JPH02288815A - 植物根被覆用組成物及び被覆方法 - Google Patents

植物根被覆用組成物及び被覆方法

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JPH02288815A
JPH02288815A JP1297855A JP29785589A JPH02288815A JP H02288815 A JPH02288815 A JP H02288815A JP 1297855 A JP1297855 A JP 1297855A JP 29785589 A JP29785589 A JP 29785589A JP H02288815 A JPH02288815 A JP H02288815A
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Aaru Fuosu Kiyarii
キャリー アール.フォス
An Tefuto Jiyatsukurin
ジャックリン アン テフト
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    • A01C—PLANTING; SOWING; FERTILISING
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は植物の根の成長促進のための被覆処理に関する
。更に詳しくは、本発明は、植物の根組織に有益な微生
物の感染または定着を促進すると共に、病原微生物によ
る感染を選択的に阻害し得るポリマー コーティングに
関する。
従来の技術 嚢状体−樹枝状体(VcsicuLar arbusc
ular; VA)菌根菌(本明細書においてrVA菌
根菌」という)類は多くの植物と有益な共生関係を形成
する。この菌類は宿主植物に植物病原菌に対する抵抗性
を付与し、且つ植物が土壌から養分、特にリンを吸収す
るのを助ける。VA菌根菌類と有益な共生関係を形成可
能な作物の多くは、根圏に見出される一般の病原性真菌
類に感受性を示す。
病原性真菌類又は他の病原菌に感染した土壌を処理する
典型的な方法は、圃場全体を殺菌剤又はくん型剤で処理
することである。メチル ブロマイドのような薬剤を使
用する最も一般的なくん蒸方法では、植物病原菌のみで
なくVA菌根菌類も駆除してしまう。さらに、近年これ
らの(ん型剤に関連する重大な健康上及び安全上の問題
が生じ、このため、連続使用を禁止又は厳しく制限する
必要が生じてきている。一方、くん型剤に代わり得る殺
菌剤の多くは高価なため、圃場全体への適用は不可能で
ある。
VA菌根菌類による有益な感染をもたらす種々の方法が
開示されてきた。例えば、Nemec、Trop。
Agric、 (Trinidad)60.97−10
1(1983)には、植物根をVAA根菌類及び固着剤
を含む接種制料に浸漬することによりカンキツ類の苗に
接種する方法が記載されており、VAA根菌類に対する
種々のくん型剤及び殺菌剤の効果が研究されている(例
えばMenge、l)hytopathology、7
2.1125−1132(1982) ;Ncmcc、
Can、J、Bot、58,522−526(1980
)参照)。さらにJohnson、C,、R,et a
l、、j、Environ 1lort、3,166−
168 (1985)は、VA菌菌根菌接種科料ための
担体として親水性ポリマーを使用することを報告してい
る。彼等の実験では、i)鉢植え植物の土壌中接種材料
をに混合する方法; if)挿し木の相系下に直接接種
材料を配置する方法; 1ii)水酸化カリウムにより
加水分解したデンプン加水分解ポリアクリロニトリル 
ポリマーである“テラソルブ(Terrasorb)”
 (Industrial 5ervicesInte
rnational 、Bradenton 、PL)
  の 1.  5g/100mI!−水濃度のスラリ
ーに根系を浸漬する方法; iv)カリウム プロペノ
エート共重合体から成るビテラ プラント ゲル(Vi
tcrra plantget;Nepera Che
mical Company IIarriman、N
Y )の1 g/l 00ml!水濃度のスラリーに根
系を浸漬する方法の4つの方法が採用されている。Jo
hnsonの報告では上記特定ポリマー及び浸漬方法は
、公知の他の方法に比べて低い接種レベルしか得られて
いない。さらに、Bcswetherick、J、T、
 et al、。
Trans、Br、Mycol、Soc、 89.80
3−805(1987)には、根を菌体が付着する四角
いセロファンの間に挟むことによる、VAA根菌の根へ
の接種について記され、接種についての他の従来技術が
多く引用されている。
11wang、Plant Disease、72.4
48−452. (1988)には、メタラキシルで種
子を処理した後、VAA根菌類を接種した土壌に植え付
けることが記されている。
Groth et al、、PIant Diseas
e、67.1377−1378(1983)には、メタ
ラキシル及びVAA根菌類で処理した土壌の使用につき
、植物成育に対する影響が記されている。5tride
r、Plant Disease rcportcr、
61゜746−748 (1977)には、根の浸漬液
にベノミルを添加しりジフトニア(R11izocto
nia)根腐れを防止することが記されている。西ドイ
ツ国特許第128゜396号(1977)には、拮抗微
生物を増殖させるための栄養物質及び殺菌剤で種子をコ
ートする方法が記されている。Leong、Ann、R
ev。
Phytopatol、 24.187−209(19
86)は、植物病原菌の生物的制御におけるシデロホア
の役割を総説している。Melero−Vara at
 al、、Plant Disease、66゜132
−135 (1982)は、ベト病を制御するためのメ
タラキシルを含む種子加工法を述べている。
移植中に重合物質を用いて苗の根をコートし、乾燥を防
ぐ事も知られている(例えばllamiltonet 
al、、Tobacco International
、184.88−91(1982) ;西ドイツ国特許
第1945110号(1970) ;日本国特許第57
−083230号(1982) ;日本国特許第54−
117734号(1979)参照)。さらに、ジャンプ
(Jung)による米国特許第4434231号及び第
4755468号は、架橋ポリマーによって根系をコー
トする種々の方法について述べている。しかし、架橋は
胞子の発芽及び感染を抑制する。
発明が解決しようとする問題点 有益なVAA根菌類の増殖及び植物病原菌による感染防
止についての有意な研究が成されているにも拘らず、植
物の生育の促進及び移植苗の生存数の増大を図るための
より改善された経済的な植物処理法の出現が、要望され
続けている。本発明は、このような方法の幾つかを提供
しようとするものである。
問題を解決するための手段 本発明者の研究によれば、植物根上に非植物毒性の被覆
を形成し得るポリマー、VAA根菌感染原体及び、病原
菌の生育の選択的抑制剤を含む水性組成物で植物の根を
被覆処理すると、VA菌根菌又は病原菌生育抑制剤のみ
で単独処理した場合に比べて植物は優れた生育を示すこ
とが見出された。しかも上記処理方法は、圃場全体を処
理する従来の方法に比較して病原菌生育抑制剤の適用が
顕著に減少する点からも特筆すべきものである。
このように、本発明は、くん型剤と比較して植物当り安
価に、性質に悪影響を与えることなく、経済的に病原菌
生育抑制剤を適用することを可能にする。本発明はまた
、VA菌根菌感染原体及び病原菌生育抑制剤を含むポリ
マー製剤で被覆された植物根を得る方法にも係わる。こ
の方法では接種のために乾燥ポリマーが使用される。
病原菌生育抑制剤含有接種材料に関連した態様では、本
発明は(a)根に植物毒性の無い被覆を形成可能なポリ
マー;(b)j−記被覆の形成により根に感染し得るV
A菌根菌感染原体;及び(c)VA菌根菌による感染に
対して病原菌による根の感染を選択的に阻害する能力の
ある病原菌生育抑制剤の3者を含有する植物根被覆用の
組成物に係わる。
これに関連して、本発明は上記根被覆組成物により根を
被覆することから成る、植物根上に生育促進ポリマーの
被覆を形成し植物の生育促進を図る方法に係わる。
又、これに関して、本発明はポリマー、根に感染させる
VA菌根菌感染原体及び根に対する病原菌の感染を選択
的に阻害する病原菌生育抑制剤を含む非植物毒性被覆を
根に有する植物に係わる。
また本発明はポリマー及び根に対する病原菌の感染を選
択的に阻害する病原菌生育抑制剤を含む非植物毒性被覆
を根に有し、且つVA菌根菌類により感染されている植
物にも係わる。本発明の上記態様は、(a)植物根に非
植物毒性の被覆を形成可能なポリマー (b)VA菌根
菌感染原体、及び(c)根に対するVA菌根菌類の感染
に比較して病原菌の感染を選択的に阻害する病原菌生育
抑制剤の各成分を含有する、植物の生育促進性の根被覆
用組成物を製造する為のキットを包含する。
乾燥ポリマーを用いてVA菌根菌感染をおこなわせるポ
リマー被覆を提供することに関連する本発明の態様の1
つは、VA菌根菌感染原体と病原菌生育抑制剤を含有す
る親水性ポリマーの乾燥組成物に係わる。該乾燥組成物
は前記a)ポリマーb)VA菌根菌感染原体及びC)病
原菌生育抑制剤を含有する混合物を不活性な基体表面−
にに被覆し乾燥することにより得られる。乾燥組成物は
次いで、表面から剥がし、根系を包むために使用される
。これら可撓性ポリマー/胞子のシートを使用する本発
明の方法においては、該シートは根に取付ける。もう一
つの態様では乾燥ポリマーを非透過性、非弾性表面上に
粉末として展延し、乾燥ポリマー粉末で根をプレコート
する。次いで、水性懸濁液中に浸漬することによりVA
菌根菌感染原体及び病原菌生育抑制剤を根に付着させる
。
上記の様に関連の態様では、本発明はこれら方法で接種
された植物及びこれらの方法を実施するに有用な組成物
に係わる。
本明細書に於て用いられる下記用語は、次の定義に従う
。
「非植物毒性」 :ポリマーに対して適用されている用
語で、植物の死又は重大な損傷を生起させない性質を意
味する。
「親水性」なる用語は、本発明に使用されるある種のポ
リマーを表現する時に使用される。ここで用いられる「
親水性」は、ポリマーが十分に水と親和し、水が乾燥ポ
リマーの被覆を透過できることを意味する。ここで開示
されたある種のポリマーは「生物的分解性」でもあり、
相当の時間の経過後に環境から消失可能である。
さらに、乾燥ポリマー フィルムが可撓性被覆を形成す
る、本発明方法で用いられるポリマーの性質は根系の周
囲を包み得る可撓性フィルムを与えるものである。乾燥
形態で使用した時、例えば根に粉末としてプレコートす
る時に満足し得るポリマーであっても、その物理的性質
から、根を包むに際し望ましいフィルムを形成できない
ものは、フィルムとして満足すべきものでは無い。本発
明において、ポリマーの可撓性フィルム形成性は実験に
より容易に決定できる。必要なのは、ポリマーの溶液を
テフロン被覆アルミニウム ボイルの様な不活性な表面
上に被覆し、被覆した物質を乾燥し、得られた層が容易
に剥離可能で可撓性フィルムを形成し得るか否かを確認
するだけでよい。
このように、本発明の種々の方法に使用され得る非植物
毒性の親水性ポリマーには、水に溶解しないが十分に親
水性で水透過性である被覆を形成する、水透過性及び生
物親和性ポリマーが含まれる。溶解度は、少なくとも、
根が病原菌に感染する前にVA菌根菌感染が確立され得
るに十分な時間ポリマーが可溶化に耐える程度でなけれ
ばならない。このようなポリマーとしては、ポリビニル
アルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミ
ド、ポリビニルアセテート、ポリエチレンオキシド、ポ
リビニルプロピオネート、ヒドロキシプロピルメチルセ
ルロース、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセ
ルロースのようなポリマーが含まれる。ガムもまた、本
発明の製剤に於てポリマーとして使用可能であり、特に
キサンタムガムおよびアラビアガムがその例である。澱
粉、特に澱粉とアクリルアミドのコポリマーも使用でき
る。
本発明の全ての態様に使用されるポリマーとしては、ホ
モポリマー、コポリマー、又は2つ又はそれ以上のポリ
マーの共形成体が含まれる。このようなポリマーについ
ては、例えば日本国特許第57083230号(198
2)  ;日本国特許第54117734号(1979
) ;西ドイツ国特許第1945110号(1970)
;東ドイツ特許第128396(1977) ;及びH
e1nrich(1977)。
Informations Poret(No、4:9
4)、pp159−166に記述されている。
本発明の全ての態様に於て上記性質を有するポリマーを
必要とするが、根を可撓性フィルムで包む方法のみが、
このような可撓性フィルムを形成可能な性質をさらに必
要とする。上記のポリマーの幾つか、特にメチルセルロ
ース(MC)、及びヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス(HPMC)が上記方法に使用可能である。
ここで使用されるVA菌根菌類は、ベシキュラアーパス
キュラ−(vesicular arbuscu!ar
;VA)菌根菌類として従来同定された菌類を言う。
多数のVA菌根菌類が知られており、これにはアカウロ
スポラ(Acaulospora) 、エンドボン(E
ndogone)属、ジャイガスポーラ(Gigasp
ora)属、グラシェラ(Glaziella)属、グ
ロマス(Glomus)属、モディセラ(Modice
l Ia)属、コンブレキシペス(conplexi 
pes)属及びエントロフォスポラ(Entropho
spora)属が含まれるが本発明はこれらに限定され
るものではない。特に重要なVA菌根菌はジャイガスポ
ーラ(Gigaspora)属及びグロマス(Glom
us)属である。グロマス(Glomus)の種の例と
しては、特に制限されないが、グロマス イントララデ
ィセス(G、1ntraradices) 、グ07ス
エツニカツム、(G、etunicatum) 、グロ
マス モッセ(G 、 mosseae)グ07ス フ
ァシクラッム(G。
fasciculatum) 、グ07ス ブザティコ
ーラ(G。
deserticola)、グロマス マクロカルパム
(G。
macrocarpum)、グロマス ミクロカルパム
(G。
microcarpum)、グロマス コンストリクタ
ム(G。
constrictum)が含まれる。ジャイガスポー
ラ(Gigaspora)属の例としては、特に制限さ
れないが、ジャイガスポーラ マルガリタ(G、mar
garita)、ジャイガスポーラ ギガンタ(G、g
igantea)、ジャイガスポーラ デシピエンス(
G、decipens)、ジャイガスポーラ グレガリ
ア(G、gregaria)、ジャイガスポーラ カロ
スポラ(G、calospora)及びジャイガスポー
ラ ニグラ(G、nigra)が含まれる(これについ
てはTrappe(1982)円〕ytopathol
ogL72.1102−1108;VA Mycorr
hiza(conway at al、、cds。
1984);Method and Pr1ncipl
es of MycorrhizalResearch
(Schenck ed、1982)参照)。
rVA菌根菌感染原体」は、植物根にVA菌根菌感染を
誘導可能な任意の感染用剤又は組成物について用いられ
る。本発明のVA菌根菌感染原体にはVA菌根菌胞子、
VA菌根菌菌糸、VA菌根菌菌糸チップおよびVA菌根
菌感染根組織が含まれ得るが、これに限定されない。
水性組成物 水性溶液又は懸濁液の形態を有する本発明の植物根被覆
製剤は、非植物毒性の根被覆を形成可能なポリマー、V
A菌根菌感染原体、及び少なくとも1つの植物病原菌に
選択的に活性でありVA菌根菌感染原体による植物の根
の感染は妨げない病原菌生育抑制剤の、3つの成分を含
む。根を浸漬して接種を行うために使用されるこれらの
組成物を製剤化するに際し、製剤化されるポリマーの量
は広い範囲に変化可能であり、適当な量の選択は当業者
の容易に行い得るところである。使用される量は主に、
選定されたポリマー及びそのポリマーの選定された植物
に対する生物的親和性に依存する。しかし一般には、1
種又は2種以上のポリマーを根被覆組成物に約0.5%
〜約20%(W/W)含ませる(しかし、この範囲を越
える濃度も、本発明の範囲から逸脱することなく可能で
ある)。
より典型的には、ポリマーは水性被覆組成物の約1%か
ら約15%(W/W)を占める。特定のポリマーに対す
る適切な範囲の例として、ポリビニルアルコール約2.
5%〜約13%(好ましくは約8%);ポリビニルピロ
リドン約1%〜約5%(好ましくは約2.5%);ポリ
アクリルアミド約1%〜約4%(好ましくは約2%);
ヒドロキシプ1つ ロピルメチルセルロース約1%〜約4%(好ましくは約
2%);メチルセルロース約1%〜約5%(好ましくは
約2.5%)を挙げることができる。
一般に、pH調節は必要ではないが、好ましくはpHは
約4〜約9の間に維持されるのが良い。
これら組成物中に使用される病原菌生育抑制剤としては
、有効濃度で根被覆組成物を形成した時、特に根圏で、
VA菌根菌に比較して植物病原菌の感染又は生育を選択
的に阻害する、化学的又は生物的任意の材料が使用可能
である。ピチウム(Pythium 5pp)属、リゾ
クトニア(I?bizoctoniaspp)属、フィ
トフトラ(Phytophthora 5pp)属又は
フザリウム(Fusarium 5pp)属の様な根の
病原菌を選択的に抑制する化学的薬剤は従来から知られ
ている(例えばMengc、 Phytopathol
ogy(19g2)72゜1125−1132を参照)
。特に好ましい化学的抑制剤は、アルミニウム トリス
(−0−エチルホスホネート)[ホセチルA 1  (
fosetyl Al) ]及びN(2,6−シメチル
フエニル)−N−(メトキシアセチル)−アラニン メ
チルエステル[メタラキシル(metalaxyl)コ
である。N−((トリクロロメチル)チオ)−4−シク
ロヘキセン−1゜2−ジカルボキシミド[キャブタン(
captan) ]のような幾つかの化学的抑制剤は、
低濃度でのみ選択的である(例えばNemec、Can
、J、Bot、(1980)58゜522−528  
; 5utton et al、、Canj、Bot、
(197B)54゜326−333を参照)。
生物的殺菌剤には、本発明の根被覆組成物に含まれた時
、VA菌根菌類に比較して病原菌を選択的に阻害する任
意の生物、例えば、細菌、菌類、又はウィルスが含まれ
る。選択的阻害は直接(例えば病原菌の毒性)又は間接
に(例えば競合、植物免疫の誘導、その他)起こすこと
ができる。特に好ましい生物的病原菌生育抑制剤は、シ
デロホアを産生ずる細菌の様な微生物である。このよう
な細菌は従来技術において良く知られている(例えばL
eong、Ann、Rev、Phytopathol 
、 (1986)24. L87−209; G11l
 et al、、J、Bacteriol、(1988
)170,163−170;Buyer et al、
、J、Biol、Chem、(198B)261,79
1−794;及びdeWeger et al、、J、
Bacteriol、(1986)165゜585−5
94参照)。特に好ましいものは生育促進シュードモナ
ス(Pseudomonas 5pp)属である。病原
菌生育抑制剤は典型的にはシュードモナス フルオレセ
ンス(Pseudomonas fluorescen
s )−シュードモナス プチダ(Pseudomon
as putida)等であり、これらは植物の根に素
早く定着し、植物の収穫量を十分に増大する(例えば5
chroth et al、。
5cience(1982) 216 、1376−1
381参照)。根圏から得られたシュードモナスの適当
な株は、植物病原菌の阻害をスクリーニングすることに
より確認できる(例えばG11l et al、(19
88)上記参照)。適当なシュードモナス株は市販もさ
れている(例えばDagger G ; Ecogen
 Inc、 、Langhorc、PA )。
相液覆製剤に含まれる病原菌生育抑制剤の量もまた、使
用される特定の薬剤の活性に依存して広く変化できる。
適当な濃度の選択は当業者が容易に行い得る。病原菌生
育抑制剤の濃度はスクリーニングにより決定できる。通
常初めに、圃場に使用したときの病原菌生育抑制剤の濃
度に近似した濃度に、根の組成物を規定すると都合がよ
い。より濃い又は薄い濃度はスクリーニングにより最適
化できる。病原菌生育抑制剤溶液中に長時聞損を浸漬す
ると、表面組織中の病原菌生育抑制剤濃度が高(なるが
、相液覆に当って長時間浸漬しない場合は、典型的には
表面組織中の病原菌生育抑制剤濃度が高くなることはな
い。
水性の根被覆組成物に含まれるVA菌根菌感染原体の量
も広く変化できる。植物の根の感染を起こすに十分な感
染原体が含まれておれば足りる。
適当な量の選択は当業者が容易に行い得る。グロマス 
イントララディセス(G、 1ntraradices
)については、感染原体の量は、例えば約1000胞子
/献〜約30000胞子/−の濃度が被覆組成物中に含
まれるように選択される。尚、各VA菌根菌感染原体に
ついては、通常、被覆組成物中の種々の濃度を繰り返し
スクリーニングすることにより最適な濃度を選択するの
が好ましい。
本発明の被覆製剤は、植物生育補助剤を随意に含むこと
ができる。このような補助剤の例には、アスコルビン酸
(AA) 、ジベレリン酸(GA)およびインドール酢
酸(IAA)のような生育調節剤(例えば、Patil
 at al、、 Indian j、PlantPh
ysiol 、 <1981)24.145−149)
又は無機リン酸塩を溶解可能な微生物が含まれる(例え
ばGoldstein。
Amer、J、AIternative  Agric
ulture(198B)1.51−57;Shing
te et al、、J、  Maharashtra
 Agric、Univ。
(1987)12.121−122  を参照)。本発
明の相液覆製剤中へのこの様な補助剤の添加は、他の薬
剤と同様に当業者の容易になしうろことである。
上記の水性根被覆組成物は、直接根組織に適用される適
切な濃度の活性成分を含有するものを、即座の使用のた
めに調製できる。一方、根被覆組成物は、これに予め決
められた量の水を添加するだけでよいキットの形態にす
ることができる。キットは一般に、予め決められた量の
ポリマー、VA菌根菌感染原体、及び病原菌生育抑制剤
を入れた、1又はそれ以上の容器を含む単一のパッケー
ジを有する。上記3成分は各々異なった容器に入れるこ
とができ、または2又はそれ以上の成分を一緒に1つの
容器に入れることもできる。種々の成分を個々の容器に
分割することは、互いに接触した個々の成分の安定性に
主に依存する。特定のポリマー、VA菌根菌感染原体及
び選択された病原菌生育抑制剤に依存して、成分は乾燥
または液体の剤型をとり得る。しかし、典型的には、ポ
リマー及び病原菌生育抑制剤は液体組成であり、1つの
容器に入れられることが最も多い。VA菌根菌感染原体
は、例えば、乾燥胞子または菌糸、並びに新鮮または乾
燥したVA菌根菌感染根組織を含有できる。最も簡単な
形態では、本キットは、ただ作用濃度に希釈すればよい
だけの、ポリマーVA菌根菌感染原体及び病原菌生育抑
制剤の濃縮した水性溶液を含む単一の容器を有するパッ
ケージを含むことができる。典型的には、本キットには
キットの成分を正しい濃度の被覆組成物に調製する方法
の説明書及び好ましくは下記の根の被覆方法についての
説明書を添付する。
乾燥ポリマー法 有益なVA菌根菌感染を植物に授けるもう一つの態様に
おいては、感染原体及び病原菌生育抑制剤を乾燥ポリマ
ー被覆により供給する。乾燥被覆は感染原体及び病原菌
生育抑制剤を1つの製剤形態で含むように、又は根が初
めに乾燥ポリマー粉末で被覆された後感染原体及び病原
菌生育抑制剤の懸濁液で処理される様に調製できる。い
ずれの方法でも被覆のポリマー成分は乾燥形態で供給さ
れる。
第1の態様において、可撓性フィルムを形成できるとい
う付加的性質を有する非植物毒性の親水性ポリマーが、
上記の病原菌生育抑制剤を含み、植物生長補助剤または
安定剤を含み又は含まずに、VA菌根菌感染原体を含有
させるために用いられる。適当なポリマーの選択は、可
撓性フィルムを形成できるその物理的性質と共に、水透
過性のための十分な親水性、非植物毒性および実用に十
分な生物分解性の必要な各性質により決められる。
本明細書には、メチルセルロース(MC)またはヒドロ
キシプロピルメチルセルロース(HPMC)を含む幾つ
かのポリマーがこれらの性質を有することが示されてい
る。
フィルムを調製するため、これらポリマーを蒸留水に適
当な範囲で、典型的には1〜5%W/Wで溶解する。得
られた溶液のpHは、前記のように約pH4〜9、好ま
しくは最終pHが4.5〜7である。VA菌根菌含有フ
ィルムを形成するため、ポリマーの懸濁液又は溶液を不
活性で容易に剥がせる支持体、例えばテフロン被覆され
たアルミニウム ホイルに塗る。フィルムの支持体は任
意の好都合な大きさで使用できる。溶液または懸濁液は
シート状に展開される。展開に当ってはピペットで展開
するコーティングや、コーティング展延、噴霧等の任意
の公知方法を採ることができる。次いでVA菌根菌感染
原体及び病原菌抑制剤を含む懸濁液を、適当な方法で湿
潤ポリマー フィルムに添加する。適当な数の感染原体
が使用され、実験的に決定できる。例えばグロマス イ
ントララディセスでは0.5X0.5インチ面積当たり
100個以上の感染原体が効果的であり、最適には0.
5XO,5インチ面積当たり約500又はそれ以上の胞
子とすると、根を100%感染させることが見出された
。より多量の感染原体もまた使用できる。感染原体は個
々に「スポラ)・」として適用し、又は表面全体に展開
する。次にフィルムを、水分含量が比較的低くなるまで
、例えば48時間60〜70°Fで乾燥させる。支持体
表面」二に形成されたフィルムを剥がし、切断して目的
の接種材料を有する適当な大きさの断片を得る。
次に、得られたフィルムの断片を通常、苗当り1フィル
ム付着させる。フィルムは根の感染に感受性の領域及び
早く生長している領域、例えば根端のすぐ上の回りを包
めば良い。根にはフィルムを一部再含水させるように十
分な水分を与える。
これに代わり得る関連の態様としては、苗の根を粉末乾
燥ポリマーまたはポリマーの混合物でプレコートし、そ
の後、感染に有効な濃度の、例えば約1000胞子/m
Iの感染原体と病原菌生育抑制剤を含む水性懸濁液に浸
す。
この態様では、使用されるポリマーは親水性であり、非
植物毒性であれば、可撓性フィルムを形成可能でなくて
もよい。前記のポリマーはいずれも、乾燥した細かい粉
末に調製でき、薄い「相様」被覆を根の上に作るのに用
いることができる。被覆は少くとも早く生長している根
の領域を覆うのがよく、好ましくは根の全体を覆うのが
よい。
感染原体及び病原菌生育抑制剤の懸濁液により粉末を付
けた根の表面を処理するに際し、感染原体を根の表面に
もたらすときに十分な再水和が明らかに生じ、ポリマー
はVA菌根菌感染原体及び病原菌生育抑制剤と根の表面
との接触を保つに十分な粘着を供給する。
植物の調製 3つの接種方法のうちどれが使用されるかによらず、植
物は典型的には以下のように調製された。
植物、通常は苗又は小植物(すなわち、根、茎および葉
を有する非成熟植物)は、それが生育している土壌から
取出される。洗浄により、根に付着している土を全て除
く。約0.5〜1%(V/V)の次亜塩素酸ナトリウム
を含む溶液に20秒間浸漬することにより、根を殺菌す
ることが望ましい。
水性懸濁液により被覆する本発明方法では、この後、感
染原体及び病原菌生育抑制剤を共に含有する根の被覆組
成物を前述の方法で取付ける。被覆は、植物を直ちに移
植する場合には、被覆を無傷に保つため、典型的には少
な(とも一部乾燥させる(数秒間〜数分)。一方、浸し
た後の植物は直接コーン型ポット又はプラグ型ポット(
例えばアガー、ピートモス、土等)に移植できる。
被覆組成物を植物の根に付着させる、好都合な方法では
、清潔にした根を被覆組成物を含む容器に単に浸せばよ
い。一方、本発明の被覆組成物はスプレーにより、例え
ば自動化された工程で適用できる。好ましくは根組織の
全てが被覆される(例えば、少なくとも50%、好まし
くは少なくとも75%、最も好ましくは約90〜100
%)。
通常、葉、又は土壌より上に見られる植物の茎の付随物
の被覆は避けることが好ましい。一般に、根城に接触す
る植物組織はできる限り多く被覆することが好ましい。
乾燥ポリマーを使用する場合、乾燥ポリマーはフィルム
として、これに感染原体と病原菌生育抑制剤の懸濁液を
加え適用するか、又は粉末乾燥ポリマーを根表面にプレ
コートさせた後に感染原体と病原菌生育抑制剤の懸濁液
中に浸漬する。どの場合にも、根の適当な部位にフィル
ムを付着し、又は乾燥ポリマーから形成された被覆を有
し感染原体と病原菌生育抑制剤の懸濁液に浸漬して調製
された植物は、直接、上記コーン型ポット又はプラグ型
ポットに再度植え付けられ又は移植される。
VA菌根菌類はアブラナ科、アガサ科、ナデシコ科及び
カヤツリグサ科等を除く地上植物の根に感染し、その効
果を発揮することが知られている。
従って、本発明はVA菌根菌が有効に作用する全ての植
物に適用可能である。本発明は経済上重要な実用又は園
芸作物であり移植されるものに、特に適用できる。
以下の実施例は本発明を表現するためのみのものであり
、いずれにせよ本発明の範囲を限定しようとするもので
はない。
実施例 実施例1 グロマス イントララディセス(Glomusintr
aradices)を配合したポリマー組成物〔ポリビ
ニルアルコール(PVA)8%(w/w )およびメタ
ラキシル1100ppを含有〕を以下の様に調製した。
PVAは、80℃で水(ミリポア膜により濾過)に対し
、8g : 92gの割合で溶解させた。ポリマーの溶
解を促進するために、1.5アンペアの電流を20分間
水に通じた。次いで、溶液を室温まで冷却した。グロマ
ス イントララディセスの感染したスーダン グラスま
たはアルファルファの根をオムニミキサー中で粉砕し、
次いで355ミクロンおよび45ミクロン(325メツ
シユ)のスクリーンを連続的に通過させて、45ミクロ
ンにスクリーン上に残った胞子を集めた。次いで、胞子
を蔗糖密度勾配(20/40/60%)遠心により濃縮
した。8%PVA溶液1gにサブデュ2E(“5ubd
ue2E”、商標、チバーガイギー社製、25.1%メ
タラキシル)400μgを加えた。
このPVA/メタラキシル溶液3溶液30壱t’くとも
約30000個の胞子と混合した。胞子の分布が一様と
なる様に一定状態で攪拌しつつ、苗を得られた溶液に浸
漬した。過剰の溶液を根から滴下させて除去し、苗を植
えた。
10日令および30日令のタマネギ苗(アリウム セパ
(Allium cepa))を上記の被覆組成物に浸
漬した。次いで、これらの苗を土着のVA菌根菌を含む
自然土壌微生物相を有する無殺菌土壌に移植した。上記
の被覆組成物により処理された植物について、移植後2
,3および4週間後の平均VA菌根菌感染度(%)を調
べ、下記の植物群と比較した; (1)無処理(対照)
、(2)グロマス イントララディセスの濃縮胞子懸濁
液のみにより接種、(3)同濃度のポリマーのみを含む
溶液に浸漬、(4)同濃度のVA菌根菌およびポリマー
を含むが、病原菌生育抑制剤を含まない溶液に浸漬。結
果は、第1表および第2表に示す通りである。VA菌根
菌感染のレベルは、本発明による被覆組成物により処理
された植物において、有意的に高くなっていることが明
らかである。
第1表 10日令タマネギ 平均VA菌根菌感染率(%) 処理     2週間  3週間  4週間対照*  
    6   14    8G、l      1
1   21   17PVA      11   
20   13PVA+G、1.       11 
        6       18PVA+MeT
+G、1. 31   32   36*感染測定値は
、土着のVA菌根菌によるものと推定。
G、1.−グロマス イントララディセス1)VA−ポ
リビニルアルコール MeT−メタラキシル 第2表 30日令タマネギ 平均VA菌根菌感染率(%) 処理     2週間  3週間  4週間対照*  
   12   12   10G、1.     1
5   22   13PVA       4   
12   13pv八十〇、1.      15  
    20      29PVA+McT+G、1
. 26   42   44*感染測定値は、土着の
VA菌根菌によるものと推定。
G、1.−グロマス イントララデイセスPVA−ポリ
ビニルアルコール MeT−メタラキシル 実施例2 VA菌根菌感染原体(propagules)を含有す
るフィルムを下記の様にして、製造した。メチルセルロ
ース(MC)およびヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス(HPMC)をミリポア膜で濾過した水に2.5%(
wt/wt)の濃度で溶解した。
フィルムを形成するために、100m1のポリマー含有
溶液をそれぞれ8インチ×12インチのテフロン被覆ア
ルミニウム箔片上に展開して、均一に分布した薄膜を得
た。次いで、ピペットを使用して、VA菌根菌感染原体
を湿潤ポリマーフィルムに滴下し、約0.5インチ×0
.5インチの領域に胞子を加えた。0.5インチ×0.
5インチの領域に0〜2000個の異なる量のVA菌根
菌胞子を加えた。次いで、フィルムを大気中60〜70
°Fで48時間乾燥させた。
この乾燥後のHPMCの含水量は、約4.3%であり、
MCの含水量は、約8.2%であった。
両月料ともに、十分な強度のフィルムを形成していたの
で、支持体からフィルムを引剥がし除去することができ
た。
次いで、乾燥フィルムを0.5インチ×0.5インチの
大きさに切断して、規定量の接種源を含む試料とした。
植物への適用のために、10日令の殺菌したタマネギ苗
を用いた。8苗の根端のすぐ上に1/2インチ平方のフ
ィルムを取り付けた。
これらの苗を砂/粘土/バーミキュライト混合土壌(滅
菌土壌)に再移植した。8週間後に植物を収穫し、収穫
時の重量および感染率を測定した。
内生胞子であるグロマス イントララディセスを接種源
として使用することにより、フィルム当り100個若し
くはそれ以上の胞子を含むフィルム片により接種された
植物体は、8週間後にコントロールに比して有意に大型
化しており、また、500個若しくc緋それ以上の胞子
により接種された植物体は、100個の胞子により接種
されたものよりも大きいことが判明した。この判定は、
ダンカンのマルティプル レンジ テスト(DMRT)
により行なった。50個の胞子により接種された植物体
は、胞子を含まない対照のそれと有意的な差は、認めら
れなかった。
フィルム当り500個以上のグロマス イントララディ
セス胞子を含むフィルムにより接種された植物体の場合
には、100%の植物体が感染した;フィルム当り10
0個の胞子を使用する場合には、61%の植物体が感染
した;フィルム当り50個の胞子を使用する場合には、
50%の植物体が感染したに過ぎなかった。“平均感染
率”は、すべての場合に比較的高く、50〜67%であ
る。
(ここに、“平均感染率”とは、染色によりVA菌根菌
の感染が生じていることが判明した被覆された根の面積
を意味する)。
これらの結果を第3表にまとめて示す。
第3表 収穫直後の重量(g)および感染 平均 感染植物 平均感染率 処理*   重量 (%)    (%)2000胞子
/fim  1.49  100   671000胞
子/fi1m  1.64  100   67500
胞子/fi1m  1.55  100   6510
0胞子/fim  O,59616050胞子/fi1
m  O,235050fi1m対照    0.13
    0    0植物対照    0.Ll   
  0    0*1処理につき20回繰り返し グロマス イントララディセスに代えて外生胞子である
グロマス モセアエを使用する同様の試験においても、
フィルム当り少なくとも100個の胞子を使用する場合
には、コントロールに比して、有意的に大型化した植物
体が得られた(DMRTにより判定)。己の場合には、
感染した植物の割合は、69%であり、平均感染率(%
)は、50%であった。
実施例3 VA菌根菌としてジャイガスポーラ マルガリータ、ポ
リマーとしてヒドロキシプロピルメチルセルロース、病
原菌生育抑制剤としてメタラキシルを含んだ、可撓性フ
ィルムによる植物の接種実験を行った。
ジャイガスポーラ マルがリークが感染したダイズの栽
培ポット土壌を、流水中で500ミクロンおよび106
ミクロンのスクリーンを連続的に通過させ、106ミク
ロンのスクリーン上に残った胞子を集め、ショ糖密度勾
配遠心により濃縮した。
フィルムを形成するために、ヒドロキシプロピルメチル
セルロースの2.5%(W / W )溶液100dを
、8インチ×12インチのテフロン被膜アルミニウム箔
片」二に展開して、均一に分布した薄膜を得た。メタラ
キシルを添加する処理の場合には、3 ppmの濃度で
ポリマー溶液中に添加した。ついで、ピペットを使用し
て、ジャイガスポーラ マルガリータの胞子を0.5イ
ンチ×0.5インチの領域に50個となるように加えた
。
ついで、フィルムを大気中60〜70°Fで48時間乾
燥させた。支持体からフィルムを剥した後、乾燥フィル
ムを0.5インチ×0.5インチの大きさに切断して、
規定量の接種源を含む試料とした。
植物として、20目令の殺菌したトマト苗を用い、各画
の根端のすぐ上にフィルムを取り付けた。
これらの苗を無殺菌圃場土壌を入れたポット(31)に
移植し栽培した。水は適宜与え、肥料としてはホーグラ
ンド溶液を毎週−回与えた。移植後8週間後の植物の重
量及び感染率を測定した。
試験結果を第4表に示す。
部 表 ・* 処     理 フィルム中にGiMのみ フィルム中にMeTのみ** フィルム中にGiM+MeT フィルムのみ** 植物対照(無処理)** 平均重量 (g) 平均感染率 (%) *1処理につき20回繰り返し **感染は土着のVA菌根菌のみによるG i M=ジ
ャイガスポーラ マルガリータMeT=メタラキシル 上記の結果から、可撓性フィルムを用いた接種実験にお
いて、VA菌根菌接種剤(ジャイガスポーラ マルガリ
ータ)およびメタラキシルをそれぞれ単独で用いた場合
よりも、両者を共に用いた場合の方が、トマトの重量お
よび感染率共に有意に増加していることが示された。
実施例4 VA菌根菌としてグロマス モッセ、ポリマーとしてメ
チルセルロース、病原菌生育抑制剤としてメタラキシル
を使用し、乾燥粉末ポリマーによる植物の接種実験を行
った。
グロマス モッセが感染したスダングラスの栽培ポット
土壌を、流水中で5oOミクロンおよび53ミクロンの
スクリーンを連続的に通過させ、53ミクロンのスクリ
ーン上に残った胞子を集め、ショ糖密度勾配遠心により
濃縮した。
植物として、20目令の殺菌したトマト苗を用いた。メ
チルセルロースを乾燥粉末ポリマーとして固い表面上に
展開した。トマトの根を乾燥粉末ポリマーによって均一
にプレコートし、下記の懸濁液に浸漬した; (1)水
(対照)、(2)グロマス モッセの濃縮胞子懸濁液(
500胞子/r+!り(3)メタラキシル100pI)
■溶液、(4)メタラキシル100 ppmを含んだグ
ロマス モッセの濃縮胞子懸濁液。
これらの苗を無殺菌圃場土壌を入れたボッ)へ(31)
に移植し栽培した。水は適宜与え、肥料としてはホーグ
ランド溶液を毎週−回与えた。移植後8週間後の植物の
重量及び感染率を測定した。
試験結果を第5表に示す。
部 表 トマトの重量と感染率 ォ 平均重量 処     理      (g) G、M、           182Me T **
        147G、M、  +MeT    
213 対照**       128 平均感染率 (%) *1処理につき20回繰り返し **感染は土着のVA菌根菌のみによるGoM、=グロ
マス モッセ M e T =メタラキシル 上記の結果から、乾燥粉末ポリマーを用いた接種方法に
おいても、可撓性フィルムを用いた接種法と同様に、V
A菌根菌接種剤(グロマス モツセ)およびメタラキシ
ルをそれぞれ単独で用いた場合よりも、両者を共に用い
た場合の方が、トマトの重量および感染率共に有意に増
加していることが示された。
以上の実施例においては、理解を容易ならしめるために
、発明をより詳細に説明したが、本発明は、これら実施
例により限定されるものではな(、特許請求の範囲の記
載により規定されるものである。
(以   」二)

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 (1)(a)植物根上に非植物毒性被覆を形成し得るポ
    リマー、 (b)植物根に感染し得るVA菌根菌感染原体、および (c)植物に対する病原菌の生育の選択的抑制剤を含む
    ことを特徴とする植物根被覆用組成物。 (2)請求項(1)に於て上記a)ポリマー、b)VA
    菌根菌感染原体及びc)病原菌生育抑制剤が水溶液また
    は水性懸濁液の形態にある請求項(1)記載の組成物。 (3)請求項(1)に於て上記a)ポリマーが可撓性フ
    ィルムの形態を有し、該フィルムが上記b)VA菌根菌
    感染原体及びc)病原菌生育抑制剤を含有する請求項(
    1)記載の組成物。 (4)請求項(1)に於て上記a)ポリマーが粉末の形
    態を有し、上記b)VA菌根菌感染原体及び病原菌生育
    抑制剤が水溶液または水性懸濁液の形態を有する請求項
    (1)記載の組成物。 (5)ポリマーが、ポリビニルアルコール、ポリビニル
    ピロリドン、ポリアクリルアミド、ヒドロキシプロピル
    メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースおよび
    メチルセルロースからなる群から選択される請求項(1
    )に記載の組成物。 (6)ポリマーが、メチルセルロースおよびヒドロキシ
    プロピルメチルセルロースからなる群から選択される請
    求項(3)記載の組成物。 (7)病原菌生育抑制剤が、生物的材料である請求項(
    1)記載の被覆用組成物。 (8)生物的材料が、シデロフォア生成微生物である請
    求項(7)記載の被覆用組成物。(9)病原菌生育抑制
    剤が、化学的材料である請求項(1)記載の被覆用組成
    物。 (10)化学的材料がフォセチルAlおよびメタラキシ
    ルからなる群から選択される請求項(9)記載の被覆用
    組成物。 (11)VA菌根菌感染原体が、ジャイガスポーラ属お
    よびグロマス属からなる群から選択される請求項1記載
    の被覆用組成物。 (12)VA菌根菌感染原体が、グロマス属である請求
    項(11)記載の被覆用組成物。(13)グロマス属が
    、グロマスイントララディセス(G.intrarad
    ices)、グロマスデザティコーラ(G.dlser
    ticola)およびグロマスモッセ(G.mossc
    ae)からなる群から選択される請求項(12)記載の
    被覆用組成物。 (14)請求項(1)記載の組成物により植物根を被覆
    処理して植物根上に植物根と組成物との接触を維持する
    被覆を形成せしめる植物根被覆処理方法。 (15)組成物が請求項(2)記載の組成物であり、水
    溶液または水性懸濁液形態の組成物により植物を被覆処
    理する請求項(14)記載の方法。 (16)組成物が請求項(3)記載の組成物であり、可
    撓性フィルム形態の組成物により植物根を被覆処理する
    請求項(14)記載の方法。 (17)組成物が請求項(4)記載の組成物であり、植
    物根をポリマー粉末でプレコートせしめ、次いでVA菌
    根菌感染原体及び病原菌生育抑制剤を含有する水溶液ま
    たは水性懸濁液で処理する請求項(14)記載の方法。 (18)植物が、苗である請求項(14)記載の方法。 (19)植物根が請求項(1)記載の組成物により被覆
    されている植物。 (20)植物がVA菌根菌に感染している請求項(19
    )記載の植物。 (21)(a)植物根上に非植物毒性被膜を形成し得る
    ポリマー、 (b)植物根に感染し得るVA菌根菌感染体、および (c)植物に対する病原菌の生育の選択的抑制剤の各成
    分を含み、且つ上記の全成分を所定の割合で所定量の水
    に混合することにより、 (i)根に被覆を形成し、 (ii)該根にVA菌根菌を感染させ且つ (iii)病原菌による根への感染を抑制し得る水性懸
    濁液または溶液を形成するべくした植物根被覆組成物調
    製用キット。
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