JPH0191789A - 光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製造法 - Google Patents
光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製造法Info
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- JPH0191789A JPH0191789A JP24876387A JP24876387A JPH0191789A JP H0191789 A JPH0191789 A JP H0191789A JP 24876387 A JP24876387 A JP 24876387A JP 24876387 A JP24876387 A JP 24876387A JP H0191789 A JPH0191789 A JP H0191789A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、生理活性を有する光学活性物質の合成に際し
、その合成経路を短縮化させる光学活性合成中間体、と
して有用な光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの
製造法に関する。
、その合成経路を短縮化させる光学活性合成中間体、と
して有用な光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの
製造法に関する。
従来、光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの合成
例としては、コーエンとケトオリ−（Ｓ。
例としては、コーエンとケトオリ−（Ｓ。
Ｇ、 Ｃｏｈａｎ、 Ｅ、にｎｅｄｏｈｒｉ、 Ｎａｔ
ｕｒｅ、 １８６．７５（１９６０）と大野（日本特許
公開昭５７−７１３！３４）の提案が知られている。前
者はβ−アセドア≦トグルタル酸ジエチルエステルから
、スイ臓プロテアーゼの一種であるα−キモトリプシン
を用いて光学活性なモノエステルを得ている。一方、後
者は、β−ベンジルオキシカルボニルアミノグルタル酸
ジメチルエステルから、エステラーゼを用いて、光学活
性なモノエステルを得ている。
ｕｒｅ、 １８６．７５（１９６０）と大野（日本特許
公開昭５７−７１３！３４）の提案が知られている。前
者はβ−アセドア≦トグルタル酸ジエチルエステルから
、スイ臓プロテアーゼの一種であるα−キモトリプシン
を用いて光学活性なモノエステルを得ている。一方、後
者は、β−ベンジルオキシカルボニルアミノグルタル酸
ジメチルエステルから、エステラーゼを用いて、光学活
性なモノエステルを得ている。
しかしながら、これらの研究は、酵素の水中での反応の
研究の枠を脱しておらず、近年、第四世代抗生物質と注
目を浴びているチェナマイシン等のβ−ラクタム系抗生
物質を合成的に生産するという目的にはほど遠いもので
あった。すなわち■高価な酵素は水中に溶解しているた
め、固定化しない限り回収できない。■固定化処理を行
った場合、処理の過程で、酵素の活性は減少する。■水
系での酵素は、固定化の有無にかかわらず、無水条件の
有機溶媒中より不安定である。■更に、使用〃ｘ料は一
般に親油性で、水には難溶である為、アセＩ〜ンやＤＭ
Ｆなどの可溶化剤を用いなければならず、このため酵素
が一段と不安定になる等の多くの欠点を有している。
研究の枠を脱しておらず、近年、第四世代抗生物質と注
目を浴びているチェナマイシン等のβ−ラクタム系抗生
物質を合成的に生産するという目的にはほど遠いもので
あった。すなわち■高価な酵素は水中に溶解しているた
め、固定化しない限り回収できない。■固定化処理を行
った場合、処理の過程で、酵素の活性は減少する。■水
系での酵素は、固定化の有無にかかわらず、無水条件の
有機溶媒中より不安定である。■更に、使用〃ｘ料は一
般に親油性で、水には難溶である為、アセＩ〜ンやＤＭ
Ｆなどの可溶化剤を用いなければならず、このため酵素
が一段と不安定になる等の多くの欠点を有している。
〔目 、的〕
本発明は、前記従来技術の欠点を克服し、光学純度の高
いβ−置換グルタル酸モノエステルを工業的に有利に製
造する方法を提供することを目的とする。
いβ−置換グルタル酸モノエステルを工業的に有利に製
造する方法を提供することを目的とする。
本発明によれば、
一般式（１）
％式％
〔式中Ｒは、水素、ハロゲン、置換もしくはＭ置換の脂
肪族炭化水素基、置換もしくは無置換の芳香族炭化水素
基、又は酸素、窒素、硫黄などのへテロ原子を含む少く
とも１種の置換基である。〕 で示されるβ−置換グルタル酸無水物をＺ−０１１（式
中、２は炭素数１〜１０の直鎖もしくは分枝鎖アルキル
基を表わす〕の存在下、酵素懸濁有機溶媒中で、加アル
コール分解する事を特徴とする、一般式（Ｕ） 〔式中Ｒ及び２は前記のとおりである〕で示される光学
活性β−置換グルタル酸モノエステルを製造する方法が
提供される。 。
肪族炭化水素基、置換もしくは無置換の芳香族炭化水素
基、又は酸素、窒素、硫黄などのへテロ原子を含む少く
とも１種の置換基である。〕 で示されるβ−置換グルタル酸無水物をＺ−０１１（式
中、２は炭素数１〜１０の直鎖もしくは分枝鎖アルキル
基を表わす〕の存在下、酵素懸濁有機溶媒中で、加アル
コール分解する事を特徴とする、一般式（Ｕ） 〔式中Ｒ及び２は前記のとおりである〕で示される光学
活性β−置換グルタル酸モノエステルを製造する方法が
提供される。 。
すなわち、本発明は、酵素の安定性５回収性。
再利用性を向上させる為に、反応溶媒として酵素が溶解
しない非水系有機溶媒を選択し、不斉合成がより効率良
く行なわれる反応として、加アルコール分解反応を選択
した事を特徴とする。
しない非水系有機溶媒を選択し、不斉合成がより効率良
く行なわれる反応として、加アルコール分解反応を選択
した事を特徴とする。
本発明の反応式を図式すれば以下のとおりである。
β−置換グルタ／Ｌａ’１ｌｌｔ！水物 光学活
性β−置換グルタ／１４ｍモノエステル 本発明における。β−置換グルタル酸無水物の酵素的加
アルコール分解による光学活性β−置換グルタル酸モノ
エステルの不斉合成に関する作用機構は以下の様に考え
られる。
性β−置換グルタ／１４ｍモノエステル 本発明における。β−置換グルタル酸無水物の酵素的加
アルコール分解による光学活性β−置換グルタル酸モノ
エステルの不斉合成に関する作用機構は以下の様に考え
られる。
まず１本反応系に酵素を加えない場合、β−置換グルタ
ル酸無水物はアルコールとエステル化反応を起こさず、
反応はガスクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラ
フィーで確認する限り反応は進行しない。この事から、
酵素が反応を進行させる触媒となっている事は明らかで
ある。更に、Ｐ−ニトロフエニルジエチルフォスフェー
トによって酵素活性を完全に失ったリパーゼを用いた場
合、エステル化反応が全く進行しないことから、酵素タ
ンパクの求核性で反応が進行しているのではない事が推
定できる。この事から、反応は酵素の活性化部位で進行
している事が推定できる。
ル酸無水物はアルコールとエステル化反応を起こさず、
反応はガスクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラ
フィーで確認する限り反応は進行しない。この事から、
酵素が反応を進行させる触媒となっている事は明らかで
ある。更に、Ｐ−ニトロフエニルジエチルフォスフェー
トによって酵素活性を完全に失ったリパーゼを用いた場
合、エステル化反応が全く進行しないことから、酵素タ
ンパクの求核性で反応が進行しているのではない事が推
定できる。この事から、反応は酵素の活性化部位で進行
している事が推定できる。
本発明において、用いられるβ−置換グルタル酸無水物
は、前記したように下記一般式（りで示される。
は、前記したように下記一般式（りで示される。
一般式
〔式中Ｒは、水素、ハロゲン、置換もしくは無置換の脂
肪族炭化水素基、置換もしくは無置換の芳香族炭化水素
基、又は酸素、窒素、硫黄などのへテロ原子を含む少く
とも１種の置換基である。〕 式中Ｒは、特にメチル、エチル、イソプロピルなどの炭
素数１〜６の直鎖または分枝鎖のアルキル基、又はクロ
ルなどのハロゲン等が望ましい。
肪族炭化水素基、置換もしくは無置換の芳香族炭化水素
基、又は酸素、窒素、硫黄などのへテロ原子を含む少く
とも１種の置換基である。〕 式中Ｒは、特にメチル、エチル、イソプロピルなどの炭
素数１〜６の直鎖または分枝鎖のアルキル基、又はクロ
ルなどのハロゲン等が望ましい。
本発明で用いられるアルコール（Ｚ−０１１）は脂肪族
アルコールを示す。
アルコールを示す。
よりＪＬ体的には、不斉炭素を有しないアルコールとし
ては、炭素数１−１０の直鎖もしくは分枝鎖脂肪族アル
コールであり、その中で、特に、炭素数３〜６の直鎖又
は分枝鎖脂肪族アルコールが望ましい。
ては、炭素数１−１０の直鎖もしくは分枝鎖脂肪族アル
コールであり、その中で、特に、炭素数３〜６の直鎖又
は分枝鎖脂肪族アルコールが望ましい。
本発明における有機溶媒としては、先に示したアルコー
ルが用いられる他次のような非水系有機溶媒である。非
水県有ｎ溶媒を具体的に例示すると、ｎ−ペンタン、ｎ
−ヘキサン、ｎ−へブタン等の直鎖型脂肪族炭化水素、
イソブタン、イソペンタン。
ルが用いられる他次のような非水系有機溶媒である。非
水県有ｎ溶媒を具体的に例示すると、ｎ−ペンタン、ｎ
−ヘキサン、ｎ−へブタン等の直鎖型脂肪族炭化水素、
イソブタン、イソペンタン。
２−メチルペンタン等の分枝鎖型脂肪族炭化水素、シク
ロペンタン、シクロヘキサン等の脂環式炭化水素、二塩
化メチレン、クロロホルム、四塩化エチレン、ジクロロ
エタン、トリクロロエタン等の含ハロゲン化炭化水素、
ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳呑族炭化水素、ジ
エチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｎ−ジブチ
ルエーテル等の脂肪族エーテル、テ！へラヒドロフラン
、テトラヒドロピラン等の脂環式エーテル等が挙げられ
るが、その中でｎ−ヘキサン、トルエン、ジエチルエー
テル、ｎ−ジブチルエーテルがより適当である。
ロペンタン、シクロヘキサン等の脂環式炭化水素、二塩
化メチレン、クロロホルム、四塩化エチレン、ジクロロ
エタン、トリクロロエタン等の含ハロゲン化炭化水素、
ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳呑族炭化水素、ジ
エチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｎ−ジブチ
ルエーテル等の脂肪族エーテル、テ！へラヒドロフラン
、テトラヒドロピラン等の脂環式エーテル等が挙げられ
るが、その中でｎ−ヘキサン、トルエン、ジエチルエー
テル、ｎ−ジブチルエーテルがより適当である。
有機溶媒の使用量に特別な制約はないが通常、原料であ
るβ−置換グルタル酸無水物１重量部に対して５〜２０
０重量部、好ましくは２０〜１００重量部使用すること
が望ましい。
るβ−置換グルタル酸無水物１重量部に対して５〜２０
０重量部、好ましくは２０〜１００重量部使用すること
が望ましい。
本発明における酵素は加水分解酵素を示し、より具体的
に例示すると、豚すい臓リパーゼ、キャンディダ属由来
の酵母リパーゼ、アスペルギルス属、ムコール属、シュ
ードモナス属由来の菌体リパーゼ等のリパーゼ類、又は
豚肝臓由来のエステラーゼ、又は１−リプシン、キモト
リプシン、サブチリシン等のタンパク分解酵素が挙げら
れる。酵素の量は触媒量でよいが、反応速度を考慮して
原料であるβ−置換グルタル酸無水物１重量部に対して
０．１〜３０重量部、好ましくは０．５〜１７重量部と
するのがよい。
に例示すると、豚すい臓リパーゼ、キャンディダ属由来
の酵母リパーゼ、アスペルギルス属、ムコール属、シュ
ードモナス属由来の菌体リパーゼ等のリパーゼ類、又は
豚肝臓由来のエステラーゼ、又は１−リプシン、キモト
リプシン、サブチリシン等のタンパク分解酵素が挙げら
れる。酵素の量は触媒量でよいが、反応速度を考慮して
原料であるβ−置換グルタル酸無水物１重量部に対して
０．１〜３０重量部、好ましくは０．５〜１７重量部と
するのがよい。
本発明においては、反応系の水分含量を極めて低くし反
応を実質的に非水系で行なう。具体的には、前記β−置
換グルタル酸無水物、アルコール、有機溶媒中に含まれ
る全水分含量は２％（Ｖ／Ｖ）以下であり、更に、０．
５％（Ｗ／Ｖ）以下が望ましい。
応を実質的に非水系で行なう。具体的には、前記β−置
換グルタル酸無水物、アルコール、有機溶媒中に含まれ
る全水分含量は２％（Ｖ／Ｖ）以下であり、更に、０．
５％（Ｗ／Ｖ）以下が望ましい。
本発明方法に従うと、比較的安価なβ−置換グルタル酸
無水物より、光学純度の高い光学活性β−置換グルタル
酸モノエステルを非常に高い収率で得ることができる。
無水物より、光学純度の高い光学活性β−置換グルタル
酸モノエステルを非常に高い収率で得ることができる。
また、従来の水系酵素反応を、有機溶媒系に置き換えた
ことにより、高価な酵素を不溶の状態で反応させる事が
できるため酵素の回収性、再利用性に優れたものである
。更に、原料の溶解性に関する問題点も除かれるので、
工業的な光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製
造法として好適である。
ことにより、高価な酵素を不溶の状態で反応させる事が
できるため酵素の回収性、再利用性に優れたものである
。更に、原料の溶解性に関する問題点も除かれるので、
工業的な光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製
造法として好適である。
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。
実施例１
３−クロログルタル酸無水物（１，４９ａ）をトルエン
１００ｍ１に溶解し、酵素粉（アマノＰ、天野製薬）１
７ｇ及び、ｎ−ブチルアルコール（４，５ｇ）を加え、
３０℃で１６０分間撹はんする。反応終了後、酵素粉を
濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラム
クロマトグラフィーで精製を行い（−）−３−クロログ
ルタル酸モノブチルエステルを８０％の収率で得た０次
いで、このモノエステルを光学活な２−ナフチルエチル
アミンと縮合させ、液体クロマトグラフィーを測定した
ところ、この光学純度は８９％ａｅであった。
１００ｍ１に溶解し、酵素粉（アマノＰ、天野製薬）１
７ｇ及び、ｎ−ブチルアルコール（４，５ｇ）を加え、
３０℃で１６０分間撹はんする。反応終了後、酵素粉を
濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラム
クロマトグラフィーで精製を行い（−）−３−クロログ
ルタル酸モノブチルエステルを８０％の収率で得た０次
いで、このモノエステルを光学活な２−ナフチルエチル
アミンと縮合させ、液体クロマトグラフィーを測定した
ところ、この光学純度は８９％ａｅであった。
実施例２
酵素の再利用の可能性を検討するため、実施例１で使用
した酵素粉を繰り返し使用した。繰り返し実験の内容は
実施例１と全く同じ条件で行い、酵素粉は反応終了後、
トルエンで洗浄し再利用した。２回目の反応において、
薄層クロマトグラフィーより１反応を追跡した結果、２
００分間で完結し、実施例１と同じ操作で精製を行い３
−クロログルタル酸モノブチルエステルを光学純度８９
％ｅｅで得た。更に、同じ酵素粉を用いて３回目の反応
を行ったところ、反応時間は２００分間で３−クロログ
ルタル酸モノブチルエステルを光学純度８９％ｅｅで得
た。
した酵素粉を繰り返し使用した。繰り返し実験の内容は
実施例１と全く同じ条件で行い、酵素粉は反応終了後、
トルエンで洗浄し再利用した。２回目の反応において、
薄層クロマトグラフィーより１反応を追跡した結果、２
００分間で完結し、実施例１と同じ操作で精製を行い３
−クロログルタル酸モノブチルエステルを光学純度８９
％ｅｅで得た。更に、同じ酵素粉を用いて３回目の反応
を行ったところ、反応時間は２００分間で３−クロログ
ルタル酸モノブチルエステルを光学純度８９％ｅｅで得
た。
実施例３
３−メチルグルタル酸無水物（１，２８ｇ）をベンゼン
１００ｍ１に溶解し、１ｇ、素粉（アマノＣＥＳ、大野
製薬）１７ｇ及び、ｎ−ブチルアルコール（４，５ｇ）
を加え、３０℃で２４時時間法んする。反応終了後、ｒ
ＬＩｌ素粉を濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリ
カゲルカラムクロマトグラフィーで精製を行い（−）−
３−メチルグルタル酸モノブチルエステルを７５％の収
率で得た。このモノエステルを２段階を経て旋光度既知
の５９１〜２体に導いたところ光学純度は７６％ｅｅで
立体配置はＲであった。
１００ｍ１に溶解し、１ｇ、素粉（アマノＣＥＳ、大野
製薬）１７ｇ及び、ｎ−ブチルアルコール（４，５ｇ）
を加え、３０℃で２４時時間法んする。反応終了後、ｒ
ＬＩｌ素粉を濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリ
カゲルカラムクロマトグラフィーで精製を行い（−）−
３−メチルグルタル酸モノブチルエステルを７５％の収
率で得た。このモノエステルを２段階を経て旋光度既知
の５９１〜２体に導いたところ光学純度は７６％ｅｅで
立体配置はＲであった。
実施例４
３−エチルグルタル酸無水物１．４２ｇをエチルエーテ
ル１００ｍ１に溶解し、酵素粉（アマノＰ、大野製薬）
１７ｇ及び、ｎ−プロピルアルコール（３，７ｇ）を加
え、３０℃で５時間撹はんする。反応終了後、酵素粉を
濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラム
クロマトグラフィーで精製を行い（−）−３−二チルグ
ルタル酸モノプロピルエステルを９５％の収率で得た。
ル１００ｍ１に溶解し、酵素粉（アマノＰ、大野製薬）
１７ｇ及び、ｎ−プロピルアルコール（３，７ｇ）を加
え、３０℃で５時間撹はんする。反応終了後、酵素粉を
濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラム
クロマトグラフィーで精製を行い（−）−３−二チルグ
ルタル酸モノプロピルエステルを９５％の収率で得た。
このモノエステルを旋光度既知のラクトン体に導いたと
ころ光学純度は７０％ｅｅで立体配置はＲであった。
ころ光学純度は７０％ｅｅで立体配置はＲであった。
実施例５
３−クロログルタル酸無水物（１，４９ｇ）をエチルエ
ーテル１００ｍ１に溶解し、酵素粉（アマノＰ、大野製
薬）１７ｇ及び、ｎ−プロピルアルコール（３，７ｇ）
を加え、３０℃で２００分間撹はんする。反応終了後、
酵素粉を濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーで精製を行い（−）−３−
クロログルタル酸モノプロピルエステルを８０％の収率
で得た。次いで、このモノエステルを光学活性な２−ナ
フチルアミンと縮合させ、液体クロマトグラフィーで８
１１定したところこの光学純度は８０％ｅｅであった。
ーテル１００ｍ１に溶解し、酵素粉（アマノＰ、大野製
薬）１７ｇ及び、ｎ−プロピルアルコール（３，７ｇ）
を加え、３０℃で２００分間撹はんする。反応終了後、
酵素粉を濾別し、濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーで精製を行い（−）−３−
クロログルタル酸モノプロピルエステルを８０％の収率
で得た。次いで、このモノエステルを光学活性な２−ナ
フチルアミンと縮合させ、液体クロマトグラフィーで８
１１定したところこの光学純度は８０％ｅｅであった。
実施例６
３−エチルグルタル酸無水物１．４２ｇをトルエン１０
０ｍ１に溶解し、酵素粉（ＰＰＬ、シグマ社製）１７ｇ
及び、ｎ−ブチルアルコール（４，５ｇ）を加え、３０
℃で５時間撹はんする。反応終了後、酵素粉を濾別し、
濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラムクロマト
グラフィーで精製を行い（−）−３−エチルグルタル酸
モノブチルエステルを得た。収率及び光学純度は実施例
４と同様であった。
０ｍ１に溶解し、酵素粉（ＰＰＬ、シグマ社製）１７ｇ
及び、ｎ−ブチルアルコール（４，５ｇ）を加え、３０
℃で５時間撹はんする。反応終了後、酵素粉を濾別し、
濾液より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラムクロマト
グラフィーで精製を行い（−）−３−エチルグルタル酸
モノブチルエステルを得た。収率及び光学純度は実施例
４と同様であった。
実施例７
３−アセ１−アミドグルタル酸無水物を、実施例１と同
様の条件で反応させたところ、良好な結果を得ることが
出来た。
様の条件で反応させたところ、良好な結果を得ることが
出来た。
実施例８
３−ベンジルチオグルタル酸無水物を、実施例１と同様
の条件で反応させたところ、良好な結果を得ることが出
来た。
の条件で反応させたところ、良好な結果を得ることが出
来た。
実施例９
酵素の精製
アマノＰ（５０ｇ）を１０１０１１Ｉリン酸バツフアー
（ｐＨ７）２００ｍｌに溶解する。０℃で１時間３０分
撹拌した後、遠心分離機にて沈澱を分離（１５００Ｇ、
１５分）した後、上清を集め硫安分画する（硫安′ａ
度３５％）。０℃で１時間撹拌した後、遠心分離にて沈
澱を集め３５％硫安溶液で洗浄する。遠心分離後、沈澱
を２０ｍ１の１８ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７）に溶
解し一晩透析する。
（ｐＨ７）２００ｍｌに溶解する。０℃で１時間３０分
撹拌した後、遠心分離機にて沈澱を分離（１５００Ｇ、
１５分）した後、上清を集め硫安分画する（硫安′ａ
度３５％）。０℃で１時間撹拌した後、遠心分離にて沈
澱を集め３５％硫安溶液で洗浄する。遠心分離後、沈澱
を２０ｍ１の１８ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７）に溶
解し一晩透析する。
この蛋白溶液にハイフロス−パーセルを１６ｇ加え撹拌
しなから０℃でアセトンを７５％（Ｗ／Ｖ）になるまで
加える。その後、粉体を濾過し減圧下３時間乾燥する。
しなから０℃でアセトンを７５％（Ｗ／Ｖ）になるまで
加える。その後、粉体を濾過し減圧下３時間乾燥する。
３−メチルグルタル酸無水物（ｔ、ｚｇｇ）をトルエン
１００ｍ１に溶解し、上記ハイフロス−パーセル吸着酵
素３ｇ及び、メタノール（０，３ｇ）を加え、３０℃で
２３時間撹拌する。反応終了後、酵素粉を濾別し、濾液
より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラムクロマトグラ
フィーで精製を行い３−メチルグルタル酸モノメチルエ
ステルを定量的に得た。次いで、このモノエステル体を
光学活性な２−ナフチルエチルアミンと縮合させ、ジア
ステレオマーとした後、２００ Ｍ １１ ｚのＮＭＲ
で光学純度を測定したところ、モノメチル体の絶対配置
はＲで光学純度は９２％ｅａであった。
１００ｍ１に溶解し、上記ハイフロス−パーセル吸着酵
素３ｇ及び、メタノール（０，３ｇ）を加え、３０℃で
２３時間撹拌する。反応終了後、酵素粉を濾別し、濾液
より溶媒を減圧留去後、シリカゲルカラムクロマトグラ
フィーで精製を行い３−メチルグルタル酸モノメチルエ
ステルを定量的に得た。次いで、このモノエステル体を
光学活性な２−ナフチルエチルアミンと縮合させ、ジア
ステレオマーとした後、２００ Ｍ １１ ｚのＮＭＲ
で光学純度を測定したところ、モノメチル体の絶対配置
はＲで光学純度は９２％ｅａであった。
実施例１０
３−メチルグルタル酸無水物（１，２８ｇ）をジイソプ
ロピルエーテル１００ｍ Ｑを溶解し、酵素粉（アマノ
Ｐ。
ロピルエーテル１００ｍ Ｑを溶解し、酵素粉（アマノ
Ｐ。
人好製ｆｆｉ）２ｇ及び、ｎ−ブチルアルコール（１，
５ｇ）を加え、２５℃で６時間撹拌する。
５ｇ）を加え、２５℃で６時間撹拌する。
反応終了後、酵素粉を濾別し、濾液より溶媒を減圧留去
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製を行い
、（−）−３−メチルグルタル酸モノブチルエステルを
定量的に得た。このモノエステルを２段階を経て、ｊＭ
光度既知のラクトン体に導いたところ、この光学純度は
９０．８％であった。
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製を行い
、（−）−３−メチルグルタル酸モノブチルエステルを
定量的に得た。このモノエステルを２段階を経て、ｊＭ
光度既知のラクトン体に導いたところ、この光学純度は
９０．８％であった。
比較例
アマノＰ（人好製薬）２００ｍｇを、リン酸ナトリウｔ
１緩衝液（２０＋ｎＭ、ｐｌ＋７）ＬｏｍＱに溶解後、
３−メチルグルタル酸ジメチルエステル（１７４Ｂ、］
、Ｏｍｍｏｌ）を加え、３７℃で６５時間振盪する。
１緩衝液（２０＋ｎＭ、ｐｌ＋７）ＬｏｍＱに溶解後、
３−メチルグルタル酸ジメチルエステル（１７４Ｂ、］
、Ｏｍｍｏｌ）を加え、３７℃で６５時間振盪する。
反応終了後、反応液を３規定塩酸で酸性とし、酢酸エチ
ル（１０ｍｌ）で３回抽出する。抽出液を、飽和重炭酸
ナトリウム水溶液（１０ｍｌ）で３回洗浄後、洗浄液を
濃塩酸で酸性とし、酢酸エチル（１０ｍｌ）で３回抽出
する。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥、濃縮し、（＋）−３−メチルグルタル酸モノ
メチルエステル８０ｍｇ（５０％収率）を得た。このモ
ノエステルの光学純度は、７４％ｅｅであった。本比較
例に示す様に、水溶液中の反応では、収率が低く、また
酵素が水に溶解している為。
ル（１０ｍｌ）で３回抽出する。抽出液を、飽和重炭酸
ナトリウム水溶液（１０ｍｌ）で３回洗浄後、洗浄液を
濃塩酸で酸性とし、酢酸エチル（１０ｍｌ）で３回抽出
する。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥、濃縮し、（＋）−３−メチルグルタル酸モノ
メチルエステル８０ｍｇ（５０％収率）を得た。このモ
ノエステルの光学純度は、７４％ｅｅであった。本比較
例に示す様に、水溶液中の反応では、収率が低く、また
酵素が水に溶解している為。
酵素の回収及び再使用が困難であるという欠点を有して
いる。
いる。
Claims (2)
- （１）一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中Ｒは、水素、ハロゲン、置換もしくは無置換の脂
肪族炭化水素基、置換もしくは無置換の芳香族炭化水素
基、又は酸素、窒素、硫黄などのヘテロ原子を含む少く
とも１種の置換基である。〕 で示されるβ−置換グルタル酸無水物をＺ−ＯＨ〔式中
、Ｚは炭素数１〜１０の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基
を表わす〕の存在下、酵素懸濁有機溶媒中で、加アルコ
ール分解する事を特徴とする、 一般式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼又は▲数式、化学式
、表等があります▼（II） 〔式中Ｒ及びＺは前記のとおりである〕 で示される光学活性β−置換グルタル酸モノエステルを
製造する方法。 - （２）酵素が加水分解酵素である特許請求の範囲第（１
）項記載の製造方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24876387A JPH0191789A (ja) | 1987-09-30 | 1987-09-30 | 光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24876387A JPH0191789A (ja) | 1987-09-30 | 1987-09-30 | 光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0191789A true JPH0191789A (ja) | 1989-04-11 |
Family
ID=17183012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24876387A Pending JPH0191789A (ja) | 1987-09-30 | 1987-09-30 | 光学活性β−置換グルタル酸モノエステルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0191789A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6758336B2 (en) | 2000-01-25 | 2004-07-06 | Norio Kohana | Storage case |
| CN115595340A (zh) * | 2022-11-28 | 2023-01-13 | 凯莱英生命科学技术（天津）有限公司（Cn） | 合成亚烷基二元酸单酯的方法 |
| WO2023126397A1 (en) | 2021-12-31 | 2023-07-06 | L'oreal | Kit for customizing a cosmetic composition |
-
1987
- 1987-09-30 JP JP24876387A patent/JPH0191789A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6758336B2 (en) | 2000-01-25 | 2004-07-06 | Norio Kohana | Storage case |
| WO2023126397A1 (en) | 2021-12-31 | 2023-07-06 | L'oreal | Kit for customizing a cosmetic composition |
| CN115595340A (zh) * | 2022-11-28 | 2023-01-13 | 凯莱英生命科学技术（天津）有限公司（Cn） | 合成亚烷基二元酸单酯的方法 |
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