JPH02501740A - 腫瘍治療における毒性作用を消去するためのメタロポルフィリンの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 腫瘍治療における毒性作用を消去するためのメタロポルフィリンの°使用 発明の背景 合成ヘム類似体錫プロトポルフィリン−Ｉ　Ｘ　（５ｎＰＰ　）はヘムオキシゲ ナーゼの薬効を持つ抑制剤即ちヘムが肝汁色素に分解する際の速度制限酵素であ る。更に５ｎＰＰは、新生児嘩乳動物の高ビリルビン症の完全抑制剤として公知 であり、また動物やヒトの自然発生的な或は実験的に誘導された黄痕の様々の形 態での血漿ビリルビンレベルを減する能力を持つものである。

５ｎＰＰには同じ活性の２つの類似体が知られている。

即ち錫メゾポルフィリン（ＳｎＭＰ　）と錫ジョードジュウテロボルフィリン（ ５ｎＩ２ＤＰ　）である。腫瘍が存在すると（自然発生であろうと移植であろう と）ヘムオキシゲナーゼ活性即ちヘム分解作用の速度制限酵素が増加し、一方α −アミルプリン醗合成酵素（ＡＬＡ合成酵素）活性即ちヘム合成の速度制限酵素 が減少し、ミクロソーマヘムの濃度、チトクロムＰ−４５０の肝臓中の濃度及び 混合機能性オキシダーゼの活性もこのヘム蛋白に応じて減少するものとして知ら れている。癌の治療に様々な型があること、特に化学療法剤がこれらの効果を増 加するものとして知られている。

多数の抗新生物化学療法剤が知られているが、これらの活性は多様な代謝活性に 基づいている。これらとしてはＮ−アルキル−Ｎ−ニトロソウレアーゼやマイト マイシン−Ｃのようなアルキル化剤、６−メルカプトプリンや５−フルオロウラ シルのような抗代謝産物、アンキシンやト１１フデルモルのような蛋白質合成抑 制剤、アルキル化とＤＮＡ中への挿入によって蛋白合成を抑制し、フリーラジカ ルの発生や肝臓（と心臓）グルタチオン貯蔵の消耗をもたらすアントラサイクリ ンタイプの抗腫瘍剤がある。挿入とは抗腫瘍剤が移動してＤＮＡらせんの隣接塩 基対間の分離を起させ、挿入ＤＮＡの性質に著しい変化をもたらすような方法を いう。アントラサイクリン型抗新生物製剤は、現在この種の治療的に有用な生産 物として広く使用されている。この種の抗腫瘍抗生物質はヒト白血病、生殖細胞 癌、肺Ｆ！！（小細胞）、肉腫、胃癌、卵巣癌の治療に使用されている。アント ラサイクリンはよく知られた抗腫瘍剤で、少なくとも１９７０年以来、ヒトの様 々な腫瘍の臨床的治療に使用されている。特にドクンルピシンが最もよ（知られ ている。ドクソルビシンは広い抗腫瘍活性スペクトルを有し、この活性は広範囲 較的治り悪い腫瘍、特に柔組織、骨肉腫や膀胱癌に及ぶものである。ドクソルビ シン他の対腫瘍活性はカーター〔ジャーナルオプザナシ３ナルキャンサーインス テイテュート５５巻第６号１２月、１９７５．１２６５〜１２７４ページ〕に詳 述されている。

臨床的な注意が払われた他のアントラサイクリンとしてはダウノルビシン、カル ミノマイシンＡＤ−３２がある。他にも有望なものもあるが、臨床的に広く用い られているのはドクソルビシンとダウノルビシンである。

アントラサイクリンは核酸合成の抑制における選択的効果に基づいて２つに分け られる。タイプエのアントラサイクリンには例えばドクソルビシン、ダウノルビ シンとカルミノマイシンがある。これらはＤＮＡ、全細胞孔ＮＡと核ＲＮＡ合成 をほとんど同じ濃度で抑制する。タイプ亘のアントラサイクリンは例えばマイト マイシンＣ１アクラシノマイシンとマイトマイシンで、ＤＮＡ合成の抑制のため に必要とされる６−７倍低い濃度で全細胞ＲＮＡ合成を抑制し、１７０−１２５ ０倍、低い濃度で核グレリボゾーム合成を抑制する。両方とも等しい毒性効果を 持つ。本発明は両方のタイプに適用される。

アントラサイクリンは肝臓におけるチトクロームＰ　−４５０によって代謝され る。これゆえこのヘム蛋白の正常レベルが肝臓で維持されることが必要である。

本発明 腫瘍を有する哺乳動物を５ｎＰＰ　、　ＳｎＭＰ又はＳｎＩ。ＤＰで処理するこ とによってヘム・オキシゲナーゼ活性を減少させ、ＡＬＡシンセターゼ活性、肝 ヘム及びチトクロムＰ−４５０量を正常化し、ガン治療または腫瘍の毒性効果を 消去することが判った。またこれらのメタロポルフィリンを化学療法剤、特にア ントラサイクリン型抗腫瘍剤、例えばドクソルビシンと共用すると、化学療法剤 のヘム及びチトクロムＰ−４５０に対する毒性効果を減することが判りた。メタ ロポルフィリンと化学療法剤との共用とは金属ポルフィリンがその効力を発揮す る時間内に投与されることを意味する。それは化学治療が開始される前の数日間 、例えば２乃至５日間である。そして、２つの薬剤を同時に投与すること、成可 く２つの成分を含む１つのタブレットの形で投与することが好ましい。

代表的な例は例えばドクソルビシンで化学治療する場合、耐え得る最大の量を継 続投与して行くと毒性効果が激しくなり投与量を減らすか又は治療を中断して毒 性効果が実質的に中和されるのを待つことが必要となる。この時点で、サイクル が繰り返されるのである。本発明の主な利点は体内のチトクロムＰ−４５０及び 他の関連する酵素の正常値を維持することによって特定の化学治療をより高い投 与量で長時間継続させ得ることである０本発明は腫瘍を有する嘔乳動物（腫瘍治 療中か否かを不問）のヘム及びチトクロムＰ−４５０の減少を防止する方法、即 ち未処置の腫瘍或は抗新生物治療中であっても、希望する結果を達成するに有効 な量の５ｎＰＰ　、　ＳｎＭＰ又はＳｎ　Ｉ　２　Ｄｒを投与する方法である。

特に５ｎＰＰ　、　ＳｎＭＰ又はＳｎ　Ｉ　２　ＤＰを患者に投与し腫瘍による 肝ヘム及びチトクロムの減少を防止し、以て化学治療中の有無に関らず腫瘍に基 因する毒性効果を防止することにある。不発明はその方法に使用する治療剤でも ある。

雄スプラグ・ドーレイラット（雄、１５０−２００５’　、１６匹／群）の３群 を使用して本発明組成物の効果を測定した。ラットに水と粉食（プリナ）とを与 えた。Ａ群は未処置、Ｂ群にはドクソルビシンを初日に皮下注射、０群には予め ５ｎＰＰを１日与えてからドクソルビシンを投与（初日）した。

トクソルビシン（１０■／体重ｋｐ　）のヘム代謝に及ぼす影響（対時間）を図 に示す。図からヘム・オキシゲナーゼ活性が増大し、ＡＬＡシンセターゼ活性が 減少すること、チトクロムＰ−４５０のミクロソーム量が２日目に最大となり、 １００日目正常値に復することが判る。ドクソルビシンを５ダ／体Ｎｋｆ投与で も略同様である。

第１表に示すように１０１ｎ９／体重ｋｇのドクソルビシン皮下注射で肝ヘムオ キシゲナーゼ活性に統計的に有効な（Ｐ（０，０５）増加（２０％）が見られ、 ＡＬＡシン七ターゼ活性は５８％、またヘムのミクロソーム含量は４５％、チト クロムＰ−４５０は１８％の付随的な減少が見られる（ドクソルビシン投与より ２日目）。ドクソルビシン投与より１日前に５ｎＰＰを投与すると、ヘム代謝に かかる変化は見られない。ドクソルビシンと５ｎＰＰとを投与した群では、ドク ソルビシン単独の群に比して肝ヘムオキシゲナーゼ活性に著しい減少（９２％） 、肝ＡＬＡシンセターゼ活性に著しい増加（３５％）が見られる。

肝チトクロムＰ　−４５０及びミクロソームヘムのレベルカ未処置群のものと実 質的に変らないということはドクソルピシンのヘム代謝に及ぼす悪影伽を５ｎＰ Ｐが防止することを示すものである。ＳｎＭＰ或はＳｎ　Ｉ　２　ＰＰと他のア ントラサイクリン型抗腫瘍剤との組合せでも同様な結果が得られる。

試験で使用された動物は、１２時間／１２時間の明／暗サイクルに制御された環 境に保持された代謝ケージ中で順化させたものであった。

非経口投与用組成物は、各注射毎に新たに、０．４ＮＮａＯＨ（２０％Ｖ／Ｖ　 ）全添加１．テｐＨ１２０ｆｌＫヲ調Ｍし、Ｉ　Ｎ　Ｈ（ＪでｐＨ７，５に調節 し、０．９％生理食塩水で最終容量とした。注射毎の投与レベルは、５０μｍｏ Ｊ／ｋＰｂ、ｗ、であった。対照動物には、同等量の生理食塩水を投与した。

動物は、犠牲にする前１６時間、水の入手を自由にした以外断食させた。肝臓を 氷冷した生理食塩水にその場で（ｉｎ　５ｉｔｕ　）散布し、しょ糖（０，２５ Ｍ）含有トリス塩酸緩衝液（０、ＯＩＭ、ｐＨ７，４）中で均質化した。均質化 物（２５％ｗ／ｖ）を９０００　Ｆで２０分間遠心分離し、得られたミトコンド リアペレットをＡ　Ｌ　Ａ−シンテターゼ活性検定に使用した。９０００　ｘｇ 上清をベックマン（Ｂｅｃｋ−ｍａｎ）Ｌ５−５０超遠心分１ｍＩ＆Ａ（ｕｌｔ ｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ　）中で１０５０００　ｘｇで６０分間遠心分離した 。ミクロソームペレットを最小限容量のリン酸カリウム緩衝液（０，１Ｍ　。

ｐＨ７，４）中に再懸濁し、シトソール（ｃｙｔｏｓｏｌ　）をピリペルディン リダクターゼ（ｂｉｌｉｖｅｒｄｉｎｒｅｄｕｃｔａｓｅ　）の原料として使用 した。チトクロームＰ−４５０の含有量は、Ｃｈｅｍ、、　２３９　：　２３７ ９　（１９６６）及び２３９７２３７０　（１９６６）　）によって測定し、蛋 白の濃度は、結晶性牛血清アルプミンを標準として使用し、ロー！Ｊ−（Ｌｏｗ ｒｙ　）等の方法（Ｊ、　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ−、１９３２６５（１９５］）　 ）によって測定した。ヘム、ＡＬＡシンテターゼ及びヘムオキシゲナーゼの検定 は、ダルモンド及びカッバス（Ｄｒｕｍｍｏｎｄ　ａｎｄＫａｐｐａｓ　）がＰ ＮＡＳ　、　７８　、６４６６−６４７０　（１９８１）に記載したようにして 行なった。統計処理は、スチューデンツｔ−テスト（５ｔｕｄｅｎｔ　’ｓ　ｔ 　−ｔｅｓｔ　（Ｐｒｏｐｈｅｔ　）　）によって行なった。

本発明の製品は、注射用の非経口組成物として提供される。選択したｌ又は複数 の金属ポルフィリンは、ゴマ油、ビーナツツ油又はオリーブ油等の不活性油中に 懸濁することができるし、また、ｐＨ約７乃至８、好ましくは７．４乃至７．５ の等張緩微水溶液中に懸濁することもできる。有用な緩衝液としては、（えん酸 ナトリウム−くえん酸及びりん酸ナトリウムーりん酸を挙げることができる。

望ましい等張性は、塩化ナトリウム、又は、その他の薬学的に許容できる薬剤、 例えば、グルコース、は５ｒＲ。

酒石酸ナトリウム、プロピレングリコール又はその他の有機若しくは無機の溶媒 等によって達成することができる。塩化ナトリウム及びグルコースは純粋な形で 容易にしかも安価に入手できるので好ましい。

不発明の組成物には、主要活性成分として金属ポルフィリンを含有せしめること ができ、１だ金属ポルフィリンとドキソルビシン等の化学治療剤との混合物を含 有せしめることができるが、該組成物を凍結乾燥形態として等張生理食塩水等の 水溶性媒体又は等張緩衝液中で再構成するように製造することもできる。

最適の投与量は、選択された金属ポルフィリン、年令、体重、一般的健康状態、 腫瘍の負荷等の要因及びその他車業者に良く知られた要因に基づいて担当医師に よって決定される。組成物は、一般に、−又は複数の処置の為の投与単位形態で 提供される。非経口投与用の投与単位形態は、代表的には、７．１５乃至７１． ５　ｍ９／ｌｄのＳ　ｎＰＰ　ｙ　０．７］９乃至７．１９　ｍｙ／ｌｎｌのＳ ｎＭＰ　；又は９．１５乃至９１．５　ｍ？／ｌｄ−のＳｎ　ｌ２ＤＰを含有し 、それぞれ０．７１５乃至７．１５　ｍｙ／ｋｇ　ｂ、ｗ、　；　０．０７１９ 乃至７．１９１ｎｖ′ｋＰ　ｂ−Ｗ、を又は０．９１５乃至９．１５　ｍ９７ｋ ｇ　ｂ、ｗ、の投与量をもたらすようにさ゛れる。もちろん、投与量単位毎の化 学治療剤の量は、選択された薬剤、患者の臨床状態及び担当医師の評価可能な他 の要因によってさ１ざまである。ドキソルビシンの場合、注射用に調整される各 投与単位は、約２０乃至７０　ｍｙ／ｎｌのドキソルビシンを代表的には薬学的 に許容できる酸性塩として含有する。

又、水性媒体中で所望の量の金属ポルフィリン及び望１しくは抗腫瘍剤を含有す るように再構成するに十分な凍結乾燥粉末を包含する容器形態に一投与単位を構 成することもできる。

不発明の治療用組成物はかかる目的に使用される通常の手順で調整することがで き、本明細誉で述べる必要はない。

Ｐ柑　（υ　） ｅ−ＡＬＡ−５休ｌ！− 手続補正書（自発） 平成元年メ月２７日

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．腫瘍治療の毒性効果を消去する方法であって、上記治療を受けて上記消去を 必要とする患者に対し、上記消去を生じさせるに有効な量のＳｎＰＰ、ＳｎＭＰ 又はＳｎＩ２ＤＰを投与する方法。
2. ２．化学治療の毒性効果を消去する方法であって、上記治療を受けて上記消去を 必要とする患者に対し、上記消去を生じさせるに有効な量のＳｎＰＰ．ＳｎＭＰ 又はＳｎＩ２ＤＰとともに治療上効果的な量の化学治療剤を投与する方法。
3. ３．化学治療剤がアンスラサイクリン型の抗腫瘍剤である請求項２記載の方法。
4. ４．アンスラサイクリン型の抗腫瘍剤がドキソルビシンである請求項３記載の方 法。
5. ５．薬学的に許容できる担体と、主要活性成分として化学治療剤とともにＳｎＰ Ｐ、ＳｎＭＰ又はＳｎＩ２ＤＰを包含する非経口投与用薬剤組成物。
6. ６．化学治療剤がアンスラサイクリン型の抗腫瘍剤である請求項５記載の薬剤組 成物。
7. ７．アンスラサイクリン型の抗腫瘍剤がドキソルビシンである請求項６記載の薬 剤組成物。
8. ８．上記薬学的担体が緩衝等張生理食塩水溶液である請求項５、６又は７項記載 の薬剤組成物。
9. ９．上記薬学的担体が緩衝等張グルコース水溶液である請求項５、６又は７項記 載の薬剤組成物。
10. １０．化学治療剤及びＳｎＰＰ、ＳｎＭＰ又はＳｎＩ２ＰＰを包含する凍結乾燥 された組成物。
11. １１．化学治療剤がアンスラサイクリン型の抗腫瘍剤である請求項１０記載の凍 結乾燥された組成物。
12. １２．アンスラサイクリン型の抗腫瘍剤がドキソルビシンである請求項１１記載 の凍結乾燥された組成物。