JPH0274261A - 支持体表面を抗血栓形成性となす方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は生物医療用具、より詳細には支持体を抗血栓形
成性（ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｉｃ　ａｇｅｎｔ
）で被覆する方法に関する。

（従来の技術） 体液に対して生物学的および化学的に安定な材料を見出
すために長年にわたって広範な研究が行われてきた。こ
の領域の研究は血液と接触する可能性のある各種物体お
よび物品、たとえば人工器官、血管グラフト、プローブ
、カニユーレ、カテーテルなどの開発に伴って次第に重
要になってきている。

合成プラスチックがこの種の物品に好ましい材料として
目立ってきた。しかしこれらの材料は血栓形成性である
という重大な欠点をもつ。血栓形成性は抗凝血薬、たと
えばヘパリンの使用により簡便に対処されている。処理
しない場合は血栓形成性である高分子表面にヘパリンを
付着させるための各種の方法が示されている。

ソロモンらの米国特許第４，５２１，５６４号明細書に
は高分子物品をアミンに冨む面で被覆し、そのアミノ基
にアルデヒドで活性化したヘパリンを共有結合させるこ
とが示されている。ライニンガーらの米国特許第３，６
１７，３４４号明細書にはポリマー表面を化学的に改質
してクロルメチル基を含有させる方法が示されている。

このクロルメチル基のアミノ化によってハロゲン化第四
アンモニウムが得られる。このハライドとヘパリンナト
リウムの反応によってヘパリンが表面にイオン結合する
。

関連する方法がエリクソンらの米国特許第３，６３４．
１２３号明細書に記載されている。プラスチック表面を
備えた物品をカチオン界面活性剤、たとえば長鎖アルキ
ルアミンまたはアルキレンジアミンヒドロハライドの水
溶液中で、その軟化点付近またはそれを上回る温度に加
熱する。溶液はあらかじめｐＨ７，０以下に酸性化され
る。次いでこのプラスチック物品をヘパリンの水溶液で
処理すると、約０．１１．ｔｌ、のヘパリンを保有する
物品が得られる。

さらに改良されたものがエリクソンらの米国特許第３．
８１０，７８１号明細書に記載されており、その場合ヘ
パリン化されたプラスチック表面がグルタルアルデヒド
によって安定化されている。

ウィリアムズらの米国特許第４，３４９，４６７および
４．６１３．５１７号明細書には界面活性剤−ヘパリン
法の変法が記載されている。前者の明細書には、濃厚な
ヘパリン溶液を用いるほどより多量のヘパリンがプラス
チック表面に付着することが示されている。後者の明細
書には高分子表面をプラズマで処理し、プラズマ処理し
た表面を第四アンモニウム塩で処理し、この塩をヘパリ
ンナトリウムと反応させ、そしてヘパリンをグルタルア
ルデヒドで架橋させることが示されている。

（発明が解決しようとする課題） 医療用具を製造するための抗血栓形成性表面を目的とし
て著しい進歩前なされたが・いっそうの改良が求められ
ている。特に、血液と長期間接触する器具に用いるため
の本質的に非血栓形成性である表面をもつ材料が求めら
れている。本発明の目的ハコの要望を満たすことである
。

（課題を解決するための手段） 支持体をヘパリン化する方法は、溶剤中の界面活性剤（
上清）溶液のρＩＩを７．５より高く調整し、支持体を
ｐｌ（１！整した溶液に、ＳＡＡが支持体に塗布される
のに十分な期間浸漬し、塗被された支持体を抗血栓形成
薬の溶液に浸漬することを含む。

好ましいＳＡＡはアンモニウム塩、たとえば第、第二も
しくは第三アミンの塩、または第四塩である。好ましい
アンモニウム塩は水性媒質に可溶性であり、炭素原子約
８〜２０個のアルキル基を少なくとも１個含む、きわめ
て好ましい塩は、炭素原子約１〜４個のアルキル基少な
くとも１個をさらに含む第三アミンの塩である。特に好
ましい塩はドデシルメチルアンモニウムクロリドであり
、以下これをＤＭＡＣと呼ぶ。好ましい抗血栓形成薬は
スルホン化された多糖類、たとえば硫酸デキストラン、
きわめて好ましいヘパリンである。

浸漬液のｐｏはアルカリ性化剤、たとえば溶剤に可溶性
のアミン溶液を添加することにより、好ましくはアルカ
リ金属水酸化物を添加することにより、目的のｐＨに調
整することができる。

任意のヘパリン安定化工程はヘパリン化した支持体をジ
アルデヒド、たとえばグルタルアルデヒドの溶液で処理
することにより行うことができる。

ＳＡＡによる支持体の浸漬をアルカリ性ｐＨで行う本発
明によれば、支持体に結合しうるヘパリンの量および永
続性が、中性または酸性のｐＨで行われる先行技術のヘ
パリン化法と比較して実質的に高まる。さらに血小板沈
着により測定した本発明方法により結合したヘパリンの
活性も、先行技術による方法と比較して実質的に改良さ
れている。

本発明方法はより低い温度でより短時間に行われるとい
う点で先行技術より操作的に簡単である。

本発明によればヘパリンを結合させるのに低濃度のアン
モニウム塩を必要とするにすぎず、従って本発明方法に
よりヘパリン化された医療用具の原価が低下する。

図面について簡単に説明する。

Ｍ１図はヘパリン化されていない支持体、ならびに本発
明方法により、および先行技術方法によりヘパリン化さ
れた支持体上への血小板の沈着を示す。

第２図はノーマルセーラインで洗浄したのちの第１図の
支持体上への血小板の沈着を示す。

本発明は多種多様な形態により満たされるが、ここには
本発明の好ましい形態を詳述する。ただしこの記載は本
発明の原理の一例であって、本発明をここに図示および
記載した形態に限定するためのものではないと考えるべ
きである。本発明の範囲は特許請求の範囲およびその均
等物により判断されるであろう。

本発明のヘパリン化法は、血液との接触が意図される物
品に使用されるいかなる支持体上でも行うことができる
。適切な支持体は、ポリマーの被膜を備えた、または備
えていない金属、ガラス、セラミックなどである。以下
においては好ましい支持体、すなわちポリマー系支持体
に関して記載する。

ポリマー系支持体は天然または合成、硬質または軟質、
および多孔質または非多孔質のいずれであってもよい。

これをまずいずれかの目的とする形状、寸法または構造
に成形する。その代表例は弁、ピン、容器、スリーブ、
コネクター、外科用チューブ、補てつ具、カテーテルな
どである。あるいは、ポリマー樹脂をまず本発明方法で
処理したのち、目的の形状に加工することもできる。

普通は血液と接触させて用いる物品を製造するために一
般に用いられるポリマー樹脂はいずれも、本発明の支持
体として使用できる。たとえばカテーテル、人工血管、
弁などの補てつ具はしばしば下記のものから製造される
。ポリオレフィン、ポリアクリル、ポリ塩化ビニル、ポ
リアミド、ポリウレタン、ポリウレタンウレア、シリコ
ーン−ウレタンコポリマー、ポリビニルピロリドン、ポ
リビニルアルコール、酢酸セルロース、ポリメチルおよ
びそのヒドロゲル。好ましい支持体はポリウレタン、き
わめて好ましくはほぼショアー４５４からショアー７５
０までの硬度をもつポリウレタンである。

アンモニウム塩型の一般式■の第一、第二、もしくは第
三アミン、アルキレンジアミン、または第四アンモニウ
ム塩、あるいはそれらの混合物を支持体の表面と接触さ
せる。

式ＩにおいてＲ３は炭素原子１〜１８個の直鎖または分
枝鎖アルキル基、または炭素原子約７〜１８個のアルア
ルキル基であり、Ｒｔ、　ＲｉおよびＲ１は互いに無関
係に水素原子またはＲ１であり、Ｘは負のｍ個イオン、
たとえばハライドイオンである。たとえばＲ１がＣＩＩ
ＨＩ？であり、Ｒ２がＣｈＨｓＣＨｚであり、Ｒ３およ
びＲ１がメチルである市販の第四塩ヘンザルコニウムク
ロリドを使用しろる。好ましい塩はＲ１およびＲ４が水
素原子である第２アミンである。きわめて好ましい塩は
Ｒｔがドデシルであり、１１．がメチルであり、Ｒ５お
よびＲ４が水素原子であるＤＭＡＣである。

ポリマー系支持体の表面は下記のようにｐＨ調整された
塩分散液に支持体を浸漬することによりＳＡＡで被覆す
ることができる。分散液という語はここでは懸濁液およ
び溶液を含めた意味をもつ。

立証されてはいないが、浸漬処理に際してＳＡＡは化学
吸着により支持体の分子構造内へ透過し、これにより塩
の長鎖アルキル部分の１または２以上がポリマー系支持
体に効果的に結合すると考えられる。

浸漬は一般に、分散した上記の塩を含有する溶剤または
溶剤混合物中に、調整されたｐＨにおいて支持体を浸漬
することにより行われる。浸漬媒質の調整されたｐＨに
おいてＳＡＡが少なくとも部分的に溶解する溶剤はいず
れも使用できる。適切な溶剤は一般に極性溶剤、たとえ
ば水、アルコール類、または水性アルコール類である。

場合により、支持体と界面活性剤のより良好な接触を維
持するために、浸漬媒質に調整されたｐＨで乳化剤を添
加することが有利である。

浸漬操作に際し溶剤中の化合物ＩおよびＨの濃度は決定
的ではないが、ｏ、ｏｉ〜２０重量％、好ましくは０．
１〜１５重量％、きわめて好ましくは０．５〜５．０重
量％に維持することが有利である。（特に指示しない限
り、ここで用いる％はすべで重量による。）浸漬は約Ｏ
′Ｃ１好ましくは周囲温度から、樹脂系支持体の軟化点
をわずかに上回る温度までの温度で行うことができる。

“軟化点°゛とは支持体分子の可動性が付加されるため
樹脂系支持体の表面が可撓性になる温度を意味する。浸
漬時間も決定的ではなく、約１分から２４時間まで、好
ましくは約１０分から２時間までである。

浸漬工程が終了した時点で支持体を浸漬媒質から取出し
、適切な溶剤、たとえば蒸留水または食塩液で簡単にリ
ンスすることによって過剰のＳＡＡを除去することがで
きる。

固着したＳＡＡを保有するポリマー系支持体を次いで抗
血栓形成薬で処理することができる。好ましい抗血栓形
成薬はスルホン化された多ｗ類、たとえば硫酸デキスト
ラン、または好ましくはヘパリンである。ヘパリン化は
表面に固着したＳＡＡを保有する支持体を溶剤、好まし
くは水に浸漬することにより行うのが好都合である。好
ましいヘパリン塩はアルカリ金属塩、たとえばヘパリン
ナトリウムである。浸漬が有利に行われる温度はほぼ室
温から約８０″Ｃまで、ただし支持体の軟化点以下であ
る。浸漬時間は採用する温度に依存し、一般に８時間以
下である。ヘパリンナトリウム溶液に浸漬するために好
ましい範囲は３０〜５０’Ｃおよび１０分ないし２時間
である。浸漬液中のヘパリンの濃度は決定的ではなく、
約１〜１５％、好ましくは約５〜１０％である。

ヘパリン化工程に続いて支持体をヘパリン溶液から取出
し、蒸留水で十分にリンスする。

場合によりジアルデヒドで処理してヘパリンの官能基を
架橋することによって、ヘパリンが血液の存在下で支持
体から脱着するのに対して安定化することが有利である
。この異なるヘパリン単位における官能基の架橋はヘパ
リン化した表面を０．１〜５．０％の濃度範囲のジアル
デヒド水溶液で処理した場合に行われる。ヘパリン化し
た表面とジアルデヒド溶液の接触を約１０分間から６時
間の期間、周囲温度から約８０’Ｃにおいて維持するこ
とがきわめて有利である。好ましい安定化条件は、約０
，５％の濃度のグルタルアルデヒドで約１時間、はぼ周
囲温度ないし４５℃において処理することである。

この安定化したヘパリン化表面を浴から取出し、蒸留水
で十分に洗浄し、乾燥させたのち、血液と１妾触させる
。

本発明に従ってＳＡＡを支持体に固着させる際に浸漬媒
質をアルカリ性ｐＨに調整すると、意外にもヘパリン結
合の量および永続性が大幅に高まることが認められた。

本発明および先行技術における塩類水溶液は塩類の化学
組成、浸漬溶剤中におけるその濃度、およびｐＨ測定温
度に応じて６．７〜７．５のｐｏをもつ。本発明の浸漬
工程をｐＨ１１整せずに行うと、後記の表に示すように
支持体表面に固着するヘパリンの世は少ない。アルカリ
性化剤の添加によってｐｏを約７．５〜１４．０に調整
すると、はるかに多量のヘパリンを支持体に固着させる
ことができる。適切なアルカリ性化剤は可溶性アミン、
たとえばトリエチルアミン、水酸化アンモニウム、また
は好ましくはアルカリ金属酸化物である。

アルカリ性ｐＨで浸漬を行うことの効果は、先行技術の
酸性および中性ｐＨでの実験プロトコールから任意に選
ばれたちの４種において得られた結果を、本発明のアル
カリ性ｐＨの場合と比較することにより判定できる。プ
ロトコールへの場合は浸漬が４５°Ｃで６０分間行われ
、プロトコールＢの場合は２５°Ｃで３０分間行われ、
いずれもグルタルアルデヒドによる安定化を伴う。プロ
トコールＡ′およびＢ′は、グルタルアルデヒドによる
安定化を含まない点以外はＡおよびＢと同じである。

下記の第１および０表はショアー硬さ５０Ｄの有標ボリ
ウレクン（ＰＩ−Ｐ）およびショアー硬さ８０Ａの市販
ボリウレクン（ＰＩ−Ｃ、テコフレックス（Ｔｅｃｏｆ
ｌｅχ、商標））に結合したペハリンのｉ　（ｐｇ／ｃ
ｍ”）を示し、それぞれグルタルアルデヒドによる安定
化を伴うもの、および伴わないものである。初期の結合
ヘパリン量、ならびにｌ、　２．３および５日間の動的
浸出後に残留する贋を本発明方法による結合の永続性の
尺度として示す。

第−土一表 第−ニー表 これらの表から容易に認められるように、支持体、浸漬
に際しての時間、温度、または好ましいＤＭＡＣの濃度
に関係なく、支持体に結合したヘパリンの量および永続
性は、先行技術のｐＨ７．５に対しｐｌｌｌｏ、２では
１１００％に及ぶ増加が得られた。さらに、いずれの場
合も５日間では結合ヘパリンの大部分が支持体から洗い
去られるが、浸漬を７．５ではなく約１０．２のｐＨで
行った場合、例２に従った５日間の動的浸出後にはるか
に多量のヘパリンが支持体上に残留することが分かる。

本発明方法により結合したヘパリンのグルタルアルデヒ
ドによる任意の安定化効果は、第１表と第■表、すなわ
ちグルタルアルデヒド処理を伴う場合および伴わない場
合の支持体上のヘパリン量を比較することにより判定で
きる。一般に、グルタルアルデヒドを用いた場合、長期
間の浸出後に硬度の比較的高いｐｕ−ｐ支持体上に約０
−１００％のいずれか多量のヘパリンが残留することが
分かる。

しかし意外にも、より軟質のテコフレックス（商標）型
支持体に結合したヘパリンの永続性はグルタルアルデヒ
ド処理によって改良されなかった。

本発明方法により結合したヘパリンの活性はレラー（Ｌ
ｅｌａｈ）　　らＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｍｅｄ
ｉｃａｌ　ＭａｔｅｒｉａｌｓＲｅｓｅａｒｃｈ　１８
．４７５　（１９８４）に記載されたエクス・ビボ（ｅ
ｘ　ｖｉｖｏ）短絡モデルにより判定できる。この方法
では表面への血小板の沈着を時間の関数として測定する
。第１図は対照（非ヘパリン化）３ｍｓＰＵ−Ｐチュー
ブ上、および例４によりヘパリン化した同一チューブ上
の血小板の沈着を比較する。

第２図は食塩液ノーマルセーラインで洗浄したのちの同
一支持体上における血小板の沈着を比較する。５．１５
．３０および６０分間の試験それぞれにおいて、食塩液
洗浄を伴う場合および伴わない場合につき、本発明によ
りヘパリン化した支持体は対照支持体、または先行技術
によりｐ）１７．５でヘパリン化した支持体より、沈着
した血小板は実質的に少ないことが分かる。

本発明方法の他の形態においては、支持体を浸漬工程前
にウィリアムズらの方法によってプラズマで処理するこ
とができる。この任意のプラズマ処理は本発明方法にと
って必須ではないが、硬質、疎水性表面、たとえばポリ
プロピレンおよびポリテトラフルオルエチレンを本発明
方法による浸漬およびヘパリン化のために調製する際に
有利となる場合がある。

以下の例は本発明をさらに説明するために提示されたも
のであり、本発明の限定と考えるべきでない。

（実施例） 以下の例で用いた溶液は下記により調製された。

１、且Ｘ旦又へ旦皿撒 蒸留水８００ｄを４５°Ｃに予熱したのち、これにＤＭ
ＡＣｌ４５ｇを完全に溶解した。最終ＤＭＡＣ溶液のｐ
ＨをＩＮ塩酸または５Ｎ水酸化ナトリウム溶液のいずれ
かにより目的のｐＨに調整した。次いで溶液を蒸留水で
最終容量９６７　ｄに調整した。

２、　５．０　２．５および０．９４　　Ｄ　Ｍ　Ａ　
にれらの溶液は１５％ＤＭＡＣ原液を適宜希釈すること
により調製された。溶液のｌｌ）Ｉを希釈後に再度検査
し、必要に応じ目的の値に再調整した。

３．９０３Ｈ−ヘパリン゛′ ヘパリンナトリウム３３．７５ｇおよびトリチウム標識
ヘパリン５００μＣ４を室温で水３７５−に、十分に攪
拌しながら溶解した。ヘパリンの最終濃度は９％であり
、トリチウム活性は１．３３μＣ４／ｍであった。

４、　０．５　　グル　ルアルー′ヒ この溶液は５０％グルタルアルデヒド溶液１ｄを蒸留水
９９ｍで希釈することにより、または２５％グルタルア
ルデヒド溶液２ｄを蒸留水９８−で希釈することにより
調製された。

例１ −　、ヘパ１ン　゛ ポリマー系支持体をあらかじめ選ばれた期間、あらかじ
め選ばれた温度で、ｐＨ４，３，７，５，８，４１Ｏ１
２および１３．０のあらかじめ選ばれた濃度のＤＭＡＣ
水溶液に浸漬した。支持体を浸漬溶液から取出し、ヘパ
リンナトリウムの９％水溶液に４５°Ｃで６０分間、ま
たは２５゛Ｃで３０分間浸漬した。ヘパリン化された支
持体を浸漬溶液から、リンスして過剰のヘパリン溶液を
除去し、所信１リグルタルアルデヒドの０．５％水溶液
に１時間、浸漬に用いたものと同じ温度で浸漬すること
により安定化した。

ヘパリン結合の永続性は例２の浸出率試験により判定さ
れた。ヘパリンの結合量は例３の方法により測定された
。

例２ 人へバ　ンの゛　　　　　　るための 狂 被覆試料を攪拌プレートにより周囲温度で５日間まで、
食塩液ノーマル七−ライン（ＮＳ）　Ｉ　Ｎ中において
動的に浸出させた。食塩液は毎日交換された。試料を２
４時間毎に取出し、例３の方法により残留ヘパリン量を
調べた。

例３ 七人ヘパ１ン　のＳ １）ＭＡＣ被覆支持体を例１に従ってあらかじめ定めら
れた量のヘパリンおよびトリチウム化ヘパリンの混合物
によりヘパリン化した。このチューブを所望によりグル
タルアルデヒド安定化後にテトラヒドロフランに溶解し
、インスターゲル（Ｉｎｓｔａｇ　ｅｌ、商標）、シン
ナレーションカクテルを添ＰＭ 加し、伊榊噂（毎分光たりの壊変数）を測定した。

このＤＰＭを既知量のトリチウム化ヘパリンを含有する
溶液から作成した標準曲線と比較した。

例４ 七人ヘパ１ンのＳ　の１番 長さ５ｃｔａのＰＩＪ−Ｐチューブの断片を例１の方法
により、プロトコールＢ、すなわち０．９４％ＤＭＡＣ
水溶液ならびに９Ｈ７，５および１０．２を採用してヘ
パリン化した。これらのヘパリン化チューブおよび対照
チューブについての血小板沈着試験を、レラーらのエク
ス・ビポ短絡モデル（前掲）に従って行った。３匹のイ
ヌにおける沈着血小板の平均数を第１図に示す、沈着血
小板数はｐＨＩＯ，２でヘパリン化したチューブの方が
対照チューブおよびｐＨ７，５でヘパリン化したチュー
ブより著しく少ないことが認められる。

例５ ノーマルセーーイン　　′の　　ヘパ１ンのΩｊｔこ 例５で得たヘパリン化ＰＵ−Ｐチューブを５０ＩＩ１１
／分〉Ｘ の流量のノーマルセーライン８０００．ｄ、夛いで１５
０ｄ／分の流量の蒸留水１０００ｄで洗浄した。これら
のチューブおよび対照チューブをエクス・ビボ短絡モデ
ルにより血小板沈着につき評価した。第２図はノーマル
セーライン洗浄後ですら沈着血小板数は、ｐ）１１０．
２でヘパリン化したチューブの方がｐＨ７，５でヘパリ
ン化したチューブまたは対照チューブより著しく少ない
ことを示す。

【図面の簡単な説明】

第１図はヘパリン化されていない支持体、ならびに本発
明方法により、および先行技術方法によりヘパリン化さ
れた支持体上への血小板の沈着を示す。 第２図はノーマルセーラインで洗浄したのちの第１図の
支持体上への血小板の沈着を示す。 （外４名） ＦＩＧ＋ ＦＩＧ、２

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ａ）溶剤中のアンモニウム塩型界面活性剤の溶液の
   ｐＨを７．５より高く調整し、この界面活性剤は炭素原
   子８〜２０個のアルキル基を少なくとも１個含み； ｂ）上記のｐＨ調整された溶液にポリマー系支持体を浸
   漬し、これにより界面活性剤の被膜を支持体上に形成さ
   せ； ｃ）この被膜を有する支持体をｐＨ調整された溶液から
   取出し；そして ｄ）この被膜を有する支持体をヘパリン溶液に浸漬し、
   これによりヘパリンが界面活性剤の被膜と反応してヘパ
   リン化された支持体を与えることよりなる、ポリマー系
   支持体のヘパリン化法。 ２、ポリマー系支持体がポリオレフィン、ポリビニル、
   ポリアクリル、ポリエステル、ポリアミド、ポリカーボ
   ネート、フッ素化ポリマー、酢酸セルロース、シリコー
   ンゴムおよび天然ゴム、ポリウレタン、ポリウレタンウ
   レアおよびシリコーン−ウレタンコポリマーよりなる群
   から選ばれる、請求項１に記載の方法。 ３、界面活性剤が第一アミン、第二アミン、第三アミン
   、アルキレンジアミンの塩、および第四塩よりなる群か
   ら選ばれる、請求項１に記載の方法。 ４、さらに、ヘリパン化された支持体をジアルデヒドで
   処理してヘパリンを安定化することよりなる、請求項１
   に記載の方法。 ５、さらに、ポリマー系支持体をアンモニウム塩溶液に
   浸漬する前に、支持体をプラズマで処理することよりな
   る、請求項１に記載の方法。 ６、ａ）溶剤中のアンモニウム塩型界面活性剤の分散液
   のｐＨを７．５より高く調整し；ｂ）上記のｐＨ調整さ
   れた溶液に支持体を浸漬し、これにより界面活性剤の被
   膜を支持体上に形成させ； ｃ）この被膜を有する支持体をｐＨ調整された溶液から
   取出し；そして ｄ）この被膜を有する支持体をスルホン化多糖類の溶液
   に浸漬し、これによりこの多糖類が界面活性剤の被膜と
   反応して抗血栓形成性支持体を与える ことよりなる、支持体を抗血栓形成性となす方法。 ７、ａ）水性媒質中のドデシルメチルアンモニウムクロ
   リド溶液のｐＨを、この溶液のｐＨを約１０．２に高め
   るのに十分な量のアルカリ化剤の添加により調整し； ｂ）ｐＨ約１０．２のこの溶液にポリマー系支持体を浸
   漬し、これにより支持体上にドデシルメチルアミンの被
   膜を形成させ； ｃ）この被膜を有する支持体をｐＨ約１０．２の溶液か
   ら取出し；そして ｄ）この被膜を有する支持体をヘパリン溶液に浸漬し、
   ヘパリン溶液が上記被膜と反応してヘパリン化された支
   持体を与える ことよりなる、ポリマー系支持体のヘパリン化法。 ８、さらに、ヘパリン化された表面をグルタルアルデヒ
   ドで処理してヘパリンを安定化することよりなる、請求
   項７に記載の方法。 ９、さらに、支持体をドデシルメチルアンモニウムクロ
   リドの溶液に浸漬する前にプラズマで処理することより
   なる、請求項８に記載の方法。