JPH0296536A - プラスミノゲン乾燥製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、プラスミノゲン製剤の改良に関し、さらに詳
しくは、プラスミノゲン乾燥製剤の水への溶解時の溶解
性の改良をなしたプラスミノゲン乾燥製剤に関するもの
である。

〔従来技術〕

プラスミノゲンは、ウロキナーゼなどによって活性化さ
れてプラスミノゲンとなり、これがフィブリンを溶解し
て線溶現象をもたらすものである。

プラスミンは、線溶現象の研究用として用いられる他、
近年線溶系の治療剤（血栓治療剤）としての臨床応用も
なされている。

プラスミノゲン製剤において、プラスミノゲン自体は前
駆型酵素で安定な物質であり、夾雑物として製剤中にプ
ラスミン等を含まないかぎり安定である。しかし、プラ
スミノゲンは、乾燥製剤とすることにより、水に対する
溶解性および溶状が悪くなる。

出願人は先に、プラスミノゲンの乾燥製剤に、水への溶
解時のにごり、糸状様物質の発生を抑止するための熔解
剤として糖またはアミノ酸を添加したプラスミノゲン製
剤を提案している（特開昭６２−１５’３２２４公報）
。

しかし、プラスミノゲン含有組成物を過酷条件下（たと
えばウィルス不活化のための処理等）におくことにより
、乾燥製剤の溶解性および溶状が悪くなることが判明し
た。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明の目的は、過酷条件下においた後でも乾燥化され
たプラスミノゲンの水に対する溶解性および溶状が良好
であるプラスミノゲン乾燥製剤を提供することである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明はプラスミノゲン、Ｉ！類、アミノ酸およびアル
ブミンを含有してなるプラスミノゲン乾燥製剤からなる
。

本発明におけるプラスミノゲン乾燥製剤とは、実質的に
乾燥された状態にある製剤をいい、たとえば粉末状とな
しうる程度であれば、多少水分を含んでいてもよい。

本発明のプラスミノゲン乾燥製剤は乾燥状プラスミノゲ
ンを主成分とするものである、乾燥状プラスミノゲンと
しては、粉末状、特に凍結乾燥プラスミノゲンがあげら
れる。かかる乾燥状プラスミノゲンは、プラスミノゲン
含有液を、自体既知の手段にて乾燥、特に凍結乾燥する
ことによって製造される。

当該プラスミノゲン含有液は、特に限定されるものでは
なく、たとえば人を含む動物等の直情、血漿、腹水、胎
盤抽出液、胎盤＆ｌＩ＃ｓ抽出液、コーンの低温アルコ
ール分画法の百分■のようにプラスミノゲンを含有する
両分から広く公知の方法によって精製されたプラスミノ
ゲン、遺伝子工学により得られたプラスミノゲンなどを
含有する溶液が挙げられる。

プラスミノゲンの精製法としては、たとえば特開昭５５
−１５３５９２号公報に記載の方法、リジン−セファロ
ースによる精製法（Ｓｃｉｅｎｃｅ、　１７０＋１０９
５、１９７０年）などを代表的な方法として例示するこ
とができる。

また、プラスミノゲン製剤はウィルス不活化のための処
理が行われているものが好ましい。ウィルス不活化処理
としては、たとえばプラスミノゲンの液状組成物を５０
〜１００°Ｃで５〜３０時間加熱する方法、乾燥組成物
を５０〜１００°Ｃで、１０〜１５０時間加熱する方法
、界面活性剤と接触させる方法、その他の薬剤、たとえ
ば、トリアルキルホスフェートと接触させる方法および
これら処理の組み合わせが挙げられる。

本発明で使用される溶解剤は糖類、アミノ酸およびアル
ブミンである。

Ｉ！類としては単＄１！類（ブドウ糖、ガラクトースな
ど）、三糖類（シｇ糖、乳零唐など）、糖アルコール（
マンニトール、ソルビトールなど）が例示され、特に好
ましい糖類は糖アルコールである。

アミノ酸としては、中性アミノ酸（グリシン、アラニン
など）、酸性アミノ酸（グルタミン酸、アスパラギン酸
など）、塩基性アミノ酸（アルギニン、リジンなど）が
例示され、特に好ましいアミノ酸は塩基性アミノ酸であ
る。

アルブミンは、抗原性の問題からヒト由来のアルブミン
であることが好ましく、それらは医療用に精製されたも
のであれば特に制限はない。その純度は、電気泳動法で
分析して８０％以上がアルブミンであるものが好ましい
。ヒト由来アルブミンを得る方法としては、エタノール
分画法（特公昭４７−２８６９号公報、特公昭３５−５
２９７号公報）、有機酸の存在下で加熱する方法（特公
昭４３−１６０４号公報、特公昭５１　４０ｉ３２１号
公報）なとが例示される。特に、好ましくはアルブミン
を加熱処理（好ましくは、６０゛Ｃ１１０時間程度の加
熱処理）して肝炎ウィルスなどのウィルス不活性化処理
を行ったものが使用される。

本発明のより好ましい実施態様は、糖アルコール、塩基
性アミノ酸およびアルブミンの併用である。

本発明のプラスミノゲン乾燥製剤は、通常熔解剤をプラ
スミノゲン溶液に添加した後、自体既知の乾燥処理に付
すことによって調製される。

本発明において、溶解剤の配合量は本発明のプラスミノ
ゲン乾燥製剤を水に熔解させた場合に溶解時のにごり、
糸状様物質の発生を抑制するに十分な量であり、具体的
には各成分毎に次の通りである。

Ｉ！頻およびアミノ酸の使用量は、それぞれプラスミノ
ゲンの１００〜５００ＣＵ／ｍｌに対して、０．５％（
Ｗ／Ｖ）　〜１０％　（Ｗ／Ｖ）程度、ヨリ好ましくは
０．５〜５％（Ｗ／Ｖ）程度である。なお、糖類〔特に
、糖アルコール〕　（Ａ）と塩基性アミノ酸（Ｂ）との
好ましい重量比、即ちＢ／Ａは０．１〜３であり、最適
には１である。

アルブミンの使用量はプラスミノゲンの１００〜５００
　ＣＵ／ｍｌに対して０．０５〜５％（Ｗ／Ｖ）程度、
より好ましくは０．５〜１％（Ｗ／Ｖ）程度である。

上記の溶解剤の添加量の範囲において、製剤の安定性、
水溶解性、溶状および製剤化のバランスが最も良好であ
る。

本発明のプラスミノゲン乾燥製剤は、用時生理食塩液注
射用蒸留水などの水性溶媒に溶解されて投与される。投
与に際しては、−船釣には静脈内投与が行われ、たとえ
ば血栓症の治療のためには一回当たりブラスミノゲンと
して１００〜３０００　ＣＵの投与が行われる。

なお、本発明からなる製剤には、医薬品製造の通例技術
に準じて賦形剤などを有効量添加してもよい。

〔効　果〕

本発明からなるプラスミノゲン乾燥製剤は、水への溶解
時のにごり、糸状用物質の発生が抑制され、溶解後も活
性が保持される。また、凍結乾燥時の安定性、特に長期
安定性に優れているので、医療用製剤としてより安全で
あり、実用に即したものである。従って、本発明製剤に
よって、たとえば各種血栓症の治療がより効果的に行え
る。

〔実施例］ 実施例１ コーンの冷エタノール分画性で得られた両分■十■ペー
スト抽出残査を、１０単位／　ｍ　ｌのアプロチニンと
０．１　Ｍ塩化ナトリウムを含むトリス塩酸緩衝液（ｐ
ｌ（８，３）に懸濁し、少時撹拌した後５％硫酸アンモ
ニウムを添加・撹拌し遠心分離により上清を分離した。

更に、この上清に３０％硫酸アンモニウムを添加・撹拌
し遠心分離により沈澱を分離した。この沈澱を、０．９
％塩化ナトリウムを含む０．９％グリシンン容液（ｐＨ
７，２）に懸濁し、Ｄｅｕｔｓｃｈ、　Ｄ、Ｇら（Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ、　　１７０．１０９５．　　（１９７０）
）の方法に準じリジン−セファロースカラムに注入し、
プラスミノゲンを吸着させ、次いで不純蛋白質を１塩化
ナトリウムを含む０．９％グリシン溶液（ｐＨ７，２）
で洗浄した後、０．２Ｍε−アミノカプロン酸と０．９
％塩化ナトリウムとを含む溶媒（ｐＨ７，０）を用いて
吸着したプラスミノゲンを溶出せしめた。

この精製した精製プラスミノゲン液（７６，２ｃｕ／ｍ
ｌ）をｐＨ５，ｏで６０°ＣＩＯ時間加熱後、１％アル
ギニン・１％マンニトールと０．４５％塩化ナトリウム
を含む５０１リン酸緩衝液（ｐｌ＋７．２　）で−昼夜
透析した。透析後、最終濃度が０〜５％となるようにヒ
ト血清アルブミンを添加し凍結乾燥した。凍結乾燥後、
蒸留水で再溶解し性状を比較した。

当該凍結乾燥製剤は、容易に蒸留水に溶解した。

また、溶状は表１に示す通りであり、アルブミンを添加
した再溶解液は清澄であった。

また、アルブミン無添加、０．５％添加の溶解液を室温
で静置して、２時間までの活性および溶状を測定し、表
２に示した。

（以下余白） 表１　凍結乾燥後再溶解液の性状 ＋＋：極めて清澄、＋：清澄、±：＠白濁なお、プラス
ミノゲンの力価は、Ｋａｔｏら（Ｊ。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、　８８．１８３．　（１９８０））の
方法に準じ、合成基質法で求めた。

また、ＣＯ単位はカゼイン単位（Ｖｏｘ　Ｓａｎｇ、　
　５３５７−３７６　（１９６０））を意味する。

表２　凍結乾燥後の水熔解液の安定性 率溶解後の室温静置時間 手続補正書（自制 昭和６３年１１月１６日 曾

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. プラスミノゲン、糖類、アミノ酸およびアルブミンを含
   有してなることを特徴とするプラスミノゲン乾燥製剤。