JPH02500517A - ペプチド化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 被ブチＰ化合物 本発明は造血における刺激効果を有する新規ペプチドおよびその製造方法に関す る。

骨髄細胞は多能性幹細胞から誘導されるものであり、この多能性幹細胞は成熟し て形態学上異なる細胞からなる複雑な集団即ち巨核球、赤血球、顆粒球およびリ ン・ｅ球を形成する。約１０％の幹細胞のみがいつでも細胞分裂中である。成熟 の初期において各々の増殖幹細胞は特定の形態学上異なる細胞に傾き（ｃｏｍｍ ｉｔｔｅｄ）　、結果として上記４つの成熟細胞タイプの１つに導かれる。細胞 が増殖するにつれて、それらは徐々にさらに増殖する力を失い、そして成熟細胞 、例えば赤血球または顆粒球はもはや分裂することはできない。結果として、成 熟細胞が絶えず死んでいるためあまり成熟していない細胞の増殖化能力、特に造 血に傾く幹細胞が維持されることが重要である。

本発明者らは今般造血幹細胞の増殖を刺激することができる新規なベプチｒ群を 見い出した。

従って本発明によれば （式中、すべてのアミノ酸単位はＬ−配置であり、讐たは水素原子であり、 Ｂは　−ＩＣＨ−ＣＨ−Ｃｔ）Ｒ”　−ＮＨ−ＣヨーＣｏ−Ｐ、！ またはヒドロキシ基であり、 ｎおよびコは独立して１または２の整数であり、ａおよびｂは独立してＯまたは １の整数であり、Ｒ、Ｒ’およびＲ″は独立してヒドロキシ基またはアミノ基で ある。

但し、ＡおよびＢがそれぞれ水素原子およびヒドロキシ基である場合、ｂは整数 Ｏではない）の化合物およびその生理学的に許容しうる塩が提供される。

従って式（１）の化合物は対称の二量体である。

Ａがグルタミン残基またはプロリン残基である場合、ａ　＝　ｂ　＝　１、ｖ　 ＝　２、ｍ＝１．ＲおよびＲ′がヒドロキシ基、そしてＢがリジン残基であるの が好ましい。

Ｂがアルイニン残基である場合、Ａがピログルタミン酸塩残基、ａ　＝　ｂ　＝ 　１、ｎ＝２、ｍ＝１、セしてＲおよ好ましい基の化合物はｂ＝１．ｓ＝１そし てＲ、Ｒ’およびＲ“がヒドロキシ基である化合物である。

本発明の特に好ましい化合物は下記の化合物である（アミノ酸について慣用の生 化学記号法を用いてＮ−末端から読み取った）： （ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ）　２（ｐＧｌｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙ ｓ）　２（ｐ（）ｌｕ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）　２（ｐｃ）ｌｕ− ＧＬｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａ、ｒｇ）　２（Ｇｌｎ−ｅｌｕ−Ａｓｐ−ｃｙｓ− Ｌｙｓ）２（Ｐｒｏ−Ｇｉｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２さらに特に好ましい 化合物は（ｐＧＥ、＊−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２即ちａ＝ｂ＝１　 、ｍ＝１、ｎ　＝　２、ＲおよびＲ′がヒドロキシ基であり、Ａがピログルタミ ン酸塩残基であり、そしてＢがリジン残基である化合物である。不発明のベプチ ｒの生理学的に許容しうる塩としては酸付加塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、 硫酸塩など並びに塩基との塩、例えばナトリウムまたはカリウム塩のようなアル カリ金属塩、カルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩またはアミン塩が包含さ れる。

幾つかの式（１）の化合物はＥＰＡ屋８３３０７２１０．１に記載後者の出原は 顆粒球生成における抑制効果を有する血液調整ベプチｒの小群である。

入手しうる天然の顆粒球生成因子がわずかな量であるため、天然物質の構造はま だ決定されていない。それはまだ結晶＝たは完全に純粋な形態では得られておら ず、しかも天然源由来の物質のみを用いるだけで達成できるかどうかもわかって いない。それは上記の不発明者らのＥＰＡにおいて報告されているように構造式 ｐｙｒｏＧｌｕ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−ＬｙｓＯＨを有すると仮定さｎてい るが、この構造式を有する合成化合物は不活性であることが証明された。

天然の顆粒球生成抑制因子が酸化条件１ｃ付されると刺激作用を有する化合物を 生成することが観察されている。

しかしながらこの生成物は単離もされていなければ同定もされていない。一方、 本発明のベゾチＰは医薬用途に適当な純粋な形態でそして比較的多量に得られる 。

糧、すなわちｐｙｒｃＧｌｕ−０１＊−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−ＬｙｓＯ：が凍結させ そして解凍に付した場合、メルカプトエタノールで処理することにより逆にする ことができる刺激活性を示すことが報告されている（　Ｅｘｐ　ＨｅｎａｔＯｌ 、　１２　、７　（１９８１）　）。しかしながらその刺激生成物は純粋な形態 で得られず、そしてその構造は決定されなかった。

化学的に純粋な形態でのこの新規化合物はインビトロおよびインビボ血液調整効 果１（関して試験を行なった。

人間およびマウスの両方の造血幹細胞のインビトロ試験は１５００％までの寒天 コロニー形成における増大を示した。刺激効果は１ｏ−１３〜１０−５Ｍの濃度 範囲で生じる。マウスでのインビボ試験において本発明者らは１回の注射で造血 幹細胞の数を４８時間以内で５０％まで増大し、そして連続注入により幹細胞の 数を１３日間で２倍にすることができることを見い出した。

本発明は特に骨髄損傷、無顆粒球症および無形成貧血を含む、減少された造血活 性に病んでいる患者において造血を刺激するのに適用される。これは例えば骨髄 移植手術における組織反応を抑えるための免疫抑制処置により抑制された骨髄機 能を有する患者の治療を含む。

本発明の化合物はまた新生物形成またはウィルス性疾患の細胞療法および放射線 療法を施した後、骨髄より急速な再生を促進するために用いてもよい。

さらに新規化合物は患者が骨髄疾患に伴って起こる免疫応答の低下により深刻な 感染症を有する場合特に有用である。

他の臨床上の適用としては、本発明者らのＥＰＡ明細書において開示されたその 相当する単量体または関連の造血抑制剤と組み合わせて骨髄細胞における高い活 性と低い活性のピークを交互にさせる。すなわち造血の自然な概日リズムを増加 させることである。このようにして細胞療法は低い骨髄活性の段階で付与するこ とができ、すなわち骨髄損傷の損失を減少させることができ、一方再他の組織、 特に非造血組織に関連した腫瘍細胞における刺激効果がないことは注目すべきで ある。従って新規化合物は選択的に造血系を刺激する。

ペプチドは有意な毒性を示さない。さらに観察されるすべての血液学上効果は可 逆であり、ベプテＰを用いて注射した動物の他の器官において肉眼で見える変化 は観察されなかった。

一般に刺激効果をはたらかせるために本発明のペプチドを１日に体重７０ｋｌ？ あたり０１〜１０■、例えば１〜５■の投与量範囲で人間の患者に注射投与しう る。もし注入（ｉｎ？ｕｓｉｏｎ）または同様の手段により投与するならば、そ の投与量は６日間にわたって体重７０ｋｇあたり３０〜３００■の範囲、例えば 約１００■であってもよい。原則として患者の細胞外の液においてベプチｒの約 １０　Ｍ〜１０−５Ｍの濃度を生成させるのが望ましい。

本発明のさらに別の特徴によれば薬学的担体または賦形剤と組み合わせて１種ま たはそれ以上の前述で定義した式（１）の化合物ｆたはその生理学的に許容しう る塩を活性成分として含有する医薬組成物を提供する。本発明の組成物は例えば 経口、経鼻、非経口的または直腸投与に適当な形態であってもよい。

本明細書で用いる「薬学的」なる語は本発明の獣医学用途を包含するものである 。

本発明の化合物は慣用の薬理的投与形態、例えば錠剤、コーチング錠、経鼻用ス プレー剤、液剤、乳剤、散剤、カプセル剤または持効性形態であってもよい。慣 用の薬学的賦形剤並びに通常の製造方法が、これらの形態を製造するのに用いる ことができる。錠剤は、例えば活性成分（複数回）を乏知の賦形剤、例えば炭酸 カルシウム、リン酸カルシウムまたはラクトースのような希釈剤、コーンスター チまたはアルギニン酸のような崩壊剤、スターチまたはゼラチンのような結合剤 、ステアリン酸マグネシウムまたはタルクのような滑沢剤および／またはカルボ キシポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、セルロースアセテートフタレ ートまたはポリビニルアセテートのような持効性を得るための剤とともに混合す ることにより製造できる。

所望ならば錠剤は幾つかの層を成してもよい。コーテング錠は錠剤の際と同様な 方法で得られた核（ｃｏｒｅ）を錠剤コーチングに通常用いられる剤、例えばポ リビニルピロリｒ７またはシニラツク、アラビアゴム、タルク、二酸化チタンま たは糖でコーチングすることにより製造できる。持効性を得るために、または配 合禁忌を避けるため１で核もまた幾つかの１を成してよい。コーチング錠もまた 錠剤用に上記の賦形剤が用いられた場合に持効性を得るために幾つかの凰を成し てよい。

器官特異的担体系もまた使用してよい。

注射液は慣用の方法により例えばｐ−ヒＰロキシベンゾエートのような保存剤ま たはＥＤＴＡのような安定剤を添アルまたはアンプルに充てんされる。

経鼻用スプレー剤は同様に水溶液中で製剤化され、エアゾル噴射剤と一緒に、＝ たは手動の圧縮装置を備えたスプレー容器１（詰めろｎる。１種または数種の活 性成分を含有するカプセル剤は例えば七の活性成分をラクトースまたはソルビト ールのような不活性担体と混合し、該混合物をゼラチンカプセル中１ｃ充てんす ることにより製造できる。

適当な坐剤は例えば活性成分、または活性成分の組み合わせをこの目的のために 構想された慣用の担体、例えば天然脂肪またはポリエチレングリコールまたはそ の誘導体と１合すること１でより製造できる。

不発明の化合物を含有する投与単位は好ましくは０．１〜１０■、例えば１〜５ ■の式（１）のベプチｒまたはその項を含有する。

本発明のさらに別の特徴（Ｃよれば、患者に有効量の前述で定義した医薬組成物 を投与することからなる造血の刺激方法が提供される。

しで・しながら、新規ペプチｒのさらに主要な用途は免疫学上のアッセイ技法用 の物質の製造にある。ベプチｒは抗体生成動物（例えばウサギ、モルモットまた はヤイ）中１（注射するため１てアルブミン、ポリリジンまたはポリプロリンの ような適当な高分子量の担体に共有結合される。

インビトロ免疫感作技術もまた使用してもよい。高分子量の担体な用いての良く 知られた吸着技術を使用することにより高い特異性の抗血清が得られる。ペプチ ド分子に放射能（ＳＨ，ｌＣ，５５Ｓ）を導入することにより放射免疫検定法が 容易に設計され、血清（血漿）、尿および髄液のような異なる生物学的液におけ るペプチドを決定するために用いられる。

本発明のベプチｒは何れかの都合の良い方法で合成することができる。一般に存 在する反応性側鎖基（アミノ、チオールおよび／またはカルボキシル）は全体に わたる合成のカップリング反応中、保護され従って最終段階は式（１）の保護さ れた誘導体の脱保護化である。通常、すべての−ＣＯＯＨ基、すべての−ＮＨ２ 基およびピログルタミルまたはゾロリン残基の一冊基は保護され、このように保 護された形態のペプチドは本発明の他の特徴を形成し、またはカルボキシルブロ ッキング基でアリ、ｎおよび二は独立して整数１または２であり、ａおよびｂは 独立して整数０または１であり、Ｒ１、ｐ、２　、　ｐ、８およびＢｌｏはアミ ノ、ヒｒロキシ、保護さｔたアミンまたはカルボキシル保護基であり、Ｒ５，デ 、Ａ　、　Ｒ５、Ｒ６、ｐ、７およびＲ９は水素原子、またはアミン保護基であ る。

但し、ｐ４が水素原子またはアミン保護基であり、セしてＢがヒドロキシ基また はカルボキシルブロッキング基である混合、ｂは整数のＯではない） を有する。

一般１で式（Ｉｔ）の保護さｎた誘導体はペプチド分子において適当な手段を用 いて製造することができる。

可能な合成ルートの１つはシスチンを利用するものであり、これを残留のアミノ 酸残基とカップリングさせ２つの同一の二量体の鎖を集めシスチンにすでに存在 しているフスルフィド結合を介して結合させる。別の手段としてはＳ−保護され たシスチンを用いて、Ｓ−保護された形態での相当する単量体化合物を合成して Ｓ−保護基を除去して二量体化を行なう方法がある。脱保護化段階におい−て直 接ノスルフイｒ結合を生成する酸化剤により除去することができるＳ−保護基を 用いることが可能である。すなわち例えばトリチル基は、好ましくはジメチルホ ルムアミｒのような適当な溶媒中でヨウ素により選択的に除去することができる 。このような二量体化はＣ−およびｌｉ−保護された単量体上で行ない、次いで Ｃ−およびＮ−保護基を除去するか、または最終合成段階として （式中人、Ｂ、’ｎ、Ｉｎ、ａ、ｂ、Ｒ２よびＲ′は上述の通りであり、そして Ｒ″は水素原子または酸化条件下で除去されうるチオール保護基である） の化合物を用いて行なうことができる。

イプチｒ鎖を構築する場合原則としてＣ−末端またはＮ−末端のどちらかを開始 することができるが、Ｃ−末端開始方法のみが普通の方法である。

すなわち例えばり・クンの適当に保護された誘導体をシスティンまたはシスチン の適当に保護された誘導体と反応させるこ・とによりＣ−末端で開始させること ができる。

リジン誘導体は遊離のα−アミノ基を有し、一方性の反応体は遊離のまたは活性 化されたカルボキシル基および保護されたアミン基を有するであろう。カップリ ング後、で選択的にＮ−脱保護化してさらにアミノ酸残基の付加をすることがで きる。この操作は要求するアミノ酸シーケンスが完了するまで継続される。

例えば使用さｎるカルボン酸活性化置換基は対称のまたは混合無水物、または例 えばｐ−ニトロフェニルエステル、　２，４．５−トリクロロフェニルエステル 、Ｎ−ヒｒ口キシベンゾトリアゾールエステル（ｏｇｔ）、またはＮ−ヒｒロキ マスクシンイミクルエステル（○ＳＵ）のような活性化エステルを包含する。

遊離のアミンおよびカルボキシル基のカンプリングは例えばジンクロヘキシルカ ルボノイミｌ’　（ＤＣＣ）を用いて行なうことカーでさる。使用することが他 のカップリングＮｌｉ？例えハ１（−二トキシカルボニル−２−ニドキシ−１， ２−ジヒｒコキノリンである。

一般にカップリング反応は好都合には適当な溶媒系、例えばテトラヒドロフラン 、・クオキサン、ジメチルホルムアミｒ、メチレンクロライド＝たはこれらの溶 媒の混合物中低温、例えば−２０℃、周囲温度までの温度で好都合に行なうこと ができる。

固相樹脂支持体上でより好都合に合成することができる。クロロメチル化ポリス チレン（１％ジビニルベンゼンで交叉結合させた）が１つの有用なタイプの支持 体であり、この場合合成は例えば支持体にＮ−保護されたリジンをカップリング させることに二りＣ−末端で開始するであろう。

多くの適当な固相技術が下記の文献に記載されている。

Ｅｒ１ｃ　Ａｔｈｅｒｔｏｎ、　Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ　Ｊ、　Ｌｏｇａｎ、 およびＲＯｂｅｒｔ　Ｃ。

５ｈｅｐｐａｒｄ　Ｊ　、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　Ｐｅｒｋｉｎ　１．５３８ 〜４６　（１９８１）　；　Ｊａｒ：１ｅｓＰ、　Ｔａｚ、　Ｆｏｅ　Ｓ、　Ｔ ｊｏｅｎｇ、およびＲ，Ｂ、　Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ　Ｊ、　Ａ、ｍ、　Ｃｈｅ ：ｌ。

Ｓｏｃ、　１０２６１１７〜２７　（１９８０）　；Ｊａｓｅｓ　Ｐ、　Ｔａ＝ ｎ、　Ｒｘｃｈａｒｄ　Ｄ。

ＤｉｍａｒｃｈｉおよびＲ，Ｂ、　Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌａ　Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｐ ｅｐｔｉｄｅ　Ｐｒ０ｔｅｌｎＲｅｓ　旦４１２〜２５　（１９８０）　；　Ｍ ａｎｆｒｅｄ　ｌｖ！ｕｔｔｅｒおよびＤｉｅｔｅｒＢｅｌｌｏｆ、　Ｈｅ１ｖ ｅｔｉｃａ　Ｃｈｉｍｉｃａ　Ａｃｔ、ａ　６７２００９〜ｉ　６　（１９８４ ）アミノ酸のための保護基の広範囲な選択が知られており、下記の文献に記載さ れている。

５ｃｈｒ８ａｅｒ、　Ｅ、、およびＬｕｂｋｅ、　Ｋ、、　Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉ ｄｅｓ、　Ｖｏｌｓ、　１および２、Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ 　ＹｏｒｋおよびＬｏｎｄｏｎ、　１９６５および１９６６；　Ｐｅｔｔｉｔ、 　Ｇ、Ｒ，、５ｙｒｘｔｈｅ、ｉｃ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、　Ｖｏｌｓ、　１〜４ 、Ｖａｎ　Ｎｏ５ｔｒａｎｄ、　Ｒｅ１ｎｈｏｌｄ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　１９ ７０．１９７１．１９７５および１９７６　；　ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ　＋　 Ｍｅ　ｔｈｏａｅｎ　ｄｅｒ　ＯｒｇａｎｌＳＣｈｅｎ　Ｃｈｅｆｎｌｅ。

５ｙｚｔｈｅｓｅ　ｖｏｎ　Ｐｅｐｔｉｄｅｐ、　Ｂａｎｄ　１５、Ｃ＋ｏｒｇ 　Ｔｈ１ｅｐｅ　Ｖｅｒｌａｇ、　Ｓｔｕ−ｔｔｇａｒｔ　１９７４　；　Ａｍ １ｎｏ　Ａｃ１ｄｓ、　ＰｅｐｔｉｄｅｓおよびＰｒｏｔｅｉｎｓ　、　Ｖｏｌ 　。

４〜８、Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｏｃｉｅｔｙ、　Ｌｏｎｄｏｎ　１９７ ２．１９７４．１９７５および１９７６　；　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、　５ｙｎｔｈ ｅｓｉｓ−ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｄａｔａ　１〜６、Ｗｏｌｆ−ｇａｎｇ　Ｖｏｅ ｌｔｅｒ、　Ｅｒ１ｃ　Ｓｃｈｍｉｄｔ−３ｉｅｇｘｎ、　Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈ１ ｅｚｅ　ＶｅｒｌａｇｅＳｔｕｔｔｇａｒｔ、　ＮＹ、　１９Ｂ５　：　Ｔｈｅ 　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、　１０ａｌｙｓｉｓ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ。

ｂｉｏｌｏｇｙ　１〜７　、　Ｅｄ：　Ｅｒｈａｒｄ　Ｇｒｏｓｓ、　Ｊｏｈａ ｎｎｅｓ　Ｍｅｌｅｎｈｏｆｅｒ、　Ａｃａ−ｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　ＮＹ 、　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｓｉｓｃｏ、　Ｌｏｎｄｏｎ；　５ｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ 　ｐｅｐ−ｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　２ｐｄ　ｅｄ、、　Ｊｏｈｎ　）ｉ 、　Ｓｔｅｗａｒｔ、　Ｊａｎｉｓ　Ｄ、　Ｙｏｕｐｇ。

従って使用することのできるアミン保護基はカルボベンゾキシ（以後Ｚと称す） 、ｔ−ブトキシカルボニル（以後Ｂｏｃ）、４−メトキシ−２，３，６−）リメ チルベンゼンスルホニル（１，＜　＊、ｒ　）および９−フルオレニルメトキシ カルボニル（以後Ｆコｏｃと称す）を包含する。ペプチドをＣ−末端部から構築 する場合、アミン保護基が加えられた各各の新しい残基のα−アミン基の上に存 在し、そして次のカップリング段階の前に選択的に除去する必要があると理解さ れ二う。このような一時的なアミン保護のために特に有用な基の１つとして有機 溶媒中ピペリジンで処理することにより選択的に除去することのできるＦｍｏｃ 基がある。

用いうｔｚるカルボキシル保護基は例えばベンジル（Ｂｚｌ）、ｐ−ニトロペン ノル（ｏＮｂ）、ペンタクロロフェニル（ｏｐｃｚｐ）。

ペンタフルオロフェニル（ＯＦＦＰ）またはｔ−ブチル（ｏｔｐｕ）基のような 容易に開裂されたエステル基、並びに固体支持体上のカンプリング基、例えばポ リスチレンに結合されたメチル基を包含する。

チオール保護基はｐ−メトキシベンジル（Ｍｏｂ）、トリチル（Ｔｒｔ）および アセトアミドメチル（Ａｃｍ）を包含する０例えば上記の引用文献に記載されて いるように広範囲の他のこのような基が存在し、そして上記記載の工程における このような基の使用は全て本発明の範囲内に入ると理解されよう。

アミン−およびカルボキシル−保護基を除去するための広範囲な手段がある。し かしながらこれらの手段は使用する合成方法と矛盾のないものでなげればならな い。

側鎖の保護基は次のカップリング段階の前に一時的なα−アミン保護基を除去す るために使用さｎる条件に対して安定でなければならない。

Ｂｏｃのようなアミン保護基およびｔ−Ｂｕのようなカルボキシル保護基は例え ばトリフルオロ酢酸を用いた酸処理１ζよって同時に除去することができる。Ｔ ｒｔのようなチオール保護基はヨウ素のような酸化剤を用いて選択的に除去する ことができる。

以下の実施例は単に例示するだめのものである。

溶媒は商業上の物質から再蒸音し、次のよう１てして貯蔵した： モレキュラーシーブ４Ａ上のジメチルだルムアミド（ＤｌｉＧ’　）、ＣａＣｌ ２上のククロロメタン（ＤＣＭ）、！：ａ／Ｐｂ合金（Ｂａｋｅｒ）上のトリエ チルアミン（ＴＥＡ）およびモレキュラーシーブ４Ａ上のトリフルオロ酢酸（Ｔ ＦＡ、）。

ＴＬＣ系は以下のようにした； Ｓ１ニジリカ／ｃＨｃｔ５：　ＭｅＯＨ（９８：２）＄２ニジリカ／ＣＨＣ４ｇ 　：　ＭｅＯＨ（９５：５）Ｓ３ニジリカＲＰ　８１５％エタノール中０．１％ ＴＦＡ　（水溶液）精製さｎた最終生成物を逆相高速液体クロマトグラフィー（ ＨＰＬＣ）により分析した。ＨＰＬＣ−系はＨＰ　１０９［：１Ｍクロマトグラ フで構成され、作り付けのオートサンプラーおりｒｏｎｎ、　ＦＲＧ　）　、お よび５ｕｐｅｌｃｃｓｉｌ　ＬＣ−１８カラム（２５０Ｘ４．６ｍ、５μ粒子） を備えた。試料を０１％（−７〜）　ＴＦＡ水溶液中に溶解し、０１％τＦＡ中 の０　”’−３０”／Ｑアセトニトリル（水溶液）の直線グラジエントで溶離し た。流速は２ｒｒ、ｌｌ’＋であった。溶離物を帯域幅４コニを有する２１４二 二でモニターした。溶媒クロマトグラムを電子工学的に減じ、その結果を面積％ として衣わした。

アミノ酸分析： シスチン含有イデテドを過イ酸により酸化し、酸不安定なシスチン残基を酸安定 なシスティン酸１（変換させ、６　Ｍ　！−１ｃｔ中１ｉ０℃で１６時間の酸加 水分解ＩＣ付した。乾燥した加水分解物を次いでフェニルインチオシアネートを 用いて誘導し、Ｈｅ１ｚｒｉｋｓｏｎの之ａ１．ヨ１ｏｃｈ、　１３６．６５〜 ７４（１９８４年）に記載のようにして分析した。

実施例　１ （ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−ａｙ　ｓ　−ＬｙＳ　）　２（Ｆｐｏｃ−Ｃｙｓ −Ｌｙｓ（Ｎｇ−ＢＯｅ）−０ｔＢｕ）２　（ｉ）　’２　Ｆ　（２，２７５式 ）の（Ｆ＝ｐｏｃ−Ｃｙｓ−Ｏ８ｖ）２．２．１８　ｆ　（５，０ＪＪ）のＩ− ｙｓ（Ｎｇ−ＢｏＣ）−０ｔＢｕ−ＨＣＬおよび０．５８ｆ（５ｄ、Ａ）のＮ− エチルモルホリンを７．５　ａｔのＤｌ、？に溶解し、室温で６時間攪拌した。

反応混合物を減圧下で蒸発乾固した。３留物を５０−のＣＨＣ２Ｓに溶解し、（ ：］、Ｉ　Ｎ　ＨＣＬ１２ｒｕｌ　（３回）、セして１Ｍ　ＮａＣｔｌ　２　ｍ ｌ　（３回）で洗浄した。有機相を相分離ろ紙（Ｗｈａ　ｔコｎ）１（通してろ 過し、そして減圧下蒸発乾固した。

粗生成物（３，３２ｆ　）を５ゴの熱ＭｅＯＨ（１５時間）から再結晶してろ過 し、ＭｅＯＨおよびエーテルで洗浄し、そして風乾した。収量：１．７５ｆ（６ １％）、白色の固形物はＴＬＣ上１つの主点を示した。（Ｕｖ２５４＋、Ｃ１２ ／ジカルボキシジン＋、ニンヒｒリン÷、Ｓｌ：　Ｒｆ＝０．６６７、Ｓ２　： 　Ｒｆ＝ｏ、５２９）（ｃｙｓ−Ｌｙｓ（Ｎｇ−Ｂｏｃ）−ｏｔＢｕ）２（２） 　：ｔｓｆ（ｔ１９ｍ−ｖ）の化合物（１）をＤＭＦ中の２０％−被りジン１０ ゴに溶解し、室温で３０分間攪拌した。ＴＬＣ（８２）はすべての出発物質が消 費され、１つの新しい生成物のみが生成したことを示した（Ｕｖ２５４÷、Ｃ１ ０／ジカルボキシジン２二ンヒｒリン＋）。溶媒を減圧下で蒸発させた。

残留物を２０−のエーテルに溶解し、３ｄの０．１ＮＨＣｊで２回、セして３ゴ の１Ｍ　ＮａＨＣＯｓで洗浄した。有機相を相分離ろ紙に通してろ過し、そして 蒸発乾固した。収量：ｔ２ｆ、ＴＬＣは１つのニンヒｒリン陽性成分のみを示し た（　８２　：　Ｒｆ＝０．２１６　）。

（Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（β−０ｔＢｕ）−ＣｙＳ−ＬｙＳ（Ｎｇ−Ｂｏｃ）−ｏｔ ：ａｕ）２　（３）　：約１１９ｍＭの化合物（２）およびｔ　５２　ｆ　（２ ，６ｍＭ”）のＦｍｏｃ−Ａｓｐ（β−０ｔＢｕ）−０Ｓｕ　を６１１ＬｌのＣ Ｈ２Ｃ２２に溶解し室温で２時間攪拌した。ＴＬＣ（８１）はすべてのニンヒＰ リン陽性物質が消費され、そしである新しい主要なＵｖ２５４陽性生成物が生成 したことを示した。蒸発させた後残留物を３０ｍ／のＥｔＯＡＣに溶解し、１０ １！ＬｌのＩ　Ｍ　ＮａＣ２で４回洗浄し、ろ過し、そして（１）に記載のよう にして蒸発させた。粗生成物をエーテル（２，５ｔＡ’）に溶解し、４ゴのｎ− へキサンを加えて半結晶性固形物として沈殿させた（冷蔵庫１６時間）。溶媒を デカンテーションし、生成物を５ｄのｎ−ヘキサンで洗浄し、モして減圧下で乾 燥した。収量：１、２７２２（６７％）。ＴＬＣは１つの主点を示した（　ｕｖ ２５４＋、０ｔ２／ジカルボキシノン”、ニンヒｙ　＋）ン÷、８１　：　Ｒｆ ＝０３３３．８２　：　Ｒｆ＝０．６５８　）。　□（ＡＳｐ（β−０ｔＢＬ１ ）−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ（！ぐε−Ｂｏｃ）−ｏｔｇｕ）２（４）　：１．０２（０ ６２ピｌ）の化合物（３）をこ三２ｃｔ２中の２０％ピペリジン５　ｒｎｌに溶 解し、（２）に記載のように処理した。

収量：０．４６９２（６５％）。ＴＬＣは１つのニンヒＰリン陽性点（３２：　 Ｒｆ＝０．２２　）のみを示した。

（Ｆ：ｐｏｃ−Ｇｌｕ（ｒ−ＯｔＢｕ）−Ａｓｐ（β−０ｔＢｕ）−Ｃｙｓ−Ｌ ｙｓ（Ｎｇ−Ｂｏｃ）　−０ｔＢｕ）２（ｓ）　： ０．４６９２（０，４０７ｒｙ、）の化合物（４）およびｏ、４７ｒ（ｏ、９゜ ｉＡ）のＦｗｏｃ−Ｃｒｌｕ（γ−０ｊＢ＊）−０Ｓｕを５ｄのＣ五２Ｃ４２に 溶解し、室温で１５時間攪拌した。（３）に記載の方法に従って後処理した。収 量：０．６２７（７７％）。ＴＬＣは１つの主点を示した（　Ｕｖ２５！”、Ｃ １２／　：カルボキシジン“、ニンヒｐ　＋）ン÷、Ｓｌ：　Ｐ、ｆ＝０．３１ ２．８２　：　Ｒｆ＝０．５３６　）。

（Ｇ４ｕ（ｒ−ＯｔＢｕ）−Ａｓｐ（β−０ｔＢｕ）−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ（Ｎｇ− Ｂｏｃ）−０ｔＢｕ）２（６）：０．５０　ｆ　（０，２５ｔｌシ）の化合物（ ５）をＣＨ２Ｃ４２中の２０％ピペリジン２．５−に溶解し、そして（２）に記 載のように処理した。

ＴＬＣ＆？１ツ（７）ニンヒｒｌＪン陽性点（８２：　ｈｒ＝ｏ、１５４）　ノ みを示した。

（ｐＧｌｕ−０１ｕ（ｙ−ＯｚＥｕ）−Ａｓｐ（β−０ｔＢｕ）−Ｃｙｓ−Ｌｙ ｓ（Ｎｇ−Ｂｏｃ）　−ｏ　ｔＢｕ）　２　（７）　： 約０２５四ｌの化合物（６）および０．２０６９　（０，５４６−ｆ４　）のｐ Ｇｌｕ−ＯＰＣｌＰを２．５　ｍｌのＤｌ、ｉＦに溶解し、室温で１５時間攪拌 した。（３）に記載の方法に従って後処理した。収量：０．２５９９（５９％） 。ＴＬＣは１点（Ｕｖ２５４÷、ニンヒドリン÷およびｃｚ２　／　、７カルボ キシジン＋、Ｓ２　：　ｐ、ｆ＝ｏ、１１７　）　オよび痕跡量の不納物のみを 示した。

（ｐｏｌｕ−’０１ｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２　（８）ｏｌｌｏｒ（ｏ、 ｏ６３ｒ、ｌ、ａ）の化合物（７）を５１ｎｌの８０％ＴＥＡ（Ｃ！（２Ｃ４２ ）１．で溶解し、室温で３０分間攪拌した。溶媒を蒸発させ残留物を（４＠ｌの 五２０＋２ゴのＣＨＣ４ｓ　）に溶解した。水相を３ｄのＣＨＣｌ％で２回洗浄 し、減圧下で蒸発乾固シタ。粗生成物（Ｄ、　Ｄ　５　Ｄ　９　）を７５％＝ｚ Ｏ＝　（ａｑ　、）中１７）０．１％ＴＦＡを溶離剤として用いてＬｏｂａｒ　 （Ａ−）　ＲＰ　８カラム上で精製した。

生成物を凍結乾燥した後、５％ｇｔｏＨ（ａｑ、）中の０．１％ＴＦ、！、、を 溶離剤として用いて同じカラム上で再クロマトグラフィー処理した。生成物を凍 結乾燥した。収量：（１，０１６２゜ニンヒドリン“、Ｃ４２／ジカルボキシジ ン“およびＵｖ２５４÷生成物ハＴＬＣＫ　ヨり相同であり（Ｓｘ　：　Ｒｆ＝ ０．４３６）、セしてＨＰＬＣにより痕跡量の不純物のみが検出された。

アミノ酸分析：Ａｓｐ（１，０２）、Ｇｌｕ（ｔ９１）、ｃｙｓ（１，０８）、 Ｌｙｓ　（０，９３） 実施例　２ （Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２（９）　： 実施例（１）から得られる化合物（２）をＴＦＡ　ｌ＜溶解し、周囲温度で４０ 分間攪拌した。溶媒を減圧下（５０℃）で蒸発させ残留物の水溶性部分を５％三 ’ｕＯＨ（ａｑ　＋　）千の０．１％ＴＦＡ（ａｑ　、）を移動相として用いる ＬＯｂａｒ　（Ｂ）　ＲＰ　８カラム（ＬｉｅｒＣｋ）上のクロマトグラフィー に付した。カラムを−ｖＶ２゜。でモニターした。純粋な生成物を含有する画分 （τＬＣ）をプールし凍結乾燥した。生成物はＴＬＣ（Ｓ５　：　Ｒｆ＝０．５ ７　）　ｌ（：り相同であり、そしてニンヒドリンとの陽性反応を示し、乙１゜ ５４吸収はなかった。

ＨＰＬＣ−分析：９乙５％続枠（面積による）アミノ酸分析：　Ｃｙｓ　（１， ０１）、Ｌｙｓ　（０，９９）実施例　５ （Ａ　Ｅ　：ｌニー　’：　Ｈ，°５−二−ｓ）２　（１０）　：化合物（乙） を実施例２（移動相中２％Ｂ７０ＢＨ）に記載のように処理してでヒ金物（１０ ）を得た。生成物はＴＬＣ＋で二つ相同であり（Ｓ３　二Ｐ、ｆ＝０．６４　） 、ニンヒドリンとの陽性反応を示し、ニ”〜“２５４吸収がなかった。

五三ＬＣ−分析、９７９％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（０，９９ ）、ｃｙｓ（１，０３）、Ｌｙｓ　（０，９８）実施例　４ （３ニー、’、ｓ　ｐ−ＣＮ−ε−Ｌｙｓ）２（１１）　：化合物（６）を実施 例２１ζ記載のように処理して化合物（１１）を得た。生成物はＴＬＣにより相 同であり（ｓ３：Ｒｒ＝０８３）、ニンヒドリンとの陽性反応を示し、Ｕｖ２５ ４吸収がなかった。

ＨＰＬＣ−分析：１００％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（１，Ｃｌ ８）、ＣｙＳ（０，９７）、Ｇｌｕ　（０，９８）、Ｌｙｓ　（０，９８） 実施例　５ （ｐｃｎｕ−ｅｌｕ−Ａｓｐ＝ｃｙｓ）２（１２）　：化合物（１２）をＢ１０ １ｙ−ａｘ　４１７０　自動ペプチド合成器および溶媒としてのＤＩ、／Ｆを用 いる連続フロー固相ペプチｒ合成法によりモノマーとして合成した。

試薬：　Ｆｙｏｃ−ｃｙｓ（ｒｒｔ）−ｓ；−ｓＲｒｓ−ＲＥｓｘＮ（Ｂａｃｈ ｅｍ）　；　Ｆｐｏｃ−Ａｓｐ（β−０ｔＢｕ）−０ＰＦＰ　；　ＦＭＯＣ−Ｇ ｌｕ（γ−○ｔＢｕ）−０ＰＦＰ　；　ｐＧｌｕ−ＯＰＣＬＰ　；触媒としての 五〇］３Ｔ　０ＦＭＯＣは各カンプリング工程後Ｄ１０′中の２０％ビイリジン により除去した。完全に保護されたベプチｒを固体支持体上でＤＩＪＦ中の０． １Ｍヨウ素（２〜３当量）を用いて１５分間処理することによりジスルフイｒ架 橋、従って二量体が確立した。ＤＭＦで洗浄した後イプチＰを固体支持体から分 離し、残りの保護基を一工程でＣＨＡＣ４中５０％ＴＦＡを用いて４０分間処理 して除去した。樹脂をろ去し、ろ液を減圧下（３０℃）蒸発乾固させた。残留物 を０．１％ＴＦＡ（ａＱ、）に溶解し、移動相として４％プロ・ぞノー２−オー 　＃　（ａｑ−）中の０．１％ＴＦＡ（ａｑ、）を用いるＬｏｂａｒ　（Ｂ）Ｒ Ｐ　Ｂカラム上のクロマトグラフィーに付した。カラムをＵｖ２２ｏでモニター した。純粋な生成物（ＨＰＬＣ）を含有する画分をブー”’２５４吸収がなかっ た。

ＨｐｚＣ−分析：　９６．９％純粋（面積による）アミノ酸分析：ＡＳｐ　（ｔ 　ｉ　５　）、Ｃｙｓ　（ａ、ｑ　９　）、ｃｌｕ（ｔ８５）実施例　６ （ｐ　ＯＩ　ｕ　−０４’ｊ　−Ｃ−；　Ｓ　−Ｌｌ−Ｓ　）　２（ｉ　３　） 　’。

化合物（１乙）を合成１−１その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載 のようにして精製した。

前記されていない試薬：　ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（Ｎｇ−ＢＯＣ）−８ＡＳＲＬＮ　 −Ｐ、ミＳＩ’コ；　Ｆ４．イ０Ｃ−Ｃ”、−Ｓ　（Ｓ−Ｔ：　’＋　）　−〇 ＰＦＰ　６生成物はＴＬＣにより相同であり（Ｓ３　：　＝、ｒ＝ｏ、４９　） 、ニンヒドリンとの陽性反応を示しビＶ２５４吸収はなかった。

ＨＰＬ　Ｃ−分析：１００％純粋（面積Ｋｊる）アミノ酸分析：Ｃｙｓ（１，０ １）、Ｇｌｕ（１，９８）、Ｌｙｓ　（ｔｏ　１）実施例　７ （ｐＧｌｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２　（１４）　：化合物（１４）を合成 し、その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載のようにして精製した。

生成物はＴＬＣにより相同であり（Ｓ３：　Ｒで±０５５）、ニンヒドリンとの 陽性反応を示し、Ｕｖ２５４吸収はなかった。

ＨＰＬＣ−分析：９７５％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（１，０４ ）、ｃｙｓ　（０，９６）、Ｇｌｕ　（０，９７）、Ｌｙｓ（１，０２） 実施例　８ （ｐＧｌｕ−Ａ、５ｐ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）　２　（１５）　：化合物（ １５）を合成し、その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載のようにし て精製した。生成物はＴＬＣにより相同であり（ｓｘ：ｐ、ｆ＝ｏａ２）　、ニ ンヒドリンとの陽性反応を示し、ＵＶ２５４吸収はなかった。

ＨＰＬＣ−分析：９９３％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（ｉ、ｃ３ ）、Ｃｙｓ　（０，９６）、Ｇｌｕ　（２，０９）、Ｌｙｓ　（０，９４） 実施例　９ （ｐＧｌｕ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２（１６’）　：化合物（１６ ）を合成し、その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載のよつ１（シて 精製した。生成物はＴＬＣにより相同であり（Ｓ３二三ｊ＝０．３８）、ニンヒ ドリンとの陽性反応を示し、Ｕ″＼°２．４吸収はなかった。

ＨＰＬＣ−分析：ｉ０Ｄ％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（２０６） 、Ｃｙｓ　（０，９８）、Ｃ−二ｕ（０，９８）、ＬｙＳ　（０，９８） 実施例　１０ （ｐ（）ｌｕ−Ｃ−：ｕ−ＧＩａ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２（１７）　：化合物（１ ７）を合成し、その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載の二うにして 精製した。生成物はＴＬＣにより相同であり（Ｓｓ　：　Ｒｆ＝０．３９）　、 ニンヒドリンとの陽性反応を示し、ＵＶ２５４吸収はなかった。

ＨＰＬ、Ｃ−分析、９９９％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ｃｙｓ（０，９ ５）、Ｇｌｕ　（２，９０）、ＬＹＳ（１，１５）実施例　１１ 化合物（１８）を合成し、その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載の ようにして精製した。前記されていない試薬：Ｆ〕、ζ○Ｃ−ＡＢ　＋ｌ　−Ｑ ｐＩＩ”ｐ　、生成物はＴＬＣにより相同であり（３３：　ｐで＝：Ｑ、４２　 ）　、ニンヒドリンとの陽性反応を示し、ＵＶ２５４吸収はなかった。

：；ＰＬＣ−分析：９８２％純粋（面積による）アミノ酸分析：　ｐ−ｓｘ　（ １，１）、Ｃｙｓ　（ｔＯ３）、Ｃ−１ｕ（１，９）、Ｌｙｓ　（０，９６） 実施例　１２ （ｐＧ４ｕ−ＧＬｐ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２　（１９）　’化合Ｔｈ　（ １９）を合成し、その相当するアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載の二つＫｌ 、て精製した。前記されていない試薬、別、４ＣＣ−ＧＬ＝−○ＰＦＰ　０生成 物はＴＬＣに二つ相同であり（Ｓ！：Ｆ、ご＝＝０．４５）、ニンヒドリンとの 陽性反応を示し、７〜′２５を吸収はたつ）つた。

″：、Ｐ″−ニー分析、９８３％純枠（面積に：る）アミノ酸分析：Ａｓｐ（１ ０９）、Ｃｙｓ　（１０６）、Ｇ３．ｘ　（ｉ、　８９　）、Ｌｙｓ（０，９６ ） 実施例　１３ （ｐＣ−二、＝　−＝　１ｖ　−Ａ　ｓ　ｐ　−Ｃｙ　ｓ−ｐ−ｒ　ｇ　）２　 （２０）　二化合物（２０）を合成し、その関連したアミノ酸誘導体を用いて実 施例５記載のようにして精製（移動相として５％プ＝）ξノー２−オール）した 。最後にＴＦＡ中の°１０％テオアニノールを用いて脱プロトン化した。

記載されていない試薬：’　ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−８ＡＳＲＩＮ−Ｐ３ ＳＩＮ０生成物はニンヒドリンとの反応を示さず、ＵＶ２５４吸収はなかった。

ＨＰＬＣ−分析：９９．４％純ｅ（＋Ｉｔ＋ｆｆｔＫ！ル）アミノ酸分析：Ａｒ ｇ（０，９２）、ＡＳＩＩ）　（１，１２）、ａｙｓ（ｔｐｏ）、ｅｉｕ（１， ９６） 実施例　１４ （０１：ｚ−Ｇ４ｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２　（２１）　：化合物（２１ ）を合成し、その関連したアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載のようにして精 製した。生成物はＴＬＣにより相同であり（Ｓ５　：　Ｒｆ＝０．５７　）　、 ニンヒドリンとの陽性反応を示し、ＵＶ２５４吸収はなかった。

ＨＰＬＣ−分析：９４．７％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（ｔｏｏ ）、ＣｙＳ　（１，０１）、　Ｇｌ）：（２，０２）、Ｌｙｓ　（０，９６） 実施例　１５ （ｐｒｏ−ｏｌｕ−Ａｓｐ−ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２　（２２）　：化合物（２２） を合成し、その関連したアミノ酸誘導体を用いて実施例５記載のようにして精製 した。生成物はＴＬＣにヨリ相同テ＆’）　（８５：Ｒｆ＝＝０．５７）　、　 二７ヒｆ＋）７との陽性反応を示し、ＵＶ２５４吸収はなかった。

Ｉ（ＰＬＯ−分析：９８．２％純粋（面積による）アミノ酸分析：Ａｓｐ（１， ０６）、Ｃｙｓ　（１，０１）、Ｃ，ｌｕ　（０，９９）、Ｌｙｓ　（０，９９ ）、ＰｒＯ（０，９６）生際調査報告 黒際調査報告 ；巳εフ００フε４

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．式（Ｉ） ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）（式中、すべてのアミノ酸単位はＬ− 配置であり、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があり ます▼、▲数式、化学式、表等があります▼または水素原子であり、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼または ヒドロキシ基であり、 ｎおよびｍは独立して１または２の整数であり、ａおよびｂは独立して０または １の整数であり、Ｒ、Ｒ′およびＲ′′は独立してヒドロキシ基またはアミノ基 である。 但し、ＡおよびＢがそれぞれ水素原子およびヒドロキシ基である場合、ｂは整数 の０ではない）の化合物およびその生理学的に許容しうる塩。
2. ２．ｂが整数１であり、ｍが整数１であり、そしてＲ、Ｒ′およびＲ′′がヒド ロキシ基である請求項１記載の化合物。
3. ３． （‘Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２ （Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２ （ＧＩｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２（ｐＧＩｕ−ＧＩｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ） ２（ｐＧＩｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２（ｐＧＩｕ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｃｙ ｓ−Ｌｙｓ）２（ｐＧＩｕ−ＧＩｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａｒｇ）２（ＧＩｕ−Ｇ Ｉｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ）２（Ｐｒｏ−ＧＩｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ ）２である請求項２記載の化合物。
4. ４．請求項２記載の化合物である化合物（ｐＧＩｕ−ＧＩｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ− Ｌｙｓ）２。
5. ５．式（ＩＩ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）（式中、Ａは▲数式、化学式、表等 があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があ ります▼、水素原子またはアミン保護基であり、Ｂは▲数式、化学式、表等があ ります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、ヒドロキシ蕃またはカルボキシ ルブロツキング基であり、ｎおよびｍは独立して整数１または２であり、ａお工 びｂは独立して整数０または１であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ８およびＲ１０はアミノ 、ヒドロキシ、保護されたアミノまたはカルボキシル保護基であり、Ｒ３、Ｒ４ 、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ９は水素原子またはアミン保護基である。 但し、Ａが水素原子またはアミン保護基であり、そしてＢがヒドロキシ基または カルボキシルブロッキング基である場合、ｂは整数０ではない）の化合物を脱保 護化することからなる請求項１記載の化合物の製造方法。
6. ６．脱保護化が酸加水分解、水素化分解、アンモノリシスまたは酵素加水分解に より行なわれる請求項５記載の方法。
7. ７．式（ＩＩＩ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）（式中、Ａ、Ｂ、ｎ、ｍ、ａ、ｂ 、ＲおよびＲ′は上述の通りであり、そしてＲ′′は水素原子、または酸化条件 下で除去されうるチオール保護基である） の化合物を二量化することからなる請求項１記載の化合物の製造方法。
8. ８．請求項５記載の式（ＩＩ）の化合物。
9. ９．活性成分として１種またはそれ以上の請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、ま たはその生理学的に許容しうる塩を薬学的起体または賦形剤とともに含有する医 薬組成物。
10. １０．有効量の請求項１記載の化合物が人間または動物の被験体に投与されるか かる被験体の造血系を刺激する方法。