JPH03144367A - 間接凝集免疫測定方法及び装置 - Google Patents
間接凝集免疫測定方法及び装置Info
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- JPH03144367A JPH03144367A JP1281895A JP28189589A JPH03144367A JP H03144367 A JPH03144367 A JP H03144367A JP 1281895 A JP1281895 A JP 1281895A JP 28189589 A JP28189589 A JP 28189589A JP H03144367 A JPH03144367 A JP H03144367A
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を用い、抗原
抗体反応を利用した間接凝集免疫測定方法及び装置に関
するものである。
抗体反応を利用した間接凝集免疫測定方法及び装置に関
するものである。
（従来の技術）
免疫測定方法の一つとして、抗原抗体反応によって起る
結合反応を抗原又は抗体を結合させた粒子を用いて感度
を高めて測定する間接凝集反応は、受身凝集反応又は逆
受身凝集反応と呼ばれ多量検体の簡易測定法として広く
実用化されている。
結合反応を抗原又は抗体を結合させた粒子を用いて感度
を高めて測定する間接凝集反応は、受身凝集反応又は逆
受身凝集反応と呼ばれ多量検体の簡易測定法として広く
実用化されている。
（本発明が解決しようとする問題点）
間接凝集反応による免疫測定法は、ＥＩＡ（酵素免疫測
定法）やＲＩＡ（放射免疫測定法）等に比べ操作が簡便
であり、最終の抗原抗体反応の有無の判定にも特別な機
器を要しない等の特徴がある。
定法）やＲＩＡ（放射免疫測定法）等に比べ操作が簡便
であり、最終の抗原抗体反応の有無の判定にも特別な機
器を要しない等の特徴がある。
しかしながら、その操作に熟練を要する、あるいは自動
化が困難である等の欠点があり、今もって部分自動化の
域を出ない状態である。
化が困難である等の欠点があり、今もって部分自動化の
域を出ない状態である。
また間接凝集法のパターン形成法としては、マイクロプ
レートに所定の希釈検体溶液に所定の試薬粒子液を添加
、撹拌後静置し、粒子の沈降パターンから抗原抗体反応
の有無を判断する方法（以下静置法と省略する）と、７
字型のマイクロプレートの底に粒子を遠心力を用いて強
制的に沈降させ、その後マイクロプレートを傾斜させた
状態に置き、粒子の底からの剥離状況から抗原抗体反応
の有無を判断する方法（以下遠心法と省略する）とがあ
る、前者の＃％直置法よる沈降パターンから抗原抗体反
応の有無を判断する場合には、静置中の振動によるパタ
ーンの乱れ、例えばスリップ現象の誘発、パターン面積
の減少等が起こりやすく自動化を困難にしていた。更に
静置法のもう一つの欠点は、パターン形成の完成までに
、使用する粒子によっても異なるが、約０．５乃至３時
間もの長時間を要することである。又後者の遠心法では
、遠心機を用いて沈降を数分で行ない、その後マイクロ
プレートを傾斜させ数分でパターン読取りが行なえ、パ
ターン形成中、振動が加わることによるパターンの乱れ
を心配する必要がない等の利点があるが、実際上、遠心
機を用いて自動的に免疫測定を行なうことは技術的に困
難であり、これらの問題は本発明が解決しようとする問
題点である。
レートに所定の希釈検体溶液に所定の試薬粒子液を添加
、撹拌後静置し、粒子の沈降パターンから抗原抗体反応
の有無を判断する方法（以下静置法と省略する）と、７
字型のマイクロプレートの底に粒子を遠心力を用いて強
制的に沈降させ、その後マイクロプレートを傾斜させた
状態に置き、粒子の底からの剥離状況から抗原抗体反応
の有無を判断する方法（以下遠心法と省略する）とがあ
る、前者の＃％直置法よる沈降パターンから抗原抗体反
応の有無を判断する場合には、静置中の振動によるパタ
ーンの乱れ、例えばスリップ現象の誘発、パターン面積
の減少等が起こりやすく自動化を困難にしていた。更に
静置法のもう一つの欠点は、パターン形成の完成までに
、使用する粒子によっても異なるが、約０．５乃至３時
間もの長時間を要することである。又後者の遠心法では
、遠心機を用いて沈降を数分で行ない、その後マイクロ
プレートを傾斜させ数分でパターン読取りが行なえ、パ
ターン形成中、振動が加わることによるパターンの乱れ
を心配する必要がない等の利点があるが、実際上、遠心
機を用いて自動的に免疫測定を行なうことは技術的に困
難であり、これらの問題は本発明が解決しようとする問
題点である。
（問題点を解決するための手段）
本発明の目的は、従来の上記の欠点を回避し、間接凝集
反応の全過程を自動化した磁気沈降促進型の間接凝集免
疫測定方法及び装置を提供することである。
反応の全過程を自動化した磁気沈降促進型の間接凝集免
疫測定方法及び装置を提供することである。
本発明の磁気沈降促進型の間接凝集免疫測定方法（以下
「凝集免疫測定方法」という）は、試薬として磁性体粒
子又は磁性体を含む粒子を用いて間接凝集反応による免
疫測定系を構威し、反応後該粒子を含む成分を容器底部
に磁力により強制沈降させ、次に該容器を傾斜させ、沈
降粒子の該容器からの剥離状況から免疫反応の有無を判
断する凝集免疫測定方法である。本発明の凝集免疫測定
方法において、磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を含む
成分を磁力により強制沈降させるには、電磁石を用いて
も永久磁石を用いてもよい。
「凝集免疫測定方法」という）は、試薬として磁性体粒
子又は磁性体を含む粒子を用いて間接凝集反応による免
疫測定系を構威し、反応後該粒子を含む成分を容器底部
に磁力により強制沈降させ、次に該容器を傾斜させ、沈
降粒子の該容器からの剥離状況から免疫反応の有無を判
断する凝集免疫測定方法である。本発明の凝集免疫測定
方法において、磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を含む
成分を磁力により強制沈降させるには、電磁石を用いて
も永久磁石を用いてもよい。
本発明の間接凝集免疫測定装置は免疫測定用検体及び免
疫測定用試薬を受容する該免疫測定用試薬の磁性体又は
磁性体を含む粒子を含む成分の沈降を磁力によって強制
沈降させる手段と、該容器を傾斜させた状態に置く手段
とを有するものである。即ち、本発明においては、磁石
を用いた沈降促進台上で磁性体粒子を強制的に沈降させ
、容器底面に引き寄せ、あたかも遠心法で沈降させたの
と同じ作用を得ることができる。これにより従来の静置
法で要した時間の三分の一以下の短時間で、しかも振動
等に影響を受けない測定方法と装置を完成することがで
きる。
疫測定用試薬を受容する該免疫測定用試薬の磁性体又は
磁性体を含む粒子を含む成分の沈降を磁力によって強制
沈降させる手段と、該容器を傾斜させた状態に置く手段
とを有するものである。即ち、本発明においては、磁石
を用いた沈降促進台上で磁性体粒子を強制的に沈降させ
、容器底面に引き寄せ、あたかも遠心法で沈降させたの
と同じ作用を得ることができる。これにより従来の静置
法で要した時間の三分の一以下の短時間で、しかも振動
等に影響を受けない測定方法と装置を完成することがで
きる。
本発明において試薬中に含まれる磁性体としては、底面
に強制的に沈降させるために磁性体の中でも強磁性体を
好適に使用することができる。また本発明において試薬
として使用できる磁性体粒子又は磁性体を含む粒子の具
体例は以下の通りである。
に強制的に沈降させるために磁性体の中でも強磁性体を
好適に使用することができる。また本発明において試薬
として使用できる磁性体粒子又は磁性体を含む粒子の具
体例は以下の通りである。
磁性体粒子、強磁性体を含んだゼラチン粒子（特開昭５
９−１９５１６１号参照）、磁性体を血清アルブミン等
で被覆した粒子、同様に台底ポリマーで被覆した粒子、
合成ポリマー中磁性体を含んだ粒子等である。
９−１９５１６１号参照）、磁性体を血清アルブミン等
で被覆した粒子、同様に台底ポリマーで被覆した粒子、
合成ポリマー中磁性体を含んだ粒子等である。
また発明の検体及び試薬を受容する容器としてはプラス
チック製、例えばポリスチレン、ＡＢＳ樹脂又はガラス
製のＵ字型又は９字型の容器を使用できる。これら容器
の大きさは問わないが、大量の検体を処理し、取り扱い
が容易であり、鮮明な像を得るために、ポリスチレン製
のＶ字型マイクロプレートが好適に用いることができる
。
チック製、例えばポリスチレン、ＡＢＳ樹脂又はガラス
製のＵ字型又は９字型の容器を使用できる。これら容器
の大きさは問わないが、大量の検体を処理し、取り扱い
が容易であり、鮮明な像を得るために、ポリスチレン製
のＶ字型マイクロプレートが好適に用いることができる
。
本発明の凝集免疫測定装置においては、前記の通り、免
疫測定用検体及び免疫測定用試薬を受容するマイクロプ
レート、該試薬の磁性体又は磁性体を含む粒子を含む成
分を磁力により強制沈降させる手段、及び該マイクロプ
レートを傾斜させた状態にする手段とが必須であるが、
これを全自動の凝集測定装置として実際に使用する際に
は、第１図に示すように、マイクロプレート供給装置１
、検体分注装置２、試薬分注装置３、検体及び試薬撹拌
装置４、マイクロプレート低部に磁性体粒子又は磁性体
を含む粒子を磁力で沈降させる強制沈降促進装置５、引
続いてこれを傾斜した状態に置く傾斜処理装置６、沈降
粒子成分のマイクロプレートからの傾斜による剥離状況
を読取るパターン読取り装置７及び使用済みマイクロプ
レートを回収するマイクロプレート回収装置８を組合せ
て構成することができる。第１図に示す構成例は、本発
明の測定装置の一実施例であって、本発明を限定するも
のではない。
疫測定用検体及び免疫測定用試薬を受容するマイクロプ
レート、該試薬の磁性体又は磁性体を含む粒子を含む成
分を磁力により強制沈降させる手段、及び該マイクロプ
レートを傾斜させた状態にする手段とが必須であるが、
これを全自動の凝集測定装置として実際に使用する際に
は、第１図に示すように、マイクロプレート供給装置１
、検体分注装置２、試薬分注装置３、検体及び試薬撹拌
装置４、マイクロプレート低部に磁性体粒子又は磁性体
を含む粒子を磁力で沈降させる強制沈降促進装置５、引
続いてこれを傾斜した状態に置く傾斜処理装置６、沈降
粒子成分のマイクロプレートからの傾斜による剥離状況
を読取るパターン読取り装置７及び使用済みマイクロプ
レートを回収するマイクロプレート回収装置８を組合せ
て構成することができる。第１図に示す構成例は、本発
明の測定装置の一実施例であって、本発明を限定するも
のではない。
本発明について下記に実施例を示して更に詳細に説明す
る。
る。
（実施例）
ＣＡＦＰ感作フェリコロイド含有ゼラチン粒子の調製〕
フェリコロイドを含むゼラチン粒子（平均粒径約３果ク
ロン、特開昭５９−１９５１５１号参照）に抗ヒトＡＦ
Ｐ抗体（ウサギ、ＤＡＣＯ）を用い、Ｂａｒｎａｒｄ等
の方法（ＣＩｉｎ、 Ｃｈｅｓｓ、、 ２７ （６）
８３２（１９８１））に従い、抗ヒトＡＦＰ感作フェ
リコロイド含有ゼラチン粒子を調製した。
ロン、特開昭５９−１９５１５１号参照）に抗ヒトＡＦ
Ｐ抗体（ウサギ、ＤＡＣＯ）を用い、Ｂａｒｎａｒｄ等
の方法（ＣＩｉｎ、 Ｃｈｅｓｓ、、 ２７ （６）
８３２（１９８１））に従い、抗ヒトＡＦＰ感作フェ
リコロイド含有ゼラチン粒子を調製した。
検体血清を血清希釈用液でＩＯ倍に希釈し、これを■字
型マイクロプレートにとり、これに上記の抗ヒトＡＦＰ
感作フェリコロイド含有ゼラチン粒子の０．０９％含有
の分散液２５μｌを加え、撹拌し、１０分間経過後、磁
石を用いた沈降促進台に５分間静置し、その後磁力の影
響の無いパターン読取台でマイクロプレートを約７０°
傾け、マイクロプレートのウェル底部からの沈降粒子の
剥離状況から免疫反応の有無を判定した。ウェル底部よ
り、沈降粒子の剥離の見られるものを陰性判定、見られ
ないものを陽性判定とした。
型マイクロプレートにとり、これに上記の抗ヒトＡＦＰ
感作フェリコロイド含有ゼラチン粒子の０．０９％含有
の分散液２５μｌを加え、撹拌し、１０分間経過後、磁
石を用いた沈降促進台に５分間静置し、その後磁力の影
響の無いパターン読取台でマイクロプレートを約７０°
傾け、マイクロプレートのウェル底部からの沈降粒子の
剥離状況から免疫反応の有無を判定した。ウェル底部よ
り、沈降粒子の剥離の見られるものを陰性判定、見られ
ないものを陽性判定とした。
本発明による上記の免疫測定方法とセロＩディア・ＡＦ
Ｐｍｏｎ（α−フェトプロティン測定用試薬、冨士レビ
オ株式会社製）を用いた従来の静置法（従来法）につい
て、それぞれの力価の相関図を第２図に示す。
Ｐｍｏｎ（α−フェトプロティン測定用試薬、冨士レビ
オ株式会社製）を用いた従来の静置法（従来法）につい
て、それぞれの力価の相関図を第２図に示す。
（発明の効果）
本発明の抗原抗体反応の免疫測定方法及び装置において
は、磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を担体として用い
、これを磁力を用いて容器底部に強制沈降させ、次に該
容器を傾斜させ、沈降粒子容器からの剥離状況から抗原
抗体反応の有無を判定するものであるから、従来の遠心
法と同じ効果を磁性体粒子と磁力で達成でき、従来の遠
心法では困難である全自動化も容易に達成でき、かつ従
来の静置法よりもはるかに短時間でかつ振動等の影響を
全く受けることなく測定が可能である。又本発明の凝集
免疫測定方法と従来の静置法との間には、それぞれの測
定結果に実質的に対応する相関関係があり、従来の静置
法に代えて使用できる。
は、磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を担体として用い
、これを磁力を用いて容器底部に強制沈降させ、次に該
容器を傾斜させ、沈降粒子容器からの剥離状況から抗原
抗体反応の有無を判定するものであるから、従来の遠心
法と同じ効果を磁性体粒子と磁力で達成でき、従来の遠
心法では困難である全自動化も容易に達成でき、かつ従
来の静置法よりもはるかに短時間でかつ振動等の影響を
全く受けることなく測定が可能である。又本発明の凝集
免疫測定方法と従来の静置法との間には、それぞれの測
定結果に実質的に対応する相関関係があり、従来の静置
法に代えて使用できる。
第１図は、本発明による全自動磁気沈降促進型の間接凝
集免疫測定装置の一構成例を示すブロック図、第２図は
、本発明による免疫測定方法と従来の静置法（従来法）
についての、それぞれの力価の相関図である。 １・・・マイクロプレート供給装置、２・・・検体分注
装置、３・・・試薬分注装置、４・・・検体及び試薬撹
拌装置、５・・・強制沈降促進装置、６・・・傾斜処理
装置、７・・・パターン読取り装置、８・・・マイクロ
プレート回収装置。
集免疫測定装置の一構成例を示すブロック図、第２図は
、本発明による免疫測定方法と従来の静置法（従来法）
についての、それぞれの力価の相関図である。 １・・・マイクロプレート供給装置、２・・・検体分注
装置、３・・・試薬分注装置、４・・・検体及び試薬撹
拌装置、５・・・強制沈降促進装置、６・・・傾斜処理
装置、７・・・パターン読取り装置、８・・・マイクロ
プレート回収装置。
Claims (2)
- （１）磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を用いる間接凝
集免疫測定法において （イ）該粒子を容器底部に磁力により強制沈降させる段
階 （ロ）該容器を傾斜させる段階 （ハ）該粒子の該容器底部からの剥離状態を判断する段
階 からなる該測定法。 - （２）免疫測定用検体及び免疫測定用試薬を受容する容
器と、該免疫測定用試薬の磁性体粒子又は磁性体を含む
粒子を含む成分を沈降を磁力によって強制沈降させる手
段と、該容器を傾斜させる手段とを有することを特徴と
する間接凝集免疫測定装置。
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1281895A JPH03144367A (ja) | 1989-10-31 | 1989-10-31 | 間接凝集免疫測定方法及び装置 |
| CA002028995A CA2028995A1 (en) | 1989-10-31 | 1990-10-30 | Indirect agglutination immunoassay and apparatus therefor |
| AU65720/90A AU626044B2 (en) | 1989-10-31 | 1990-10-31 | Indirect agglutination immunoassay and apparatus therefor |
| EP90120939A EP0426170B1 (en) | 1989-10-31 | 1990-10-31 | Indirect agglutination immunoassay and apparatus therefor |
| KR1019900017534A KR940009958B1 (ko) | 1989-10-31 | 1990-10-31 | 간접 응집 면역 측정 방법 및 장치 |
| ES90120939T ES2054195T3 (es) | 1989-10-31 | 1990-10-31 | Ensayo inmunologico de aglutinacion indirecta y aparato para el mismo. |
| DE69007587T DE69007587T2 (de) | 1989-10-31 | 1990-10-31 | Indirektes Agglutinationsimmunnachweisverfahren und Vorrichtung dafür. |
| US08/082,373 US6258607B1 (en) | 1989-10-31 | 1993-06-28 | Indirect agglutination immunoassay and apparatus therefor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1281895A JPH03144367A (ja) | 1989-10-31 | 1989-10-31 | 間接凝集免疫測定方法及び装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03144367A true JPH03144367A (ja) | 1991-06-19 |
Family
ID=17645456
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1281895A Pending JPH03144367A (ja) | 1989-10-31 | 1989-10-31 | 間接凝集免疫測定方法及び装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH03144367A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05297001A (ja) * | 1992-04-15 | 1993-11-12 | Fujirebio Inc | 磁性粒子を用いた自動免疫測定方法及び装置 |
| JPH06324041A (ja) * | 1993-05-17 | 1994-11-25 | Fujirebio Inc | 間接凝集免疫測定法及びこれに用いる沈降パターン測定装置 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02107968A (ja) * | 1988-10-15 | 1990-04-19 | Olympus Optical Co Ltd | 磁性粒子を用いた免疫学的測定方法 |
| JPH02124464A (ja) * | 1988-07-20 | 1990-05-11 | Olympus Optical Co Ltd | 磁性マーカー粒子を用いた免疫学的測定方法 |
-
1989
- 1989-10-31 JP JP1281895A patent/JPH03144367A/ja active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02124464A (ja) * | 1988-07-20 | 1990-05-11 | Olympus Optical Co Ltd | 磁性マーカー粒子を用いた免疫学的測定方法 |
| JPH02107968A (ja) * | 1988-10-15 | 1990-04-19 | Olympus Optical Co Ltd | 磁性粒子を用いた免疫学的測定方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05297001A (ja) * | 1992-04-15 | 1993-11-12 | Fujirebio Inc | 磁性粒子を用いた自動免疫測定方法及び装置 |
| JPH06324041A (ja) * | 1993-05-17 | 1994-11-25 | Fujirebio Inc | 間接凝集免疫測定法及びこれに用いる沈降パターン測定装置 |
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