JPH02225539A - 多孔質キトサン成形物の製造法 - Google Patents
多孔質キトサン成形物の製造法Info
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- JPH02225539A JPH02225539A JP4578189A JP4578189A JPH02225539A JP H02225539 A JPH02225539 A JP H02225539A JP 4578189 A JP4578189 A JP 4578189A JP 4578189 A JP4578189 A JP 4578189A JP H02225539 A JPH02225539 A JP H02225539A
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- porous chitosan
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
に産業上の利用分野Ｘ
本発明は蛋白の様な巨大分子はもとより、微生物の様な
微粒子の吸着、拡散に優れた機能を有する多孔質キトサ
ン成形物の製造法に関し、本発明で得られた多孔質キト
サン成形物は、微生物固定化用担体、クロマトグラフィ
ー用充填剤、生理活性物質固定化用担体、！金属吸着用
担体等広範な用途に優れた性能を有するものである。
微粒子の吸着、拡散に優れた機能を有する多孔質キトサ
ン成形物の製造法に関し、本発明で得られた多孔質キト
サン成形物は、微生物固定化用担体、クロマトグラフィ
ー用充填剤、生理活性物質固定化用担体、！金属吸着用
担体等広範な用途に優れた性能を有するものである。
【従来の技術１
従来より多孔質キトサン成形物の製造法としては、特公
昭５９−３０７２２号、特開昭８１−４０３３７号等に
開示されたものがあるが、これらはキトサンの酸性水溶
液を塩基性水溶液中で凝固再生析出して得るものである
。 Ｋ発明が解決しようとする課題】 微生物固定化用担体として効率よく微生物を吸着固定さ
せるためには、担体の表面からその内層部につながる様
に微生物より大きい直径の気孔を多数有することが重要
である。上述した従来より開示されている方法による多
孔質キトサン成形物は、キトサン酸性水溶液の固形分濃
度、ＩＩ固温浴組成ＩＩ孔調節剤量等の条件を、細孔径
を大きくする様に調整して製造を行うことにより成形物
の内部には大きな直径の気孔を有するものを得ることが
できる。しかしながら、この成形物の表面及びその近傍
では凝固浴中でキトサン成形物を凝固再生析出させるた
めに、気孔径が小さな多孔状の表面となってしまってい
て、微生物の如きものを固定化しようとしても成形物の
内部にある大きな直径の気孔に入り込める構造ではない
欠点があった。 本発明は成形物表面とその近傍でも内部の大きな多孔気
孔径と路間−の気孔径を有するよう改善することを目的
とするものである。
昭５９−３０７２２号、特開昭８１−４０３３７号等に
開示されたものがあるが、これらはキトサンの酸性水溶
液を塩基性水溶液中で凝固再生析出して得るものである
。 Ｋ発明が解決しようとする課題】 微生物固定化用担体として効率よく微生物を吸着固定さ
せるためには、担体の表面からその内層部につながる様
に微生物より大きい直径の気孔を多数有することが重要
である。上述した従来より開示されている方法による多
孔質キトサン成形物は、キトサン酸性水溶液の固形分濃
度、ＩＩ固温浴組成ＩＩ孔調節剤量等の条件を、細孔径
を大きくする様に調整して製造を行うことにより成形物
の内部には大きな直径の気孔を有するものを得ることが
できる。しかしながら、この成形物の表面及びその近傍
では凝固浴中でキトサン成形物を凝固再生析出させるた
めに、気孔径が小さな多孔状の表面となってしまってい
て、微生物の如きものを固定化しようとしても成形物の
内部にある大きな直径の気孔に入り込める構造ではない
欠点があった。 本発明は成形物表面とその近傍でも内部の大きな多孔気
孔径と路間−の気孔径を有するよう改善することを目的
とするものである。
本発明は低分子量キトサンの酸性水溶液を塩基性水溶液
中で凝固析出させ多孔質キトサン成形物を得、次いで該
多孔質キトサン成形物を酸溶液で処理することを特徴と
する多孔質キトサン成形物の製造法である。 本発明においては、キトサンとして平均分子量が１０，
０００〜２３０，０００の低分子量キトサンが用いられ
、該低分子量キトサンを酢酸、ジクロル酢酸。 蟻酸の単独又は混合物水溶液に溶解させキトサン酸性水
溶液とする。キトサン酸性水溶液中のキトサンの濃度は
２〜２０％（重量）の範囲で自由に選択することができ
る。この際、キトサン酸性水溶液中に細孔調節剤として
水溶性高分子物質であるポリビニルアルコール、ポリエ
チレングリコール等を単独又は組合せて添加してもかま
わない。該キトサン酸性水溶液からキトサンを再生して
多孔質キトサン成形物を得るためには、例えば孔径０．
１〜０．２５ ｔｍφのノズルより圧力下で塩基性水溶
液中に該キトサン酸性水溶液を一定量づつ落下させるこ
とにより多孔質キトサン粒状体が得られる。又、キトサ
ン酸性水溶液を定量ポンプでスリットから塩基性水溶液
中に押出し再生させるとキトサンフィルムのキトサン成
形物が、孔径０．１〜０゜２５順φのノズルより塩基性
水溶液中に定量的に紡出すれば、繊維状のキトサン成形
物が得られる。塩基性凝固浴中に加える塩基性物質とし
ては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリ
ウム、炭酸カリウム、アンモニア、エチレンジアミン等
のアルカリ性物質が用いられ、塩基性溶液とするには、
水、又はメタノール、エタノール等の極性を有するアル
コール類又は水とアルコール類の混合物に上述の塩基性
物質を加えて使用する。 得られた水を含む多孔質キトサン成形物はメタノール、
エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類
やアクリロニトリル等の極性溶媒を用いて水を適宜置換
する。次いで酸水溶液で表面処理をするが、この際用い
られる酸としては酢酸。 蟻酸、ブＯピオン酸等の有機酸、又は塩酸、硝酸等の鉱
酸が挙げられ、多孔質キトサン成形物は酸水溶液で短時
間処理し、次いで酸を水洗する。この時成形物に水が含
まれていれば酸の水溶液を、極性溶媒が含まれている場
合は該極性溶媒と酸の混合物を用いることが好ましい。 酸の濃度としては０．５〜５．０％（重量）のものが使
用され、酸処理は２５℃で１０秒〜５分間行なう。しか
しながら、処理条件はキトサン酸性水溶液の濃度、塩基
性凝固浴濃度、処理に用いる酸の種類と濃度によって成
形物内部の大きな気孔を表面に具備させるように自由に
選択できることは勿論である。酸処理後の水洗は成形物
中の酸が充分洗い落される迄流水中で行なう。上述の酸
処理により得られた多孔質キトサン粒状体は、表ｍｌ及
びその近傍にある、内部より、より直径の小さい細孔径
気孔部分が除去されるので、表面から内部に向って大き
な直径の気孔を有するものとなる。更に、微生物の培養
条件は殆どが中性から酸性の領域で行なわれるために、
微生物固定化用担体として使用する場合は、酸性条件で
不溶であることが必要であり、このため本発明により処
理を行なった多孔質キトサン成形物を、更に架橋試薬に
より化学修飾することが有効である。架橋剤としては特
に限定されないが特公昭６３−５４２８６号、特開昭６
３−２０５１４４号、特開昭６３−２８４５３号で開示
した方法により酸不溶化にすることが可能である。 に実 施 例】 以下、本発明を実施例により詳述するが、本発明は実施
例記載の範囲に限定されるものではない。 尚、多孔質キトサン成形物の表面最大細孔径は凍結乾燥
処理の後、走査型電子顕微鏡により測定した。 実施例１゜ 脱アセチル化度７８％、平均分子［５２，Ｃｏｏのキト
サン６０ｇを総量が１，０００−になる様に３％酢酸水
溶液に溶解した。同様にキトサン６０９にポリエチレン
グリコール（分子＠ ２０．０００．和光補薬工業■製
）５０ｇと１００ ｇをそれぞれ加えて総量が１，００
０−となる様に３％酢酸水溶液に溶解した。これらの溶
液を６％苛性ソーダ、 ３０％エタノール、６４％水か
らなる混合溶液中に孔径０．２５ Ｍφノズルから一定
量づつ落下させて凝固再生させた後、中性になる迄充分
水洗して夫々平均粒径約１．２顛φの多孔質キトサン粒
状体１λ（湿ｉｔ！ｌ）を得た。これらから夫々 １０
０蛇を採取して比較例試料とした。 夫々９００ｄの得られた多孔質キトサン粒状体の付槓水
を除去後、０．５％酢酸水溶液１１中に２５℃で３０秒
間浸漬処理した後、直ちに中性になる迄水洗を行なった
。水洗後の多孔質キトサン粒状体の容積は夫々８５５ｉ
であった。該多孔質キトサン粒状体を固体と液体が共存
する窒素中で急冷し一５０℃。 １０−７トールの真空度で凍結乾燥した（処理品という
）。この際比較例として０．５％酢酸水溶液で処Ｊψし
ない多孔性キトサン粒状体（未処理品という）も同様に
夫々凍結乾燥した。 ポリエチレングリコールを加えない場合のキトサン多孔
質粒状体未処理品と、酢酸水溶液で処理したキトサン多
孔質粒状体について、走査型電子顕微鏡を用いて表面形
状の写真を撮影し、第１図Ａ及び第１図８にそれぞれ示
した。倍率は５．０００倍である。また、ポリエチレン
グリコール１００ｇを加えたキトサン酸性水溶液から得
たキトサン多孔質粒状体の未処理品と処理品についての
顕微鏡写真を第２図Ａ及び第２図Ｂにそれぞれ示す。倍
率は第２図Ａはｓ、ｏｏｏ倍、第２図Ｂは２．０００倍
である。 又、上記の全部の試料について走査型電子顕微鏡を用い
て表面最大細孔径を測定し、その結果を第１表に示した
。第１表及び第１．２図から明らかな如く、酸処理をす
ることにより多孔質キトサン粒状体の表面細孔径が大き
くなることが明らかである。 実施例２゜ 脱アセチル化１’９７８％、平均分子ｉｉ ５２ 、０
００のキトサン１２（１ｇ、ポリエチレングリコール（
分子量２０．０００＞ ２００９をａｌが２，０００
ｄとなる様に３％酢酸水溶液−に溶解させた。該酸性水
溶液を６％苛性ソーダ、３０％エタノール、６４％の水
よりなる混合溶液中に孔径０．２５ Ｂφのノズルから
一定量づつ落下させ凝固再生させた後、中性になる迄充
分水洗して、平均粒径的１．２闇φの多孔質キトサン粒
状体２文（湿潤）を得た。 次いで酢ｌｌ！濃度を０．０５ 、 ０，５． １．０
． ５．０％とした酢酸水溶液を夫々４００ａｅ調製し
、更にこれを１００−づつに分け、夫々に多孔質キトサ
ン粒状体を１００−づつ投入し、浸漬時間を１０．３０
．６０゜３００秒間として９８理した。夫々、酢酸水溶
液で処理後直ちに中性になる迄充分水洗（）多孔質キト
サン粒状体の容積を測定した。又、実施例１＠様に凍結
乾燥後走査型電子顕微鏡で表面最大細孔径を測定し、そ
の結果を第２表に示した。この結果から、酸濃度と処理
時間を自由に選択組合せることによって、所望の表面最
大細孔径を得られることが明らかである。 第 ２ 表 実施例３゜ 脱アセチル化度７８％、平均分子量４８，０００のキト
サンを用い、キトサン５０ｇに対し２．５％酢酸水溶液
８５０９．キトサン６０ｇに対し３．０％酢酸水溶液８
４０ｇ、及びキトサン７０ｇに対し３６５％酢酸水溶液
８３０ｇを加え、夫々にポリエチレングリコール（分子
量２０，０００＞を１００９添加し充分溶解したキトサ
ン酸性水溶液を得た。夫々のキトサン酸性水溶液を２０
％のエタノールを含む３％、６％及び９％の苛性ソーダ
水溶液中に孔径０，２５ ｍφノズルから一定量づつ滴
下させて凝固再生させた後中性になる迄充分水洗して平
均粒径約１．２Ｍφの多孔質キトサン粒状体を得た。更
にこれらを０．５％酢酸水溶液中に２５℃で３０秒間浸
漬後充分水洗し実施例１と同様に凍結乾燥し、走査型電
子顕微鏡により表面の最大細孔径を測定し、結果を第３
表に示した。 この結果からキトサン酸性水溶液中のキトサン′ａ度と
凝固液の苛性ソーダ濃度の組合わせを選択して再成形後
酢酸水溶液で処理することにより、多孔質キトサン粒状
体の表面に大きな気孔をＲ現させることが出来ることが
明らかである。 第 ３ 表 （単位二μ） 応用例１゜ キトサンｍａ ｅ％、凝固液中の苛性ソーダ濃度６％の
条件で実施例３と同様にして得られた０、５％酢酸で表
面処理を行なわない多孔質キトサン粒状体（未処理品と
いう）とこれを０．５％酢酸で２５℃で３０秒間処理し
た多孔質キトサン粒状体く処理品という）について以下
に記述するＡ、Ｂ、Ｃの方法による架橋処理を行なって
６種の菌体固定化用担体を得た。 Ａ：多孔質キトサン粒状体１００ａｅ （湿潤）に水５
０ｄとへキサメチレンビス−（，２、３−エポキシプロ
ビルジメチルアンモニウムクロライド）２０ｇを加え、
６０℃で４ＦＲ間反応させ、反応終了後イオン交換水で
充分水洗した。 Ｂ；多孔質キトサン粒状体１００ａｅ （湿潤）に含ま
れる水をジメチルホルムアミドで充分置換後、ヘキサメ
チレンジイソシアネート８ｇを加え室温で２時間反応さ
せた。反応終了後ジメチルホルムアミドで未反応のへキ
サメチレンジイソシアネートを除去後、イオン交換水で
充分水洗した。 Ｃ：多孔質キトサン粒状体１００ｄ（湿潤）に含まれる
水をジメチルホルムアミドで充分置換後、４．４′ −
ジフェニルメタンジイソシアネート８りを加え室温で１
時間反応させた。反応終了後ジメチルホルムアミドで未
反応の４．４′ −ジフェニルメタンジイソシアネート
を除去後、イオン交換水で充分水洗した。 そして、酢酸菌ＩＦＯ−３８２３をグルコース、イース
トエクスライト、ポリペプトンを含むＰＧＹ培地３〇−
に植菌後、３０℃、２４時間、１２０回転／分で振盪培
養した培養懸濁液４−に対し、未処理品、処理品にそれ
ぞれＡ、Ｂ、Ｃの架橋処理をした６種の架橋多孔質キト
サン粒状体を各２−加え、５℃で１時間吸着させ吸着菌
数を測定して第４表に示した。 菌体吸者数の測定は次の通り行なった。 ■グルコース、ポリペプトン、酵母エキスから成るＰＧ
Ｙ培地にエタノールを２％となるように加えた培地３０
−にアセトバクター アセチ（＾ｃｅｔ。 ｂａｃｔｅｒ ａｃｅｔｉ、ＩＦＯ−３８２３）を植菌
し、３０℃で２４時間Ｎ席培養を行なう。 ■この培養懸濁液４ｒｄを、予め滅菌しておいた試料に
加え、４℃で１時間振盪し、吸着させる。 ■吸着終了後、上清を１００ｄ取り、４．０００倍希釈
し、そのうちの１００−を取って予め用意しておいた平
板培地に塗抹して、４８時間培養後、出現したコロニー
数をカウントする。吸着前の培養懸濁液については、ａ
、 ｏｏｏ倍希釈して、同様の操作でコロニー数をカウ
ントしておく。 ■吸着前後の細胞数の差から吸着数を算出する。 この結果、多孔質キトサン粒状体を酸処理した方が吸着
菌数がかなり多くなり優れた国体固定化用担体となるこ
とが明らかである。 第 ４ 表
中で凝固析出させ多孔質キトサン成形物を得、次いで該
多孔質キトサン成形物を酸溶液で処理することを特徴と
する多孔質キトサン成形物の製造法である。 本発明においては、キトサンとして平均分子量が１０，
０００〜２３０，０００の低分子量キトサンが用いられ
、該低分子量キトサンを酢酸、ジクロル酢酸。 蟻酸の単独又は混合物水溶液に溶解させキトサン酸性水
溶液とする。キトサン酸性水溶液中のキトサンの濃度は
２〜２０％（重量）の範囲で自由に選択することができ
る。この際、キトサン酸性水溶液中に細孔調節剤として
水溶性高分子物質であるポリビニルアルコール、ポリエ
チレングリコール等を単独又は組合せて添加してもかま
わない。該キトサン酸性水溶液からキトサンを再生して
多孔質キトサン成形物を得るためには、例えば孔径０．
１〜０．２５ ｔｍφのノズルより圧力下で塩基性水溶
液中に該キトサン酸性水溶液を一定量づつ落下させるこ
とにより多孔質キトサン粒状体が得られる。又、キトサ
ン酸性水溶液を定量ポンプでスリットから塩基性水溶液
中に押出し再生させるとキトサンフィルムのキトサン成
形物が、孔径０．１〜０゜２５順φのノズルより塩基性
水溶液中に定量的に紡出すれば、繊維状のキトサン成形
物が得られる。塩基性凝固浴中に加える塩基性物質とし
ては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリ
ウム、炭酸カリウム、アンモニア、エチレンジアミン等
のアルカリ性物質が用いられ、塩基性溶液とするには、
水、又はメタノール、エタノール等の極性を有するアル
コール類又は水とアルコール類の混合物に上述の塩基性
物質を加えて使用する。 得られた水を含む多孔質キトサン成形物はメタノール、
エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類
やアクリロニトリル等の極性溶媒を用いて水を適宜置換
する。次いで酸水溶液で表面処理をするが、この際用い
られる酸としては酢酸。 蟻酸、ブＯピオン酸等の有機酸、又は塩酸、硝酸等の鉱
酸が挙げられ、多孔質キトサン成形物は酸水溶液で短時
間処理し、次いで酸を水洗する。この時成形物に水が含
まれていれば酸の水溶液を、極性溶媒が含まれている場
合は該極性溶媒と酸の混合物を用いることが好ましい。 酸の濃度としては０．５〜５．０％（重量）のものが使
用され、酸処理は２５℃で１０秒〜５分間行なう。しか
しながら、処理条件はキトサン酸性水溶液の濃度、塩基
性凝固浴濃度、処理に用いる酸の種類と濃度によって成
形物内部の大きな気孔を表面に具備させるように自由に
選択できることは勿論である。酸処理後の水洗は成形物
中の酸が充分洗い落される迄流水中で行なう。上述の酸
処理により得られた多孔質キトサン粒状体は、表ｍｌ及
びその近傍にある、内部より、より直径の小さい細孔径
気孔部分が除去されるので、表面から内部に向って大き
な直径の気孔を有するものとなる。更に、微生物の培養
条件は殆どが中性から酸性の領域で行なわれるために、
微生物固定化用担体として使用する場合は、酸性条件で
不溶であることが必要であり、このため本発明により処
理を行なった多孔質キトサン成形物を、更に架橋試薬に
より化学修飾することが有効である。架橋剤としては特
に限定されないが特公昭６３−５４２８６号、特開昭６
３−２０５１４４号、特開昭６３−２８４５３号で開示
した方法により酸不溶化にすることが可能である。 に実 施 例】 以下、本発明を実施例により詳述するが、本発明は実施
例記載の範囲に限定されるものではない。 尚、多孔質キトサン成形物の表面最大細孔径は凍結乾燥
処理の後、走査型電子顕微鏡により測定した。 実施例１゜ 脱アセチル化度７８％、平均分子［５２，Ｃｏｏのキト
サン６０ｇを総量が１，０００−になる様に３％酢酸水
溶液に溶解した。同様にキトサン６０９にポリエチレン
グリコール（分子＠ ２０．０００．和光補薬工業■製
）５０ｇと１００ ｇをそれぞれ加えて総量が１，００
０−となる様に３％酢酸水溶液に溶解した。これらの溶
液を６％苛性ソーダ、 ３０％エタノール、６４％水か
らなる混合溶液中に孔径０．２５ Ｍφノズルから一定
量づつ落下させて凝固再生させた後、中性になる迄充分
水洗して夫々平均粒径約１．２顛φの多孔質キトサン粒
状体１λ（湿ｉｔ！ｌ）を得た。これらから夫々 １０
０蛇を採取して比較例試料とした。 夫々９００ｄの得られた多孔質キトサン粒状体の付槓水
を除去後、０．５％酢酸水溶液１１中に２５℃で３０秒
間浸漬処理した後、直ちに中性になる迄水洗を行なった
。水洗後の多孔質キトサン粒状体の容積は夫々８５５ｉ
であった。該多孔質キトサン粒状体を固体と液体が共存
する窒素中で急冷し一５０℃。 １０−７トールの真空度で凍結乾燥した（処理品という
）。この際比較例として０．５％酢酸水溶液で処Ｊψし
ない多孔性キトサン粒状体（未処理品という）も同様に
夫々凍結乾燥した。 ポリエチレングリコールを加えない場合のキトサン多孔
質粒状体未処理品と、酢酸水溶液で処理したキトサン多
孔質粒状体について、走査型電子顕微鏡を用いて表面形
状の写真を撮影し、第１図Ａ及び第１図８にそれぞれ示
した。倍率は５．０００倍である。また、ポリエチレン
グリコール１００ｇを加えたキトサン酸性水溶液から得
たキトサン多孔質粒状体の未処理品と処理品についての
顕微鏡写真を第２図Ａ及び第２図Ｂにそれぞれ示す。倍
率は第２図Ａはｓ、ｏｏｏ倍、第２図Ｂは２．０００倍
である。 又、上記の全部の試料について走査型電子顕微鏡を用い
て表面最大細孔径を測定し、その結果を第１表に示した
。第１表及び第１．２図から明らかな如く、酸処理をす
ることにより多孔質キトサン粒状体の表面細孔径が大き
くなることが明らかである。 実施例２゜ 脱アセチル化１’９７８％、平均分子ｉｉ ５２ 、０
００のキトサン１２（１ｇ、ポリエチレングリコール（
分子量２０．０００＞ ２００９をａｌが２，０００
ｄとなる様に３％酢酸水溶液−に溶解させた。該酸性水
溶液を６％苛性ソーダ、３０％エタノール、６４％の水
よりなる混合溶液中に孔径０．２５ Ｂφのノズルから
一定量づつ落下させ凝固再生させた後、中性になる迄充
分水洗して、平均粒径的１．２闇φの多孔質キトサン粒
状体２文（湿潤）を得た。 次いで酢ｌｌ！濃度を０．０５ 、 ０，５． １．０
． ５．０％とした酢酸水溶液を夫々４００ａｅ調製し
、更にこれを１００−づつに分け、夫々に多孔質キトサ
ン粒状体を１００−づつ投入し、浸漬時間を１０．３０
．６０゜３００秒間として９８理した。夫々、酢酸水溶
液で処理後直ちに中性になる迄充分水洗（）多孔質キト
サン粒状体の容積を測定した。又、実施例１＠様に凍結
乾燥後走査型電子顕微鏡で表面最大細孔径を測定し、そ
の結果を第２表に示した。この結果から、酸濃度と処理
時間を自由に選択組合せることによって、所望の表面最
大細孔径を得られることが明らかである。 第 ２ 表 実施例３゜ 脱アセチル化度７８％、平均分子量４８，０００のキト
サンを用い、キトサン５０ｇに対し２．５％酢酸水溶液
８５０９．キトサン６０ｇに対し３．０％酢酸水溶液８
４０ｇ、及びキトサン７０ｇに対し３６５％酢酸水溶液
８３０ｇを加え、夫々にポリエチレングリコール（分子
量２０，０００＞を１００９添加し充分溶解したキトサ
ン酸性水溶液を得た。夫々のキトサン酸性水溶液を２０
％のエタノールを含む３％、６％及び９％の苛性ソーダ
水溶液中に孔径０，２５ ｍφノズルから一定量づつ滴
下させて凝固再生させた後中性になる迄充分水洗して平
均粒径約１．２Ｍφの多孔質キトサン粒状体を得た。更
にこれらを０．５％酢酸水溶液中に２５℃で３０秒間浸
漬後充分水洗し実施例１と同様に凍結乾燥し、走査型電
子顕微鏡により表面の最大細孔径を測定し、結果を第３
表に示した。 この結果からキトサン酸性水溶液中のキトサン′ａ度と
凝固液の苛性ソーダ濃度の組合わせを選択して再成形後
酢酸水溶液で処理することにより、多孔質キトサン粒状
体の表面に大きな気孔をＲ現させることが出来ることが
明らかである。 第 ３ 表 （単位二μ） 応用例１゜ キトサンｍａ ｅ％、凝固液中の苛性ソーダ濃度６％の
条件で実施例３と同様にして得られた０、５％酢酸で表
面処理を行なわない多孔質キトサン粒状体（未処理品と
いう）とこれを０．５％酢酸で２５℃で３０秒間処理し
た多孔質キトサン粒状体く処理品という）について以下
に記述するＡ、Ｂ、Ｃの方法による架橋処理を行なって
６種の菌体固定化用担体を得た。 Ａ：多孔質キトサン粒状体１００ａｅ （湿潤）に水５
０ｄとへキサメチレンビス−（，２、３−エポキシプロ
ビルジメチルアンモニウムクロライド）２０ｇを加え、
６０℃で４ＦＲ間反応させ、反応終了後イオン交換水で
充分水洗した。 Ｂ；多孔質キトサン粒状体１００ａｅ （湿潤）に含ま
れる水をジメチルホルムアミドで充分置換後、ヘキサメ
チレンジイソシアネート８ｇを加え室温で２時間反応さ
せた。反応終了後ジメチルホルムアミドで未反応のへキ
サメチレンジイソシアネートを除去後、イオン交換水で
充分水洗した。 Ｃ：多孔質キトサン粒状体１００ｄ（湿潤）に含まれる
水をジメチルホルムアミドで充分置換後、４．４′ −
ジフェニルメタンジイソシアネート８りを加え室温で１
時間反応させた。反応終了後ジメチルホルムアミドで未
反応の４．４′ −ジフェニルメタンジイソシアネート
を除去後、イオン交換水で充分水洗した。 そして、酢酸菌ＩＦＯ−３８２３をグルコース、イース
トエクスライト、ポリペプトンを含むＰＧＹ培地３〇−
に植菌後、３０℃、２４時間、１２０回転／分で振盪培
養した培養懸濁液４−に対し、未処理品、処理品にそれ
ぞれＡ、Ｂ、Ｃの架橋処理をした６種の架橋多孔質キト
サン粒状体を各２−加え、５℃で１時間吸着させ吸着菌
数を測定して第４表に示した。 菌体吸者数の測定は次の通り行なった。 ■グルコース、ポリペプトン、酵母エキスから成るＰＧ
Ｙ培地にエタノールを２％となるように加えた培地３０
−にアセトバクター アセチ（＾ｃｅｔ。 ｂａｃｔｅｒ ａｃｅｔｉ、ＩＦＯ−３８２３）を植菌
し、３０℃で２４時間Ｎ席培養を行なう。 ■この培養懸濁液４ｒｄを、予め滅菌しておいた試料に
加え、４℃で１時間振盪し、吸着させる。 ■吸着終了後、上清を１００ｄ取り、４．０００倍希釈
し、そのうちの１００−を取って予め用意しておいた平
板培地に塗抹して、４８時間培養後、出現したコロニー
数をカウントする。吸着前の培養懸濁液については、ａ
、 ｏｏｏ倍希釈して、同様の操作でコロニー数をカウ
ントしておく。 ■吸着前後の細胞数の差から吸着数を算出する。 この結果、多孔質キトサン粒状体を酸処理した方が吸着
菌数がかなり多くなり優れた国体固定化用担体となるこ
とが明らかである。 第 ４ 表
本発明による多孔質キトサン成形物はその表面が内部と
同様の大きな孔径の細孔を具備しているので、微生物等
の菌体固定担体として用いた時に初期接着量を大幅に向
上出来、生菌をその内部の大きな孔径で効率よく増殖可
能であり、バイオリアクター用担体として応用するのに
極めて好適である。又、多孔質キトサン成形物であるの
で弾性に富んでおり、流ｖＪ層培養の担体として用いた
時も衝撃に強く弾力性がある。本発明による多孔質キト
サン成形物は、更に分子内アミノ基を用いて架橋反応さ
せることにより耐酸、耐アルカリ性の向上や種々の官能
基を導入し各種菌体に適する化学修飾を行ない、機能化
を計ることができる効果もある。
同様の大きな孔径の細孔を具備しているので、微生物等
の菌体固定担体として用いた時に初期接着量を大幅に向
上出来、生菌をその内部の大きな孔径で効率よく増殖可
能であり、バイオリアクター用担体として応用するのに
極めて好適である。又、多孔質キトサン成形物であるの
で弾性に富んでおり、流ｖＪ層培養の担体として用いた
時も衝撃に強く弾力性がある。本発明による多孔質キト
サン成形物は、更に分子内アミノ基を用いて架橋反応さ
せることにより耐酸、耐アルカリ性の向上や種々の官能
基を導入し各種菌体に適する化学修飾を行ない、機能化
を計ることができる効果もある。
【図面の簡単な説明】
第１図Ａ、Ｂ及び第２図Ａ、Ｂは、走査型電子顕微鏡を
用いた実施例１に記載のキトサン多孔質粒状体の表面形
状を示す撮影写真であり、第１図Ａはポリエチレングリ
コールを加えない場合のキトサン粒状体未処理品を、第
１図Ｂはポリエチレングリコールを加えない場合のキト
サン粒状体の本発明による処理品を示し、第２図Ａはポ
リエチレングリコールを加えた場合のキトサン粒状体未
処理品を、第２図Ｂはポリエチレングリコールを加えた
場合のキトサン粒状体の本発明による処理品を示すもの
である。 第 １ 図 第 ２ 図 表血未久り理品、イド？率” ５ ｒ ｏａＯ表面未処
理品７倍率： ’＞−、５、ｔ）００表ゴｉｉ処理品８
倍率：ン５．０００ 表面処理品１倍率’：×”’２４’Ｏ’０θ発明の名称 補正をする者 事件との関係 住 所 氏 名 書（方 多孔質キトサン成形物の製造法
用いた実施例１に記載のキトサン多孔質粒状体の表面形
状を示す撮影写真であり、第１図Ａはポリエチレングリ
コールを加えない場合のキトサン粒状体未処理品を、第
１図Ｂはポリエチレングリコールを加えない場合のキト
サン粒状体の本発明による処理品を示し、第２図Ａはポ
リエチレングリコールを加えた場合のキトサン粒状体未
処理品を、第２図Ｂはポリエチレングリコールを加えた
場合のキトサン粒状体の本発明による処理品を示すもの
である。 第 １ 図 第 ２ 図 表血未久り理品、イド？率” ５ ｒ ｏａＯ表面未処
理品７倍率： ’＞−、５、ｔ）００表ゴｉｉ処理品８
倍率：ン５．０００ 表面処理品１倍率’：×”’２４’Ｏ’０θ発明の名称 補正をする者 事件との関係 住 所 氏 名 書（方 多孔質キトサン成形物の製造法
Claims (1)
- １、低分子量キトサンの酸性水溶液を塩基性水溶液中で
凝固析出させ多孔質キトサン成形物を得、次いで該多孔
質キトサン成形物を酸溶液で処理することを特徴とする
多孔質キトサン成形物の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1045781A JPH0657761B2 (ja) | 1989-02-27 | 1989-02-27 | 多孔質キトサン成形物の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1045781A JPH0657761B2 (ja) | 1989-02-27 | 1989-02-27 | 多孔質キトサン成形物の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02225539A true JPH02225539A (ja) | 1990-09-07 |
| JPH0657761B2 JPH0657761B2 (ja) | 1994-08-03 |
Family
ID=12728833
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1045781A Expired - Fee Related JPH0657761B2 (ja) | 1989-02-27 | 1989-02-27 | 多孔質キトサン成形物の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0657761B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6599720B2 (en) | 1993-12-01 | 2003-07-29 | Marine Polymer Technologies | Methods for making poly-β-1→4-N-acetylglucosamine |
| US8858964B2 (en) | 2010-04-15 | 2014-10-14 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Anti-bacterial applications of poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| US8871247B2 (en) | 2007-02-19 | 2014-10-28 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Hemostatic compositions and therapeutic regimens |
| US10765698B2 (en) | 2011-04-15 | 2020-09-08 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Treatment of disease with poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| CN114106401A (zh) * | 2021-12-03 | 2022-03-01 | 西南大学 | 一种多孔壳聚糖膜及其制备方法与应用 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60215003A (ja) * | 1984-04-10 | 1985-10-28 | Unitika Ltd | キトサン成形体の製造方法 |
| JPS62288601A (ja) * | 1986-06-06 | 1987-12-15 | Agency Of Ind Science & Technol | キトサン粒子の製造方法 |
-
1989
- 1989-02-27 JP JP1045781A patent/JPH0657761B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| JPS60215003A (ja) * | 1984-04-10 | 1985-10-28 | Unitika Ltd | キトサン成形体の製造方法 |
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| US6864245B2 (en) | 1993-12-01 | 2005-03-08 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Biocompatible poly-β-1→4-N-acetylglucosamine |
| US9139664B2 (en) | 2007-02-19 | 2015-09-22 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Hemostatic compositions and therapeutic regimens |
| US8871247B2 (en) | 2007-02-19 | 2014-10-28 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Hemostatic compositions and therapeutic regimens |
| US9139663B2 (en) | 2007-02-19 | 2015-09-22 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Hemostatic compositions and therapeutic regimens |
| US10383971B2 (en) | 2007-02-19 | 2019-08-20 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Hemostatic compositions and therapeutic regimens |
| US8858964B2 (en) | 2010-04-15 | 2014-10-14 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Anti-bacterial applications of poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| US9198928B2 (en) | 2010-04-15 | 2015-12-01 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Anti-bacterial applications of poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| US9642871B2 (en) | 2010-04-15 | 2017-05-09 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Anti-bacterial applications of poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| US10206938B2 (en) | 2010-04-15 | 2019-02-19 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Anti-bacterial applications of poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| US10561677B2 (en) | 2010-04-15 | 2020-02-18 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Anti-bacterial applications of poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| US10765698B2 (en) | 2011-04-15 | 2020-09-08 | Marine Polymer Technologies, Inc. | Treatment of disease with poly-N-acetylglucosamine nanofibers |
| CN114106401A (zh) * | 2021-12-03 | 2022-03-01 | 西南大学 | 一种多孔壳聚糖膜及其制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0657761B2 (ja) | 1994-08-03 |
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