JPH02504154A - 細胞分化の誘発に有効な化合物の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 細胞分化の誘発に有効な化合物および該化合物の製法本発明は、保健福祉布の認 可および補助金により支持された実験の過程でなされ几ものである。政府は本発 明に対し、ある種の権利を有する。

本発明は新規ビタミンＤ化合物およびその一般的な製法に関する。

特に、本発明は、悪性細胞の分化において特異的で予期せぬほどの活性を示すＩ α−ヒドロキシビタミンＤ側鎖同族体、および特異的な白血病を含め、腫瘍疾患 の治療に新規な該化合物を用いる方法にビタミンＤ系の化合物は、動物やヒトの カルシウム恒常性の制御に必須な薬剤としてよく知られている。また、カルシウ ム代謝の調整には、ビタミンＤ自体ではなく、動物や人体において該ビタミンＤ から形成された代謝物が有効であることも知られている。これに関連し、最も重 要なビタミンＤ代謝物は１α−２５−ジヒドロキシビタミンＤ　ｓ（１、２５− （ＯＨ）ｔＤ　ｓ）である。この化合物、並びにある種の構造類似体、例えばｌ α−ヒドロキシビタミンＤ３（ｌα−０Ｈ−Ｄ、）、１α−ヒドロキシビタミン Ｄ、（１α−ＯＨＤｔ）ま７こはある種のフッ素置換１　、２５　　（ＯＨ）ｙ Ｄ　ｓ誘導体は、腸のカルシウム吸収や骨からのカルシウムの再吸収（骨移送） に対し、非常に有効である。このため、これらの化合物は、腎性骨ジストロフィ 、上皮小体機能低下症、ビタミンＤ耐性くる病やオステオポローシスなどの種々 のカルシウム代謝障害を治療するための医薬として、現在使用されているかまた はその使用が提案されている。

近年の研究によれば、１．２５　　（ＯＨ）＊Ｄｓは、イン・ビボでのカルシウ ム恒常性の制御におけるその役割に加え、他の生物学的機能を示すことが確証さ れている。特に、１　、２５　　（ＯＨ）ｔＤｓおよびその関連化合物（例えば 、ｌα−ＯＨ−Ｄ　ｓ、ｌ　、２５−（ＯＨ）ｔＤ、のフルオロ類似体）は、細 胞分化の誘発に対し、非常に有効であることが証明されている。最も重要なこと として、１．２５−（ｏｉ−ｉ）ｔＤ、は、悪性細胞（とくに、白血病細胞）の 増殖を抑制し、培養中の分化を正常な単核細胞に変換させることが判明している 〔アベら、プロシーディング・オブ・ナショナル・アカデミイ・オブ・サイエン ス（Ａｂｅ　ｅｔ　ａｌ、、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｆｆ、Ａｅａｄ、５ｃｉ）、ＵＳ Ａ７８巻、４９９０頁（１９８１年）：ホンマら、イビッド（Ｈｏｎｍａ　ｅｔ 　ａｌ、、１ｂｉｄ）、８０巻、２０１頁（１９８３年）〕。この著しい活性に より、１．２５−　（ＯＨ）ｔＤ　３および関連化合物は、抗ガン剤、とくに抗 白血病剤として提案されている〔スダら（Ｓｕｄａ　ｅｔ　ａｌ、）、米国特許 第４３９１８０２号〕。しかしながら、これら化合物は、培養株中の悪性細胞の 分化において非常に有効であることが事実だとしても、カルシウム代謝に作用す る薬剤として同等の非常に高い活性を示すので、分化治療における抗ガン剤とし ての実際的な用途は、大きく制限されている。杭内血症剤として、イン・ビボで 有効な使用に必要なレベルでは、当該化合物は、その固有なカルセミツク（ｃａ ｌｃｅｍｉｃ）活性により、血液中のカルシウムを著しく高くかつ非常に危険な レベルに誘発しうる。このカルセミツク活性のため、これらの公知のビタミンＤ 化合物は悪性細胞の治療に用いることが妨げられたり、制限されており、シｆ； がって特異的な選択的作用がより大きな化合物が必要となっている。

本明細書において、「カルセミツク活性」または「カルセミツク作用」なる語は 、腸のカルシウム吸収（Ｃａ輸送）および骨からの再級収（骨移送）に対するビ タミンＤ化合物の刺激によって血中カルシウムのレベルを増加させるような、該 ビタミンＤ化合物のよく知られた能力に関する短縮語である。「分化活性」なる 語は、その正常細胞への分化を含め、近年発見されたある種のビタミンＤ化合物 の、悪性細胞の増殖阻止活性を意味する。

先行実験によれば、向上した分化活性を有する数種の化合物が製造されている。

すなわち、米国特許第４７１７７２１号ならびに他の刊行物〔オストレムおよび デル力、ステロイド（Ｏｓｔｒｅｍ　＆　ＤｅＬ　ｕｃａ、　Ｓ　ｔｅｒｏｊｄ ｓ）、４９巻、７３〜！０２頁（１９８８年）ニオストレムら、ジャーナル・オ ブ・バイオロジイカル・ケミストリイ（Ｏｓｔｒｅｔｂ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ　 、Ｂ　１ｏＩ２．　Ｃｈｅｉ、　）、２６２巻、１４１６４頁（１９８７年）〕 は、側鎖が炭素１つだけ長い１．２５−（ＯＨ）、ｔＤ類似体が１．２０　　（ ＯＨ）ｔＤｓ自体よりも約１０倍の白血病細胞の分化活性を示す旨開示する。し かしながら、かかる化合物は、カルシウム吸収の刺激および血しょうカルンウム レベルの上昇については、ｌ。

２５　　（ＯＨｒ）ｓとほぼ同等の効力のままであり、したがって前記したよう な、望ましくないほど強力な「カルセミツク作用」の問題は解決されていない。

したがって、かかる化合物は、分化：カルセミツク活性の比率改善を示すものの 、カルセミツク活性が親化合物（１゜２５　　（ＯＨ）＝Ｄｓ）と同様なほどに 高い点で、該化合物は選択性を示さない。選択的分化活性を示すと言われている 他のビタミンＤ−関連化合物が報告されている〔オストレムら（Ｏｓｔｒｅｍ　 ｅｔ　ａｌ、）、前掲；クボデラら、ケム・ファルム・プル（Ｋｕｂｏｄｅｒａ 　ｅｔ　ａｌ、、Ｃｈｅｍ。

Ｐ　ｈａｒｍ、　Ｂ　ｕｌ　１．）、３４巻、２２８６〜８９頁（１９８６年） ；イケカワら、ケム・ファルム・プル（Ｉ　ｋｅｋａｗａ　ｅｔ　ａｌ、、Ｃｈ ｅｍ、Ｐｈａｒ＋ｉ、Ｂｕｌ］、）、３５巻、４３６２頁（１９８７年）〕。し かし、これらの化合物は、本発明の化合物と比較すると、構造上明確な差異を有 する。

発明の概要 本発明は、非常に有利で所望の生物学的活性パターンを示す新規な部類の化合物 を提供する。これらの化合物は、悪性細胞の分化誘発において１．２５−（ＯＢ ）ｔＤｓと比較して非常に高い活性を示す一方、カルシウム代謝に対し示す効果 が１．２５−（Ｏ）Ｉ）　ｔＤｓよりも非常に低いことで、特徴付けられる。す なわち、これらの化合物は、非常に特異的な分化剤であり、その活性パターンに より、悪性細胞の分化治療に使用することができる。非常に高い分化活性を、著 しく減少または抑制したカルシウム代謝と組み合わせることにより、イン・ビポ において、これらの化合物を、血中カルシウムレベルを過剰に誘発することなく 悪性細胞の処置のために投与することができる。これらの特性のため、かかる化 合物は、上記目的の好ましい薬剤となる。

構造上、望ましい生物学的寄与を示す該化合物の重要な特徴は、側鎖が、２また は３つのメチレン単位を該側鎖に導入することによって延長されている１、２５ −（Ｏｌｌ）ｔＤ３の側鎖同族体である。すなわち、このタイプの化合物は、以 下の式で示される構造を特徴とする。

式中、Ｘ、ＹおよびＺは、同一または異なって、水素またはヒドロキン保護基、 およびｎは３ま１こは４の整数を意味する。

２４−ジホモ−１，２５−（ＯＨ）！Ｄｓおよびヒドロキシ保護誘導体、即ちｎ が３である上記構造を有する化合物、および２４−トリホモ−１，２５−（ＯＲ ）ｔＤｓおよびそのヒドロキシ保護誘導体、即ちｎが４である上記構造を有する 化合物は、上記式で示される化合物の、好ましい例である。

本発明の化合物は、米国特許第４７１７７２１号の２４−ホモ−ビタミンＤ化合 物に関連するものではあるが、しかしながら、本発明の該化合物は、構造上およ び生物学的特性の両方の点で、特徴付けられるものである。構造的には、該化合 物は、重要な特徴として該側鎖が、２または３つのメチレン単位を該炭素鎖に導 入することによって延長されている新規なビタミンＤ同族体であり、生物学的に は、該化合物は、１．２５−（ＯＨ）ｔＤｓと比較して、悪性細胞の増殖抑制お よび分化誘発において少なくとも類似の効力を有するかまたはそれ以上の効力を 有する一方、カルシウム活性が全くないかまたは著しく減少させた、高い選択性 を示す細胞分化剤である。

したがって本発明は、悪性細胞の分化促進や腫瘍疾患の治療に特に有用な新規な 化合物を提供するものである。

本発明は、またビタミンＤ化合物の新規な製法を提供する。この方法は、前記し た新規な化合物、並びに公知のビタミンＤ代謝物ま１；は他の同族体または他の 側鎖修飾ビタミンＤ誘導体の合成に使用することができる。

この合成の基本的概念は、別に特別に合成した側鎖単位を、２２位の炭素に置換 可能な基を有する予備形成ビタミンＤ核に結合させることにより、所望のビタミ ンＤ化合物をつくりあげることである。

必要な側鎖単位は、フェニルスルホン誘導体として調製され、必要なビタミンＤ 核は、合成目的物がｌα−ヒドロキシビタミンＤ型化合物のときには以下の構造 式を存するセコステロール誘導体である。

式中、ＸおよびＹは、水素またはヒドロキシ保護基、およびＬは、ハライドのよ うな脱離基、トンロキンもしくはメシロキシ、ま１こは同様な置換可能な官能基 を意味する。このタイプの好ましい誘導体は、ヒドロキシ保護Ｄ−２２−）シロ キシ化合物である。所望の側鎖の調製に用いるのに必要なフェニルスルホン化合 物は、以下の構造を有する。

Ｐ　ｈＳ　Ｏｔ−ＣＨｔ−Ｒ 式中、Ｐｈはフェニルまたはアルキル置換フェニル、およびＲは、アルキル、お よびヒドロキシおよびフルオロ置換アルキルからなる群から選ばれる基を意味し 、該ヒドロキシは、好ましくはヒドロキシ保護基から誘導される。

前記したビタミンＤ−２２−トシレートと、適切なフェニルスルホン単位の結合 は、スルホン化学の確立、された原理に基づく〔例えば、ビイ・ディ・マグナス 、テトラヘドロンＣＰ、Ｄ、Ｍａｇｎｕｓ、ＴｅＬｒａｈｅｄｒｏｎ）、３３巻 、２０１９頁（１９７７年）−トロストら、テトラヘトａン−レターズ（Ｔｔｒ ｏｓｔ　　ｅｔ　　ａｌ、、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　　Ｌｅｔｔｅｒｓ）、３ ４７７頁（１９７６年）参照〕。強塩基を媒介とする該反応は、以下の構造式を 有する付加物を生成する。

式中、Ｒ，ＸおよびＹは前記と同じ。上記の中間体付加物は、新規化合物である が、次いでこれを、金属アマルガム（例えばナトリウムアマルガム、アルミニウ ムアマルガム）含宵媒体中で還元させて、以下の構造式で示される所望のビタミ ンＤ化合物を製造する。

還元性脱スルホン化は、例えば金属／アルキルアミンまたは金属／ＮＨ３混合物 を用いる、溶解性金属による還元のような他の手段によっても達成することがで きる。次いで、ヒドロキシ保護基を常法で除去して、対応する遊離ヒドロキシ化 合物を生成することができる。

本発明の側鎖結合過程に用いられる、前記ビタミンＤ−２２−）シレート出発物 質は、公知の方法で調製することができる公知物質である　〔例えば、１ンドリ ヱーλら、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリイ（Ａｎｄｒｅｖｓ　 　ｅｔａｌ、、Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、）、５１巻、４８１９頁（１９８６年） 〕。また、該出発物質は、ハイドライド還元し次いでビタミンＤ−２２−エステ ルをトシル化することで調製することができる〔クトーネルら、テトラヘドロン ・レターズαｕＬｎｅｒｅｔ　ａｌ、、Ｔｅｔ、　１．ｅｔｔｅｒｓ）、２８＠ 、６１２９〜６１３２頁（１９８７年）参照〕。該エステルは以下の構造式で示 される。

式中、ＸおよびＹは水素またはヒドロキシ保護基、Ａはアルキルまたはアリール 基を意味する。本発明のビタミンＤ化合物の合成の一部としての、これら新規エ ステルの製造および使用は、本発明の別の態様である。

明白ではあるが、ビタミン核としてビタミンＤ−２２−トシレートを用い側鎖残 基としてフェニルスルホンを使用する前記方法は、選択されたアルキルまたはヒ ドロキシアルキル基Ｒに応じ、多数のｌα−ヒドロキシビタミンＤ側鎖類似体の 調製に使用することができる。好ましいフェニルアルキルスルホン単位は、Ｒが アルキルまたはヒドロキシアルキル基の化合物であり、以下の構造式で示される 。

式中、Ｕは、水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシおよび炭素数１〜４の炭化水素 残基からなる群から選ばれる基、ρ、ｍおよびｎは、独立して１〜５の整数、Ｚ は、水素またはヒドロキシ保護基を意味する。所望の生物学的活性（すなわち、 高い分化活性と全くないかまたは低いカルセミツク活性）を有する新規化合物の 製造に特に好ましいものは、ｎが３まには４の前記したスルホン単位である。

本明細書および請求の範囲において用いられるヒドロキシ保護基なる語は、ヒド ロキシ基の一時的な保護に通常使用される任意の基、例えばアシル、アルキルシ リルおよびアルコキシアルキルを意味し、保護ヒドロキシ基は、かかる保護基に より誘導されるヒドロキシ基である。「アシル」なる語は、その全ての異性体形 の炭素数１〜６のアルカノイル、または炭素数１〜６のカルボキンアルカノイル 基、例えばオキサリル、マロニル、スクシニル、グルタリル、または芳香族アン ル基、例えばベンゾイル、またはハロ、ニトロ若しくはアルキル置換ベンゾイル 基を意味する。本明細書および請求の範囲において用いられる「アルキル」なる 語は、その全ての異性体形の炭素数１〜ｌＯの直鎖または分枝鎖アルキルを意味 する。アルコキシアルキル保護基は、メトキシメチル、エトキシメチル、メトキ ンエトキシメチル、またはテトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロピラニルで ある。好ましいアルキルシリル保護基は、トリメチルノリル、トリエチルノリル 、ｔ−ブチルジメチルシリルおよび類似のアルキル化シリル残基である。

つぎに、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、これらに限定される ものではなく、単に製造法および該方法によって得られる新規化合物を示すもの である。これらの実施例において、アラビア数字により特定した化合物（例えば 、化合物１，２．３など）は、その処理工程図において番号を付した構造と対応 するものである。さらに、実施例では、該新規化合物の特徴的な生物学的特性、 例えば細胞分化剤および抗癌剤としての二メｔら化合物の適用において基材とし て役立つような特性を説明する。

赤外スペクトル（！Ｒ）は、ニコレット（Ｎ　ｉｃｏｌｅｔ）Ｍ　Ｘ　−Ｉ　　 Ｆ　Ｔ　−ＩＲスペクトロメーターにより、正味の油状物質からなる膜を用いて 得ｆ二。紫外線（ＵＶ）吸収スペクトルは、ヒタチ・モデル６Ｏ−１００−ＵＶ −ＶＩＳスペクトロメーターで記録した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、 ２７０または４００ＭＨｚにおいて、プルツカ−ＷＨ−２７０またはＡＭ−４０ ０ＦＴスペクトロメーターにより、挙げた溶媒中で記録した。化学シフト（δ） は内部対照ＭｅＳ　ｉ（δ：０゜００）またはＣＨＣｌ、（δニア、２４）から 低磁場方向へのものとして記した。

低ま几は高分解能マススペクトルは、特に断らなければ７０ｅＶにおいて、クラ トスＤＳ−５５データ・システムを備えたクラトス間Ｓ−５０ＴＣインストルメ ントで記録した。高分解データは、ピーク・マツチングにより得た。試料は、１ ２０〜２５０℃に維持したイオン源内に、ダイレクトーインサーンヨン・ブロー ベにより導入しに。カラムクロマトグラフィには、シリカゲル６０（メルク、７ ０〜２３０〜４００メツシユ）を用いた。薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）は、 予めコーチングしたアルミナ・シリカゲル・シートを用い、ＥＭサイエンス（ギ ブストーン、ＮＪ）のＵＶインジケーターにより・行った。用いた溶媒系はつぎ の通りである二人；クロロホルム−エタノール−８５：　Ｉ　５　（ｖ／ｖ）、 Ｂ１ヘキサン−酢酸エチル＝ｌ：１およびＣ，ヘキサン−酢酸エチル＝３：１゜ 高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）は、モデル６０００Ａソルベント・デリ バリイ・システム、モデル６ＵＫユニバーサル・インジェクターおよびモデル４ ５０可変波長デイテクターを備えたウォーターズ・アソンアエート液体クロマト グラフィを用いて行った。ゾルパックス−シリカ（フエノメネックス）カラム（ ６，２ｕ＋Ｘ２５ｃｍおよび１０ｘｚｘ２５ｃｘ）を用いた。溶媒系：Ａ：ヘキ サン中、３％２−プロパツール、Ｂ；ヘキサン中、２％２−プロパツール、Ｃ； ヘキサン中、６％２−プロパツール、Ｄ：ヘキサン中、１０％２−プロパツール 、Ｅ；ヘキサン中、２０％２−プロパツール、Ｆ、ヘキサン中、２％酢酸エチル 、ＨＰＬＣ試料の精製には、シリカゲル５ｅｐ−Ｐａｋ（ウォーターズ・アソシ アエート）カートリッジを用いた。３β−アセトキシ−２２，２３−ビスツルー ５−コレニック・アシッド（ｃｈｏｌｅｎｉｃ　ａｃｉｄ）は、ステラロイド（ ウィルトン、ＮＨ）から購入した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）は、ナトリウ ム・ベンゾフェノン・ケチルから蒸留した。他の溶媒は常法で精製した。ヘキサ ン中ｎ−ブチルリチウム（アルドリッチ）は、ｎ−プロパツールにより、ＴＨＦ 中１．１０−フェナトリンの存在下に、アルゴン中で滴定した。

ビタミンＤ化合物を伴う反応は、璧素またはアルゴン雰囲気下にマグネチック・ スターラーで撹はんしながら行った。溶液および液体の添加は、ゴム膜を介しシ リンジで行った。

実施例１ １α−ヒドロキンビタミンＣ−２２エステル（化合物１０）およびヒドロキシ保 護誘導体（化合物８．１１）の合成（処理工程１）（ａ）ステロイドエステル】 および２の調製３β−アセトキシ−２２，２３−ビスツルー５−コレニック・ア シッド１０ｇをメタノール中５％ＫＯＨ４２０：ｇに溶解し、溶液を室温で１５ 分間撹はんして該アセテートを加水分解させた。この溶液に、メタノール中ｌＯ ％ＨｔＳＯ−１６０ｙｉρを撹はんしんから添加し、得られた懸濁液をメタノー ル中１％Ｈ＊５０４４００ｘ（ｌで希釈した。混合物°を４８時間加熱還流して 、エステル化を完了させた（ＴＬＣにより、溶媒系Ａで確認）。生成物、メチル エステル（ＩＯ２，Ｏｆ、８８％）を常法で単離し、かかる物質４．４９Ｃ１２ ｘａ＋ｏｌ）を乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１３５ｘ（ｌに溶解し、イ ミダゾール３．６ｙ（５２、８ｙｍｏｌ）を加え、次いでｔｅｒｔ−ブチルジメ チルシリル・クロライド４．．０９（２６，４１ｍｏｌ）を加えた。溶液を、か さ高い沈澱物が形成するまで室温で５分間撹はんし、次いで撹はんを付加的に１ ５分間続けた。反応混合物をヘキサン４００ｘ（ｌで抽出し、水、飽和Ｎ　ａ　 Ｃ］溶液で洗浄し、Ｍｇ５Ｏ，で乾燥した。溶媒を蒸発させ、ｉｔ、ｃｃ溶媒系 ｂ）で生成してシリル化エステル２（５，３９）を無色の油として得、これを付 加的に精製することなく次の工程に用いた。分析用の試料は、フラッシュ・カラ ムクロマトグラフィにより、ヘキサン中２％酢酸エチルを用いて得た。

ＪＲ（膜）＋１７３７．９９．１６０４．８９ｃ友−１■月Ｌユ≦ムＬ乙」ｌ兜 阻艮 化合物（２）１．０９（２，１ｊ＋ｍｏｌ）、ジブロモマンチン０．４２ｔ（１ ゜５１１１１０１）および無水重炭酸ナトリウムｏ、９１ｇ（１０鞘ｏ１）の、 ヘキサン２０ＲＩ２中混合物を、窒素雰囲気中、３０分間、出発エステル−？− が検出されなくなるまで（ＴＬＣ，溶媒系Ｃ）加熱還流した。沈澱物をろ過し、 溶液を減圧下に乾燥した。残渣を無水ＴＨＦ５ｍＱに再び溶解し、テトラブチル アンモニウム・ブロマイド０．０６９（０，１９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を 室温で３０分間、窒素雰囲気下で撹はんした。テトラブチルアンモニウム・フル オライドｌ０ｉｄ（ＴＨＦ中＋Ｍ）の溶液を添加し、次いでＳ−コリジン０．７ ６を加え、混合物をＭｌ！：雰囲気下？こ室温で１時間撹はんした。別に、テト ラブチルアンモニウム・フルオライド５ｘＱを添加し、３時間撹はんを続けた。

エーテル５０ｉＱを添加し、有機層を水、冷ＩＮ塩酸、次いでｌＯ％ＮａＨｃｏ ３で洗浄し、無水λ４ｇ５Ｏａで乾燥した。生成物をベンゼンに溶解し、シリカ ゲル（７０〜２３０メツシユ）３０９を用いてクロマトグラフィに付しｆ０エス テル（３）０．４４９（５８％）をヘキサン中酢酸エチルを用いて溶離させｒ二 。分析用の試料は、ＨＰＬＣ（溶媒系Ａ％Ｒｖ７７好）で得た。

ＵＶＣヘキサン９３％２−プロパツール）、λ１ｉａｘ＝　２６２　ｎｍ（ε７ ０００）、λｍａｘ＝　２７２ｎ＋１（ε９８００）、；、ｍａｘ＝　２８２η ｍ（εｌ　０５００）、λｍａｘ＝２９３（ε６０００）；’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ Ｉｓ）δ、０．５４（ｓ、３Ｈ，１ｇ−ＣＨｓ）、０．９４（ｓ、３Ｈ，＋　９ −ＣＨｔ）、１．２２（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ、２　＋−ＣＨ５）、３．６（ｉ 、ＩＨ，３−Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ，ｃＯ２ｃＨａ）、５．４２（ｍ。

ＩＨ，６−Ｈ）、５．５８（ｍ、ＩＨ，７−Ｈ）；％４Ｓ、ｌＴ６／ｚ（相対的 強度）Ｍ−３５８（６１）、３４０（１２）、３２５（１００）、２９９（６８ ）、２７＋（７）、２５３（１７）、２３７（２６）、２１１（２７）、１４３ （７２）、＋１９（３５）（Ｃ）ビタミンエステル（±）Δ鳳艮 ベンゼンーエチルエーテル（］：４、ｖ／ｖ）　３５０　＊０中ジエン３（８３ ０１ｇ、２　、３　ｘｍｏｌ）の溶液を、撹はんしながら、窒素雰囲気下にて、 窒素バブラーおよびピッカー・フィルターを備えに水冷石英浸漬ウェル中で、ハ ノヴイヤ（Ｈｎｏｖｉａ）６０８　Ａ　３６中圧ＶＶランプを用い、４０分間（ ４ｘ　１０分）照射した。反応を、ＨＰＬＣにより、ヘキサン中２％　２−プロ パツールを用い、２６５ｎｍでモニターした。

溶液を減圧下で乾燥し、乾燥エタノール１００ｆｆｉＲに再度溶解し、窒素雰囲 気下に３時間加熱還流し１；。次いで溶液を濃縮し、ヘキサン中１０％酢酸エチ ルに再度溶解し、シリカゲル（７０〜２３０メッシ：Ｌ）３０ｇ上でクロマトグ ラフィに付した。ビタミンエステル４（２９８ｉｇ、３６％）を、ヘキサン中１ ５％酢酸エチルの混合物を用いて溶離した。分析用の試料は、ＨＰＬＣ（溶媒系 Ｂ、Ｒｖ９４ｍ＋２）で得た。

ＩＲ（膜）１７３８．９５ｃｒ’ ＵＶ、　　λａａｘ＝　２６４　ｎｍ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）δ、０．５６（３Ｈ，ｓ、１　Ｂ−ＣＨｓ）、１９２ ０（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、２１−ＣＨ−）、３．６６（３Ｈ，Ｓ、ＣｏＩＣＨ ３）、３．９５（ＩＨ劃、　３−Ｈ）、４．８０（ｌＨ，ｄｊ＝１２）（ｚ、１ ９．イユーＨ）、５．０５（ｌ　Ｈ，ｄ、Ｊ　＝　１．２Ｈｚ、　１９−も−Ｈ ）、６．０３（ｌ　Ｈ，ｄ、Ｊ＝１１Ｈ２，？−Ｈ）、６．２３（ＩＨ，ｄ、Ｊ ＝１１Ｈｚ、６−Ｈ）；ＭＳＳｍ／ｚ（相対的強度）、Ｍ−３５８（４５）、３ ４０（９）、３２５（４５）、２９９（２２）、２５３（１９）、２３７（１８ ）、１３６（６０）、１１８（１００） （ｄ）　３　、５−シクロビタミン・エステル（６）Ｏｍ表エステル４をトンレ ート５に、常法により、ピリジン中ｐ−）ルエンスルホニルクロライドを用い、 ４℃で２０時間を要して変換させた。粗製トシレート５（１０２ｉｇ、０．２荻 ｍｏｌ）を無水ジクロロメタン２１ρに溶解し、これを、撹はんしながら無水重 炭酸カリウム２５０π９含有メタノール溶液１５杼に５５℃で添加しｆ二。混合 物をＮ素雰囲気下に５５℃で２４４時間撹んし１こ。次いで溶媒を減圧除去し、 残留物をエーテルで抽出し１ニ。有機層を水洗し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥しＴこ 。生成物、シクロビタミンエステル且を、シリカゲルクロマトグラフィにより、 ヘキサン中２０％酢酸エチルを用いて精製したＣ５０η、６８％）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）、６０．５４　（３Ｈ，ｓ、　１８　　ＣＨ３）、０ ．７−ＣＨＳ）、３．２５（３Ｅ、ｓ、６Ｒ−ＯＣＨａ）、３．６５（３Ｈ，ｓ 、２２ＣＯ＊　ＣＨ、）、４．１５（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝９Ｈｚ、６−Ｈ）、４．８ １１１（ＩＨｉ９Ｅ−Ｈ）、５．００（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝９Ｈｚ、７−Ｈ）、５． ０２（ＩＨ，１９Ｅ−Ｈ）： ＭＳ、ｍ／ｚ（相対的強度）３７２（Ｍ”　、＋　７）、３４０（１００）、２ ５３（４，８）、２２＋（４０）、Ｉ　３５（７２）。

（ｅ）　５　、６−ンス１α−ヒドロキシビタミン・ニスチル（８）およびトｔ ｅｒｌ−ブチル・ヒトロベルオキンド１１２μ（゛（トルエン中３　、０　’１ ．１溶液、０　、３４　ｘｍｏｌ）を、乾燥塩化メチレン２ｘＱ中二酸化セレン ９ｍ９（０、８ｚｍｏｌ）の懸濁液に添加し乙。混合物を室温にて窒素雰囲気下 に、透明な溶液かえられるまで撹はんした。無水ピリジン１２μＣ（０、］　５ 　Ｘｌｌｌ０Ｉ）を添加し、次いで無水ジクロロメタン２ｘＱ中に溶解したエス テル６（５０ｉ９）を添加した。混合物を窒素雰囲気下に３０分間撹はんした。

冷１０％重炭酸ナトリウム２にρを添加し、混合物をエーテルで抽出した。有機 層を冷１０％重炭酸ナトリウム、氷水で洗浄し、次いで無水Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で 乾燥した。ンリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン中ｌＯ〜２０％酢酸エチル） により、ｌα−ヒドロキシ化合物（７）１２．５ｘｙを得た。この生成物を直ち に氷酢酸０　、５ｘＱに溶解し、溶液を５５℃で窒素雰囲気下にて撹はん下に１ ５分間加熱した。反応混合物を水上に注ぎ、エーテルで抽出し、水冷飽和重炭酸 ナトリウムで洗浄した。合しγニエーテル抽出物を水洗し、Ｍｇ５Ｏ。

量の２０％）。（、）２．７Ｅ）および（５Ｅ、７Ｅ）異性体、影および黒の分 析試料は、各々、プレバラテイブＨＰＬＣにより、比率２．５：ＨＰＬＣ，溶媒 系Ｃ，Ｒｖ　６８１（１：ＵＶ（ＥｔＯＨ）λ最大２６４　ｎｍ、λ最小２２７ ｎｍ、Ａ２６４／Ａ２２７＝２．０７゜ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｐｓ）δ、０．５６（３Ｈ，ｓ、Ｉ　８　　ＣＨａ）、１． ２０（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、２１−ＣＨＩ）、２．０４（３Ｈ，Ｓ、３β −アセチ゛ル）、３．６６（３Ｈ，ｓ、２２　　Ｃ０ｙＣＨｓ）、４．４（ＩＨ ，ｍ、Ｉ　　Ｈ）。

５．２（ＩＨ，ｍ、３−Ｈ）、５．０１（１９Ｅ−Ｈ）、５．３４（１９Ｚ−Ｈ ）。

６．０１（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、７−Ｈ）、６．３３（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１０ Ｈ２，６−Ｈ）。

Ｍ　Ｓ　、　ｍ／　ｚ（相対的強度）、４１６（Ｍ”　、４）、３５６（１００ ）、３３８（２１）、２５１（１３）、１３４（９５）。

）（ＰＬＯ，溶媒系Ｃ，Ｒｖ　７８　ｍｌ；ＵＶ（ＥｔＯＨ）、λ最大２６７　 ｎｍ、λ最小２２７ｎｍ、Ａ　２６７／Ａ　２２７＝３．５１； ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）（５，０，５６（３Ｈ，Ｓｉ、１８　　ＣＨａ）、１ ．２０（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、２１−ＣＨｓ）、２．０４（３Ｈ，ｓ、３ β−０Ａｃ）、３．６６（３Ｈ，ｓ、２２　　Ｃ０ｔＣＨｓ）、４．５（ＩＨ， ｍ、Ｉ−Ｈ）、５．３（Ｉ　Ｈ，＋ｌｌ、３−Ｈ）、４．９９（１９Ｅ−Ｈ）、 ５．１３（＋　９２−Ｈ）、５゜８１（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、７−Ｈ）、６ ．５６（ｌ　Ｈ，ｄ、Ｊ＝Ｉ　ＯＨｚ。

６−Ｈ）。

（４）１α−ヒドロキシエステル（ｌＯ）およびジシリルエステル（ｌｌ）の調 製 メタノール１０ｇＮ中０．ＩＮＫＯＨ溶液を、エチルエーテル１０１ｇ中酢酸エ ステル８（１００ｚ９．０　、２４　ｇａｏｌ）の撹はん溶液に添加した。得ら れた溶液を室温にて９０分間、出発物質がＴＬＣ（溶媒系Ｂ）により検出されな くなるまで、撹はんした。ジヒドロキシニス４）で単離しに。

イミダゾール（２５０ｙ、３　、６　ｇａｏｌ）およびｔｅｒｔ−プチルジメチ ルンリル・クロライド（２５０廣９、ｌ　、　６　ｍ＋ｎｏｌ）のＤＭＦ２３１ １２中潟合物を、エステル（Ｉ　ＯＸ８６，２Ｈ１０、２３ｉｍｏｌ）のＤＭＦ ４ｘｇ中撹はん溶液に添加した。得られた均一混合物を１５分間、５５℃にて、 ＴＬＣ（溶媒系Ｂ）により出発物質が検出されなくなるまで撹はんした。生成物 をヘキサンで単離し、次いで有機層を塩水で洗浄し、無水Ｍｇ５Ｏ，上で乾燥し た。粗製生成物のへキサン溶液をシリカゲルＳ　ｅｐ−Ｐ　ａｋカートリッジに よりろ過して、ジシリル化エステル（１１）（１３６ｘ９．９８％）を得に０ ＵＶＣヘキサン）１λ最大２６４　ｒ＋ｍ、λ最小２２７ｎｍ、Ａ２６４／Ａ２ ２７＝１．９１； ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）、６０．０７　［１２Ｈ，ｓ、５ｉ（ＣＨｓ）ｔｌ、 ０．５５（３Ｈ，ｓ、１　８−Ｃ）（ｌ）、０．８　６［１８Ｈ，Ｓ、Ｃ（ＣＨ Ｉ）Ｓコ、１．２０（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、２１−ＣＨｓ）、３．６５（ ３Ｈ，ｓ、０−ＣＨｓ）、４゜１８（１）（劃、３−Ｈ）、４．３６（Ｉ　Ｈ， ｍ、　１−Ｈ）、４．８３（Ｉ　Ｈ，ｄ、Ｊ＝　１．２）１ｚ、ｌ　９２−Ｈ） 、５．１６（ｌ　）（、ｄｊ　＝　］　、２Ｈｚ、１９Ｅ−Ｈ）、５．９６（Ｉ 　Ｈ，ｄ、Ｊ　＝　］　］１．２Ｈｚ、７−Ｈ：ｉ、６．１９（ｌ　Ｈ，ｄ、Ｊ ＝　１　１．２　Ｈｚ、　６−Ｈ）； ＭＳ、ｍ／ｚ（ｍ／ｅ２４８に対し標準化し７ｚ強度）、６０２（Ｍ″’　、１ ０）、４７０（５９）、４１３（７）、３３８（１０）、２４８（１００）。

実施例２ Ｃ−２２−アルコール（１２）およびＣ−２２−トンル誘導体（１３）の姐（処 理工程■） （ａ）Ｃ−２２−アルコール（１２）の調製水素化アルミニウムリチウム２５　 ｍｔｃＯ、６５ｘｍｏｌ）をシリルエステル（１上）＋　３６．２７１９（０， ２３和０１）の無水ＴＨＦ５ｉＯ中撹はん溶液に、アルゴン雰囲気下に０℃で添 加した。懸濁液を１５分間０℃で撹はんし、過剰のＬ　ｉＡ　Ｉ　Ｈ４を、ＴＨ ＦＨＦ中形０％水中滴下により分解させた。懸濁液をＴＨＦＩＯｘ（で希釈し、 撹はんを室温でさらに１５分間続けた。生成物を標準的抽出法により、酢酸エチ ルおよびシリカゲルＳ　ｅｐ−Ｐ　ａｋろ過（ヘキサン中ｌＯ％酢酸エチル）を 用いて単離し乙、ジンリルアルコール１２を無色の油として得ｆニ（１１８，１ ９、収率９１％）。

Ｕ　Ｖ　（Ｅ　ｔｏ　Ｈ）、　λ最大２６４．；、！小２２７．Ａ２６４／Ａ２ ２７＝］、５７； ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）δ０．００（１２Ｈ，ｓ、５ｉ−ＣＨｓ）０．５３（ ３Ｈ，ｓ、１８−ＣＨ−）、０．８５［１８Ｈ，ｓ、５ｉ−Ｃ（ＣＨｓ）、ｌ、 １．０４（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２１　　ＣＨ３）、３．３７および３． ６３（ＩＨおよびＩＨ，各々ｍ、２２　　ＣＨｙ）、４．］７（ＩＨ，ｍ、３　 　Ｈ）、４．３５（ＩＨ，ｍ、　１−Ｈ）、４．８４（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ、　Ｉ　 ９　Ｚ−Ｈ）、５．１６（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ。

１９Ｅ−Ｈ）、６．０（ｌ　Ｈ，ｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、７−Ｈ）、６．２１（ ＩＨ。

ｄｊ＝１２．２Ｈｚ、６−Ｈ）； Ｍ　Ｓ　、ｍ／ｚ（ｍ／ｅ　２４８に対し標準化した強度）、５７４（Ｍ′、１ ７）。

４４２（６７）３８３（１１）、３０８（１７）、２４８（１００）。

（ｂ）２２−アルコール−トシレート（１３）の調製ｐ−トルエンスルホニルク ロライド４２．７℃ｇ（０、２２ｚｍｏｌ）の乾燥ピリジン５０μＣ中水冷溶液 を、アルコール１２の撹はん溶液に０℃にて窒素雰囲気下で添加し几。混合物を ５℃で２２時間、出発物質がＴＬＣ（溶媒系Ｃ）により検出されなくなるまで撹 はんした。反応混合物を水冷飽和水性Ｎ　ａ　ＨＣＯｓ上に注ぎ、撹はんをさら に３０分間続けた。生成物を酢酸エチル−ヘキサン１　：　ｌ　（Ｖ／Ｖ）で抽 出しＴこ。

有機層を飽和ＮａＣ１で洗浄し、Ｍｇ５Ｏ，で乾燥した。溶媒を減圧除去し、ピ リジンを窒素気流中で除去した。粗製生成物をシリカゲルＳ　ｅｐ−Ｐ　ａｋろ 過（ヘキサン９５％酢酸エチル）で精製して、純粋なトシレート−１３（５４ｏ 、９８％）を得た。

ＩＲ（膜）３５００，２９５０．１５Ｂ０，１３６７．１．２６７ｊ　１８９ｊ １７８，１０９９，１０８５．８３５ｃｍ−’；Ｕｖ（ヘキサン）λ最大’ｌ　 ６３　ｎｍ、λ最小２３６ｒ＋ｍ：’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）６０．００（＋　 ２Ｈ，ｓ、５ｉ−ＣＨｓ）、０．４３（３Ｈ，ｓ、１８−ＣＨ５）、０．８１　 ［１８Ｈ，ｓ、５ｉ−Ｃ（ＣＨ−）−〕、０．９３（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ 、２１　　ＣＨｓ）、２．４０（３Ｈ，ｓ、Ａｒ　　ＣＨ、）、３．６４および ３．９１（］　ＨおよびＩＨ，各々ｍ、２２　　ＣＨｔ）。

４．１３（ＩＨ，＋ｏ、３−Ｈ）、４．３１（ＩＨ，ｍ、１−Ｈ）、４．７９（ ＩＨ，ｂｒｓ、　ｌ　９　Ｚ−Ｈ）、５．　Ｉ　３（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ、　Ｉ　９ Ｅ−Ｈ）、５．９４　（Ｉ　Ｈ，ｄ。

Ｊ　＝　１２．８Ｈｚ、７−Ｈ）、６．１７（Ｉ　Ｈ，ｄ、Ｊ　＝　１２．８Ｈ ｚ、６−Ｈ）。

７．４３および７．８４（２Ｈおよび２Ｈ，各々ｍ、Ａｒ−Ｈ）；ＭＳ　ｍ／ｚ （ｍ／ｚ２４８に対し標準化した強度）、７２８（６）、５９６（３０）、５５ ６（７）、４６４（７）、４２４（４４）、３６７（＋　９）、２９２（２３） 、２４８（１００）： 大量（Ｃ４＋Ｈｅ＋＋ＯｓＳ　ｉｔｓとして）、計算値ニア　２８．４３３８、 実験値ニア２８．４３２６゜ ｍＯ］）の無水ＴＨＦ　２５ｚρ中溶液を、激しい撹はん下に３０分間を要し、 アルゴン雰囲気下、メチルマグネシウムブロマイド（エーテル中３Ｍ溶液１２． ９ｘＱ）の乾燥ＴＨＦ２５ｘｆｆ中溶液ニ、−１０℃で添加した。反応混合物を ２時間以内に室温まで暖め、水でクエンチングし、希塩酸で中和し几６混合物を エーテルで抽出し、合した有機層を水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒の 除去後、残渣を真空蒸留して、クロロアルコール１５を無色の液体として得た（ ２．１？、７０％）。無水ンメチルホルムアミド５ｘ（７中の生成物＋５（１， ５り、ｌ　Ｏｘｍｏｌ）を、チオフェノール１．３２９＜１２肝０１）およびカ リウムｔ−ブトキシド１．３２９（１１，３ｉｆｆｌｏＩ）の無水ジメチル示ル ムアミド２５ｘＱ中撹はん溶液に添加した。反応混合物を室温にて一夜撹はんし 、溶液をジクロロメタンと水の間に、分離させた。有機層を水性炭酸ナトリウム 、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。

溶媒を真空蒸留して、粗油をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにより、ヘ キサン−酢酸エチルで精製した。スルフィド■（２，２ｇ、９８％）を無色の液 体として得ｒ二。スルフィド１６（１，０１ｇ、４゜５　ｘｍｏｌ）を乾燥ジク ロロメタン４０＋（！に溶解し、３−クロロ過安息香酸２．５ｙ（Ｉ　１．６ｇ ｍｏｌ、アルドリッチ８０〜８５％）を、撹はん下、時々冷却しながら滴下した 。反応混合物を２時間撹はんし、次いで１０％重炭酸ナトリウムでクエンチング した。合した有機層を水性に酸ナトリウムおよび塩水で洗浄し、硫酸マグネシウ ム上で乾燥し７二。溶媒を真空蒸留して粗製の油をシリカゲルフラッシュクロマ トグラフィにより、ヘキサン−酢酸エチル混合物を用いて精製し、ス乾燥ジメチ ルホルムアミド５０ｄ中撹はん溶液に、トリエチルシリル・クロライド１．１５ ４７（７，７ｒ＋ｏ＋ｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間維持し、次 いでジクロロメタンで希釈した。混合物を水性塩化アンモニウム溶液および水で 洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を真空下で除去した。残渣 をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィで精製した。ヘキサエチルジシロキサ ンをまずヘキサンで溶離し１こ。トリエチルシリル−保護スルホン＋８（１゜８ ９．９７％）をヘキサン−酢酸エチル９：ｌで無色の液体として溶離しｆ二。

ＩＲ（正味）：３０４５．２９４０，１４．４０．１３６０．１１３０．１０２ ０ｃＩｎ−Ｉ： ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣ１５）６０．５１８（６Ｈ，ｑ、Ｊ＝６゜２ Ｈｚ、５ｉ−ＣＨｙ）、０．８９９（９Ｈ，ｔ、Ｊ　＝　６．２Ｈｚ、５ｉ−Ｃ −ＣＨｓ）、１．＋　４２（６Ｈ，ｓ、ＣＨｓ）、１．３０７−１．４６２（４ Ｈ，ｍ）、１６５５−１．７３８Ｃ２Ｈ，ｍ、Ｈ−４）、３．０８０−３．１２ ２（２Ｈ，＋Ａ。

Ｈ−２）、７．５６７（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ−アリール　メタ）、７ ゜６４８（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ−アリール　バラ）、７．９１６（２ Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．８３Ｈｚ、Ｈ−アリール　オルソ）；ＭＳ（Ｅ　Ｉ　、７　ｅ Ｖ）：ｍ／ｚ（相対的強度）３７２（Ｍ＝　、２）、３４１　（１００）、２２ ９（２）、２２７（１８）、１７３（２４）、１０３（２２）、７５（４５）、 ５５（３３）。

処理工程■の実施例において示したように、他のフェニルスルホン単位も、前記 した一般的方法または文献記載の類似の方法により調整することができる。例え ば、以下のとおりである。

（ｂフェニルスルホン（１９）の調製 前記実施例３（ａ）記載の方法に従い、ジクロロ化合物１４を処理した。ただし 、メチルマグネシウムブロマイドに代えて、エチルマグネシウムブロマイドを第 １反応工程に用いて、構造式１９（Ｚ＝Ｅ　ｔｓ　Ｓ　＋）のフェニルスルホン 同族体ヲ得た。

（Ｃ）フェニルスルホン（２３）のＤＨＪ６−ブロモヘキサノイルクロライド２ ０（３，８１１，２、８ｚ（１，１８ｍｍ０１）の無水ＴＨＦＩＯ１中溶液を、 激しい撹はん下に１５〜２０分間を要し、アルゴン雰囲気下に、メチルマグネシ ウムブロマイド（エーテル中３Ｍ溶液１４＋ｆｆ）の無水ＴＨＦ１５＊（２中溶 液に、−１０℃で添加した。反応混合物を２時間、室温で撹はんし、０℃に冷却 し、慎奮に１：ｌ希塩酸で分解させた。混合物をエーテルで抽出し、合した有機 層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させて、ブロモアルコール（２ １）を無色の油として得た（３．６９．９４％）。

ブロモアルコール３．４９（１６１１１１０１）を、無水ジメチルホルムアミド 中ベンゼンスルフィン酸ナトリウム塩３．３９（２０ｉ＋ｍｏｌ）で、７０℃に て４，５時間処理した。混合物を氷上に注ぎ、ジクロ口メタンて抽出し、ＩＮ塩 酸、水、１０％重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し 、ろ過し、蒸発させて、スルホン（主主）を得、これを、フラッシュクロマトグ ラフィにより、シリカケン上で精製し、ヘキサン中４０〜５０％酢酸エチルで溶 離させて、少量の対応するスルフィネートエステルを含むスルホンＣ４，１８９ ，９８％）を得た。

ＭＳ、ｍ／ｚ（２７０（Ｍ＝）、２５５（Ｍ゛−１５）、７７．５９）スルホン （２２８４ｇ、］、４ｉｍｏｌ）およびイミダゾール３．８９（５５ｗｒＡｏｌ ）の乾燥ジメチルホルムアミド１３ｚ（中撹はん溶液に、トリエチルシリル・ク ロライド４．６９（５，１ｉｆｆ、３０ｉｍｏｌ）を添加した。

反応混合物を室温で２時間撹はんし、氷水に注ぎ、エーテルで抽出し、無水硫酸 マグネシウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフ ィで精製した。ヘキサエチルジシロキサンをまずヘキサンで溶離し、ヘキサン中 ３％酢酸エチルで少量のスルホンを含む保護スルフィネートエステルを溶離し、 次いでヘキサ凱　６０％）。

元素分析値（Ｃｔ。Ｈ！５ＯｓＳＳｉ）計算値（％）：Ｃ：６２．４５、Ｈ：９ ．４３、Ｓ：３８．３４実験値（％）：Ｃ：６１．９７、Ｈ：９．４５、Ｓ：３ ８．３３Ｍ　Ｓ　、巳／乙（相対的強度）３５５（１００）（Ｍ”　−２９）、 ２２７（１５）、＋７３（３５）、ｔ０３（４，３）、７５（９５）、５５（２ ３）、ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤ　ＣＩｓ）、０．５４（６Ｈ，ｑ、Ｊ＝７ Ｈｚ、５ｉＣＨｔ）、０．９４（９Ｈ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）、Ｓｉ　　ＣＣＨｓ） 、１．１５　（６Ｈ，ｓ、ＣＨｓ）、１．３１−１．３６（４Ｅ劃）、３．０８ −３．１２（２Ｈ，ｍ、Ｈ−２）、７．５７（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ− アリール−メタ）、７．６６（Ｉ　Ｈ，ｔ）、Ｈ−アリール−バラ）、７．９２ （２）（、ｄ。

Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ−アリール−オルソ）。

−ルで、標準的エステル化条件下に処理して、対応するメチルエステルを得、こ れを、グリニヤー反応に、メチルマグネシウムブロマイドを用いて付して、フェ ニルスルホン誘導体（、ζ５）を得几。（影マグネシウムブロマイドに代えて、 エチルマグネシウムブロマイドを、グリニヤー反応工程に用いて、保護スルホン 同族体（２８）を得た。

前記実施例に記載したように、フェニルスルホン単位は、適切に調製され、その 後ヒドロキシ保護誘導体として使用される。トリエチルシリル保護基に加え、他 の好ましいヒドロキシ保護基は、ｔ−ブチルジメチルシリル、テトラヒドロフラ ニル、およびテトラヒドロピラニルである。

寒鬼Δ土 側鎖結合反応（処理工程図■） （ａ）ビタミンスルホン２９および３０の調製】、１０−フェナトリン（インジ ケーターとして使用）の無水ＴＨＦ溶液をアルゴン雰囲気下に、ｎ−Ｂ　ｕＬ　 ｉのヘキサン中１．３５Ｍ溶液（４８μｇ１６４μｍｏ＋）に添加して、暗赤色 の混合物を得た。溶液をアセトン−ドライアイス浴に入れ、ジイソプロピルアミ ン（９μｇ、６４μｍｏｌ）を加えた。得られた溶液をアルゴン雰囲気下に３０ 分間、−７７℃で撹はんした。次いで、スルホン±８（２９Ｂ、８０μｍｏｌ） のＴＨＦ　Ｉ　００μＱ中溶液を添加し、次いで別のＴＨＦ　１００Ｈｇを用い て洗浄した。得られた褐色の混合物を一７５℃でアルゴン雰囲気下に３０分間撹 はんし、冷却浴をＣＣ１，ドライアイス浴に置き換えた。−２１℃での１５分間 の撹はん後、トシレート１３（１１，６１９，１６μｍ０１）の溶液を加えると 、反応混合物が黒色から赤色に変わった。溶液を一２０℃〜−３０℃で３．５時 間撹はんし、飽和塩化ナトリウム１ｘ（２を一１０℃で添加した。混合物をヘキ サンで抽出し、有機層を飽和ＮａＣ１で洗浄した。

有機抽出物をシリカゲルＳ　ｅｐ−Ｐ　ａｋカートリッジでろ過し、次いでヘキ サ２９１０％酢酸エチル２０ｗＱでろ過した。プレバラテイプＨＰ　Ｌ　Ｃ（カ ラム６．２ｘ２５ｃｘＸ溶媒系Ｆ）により、Ｒｖ３７ｘｌ？で未反応トンレート ±３（３，Ｏｚｇ）を得た。次いで、スルホン２９（２゜１！ｇ、１９％）をＲ ｖ５５ｉ＋ｊで溶離させた。

ＩＲ（膜）３５００．２９５６．１４４０．１３０１．１２５８．１１４７．１ ０８６．１０７２．１０６４ｃｍ−’；ＵＶ（ヘキサン）λｍａｘ２６４　ｎｍ 、λＩＩｉｎ２３０ｎｍ、Ａ２６４／Ａ２３０＝１．９６゜ ’ＨＮＭＲ（ＣＤｃｌｓ）δ０．４１　（３Ｈ，ｓ、　１８　　ＣＨり、０．５ １（６Ｈ，ｑ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、Ｓｉ　　ｃＨｙ　　）、０．８６および０．８ ８［９Ｈおよび９Ｈ，各々、ｓ、Ｓｉ　　Ｃ（ＣＨｓ）ｓ］、０．９０（９Ｈ， ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ。

５ｉＣＨｚ　　ＣＨ−）、１．１３（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２１　　ＣＨ ３）、１．２３（６Ｈ，ｓ、２６．２７−ＣＨｓ）、４．１７（ｌ　Ｈ，ｍ、３ −Ｈ，４゜３７（Ｉ　Ｈ，ｍ、　１−Ｈ）、４．８５（ＩＨ，ｂｒｓ、１９Ｚ− Ｈ）、５．１７（ＩＨ，ｂｒｓ、　１９Ｅ−Ｈ）、５．９９（ｌＨ，ｄ、Ｊ＝１ １．０Ｈｚ、７−Ｈ）、６．２１（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝ＩＯ，８Ｈｚ、６−Ｈ）、７ ．５４（２Ｈ１ｔ、Ｊ＝７゜３Ｈｚ、Ａｒ−Ｈ，メタ）、７．６１（ＩＨ，ｔ、 Ｊ＝７．３Ｈｚ、Ａｒ−Ｈ，バラ）、７．３３（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、Ａ ｒ−）（、オルソ）；ＭＳ、ｍ／Ｚ（相対的強度）、９２６　（Ｍ′″、１６） 、７９４（１００）、７３７（９）、５３０（９）、５２１（６）、３８９（１ ３）、３０１（ε）。

スルホン３０（３，８ｚｙ、３５％）（炭素２３位における影りのエピマー）を Ｒｖ８７ｉ（７で溶離した。

ＩＲ（膜）３５００．２９５５．１４４０．１３０４．１２５７．１１４８．１ ０８６．１０７２．１０６４ｃ＋ｎ−’；ＵＶ（ヘキサン）λｍａｘ２６４！ｍ 、　ｍ１ｎ２２９！ｍ、　Ａ２６４／Ａ２２９＝２．０６゜ ”１（ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）６０．４９（３Ｈ，ｓ、１８　　ＣＨｓ）、０．５ １（６Ｈ，ｑ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、Ｓｉ　　ＣＨｔ　　）、０．８５［１８Ｈ，ｓ 、５ｉ−Ｃ（ＣＨ５）３コ、　　０．９０（９Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、Ｓｉ　 　　ＣＨｔ　　　ＣＨｓ）、　　１　。

１３（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、２１　　ＣＨｓ）、１．２３（６Ｈ，ｓ、２ ６゜２７−ＣＨ，）、４．１６（ＬＨ，ｍ、３＝Ｈ）、４．３５（ＩＨ，＋ｎ、 １−Ｈ）、４．８３（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ、　１９　Ｚ−Ｈ）、５．１６（Ｉ　Ｈ， ｂｒｓ、ｌ　９Ｅ−Ｈ）、５．９８（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝Ｈｚ、７−Ｈ）、６．２０ （ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１１．３８ｚ、　６−　Ｈ）、７．５４（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７Ｈ ｚ、Ａｒ−メタ）、７．６１（Ｉ　Ｈ。

ｔ、Ｊ　＝　７　Ｈｚ、Ａｒ−Ｈ，バラ）、７．８６（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝７Ｅｚ、 Ａｒ−Ｈ。

オルソ）： ＭＳ　　口／ｚ（相対的強度）、９２６（１９）、７９４（１００）、７３７（ １１）、５３０（２８）、５２１（１４）、３８９（３３）、３０１（＋４）。

（ｂ）２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤｓ（３２）メタノール ０　、５　ｚＱ中Ｎ　ａｔＨＰ　Ｏ４の飽和溶液を、スルホン２９（１，８０ｚ ｓ＋）の無水ＴＨＦ０．５＋ρ中撹はん溶液に加え、次し）で粉末無水Ｎａ？Ｈ ＰＯ４（８０！りを添加した。混合物をアルゴン雰囲気下（こ３０分間撹はんし 、０℃に冷却しｆこ。新鮮な５％ナトリウムアマルガム（約２０　Ｏｎ）を添加 し、混合物を３時間、５℃でＴＬＣ（溶媒系Ｃ）により出発物質が検出されなく なるまで、撹はんした。混合物をヘキサン３ｘＱで希釈し、撹はんを１５分間続 けた。溶媒をデカンテーションし、固体物質をヘキサン（３ｘ２ｘ（りで洗浄し た。水および飽和塩化ナト１功ム２ｘ（ｌを合した有機溶液に加えた。有機層を 飽和塩化ナトリウムで洗浄し、シリカゲルＳ　ｅｐ−Ｐ　ａｋカートリッジでろ 過して、ヒドロキシ保護２４−ジホモ−！α−２５−ジヒドロキシビタミンＤ、 化合物旦を無色の油として得た（１．１９ｙ、１．５μｌ１１０１．７８％）。

同様な方法に従い、スルホン１更のナトリウムアマルガム還元により、化合物３ １を得た。すなわち、前記実施例４（ａ）で得られたような、スルホン２９およ び１隻は、ナトリウムアマルガム還元前に、分離する必要はない。両温合物は、 効果的に還元して所望のビタミンＤ誘導体旦を得ることができる。。

化合物３１（１，１０）を無水ＴＨＦ０．５ｓｌ！に溶解し、この溶液に、ＴＨ ＦＨＦ中子トラブチルアンモニウムルオライド（２０μ（，１Ｍ溶液）を添加し た。混合物をアルゴン雰囲気下に、５０分間５０℃で撹はんした。次いでエーテ ル３ｚＱを添加し、有機層を飽和塩化ナトリウムで洗浄した。溶媒を除去し、残 渣をヘキサン中ｌθ％２−プロパツールに溶解し、シリカゲルＳ　ｅｐ−Ｐ　ａ ｋでろ過した。プレパラテイブＨＰ　Ｌ　Ｃ（溶媒系Ｄ１カラム６．２ｉｉｘ２ ５ｃｔ、Ｒｖ６２１Ｑ）により、所望のビタミンＤ同族体３２を得た（４６５μ ９．７６％）。

ＩＲ（膜）３３６０．２９２７．１６０２．１４４７．１３７６．１２９７．１ １４６．１１０６．１０８６、ｌ　０６４　ｃｒｒｌ−’；Ｕ■（ヘキサン中１ ０％２−プロパツール）λｒＡａｘ　２６４　ｎｍ、λｍ１ｎ２２８＋ｖ、Ａ２ ６４／Ａ２２８＝　１．９１　；’　ＨＮ　Ｍ　Ｒ（ＣＤ　ＣＩｓ）δ０．５２ （３１４，ｓ、ｌ　８−ＣＨａ）、０．９０（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２１ 　　ＣＨ３）、１．１９（６Ｈ，ｓ、２６．２７−ＯＨ５）、４．２２（ｌＨ， ＋ｎ、３−Ｈ）、４．４２（ＩＨ，ｍｕ−Ｈ）、４．９９（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ、　 １９　Ｚ−Ｈ）、５．３１（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ、１９Ｅ＝Ｈ）、６．００（ＩＨ， ｄｊ＝１１．１Ｈｚ、７−Ｈ）、６．３６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ、　６ −　Ｈ）； Ｍ　Ｓ　、　ｍ／　ｚ（相対的強度）４．４４（Ｍ＝　、１．４．）、４２６（ ４］）、３９３（１０）、２５１（２６）、２０９（１７）、１９７（２０）、 ＋５７（２９）、＋５５（３７）、１３４（５８）、＋０５（５４）、５９（１ ００）； 代置Ｃ！　ｓ　Ｈ４ｓ　Ｏｓとして、計算値：４４４．３６０３、実験値：４４ ４．３６０９ （Ｃ）フェニルスルホン（２３）を用いｆ二側鎖の結合実施例４（ａ）記載の条 件下に反応させて、対応するビタミンスルホン付加物を得た。これら付加物を、 前記実施例４（ｂ）の一般的な条件を用いてＮａ／Ｈｇ還元したのち、次いで実 施例４（ｂ）記載のヒドロキシ保護基を除去して、所望の生成物、２４−トリホ モ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ、を得ｒ二。これは、以下の構造で示さ れる。

ＨＬ−６０細胞（ヒト白血病細胞）の分化測定は、デル力ら（米国特許第４７１ ７７２１号）記載の一般的な方法に従い行った。該特許記載の方法に加え、非特 異的酸エステラーゼ活性を、市販のキット（シグマ・ケミカル・コーポレイショ ン・（セントルイス、ミズリイ）に記載のように測定した。第１表に示すように 、分化の程度は、３つの異なる方法（ＮＢＴ還元、食作用、およびエステラーゼ 活性）で決定し、結果を、種々の濃度のビタミンＤ化合物での処置に応じて生成 した分化細胞の割合として示す。

第１表 ２４−シ゛ホモ−］　、２５　　（ＯＨ）ｔＤ３の分化活性（培養中のＨＬ−６ ０細胞） 化合物　　　　濃度　　　　　分化を示す細胞の％（モル）　　　　ＮＢＴ還元 　　食作用　　エステラーゼ゛１．２５−（ＯＨ）ｔＤ３　　　１ＸＩＯ−’　 　　　３２＋３”　　　　２ｇ＋：（ａ２Ｂ＋２”１ｘｌＯ−’　　　　５１ｆ ３　　　５６＋３　　６０１１ＸＩＯ”　　　８２±４　　８４±４　　８６± ２２４−）゛ネ七−１．２５ −（ＯＨ）、Ｄ、　　　　　　］　Ｘ　１０−”　　　　２８±３　　３６±３ 　　３５±４５ｘｌＦ”　　　　６４±４　　６２±４　６２±３（化合物皿） 　　　　ｌＸｌ０−”　　　７０±２　　６８±２　６８±４ｓｘ　ｔｏ−”　 　　　９３±５　　９４±２　９４±２８：測定３〜４回の平均標準誤差 これら３つの分析結果を第１表に示した。明らかなように、新規同族体２４−ノ ホ％−１，２５−（ＯＨ）ｔＤｓ（化合物３２）は、１．２５−（ＯＨ）　！　 Ｄ　ｓ自体よりも、培養株におけるＨＬ−６０細胞の分化誘発の点で、活性が高 い（第１表）。すなわち、天然のホルモンであるｌ。

２５−（ＯＨ）！Ｄ　ｓハ、濃度１ＸｌＯ−＠モルで約５０〜６０％の細胞の分 化を誘発するのに対し、新規な２４−ジホモ同族体（化合物３２）は、５倍も低 い濃度（５Ｘ１０′□’Ｍ）で、６０％以上の分化が得られｆ二。同様に、１． ２５−（ＯＨ）＋Ｄ−では、約８０％の分化細胞の生成のために、濃度ｌＸｌ０ −’モルが必要であるのに対し、ジホモ同族体では、５ｘｌＯ−”Ｍ（例えば５ 倍も低い）で９０％よりも良好な分化が得られる。これらの結果は、２４−ジホ モ−１、２５−（ＯＨ）＝Ｄ　＊が、培養株におけるＨＬ−６０細胞の分化誘発 の点で、５〜ＩＯ倍も活性か高いことを、強く支持するものである。

２表） 乳離れしたばかりの雄性ラットを、ハルラーン・スプラーグ・ドウージー・カン パエイ（マジソン、ライスコンシン）から入手し、高カルシウム・低すン分のく る病誘発性食物〔スダら、ジェイ・二、）ル（Ｓｕｄａｅｔ、ａｌ、、Ｊ、Ｎｕ ｔｒ）、１００巻、１０４９〜１０５２頁、１９７０年〕をラットに与えた。

かかるラットに、この餌を自由に合計４週間与えた。３週の終わりに、動物を各 群ラット６匹に分けた。１つの群に、毎日、腹こう内に、ビヒクル（ポリエチレ ングリコール９已１３１（を与えｆこ。のこりの群は、以下の用量を含む同じ量 のビヒクルを与えた：１．２５−（ＯＨ）＋Ｄｓ＝　１　２．５ｎｇ、Ｉ　、２ 　５−（ＯＨ）ｔＤｓ＝２５ｎｇ、２４−′）ホモ−１．２５−（ＯＨ）ｔＤｓ ＝１２．５ｎｇまたは２４−ジホモ−１　、　２　Ｄ　−（Ｏ　Ｈ）？Ｄ　ａ＝ 　２　５　ｎｇｅ最後の投与後２４時間ののち、動物を殺し、腸を摘出し、十二 指腸セグメントを用いて、腸カルシウム輸送をハロランおよびデル力〔アーチ・ バ（ｔケム・バイｊフイズ（Ａｒｃｈ．ＢｉｏｃｈｅＩｌｌ．Ｂｉｏｐｈｙｓ． ）、２０８巻、４７７　〜４８６頁、１９８１年〕記載のように測定しｆ：。カ ルシウム輸送活性は、第２表に、カルシウム輸送比率と゛して示し、これは、Ｉ １０表示によって記した〔しよう膜媒体中のカルシウム濃度（Ｉ）：粘膜媒体中 のカルシウム濃度（０）〕。テスト化合物による骨無機質化を分析するために、 全ての動物の大腿骨を摘出し、ソックスレット抽出器により９５％エタノールで ２４時間抽出し、ソックスレット抽出器によりクロロホルムで２４時間抽出した 。これらを恒量まで乾燥し、その全量および大腿骨中の灰分割合を、６００°Ｆ ×２４時間の焼却後に測定した。カルシウム輸送比率は、Ｉｌｏで示した〔しよ う膜媒体中のカルシウム濃度（１）二粘膜媒体中のカルシウム濃度（０）〕。天 天分量は、灰分／大腿骨の合計ミリグラム数または脱脂乾燥前重量に基づく灰分 割合で、決定した。

第２表 ２４−ジ本モー１．２５ージｂｙａ今シビタミンＤ！＋二対する＜、Ｚ遺う］］ ］μ茎五ーーーーーーーーーー一群　　カルシウム輸送比（１／の　大腿骨灰分 （Ｉ９）　　大腿骨灰分（シ）（平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．）　　　（平均±Ｓ．Ｅ． Ｍ．）　　（平均−ｊ：ｓ．Ｅ．Ｍ．）対照　　　　　　４．０±０．２”　　 　　　１７．７±１．０ａ１４．０±０．２０ａＱ’　ｔクル） １、　、　２５−（ＯＢ）　！Ｄ３ １２、５ｎｇ７日　　　１０．４±０．８　　　　　　　２６．３±１．６　　 　　　　１８．９±０．５２２５　　ｎｇ／日　　　１３．２±１．０　　　　 　　　２６．４±１．７　　　　　　１９．９±１．３２４−シ゛本モー１．２ ５ ｘ２．５ｎｇ／日　　　　３，０±０．３　　　　　　　２１．１１．０　　　 　　　１４．７５±１．４旦−ｊΔ３　　　　３．０±０．４　　　　　　１． ８．７±１．５　　　　　１４．８±０，６９ａ：測定６回の平均標準誤差 （ｂ）腸カルシウム輸送および骨カルシウム代謝の測定（第３表および第４表） 乳離れしたばかりの雄性ラットを、ハルラーン・スブラーグ・ドウージー・カン バエイから入手し、低カルシウム・ビタミンＤ欠乏食物〔スダら、ジェイ・ニュ トル（Ｓｕｄａ　ｅｔ．ａｌ．、Ｊ．Ｎｕｔｒ）、１００巻、１０４９　〜１０ ５２頁、１９７０年〕をラットに４週間与えた。３週の終わりに、動物に、第３ 表および第４表に示した用［１（ポリエチレングリコール９５％十エタノール５ ％に溶解）を与えた。各群の動物に、毎日、７日間、腹こう内に、示した用量を 含む溶媒ビヒクルＯ　、　ｌ　Ｉｆｆを与えた。対照群は、溶媒のみ与えた。腸 カルシウム輸送は、ハロランおよびデル力　〔アーチ・バイオケム・バイオフイ ズ（Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．）、２０８巻、４７７　〜４ ８６頁、１９８１年〕記載のように測定し、血しようカルシウムは、原子吸収ス ペクトロホトメーターを用いて測定した（米国特許第４７１７７２１号）。

第３表 ２４−シネモー１．２５−ジ七ドロＮノビタミンＤ、（こ対する低カルシウム餌 ・ラットの応答 群　　　カルシウム輸送（Ｉｌｏ）　　　血漿カルシウム（次９％）（平均力Ｓ 、Ｅ、Ｍ、）　　　　　　　（平均±Ｓ、Ｅ、Ｍ、）対照　　　　　　　４．８ ±０．２６ａ４．１＝ｌ：Ｏ，Ｏ＋１　、２５−（ＯＨ）　ｔＤｓ １２．５ｎｇ／日　　　　　１１，２土０．６　　　　　　　　　　　４．８± ０．０８２５　　ｎｇ／日　　　　　１３．２±１．２　　　　　　　　　　　 ４．８±０，０８２４−シ゛ネモー１．２５ １２５ｎｇ／日　　　　　　９．４±０．８　　　　　　　　　　　４．．２土 ０．０６ａ：測定６回の平均標準誤差 第４表 ２４−シネモー１，２５−ジヒド０什ビタミンＤ３に対する低カルシウム餌・ビ タミンＤ欠乏ラットの血しょうカルシウム応答 群　　　　　　　　　　血漿カルシウムＣｘ９％）（平均力Ｓ、Ｅ、Ｍ、） 対照　　　　　　　　　　　　３．４±０．０７ａ１．２５−（ＯＨ）ｔＤｓ １２．５ｎｇ／日（７日間）３．７±０．１７２５　　ｎｇ／日　　　　　　　 　　　　　４．１　　±０．０７７５　　ｒａｇ／日　　　　　　　　　　　４ ．６　±０．０９２５ｎｇ／日　　　　　　　　　　　　３６±０，１６１２５ ｎｇ／日　　　　　　　　　　　　　３，９５出０．１３２５０ｎ／日　　　　 　　　　　　　　３８０±０．０５ａ・測定６回の平均標準誤差 第２表および第３表に示した結果によれば、２４−ジホモ−１，２５（ＯＨ）ｔ Ｄ　３（化合物３２）は、１．２５−（ＯＨ）、Ｄ、よりも、腸カルシウム輸送 刺激において、活性が著しく低い。１．２５−（ＯＨ）。

Ｄ３は、１日当たり、１２．５〜２５ｎｇで最大カルシウム輸送を達成するのに 対し、２４−ジホモ−１，２５−（ＯＨ）ｔＤｓは、これらの用量ではいかなる 場合も、活性を示さず（第２表）、１日当１；りのレベル１２５ｎｇでのみ、実 質的な応答をなしたにすぎない（第３表）。この応答でさえ、１．２５−（ＯＨ ）ｔＤｓ（１−’２．５ｎｇ／日）により得られる活性よりも低い。これらの結 果は、該ジホモ同族体が腸カルシウム輸送刺激において１　、２５−（ＯＨ）ｔ Ｄ　ｓの活性の１０分のｌまにはそれ以下であることを、証明するものである（ 第２表および第３表）。

骨無機質化の場合（第２表）、スケルトンによる２４−ジホモ−１，２５−（ｏ ｎ）ｔＤｓの無機質化の効果と、同様な欠如が観察された。第２表における大腿 骨灰分および大腿骨灰分％の数値に示されているように、用１１２．５ｎｇおよ び２５ｎｇのジホモ化合物（３２）は、対照と比較して実質的な変化を生み出し ていないのに対し、ｘ、２ｓ−（ｏＨ）ｔＤｓは、これらと同じ投与レベルで実 質的な無機質化を誘発している。

骨カルシウム代謝（血しようカルシウムレベル）の測定によれば、１．２５−（ ０）１）、Ｄ、は、骨の損失による血しようカルシウムの上昇を、用量１２，５ 〜２５ｎｇ／日で生じさせることが明白である（第３表および第４表）。これに 対し、２４−ジホモ−１，２５−（０１１）ｔＤ３は、投与レベル２５ｎｇ／日 で実質的な応答を誘発さけず、第１実験の１２５ｎｇ／日でも全く誘発させず（ 第３表）、第２実験においてレベル１２５〜２５０ｎｇで投与した場合に、血し ようカルシウムをごく穏やかに上昇させたにすぎない（第４表）。同様に、注目 すべきは、第４表の観察によれば、１２５　ｎｇ／日から２５０　ｎｇ／日に用 量を増加させても、血中のカルシウムレベルは増加しない。これらの結果によれ ば、２４．２４−ジホモ−１，２５−ｃＯＨ）ｔＤ３は、骨の消費による血しよ うカルシウムの増加に関し、１　、２５−（ＯＨ）ｔＤｓと比較して、１０分の １以下の活性である。これらの結果は、骨カルシウム代謝を測定する第３の実験 により確認でき、この実験では、ジホモ化合物１主は、１１０００ｎ／日までの 投与範囲にわたり、応答を誘発させない。

すなわち、新規なビタミンＤ同族体（化合物１影）は、細胞分化において予期で きないほどの好適な活性を示す一方、カルシウム輸送および代謝に対しほとんど 作用しないことが判明した。これは、抗癌剤として使用されるビタミンＤ化合物 にとって望ましいタイプの活性である。１．２５−（ＯＨ）ｔＤ、と比較して非 常に低いカルシウム作用により、新規なノホモー１．２５（ＯＨ）＊Ｄｓ同族体 は、望ましくない過剰カルンウム化応答を患者に誘発させることなく、投与する ことかできる一方、悪性細胞の増殖抑制および細胞分化の誘発において、ｌ、２ ５−（ＯＨ）ｔＤｓよりも、高い効力を示す。同じタイプの活性パターン、すな わち明白な分化活性と、非常に低いかまたは全くないカルセミツク活性との組み 合わせは、本発明の２４−トリホモ同族体に対し予想でき、この化合物も著しく 向上した有利な分化／カルセミツク活性の比率を示すことができる。先行技術（ ＵＳＰ、Ｎｏ、　４７１７７２１）の２４−ホモ−ビタミンＤと構造的には関連 するが、本発明の側鎖ホモビタミンＤ化合物は、本質的に変化した活性特性：は ぼなくなったカルセミツク活性と結合した高い細胞分化活性を示すものである。

さらに、分化活性は、ヒト白血病細胞（ＨＬ−６０細胞）の場合にも示すので、 本発明の新規なビタミン同族体は、ヒトの悪性細胞、とくに白血病の治療に使用 することができる。

治療目的には、本発明の化合物は、通常の溶媒中の溶液、または通常の適した溶 媒または担体中のエマルジョン、懸濁液または分散液として、ま１こはビル、錠 剤ま７二はカプセルとして、常法により処方することができる。かかる組成物は 、また、他の医薬上許容することができる非毒性賦形剤、例えば安定剤、抗酸化 剤、バインダー、着色剤、乳化剤、または香味剤を含有することができる。

該化合物は、有利には注入または適した滅菌溶液の経静脈注入により、または食 物管を介する経口投与の形態で投与する。ヒト白血病の治療には、本発明のホモ ビタミンＤ化合物は、白血病細胞のマクロファージへの分化誘発に充分な投与量 で患者に投与する。好ましい投与量は、０．５μｇ〜５０μｇ／日で、かかる投 与量は、当業者に明らかなように、疾患の激しさや患者の応答や状態に応じ、高 い用量レベルまで調節することができる。

ＦＩＧ、３ １斗　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１９国際調査報 告 ｍ＋＃＋’１ｌｌＡｅｌｌ＾１６１１１６１４１　ｈｖｐｃτ／ｌＸＳ　　ε９ １０）６３３国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、ＸおよびＹは、同一または異なって、水素およびヒドロキシ保護基から なる群から選ばれる基を意味する。〕で示されるビタミンＤ−２２−トシレート 誘導体を、式：Ｐｈ−ＳＯ２−ＣＨ２−Ｒ 〔式中、Ｒはアルキル、フルオロ置換アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、およ びヒドロキシおよびフルオロ置換アルキル（存在するいずれのヒドロキシ基も、 好ましくはヒドロキシ保護基により誘導体化される）からなる群から選ばれる基 を意味する。〕で示されるアルキルフェニルスルホン誘導体で処理し、これによ り、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｘ、ＹおよびＲは前記と同じ。〕で示される側鎖スルホン付加物を得、 得られた側鎖スルホン付加物を還元脱スルホン化して、対応するビタミンＤ化合 物を得、次いで要すれば、存在するヒドロキシ保護基を除去することからなる、 式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、 ＸおよびＹは、同一または異なって、水素およびヒドロキシ保護基からなる群か ら選ばれる基、および Ｒはアルキル、フルオロ置換アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ヒドロキシお よびフルォロ置換アルキル、ヒドロキシ保護ヒドロキシ置換アルキル、およびヒ ドロキシ保護ヒドロキシおよびフルオロ置換アルキルからなる群から選ばれる基 を意味する。〕で示されるビタミンＤ化合物の製造法。 ２．ＸおよびＹがヒドロキシ保護基である請求項１記載の製法。 ３．Ｒがヒドロキシ保護形の４−メチル−４−ヒドロキシベンチルである請求項 ２記載の製法。 ４．Ｒがヒドロキシ保護形の５−メチル−５−ヒドロキシヘキシルである請求項 ２記載の製法。 ５．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、ＸおよびＹ、同一または異なって、水素およびヒドロキシ保護基からな る群から選ばれる基、およびＲはアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、フルオロ 置換アルキル、およびヒドロキシおよびフルオロ置換アルキル、および対応する これらのヒドロキシ保護形を意味する。〕で示される化合物。 ６．ＸおよびＹが水素である請求項５記載の化合物。 ７．ＸおよびＹがヒドロキシ保護基である請求項５記載の化合物。 ８．Ｒが４−メチル−４−ヒドロキシベンチルである請求項５記載の化合物。 ９．Ｒがヒドロキシ保護形の４−メチル−４−ヒドロキシベンチルである請求項 ５記載の化合物。 １０．Ｒが５−メチル−５−ヒドロキシヘキシルである請求項５記載の化合物。 １１．Ｒがヒドロキシ保護形の５−メチル−５−ヒドロキシヘキシルである請求 項５記載の化合物。 １２．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、 Ｘ、ＹおよびＺは、同一または異なって、水素およびヒドロキシ保護基からなる 群から選ばれる基、およびｎは３または４の整数を意味する。〕 で示される化合物。 １３．Ｘ、ＹおよびＺがヒドロキシ保護基である請求項１２記載の化合物。 １４．Ｘ、ＹおよびＺがアルキルシリルである請求項１３記載の化合物。 １５．Ｘ、ＹおよびＺが水系である請求項１２記載の化合物。 １６．２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３０１７．２４−ト リホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３。 １８．請求項１２記載の化合物と共に医薬上許容される賦形剤を含有する医薬組 成物。 １９．化合物が、２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である 請求項１８記載の医薬組成物。 ２０．化合物が、２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３であ る請求項１８記載の医薬組成物。 ２１．悪性細胞の細胞分化を誘発または向上させるにあたり、該細胞を、細胞分 化の誘発に充分な量の、請求項１２記載の少なくとも１つの化合物にさらすこと を特徴とする方法。 ２２．化合物が、２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である 請求項２１記載の方法。 ２３．化合物が、２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３であ る請求項２１記載の方法。 ２４．腫瘍疾患を治療するにあたり、 腫瘍疾患の患者に、有効量の、請求項１２記載の少なくとも１つの化合物を投与 することを特徴とする方法。 ２５．投与される化合物が、２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミン Ｄ３である請求項２４記載の方法。 ２６．投与される化合物が、２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミ ンＤ３である請求項２４記載の方法。