JPH02242163A - 自動免疫測定装置の発光試薬注入装置 - Google Patents
自動免疫測定装置の発光試薬注入装置Info
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- JPH02242163A JPH02242163A JP6275389A JP6275389A JPH02242163A JP H02242163 A JPH02242163 A JP H02242163A JP 6275389 A JP6275389 A JP 6275389A JP 6275389 A JP6275389 A JP 6275389A JP H02242163 A JPH02242163 A JP H02242163A
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- reagents
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は固相試薬を使った免疫反応により血清や尿等の
試料中に含まれる成分を測定する免疫測定装置に係わり
、特に複数の発光試薬を混合して試料に注入するように
した自動免疫測定装置の発光試薬注入装置に関するもの
である。
試料中に含まれる成分を測定する免疫測定装置に係わり
、特に複数の発光試薬を混合して試料に注入するように
した自動免疫測定装置の発光試薬注入装置に関するもの
である。
酵素免疫測定法は、酵素活性をマーカーとして抗原抗体
反応の程度を知り、これから抗原または抗体の量を定量
する方法であって、酵素標識抗原(または抗体)と非標
識抗原(または抗体)とが抗体(または抗原)に対して
競合しないサンドイツチ法や、酵素標識抗原(または抗
体)と非標識抗原量ルたは抗体)とを競合させることに
よってその非標識抗原量を求める競合反応法、その他種
々の方法がある。
反応の程度を知り、これから抗原または抗体の量を定量
する方法であって、酵素標識抗原(または抗体)と非標
識抗原(または抗体)とが抗体(または抗原)に対して
競合しないサンドイツチ法や、酵素標識抗原(または抗
体)と非標識抗原量ルたは抗体)とを競合させることに
よってその非標識抗原量を求める競合反応法、その他種
々の方法がある。
第4図はサンドイツチ法による測定原理を説明するため
の図、第5図は競合法による測定原理を説明するための
図であり、61は固相担体、62は抗体、63は被測定
抗原、64は標識物質、65はm識抗体、66は基質、
67は生成物を示す。
の図、第5図は競合法による測定原理を説明するための
図であり、61は固相担体、62は抗体、63は被測定
抗原、64は標識物質、65はm識抗体、66は基質、
67は生成物を示す。
サンドイツチ法は、第4図に示すように、■ まず、固
相担体61の表面に物理的な吸着や化学反応を利用した
結合により抗体62を固相状態にしておき、これに被測
定抗原63を含むサンプルを加える。
相担体61の表面に物理的な吸着や化学反応を利用した
結合により抗体62を固相状態にしておき、これに被測
定抗原63を含むサンプルを加える。
■ その結果、サンプル中にはいろいろな夾雑成分があ
るものの、抗体62と抗原63とが特異的に反応しく第
1反応)、被測定抗原63が固相化抗体62に結合する
ので、その後、洗浄を行うことによりサンプル中の夾雑
成分を廃棄する。
るものの、抗体62と抗原63とが特異的に反応しく第
1反応)、被測定抗原63が固相化抗体62に結合する
ので、その後、洗浄を行うことによりサンプル中の夾雑
成分を廃棄する。
■ 次に、酵素を標識64として結合させた酵素標識抗
体65を添加する。
体65を添加する。
■ その結果、抗原抗体反応(第2反応)が起こり、固
相化抗体62に結合している抗原63の上に酵素1識抗
体65が結合する。この場合、酵素標識抗体65は、過
剰に添加されるので、抗原63と抗体65が結合して生
じた結合型の部分(b。
相化抗体62に結合している抗原63の上に酵素1識抗
体65が結合する。この場合、酵素標識抗体65は、過
剰に添加されるので、抗原63と抗体65が結合して生
じた結合型の部分(b。
und 、 B)と結合していない遊離型の部分(fr
ee、F)ができる。
ee、F)ができる。
■ そこで、洗浄を行うことによって遊離型の部分(f
ree、 F)の過剰酵素標識抗体を廃棄する。
ree、 F)の過剰酵素標識抗体を廃棄する。
つまり、B/F分離を行う。
■ 次に酵素反応を行う。このときの酵素活性は、結合
型の部分の酵素標識抗体の量によって決まるので、その
酵素標識抗体量は固相化抗体に結合した抗原量、すなわ
ち被測定抗原量を表すことになる。
型の部分の酵素標識抗体の量によって決まるので、その
酵素標識抗体量は固相化抗体に結合した抗原量、すなわ
ち被測定抗原量を表すことになる。
競合反応法は、愼5図に示すように、
■ 抗体を固相化しておき、被測定抗原及び被測定抗原
と同じ抗原に標識を結合させた標識抗原を添加する。
と同じ抗原に標識を結合させた標識抗原を添加する。
■ その結果、抗原抗体反応が起こり、被測定抗原及び
標識抗原がそれぞれの量の割合に応じて固相化抗体に結
合する。
標識抗原がそれぞれの量の割合に応じて固相化抗体に結
合する。
■、■ 次に、サンドイツチ法と同様にB/F分離を行
い、酵素反応を行う。このときの酵素活性は、結合型の
部分の酵素標識抗体の量によって決まるので、添加した
標識抗原量から検量線を使って被測定抗原量を求めるこ
とができる。
い、酵素反応を行う。このときの酵素活性は、結合型の
部分の酵素標識抗体の量によって決まるので、添加した
標識抗原量から検量線を使って被測定抗原量を求めるこ
とができる。
上記の方法は、いずれも所謂分離法であり、これに対し
てB/F分離を行わない非分離法もある。
てB/F分離を行わない非分離法もある。
非分離法は測定時間が早く操作が簡単であるが、測定感
度が低い等の欠点がある。それに比べて分離法は、測定
感度は高いが操作が非常に複雑且つ面倒であり、自動化
が難し〈従来はほとんどの場合手作業で行われていた。
度が低い等の欠点がある。それに比べて分離法は、測定
感度は高いが操作が非常に複雑且つ面倒であり、自動化
が難し〈従来はほとんどの場合手作業で行われていた。
上記の免疫測定を自動化する場合は、ポリスチレンポー
ルまたはガラスピーズ等の固相に抗体または抗原を固定
して固相化したものが固相試薬として用いられている。
ルまたはガラスピーズ等の固相に抗体または抗原を固定
して固相化したものが固相試薬として用いられている。
この固相試薬は、不安定であるため、通常は保存液を満
たした容器の中に入れておき、酵素免疫測定を行うとき
に容器の中から固相試薬を1つずつ反応検出容器に移し
、サンプルの分注、標識試薬の分注、B/F分離、洗浄
を行って、しかる後、結合型の部分を検出器へ移すよう
にしている。
たした容器の中に入れておき、酵素免疫測定を行うとき
に容器の中から固相試薬を1つずつ反応検出容器に移し
、サンプルの分注、標識試薬の分注、B/F分離、洗浄
を行って、しかる後、結合型の部分を検出器へ移すよう
にしている。
ところで、酵素反応を利用して測定する場合には、例え
ば色素液を形成し、比色計により色の濃さを測定して反
応を検出するものがあるが、検出感度が低いため、免疫
反応生成物に発光試薬を注入してその化学発光を検出す
ることが行われている。そして、化学発光の検出には、
連続的に反応生成物を流して計測するフローセルタイプ
と試験管等を利用して試験管単位で測定するバッチ式測
定タイプのものがあり、化学発光における光量が微弱で
あるため、いずれのタイプのものでも発光反応液の部位
にフォトマルチプライヤ等の検出素子を近接設置するこ
とにより発光検出を行っている。
ば色素液を形成し、比色計により色の濃さを測定して反
応を検出するものがあるが、検出感度が低いため、免疫
反応生成物に発光試薬を注入してその化学発光を検出す
ることが行われている。そして、化学発光の検出には、
連続的に反応生成物を流して計測するフローセルタイプ
と試験管等を利用して試験管単位で測定するバッチ式測
定タイプのものがあり、化学発光における光量が微弱で
あるため、いずれのタイプのものでも発光反応液の部位
にフォトマルチプライヤ等の検出素子を近接設置するこ
とにより発光検出を行っている。
このような化学発光を検出する自動免疫測定において、
例えば過酸化水素(H,02)とアルカリを反応させて
試薬として試料に注入する場合があるが、H3O2とア
ルカリとは直ぐに反応してH3O2が無くなってしまう
という問題があった。
例えば過酸化水素(H,02)とアルカリを反応させて
試薬として試料に注入する場合があるが、H3O2とア
ルカリとは直ぐに反応してH3O2が無くなってしまう
という問題があった。
このように、複数の発光試薬を混合して仕様するような
場合、混合したときに発光試薬が安定状態を保持できず
、そのためデータが変化してしまい安定してデータの収
集をすることができなかった。
場合、混合したときに発光試薬が安定状態を保持できず
、そのためデータが変化してしまい安定してデータの収
集をすることができなかった。
本発明はかかる事情に鑑みてなされたもので、化学発光
を利用する免疫反応を測定する自動免疫装置において、
発光試薬の安定性を保持し、安定な発光光量が得られ、
データを安定的に収集することができる自動免疫反応測
定の発光試薬注入装置に関するものである。
を利用する免疫反応を測定する自動免疫装置において、
発光試薬の安定性を保持し、安定な発光光量が得られ、
データを安定的に収集することができる自動免疫反応測
定の発光試薬注入装置に関するものである。
そのために本発明は、反応管内の免疫反応生成物に発光
試薬を注入して化学発光させることにより免疫反応を測
定する自動免疫測定装置において、複数の発光試薬をそ
れぞれ収納した容器と、各容器内の発光試薬を混合させ
る混合手段と、混合した試薬を反応管に注入する注入手
段とを備え、発光させる直前に複数の試薬を混合注入す
るようにしたこと、また発光試薬注入手段により発光試
薬を予備吐出することを特徴とする。
試薬を注入して化学発光させることにより免疫反応を測
定する自動免疫測定装置において、複数の発光試薬をそ
れぞれ収納した容器と、各容器内の発光試薬を混合させ
る混合手段と、混合した試薬を反応管に注入する注入手
段とを備え、発光させる直前に複数の試薬を混合注入す
るようにしたこと、また発光試薬注入手段により発光試
薬を予備吐出することを特徴とする。
本発明の自動免疫反応測定の発光試薬注入装置は、別々
に収納しておいた発光試薬を発光検出の直前において混
合することにより発光試薬を安定して保持することがで
き、さらに発光検出に当たって発光試薬を予備吐出する
ことにより、注入部に残っているものを洗浄してそれら
の影響をなくすようにしたのでデータの安定性を保持す
ることができる。
に収納しておいた発光試薬を発光検出の直前において混
合することにより発光試薬を安定して保持することがで
き、さらに発光検出に当たって発光試薬を予備吐出する
ことにより、注入部に残っているものを洗浄してそれら
の影響をなくすようにしたのでデータの安定性を保持す
ることができる。
以下、実施例を図面に基づき説明する。
第1図は本発明に係る自動免疫測定装置の1実施例構成
を示す図、第2図は本発明に係る自動免疫測定装置に使
用されるカートリッジのl実施例を示す図である。図中
、■は反応ターンテーブル、2はカートリッジターンテ
ーブル、3は試薬ターンテーブル、4はサンプルターン
テーブル、5はサンプルカップ、6はディスポチップ、
7〜9はアーム機構、10は検出器、11はダスト、1
2は制御処理部、21はカー) IJッジ本体、22は
フィルター、23は固相試薬、24は排出孔、25は開
口部、26はアルミキャップ、27はオリメ、28は先
端部を示す。
を示す図、第2図は本発明に係る自動免疫測定装置に使
用されるカートリッジのl実施例を示す図である。図中
、■は反応ターンテーブル、2はカートリッジターンテ
ーブル、3は試薬ターンテーブル、4はサンプルターン
テーブル、5はサンプルカップ、6はディスポチップ、
7〜9はアーム機構、10は検出器、11はダスト、1
2は制御処理部、21はカー) IJッジ本体、22は
フィルター、23は固相試薬、24は排出孔、25は開
口部、26はアルミキャップ、27はオリメ、28は先
端部を示す。
第1図において、カートリッジターンテーブル2は、第
2図に示rような使い揄でのカー) IJツジ(反応検
出容器)を格納して回転するテーブルであり、取り外し
可能な10個のカセットで構成しそれぞれのカセットに
30個のカートリッジを格納できるようにした例を示し
ている。これによると、各区分には同じ固相化抗体のカ
ートリッジを格納するので、10項目分のカー) IJ
ッジを用意することができる。試薬ターンテーブル3は
、標識抗体の試薬ボトル及びその分注のためのディスポ
チップを格納して回転するテーブルであり、10種類、
すなわち10項目分の試薬ボトルを格納できるようにし
た例を示している。サンプルターンテーブル4は、サン
プルを収納したサンプルカップ5及びサンプルを分注す
るディスポチップ6を格納して回転するテーブルであり
、各サンプルカップ5に対応してその内側に2個のディ
スポチップ6を格納できるようにした例を示している。
2図に示rような使い揄でのカー) IJツジ(反応検
出容器)を格納して回転するテーブルであり、取り外し
可能な10個のカセットで構成しそれぞれのカセットに
30個のカートリッジを格納できるようにした例を示し
ている。これによると、各区分には同じ固相化抗体のカ
ートリッジを格納するので、10項目分のカー) IJ
ッジを用意することができる。試薬ターンテーブル3は
、標識抗体の試薬ボトル及びその分注のためのディスポ
チップを格納して回転するテーブルであり、10種類、
すなわち10項目分の試薬ボトルを格納できるようにし
た例を示している。サンプルターンテーブル4は、サン
プルを収納したサンプルカップ5及びサンプルを分注す
るディスポチップ6を格納して回転するテーブルであり
、各サンプルカップ5に対応してその内側に2個のディ
スポチップ6を格納できるようにした例を示している。
反応ターンテーブル1は、カートリッジターンテーブル
2のカートリッジがセットされlポジションずつ回転し
ながら、先に説明したようにサンプルの分注、標識抗体
の添加、振動による撹拌反応、洗浄等を行うものである
。アーム機構7〜9は、反応ターンテーブルlとカート
リッジターンテーブル2、試薬ターンテーブル3、サン
プルターンテーブル4との間でカートリッジの挿脱、試
薬やサンプルの分注を行うための機構であり、それぞれ
の軌跡を示したのが円a、b、cである。また、検出5
10は、反応後のカートリッジに発光試薬を注入して発
光量を検出するものであり、ダスト11は、発光量検出
後のカートリッジを廃棄するところである。
2のカートリッジがセットされlポジションずつ回転し
ながら、先に説明したようにサンプルの分注、標識抗体
の添加、振動による撹拌反応、洗浄等を行うものである
。アーム機構7〜9は、反応ターンテーブルlとカート
リッジターンテーブル2、試薬ターンテーブル3、サン
プルターンテーブル4との間でカートリッジの挿脱、試
薬やサンプルの分注を行うための機構であり、それぞれ
の軌跡を示したのが円a、b、cである。また、検出5
10は、反応後のカートリッジに発光試薬を注入して発
光量を検出するものであり、ダスト11は、発光量検出
後のカートリッジを廃棄するところである。
本発明に係る自動免疫測定装置に使用されるカートリッ
ジは、第2図に示すようにカートリッジ本体21が筒状
をなし、固相試薬23を入れ、その下にフィルター22
を設けたものであり、さらに、フィルター22の下に細
い排出孔24が途中まで設けられ、上端の開口部25が
アルミキャップ26で塞がれたものである。固相試薬2
3は、数十μmφ程度の顆粒の表面に抗体を固定したも
のであり、固相試薬23の抗体や抗原は、蛋白質である
ため分解しやすいので、防腐剤や一定のpHを保つため
の緩衝液等からなる保存液に浸されている。
ジは、第2図に示すようにカートリッジ本体21が筒状
をなし、固相試薬23を入れ、その下にフィルター22
を設けたものであり、さらに、フィルター22の下に細
い排出孔24が途中まで設けられ、上端の開口部25が
アルミキャップ26で塞がれたものである。固相試薬2
3は、数十μmφ程度の顆粒の表面に抗体を固定したも
のであり、固相試薬23の抗体や抗原は、蛋白質である
ため分解しやすいので、防腐剤や一定のpHを保つため
の緩衝液等からなる保存液に浸されている。
また、排出孔24を設けた部分には、切り込まれたオリ
メ27があって、そのオリメ27において先端部28を
折り曲げることによってカートリッジ本体21から容易
に取り除くことができ、排出孔24を貫通させることが
できる。排出孔24は、極めて細い径で形成し、また、
フィルター22が配置されているので、カー) IJッ
ジを使用するに際して、先端部28がカー) IJッジ
本体21から取り除かれた状態においても、分注された
サンプルや試薬、洗浄水等が排出孔24から容易に排出
されず、上端の開口FA25から加圧空気を供給するこ
とにより、或いは排出孔24から吸引することにより排
出されるようにしている。
メ27があって、そのオリメ27において先端部28を
折り曲げることによってカートリッジ本体21から容易
に取り除くことができ、排出孔24を貫通させることが
できる。排出孔24は、極めて細い径で形成し、また、
フィルター22が配置されているので、カー) IJッ
ジを使用するに際して、先端部28がカー) IJッジ
本体21から取り除かれた状態においても、分注された
サンプルや試薬、洗浄水等が排出孔24から容易に排出
されず、上端の開口FA25から加圧空気を供給するこ
とにより、或いは排出孔24から吸引することにより排
出されるようにしている。
したがって、カートリッジは、上端がアルミキャップ2
日により、下端が先端部28により完全に密封された状
態でフィルター22上に固相試薬23が保存され、カー
トリッジターンテーブル2に格納されている。そして、
このカートリッジをアーム機構7によりカートリッジタ
ーンテーブル2から反応ターンテーブル1に移送すると
きに、ダスト11において先端部28を取り除き、反応
ターンテーブル1の次のポジションにおいて保存液を吐
き出し、洗浄を行うようにしている。
日により、下端が先端部28により完全に密封された状
態でフィルター22上に固相試薬23が保存され、カー
トリッジターンテーブル2に格納されている。そして、
このカートリッジをアーム機構7によりカートリッジタ
ーンテーブル2から反応ターンテーブル1に移送すると
きに、ダスト11において先端部28を取り除き、反応
ターンテーブル1の次のポジションにおいて保存液を吐
き出し、洗浄を行うようにしている。
次に本発明に係る自動免疫測定装置の流系を基に動作を
説明する。
説明する。
第3図は全体の流系図であり、31はドレインタンク、
32はコンプレッサー、33はインアウト切り替えバル
ブ、34〜37.51と53はポンプ、38〜41はタ
ンク、42は3方ジヨイント、43は抵抗管、44はプ
レヒーター、45.52と54はバルブ、46はミキサ
ーを示す。
32はコンプレッサー、33はインアウト切り替えバル
ブ、34〜37.51と53はポンプ、38〜41はタ
ンク、42は3方ジヨイント、43は抵抗管、44はプ
レヒーター、45.52と54はバルブ、46はミキサ
ーを示す。
流系は、第3図に示すように29ポジシヨンの反応ター
ンテーブル1において、ポジション■を基点とし、サン
プルや試薬の分注、洗浄等の流系が接続されている。基
点のポジション■で、始めにカートリッジを反応ターン
テーブルにセットし、この反応ターンテーブルを予め定
められた2種類のポジション数ずつ交互に回転させる。
ンテーブル1において、ポジション■を基点とし、サン
プルや試薬の分注、洗浄等の流系が接続されている。基
点のポジション■で、始めにカートリッジを反応ターン
テーブルにセットし、この反応ターンテーブルを予め定
められた2種類のポジション数ずつ交互に回転させる。
反応後のカートリッジは検出器10に移される。
まず、第3図において反応ターンテーブルlに接続され
る各流系を説明する。
る各流系を説明する。
ドレイタンク31は、反応ターンテーブル1の各カー)
+7ツジから廃棄された保存液、洗浄液を収容するた
めのものであり、反応ターンテーブル1の各ポジション
の下方に環状に設けたドレイン路に接続される。コンプ
レッサ32は、保存液の廃棄やその直後の洗浄、B/F
分離での洗浄、ディスポチップの先端に残ったサンプル
や試薬の廃棄、洗浄のために加圧空気を供給するもので
ある。
+7ツジから廃棄された保存液、洗浄液を収容するた
めのものであり、反応ターンテーブル1の各ポジション
の下方に環状に設けたドレイン路に接続される。コンプ
レッサ32は、保存液の廃棄やその直後の洗浄、B/F
分離での洗浄、ディスポチップの先端に残ったサンプル
や試薬の廃棄、洗浄のために加圧空気を供給するもので
ある。
タンク38は発光補助試薬、タンク39と40は、発光
試薬をそれぞれ収容するためのものであり、インアウト
切り替えバルブ33とポンプ34〜37は、発光補助試
薬、希釈液、発光試薬を送るためのものである。希釈液
及び洗浄液には、タンク41に収納された!ll液液用
いられる。この緩衝液としては免疫反応を促進させる界
面活性剤や糖等の混合液が用いられる。これらの注入方
法の詳細については後述する。
試薬をそれぞれ収容するためのものであり、インアウト
切り替えバルブ33とポンプ34〜37は、発光補助試
薬、希釈液、発光試薬を送るためのものである。希釈液
及び洗浄液には、タンク41に収納された!ll液液用
いられる。この緩衝液としては免疫反応を促進させる界
面活性剤や糖等の混合液が用いられる。これらの注入方
法の詳細については後述する。
洗浄工程では、バルブ45が選択的に開閉され、緩衝液
がタンク41から抵抗管43、ブレヒータ44、バルブ
45を通してそれぞれのポジション■、■、■のカート
リッジに注入される。そして次に、エアバルブが選択的
に開閉され、コンプレッサ32からエアバルブを通して
それぞれのポジション■、■、■のカートリッジに加圧
空気が供給される。通常の洗浄では、洗浄液(緩衝液)
の注入、加圧空気による廃棄が4回行われる。
がタンク41から抵抗管43、ブレヒータ44、バルブ
45を通してそれぞれのポジション■、■、■のカート
リッジに注入される。そして次に、エアバルブが選択的
に開閉され、コンプレッサ32からエアバルブを通して
それぞれのポジション■、■、■のカートリッジに加圧
空気が供給される。通常の洗浄では、洗浄液(緩衝液)
の注入、加圧空気による廃棄が4回行われる。
ポジション■では、サンドイツチ法と競合反応法が適用
できるように、サンプルの分注流系と標識抗体試薬の分
注流系が接続されるが、これらは、それぞれサンプルカ
ップ或いは試薬ボトルから専用のディスポチップを使っ
て吸入、分注している。
できるように、サンプルの分注流系と標識抗体試薬の分
注流系が接続されるが、これらは、それぞれサンプルカ
ップ或いは試薬ボトルから専用のディスポチップを使っ
て吸入、分注している。
この場合、先端にサンプル或いは試薬が残留するので、
それらを加圧空気により吹き出すように加圧空気の流系
が接続されている。それが、サンプル分注系ではバルブ
52の流系であり、ディスポチップの先端をサンプルタ
ーンテーブル4のサンプルカップの中に挿入し、サンプ
リングポンプ51によりサンプルを吸引しポジション■
のカートリッジに分注した後にこの流系に切り替えられ
る。
それらを加圧空気により吹き出すように加圧空気の流系
が接続されている。それが、サンプル分注系ではバルブ
52の流系であり、ディスポチップの先端をサンプルタ
ーンテーブル4のサンプルカップの中に挿入し、サンプ
リングポンプ51によりサンプルを吸引しポジション■
のカートリッジに分注した後にこの流系に切り替えられ
る。
同様に、試薬を分注する場合にも、ディスボチッブの先
端を試薬ターンテーブル3の試薬ボトルの中に挿入し、
試薬ポンプ53により吸入、分注した後にバルブ54に
より加圧空気の流系に切り替えられる。また、内圧が上
がると吸引量が安定しなくなるので、大気開放用のバル
ブも設けられている。
端を試薬ターンテーブル3の試薬ボトルの中に挿入し、
試薬ポンプ53により吸入、分注した後にバルブ54に
より加圧空気の流系に切り替えられる。また、内圧が上
がると吸引量が安定しなくなるので、大気開放用のバル
ブも設けられている。
次に、反応ターンテーブルlのポジションの回転に沿っ
て説明する。
て説明する。
ポジション■でアーム機構7が動作してカートリッジタ
ーンテーブル2から新しいカートリッジを搬送し先端部
を取り除いてセットする。
ーンテーブル2から新しいカートリッジを搬送し先端部
を取り除いてセットする。
ポジション■に新しいカートリッジをセットするときに
第2図に示す先端部28をカートリッジから取り除いて
も、それだけでは中の保存液が廃棄されないので、ポジ
ション■でカートリッジの上端開口部から加圧空気を送
りカー) IJッジの中の保存液を廃棄する。
第2図に示す先端部28をカートリッジから取り除いて
も、それだけでは中の保存液が廃棄されないので、ポジ
ション■でカートリッジの上端開口部から加圧空気を送
りカー) IJッジの中の保存液を廃棄する。
次のポジション■で洗浄バルブをカー) IJッジの上
端開口部にセットして洗浄液と加圧空気を交互に例えば
4回繰り返し送ることによって洗浄を行う。
端開口部にセットして洗浄液と加圧空気を交互に例えば
4回繰り返し送ることによって洗浄を行う。
続いてポジション■で、希釈液を添加する。これは、血
液や血清、尿等を直接注入すると、種々の成分が免疫反
応に邪魔をする場合があるので、免疫反応を起こしやす
くするものである。
液や血清、尿等を直接注入すると、種々の成分が免疫反
応に邪魔をする場合があるので、免疫反応を起こしやす
くするものである。
そして、ポジション■でサンプリングカップ力)らディ
スポチップでサンプルを吸引し、カートリッジに分注す
る。
スポチップでサンプルを吸引し、カートリッジに分注す
る。
その後は、1ポジシヨンずつ回転する毎に振動を与え撹
拌することにより免疫反応(第1反応)を促進させ、ポ
ジション0で給水、加圧空気による排水を4回繰り返し
洗浄を行うことによって、先に説明したB/F分離を行
う。
拌することにより免疫反応(第1反応)を促進させ、ポ
ジション0で給水、加圧空気による排水を4回繰り返し
洗浄を行うことによって、先に説明したB/F分離を行
う。
ここでB/F分離後の動作について詳しく説明すると、
まず、ポジション0から20ポジシヨン順方向へ回転さ
せ、−旦ポジション■で止めてバッファとして希釈液(
緩衝液)を注入し、さらに■0ポジション順方向へ回転
させて前回より1ポジシヨン先のポジション■まで進め
る。ここで振動による撹拌を行った後、同様に20ポジ
シヨン順方向へ回転させて一旦ポジション■で止めて標
識抗体の分注を行う。希釈液は、プレヒートして反応温
度を安定化し、免疫反応を円滑に行い促進させる作用が
あると共に次の標識試薬を分注した場合に撹拌効果を高
める。これがサンドイツチ法の場合の操作である。
まず、ポジション0から20ポジシヨン順方向へ回転さ
せ、−旦ポジション■で止めてバッファとして希釈液(
緩衝液)を注入し、さらに■0ポジション順方向へ回転
させて前回より1ポジシヨン先のポジション■まで進め
る。ここで振動による撹拌を行った後、同様に20ポジ
シヨン順方向へ回転させて一旦ポジション■で止めて標
識抗体の分注を行う。希釈液は、プレヒートして反応温
度を安定化し、免疫反応を円滑に行い促進させる作用が
あると共に次の標識試薬を分注した場合に撹拌効果を高
める。これがサンドイツチ法の場合の操作である。
すなわち、10ポジシヨンのピッチを回転させる操作と
20ポジシヨンのピッチを回転させる操作を交互に行う
ことにより、前回のポジションから1ポジシヨンずつ進
めるようにする。このようにするので、サンドイツチ法
でもサンプルの分注のポジション■で、II識試薬の分
注を行う装置構成を採用することができる。その結果、
ポジション■で同時にサンプルと標識抗原の分注を行う
ように回転操作を制御することによって競合反応法の場
合も同様に同じ流系により免疫測定を行うことができる
。
20ポジシヨンのピッチを回転させる操作を交互に行う
ことにより、前回のポジションから1ポジシヨンずつ進
めるようにする。このようにするので、サンドイツチ法
でもサンプルの分注のポジション■で、II識試薬の分
注を行う装置構成を採用することができる。その結果、
ポジション■で同時にサンプルと標識抗原の分注を行う
ように回転操作を制御することによって競合反応法の場
合も同様に同じ流系により免疫測定を行うことができる
。
その後、ポジション0まで第1反応と同様にlOポジシ
ョンのピッチと20ポジシヨンのピッチにより交互に回
転させながら振動を与えて撹拌することにより免疫反応
(第2反応)を促進させ、ポジション■で再び洗浄によ
るB/F分離を行う。
ョンのピッチと20ポジシヨンのピッチにより交互に回
転させながら振動を与えて撹拌することにより免疫反応
(第2反応)を促進させ、ポジション■で再び洗浄によ
るB/F分離を行う。
そして、ポジション■で発光を強めるための発光補助試
薬を添加し、始めのポジション■で検出器10にカート
リッジを移す。検出器10では、カートリッジに発光試
薬を添加した直後に発光量を測定する。
薬を添加し、始めのポジション■で検出器10にカート
リッジを移す。検出器10では、カートリッジに発光試
薬を添加した直後に発光量を測定する。
上記の動作において、例えばポジション■に12秒間静
止してから順方向に20ポジシヨンのピッチで回転して
ポジション■で12秒間静止し、次にポジション■まで
10ポジシヨンピツチで回転して、24秒間かけてポジ
ション■からポジション■・・・とlポジションずつ進
めると、ポジション■においては、12秒間でまずカー
トリッジを検出器10に移し、新しいカートリッジをカ
ートリッジターンテーブル2から持ってきてセットする
ことになる。この場合には、第1反応に約3分、第2反
応に約5分を要し、全体として10分前後で1サンプル
の免疫反応測定を行うことができ、凡そ150テス)/
hrの測定速度を実現することができる。
止してから順方向に20ポジシヨンのピッチで回転して
ポジション■で12秒間静止し、次にポジション■まで
10ポジシヨンピツチで回転して、24秒間かけてポジ
ション■からポジション■・・・とlポジションずつ進
めると、ポジション■においては、12秒間でまずカー
トリッジを検出器10に移し、新しいカートリッジをカ
ートリッジターンテーブル2から持ってきてセットする
ことになる。この場合には、第1反応に約3分、第2反
応に約5分を要し、全体として10分前後で1サンプル
の免疫反応測定を行うことができ、凡そ150テス)/
hrの測定速度を実現することができる。
なお、lサンプルで複数項目の測定を行う場合には、ポ
ジション■において、それぞれの測定項目に対応した固
相試薬のカートリッジがカートリッジターンテーブルに
セットされ、それらのカートリッジに同じサンプルが分
注され、さらに測定項目に対応した試薬が分注される。
ジション■において、それぞれの測定項目に対応した固
相試薬のカートリッジがカートリッジターンテーブルに
セットされ、それらのカートリッジに同じサンプルが分
注され、さらに測定項目に対応した試薬が分注される。
そして、検出器10で発光量が測定されて終了となる。
再度測定が必要な場合には、残りのディスポチップを使
ってサンプルの分注を行う。そのために、第1図のサン
プルターンテーブルにおいて各サンプル対応に2個のデ
ィスポチップを格納している。再測定は、測定値が予め
設定された範囲を著しく逸脱したような異常値を示す場
合だけでなく、−次スクリーニングとして予め測定項目
毎に判定値が与えられ、その判定結果から次の測定項目
が設定されている場合等がある。例えば血清肝炎の検査
において、まず、HBS抗原の検査を行い、その結果で
陽性となった場合にHBEやHBS抗原の検査を行う如
きである。また、使い揄でのディスポチップを用いてい
る理由は、免疫分析の場合には非常に幅が広く、従来の
ピペットでは完全な洗浄ができないためである。
ってサンプルの分注を行う。そのために、第1図のサン
プルターンテーブルにおいて各サンプル対応に2個のデ
ィスポチップを格納している。再測定は、測定値が予め
設定された範囲を著しく逸脱したような異常値を示す場
合だけでなく、−次スクリーニングとして予め測定項目
毎に判定値が与えられ、その判定結果から次の測定項目
が設定されている場合等がある。例えば血清肝炎の検査
において、まず、HBS抗原の検査を行い、その結果で
陽性となった場合にHBEやHBS抗原の検査を行う如
きである。また、使い揄でのディスポチップを用いてい
る理由は、免疫分析の場合には非常に幅が広く、従来の
ピペットでは完全な洗浄ができないためである。
次に、発光試薬の注入方法について詳細に説明する。
前述したように、タンク38は発光補助試薬、タンク3
9と40は、発光試薬をそれぞれ収容しており、インア
ウト切り替えバルブ33とポンプ34〜37を介して発
光補助試薬、希釈液、発光試薬を送っている。希釈液及
び洗浄液には、タンク41に収納された緩衝液が用いら
れる。この緩衝液としては免疫反応を促進させる界面活
性剤や糖等の混合液が用いられる。タンク41は、密閉
構造にしてコンプレッサ32から加圧空気を供給して圧
力を加えることによって送液するように構成しており、
洗浄液は抵抗管43、ブレヒータ44、バルブ45を通
し安定した所定の温度と流量になるように制御すること
によって反応をしやすくし反応の安定化を図っている。
9と40は、発光試薬をそれぞれ収容しており、インア
ウト切り替えバルブ33とポンプ34〜37を介して発
光補助試薬、希釈液、発光試薬を送っている。希釈液及
び洗浄液には、タンク41に収納された緩衝液が用いら
れる。この緩衝液としては免疫反応を促進させる界面活
性剤や糖等の混合液が用いられる。タンク41は、密閉
構造にしてコンプレッサ32から加圧空気を供給して圧
力を加えることによって送液するように構成しており、
洗浄液は抵抗管43、ブレヒータ44、バルブ45を通
し安定した所定の温度と流量になるように制御すること
によって反応をしやすくし反応の安定化を図っている。
同様に発光試薬においても、ミキサー46にヒーターを
付加することによって発光反応時の温度の安定化を図る
こともできる。
付加することによって発光反応時の温度の安定化を図る
こともできる。
例えばインアウト切り替えバルブ33が図示の状態にお
けるポンプ吸引工程では、ポンプ34により発光補助試
薬がタンク38から吸引され、ポンプ35により希釈液
(水)がタンク41から吸引され、同様にポンプ36.
37により発光試薬がタンク39.40から同時に吸引
される。そして、インアウト切り替えバルブ33が切り
替わり(上半分が右方ヘシフトし)ポンプ吐出工程に入
ると、発光補助試薬と希釈液は、ブレヒータ44を通し
て所定の温度に温められてそれぞれポジション■、■の
カートリッジに注入される。また、発光試薬は、3方ジ
ヨイント42、ミキサー46を通してミキシングされ、
検出器IOのカートリッジに注入される。
けるポンプ吸引工程では、ポンプ34により発光補助試
薬がタンク38から吸引され、ポンプ35により希釈液
(水)がタンク41から吸引され、同様にポンプ36.
37により発光試薬がタンク39.40から同時に吸引
される。そして、インアウト切り替えバルブ33が切り
替わり(上半分が右方ヘシフトし)ポンプ吐出工程に入
ると、発光補助試薬と希釈液は、ブレヒータ44を通し
て所定の温度に温められてそれぞれポジション■、■の
カートリッジに注入される。また、発光試薬は、3方ジ
ヨイント42、ミキサー46を通してミキシングされ、
検出器IOのカートリッジに注入される。
ところで発光試薬は、標識物質によって異なるが、例え
ばTクリジニウム(A cridinium)の場合に
は過酸化水素とアルカリの混合液、ルミノール(Lu制
nol)の場合には過酸化水素とFeイオンの混合液、
ジオキセトン(1,2−D 1oxejone)の場合
には過酸化水素と蛍光物質との混合液が用いられるが、
これらは短時間で反応してしまうので、発光検出の直前
において、それぞれのボトルから3方ジヨイント42、
ミキサー46を通して同時に注入している。このように
検出を行う直前において発光試薬を混合するので、発光
試薬は安定した状態で保持することができる。
ばTクリジニウム(A cridinium)の場合に
は過酸化水素とアルカリの混合液、ルミノール(Lu制
nol)の場合には過酸化水素とFeイオンの混合液、
ジオキセトン(1,2−D 1oxejone)の場合
には過酸化水素と蛍光物質との混合液が用いられるが、
これらは短時間で反応してしまうので、発光検出の直前
において、それぞれのボトルから3方ジヨイント42、
ミキサー46を通して同時に注入している。このように
検出を行う直前において発光試薬を混合するので、発光
試薬は安定した状態で保持することができる。
なお、装置の運転を比較的長時間停止させた後、運転を
開始する場合には、3方ジヨイント42から先の管内に
残されている発光試薬が劣化しているので、この残され
ていた発光試薬を予め廃棄する必要がある。そのために
は、発光試薬供給ピペットを検出位置とは別の位置に置
かれたドレインに移動し、ポンプ36.37及びインア
ウト切り替えバルブ33を操作させて前記残されている
発光試薬を吐き出し、それから新しい発光試薬をカート
リッジへ注入するようにすれば良い。
開始する場合には、3方ジヨイント42から先の管内に
残されている発光試薬が劣化しているので、この残され
ていた発光試薬を予め廃棄する必要がある。そのために
は、発光試薬供給ピペットを検出位置とは別の位置に置
かれたドレインに移動し、ポンプ36.37及びインア
ウト切り替えバルブ33を操作させて前記残されている
発光試薬を吐き出し、それから新しい発光試薬をカート
リッジへ注入するようにすれば良い。
前述の説明は本発明の一例であり、実施にあたっては幾
多の変形が考えられる。例えば、上記実雄側では2つの
試薬の混合について説明したが、3試薬以上であっても
よい。また、同一カートリッジ内に2種以上の試料が存
在し、それらを別々に検出するために別々な分注ノズル
を用意し、各試薬を時間差をおいて注入することにより
各個別に検出することもできる。
多の変形が考えられる。例えば、上記実雄側では2つの
試薬の混合について説明したが、3試薬以上であっても
よい。また、同一カートリッジ内に2種以上の試料が存
在し、それらを別々に検出するために別々な分注ノズル
を用意し、各試薬を時間差をおいて注入することにより
各個別に検出することもできる。
さらに1種の測定対象物とその他の存在するバックグラ
ウンドがある場合に、第1の発光試薬の分注を行って予
め目的物質以外のバックグラウンド物質を発光させた後
、第2の試薬を分注し、目的発光物質の発光を検出する
こともでき、このことによりバックグラウンドを除去す
ることができる。
ウンドがある場合に、第1の発光試薬の分注を行って予
め目的物質以外のバックグラウンド物質を発光させた後
、第2の試薬を分注し、目的発光物質の発光を検出する
こともでき、このことによりバックグラウンドを除去す
ることができる。
また、分注ノズルおよび検出器の蓋、カートリッジのチ
ャックを一体にしてアームを構成し、このアームで第3
図に示すように回転円弧状に動かし、検出すべきカート
リッジの直前のタイミングでカートリッジのない反応タ
ーンテーブルの孔部分に発光試薬を予備吐出し、その後
分析すべきカートリッジを検出器に移送し、所定のタイ
ミングで発光試薬を分注して発光を検出させれば、デー
タの安定性を保持することができる。
ャックを一体にしてアームを構成し、このアームで第3
図に示すように回転円弧状に動かし、検出すべきカート
リッジの直前のタイミングでカートリッジのない反応タ
ーンテーブルの孔部分に発光試薬を予備吐出し、その後
分析すべきカートリッジを検出器に移送し、所定のタイ
ミングで発光試薬を分注して発光を検出させれば、デー
タの安定性を保持することができる。
以上のように本発明によれば、複数の発光試薬を用意し
、発光検出の直前において混合して試料に注入するよう
にしたので、試薬の安定性が得られ、その結果安定な発
光光量が得られる。また、発光試薬を予備吐出すること
により残留物による影響を除去し、正確な測定ができる
。さらに異なる試薬を別々な分注ノズルで時間差を右い
て注入することにより複数成分の検出や目的物質以外の
バックグラウンドの除去を行うことが可能となり1、安
定したデータの収集が可能とある。
、発光検出の直前において混合して試料に注入するよう
にしたので、試薬の安定性が得られ、その結果安定な発
光光量が得られる。また、発光試薬を予備吐出すること
により残留物による影響を除去し、正確な測定ができる
。さらに異なる試薬を別々な分注ノズルで時間差を右い
て注入することにより複数成分の検出や目的物質以外の
バックグラウンドの除去を行うことが可能となり1、安
定したデータの収集が可能とある。
第1図は本発明に係る自動免疫測定装置の1実施例構成
を示す図、第2図は本発明に係る自動免疫測定装置に使
用されるカートリッジの1実施例を示す図、第3図は全
体の流系図、第4図はサンドイツチ法による測定原理を
説明するための図、第5図は競合法による測定原理を説
明するための図である。 1・・・反応ターンテーブル、2・・・カートリッジタ
ーンテーブル、3・・・試薬ターンテーブル、4・・・
サンプルターンテーブル、5・・・サンプルカップ、6
・・・ディスポチップ、7〜9・・・アーム機構、IO
・・・検出器、11・・・ダスト、12・・・制御処理
部、21・・・カートリッジ本体、22・・・フィルタ
ー、23・・・固相試薬、24・・・排出孔、25・・
・開口部、26・・・アルミキャップ、27・・・オリ
メ、28・・・先端部。 第2図 出 願 人 日本電子株式会社 代理人 弁理士 蛭 川 昌 信(外5名)手 続 補 正 書 (方式) 事件の表示 平成 1年特許願第062753号 2゜ 発明の名称 自動免疫測定装置の発光試薬注入装置 3゜ 補正をする者 事件との関係
を示す図、第2図は本発明に係る自動免疫測定装置に使
用されるカートリッジの1実施例を示す図、第3図は全
体の流系図、第4図はサンドイツチ法による測定原理を
説明するための図、第5図は競合法による測定原理を説
明するための図である。 1・・・反応ターンテーブル、2・・・カートリッジタ
ーンテーブル、3・・・試薬ターンテーブル、4・・・
サンプルターンテーブル、5・・・サンプルカップ、6
・・・ディスポチップ、7〜9・・・アーム機構、IO
・・・検出器、11・・・ダスト、12・・・制御処理
部、21・・・カートリッジ本体、22・・・フィルタ
ー、23・・・固相試薬、24・・・排出孔、25・・
・開口部、26・・・アルミキャップ、27・・・オリ
メ、28・・・先端部。 第2図 出 願 人 日本電子株式会社 代理人 弁理士 蛭 川 昌 信(外5名)手 続 補 正 書 (方式) 事件の表示 平成 1年特許願第062753号 2゜ 発明の名称 自動免疫測定装置の発光試薬注入装置 3゜ 補正をする者 事件との関係
Claims (2)
- (1)反応管内の免疫反応生成物に発光試薬を注入して
化学発光させることにより免疫反応を測定する自動免疫
測定装置において、複数の発光試薬をそれぞれ収納した
容器と、各容器内の発光試薬を混合させる混合手段と、
混合した試薬を反応管に注入する注入手段とを備え、発
光させる直前に複数の試薬を混合注入するようにしたこ
とを特徴とする自動免疫測定装置の発光試薬注入装置。 - (2)発光試薬注入手段により発光試薬を予備吐出する
ことを特徴とする請求項1記載の自動免疫測定装置の発
光試薬注入装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6275389A JPH02242163A (ja) | 1989-03-15 | 1989-03-15 | 自動免疫測定装置の発光試薬注入装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6275389A JPH02242163A (ja) | 1989-03-15 | 1989-03-15 | 自動免疫測定装置の発光試薬注入装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02242163A true JPH02242163A (ja) | 1990-09-26 |
Family
ID=13209479
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6275389A Pending JPH02242163A (ja) | 1989-03-15 | 1989-03-15 | 自動免疫測定装置の発光試薬注入装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH02242163A (ja) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52123692A (en) * | 1976-04-10 | 1977-10-18 | Omron Tateisi Electronics Co | Chemical analyzer |
| JPS55131754A (en) * | 1979-04-03 | 1980-10-13 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | Method and dvice for detecting fluorescent substance |
| JPS55155234A (en) * | 1979-05-22 | 1980-12-03 | Aloka Co Ltd | Analyzer of trace component in test piece |
| JPS62133355A (ja) * | 1985-12-06 | 1987-06-16 | Nitsuteku:Kk | Eia自動分析装置 |
| JPS6441843A (en) * | 1987-08-07 | 1989-02-14 | Niti On Med Phys Instr Mfg | Flow cell |
-
1989
- 1989-03-15 JP JP6275389A patent/JPH02242163A/ja active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52123692A (en) * | 1976-04-10 | 1977-10-18 | Omron Tateisi Electronics Co | Chemical analyzer |
| JPS55131754A (en) * | 1979-04-03 | 1980-10-13 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | Method and dvice for detecting fluorescent substance |
| JPS55155234A (en) * | 1979-05-22 | 1980-12-03 | Aloka Co Ltd | Analyzer of trace component in test piece |
| JPS62133355A (ja) * | 1985-12-06 | 1987-06-16 | Nitsuteku:Kk | Eia自動分析装置 |
| JPS6441843A (en) * | 1987-08-07 | 1989-02-14 | Niti On Med Phys Instr Mfg | Flow cell |
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