JPH0254358B2 - - Google Patents

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【発明の詳細な説明】

術語Ｃ−076は、ストレプトミセス アベルミ
チリス（Streptomyces avermitilis）のＣ−076
生産菌株の醗酵ブロスから単離される一連の化合
物を記述する為に使用される。培養物の形態学的
な特徴は、米国特許出願番号第772601号、これは
独特許第P27170407号として発表されているが、
に於て完全に記載されている。Ｃ−076化合物群
は、一連のマクロライドであり、各化合物に於て
13位が４−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ
−オレアンドロース基によつて置換されている。
Ｃ−076化合物の２−シリーズは、23−水酸基に
加えて種種の他の水酸基を有している。他の残り
の水酸基に影響を与えることなく、23−水酸基を
選択的に酸化することが、本発明の主目的であ
る。Ｃ−076化合物及び本出願中のそれらの誘導
体は、高度の駆虫及び抗寄生虫活性を有してい
る。 Ｃ−076シリーズの化合物は以下の構造式を有
する。 式中、Ｒは4′−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−
α−Ｌ−オレアンドロース基であり以下の構造を
有する。 構造中の破線は、一重又は二重結合を示し、
R₁は水酸基であり、当該破線が一重結合を示す
時のみ存在する。 R₂はイソプロピル又は２級ブチルであり、 R₃はメトキシ又は水酸基である。 Ｃ−076化合物には８種の異なる化合物が存在
し、個々の化合物の構造に基づいてA1a，A1b，
A2a，A2b，B1a，B1b，B2a，B2bと命名され
ている。 前述の構造式に於て、個々のＣ−076化合物は
以下の置換基を有する。

【表】 破線が一重結合を示し、R₁が水酸基であるＣ
−076化合物は、名称中の２によつて同定される
が故に、“２−シリーズ”と呼ばれる。本発明の
化合物は、23−ヒドロキシ基（R₁）がケトンに
酸化される時に生成する。更に、23−ヒドロキシ
基の酸化の前又は後に、本分子の他の誘導体を製
造することが可能である。それらの例として、１
個又は両方のα−Ｌ−オレアンドロース部分の除
去、１ないしそれ以上の水酸基のアシル化があげ
られる。 従つて、新規23−ケト化合物を供給することが
本発明の一つの目的である。そのような化合物の
製造方法を記述することも、目的の一つである。
さらにそれら化合物の抗寄生虫剤としての使用を
記載し、そのような使用のための組成物を供給す
ることも本目的の一つである。本発明の以下の記
述を読むことにより、本発明のさらに他の目的も
明らかになるであろう。 本発明の化合物は以下の構造式によつて、最も
良く記述される。 式中、R₁はイソプロピル又は２級ブチルであ
る。 R₂はメトキシ、又は水酸基である。 R₃は水素、α−Ｌ−オレアンドロシル、又は
4′−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ−オレ
アンドロシルである。 本発明に於て、術語“低級アルカノイル”又は
“低級アルカノイルオキシ”は、これら低級アル
カノイル基及び２−６個の炭素原子を含有する低
級アルカノイルオキシ基の低級アルカノイル部分
を含めることを意図している。それらの基の例と
してアセチル、プロピオニル、ブチリル、ピバロ
イル等があげられる。 術語“ハロ”又は“ハロゲン”はハロゲンであ
る弗素、塩素、臭素、沃素を含有することを意図
している。 本発明の好ましい化合物は以下の時に実現され
る。 R₁がイソプロピル、又は２級ブチルであり、 R₂がメトキシ、又は水酸基であり、 そして R₃が4′−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ
−オレアンドロシル、である。 Ｃ−076分子を調べれば容易に明らかになるが、
本発明の化合物を製造するうえで酸化すべき23−
ヒドロキシ基に加えて、少なくとも２個（Ａ化合
物）、場合によつては３個（Ｂ化合物）の水酸基
が存在する。従つて、本発明の一つの目的は23−
ヒドロキシ基を酸化し、他の水酸基をそのまゝに
残しておくことである。23−ヒドロキシを選択的
に酸化する方法、又は酸化してはいけない水酸基
を選択的に保護する方法を用いることによつて、
この目的は達成される。 23−ヒドロキシ基を23−ケト基に選択的に酸化
するための操作は、未保護のＣ−076出発物質、
好ましくはＣ−076 B2aを土壌中に土壌１当り
100マイクログラムから10グラム入れることによ
つて遂行される。通常の未殺菌の農業用土壌を、
常温の生育温度で利用する。一般に、Ｃ−076出
発物質のアセトン溶液を、変換を起させる土壌の
上にスプレー散布する。土壌中に23−ケト化合物
がひとたび形成されると、そのような土壌中で生
育している植物は、土壌中で形成されたそのよう
な23−ケト化合物によつて線虫の害から保護され
る。これらの場合、生成する23−ケト化合物の量
が土壌中に正しく存在するように、23−ヒドロキ
シ化合物を土壌中に、土壌１当り20マイクログ
ラムから20ミリグラム投与する。この場合、より
多量の23−ヒドロキシ化合物（土壌１当り、
100ミリグラムから10グラム）を土壌に投与する
ことが可能である。23−ケト化合物への変換は、
２ないし20日間でおこり、所望するならば、ケト
ン、好ましくはアセトン、又は低級アルカノー
ル、好ましくはメタノール又はエタノール等の有
機溶媒を用いる抽出によつてこの生成した化合物
を土壌から除去することが可能である。大部分の
23−ケト化合物は土壌中７日めから10日めの間に
生産され、その時点に於て土壌からうまく抽出さ
れることが見出されている。他の目的、又は更に
反応を行うために土壌中から23−ケト化合物を抽
出しなければならない時は、土壌温度を20から30
℃に維持しておくのが最良である。 23−ケト化合物をひとたび抽出によつて土壌か
ら除去したら、カラム、薄層、高圧液体クロマト
グラフイー等の既知の方法によつて精製する。精
製したら、23−ケト化合物を抗寄生虫剤として使
用することもできるし、下記のように23−ケトＣ
−076化合物の他の誘導体を生産するための反応
に使用することもできる。 23−ケト化合物は、化学的酸化法及び4″，５及
び13位の他の反応性のある水酸基の保護により23
−ヒドロキシ化合物から、化学的に調製すること
も可能である。３級水酸基である７−ヒドロキシ
基は、酸化を受けない。 保護したＣ−076化合物の調製を以下に記述す
るが、23−ケト基を有するそのような保護した化
合物は新規化合物であり、そのような化合物もま
たかなりの抗寄生虫活性を有するということに注
意すべきである。これらの保護した誘導体は、本
発明の範囲内に含まれる。 4″及び５位の好ましい保護基は、３置換シリル
オキシアセチル基である。最も好ましい基は３級
−ブチルジメチルシリルオキシアセチル基であ
る。4″−保護Ｃ−076 A2a／A2b及び4″，５−保
護Ｃ−076 B2a／B2b化合物は、Ｃ−076未保護
化合物を、塩化メチレン、トルエン、ベンゼン、
酢酸エチル、テトラヒドロフラン等の非プロトン
性溶媒中、保護基の酸ハライドである保護基化剤
と結合させることにより調製する。好ましい試薬
は３級−ブチル−ジメチルシリルオキシアセチル
クロリドである。副反応を最少限にするために、
反応混合物中に３級アミンを加えておき、反応の
進行中に遊離してくる酸ハライドと反応させる。
好ましいアミンはピリジン及びトリエチルアミン
である。遊離してくる酸ハライドの量と等モル量
の３級アミンが要求されるが、一般に数当量のア
ミンを採用する。溶媒を使用せず、アミンが事実
上溶媒となるように過剰に使用することさえも可
能である。０℃ないし反応混合物の還流温度に於
て、撹拌を行いながら反応させると1/2から16時
間以内に反応は完了する。 4″−及び５−位に３置換シリルオキシアセチル
保護基を有する保護した化合物では、２段階の反
応によつてそのような保護基を除去する。第１段
階では、保護化合物を室温に於て、メタノール等
の低級アルカノール中、ｐ−トルエンスルホン酸
の存在下、30分間撹拌する。１モル当量のｐ−ト
ルエンスルホン酸を採用する。 この反応からの生成物は、4″−又は５−位にヒ
ドロキシアセトキシ基を有する。つまり、３級−
ブチルジメチルシリル基が除去されたのである。
従つて、保護基を除去するための第１段階は、本
発明のヒドロキシアセトキシ化合物を調製するた
めの一つの方法である。これに続いて、保護した
中間体をメタノール中、室温に於て1/2ないし２
時間ナトリウムメトキシドで処理する。ヒドロキ
シアセトキシ基が開裂して、水酸基が残るのでこ
の生成物を当業界周知の方法によつて単離する。 別法により、３置換シリルオキシアセチル保護
基は１段階で除去することも可能である。ほゞ室
温に於て、ナトリウムメトキシドにより最高６時
間にわたる時間処理すると、所望する未保護生成
物が得られる。 23−ヒドロキシ出発物質及び23−ケト生成物の
他の有用な保護基及び誘導体は、アシル及び置換
アシル、特にアセチル、トリフロロアセチル、ト
リクロロアセチル、クロロアセチル、ヒドロキシ
アセチル、カルボキシアセチル、フエノキシアセ
チル等の低級アルカノイル及び置換低級アルカノ
イルである。そのようなアシル化化合物は、置換
基上に置換するアシル基のハライド、好ましくは
クロリド、のようなアシル化剤を用いて調製され
る。更に無水物、ハロホルメート等の試薬もまた
有用である。 ハライド試薬を採用するこれらの反応に於て、
反応の進行に伴つて放出される水素ハライドと反
応し、中和することのできる塩基性化合物を、反
応混合物中に入れておくのが有利である。トリエ
チルアミン、ピリジン、ジメチルアミノピリジ
ン、ジイソプロピルエチルアミン等の３級アミン
が好ましい。放出される水素ハライドに関して、
等モルの塩基性化合物が要求されるが、塩基性化
合物を溶媒とするような過剰量を用いても、有害
とはならない。 出発物質は溶媒、好ましくはピリジン中、０℃
から室温の範囲で、好ましくは室温でアシル化す
るが、反応は４−24時間以内で完了する。生成物
は既知の方法で単離する。 アシル保護基は、低級アルカノール中、０℃か
ら室温の範囲に於て、緩和な塩基を触媒とする保
護化合物の加水分解によつて容易に除去される。
反応は１−24時間以内に完了する。 23−ヒドロキシ基は、ピリジニウム、ジクロメ
イト、塩化オキザリル−ジメチルスルホキシド、
無水酢酸−ジメチルスルホキシド、クロム酸−ジ
メチルピラゾール、クロム酸、無水トリフロロメ
チル酢酸−ジメチルスルホキシド、ｍ−クロロサ
クシイミデートクロム酢−酢酸等の酸化剤によつ
て23−ケト基に酸化される。塩化オキザリル−ジ
メチルスルホキシドが好ましい酸化剤である。上
述したように、適宜保護した化合物を採用する。
反応は、ドライアイス浴温から室温に於て、好ま
しくはドライアイス浴温から０℃に於て行い、１
−24時間以内で反応は終了する。反応は出発物質
が応分に溶け、かつ酸化剤と反応しない溶媒中で
実行することができる。ジメチルホルムアミド、
ジメチルスルホキシド、塩化メチレン、クロロホ
ルム、四塩化炭素等の溶媒が受容される。ピリジ
ニウムジクロメイト反応には、ジメチルホルムア
ミド及びジメチルスルホキシドが好ましい。クロ
ム酸−ジメチルピラゾール反応には、塩化メチレ
ンが好ましい。化合物は、反応混合物から当業界
周知の方法によつて単離される。 親Ｃ−076化合物の13−位に於ける炭水化物側
鎖は、4′−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ
−オレアンドロース基であり、Ｃ−076モノ配糖
体及びＣ−076アグリコンをそれぞれ製造するた
めの、この糖部分の１個又は両方を選択的に除去
する方法が利用可能である。 Ｃ−076モノ配糖体及びアグリコンの両方を調
製するために一般的に応用できる反応条件には、
水と混合し得る非親刻性の有機溶媒、好ましくは
ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメトキシエ
タン、ジメチルホルムアミド、ビス−２−メトキ
シエチルエーテル等、の水性溶液（水の含量は容
量にして、0.1から20％である）に、Ｃ−076化合
物を溶解することが含まれる。この水性有機溶媒
に、容量で0.01から10％程度の酸を加える。反応
混合液を、一般に約20−40℃、好ましくは室温で
６ないし24時間撹拌する。上述の反応条件下に於
て、約0.01から0.1％のより低濃度の酸は主とし
てモノ配糖体を与える。約１から10％のより高濃
度の酸は、上述の反応条件下では主としてアグコ
ンを与える。中間の酸濃度により、一般にモノ配
糖体及びアグリコンの混合物が得られる。生成物
及び混合物は、カラム、薄層、分取用薄層及び高
速液体クロマトグラフイー等の技術、及び他の既
知の技術により単離、精製する。 上述の操作で使用される酸には、硫酸、ハイド
ロハロ酸、リン酸、トリフロロ酢酸、トリフロロ
メタンスルホン酸等の鉱酸及び有機酸が含まれ
る。ハイドロハロ酸は好ましくは塩酸又は臭素酸
である。上述の方法に於ける好ましい酸は硫酸で
ある。 単離を調製するためのもう一つの方法では、イ
ソプロパノール中の１％（容量）の硫酸を使用
し、20−40℃、好ましくは室温で６ないし24時間
反応させる。アグリコンを調製するためには、前
述の条件下、メタノール中の１容量％の硫酸が適
していることが見出されている。 上述した他の酸もまたこの目的に使用し得る
が、その濃度は硫酸の場合とほゞ同じである。 上述した単糖及びアグリコン化合物は、反応混
合物から単離され、化合物の混合物は当業界周知
の方法、特に上述したクロマトグラフイー技術に
より分離される。 １ないし両方のグリコシル基を除去すると、
4′−（モノ配糖体に対して）及び13−（アグリコン
に対して）位に水酸基が残ることが明らかであ
る。これらの水酸基は、4″及び５−位の水酸基と
ほゞ同程度の反応性を有しており、このような
4″及び５−位が置換されるアシル誘導体は、これ
ら4′及び13−位に於てもまた置換されるであろ
う。上述の反応条件は、それらの化合物に同じよ
うに応用し得る。 本発明の新規化合物は、人間及び動物の健康分
野及び農業分野に於て、駆虫、抗外部寄生虫、殺
虫及びだに駆虫剤として重要な殺寄生活性を有し
ている。 一般に、寄生虫病として記述される病気、又は
一群の病気は、動物宿主に寄生虫として知られて
いる寄生虫が感染したためにおこる。寄生虫病
は、豚、羊、馬、牛、山羊、犬、猫及び家禽のよ
うな家畜動物における主要、かつ深刻な経済的問
題となつている。寄生虫のなかでは、線虫として
記述される虫の一群が、種々の動物に於ける広は
ん、かつしばしば深刻な感染の原因となる。上述
の動物に感染する線虫の最も一般的な属は、ヘモ
ンカス（Haemonchus）、トリコストロンギラス
（Trichostrongylus）、オステルタギア
（Ostertagia）、ネマトジラス（Nematodirus）、
コーペリア（Cooperia）、アスカリス
（Ascaris）、ブノストマム（Bunostomum）、オ
オソフアゴストマム（Oesophagostomum）、チ
ヤベルチア（Chabertia）、トリカリス
（Trichuris）、ストロンギラス（Strongylus）、ト
リコネマ（Trichonema）、ジクチオカウルス
（Dictyocaulus）、キヤピラリア（Capillaria）、
ヘテラキス（Heterakis）、トキソカラ
（Toxocara）、アスカリジア（Ascaridia）、オキ
シウリス（Oxyuris）、アンシロストマ
（Ancylostoma）、ウンシナリア（Uncinaria）、
トキサスカリス（Toxascaris）、及びパラスカリ
ス（Parascaris）である。ネマトジラス
（Nematodirus）、コーペリア（Cooperia）及び
オオソフアゴストマム（Oesophagostomum）の
ようなこれらのうちの数種のものは、主として腸
管を襲い、一方ヘモンカス（Haemonchus）及び
オステルタギア（Ostertagia）等の他のものは、
胃に分布していることが最も多く、ジクチオカウ
ルス（Dictyocaulus）等の他のものは肺で発見
される。更に他の寄生虫は、心臓、血管、皮下及
びリンパ組織等の身体の他の組織及び器管に存在
する。寄生虫病として知られる寄生虫の感染によ
り、貧血、栄養不良、虚弱、体重の減少、腸管
壁、他の組織及び器管のひどい損傷がおこり、処
置しないでおくと、感染宿主の死を招くこともあ
り得る。本発明の23−ケト Ｃ−076化合物は、
これら寄生虫に対し予期せぬほど高い活性を有
し、更に、犬のジロフイラリア（Dirofilaria）、
けつ歯類のネマトスピロイデス
（Nematospiroides）、シフアシア（Syphacia）、
アスピキユルリス（Aspiculuris）、だに、のみ、
しらみ、のみむし、あおばえ、等の動物及び鳥に
於ける節足動物性外部寄生虫、羊におけるルシリ
ア（Lucilia）、牛におけるかむ昆虫及びヒポデル
マ種（Hypoderma）のような移動性双翅類幼生、
馬に於けるガストロフイラス（Gastrophilus）、
及びけつ歯におけるキユテレブラ種
（Cuterebra）に対しても活性である。 本発明の化合物は、人間に感染する寄生虫に対
しても有用である。人間の胃−腸管系寄生虫の最
も一般的な属は、アンシロストマ
（Ancylostoma）、ネカトル（Necator）、アスカ
リス（Ascaris）、ストロンギロイデス
（Strongyloides）、トリチネラ（Trichinella）、
キヤピラリア（Capillaria）、トリカリス
（Trichuris）及びエンテロビウス（Enterobius）
である。胃腸管系以外の他の組織及び器管及び血
液中に見出される、他の医学的に重要な寄生虫の
属は、ウチエレリア（Wuchereria）、ブルギア
（Brugia）、オンコセルカ（Onchocerca）、ロア
（Loa）等のフイラリア虫、ドラカンカラス
（Dracunculus）、及びストロンギロイデス
（Strongyloides）、トリチネラ（Trichinella）等
の腸管系寄生虫の外腸管段階のものである。本発
明の化合物は人間に寄生する節足動物、人間を悩
ませるかむ昆虫及び他の双翅類毒虫に対しても価
値あるものである。 本発明の化合物はブキブリ、ブラツテラ
（Blattella）、衣類の蛾チネオラ（Tineolla）、ひ
めまるかつぶしむし、アツタゲヌス
（Attagenus）及び家ばえムスカ ドメスチカ
（Musca domestica）等の家庭にいる虫に対し
ても活性を示す。 本発明の化合物は、トリボリウム
（Triborium）、テネブリオ（Tenebrio）等の貯
蔵穀物の害虫、くもだに〔テトラニカス
（Tetranychus）〕、あぶらむし〔アシルチオシホ
ン（Acyrttiosiphon）〕等の農業植物の害虫に対
して有用であり、いなごのような移動性直翅類、
植物組織上に棲息する昆虫の未成熟段階にあるも
のに対して有用である。本発明の化合物は、土壌
線虫及びメロイドギネ（Meloidogyne）等の農業
上重要な植物寄生虫に対する殺線虫剤として有用
である。 これら化合物は、動物に於ける駆虫剤として使
用する場合カプセル、大丸薬又は錠剤のような単
位投薬形として、又は水薬として経口的に投与す
ることが可能である。水薬は、通常ベントナイト
等の懸濁剤及び湿潤剤又は類似の補形薬を一緒に
含有する水中の活性成分の溶液、懸濁液又は分散
液である。一般的には、水薬は消泡剤をも含有す
る。水薬組成物は、一般に重量で、活性成分を約
0.001ないし0.5％含有する。好ましい水薬組成物
は、重量で0.01から0.1％含有する。カプセル及
び大丸薬は澱粉、タルク、ステアリン酸マグネシ
ウム、又はリン酸２カルシウム等の担体と混合し
た活性成分から成る。 Ｃ−076誘導体を、乾燥した固型の単位投薬形
として投与することが望ましい時、活性化合物の
所望する量を含有するカプセル、大丸薬又は錠剤
が一般に採用される。これらの投薬形は、活性成
分を細かく砕いた適当な稀釈剤、充填剤、分散剤
及び／或は結合剤（澱粉、乳糖、タルク、ステア
リン酸マグネシウム、食用ゴム等）と良く均一に
混合することにより調製される。そのような単位
投薬組成物は、治療すべき宿主動物の型、感染の
ひどさ及びタイプ、宿主の体重等の因子に依存し
て、その全重量及び抗寄生虫剤の含量を大巾に変
えることが可能である。 活性化合物を動物の飼料と混ぜて投与しなけれ
ばならない時、飼料中によく分散させるか、表面
仕上げ剤として使用するか、或は錠剤の形にする
が、これは仕上げをした飼料に添加したり、場合
によつては別々に食べさせることも可能である。
別の方法として、我々の発明した抗寄生虫化合物
は、動物に非経口的に、例えば反蒭胃内筋肉内、
気管内又は皮下注射によつて投与することが可能
であり、その場合、活性成分は液状の担体媒体中
に溶解又は分散させる。非経口投与するために
は、活性物質を許容される媒体、好ましくはピー
ナツツ油、綿実油等の種々の食用油、と混合する
のが適している。ソルケタール、グリセロールフ
オーマルなどを用いる有機調製物のような他の非
経口的媒体、及び水性非経口的組成物もまた使用
される。活性単糖又はアグリコンＣ−076化合物
又は化合物群を、投与用の非経口的組成物中に溶
解または懸濁させる。そのような組成物は、一般
に重量で0.005ないし５％の活性化合物を含有す
る。 本発明の抗寄生虫剤は、主として寄生虫病の治
療及び／或は予防に使用されるが、他の寄生虫、
例えば家畜及び家禽に於けるだに、しらみ、の
み、乾酪虫及び他のかむ昆虫等の、節足動物寄生
虫によつておきる病気の予防及び治療に有用であ
る。本化合物は、人間を含めた他の動物に生ずる
寄生虫病の治療にも有用である。勿論最良の結果
を得るために使用すべき最適量は、使用する特定
の化合物、治療すべき動物の種類、寄生虫病の種
類やひどさの程度に依存する。一般に、我が新規
化合物を動物の体重１Kg当り約0.001から10mg経
口投与すると良好な結果が得られる。この際投与
する全量は、１度に、又は１−５日間の比較的短
い期間中に、数回にわけて与える。本発明の好ま
しい化合物については、動物に体重１Kg当り約
0.025から0.5mg投与することによつて、これら寄
生虫病の治療にすぐれた結果を得ることができ
る。再感染を防ぐために必要とされる場合には、
繰り返し治療をするが、その必要性は、寄生虫の
種類及び投与方法に依存する。これら物質を動物
に投与する技術は、家畜分野に於て良く知られて
いるものである。 本文書中で記載する化合物を、動物飼料の一成
分として、又は飲み水に懸濁、或は溶解する場
合、単数又は複数の活性化合物が不活性な担体、
又は稀釈剤中によく分散するように組成物を調製
する。不活性な担体とは、抗寄生虫剤と反応せ
ず、動物に対し安全に投与できるものを意味す
る。飼料投与用の担体は、動物飼料の一成分であ
ること、或は一成分とすることができることが望
ましい。 適当な組成物は、その中に活性成分が比較的大
量に存在し、動物に直接投飼するのに、或は直接
又は中間的な稀釈又は混合の後で飼料に添加する
のに適した予備混合物又は増補剤を含有してい
る。そのような組成物に適した典型的な担体、又
は稀釈剤には、例えば醸造家の乾燥穀物、とうも
ろこし粉、かんきつ類粉、醗酵残渣、粉砕したカ
キの殻、こむぎシヨート、可溶性糖みつ、とうも
ろこしの穂軸の粉、食用豆細粉飼料、粉砕した石
灰岩等が含まれる。活性な23−ケト Ｃ−076化
合物を、粉砕、撹拌、製粉、回転等の手段により
担体中に良く分散させる。活性成分を重さの約
0.005から2.0％含有する組成物は、特に飼料用予
備混合物として適している。動物に直接投与する
飼料増補剤は重さ当り約0.0002から0.3％の活性
化合物を含有する。 そのような増補剤は、完成した飼料中の活性化
合物の濃度が寄生虫病の治療及び抑制に対して望
ましくなるように添加する。活性化合物の望まし
い濃度は、前述した因子及び使用する特定のＣ−
076誘導体によつて変化するが、所望する抗寄生
虫効果が得られるように、本発明の化合物は飼料
中に通常0.0001から0.002％の濃度となるように
与える。 本発明の化合物を使用する場合、個々の23−ケ
ト Ｃ−076成分をそのまゝ調製して使用するこ
とが可能である。別の方法として、２ないしそれ
以上の個々の23−ケト Ｃ−076成分の混合物と
同様に、親Ｃ−076化合物、他のＣ−076化合物、
又はＣ−076と関係のない他の活性化合物及び本
発明の化合物の混合物を使用することが可能であ
る。 本発明の工程の出発物質として役立つＣ−076
化合物を醗酵ブロスから単離する場合、種々のＣ
−076化合物が異なる量で調製されることが見出
されるであろう。特に、“ａ”シリーズ化合物は
相当する“ｂ”シリーズ化合物よりも、より多い
割合で調製されるであろう。“ａ”シリーズの相
当する“ｂ”シリーズに対する重量比は、約75：
25から99：１である。“ａ”シリーズと“ｂ”シ
リーズの相違はＣ−076化合物を通して一定であ
り、25−位が各々２級ブチル及びイソプロピルか
ら成つている。勿論、この相違は本反応のいずれ
にも影響しない。特に、“ｂ”成分を関連した
“ａ”成分から分離することは不要であろう。
“ｂ”化合物は、重量で非常に小さいパーセント
でしか存在せず、かつ構造の相違が反応過程及び
生物活性に与える影響は無視し得るので、これら
非常に構造の良く似た化合物を分離することは、
一般に実用的でない。 特に、本発明の化合物のための出発物質は、約
80％のＣ−076B1a又はA1aに対し20％のＣ−
076B1b又はA1bの割合で調製されることが非常
に多いことが見出されている。従つて、本発明の
好ましい組成物は、約80％の“ａ”成分と20％の
“ｂ”成分を含有するものである。 本発明のＣ−076化合物は、生育中の、或は貯
蔵中の穀物に被害を与える農業上の害虫を抑える
のに有用である。化合物は、スプレー、粉剤、乳
剤、等の既知の技術により、それらの農業上の害
虫から保護すべき生育中又は貯蔵中の穀物に投与
する。 以下の実施例は、本発明をよりよく理解しても
らうためのものであり、本発明を制限するための
ものではない。 以下の実施例で調製する23−ケト Ｃ−076誘
導体は、一般に無定形の固体として調製され、結
晶としては調製されない。従つてこれら化合物
は、質量スペクトロメトリー、核磁気共鳴等の分
析手段によつて特徴づけられる。無定形であるの
で、化合物は、はつきりとした融点では特徴づけ
られないが、採用したクロマトグラフイー及び分
析手段は、これら化合物が純粋であることを示し
ている。 実施例 １ 23−ケト Ｃ−076B2A Ａ 4″，５−ジ−Ｏ−（３級ブチル−ジメチルシ
リルオキシアセチル）Ｃ−076B2a 乾燥した窒素を含有する火で乾燥した反応容器
中で、2.0ｇのＣ−076B2a，25mlの乾燥エーテル
及び2.5mlの乾燥ピリジンを合せる。この溶液を
氷浴中で０℃に冷却し、940mgの３級ブチルジメ
チルシリルオキシアセチルクロリドを含有する８
mlのジエチルエーテル溶液を、600mgの３級ブチ
ルジメチルシリルクロリドと共に添加する。添加
によつて白色の沈澱が生ずる。この反応混合物を
氷浴中で30分間撹拌し、その後、薄層クロマトグ
ラフイーにより分析すると、反応が未だ完了して
いないことを示す。溶液１ml当り100mgの３級ブ
チルジメチルシリルオキシアセチルクロリドを含
有する８mlのエーテル溶液を更に加え、反応混合
物を更に80分間撹拌する。薄層クロマトグラフイ
ーの分析は、反応混合物中に出発物質が存在しな
いことを示している。反応混合物に200mlの冷水
を加え、次いで100mlづつのジエチルエーテルで
５回抽出する。エーテル抽出物を合せ、20mlづつ
の水で７回、水と飽和食塩水の１：１混合物で１
回洗う。エーテル層を硫酸マグネシウムで乾燥
し、真空中で蒸発乾固する。残渣をジエチルエー
テルと２回、トルエンと１回、そして再びジエチ
ルエーテルと１回合せ、高真空下で乾燥すると
3.2ｇの透明な白色泡状物質が得られ、これを175
ｇのシリカゲルのカラム（展開溶媒、塩化メチレ
ン中の15％の酢酸エチル）で精製する。溶出液の
最初の500mlをすて、その後20mlづつの画分とし
て集める。画分39−63を集めると1.34ｇの白色泡
状物質が得られる。これは4″，５−ジ−Ｏ−（３
級ブチル−ジメチルシリルオキシアセチル）Ｃ−
076B2aであることが質量スペクトロメトリー及
び300MHzの核磁気共鳴によつて示された。 質量分析値：ｍ／ｅ 756，433，429，285，
317，323nmr。核磁気共鳴（NMR）分析図を図
１に示す。 分析4″，５−ジ−Ｏ−（３級ブチル−ジメチル
シリルオキシアセチル）Ｃ−076B2a： 計算値 Ｃ 62.21 ； Ｈ 8.65 測定値 Ｃ 62.11 ； Ｈ 8.75 Ｂ 4″，５−ジ−Ｏ−（３級ブチルジメチルシリ
ルオキシアセチル）−23−−ケト−Ｃ−076B2a 12.4mg（0.01ミリモル）を0.5mlの乾燥ジメチル
ホルムアミドに溶かし、37.6mg（0.1ミリモル）
のピリジニウムジクロメイトを撹拌しながら１度
に加える。この反応混合物を室温で３ 1/2時間撹
拌する。少量を取りだし、シリカゲルの薄層クロ
マトグラフイーにより分析すると、出発物質は残
つていない。反応液を５mlの氷水でうすめ、エー
テルで３回抽出する。エーテル抽出物を水で２
回、飽和食塩水で１回洗う。硫酸マグネシウムで
乾燥後、真空中で乾燥すると、10.5mgの白色泡状
物質が回収される。この物質を250μのシリカゲ
ルの分取用薄層クロマトグラフイー板で精製し、
塩化メチレン中、５％のテトラヒドロフラン及び
0.15％のエタノールを含有する溶液で溶出する。
生成物のバンドを、25％の酢酸エチルを含む塩化
メチレンで薄層板から除去し、過し、蒸発乾固
すると70mgの白色ガラス状物質が得られ、この物
質は質量スペクトロメトリー及び300MHzの核磁
気共鳴により、4″，５−ジ−Ｏ−（３級ブチル−
ジメチルシリルオキシアセチル）−23−ケト Ｃ
−076B2aと同定された。 Ｃ 4″，５−ジ−（Ｏ−ヒドロキシアセチル）−23
−ケト Ｃ−076B2a 4.6mg（0.0037ミリモル）の4″，５−ジ−Ｏ−
（３級ブチルジメチルシリルオキシ−アセチル）−
23−ケト−Ｃ−076B2aを１％のｐ−トルエンス
ルホン酸を含有する138mlのメタノールに溶解し、
室温で55分間撹拌する。この反応混合液を５mlの
稀重曹水（0.5mlの飽和重曹水及び4.5mlの水から
調製）でうすめ、エーテルで３回抽出する。エー
テルを水で３回、飽和食塩水で１回洗い、乾燥
し、真空中で乾固すると、4.8mgの黄色泡状物質
が得られ、これを更に精製することなく次の段階
に使用する。 Ｄ 23−ケト−Ｃ−076B2a 実施例１、部分Ｃからの生成物4.8mg（0.0048
ミリモル）を、0.5mlの乾燥メタノール及び39μ
（0.0048ミリモル）のナトリウムメトキシドのメ
タノール溶液（28mgのナトリウム及び10mlのメタ
ノールから調製）に溶解する。反応物を室温で90
分間撹拌する。反応混合物を１滴の酢酸を含有す
る５mlの水でうすめ、エーテルで３回抽出する。
エーテル抽出物を水で３回、稀重曹水で１回、飽
和食塩水で１回洗い、硫酸マグネシウムで乾燥
し、窒素気流下で蒸発させる。残渣を高真空下で
乾燥すると、2.9mgのガラス状残渣が得られる。
この残渣を、250μのシリカゲルを被覆した分取
用薄層クロマトグラフイー（クロロホルム中の５
％メタノールで溶出）により精製する。生成物を
含有するバンドの位置を紫外線により決定し、シ
リカゲルから酢酸エチルにより溶出する。薄層板
上で３つのバンドが単離されるが、中央のバンド
が23−ケト−Ｃ−076B2aであることが300MHzの
核磁気共鳴によつて決定された。1.5mgが単離さ
れた。質量分析値：ｍ／ｅ 582，564，321，
261，257，237，235，209，199，145，133nmr。
NMR分析図を図２に示す。 実施例 ２ 4″，５−ジ−Ｏ−フエノキシアセチルＣ−
076B2a／B2b １ｇのＣ−076B2a／B2bを、0.25mlのピリジン
を含有する10mlの塩化メチレンに溶解する。この
溶液を窒素下に入れ、氷浴中で冷却する。撹拌し
ながら、0.39mlの塩化フエノキシキアセチルを含
有する10mlの塩化メチレンを添加し、混合物を氷
浴中で１間撹拌する。反応混合物を100mlの氷水
に注ぎ、エーテルで３回抽出する。エーテル抽出
物を合せ、水で３回、飽和食塩水で１度洗い、硫
酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮乾固す
る。残渣を80ｇのシリカゲルのクロマトグラフイ
ーにかけ、塩化メチレン中の12％の酢酸エチルに
よつて溶出する。画分１−10を捨てる。画分25−
72から880mgの白色の泡状物質が得られ、これは
300MHzの核磁気共鳴によつて4″，５−ジ−Ｏ−
フエノキシアセチルＣ−076 B2a／B2bと同定さ
れた。 実施例 ３ 23−ケト−Ｃ−076B2a 60％のローム及び40％の砂から成る1200mlの土
壌混合物を、600mgの粘土担体上の６mgのＣ−
076B2aにより処理する。この土壌混合物を13日
間放置しておく。次いでこの土壌を約４のアセ
トンと共に約1/2時間撹拌することにより抽出す
る。このアセトンをガラスフイルター上の予め洗
浄しておいた珪藻土によつて過する。次いで
液を200mlの容量に濃縮する。この濃縮物の試料
を蒸発乾固し、酢酸エチルと合せ、高真空中で乾
燥する。残渣を塩化メチレンに溶かし、活性炭及
び酸で洗つたアルミナの等量から成るカラムを塩
化メチレンにより通過させる。溶出液を15％のイ
ソプロパノールを含有する塩化メチレンに変え
る。カラム溶出液を蒸発乾固し、残渣を高速液体
クロマトグラフイー（メタノール）によつて精製
すると23−ケト−Ｃ−076B2aが固型物として収
率46％で回収される。質量分析値：ｍ／ｅ 582，
564，321，261，257，237，235，209，199，145，
133nmr。NMR分析図は図２と同様な図を示し
た。 実施例 ４ 4″，５−ジ−Ｏ−（フエノキシアセチル）−23−
ケト−Ｃ−076B2a 55mlの塩化メチレン溶液 に3.21ｇ（2.21ml、25.2ミリモル）の塩化オキザ
リルを添加する。反応混合液を窒素気流下、ドラ
イ−アイス／アセトン浴で冷却し、20mlの塩化メ
チレン中の3.95ｇ（3.6ml、50.5ミリモル）のジメ
チルスルホキシド混合物を５分間にわたつて添加
する。発泡が観測される。この混合物を２分間撹
拌する。80mlの塩化メチレン中の13.3ｇ（11.5ミ
リモル）の4″，５−ジ−Ｏ−（フエノキシアセチ
ル）Ｃ−076B2a溶液を、10分間にわたつて滴加
し、この間温度を−70℃に維持する。反応を−60
から−50℃で1/2時間行い、次いで16.1mlのトリ
エチルアミンを５分間にわたつて添加する。次い
でドライアイス浴を取り除き、反応混合物を45分
かけて室温にもどす。反応混合物を500mlの氷水
中に注ぎ、水性混合物を100mlのエーテルで、次
いで75mlのエーテルで３回抽出する。エーテル層
を合せ、50mlの水で６回、飽和食塩水で１回洗浄
し、硫酸マグネシウムで乾燥する。有機層を蒸発
乾固すると、4″，５−ジ−Ｏ−（フエノキシアセ
チル）−23−ケト−Ｃ−076B2aと同定された12.9
ｇの明るい黄色の固型物が得られる。 上述の方法に従い、4″，５−ジ−Ｏ−（フエノ
キシアセチル）−Ｃ−076B2aの代りに4″−Ｏ−フ
エノキシアセチルＣ−076A2aを使用すると、
4″−Ｏ−フエノキシアセチル−23−ケト−Ｃ−
076A2aが得られる。 実施例 ５ 23−ケト Ｃ−076B2a 200mlのメタノールを０℃に冷却し、導入管を
通してこの中にアンモニアガスを１時間吹き込
み、メタノールを飽和させる。更に260mlのメタ
ノールを加え、次いで50mlのメタノール中の12.9
ｇの4″，５−ジ−Ｏ−（フエノキシアセチル）−23
−ケト−Ｃ−076B2aを添加する。反応混合液を
０℃で45分間、室温で１時間15分撹拌する。この
混合物を蒸発乾固し、残渣にエーテルを加える。
エーテル溶媒を真空中で蒸発させる。高真空中で
乾燥すると、13ｇの黄色の泡状物質が得られ、こ
れを600mlのエーテルに溶かし、50mlの水で４回、
飽和食塩水で１度洗う。このエーテル溶液を硫酸
マグネシウムによつて乾燥し、蒸発乾固すると
11.2ｇの黄色泡状物質が得られる。この泡状物質
を500ｇのシリカゲルカラムの頂部にのせ、１：
１の酢酸エチル／塩化メチレン混合物で溶出す
る。溶出液の最初の600mlを捨て、その後20mlづ
つの画分として分取する。画分１−91を捨てる。
画分92−120を合せる。 上述の操作法に従い、4″，５−ジ−Ｏ−（フエ
ノキシアセチル）Ｃ−076B2aの代りに4″−Ｏ−
フエノキシアセチル23−ケト Ｃ−076A2aを使
用することにより、23−ケト C076A2aが回収
され、真空中で濃縮すると8.0ｇの黄色泡状物質
が得られる。これを約60mlのエーテルに溶かし、
フエノキシアンモニウムアセテートを結晶化させ
る。この溶液を過し、液を濃縮すると6.2ｇ
の黄色泡状物質が得られ、23−ケト C076B2aと
同定された。NMR分析図は図２と同様な図を示
した。 実施例 ６ 4″−Ｏ−（クロロアセチル）Ｃ−076A2a 100mgのＣ−076A2aを1.5mlの乾燥ピリジンに
溶かし、氷浴中で冷却し、温度を０℃に維持しな
がら、300mgの無水クロロ酢酸を添加する。反応
混合物を凍結乾燥し、上述したような分取用薄層
クロマトグラフイー技術（CH₂Cl₂：THF：エタ
ノールが95：５：0.2の展開溶媒でシリカゲル上
で溶出）によつて処理すると64mgの白色粉末が得
られる。この物質は核磁気共鳴及び質量スペクト
ロメトリーによつて4″−Ｏ−（クロロアセチル）
Ｃ−076A2aであることが判明した。 実施例 ７ 4″−Ｏ−クロロアセチル−23−ケト−Ｃ−
076A2a 50mgの4″−Ｏ−クロロアセチルＣ−076A2aを、
0.3mlの塩化メチレンに溶解し、−70℃に於て0.35
mlの塩化メチレン中の9.6μの２塩化オキザリル
及び16μのジメチルスルホキシドから調製した
酸化剤の溶液を、−70℃でこの溶液に加える。反
応混合物を−70から−50℃で30分間撹拌し、次い
で70μのトリエチルアミンを添加する。低温に
て更に５分間経過した後、反応混合物を室温にも
どす。反応混合物を水に添加し、シリカゲルの分
取用薄層クロマトグラフイー（CH₂Cl₂：THF：
エタノールが95：５：0.2の展開溶媒で溶出）に
よつて精製すると、4″−Ｏ−クロロアセチル−23
−ケト−Ｃ−076−A2aが得られ、これはNMR
及び質量スペクトルによつて同定された。 実施例 ８ Ｃ−076B2a4″，５−ジ−Ｏ−アセテート 200mgのＣ−076B2aを３mlの乾燥ピリジンに溶
かし、氷浴中で冷却する。１mlの無水酢酸を加
え、反応混合物を０℃で一晩放置する。反応混合
物をベンゼンと合せ、凍結乾燥し、固型物をシリ
カゲルプレート上の分取用薄層クロマトグラフイ
ー（クロロホルム中の５％テトラヒドロフランで
溶出）によつて精製すると208mgの白色固体が得
られ、これは質量スペクトルによつてＣ−
076B2a4″，５−ジ−Ｏ−アセテートと同定され
た。 実施例 ９ 23−ケト−Ｃ−076−B2a−4″，５−ジ−Ｏ−
アセテート 0.5mlの塩化メチレン中の100mgのＣ−
076B2a4″，５−ジ−Ｏ−アセテート溶液を、−70
℃に於て0.7mlの塩化メチレン中の20μの塩化オ
キザリル及び32μのジメチルホルムアミドから
調製した酸化剤溶液に、−70℃で添加する。この
反応混合液を−70から−50℃に30分間保ち、次い
で0.15mlのトリエチルアミンを加え、−50から−
70℃に５分間保つた後、反応混合物を室温に暖め
る。この混合物を氷水中に注ぎ、塩化メチレンで
抽出し、シリカゲルの分取用薄層クロマトグラフ
イー（CH₂Cl₂：THF：エタノールが95：５：0.2
の展開溶媒で溶出）により更に精製すると23−ケ
ト−Ｃ−076−B2a−4″，５−ジ−Ｏ−アセテー
トが得られ、これはそのNMR及び質量スペクト
ルによつて同定された。 実施例 10 23−ケト−Ｃ−076−B2a−モノ配糖体 500mgの23−ケト−Ｃ−076−B2aを、0.1mlの
濃硫酸及び99mlのイソプロパノールから成る溶液
10mlに溶解する。この反応混合液を室温で一晩撹
拌する。125mlのクロロホルムを加え、10mlの飽
和重曹水で１度、10mlの水で１度洗う。有機層を
硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発乾固す
るとうす黄色の固型物が得られ、これをクロロホ
ルムに溶解し、分取用のシリカゲル薄層クロマト
プレート５枚を使つてベンゼン／酢酸エチル２：
１で２度展開する。動きの遅い主成分は、ベンゼ
ンから凍結乾燥すると白色粉末が得られ、その質
量スペクトロメトリー及び300MHzの核磁気共鳴
スペクトルは、この物質が23−ケト−Ｃ−076−
B2aモノ配糖体であることを示している。NMR
分析図を図３に示す。 実施例 11 23−ケト−Ｃ−076−B2a−アグリコン 10mlのメタノール中の100mgの23−ケト−Ｃ−
076−B2a及び500mgのｐ−トルエン酸１水和物の
溶液を室温に16時間保つ。この時薄層クロマトグ
ラフイーは反応が完了したことを示している。こ
の混合物を75mlのエーテルに加え、重曹水及び水
で洗い、真空中で濃縮する。シリカゲルの分取用
薄層クロマトグラフイー（CH₂Cl₂：THF：エタ
ノールが95：５：0.2の展開溶媒で溶出）によつ
て更に精製すると、23−ケト−Ｃ−076−B2a−
アグリコンが主産物として得られ、少量の23−ケ
ト−Ｃ−076−B2aモノ配糖体が副産物として得
られ、両者共そのNMR及び質量スペクトルによ
つて同定された。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の実施例1Aで調製した4″，
５−ジ−Ｏ−（３級ブチル−ジメチルシリルオキ
シアセチル）Ｃ−076B2aのNMR分析図を示す。
第２図は、本発明の実施例1D，３及び５で調製
した23−ケト−Ｃ−076−B2aのNMR分析図を示
す。第３図は、本発明の実施例10で調製した23−
ケト−Ｃ−076−B2a−モノ配糖体のNMR分析図
を示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ R₁がイソプロピル又は２級ブチルであり、 R₂がメトキシ又はヒドロキシであり、 R₃が水素、α−Ｌ−オレアンドロシル又は4′−
   （α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ−オレアン
   ドロシルである式 の化合物、及び その５位又は13位の置換基に含まれるヒドロキ
   シの少なくとも１つが３級ブチルジメチルシリル
   オキシアセチル、モノ，ジ，トリクロロアセチ
   ル、ヒドロキシアセチル、フエノキシアセチル及
   びアセチルで保護された保護誘導体。 ２ R₁がイソプロピル又は２級ブチルであり、 R₂がメトキシ又はヒドロキシであり、 R₃が4′−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ
   −オレアンドロシルである特許請求の範囲第１項
   記載の化合物。 ３ 23−ケト Ｃ−076 B2aである特許請求の範
   囲第２項記載の化合物。 ４ R₁がイソプロピル又は２級ブチルであり、 R₂がメトキシ又はヒドロキシであり、 R₃が水素、α−Ｌ−オレアンドロシル又は4′−
   （α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ−オレアン
   ドロシルである式 の化合物、及び その５位又は13位の置換基に含まれるヒドロキ
   シの少なくとも１つが３級ブチルジメチルシリル
   オキシアセチル、モノ，ジ，トリクロロアセチ
   ル、ヒドロキシアセチル、フエノキシアセチル及
   びアセチルで保護された保護誘導体を酸化するこ
   とからなる式 （式中R₁，R₂及びR₃は前記式中で定義した通
   りである） の化合物、及び その５位又は13位の置換基に含まれるヒドロキ
   シの少なくとも１つが３級ブチルジメチルシリル
   オキシアセチル、モノ，ジ，トリクロロアセチ
   ル、ヒドロキシアセチル、フエノキシアセチル及
   びアセチルで保護された保護誘導体の製造方法。 ５ 酸化剤がピリジニウムジクロメイト、塩化オ
   キザリル−ジメチルスルホキシド、無水酢酸−ジ
   メチルスルホキシド、クロム酸−ジメチルピラゾ
   ール、無水トリフロロメチル酢酸−ジメチルスル
   ホキシド、Ｎ−クロロサクシイミド−ジメチルス
   ルホキシド、又はクロム酸−酢酸である特許請求
   の範囲第４項記載の方法。 ６ 酸化剤が、塩化オキザリル−ジメチルスルホ
   キシドである特許請求の範囲第５項記載の方法。 ７ R₁がイソプロピル又は２級ブチルであり、 R₂がメトキシ又はヒドロキシであり、 R₃が水素、α−Ｌ−オレアンドロシル又は4′−
   （α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ−オレアン
   ドロシルである式 の化合物、及び その５位又は13位の置換基に含まれるヒドロキ
   シの少なくとも１つが３級ブチルジメチルシリル
   オキシアセチル、モノ，ジ，トリクロロアセチ
   ル、ヒドロキシアセチル、フエノキシアセチル及
   びアセチルで保護された保護誘導体、である23−
   ヒドロキシ化合物を、土壌中に土壌１当り100
   マイクログラムないし10グラム入れ、２日間ない
   し20日間放置することにより、この23−水酸基を
   選択的に酸化することを特徴とする式 （式中R₁，R₂及びR₃は前記式中で定義した通
   りである） の化合物、及び その５位又は13位の置換基に含まれるヒドロキ
   シの少なくとも１つが３級ブチルジメチルシリル
   オキシアセチル、モノ，ジ，トリクロロアセチ
   ル、ヒドロキシアセチル、フエノキシアセチル及
   びアセチルで保護された保護誘導体を製造する方
   法。 ８ 23−ヒドロキシ化合物が、土壌中に土壌１
   当り20マイクログラムから20ミリグラム存在する
   特許請求の範囲第７項記載の方法。 ９ 23−ヒドロキシ化合物が、土壌中に土壌１
   当り100ミリグラムから10グラム存在する特許請
   求の範囲第７項記載の方法。