JPH0257193A - 水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを含む成型用組成物 - Google Patents
水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを含む成型用組成物Info
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- JPH0257193A JPH0257193A JP63208151A JP20815188A JPH0257193A JP H0257193 A JPH0257193 A JP H0257193A JP 63208151 A JP63208151 A JP 63208151A JP 20815188 A JP20815188 A JP 20815188A JP H0257193 A JPH0257193 A JP H0257193A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は、高分子量で且っコラーゲン分子との親和性
のよい水溶性エラスチンの製法及び該製法によって製造
された水溶性エラスチンと可溶化コラーゲンを主材とす
る構造体成型用組成物に関する。
のよい水溶性エラスチンの製法及び該製法によって製造
された水溶性エラスチンと可溶化コラーゲンを主材とす
る構造体成型用組成物に関する。
（従来技術）
分子量３０，０００未満の水溶性エラスチンを製造する
方法として例えば特開昭６０−２５８１０７が公知であ
る。
方法として例えば特開昭６０−２５８１０７が公知であ
る。
然しながら従来の水溶性エラスチンは、その用途が主に
化粧料であって不溶性エラスチンを単に可溶化したに留
まり構造体の成型性については考慮されていない。
化粧料であって不溶性エラスチンを単に可溶化したに留
まり構造体の成型性については考慮されていない。
（目的）
本発明は、構造体の成型に好適な水溶性エラスチンを製
造することを目的とするものであって、８．３００〜６
４０．０００の分子量を有し且つ酸性アミノ酸含有モル
比が大きくコラーゲン分子との親和性に優れた水溶性エ
ラスチンを提供するものである。
造することを目的とするものであって、８．３００〜６
４０．０００の分子量を有し且つ酸性アミノ酸含有モル
比が大きくコラーゲン分子との親和性に優れた水溶性エ
ラスチンを提供するものである。
更に、本発明は前記水溶性エラスチンの特性を利用して
物理的強度及び耐熱性に優れた可食性食品包装資材、人
工皮膚、人工血管、手術縫合糸、結束糸、医薬用外傷被
覆保護膜等に使用しうるコラーゲン−エラスチン複合成
型材料を提供するものである。
物理的強度及び耐熱性に優れた可食性食品包装資材、人
工皮膚、人工血管、手術縫合糸、結束糸、医薬用外傷被
覆保護膜等に使用しうるコラーゲン−エラスチン複合成
型材料を提供するものである。
（構成）
本発明水溶性エラスチンの製法は、エラスチンを含有す
る原料から原料中の球状タンパク質と脂質を抽出除去し
、次いで加圧下で所要時間オートクレーブ処理を繰り返
し施すことによってコラーゲンを除去して不溶性エラス
チンを調製する工程と、不溶性エラスチンを粉砕しｐＨ
４以下の酸溶液中で基質重量に対して１／１ｏ〜ｌ／１
０００量のペプシンを比較的短時間撹拌しながら作用さ
せて可溶化する工程と、ｐＨ１２に至らしめて失活処理
してから分子量５，０００〜７，０００未満の分子種を
除去する工程分子量６４０，０００〜８，３００を有し
がっ酸性アミノ酸含量モル比が不溶性エラスチンの１．
５倍以上有する水溶性エラスチンを製造するものである
。
る原料から原料中の球状タンパク質と脂質を抽出除去し
、次いで加圧下で所要時間オートクレーブ処理を繰り返
し施すことによってコラーゲンを除去して不溶性エラス
チンを調製する工程と、不溶性エラスチンを粉砕しｐＨ
４以下の酸溶液中で基質重量に対して１／１ｏ〜ｌ／１
０００量のペプシンを比較的短時間撹拌しながら作用さ
せて可溶化する工程と、ｐＨ１２に至らしめて失活処理
してから分子量５，０００〜７，０００未満の分子種を
除去する工程分子量６４０，０００〜８，３００を有し
がっ酸性アミノ酸含量モル比が不溶性エラスチンの１．
５倍以上有する水溶性エラスチンを製造するものである
。
前記可溶化工程におけるペプシン添加量は、３ 、２０
Ｃ１〜３ 、８００ｕｎ ｉ ｔ／ｍｇのペプシンの場
合、不溶性エラスチン重量（ｇ）に対して１／１０〜１
／１０００量であり処理条件は温度１０〜４０℃で５〜
１０時間が好ましい。
Ｃ１〜３ 、８００ｕｎ ｉ ｔ／ｍｇのペプシンの場
合、不溶性エラスチン重量（ｇ）に対して１／１０〜１
／１０００量であり処理条件は温度１０〜４０℃で５〜
１０時間が好ましい。
なお、ペプシン失活処理後に行われる、分子量５．００
０〜７，０００未満の分子種の除去手段としては水に対
する透析、限外濾過及びゲル濾過等である。
０〜７，０００未満の分子種の除去手段としては水に対
する透析、限外濾過及びゲル濾過等である。
本発明エラスチン−コラーゲン複合組成物を得るに当っ
て加えられる可溶化コラーゲンの量は前記水溶性エラス
チン１量に対して、１〜２０量であって、両者は低温下
少なくとも４℃以下で混合される。
て加えられる可溶化コラーゲンの量は前記水溶性エラス
チン１量に対して、１〜２０量であって、両者は低温下
少なくとも４℃以下で混合される。
可溶化コラーゲンには用途に応じて不溶性コラーゲン分
散体が約１：０．５〜２の範囲で添加することができる
。
散体が約１：０．５〜２の範囲で添加することができる
。
この場合においては、混合後の可溶化コラーゲン濃度が
０．２〜０．３％となるように両者を冷時混合するのが
好ましい。
０．２〜０．３％となるように両者を冷時混合するのが
好ましい。
更に上記の各組成物には少量のプロテオグリカン、グリ
コサミノグリカンまたはこれらと類似の官能基を含む多
糖物質を含有させることもできる。
コサミノグリカンまたはこれらと類似の官能基を含む多
糖物質を含有させることもできる。
（実施例１．水溶性エラスチンの製造例）新鮮な中頃靭
帯を蒸留水で水洗後、チョッパーで細切する。５倍量の
１０％塩化ナトリウム溶液を用いて４℃で振とう抽出し
て球状タンパク質を除去し、次いで３〜４倍量の冷アセ
トンで３回、冷エチルエーテルで２回更に冷アセトンで
２回抽出して脂質を除去する。十分に蒸留水で水洗して
アセトンを除き、２ ｋｇ／ｃｎｔで１時間のオートク
レーブ処理を７回繰返してコラーゲンを除去し凍結乾燥
して不溶性エラスチンを製造する。
帯を蒸留水で水洗後、チョッパーで細切する。５倍量の
１０％塩化ナトリウム溶液を用いて４℃で振とう抽出し
て球状タンパク質を除去し、次いで３〜４倍量の冷アセ
トンで３回、冷エチルエーテルで２回更に冷アセトンで
２回抽出して脂質を除去する。十分に蒸留水で水洗して
アセトンを除き、２ ｋｇ／ｃｎｔで１時間のオートク
レーブ処理を７回繰返してコラーゲンを除去し凍結乾燥
して不溶性エラスチンを製造する。
不溶性エラスチンをドライアイス−アセトンで冷却しな
がらウィレーミルで粉砕する。これを４０倍量の０．５
Ｍ酢酸溶液に分散し、エラスチン重量の１／１００量の
ペプシン（シグマ３，２００〜３．８００ｕｎｉｔ／ｍ
ｇ）を加えて１０〜４０℃で５〜１０時間撹拌しながら
可溶化処理を行う。
がらウィレーミルで粉砕する。これを４０倍量の０．５
Ｍ酢酸溶液に分散し、エラスチン重量の１／１００量の
ペプシン（シグマ３，２００〜３．８００ｕｎｉｔ／ｍ
ｇ）を加えて１０〜４０℃で５〜１０時間撹拌しながら
可溶化処理を行う。
本発明における可溶化処理時間は製品中の酸性アミノ酸
含有量に影響するものと考えられ、通常の条件では１０
時間程度が好ましい。
含有量に影響するものと考えられ、通常の条件では１０
時間程度が好ましい。
処理時間が長いとアミノ酸含有モル比が小さくなりコラ
ーゲンの線維形成性が著しく低下するので望ましくない
。（第２図参照） ペプシンの失活処理は、ＩＯＮ水酸化ナトリウム溶液を
用いてｐｉ（ｔ ２に調節することによって行う。
ーゲンの線維形成性が著しく低下するので望ましくない
。（第２図参照） ペプシンの失活処理は、ＩＯＮ水酸化ナトリウム溶液を
用いてｐｉ（ｔ ２に調節することによって行う。
次に１２，０００ｒｐｍで２０分間４℃で遠心分離し、
上澄液を集め、６Ｎ塩酸で中和した後蒸留水に対して透
析して脱塩と低分子量成分の除去を行う。
上澄液を集め、６Ｎ塩酸で中和した後蒸留水に対して透
析して脱塩と低分子量成分の除去を行う。
これを凍結乾燥して得られた水溶性エラスチンは、下記
の化学組成と分子量を有する。
の化学組成と分子量を有する。
（以下余白）
表１
＊デスモシン類を含む。
（但し、全糖含量、０．６〜０．８％）また分子量は、
第１図に示すように、６４０，０００〜８．３００を有
する。
第１図に示すように、６４０，０００〜８．３００を有
する。
第１図の測定条件は、高速液体クロマトグラフ、東ソー
ＣＣＰＭ；カラム、ＴＳＫｇｅ １Ｇ ３０００ＳＷ
（７，８Ｘ ３００ ｍｍ ） ：溶離液、０．３ＭＮ
ａＣｌを含む１／１５Ｍリン塩酸緩衝液、ｐＨ７，０；
流速、１．Ｑ １１１Ｍ７ ｍｉｎ ；検出、２８０ｎ
ｍの吸光度である。
ＣＣＰＭ；カラム、ＴＳＫｇｅ １Ｇ ３０００ＳＷ
（７，８Ｘ ３００ ｍｍ ） ：溶離液、０．３ＭＮ
ａＣｌを含む１／１５Ｍリン塩酸緩衝液、ｐＨ７，０；
流速、１．Ｑ １１１Ｍ７ ｍｉｎ ；検出、２８０ｎ
ｍの吸光度である。
上記方法によって得られた水溶性エラスチンに対し、そ
の１０倍量のコラーゲン溶液を混合して線維形成性能を
テストした結果は第２図のようであって水溶性エラスチ
ンがコラーゲン分子の会合速度および線維形成速度を著
しく促進する機能を有することが認められる。
の１０倍量のコラーゲン溶液を混合して線維形成性能を
テストした結果は第２図のようであって水溶性エラスチ
ンがコラーゲン分子の会合速度および線維形成速度を著
しく促進する機能を有することが認められる。
第２図はコラーゲン分子の会合及び線維形成の状況を濁
度の変化として、３１０ｎｍの吸光度の変化に代替して
追跡したものであってその測定条件はコラーゲン、ペプ
シン可溶化コラーゲン；コラーゲン濃度、０．６７■／
−；水溶性エラスチン濃度、０．０７６■／−；緩衝液
、１／１５Ｍリン酸緩衝液、ＰＨ８，０，温度、３７℃
であった。
度の変化として、３１０ｎｍの吸光度の変化に代替して
追跡したものであってその測定条件はコラーゲン、ペプ
シン可溶化コラーゲン；コラーゲン濃度、０．６７■／
−；水溶性エラスチン濃度、０．０７６■／−；緩衝液
、１／１５Ｍリン酸緩衝液、ＰＨ８，０，温度、３７℃
であった。
本発明水溶性エラスチン中の酸性アミノ酸含有量は可溶
化処理時間と関係があり、１０時間以上可溶化時間を要
した水溶性エラスチンの酸性アミノ以下となって線維形
成能を急減するが、５時間のものでは２，０であって、
可溶化コラーゲンに対する線維形成促進作用も大きいこ
とが確認された。
化処理時間と関係があり、１０時間以上可溶化時間を要
した水溶性エラスチンの酸性アミノ以下となって線維形
成能を急減するが、５時間のものでは２，０であって、
可溶化コラーゲンに対する線維形成促進作用も大きいこ
とが確認された。
（実施例２〉
皮を出発原料として、その中間層をミンチし、１０％塩
化ナトリウム溶液で球状タンパク質を抽出除去し、アセ
トンとエーテルで脱脂する。よく水洗した後中性塩可溶
性コラーゲンをＰＨ８，０，１／１５Ｍリン酸緩衝液で
、次いで酸可溶性コラーゲンを０．５Ｍ塩化ナトリウム
を含む０．５Ｍ酢酸で抽出除去する。可溶性コラーゲン
の抽出を５回繰返した後の残さを中和、水洗して精製不
溶性コラーゲンを得る。０．０５Ｍ酢酸を水酸化ナトリ
ウム溶液でＰＨ７，０に調整した液中に不溶性コラーゲ
ンを加え、冷時ポリトロン等で機械的に破砕して不溶性
コラーゲン分散体（Ａ）を得た。
化ナトリウム溶液で球状タンパク質を抽出除去し、アセ
トンとエーテルで脱脂する。よく水洗した後中性塩可溶
性コラーゲンをＰＨ８，０，１／１５Ｍリン酸緩衝液で
、次いで酸可溶性コラーゲンを０．５Ｍ塩化ナトリウム
を含む０．５Ｍ酢酸で抽出除去する。可溶性コラーゲン
の抽出を５回繰返した後の残さを中和、水洗して精製不
溶性コラーゲンを得る。０．０５Ｍ酢酸を水酸化ナトリ
ウム溶液でＰＨ７，０に調整した液中に不溶性コラーゲ
ンを加え、冷時ポリトロン等で機械的に破砕して不溶性
コラーゲン分散体（Ａ）を得た。
この不溶性コラーゲン分散体をコラーゲンの１／１００
量のペプシン（シグマ３．２００〜３，８００ｕｎｉｔ
／ｍｇ）を加えた０、５Ｍ酢酸中で２０’Ｃで１８時間
処理し、塩化ナトリウムによる塩析と溶解を２回繰り返
した後帆０５Ｍ酢酸に溶解し、ＮａＣ１溶液でｐＨ７，
０に調整してコラーゲン濃度０．５％の可溶化コラーゲ
ン（Ｂ）を得た。
量のペプシン（シグマ３．２００〜３，８００ｕｎｉｔ
／ｍｇ）を加えた０、５Ｍ酢酸中で２０’Ｃで１８時間
処理し、塩化ナトリウムによる塩析と溶解を２回繰り返
した後帆０５Ｍ酢酸に溶解し、ＮａＣ１溶液でｐＨ７，
０に調整してコラーゲン濃度０．５％の可溶化コラーゲ
ン（Ｂ）を得た。
不溶性コラーゲン分散体（Ａ）と可溶化コラーゲン（Ｂ
）をコラーゲンとして等量混合し混合後の可溶化コラー
ゲン濃度が、０．２５％となるように両者を冷時混合し
た。次にコラーゲン総重量に対して約１７９量の水溶性
エラスチンを０．１％水溶液として加え、ただちに冷却
アクリル板プレートに撒き、約３３℃に調整することに
よって線維形成を行わしめる。１５〜２４時間靜置しエ
装ジングして皮膜を形成した。その後４０％エチルアル
コール溶液中で脱塩と脱水を行い、次いで７０％エチル
アルコール溶液、９９．５％エチルアルコール中に移し
脱水する。これを３０℃で乾燥することによって、コラ
ーゲンとエラスチンを基本とする膜状構造体を製造した
。
）をコラーゲンとして等量混合し混合後の可溶化コラー
ゲン濃度が、０．２５％となるように両者を冷時混合し
た。次にコラーゲン総重量に対して約１７９量の水溶性
エラスチンを０．１％水溶液として加え、ただちに冷却
アクリル板プレートに撒き、約３３℃に調整することに
よって線維形成を行わしめる。１５〜２４時間靜置しエ
装ジングして皮膜を形成した。その後４０％エチルアル
コール溶液中で脱塩と脱水を行い、次いで７０％エチル
アルコール溶液、９９．５％エチルアルコール中に移し
脱水する。これを３０℃で乾燥することによって、コラ
ーゲンとエラスチンを基本とする膜状構造体を製造した
。
この膜状構造体を試料片として破断強度及び破断時の伸
びを測定した。
びを測定した。
試料片の数、５片。
長さ５關、中２鰭、厚さ０．０５〜０．０８龍各試料片
を４℃の純水中に１２時間浸漬し、厚さを計測した後、
熱応力歪測定装置（セイコー、５ＳＣ−５０００、ＴＭ
Ａ／Ｓ Ｓ−１００）を用いて以下の条件で測定した。
を４℃の純水中に１２時間浸漬し、厚さを計測した後、
熱応力歪測定装置（セイコー、５ＳＣ−５０００、ＴＭ
Ａ／Ｓ Ｓ−１００）を用いて以下の条件で測定した。
荷重速度１０ｇ／ｍｉｎ ；温度、室温：雰囲気、水中
：データサンプリング、０，１就。
：データサンプリング、０，１就。
破断強度、２３１ｇ／−未満。
破断時の伸び、２３％未満。
本発明膜状構造体の物性は製造条件によって異なること
勿論であるが、上記性能からも前記各応用製品の素材と
して好適なものである。
勿論であるが、上記性能からも前記各応用製品の素材と
して好適なものである。
（効果）
以上に述べた如く本発明水溶性エラスチンは平均分子量
が大きく且つコラーゲンに対する反応性のよい酸性アミ
ノ酸を多量に含有していることから可溶化コラーゲンの
単独又は不溶性コラーゲン分散体を含む可溶化コラーゲ
ンと短時間のうちに反応して線維を形成するので各種の
構造体を容易に成型することができ、成型品は物理的及
び熱的安定性に優れた性質を具備している。
が大きく且つコラーゲンに対する反応性のよい酸性アミ
ノ酸を多量に含有していることから可溶化コラーゲンの
単独又は不溶性コラーゲン分散体を含む可溶化コラーゲ
ンと短時間のうちに反応して線維を形成するので各種の
構造体を容易に成型することができ、成型品は物理的及
び熱的安定性に優れた性質を具備している。
更に本発明は、多糖物質等をコラーゲン又はエラスチン
に固定化させることができるので用途に応じた種々の成
型用組成物を得ることが可能である。
に固定化させることができるので用途に応じた種々の成
型用組成物を得ることが可能である。
第１図は、本発明水溶性エラスチンの分子量パターンを
示すグラフ、第２図は本発明組成物の線維形成能を示す
グラフである。 特許出願人 和 １） 敬 三 ｕ 高橋 幸資 代 理 人 弁理士 中村 宏 夏某強 夏￥遺 手 続 補 正 書（自発） 昭和６３年 ９月１９日 昭和６３年 特許願 第２０８１５１号２、発明の名
称 水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを
含む成型用組成物３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住 所 多摩市鶴牧５−３７−３−２氏名 和１）
敬三 ４、代理人 ５、補正命令の日付 自発 ＸＩ￥殆
示すグラフ、第２図は本発明組成物の線維形成能を示す
グラフである。 特許出願人 和 １） 敬 三 ｕ 高橋 幸資 代 理 人 弁理士 中村 宏 夏某強 夏￥遺 手 続 補 正 書（自発） 昭和６３年 ９月１９日 昭和６３年 特許願 第２０８１５１号２、発明の名
称 水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを
含む成型用組成物３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住 所 多摩市鶴牧５−３７−３−２氏名 和１）
敬三 ４、代理人 ５、補正命令の日付 自発 ＸＩ￥殆
Claims (2)
- （１）エラスチンを含有する原料から得た純不溶性エラ
スチンをｐＨ４以下で且つ１０〜４０℃の酸性溶液中で
撹拌しながらペプシンを１５時間を超えない範囲で作用
させて可溶化する工程と前記ペプシンを失活させて、分
子量５，０００〜７，０００未満の低分子種を除去する
工程とからなり、分子量６４０，０００〜８，３００を
有し且つ酸性アミノ酸含有モル比が不溶性エラスチンの
１．５倍以上である水溶性エラスチンを製造することを
特徴とする水溶性エラスチンの製法。 - （２）第１項記載の水溶性エラスチンに対して可溶化コ
ラーゲンを含むコラーゲン物質を１：１〜２０の範囲で
冷時混合してなるコラーゲンとエラスチンを含む成型用
組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63208151A JPH0630616B2 (ja) | 1988-08-24 | 1988-08-24 | 水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを含む成型用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63208151A JPH0630616B2 (ja) | 1988-08-24 | 1988-08-24 | 水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを含む成型用組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0257193A true JPH0257193A (ja) | 1990-02-26 |
| JPH0630616B2 JPH0630616B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=16551485
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63208151A Expired - Lifetime JPH0630616B2 (ja) | 1988-08-24 | 1988-08-24 | 水溶性エラスチンの製法及びコラーゲンとエラスチンを含む成型用組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0630616B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0320362A (ja) * | 1989-06-15 | 1991-01-29 | Nitta Gelatin Inc | コラーゲン組成物、コラーゲン組成物成形品、および、コラーゲン組成物被覆製品 |
| JP2007045722A (ja) * | 2005-08-08 | 2007-02-22 | Kyushu Institute Of Technology | 水溶性エラスチンとそれを含む食品及び医薬 |
| CN109957004A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-07-02 | E&C健康关爱株式会社 | 水溶性弹性蛋白及其制造方法 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4078431B2 (ja) | 2004-10-29 | 2008-04-23 | 国立大学法人九州工業大学 | 水溶性エラスチンとその製造方法及びそれを含む食品と医薬 |
| WO2011102363A1 (ja) | 2010-02-19 | 2011-08-25 | 国立大学法人九州工業大学 | 化学修飾水溶性エラスチン、化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンとの混合ゲル及びそれらの製造方法 |
-
1988
- 1988-08-24 JP JP63208151A patent/JPH0630616B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0320362A (ja) * | 1989-06-15 | 1991-01-29 | Nitta Gelatin Inc | コラーゲン組成物、コラーゲン組成物成形品、および、コラーゲン組成物被覆製品 |
| JP2007045722A (ja) * | 2005-08-08 | 2007-02-22 | Kyushu Institute Of Technology | 水溶性エラスチンとそれを含む食品及び医薬 |
| CN109957004A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-07-02 | E&C健康关爱株式会社 | 水溶性弹性蛋白及其制造方法 |
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| JPH0630616B2 (ja) | 1994-04-27 |
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