
者は最初の６ケ月間に免疫牛乳またはプラセボを
受け取るように無作為に（コインのフリツプによ
り決定）選ばれた。この期間の経過後、免疫牛乳
を受けた患者をプラセボに、そしてプラセボを受
けた患者を免疫牛乳に第二の６ケ月間配置した。 第二の６ケ月間が経過後、11人の患者はさらに
６ケ月間研究のために残ることを志願した。この
時点で牛乳の種類（免疫またはプラセボ）を再び
変え観察を続けた。したがつて、研究は三つの６
ケ月期間からなり、患者のうち11人は三つの期間
参加し、９人は二つの期間参加した。 患者を、月間隔で観察し、その時点で１ケ月の
牛乳供給を行い、評価調査票に書き込んでもら
い、そして血液サンプルを集めてリウマチ様因子
力価、赤血球沈降速度およびヘマトクリツト測定
値を求めた。 患者に、日に２回食事の後に１クオルトの牛乳
に相当する非脂肪乳固体の量を取るように指示し
た。牛乳固体を、朝目覚めてまもなく摂取する直
前におよび夜寝る直前に１パイントの冷い水道水
に新たに溶解した。彼等は普通通りに彼等の医者
に会いそして医者により規定された治療法に従う
ように言われた。薬物治療は随意にまたは担当医
により規定されたように行われた。本発明者は、
彼等が摂取した薬の量を報告することのみを要求
した。 １ケ月毎に各患者に調査標（第１図、第１Ａ
図）を書き込ませた。それは次の６つの部分に分
けられた： １ 朝の硬直時間 ２ ８個の関節の各々で経験される疼痛の厳しさ ３ 服用された短時間作用を有する医薬の種類お
よび量 ４ 服用された長期間作用を有する医薬の種類お
よび量 ５ 患者が普通の活動が出来る能力 ６ リウマチ様関節炎の徴候の厳しさ。 各答の次の空白に示される数は、調査票の評価
過程でその答に割り当てられたスコアを示す。投
薬で治療される部分のスコア評価するに際して、
使用した種々の医薬の関連抗炎症および鎮痛活性
を反映するように努力された。５グレーンアスピ
リン錠に１の値を与えた。すべて他の医薬（別個
に考えられるゴールド（gold）、プレークニル
（plaquenil）およびコルチゾンシヨツト（shot）
を除いて）には、アスピリンに対する値を任意に
与えた。したがつて、すべてのサリチル酸塩、チ
レノール、ダルボン、モトリン等は５グレーンア
スピリン錠と等価であると考えられ、これらにも
１の値を与えた。プレドニソーンのmg数は、４倍
値であり、服用されたインドシンカプセルの数は
2.5倍値であつた。コデインのグレーン数は２倍
値であり、服用されたブタゾラジン錠の数は７倍
値であつた。 各範疇の平均スコアは各６ケ月期間に対して計
算した。次に、プラセボの投与中記録された平均
値から免疫牛乳の投与中記録された平均値を引く
ことにより平均値の差を計算した。このようにし
て結果を計算した場合、患者が免疫牛乳を摂取し
た期間中の患者の状態の改良は、質問１および６
に対する負の値および他のすべての質問に対する
正の値により指摘された。平均補正赤血球沈降速
度（ESR）およびリウマチ様因子力価（RF）は
各々同様にして示した。これらは、正の値が免疫
牛乳の投与中より低い赤血球沈降速度またはリウ
マチ様因子力価を反映するように計算された。デ
ータはGoodnight他のStatistical Analysis
System（SAS Institute，Raleing，N.C.）を用い
て統計的に評価した。計算はIBMモデル370／
155コンピユーターを用いて行つた。 結 果 免疫牛乳は悪性貧血を有する１人を除いてすべ
ての患者により良く許容された。この患者は下痢
を訴えたので研究を中止した。ある患者は研究過
程中重量増加を報告した。これは牛乳から増大さ
れたカロリー摂取に基づくものであると思われ、
あるいは恐らく身体状態の全体的改良を反映する
ものであると思われる。 【表】 第３表に示すように、全体で27の対照期間（プ
ラセボを受け取つた６ケ月期間）および24の試験
期間（免疫牛乳を受け取つた６ケ月期間）の間患
者を観察した。１人の患者は、足首および足の１
つに物理的損傷を受けた。これらの関節の疼痛は
評価しなかつた。このことはそれらの関節に対し
てより小さい数の評価期間が存在することを説明
する。１人の患者に対する赤血球沈降速度はきわ
めて異常であり（他の患者の平均値から２標準以
上偏位している）、したがつてそれらの速度は含
まれなかつた。この省略は、その変数に対して報
告されたより少ない数の観察を説明する。 平均値および変動系数（C.V.）は各変数に対
して表に示されている。平均値間の差は、患者が
プラセボを受け取つた期間に得られた平均値から
彼等が免疫牛乳を受け取つた期間中に得られた平
均値を引くことにより計算された。免疫牛乳に対
する好ましい応答はAM硬直（問題１）および一
ケ月毎の変化（問題6a，ｂおよびｃ）に対する
負の値および他のすべての変数に対する正の値に
より指摘される。免疫牛乳に対する有効な応答
は、調査票から得られたすべてのデータに対して
得られた。確率（Ｐ）はあらゆる場合において高
度の統計的意味を指摘する。赤血球沈降速度およ
びリウマチ様因子力価に対して得られた小さな平
均値差は重要でなかつた。しかしながら、赤血球
沈降速度を個人基準で考えた場合、研究された20
人の患者のうち４人は免疫牛乳を受け取りながら
統計的に重要な減少を有した。 免疫牛乳はリウマチ様因子力価に対する平均値
に大した効果を有しなかつたけれども、個々の患
者を調べるとある興味ある応答が明らかになつ
た。研究された20人の患者のうち７人は免疫牛乳
を受けている期間中少なくとも１回の時機で負の
リウマチ様因子力価を有した。彼等のうち４人は
免疫牛乳を受けている期間中負になり、彼等の力
価は第２図に示すように対照（プラセブ）牛乳を
受けているその後の６ケ月間中正にならなかつ
た。この報告期間後研究を続けると、25人の患者
のうち13人は血液からリウマチ様因子を失つた。 議 論 この研究担当の科学者は１ケ月間隔で各患者に
個人的に会見し、問題に対する答を記録した。患
者の答に影響を及ぼすようなことはなされなかつ
た。患者は研究のある期間中プラセボを受けるこ
とを最初に知らされそしてしばしば思い起され
た。この知識は患者が質問に客観的に偏見なしに
答える誘因として働くことが予想されていた。い
かなる時点においても患者は免疫牛乳またはプラ
セボを受けているかどうかについて知らされなか
つた。 「昨日」行われた投薬に関する質問（質問
＃３）およびゴールドシヨツト、プレークニルお
よびコルチゾンシヨツトに関する質問（質問
＃４）は客観的であり、他の質問に与えられた答
を考慮する際に第一に重要なものである。これら
の質問は２つの理由から重要である： １ 免疫牛乳が疾病の徴候の軽減に有効であれ
ば、患者は随意に許可された薬剤をより少なく
服用することが予期されるであろう。平均し
て、患者は免疫牛乳を受けている期間中１日当
り４つのより少ないアスピリンまたはその等価
物を服用したことを報告した。彼等はまたこれ
らの期間中ゴールドシヨツト、プレークニルお
よびコルチゾンシヨツトをより少なく服用した
ことを報告した；および ２ 患者がリウマチ様関節炎の治療に有効な鎮痛
剤および他の医薬剤のより少ない量を服用する
際、彼等は免疫牛乳が疾病に有利に影響をしな
い限り増大された不愉快を報告することが予期
される。第２表に示されているように、患者が
たとえ関節炎の薬剤より少なく服用していても
免疫牛乳を受けている期間中にはかなり少ない
関節併発が報告された。 患者は一年間にわたつて一ケ月間隔で研究に供
され、彼等が最初に受けた牛乳製品の種類（免疫
牛乳またはプラセボ）は無作為に取られた。正の
応答または改良が調査票のすべてのパラメータに
対して得られたおよびこれらの平均応答が統計的
に意味があつたという観察は、免疫牛乳が患者に
有利な効果を有することを強く指摘するものであ
る。この結論は、患者の20％が免疫牛乳を受けて
いる間は赤血球沈降速度の統計的に意味ある（ｐ
＜0.05）減少を経験するという観察により強化さ
れる。 リウマチ様因子力価の結果を評価することは困
難である。これは少なくとも一部にはリウマチ様
関節炎の病因および予後におけるリウマチ様因子
の起源および役割が理解されていないという事実
に基づく。Rose他（1948）は、家兎抗体で鋭敏
化された羊の赤血球はリウマチ様関節炎の患者か
らの血清の存在下で凝集反応を受けることを示し
た。テストは普通の免疫グロブリン（家兎かまた
は人間のIgG）とリウマチ様因子間の特定反応に
左右される。リウマチ様因子により呈せられる特
異性は、IgGに対する抗体に予期されるものと同
じである（Epstein他1956）。リウマチ様因子の存
在は、リウマチ様関節炎の疾病厳しさと相関づけ
られており、リウマチ様関節炎患者の組織に沈殿
した蛋白質において確認することが出来る。リウ
マチ様関節炎の患者の小割合は正のリウマチ様因
子力価を有しないけれども、たとえ疾病が軽快状
態にある時でさえ正の凝集反応は負に戻らないこ
とがほとんどのリウマチ症学者により一般に認め
られている。しかしながら、De Forest他
（1958）は、鎮静後負に戻る正のリウマチ様因子
力価を有する少数の患者について述べた。病気の
再発が起つた時、テストは再び正になつた。しか
しながら、Aho、他（1959）は、病気が不活性に
なつたほとんどの患者は血清学的に正のままであ
ることに注目した。本発明者の患者の60％に負の
力価が観察されたことおよび患者の半分で力価は
６ケ月間負のままであつたという事実は、免疫牛
乳がリウマチ様関節炎の原因である一次病因因子
に影響を及ぼすことを証明するものである。 免疫牛乳のリウマチ様関節炎徴候の軽減効果
は、最近記載された組織適合性抗原（HL―Ａ）
とリウマチ症に対する敏感性間の関係
（Brewerton、1976）に基づいて考慮した場合特
に関連性を有する。組織適合性抗原は、すべての
人間の細胞に見出される遺伝的に決定される抗原
である遺伝を制御する遺伝子は組織適合性遺伝子
と呼ばれる。これらの遺伝的に決定される抗原は
いまや40以上知られている。それらは一卵性双生
児以外の個々人間でなされる組織移植の拒絶に対
して責任を有する。皮相的には、HL―Ａ抗原は
寿命の間遺伝されるという点でABO血液群に似
ている。それらの機能は移植によりつくられる高
度に人工的な状況の場合を除いていまだ知られて
いない。しかしながら、組織適合性遺伝子は第６
番目染色体の免疫応答遺伝子と密接に結合されて
いることが知られている。この関係において、そ
れらは個々人の外部侵入者たとえばバクテリアに
対する免疫応答を決定することが出来る。 HLA―B27を有する人は、種々のリウマチ病
に特に敏感であるように思われる。この組織適合
性抗原は他の素因を与える因子の存在下でリウマ
チ様関節炎をもたらす免疫応答を指令すると仮定
される。エルジニアエンテロコリテイカの腸管感
染後、ある患者は急性末梢関節炎を発生する
（Ahvon、他1969）。同様に、サルモネラ感染後、
患者の約２％は急性末梢関節炎を発生する
（Warren、1970）。HLA―B27はエルジニア関節
炎の49人の患者のうち43人におよびサルモネラ関
節炎の16人の患者のうち15人に見出された
（Aho、1974）。感染作因は腸管において局部的徴
候を生じることなくはびこることが出来るという
ことは魅力的な可能性である。HLA―B27を有
する患者では、関節炎をもたらすホスト応答が確
立される。したがつて、感染作因が関節に入り込
む必要はない。免疫牛乳は病原性バクテリアおよ
び（または）その代謝生成物を効果的に不活性に
するかまたは中和する抗体を含有するのでリウマ
チ様関節炎の患者に有利である。

【図面の簡単な説明】

第１図は本文で述べた調査票の標本、第１Ａ図
は第１図の調査票の続き、第２図は免疫牛乳につ
いて12ケ月、６ケ月にわたるおよびプラセボにつ
いて６ケ月にわたる時間対RF力価でテスト結果
をプロツトしたグラフである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記のものを包含するアメリカンタイプカル
   チヤーコレクシヨンバクテリア抗原の二種または
   それ以上からの殺されたバクテリアからワクチン
   をまず製造し、 黄色ブドウ状球菌 11631 皮膚醸膿ブドウ状球菌 155 化膿性連鎖状球菌 Ａ タイプ１ 8671 〃 タイプ３ 10389 〃 タイプ５ 12347 〃 タイプ８ 12349 〃 タイプ12 11434 〃 タイプ14 12972 〃 タイプ18 12357 〃 タイプ22 10403 醸気性菌 884 大腸菌 26 腸炎菌 13076 縁膿桿菌 7700 肺炎菌 9590 ネズミチフス菌 13311 インフルエンザヘモフイルス 9333 緑色連鎖状球菌 6249 尋常変形菌 13315 志賀赤痢菌 11835 連鎖状球菌、グループＢ 肺炎双球菌 連鎖状球菌ムタン（mutans） 座瘡杆菌、タイプ１および２ 上記ワクチンを健康な牛に連続四週間の間一週
   間に一回およびその後月に二回各々20×10⁸バク
   テリア細胞だけ筋肉注射し、第四週から始めて免
   疫化された牛から牛乳を集め、バクテリアの各々
   に対する最小力価が抗体力価をテストするための
   チユーブ凝集反応法により測定して１―500であ
   ることを保証するための力価テストを行うことに
   より製造された胃腸管の混合バクテリア感染を抑
   制するための抗体。 ２ 抗体生成物1gG型が牛乳から得られた純粋な
   免疫グロブリンである、特許請求の範囲第１項に
   記載の抗体。