JPH021839B2

JPH021839B2 -

Info

Publication number: JPH021839B2
Application number: JP9561079A
Authority: JP
Inventors: Yoshihiko Oka; Hitoshi Ishida; Mikio Morioka; Tsutomu Santo; Taku Oosono; Hamao Umezawa
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1979-07-27
Filing date: 1979-07-27
Publication date: 1990-01-12
Also published as: JPS5620599A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は一般式〔〕（式中R₁は水酸基またはアミノ基を、R₂はメチ
ル基または水素原子を意味する。）で示される新規アミノグリコシド化合物およびそ
の製造法に関する。上記化合物〔〕はトブラマイシンの3″位のア
ミノ基がＮ―メチル化され4″がＣ―メチル化され
ないか又はされ、場合によつては2′位のアミノ基
が水酸基に変換されている点に化学構造上の特徴
を有する新規化合物である。本発明によつて提供される化合物〔〕はすぐ
れた抗菌活性を示し、抗菌剤として有望である。
化合物〔〕の抗菌活性（最少有効阻止濃度）を
トブラマイシン（以下TOBと略記する）と対比
して表示すると次の通りである。

【表】

【表】上表から明らかなように、化合物〔〕は各種
細菌に強力な抗菌活性を有し、特に原料のトプラ
マイシンやその他のゲンタミシン，シソミシン，
ジベカシンに対して耐性であるプロテウスインコ
ンスタンスＡ―２株に対して強力は抗菌活性を有
している。またカナマイシンＡおよびＢに対する
耐性菌の中、リン酸化酵素でアミノグリコシドを
不活化する大腸菌Ｋ―12 ML―1629株に強い抗
菌活性を有している。一方化合物〔〕は毒性が
低く、TOBと比較するとおよそ1/2である。化合
物〔〕はこのような性質から見て非常にすぐれ
た抗生物質であり、医薬品として極めて有用であ
る。本発明によれば化合物〔〕はTOBをミクロ
モノスポラ属に属するゲンタミシン生産菌株また
はその変変異株と接触させる事によつて製造され
る。この製造法で使用される菌株はTOBの3″位を
Ｎ―メチル化し4″位をＣ―メチル化し場合によつ
ては2′位のアミノ基を酸化的に脱アミノ化する事
により水酸基に変換しうるものであれば特に制限
ははい。そのような菌株としてはたとえばミクロ
モノスポラエキスポラNRRL・2985（IFO―
13149）、ミクロモノスポラプルプレレア
NRRL・2953（IFO―13150）など公知の菌株のほ
か、ミクロモノスポラ属の新菌株であるミクロモ
ノスポラsp.K―6993株をあげることが出来る。
このミクロモノスポラsp・Ｋ―6993株は本発明者
らが沖縄県石垣島の土壌よりあらたに分離した菌
株で、ゲンタミシンを生産することが確認されて
いる。また、変異株はミクロモノスポラ属に属するゲ
ンタミシン生産菌株を、たとえば紫外線照射、コ
バルト60照射、Ｘ線照射のほか、ニトロソ化合
物、アクリジン色素化合物、核酸塩基類似物質等
の変異誘発剤を用いる通常の人工変異手段で得ら
れるものである。好適な変異株としてはゲンタミ
シン生産能が無いか、もしくは極端に生産能が低
下して、かつさきにのべたTOBをＮ―メチル化
し、Ｃメチル化し、アミノ基を水酸基に変換しう
る性質をもつものである。それら変異株の代表例
は本発明者らがらたに取得した、ミクロモノスポ
ラsp.K―6993―Ｙ―41株およびミクロモノスポ
ラエキノススポラNRR・2985―Ｎ―６株をあ
げることが出来る。つぎにミクロモノスポラsp.K―6993とその変
異株であるミクロモノスポラsp.K―6993―Ｙ―
41株およびミクロモノスポラエキノスポラ
NRRL.2985―Ｎ―６株の株についてその菌学的
性状を記載する。なお、これらの菌株は、夫々微工研寄託受理番
号4304号、同4305号および同4303中そしていずれ
も工業技術院微生物工業技術研究所に寄託されて
いる。又これらの菌株はアメリカンタイプカルチ
ユアコレクシヨンに夫々ATCC第31348号、第
31349号および第31350号として寄託されている。形態的性質上記３株の形態的特徴は比較的似ている。３
株共、真性気中菌糸は作らないが、直径05〜
1.0μで分枝した基生菌糸を形成する。胞子は基生菌糸から分枝した胞子柄の先端に
１ケのみ着生する。胞子の形は長円型か卵型で
ある。３株共、ツアペツク寒天、酵母エキス・麦芽
エキス寒天培地でよく発育し、卵アルブミン寒
天上では紫系の色を示す。Ｋ―6993及びＮ―６
株はミクロモノススポラエキノスポラ
NRRL・2985（IFO―13149）と同様の形態的特
徴を示した。Ｙ―41株は前記２株とくらべ、胞子の着生が
よくなく、発育の色調は全体的にやや薄い。各種培地上での生育状態

【表】

【表】炭素源の資化性プリドハム・ゴツトリーブ（Pridham―
Gottlieb）の培地を基礎培地として、各々の炭
素源を1.0％加えたもので、資化性を検し、そ
の結果を第２表に示す。

【表】生理学的性質

【表】

【表】第３表中ミルク、繊維素については、37℃で
１ケ月培養したのちの結果を示し、ゼラチンの
液化、硝酸還元、チロシナーゼの生成について
は29℃、２週間後の結果を示した。Ｋ―6993株は真性気中菌系を形成せず、基性
菌糸に単一の胞子を着生することから、ミクロ
モノスポラ属に属する菌株である。すでに報告されている、ミクロモノスポラ属
でゲンタミシンを生産する菌株としてはつぎの
ものがある。ミクロモノスポラプルプレア
NRRL・2953（Micromonospora purpurea）、
ミクロモノスポラエキノスポラバリエタス
エキノスポラNRRL・2985
（Micromonospora echinospora var.
echinospora）、ミクロモノスポラエキノスポ
ラバリエタスフエルギニアNRRL・2995
（Micromonospora echinospora var.ferru―
ginea）、ミクロモノスポラエキノスポラバ
リエスタパリダNRRL・2996
（Micromonospora echinosppora var.
pallida）〔以上、アンチミクロビアル・エージ
エント・アンド・ケモテラピー1963年116頁〜
124頁（Antimicrobial Agents and
chemotheraphy）及び特公昭44―21934に記
載〕ミクモノスポラサガミエンシスMK―65
（Micromonospora sagamiensis）、ミクロモ
ノスポラサガミエンシスバリエタスノン
レデユカンスMK―62（Micrmonospora
sagamiensis var.noreducans）、ミクロモノス
ポラ・サガミエンシスバリエタスフラバ
Mm―628（Micr―omonospora sagamiensin
var.fLlava）〔以上、特公昭50―39155及び特公
昭51―6755に記載〕これら７株についての分類
学上の特徴をＫ―6993株と比較して、その相異
点を第４表に掲記する。この結果ミクロモノスポラエキノスポラに
近い新菌株と考えられる。

【表】

【表】つぎに、TOBを化合物〔〕に変換するには、
TOBを含む培地中で、通常上記の菌株を培養す
ればよい。本発明の培養においては通常の抗生物
質生産のための培養法が用いられる。培養のための栄養源としていろいろなものが用
いられる。炭素源としては、ブドウ糖、殿粉、可
溶性殿粉、デキストリン、シヨ糖、糖密などが単
独或いは組合せて用いられるし、菌の資化性にも
よるが炭化水素、アルコール類、有機酸、動植物
油なども用いうる。窒素源としては無機塩、例え
ば塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、尿素、
硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム等が、天然物
窒素源としては、大豆粉、脱脂大豆粉、綿実粕、
グルテンミール、コーンミール、ペプトン、肉エ
キス、酵母エキス、乾燥酵母、コーンスチープリ
カー等が単独或いは組合せて用いられる。その他
に必要に応じて、アミノ酸類、核酸類、ビタミン
類、塩化ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸
塩、硫酸マグネシウム、塩化コバルトなどの無機
塩類も加えることができる。培養方法としては、
液体培養法とくに深部撹拌方式による方法が適し
ている。培養温度は25℃から45℃、好ましくは、
28℃から32℃で、PHは中性附近がよい。又、培養
組成、培地の液性、添加物の量、温度、撹拌数、
通気量などの培養条件は用いる菌株などに応じて
適宜選択されれなければらないことはいうまでも
ない。化合物〔〕を得るため、原料のTOBの
添加時期は培養開始時でもよいし、また、培養開
始後菌が発育した後でもよいが培養開始後72時間
頃までに行うのが望ましい添加量は0.1g〜10g／程度で一度に加えても
よいが分割して加えてもよい。また、TOBはそ
のままの形でもよいが、塩たとえば硫酸塩でもよ
い。TObBとの接触時間は原料添加後、化合物
〔〕が最も多く蓄積される時間が選択されるが、
通常原料添加後３〜７日である。化合物〔〕の
採取法は、その培養液からの単離、精製も含め
て、通常アミノグリコシド抗生物質の採取に利用
される方法が用いられる。すなわち、カチオンお
よびニオンン交換樹脂による吸脱着法、活性炭に
よる吸脱着法、セルロースのカラムクロマトグラ
フイーによる吸脱着法、シリカゲルカラムクロマ
トグフイーなどの方法を適当に組合せて用いるこ
とが出来る。具体的には、たとえば培養液のPHを
２ないし３に調整したのち、過して菌体を除
き、PHを６〜７に中和し、この構造を有する物質
の吸着、溶離に適切なカルボン酸、スルホン酸等
の基を有する樹脂たとえばカチオン交換樹脂であ
るアンバーライトIRC―50（商品名）（NH₄ ⁺）、ダ
ウエツクス50W（商品名）（NH₄D⁺）に吸着させ、
１規定のアンモニア水で溶出する。この溶出液を
減圧濃縮して、アンバーライトCG―50（商品名）
（NH₄ ⁺）でアンモニア水を用いた濃度勾配によ
るイオン交換クロロマトグラフイーを行う。これ
ら化合物〔〕をさらに分離精製するには、たと
えば、シリカゲルカラムクロマトグラフイーを用
い、また必要があればアンバーライトccCGG―
50（NH₄ ⁺）及びダウツクス１×２（商品名）
（OH^-）等によるカラムクロマトグラフイーをく
り返して行う事も出来る。上記の方法で得られた
化合物〔〕の代表的なものをあげると次の通り
である。 3′―デオキシ―4″―Ｃ―メチル―3″―Ｎ―メチ
ルカナマイシンＡあるいはその4″のエピマー〔
―T_1a〕 3′―デオキシ―4″―Ｃ―メチル―3″―Ｎ―メチ
ルカナマイシンあるいはその4″のエピマー〔―
T_1b〕 3′―デオキシ―3″―Ｎ―メチルカナマイシンＢ
〔―T₂〕塩基性である本発明の化合物〔〕は無機酸又
は有機酸たとええば塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、
ステアリン酸、プロピオン酸、酒石酸、マレイン
酸等と無毒の塩を容易に形成する。つぎに実施例により本発明の製造法をさらに説
明する。実施例１Ｋ―6993―Ｙ―41株による目的化合物〔―
T_1a〕の製造デキストリン５％、脱脂大豆粉3.5％、炭酸カ
ルシウム0.0％を含む液体培地（PH7.5）100mlを
500mlのフラスコに分注し、予じめ減菌しておく、
そのフラスコにベネツト斜面寒天培地に30℃で２
週間培養して充分生育させたミクロモノスポラ
sp・Ｋ―6993―Ｙ―41株を一白金耳接種し29℃で
48〜72時間振盪して種母培養液を得た。別に500mlフラスコに100mlの本培養地を調整
し、それに上記種母培養液１mlを植菌する。本培
養培地の組成はデキストリン５％、脱脂大豆粉
（エスサンミート特級（商品名））3.5％、炭酸カ
ルシウム0.7％、塩化コバルト0.000025％（PH7.5）
であり、オートクレーブで120℃20分間減菌して
使用する。植菌後24時間目に別に除菌しておいた
トプラマイシンを培地１ml当り300^mcg（力価）添
加した。添加後120時間29℃で振盪培養を行つて
24の培養液を得た。この培養液を４規定の塩酸
でPH2.0に調整したのち、菌体を別した。その
液を４規定の水酸化ナトリウムでPH7.0に再び
調整してアンバーライトIRC―50（NH⁺）500ml
を充填したカラムを通過させ目的化合物〔―
T_1a〕を吸着させた。樹脂を充分に水洗して１規
定のアンモニア水1.5で溶出し、溶出液を減圧
濃縮後乾燥して粗溶出物を得た。この粗溶出物を
アンバーライトCG―50（NH₄ ⁺）900mlを充填し
たカラムに吸着させ、樹脂を充分に水洗したの
ち、水４と0.7規定アンモニア水４とを用い
た濃度勾配溶出操作を行い、各フラクシヨン（各
15ml）をシリカゲル薄層クロマトグラフイー（メ
ルク社製キーゼルゲルKieselgel 60F₂₅₄（商品
名）厚さ0.25mm、展開溶媒（第５表のＡ）で２時
間展開、ニンヒドリン発色Rf値0.21）により検出
する。目的化合物〔Ｉ―T_1a〕は原料のトブラマ
イシン、〔Ｉ―T_1b〕および〔Ｉ―T₂〕に先行し
て溶出されてくる。この溶出液を濃縮し真空乾燥
して283mgの〔Ｉ―T_1a〕の粗粉末を得た。この
粗粉末アンバーライトCG―50（N₄D⁺）１cm×100
cmのカラムに吸着させ水１と0.5規定アンモニ
ア水１とで濃度勾配溶出操作を行い各フラクシ
ヨン（各5.5ml）を上記シリカゲル薄層クロマト
グラフイーで検出して〔―T_1a〕を含む区分を
集め濃縮乾固して10mgの淡黄色〔―T_1a〕粗粉
末を得た。この粗粉末をシリカゲルカラム（ワコ
ーゲルＣ―200（商品名）１cm×100cm）に付し展
開溶媒（第５表のＡ）で溶出分画し、各フラクシ
ヨン（各５ml）を上記と同様にシリカゲル薄層ク
ロマトグラフイーで検出して〔Ｉ―T_1a〕区分を
集め減圧濃縮乾固して〔Ｉ―T_1a〕の白色粗粉末
を73mg得た。これを再びアンバーライトCG―50
（NH₄ ⁺）0.6cm×17cmカラムに吸着させ、水200ml
と１規定アンモニア水とで濃度勾配溶出操作を行
い、各フラクシヨン（各５ml）を上記シリカゲル
薄層クロマトグラフイーで検出して〔II―T_1a〕
区分を集めて減圧濃縮した後、凍結乾燥して57mg
の〔Ｉ―T_1a〕白色粉末を得た。この白色粉末の
39mgをダウエツクス１×２（OH）0.6cm×20cmの
カラムにチヤージし水で溶出して、溶出されてき
た〔Ｉ―T_1a〕区分を上記シリカゲル薄層クロマ
トグラフイーで検出して集め減圧濃縮した後、凍
結乾燥して31mgの純粋な目的化合物〔Ｉ―T_1a〕
の白色粉末を得た。この〔Ｉ―T_1a〕遊離塩基（凍結乾燥品）はつ
ぎの理化学的性質を示す。塩基性の白色粉末（80℃、18時間真空乾燥）溶解性：水に極めて良く溶け、メタノール、
エタノールにも溶ける。アセトンには溶けにく
く、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、酢
酸ブチル、エーテル、ｎ―ヘキサンなどの有機
溶剤には不溶である。元素分析値(C₀H₄₀N₄O₁₀・H₂Oとして) ＣＨＮ理論値(%) 46.68 8.23 10.89 実験値(%) 46.68 8.01 10.66 融点： 154〜156℃ 旋光度：〔α〕²⁵ _D＋152.8゜（Ｃ＝0.5％、inH₂O）紫外線吸収スペクトル：末端吸収赤外線吸収スペクトル（Ｋ Br）：第１図吸
収極大（cm^-1） 820，850，1030，1090，1150，1250，1330，
1360，1450，1475，1595，2910，3340 NMRスペクトル（重水中）：第２図特徴的
ピーク 1.30ppm……３級4″―Ｃ―メチル（3H、シ
ングレツト） 2.55ppm……3″―Ｎ―メチル（3H、シング
レツト） 5.13ppm……1″―アノメリツクプロトン
（1H、ダブレツト、Ｊ＝4.1Hz） 5.30ppm……1′―アノメリツクプロトン
（1H、ダブレツト、Ｊ＝3.7Hz）マススペクトル：主なイオンピーク（ｍ／
ｅ）100，109，110，127，128，145，146，
148，162，163，190，191，192，205，208，
246，275，308，319，334，336，352，362，
380，497（Ｍ＋１）薄層クロマトグラフイーによるRf値：第５
表（末尾）以上の理化学的性質、特にマススペクトルに
おける典型的フラグメントイオンピーク（例え
ばｍ／e146，190，191，336，380及び夫々の分
解イオンピーク群、更にｍ／e497（Ｍ＋１））お
よびNMRの結果に加えてカナマイシンの6′位
のアミノ基をアセチル化する不活化酸素を持つ
シユードモナスエネルギノーサGN―315株に
よつて不活化されることから6′位にアミノ基の
存在を示している点に基いて、この実施例で得
られた化合物は次式で示される3′―デオキシ―
4″―Ｃ―メチル―3″―Ｎ―メチルカナマイシン
Ａあるいはその4″のエピマーであると認められ
る。実施例２Ｋ―6993―Ｙ―41株による目的化合物〔Ｉ―
T₂〕の製造実施例１に示した第一回目のアンバーライト
CG―50（NH₄ ⁺）900mlを充填したカラムを用い
たアンモニア水の濃度勾配分画溶出において〔Ｉ
―T_1a〕や原料のトブラマイシン等に続いて溶出
されてきた目的化合物〔Ｉ―T₂〕を含む溶出区
分を濃縮して661mgの〔Ｉ―T₂〕の粗区分を得
た。この粗区分をアンバーライトCG―50
（NH₄ ⁺）２cm×50cmカラムに吸着させ樹脂を水
洗した後、水１と0.8規定アンモニア水１と
で濃度勾配溶出操作を行い、各フラクシヨン（各
6.5ml）を実施例１と同様のシリカゲル薄層クロ
マトグラフイー（Rf値0.09）で検出して〔Ｉ―
T₂〕区分を集めて濃縮乾固して345mgの〔Ｉ―
T₂〕の淡黄色粗粉末を得た。この粗粉末をシリ
カゲルカラム（ワコーゲルＣ―200、１cm×100
cm）に付し、展開溶媒（第５表のＡ）で溶出分画
し、各フラクシヨン（各５ml）を上記シリカゲル
薄層クロマトグラフイーで検出して〔Ｉ―T₂〕
区分を集め減圧濃縮乾固して〔Ｉ―T₂〕の白色
粗粉末を293mg得た。この粗粉末をアンバーライ
トCG―50（NH₄ ⁺）１cm×50のカラムに吸着させ
水１と0.8規定アンモニア水とで濃度勾配溶出
操作を行い、各フラクシヨン（各10ml）を上記シ
リカゲル薄層クロマトグラフイーで検出し〔Ｉ―
T₂〕区分を集め減圧濃縮乾固して〔Ｉ―T₂〕の
白色粉末を266mg得た。この白色粉末をダウエツ
クス１×２（OH^-）0.6cm×17cmのカラムにチヤー
ジし、水で溶出して、溶出されて来た〔Ｉ―T₂〕
区分を上記シシリカゲル薄層クロマトグラフイー
で検出して集め減圧濃縮した後、凍結乾燥して純
粋な〔Ｉ―T₂〕の白色粉末を240mg得た。この
〔Ｉ―T₂〕遊離塩基の20mgを0.2mlのメタノールに
溶解し、0.2規定の硫酸のメタノール溶液を徐々
に加え、PH3.0に調整すると白色の沈殿を生じる。
これを取しアセトンで良く洗浄した後、真空乾
燥して36mgの〔Ｉ―T₂〕硫酸塩（融点：224〜
227℃、分解）の白色粉末を得た。この〔Ｉ―T₂〕遊離塩基（凍結乾燥品）はつ
ぎの理化学的性質を示す。塩基性の白色粉末（80℃、18時間真空乾燥）溶解性：水に極めて良くとけメタノールにも
溶ける。エタノールにはやや溶けにくく、アセ
トン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、
酢酸ブチル、エーテル、ｎ―ヘキサンなどの有
機溶剤には不溶である。元素分析値（C₁₉H₃₉N₅O₉・H₂Oとして）ＣＨＮ理論値(%) 45.68 8.27 14.02 実験値(%) 45.46 8.45 13.59 融点：160〜162℃ 旋光度：〔α〕²⁵ _D＋135.3゜（Ｃ＝１％、inH₂O）紫外線吸収スペクトル：末端吸収赤外線吸収スペクトル（KBr）：第３図吸収
極大（cm^-1） 1030，1070，1150，1235，1265，1355，1460，，
1470，1595，1640，2910，3340 NMRスペクトル（重水中）：第４図特徴的
ピーク 2.5ppm……3″―Ｎ―メチル（3H、シングレ
ツト） 5.07ppm……1″―アノメリツクプロトン
（1H、ダブレツト、Ｊ＝3.6Hz） 5.25ppm……1′―アノメリツクプトン（1H、
ダブレツト、Ｊ＝3.1Hz）マススペクトル：主なイオンピーク（ｍ／
ｅ）98，134，145，163，176，191，205，246，
274，302，320，338，348，366，482（Ｍ＋１）薄層クロマトグラフイーによるRf値：第５
表（末尾）以上の理化学的性質、特にマススペクトルにお
ける典型的なフラグメントイオンピーク（例えば
ｍ／e145，191，366及び夫々の分解イオンピーク
群、更にｍ／e482（Ｍ＋１））およびNMRの結果
ならびにトプラマイシン（3′―デオキシカナマイ
シンＢ）より誘導されることに基いて、本実施例
で得られた化合物は次式で示される3′―デオキシ
―3″―Ｎ―メチルカナマイシンＢであると認めら
れる。実施例３Ｋ―6993―Ｙ―41株による目的化合物〔Ｉ―
T_1b〕の製造実施例１に示した第一回目のアンバーライト
CG―50〔N₄D⁺〕900mlを充填したカラムを用いた
アンモニア水の濃度勾配分画溶出において、〔Ｉ
―T_1a〕に続いてトブラマイシンと共に溶出され
てきた目的化合物〔Ｉ―T_1b〕を含む溶出区分を
減圧濃縮乾固して、2.76gを〔Ｉ―T_1b〕の粗区分
を得た。この粗区分をシリカゲルカラム（ワコーゲルＣ
―200、１cm×100cm）に付し、展開溶媒（第５表
のＡ）で溶出分画し、実施例１と同様にシリカゲ
ル薄層クロマトグラフイーで〔Ｉ―T_1b〕区分を
検出して集め、濃縮乾固して〔Ｉ―T_1b〕の粗粉
末を417mgに得た。この粗粉末にはまだトブラマ
イシンが含まれてるので、再び上記と全く同じ条
件でシリカゲルクロマトグラフイーを行つて、
155mgの〔Ｉ―T_1b〕粗粉末を得た。この粗粉末
をアンバーライトCG―50〔NH₄ ⁺〕１cm××50cm
のカラムに吸着させ、水１と１規定アンモニア
水１とで濃度勾配溶出操作を行い、各フラクシ
ヨン（各10ml）を上記と同様に実施例１で用いた
シリカゲル薄層クロマトグラフイーで〔Ｉ―
T_1b〕を含む区分を検出して集め、減圧濃縮乾固
して119mgの〔Ｉ―T_1b〕の白色粉末を得た。この白色粉末をダウエツクス１×２〔OH^-〕0.6
cm×18cmカラムにチヤージし、水で溶出して、溶
出されてきた〔Ｉ―T_1b〕区分を上記と同様にシ
リカゲル薄層クロマトグラフイーで検出して集
め、減圧濃縮した後凍結乾燥して純粋な〔Ｉ―
T_1b〕の白色粉末を109mg得た。この〔Ｉ―T_1b〕遊離塩基（凍結乾燥品）はつ
ぎの理化学的性質を示す。塩基性の白色粉末（80℃18時間真空乾燥）溶解性；水に極めて良く溶け、メタノールに
も溶ける。エタノールには溶けにくく、アセトン、クロ
ロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、酢酸ブチ
ル、エーテル、ｎ―ヘキサンなどの有機溶剤に
は不溶である。元素分析値（C₂₀H₄₁N₅O₉・2H₂Oとして）ＣＨＮ理論値(%) 45.19 8.53 13.17 実験値(%) 45.27 8.45 12.60 融点：162〜165℃ 旋光度：〔α〕²⁵ _D＋102゜（0.1％H₂O中）紫外線吸収スペクトル：末端吸収赤外線吸収スペクトル（KBr）：第５図吸収
極大（cm^-1）1020，1050，1260，1335，1470，
1585，2925，3350 NMRスペクトル（重水中）：第６図特徴的
ピーク 1.31ppm……4″―Ｃ―メチル（2H、シング
レツト） 2.60ppm……3″―Ｎ―メチル（3H、シング
レツト） 5.13ppm……1″―アノメリツクプロトン
（1H、ダブレツト） 5.25ppm……1′―アノメリツクプロトン
（1H、ダブレツト）マススペクトル：主なイオンピーク（ｍ／
ｅ）130，145，163，190，191，496（M⁺¹）薄層クロマトグラフイーによるRf値：（第５
表）以上の理化学的性質、特にマススペクトルにお
ける典型的なフラグメントイオンピーク（例えば
ｍ／e145，190，191の分解イオンピーク群、更に
ｍ／e496（M⁺¹〕、核磁気共鳴スペクトル、赤外吸
収スペクトルの結果ならびにトブラマイシンから
誘導されることに基いて、次式で示される3″―Ｎ
―メチル―4″―Ｃ―メチル―3′―デオキシカナマ
イシンＢあるいはその4″のエピマーであると決定
される。なお、上記実施例で得られた目的化合物〔Ｉ―
T_1a〕、〔Ｉ―T₂〕の薄層クロマトグラフイーによ
るRf値を既知のアミノグリコシド抗生物質と対
比して示す。

【表】

【表】【図面の簡単な説明】

(1)第１図および第２図は、夫々本発明化合物
〔Ｉ―T_1a〕の赤外線吸収スペクトルおよび
NMRスペクトルを示す。 (2) 第３図および第４図は、夫々本発明化合物
〔Ｉ―T₂〕の赤外線吸収スペクトルおよび
NMRスペクトルを示す。 (3) 第５図および第６図は、夫々本発明化合物
〔Ｉ―T_1b〕の赤外線吸収スペクトルおよび
NMRスペクトルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中R₁は水酸基またはアミノ基を、R₂はメチ
ル基または水素原子を意味する。）で示されるアミノグリコシド化合物またはその酸
付加塩。２式で示される特許請求の範囲第１項記載のアミノグ
リコシド化合物またはその酸付加塩。３式で示される特許請求の範囲第１項記載のアミノグ
リコシド化合物またはその酸付加塩。４トブラマイシンをミクロモノスポラ属に属す
るゲンタミシン生産菌株またはその変異株と接触
させることを特徴とする一般式（式中R₁は水酸基またはアミノ基を、R₂はメチ
ル基または水素原子を意味する。）で示される新規アミノグリコシド化合物またはそ
の酸付加塩の製造法。５ミクロモノスポラ属に属するゲンタミシン生
産菌株またはその変異株がミクロモノスポラsp.
K―6993株、ミクロモノスポラsp.K―6993―Ｙ―
41株、またはミクロモノスポラエキノスポラ
NRRL・2985―Ｎ―６株である特許請求の範囲
第４項記載の製造法。