JPH02132369A - 液体クロマトグラフ用試料注入方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は液体クロマトグラフに用いられ、液体クロマト
グラフのカラムへ試料を可変量注入する液体クロマトグ
ラフ用試料注入方法に関する。

［従来の技術］ 液体クロマトグラフ用試料注入方法では、固定量注入法
と可変量注入法とがある。固定量注入法はサンプルルー
プの全容量に試料液を導入しこれをカラムに注入するの
で、試料注入量は毎回正確である。しかし、分析条件検
討中には試料注入量を変えて試験する必要があるので、
容量の異なるサンプルループを取り換えなければならず
煩雑である。そこで、分析条件検討中にはサンプルルー
ブを固定して可変量注入法を用い、分析条件確定後は固
定量注入法を用いるのが好ましい。

しかし、従来の可変単注入法は試料注入量が不正確であ
るという問題点かある。

次に、第１図に示す本発明の実施例に係る液体クロマト
グラフ用試料注入装置を用いてこの従来法（特開昭６２
−５０６５９号公報）を説明する。

ボートΔ〜Ｆを備えた六方弁ｌＯは試料導入ルートと試
料導入ルートとを切り換える為のものであり、実線で示
す流路と点線で示す流路のい『れか一方が選択的に導通
される。この実線で示ず流路を導通させた状態で、計量
シリンジ２０のピストンを引いて、試料吸入管ｌ４の先
端に設けられた試料吸入針１４ｇから空気を数μｐ吸引
した後、試料吸入針１４ａを試料瓶１６内に挿入して計
量シリンジ２０のピストンをさらに引き、試料液Ｉ８を
吸引して空気２ｌ及び試料液ｌ８を第４図に示す状態に
する。図中、３６は試料導入前に流路中に存在していた
洗浄溶媒である。

一方、貯槽２４内の溶離液２６はボンブ２８により送液
され、サンプルループ２２、カラム３０、検出器３２を
この順に通って外部に排出されている。

次に、六方弁１０を切り換えて点線で示す流路を導通さ
せた後、計量シリンジ２０のピストンをさらに引いて試
料吸入針１４ａ側の試料吸入管１４内に存在する試料液
１８をサンプルループ２２内に吸引する。次に、六方弁
ｌＯを切り換えて元の状態にし、サンプルループ２２内
の試料をカラム３０内へ注入する。

次に、洗浄溶媒により試料吸入針１４ａの先端から計量
シリンジ２０までの流路を洗浄ずる。

以」二の処理は複数の試料について連続的かつ自動的に
行われ、このような試料注入装置はオートサンプラと称
されている。

［発明が解決しようとする課題］ ここで、試料液をサンプルループ２２内に吸弓する前（
実線で示す流路）では、ザンプルループ２２内の圧力は
通常１００ｋ９７ｃｍ２程度と高圧であるのに対し、試
料吸入管１４内の試料液の圧カは大気圧に等しい。した
がって、試料吸入管ｌ４内の試料液をサンプルループ２
２内へ吸引するために六方弁ｌＯを切り換えて点線で示
ず流路を導通させると、サンプルループ２２内の溶離液
が膨張して試料吸入管Ｉ４内へ流れ込み、試料液が第５
図に示す如く押し戻され、溶離液が試料液中に拡散する
。この押し戻される量は、サンプルループ２２の容量、
サンプルループ２２内の圧力及び溶離液の種類によって
異なるが、通常、サンプルルーブ２２の容量の数％、例
えばサンプルループ２２の容量が５００μｅの場合には
数μＣ〜数十μＱ程度であることを本発明者は知見した
。したがって、計量シリンジ２０で設定量吸引してもサ
ンプルループ２２内への試料液注入量が設定量以下とな
り、特に、試料導入量が数十μクの場合には大きな計量
誤差となる。

本発明の目的は、このような点に着目し、計量誤差を低
減できる液体クロマトグラフ用試料注入装置を提供する
ことにある。

［課題を解決するための手段］ この目的を達成するために、本発明に係る液体クロマト
グラフ用試料注入方法では、 （１）計量シリンジのピストンを引いて、該計量シリン
ジに接続された吸入管内に気体を介し試料液を吸引し、 （２）次ノこ、弁を切り換えることにより、液体・クロ
マトグラフの送液ポンプとカラムとの間に介在接続され
ていたサンプルループを該接続から切り離して該サンプ
ルルーブを該吸入管の中間部に介在接続させ、 （３）次に、該計量シリンジの該ピストンを押して該計
量シリンジ側の該吸入管内の試料液を設定頃だけ該サン
プルループ内に導入し、 （４）次に、該弁を元の状態に切り換えることにより、
該サンプルループを該送液ポンプと該カラムとの間に接
続させて該サンプルループ内の該試料液を該カラムに注
入させる。

［実施例］ 図面に基づいて本発明の一実施例を説明する。

（１）試料吸入流路の洗浄 試料吸入管１４を第１図右方へ移動させて試料吸入針１
４ａを洗浄ボート３８内に挿入し、六方弁１０は実線で
示ず流路を導通させ、三方弁ｌ２は点線で示す流路を導
通させる。この状態で計量シリンジ２０のピストンを引
いて貯槽３４内の洗浄溶媒３６を吸引する。次に、三方
弁１２を切り換え、計重シリンジ２０のピストンを押し
て試料吸入管１４から洗浄溶媒３６を洗浄ボート内に排
出する。これにより、計量シリンジ２ｏから試料吸入針
１４ａの先端までの流路が洗浄される。

（２）試料吸入 次に、試料吸入針１４ａを第１図に示す位置まで移動さ
せながら計量シリンジ２ｏのピストンを引いて空気を試
料吸入管１４内先端部に数μｇ吸引し、試料吸入管１４
を下降させて試料１６内に挿入し、計量シリンジ２ｏの
ピストンをさらに弓いて試料液ｌ８を設定量より数μａ
多い量だけ試料吸入管１４内に吸引する。次に、試料吸
入針Ｉ４ａを上昇させて第１図に示す状態にし、計量シ
リンジ２０をさらに引いて、第２図に示す如く、試料吸
入管Ｉ４内の試料液ｌ８の後端を六方弁１０のポートＡ
付近に位置させる。すなわち、ボートＦと計量シリンジ
２０の間の試料吸入管１４内に分析用の試料液Ｉ８を位
置させる。

この試料吸入工程と並行して、他方では、貯槽２４内の
溶離液２６がポンブ２８により送液され、サンプルルー
プ２２、カラム３０、検出器３２をこの順に通って外部
に排出されている。

（３）サンプルルーブ２２内への試料導入次に、六方弁
１０を切り換えて点線で示す流路を導通させ、計竜シリ
ンジ２０のピストンを押して試料液１８をサンプルルー
ブ２２内に導入する。

計量シリンジ２０の押出量は設定された試料注入量と同
じ（六方弁ＩＯの内部流路の断面及び長さは実際には図
示したものより小さく、この流路内の試料量は設定流量
に比し無視できる。）であり、この押し出しにより試料
液１８の空気２ｌ側端は、第３図に示す如く、六方弁１
０のポートＦ付近に位置する。

六方弁ＩＯを第２図に示す状態から第３図に示す状態に
切り換えた際には、サンプルループ２２内の圧力が切り
換え前において通常１００ｋｇ／ａｍ”程度と高いため
、切り換えによりサンプルルーブ２２内の溶離液２６が
膨張してサンプルループ２２からその両側の試料吸入管
１４内に流出する。しかし、計量シリンジ２０は閉じて
いるのに対し試料吸入針１４ａは解放端となっており、
かつ、分析用の試料液１８は計量シリンジ２０側の試料
吸入管ｌ４内に存在し、しかも、この分析用試料液１８
と洗浄液３６との間に空気２ｌが存在するので、空気２
１は一時的に圧縮されるものの元の状態に戻る。

したがって、試料液ｌ８を設定量だけサンプルルーブ２
２内に導入することができ、サンプルループ２２内の溶
離液２６が試料液ｌ８内に拡散して試料導入量に大きな
誤差が生ずるのを防止することができる。

しかも、この空気層２１により、試料吸入工程において
試料吸入管１４内で試料液１８中に洗浄液３６が拡散す
るのを防市ずることができる。この効果は」二記公開公
報における介在空気の効果と同一であるが、上記効果は
新規な効果である。

（４）カラム３０内への試料注入 次に、六方弁１０を切り換えて実線で示ず流路を導通さ
せ、サンプルループ２２内に導入された上述の試料液ｌ
８をカラム３０内へ注入させる。

以上の処理を繰り返し自動的に行う。

なお、本発明において介在される空気２１は一箇所に限
定されず、空気、分析に用いられない少量の試料液、空
気、分析用試料液をこの順に試料吸入管ｌ４内に吸引し
てもよい。また、空気の代わりに他の気体を介在させて
もよい。

［発明の効果］ 以」二説明した如く、サンプルループが送液ボンブとカ
ラムとの間に介在接続されているときにはサンプルルー
プ内の溶離液は高圧であり、一方、吸入管内は大気圧に
等しいので、弁を切り換えてサンプルループをこの吸入
管に接続するとサンプルループ内の圧力が急に低下して
溶離液が膨張しこの吸入管内に流出する。しかし、本発
明に係る試料注入法によれば、計量シリンジが閉じてい
るのに対しこの吸入管の先端は解放端となっており、か
つ、計量シリンジ側の吸入管内に分析用の試料液が存在
し、しかも、この試料液と計量シリンジ側の洗浄液との
間に気体が存在するので、この気体は一時的に圧縮され
るもののその後元の状態に戻る。したがって、試料液を
設定量だけサンプルルーブ内に導入することが可能とな
り、より正確に可変試料量をカラムに注入することがで
きるという優れた効果を奏する。

【図面の簡単な説明】

第１図乃至第３図は本発明の一実施例に係り、第１図は
液体クロマトグラフ用試料注入装置の概略構成図、 第２図は試料吸入管内への試料吸入工程の最終点を示す
図、 第３図はサンプルルーブ内への試料導入工程の最終点を
示す図である。 第４図及び第５図は従来法の問題点を説明する図である
。 図中、 １０は六方弁 １２は三方弁 １４は試料吸入管 ｌ８は試料液 ２０は計量シリンジ ２２はサンプルループ ２６は溶離液 ２８はポンプ ３０はカラム ３２は検出器 ３６は洗浄溶媒

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 計量シリンジのピストンを引いて、該計量シリンジに接
   続された吸入管内に気体を介し試料液を吸引し、 次に、弁を切り換えることにより、液体クロマトグラフ
   の送液ポンプとカラムとの間に介在接続されていたサン
   プルループを該接続から切り離して該サンプルループを
   該吸入管の中間部に介在接続させ、 次に、該計量シリンジの該ピストンを押して該計量シリ
   ンジ側の該吸入管内の試料液を設定量だけ該サンプルル
   ープ内に導入し、 次に、該弁を元の状態に切り換えることにより、該サン
   プルループを該送液ポンプと該カラムとの間に接続させ
   て該サンプルループ内の該試料液を該カラムに注入させ
   る ことを特徴とする液体クロマトグラフ用試料注入方法。