JPH0314588A - 生理活性物質３８２２ａ，ｂ - Google Patents
生理活性物質３８２２ａ，ｂInfo
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- JPH0314588A JPH0314588A JP1147771A JP14777189A JPH0314588A JP H0314588 A JPH0314588 A JP H0314588A JP 1147771 A JP1147771 A JP 1147771A JP 14777189 A JP14777189 A JP 14777189A JP H0314588 A JPH0314588 A JP H0314588A
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- Japan
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- physiologically active
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- methanol
- dmso
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- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野コ
本発明は、抗腫瘍作用を有し、また真菌およびグラム陽
性、陰性細菌に対しても増殖抑制作用を有する新規な生
理活性物質に関する。
性、陰性細菌に対しても増殖抑制作用を有する新規な生
理活性物質に関する。
［従来の技術］
本発明の生理活性物質３８２２Ａは分子量４２４，分子
式ＣｔａＨｔｅＮｔＳ＊Ｏｇ 、３ ８２２Ｂは、分子
量４０２，分子式ＣｘａＨｘｔＮ＊ＳｚＯ＊の新規な物
質であり、これと同一の物理化学的性質、および生理活
性を有する物質の存在は知られていない。
式ＣｔａＨｔｅＮｔＳ＊Ｏｇ 、３ ８２２Ｂは、分子
量４０２，分子式ＣｘａＨｘｔＮ＊ＳｚＯ＊の新規な物
質であり、これと同一の物理化学的性質、および生理活
性を有する物質の存在は知られていない。
［発明が解決しようとする課題コ
本発明の目的は、抗腫瘍作用を有し、また真菌およびグ
ラム陽性、陰性細菌に対しても増殖抑制作用を有する新
規な生理活性物質を提供することにある。
ラム陽性、陰性細菌に対しても増殖抑制作用を有する新
規な生理活性物質を提供することにある。
［課題を解決するための手段コ
本発明者らは、制癌活性を有する新規物質を土壌分離菌
の中から得るべく探索研究を重ねた結果、本発明者らの
見出した特定の微生物が、癌培養細胞に対して増殖抑制
作用を有し、またある種の真菌およびダラム陽性、陰性
細菌に対しても増殖抑制作用を有する新規な生理活性物
質を生産することを見出し本発明を完成するに至った．
本発明の構造式（Ｉ） ０ および構造式（ＩＩ） で表わされる生理活性物質３８２２ＡおよびＢを生産す
る菌株は、本発明者らが、埼玉県和光市で採取した土壌
より新たに分離した菌株であり、微生物の名称’ Ｅｐ
ｉｃｏｃｃｕｍ ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ Ｆ−３８
２鴫 ２」および微生物寄託番号１微工研条寄第１０６９１号
（ ＦＥＲＭ Ｐ−１０６９１冫」として、工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されているものである．
この菌株の菌学的性状を以下に示す。
の中から得るべく探索研究を重ねた結果、本発明者らの
見出した特定の微生物が、癌培養細胞に対して増殖抑制
作用を有し、またある種の真菌およびダラム陽性、陰性
細菌に対しても増殖抑制作用を有する新規な生理活性物
質を生産することを見出し本発明を完成するに至った．
本発明の構造式（Ｉ） ０ および構造式（ＩＩ） で表わされる生理活性物質３８２２ＡおよびＢを生産す
る菌株は、本発明者らが、埼玉県和光市で採取した土壌
より新たに分離した菌株であり、微生物の名称’ Ｅｐ
ｉｃｏｃｃｕｍ ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ Ｆ−３８
２鴫 ２」および微生物寄託番号１微工研条寄第１０６９１号
（ ＦＥＲＭ Ｐ−１０６９１冫」として、工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されているものである．
この菌株の菌学的性状を以下に示す。
■ 形態
本菌株は麦芽汁寒天培地、バレイショ・ブドウ糖寒天培
地、ツアベツクードックス寒天培地，才一トミル寒天培
地，ＹｐＳｓ寒天培地などで良好な生育を示すが、分生
子の形成は、バレイショ・ブドウ糖寒天培地，ＬＣＡ培
地上で長期間培養したときのみ、わずかに認められる。
地、ツアベツクードックス寒天培地，才一トミル寒天培
地，ＹｐＳｓ寒天培地などで良好な生育を示すが、分生
子の形成は、バレイショ・ブドウ糖寒天培地，ＬＣＡ培
地上で長期間培養したときのみ、わずかに認められる。
バレイショ・ブドウ糖寒天培地に生育したコロニーを顕
微鏡下で観察すると、菌糸は隔壁を有し、高度に分枝し
ており、直径は１〜５Ｐ，菌糸表面は滑面からやや粗面
を呈している．室温で２〜３週間以上培養すると、コロ
ニーの周縁部に分生子座を形成する。分生子柄は菌糸か
ら群生、または分生子座上に形成し、３〜８戸×５〜１
８μの円筒形から視棒形であり、０〜２隔壁を生じる。
微鏡下で観察すると、菌糸は隔壁を有し、高度に分枝し
ており、直径は１〜５Ｐ，菌糸表面は滑面からやや粗面
を呈している．室温で２〜３週間以上培養すると、コロ
ニーの周縁部に分生子座を形成する。分生子柄は菌糸か
ら群生、または分生子座上に形成し、３〜８戸×５〜１
８μの円筒形から視棒形であり、０〜２隔壁を生じる。
表面は滑面、無色から淡褐色で先端に暗色のアレウロ型
分生子を単生する。分生子は黒褐色で直径９〜２５Ｊｆ
ｆｉの球形から亜球形であり、縦横に不規則な隔壁を生
じ、編目状にひびわれのはいった外膜で覆われ、いぼ状
を呈している。
分生子を単生する。分生子は黒褐色で直径９〜２５Ｊｆ
ｆｉの球形から亜球形であり、縦横に不規則な隔壁を生
じ、編目状にひびわれのはいった外膜で覆われ、いぼ状
を呈している。
■ 培地上での諸性状
各種培地上で２５゜Ｃ、１４日間培養した場合の肉眼的
観察結果を次の表１に示した。
観察結果を次の表１に示した。
表１
■ 生理的、生態的性質
１）最適生育条件
本菌株の最適生育条件はＹｐＳｓ培地においてｐＨは５
〜６であり、温度は２２〜２６℃である．２）生育範囲 本菌株はサブロー培地において、６〜３４゜Ｃの範囲で
生育し、ｐＨは３〜９である． ３）好気性、嫌気性の区別；好気性 以上の形態的特徴および培養上の性状から、本菌株が、
Ｅｐｉｃｏｃｃｕｍ属に属することが明らかになったの
で、前記諸性状を基に、宇田川俊一椿啓介偏１菌類図鑑
，（１９７Ｂ）および毘Ｂ． Ｅｌｌｉｓ著’ＤＥＭＡ
ｒＩＡＣＥＯＵＳ ＨＹＰＨＯＭＹＣＥＩ’ＥＳＪ （
１９７１）に報告されている多くの既知菌株と比較検討
した。その結果、本菌株はＥｐｉｃｏｃｃｕｔｎ ｐｕ
ｒｐｕｒａｓｃｅｎｓに最も近い性状を示すことが明ら
かとなった。
〜６であり、温度は２２〜２６℃である．２）生育範囲 本菌株はサブロー培地において、６〜３４゜Ｃの範囲で
生育し、ｐＨは３〜９である． ３）好気性、嫌気性の区別；好気性 以上の形態的特徴および培養上の性状から、本菌株が、
Ｅｐｉｃｏｃｃｕｍ属に属することが明らかになったの
で、前記諸性状を基に、宇田川俊一椿啓介偏１菌類図鑑
，（１９７Ｂ）および毘Ｂ． Ｅｌｌｉｓ著’ＤＥＭＡ
ｒＩＡＣＥＯＵＳ ＨＹＰＨＯＭＹＣＥＩ’ＥＳＪ （
１９７１）に報告されている多くの既知菌株と比較検討
した。その結果、本菌株はＥｐｉｃｏｃｃｕｔｎ ｐｕ
ｒｐｕｒａｓｃｅｎｓに最も近い性状を示すことが明ら
かとなった。
本菌株を’ Ｅｐｉｃｏｃｃｕｍ ｐｕｒｐｕｒａｓｃ
ｅｎｓ Ｆ−３８２２Ｊと命名した。
ｅｎｓ Ｆ−３８２２Ｊと命名した。
次に、生理活性物質３８２２Ａおよび３８２２Ｂの生産
は、大略して、一般発酵生産物を生産する場合に準じて
行なわれる． すなわち、各種の栄養物質を含む培地でＥｐｉｅｏｃｃ
ｕａ＋ ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ Ｆ−３８２２
株を好気的条件下で培養する． 培地は主として液体培地を用い、炭素源としてはグルフ
ース、廃糖蜜、スターチなどを単独または混合して用い
ることができる．窒素源としてはポリペブトン、大豆粉
、酵母エキスなどを単独かまたは混合して用いることが
できる．その他、菌株の生育を助け生理活性物質３８２
２ＡおよびＢの生産を促進する有機物および無機塩を必
要により添加または混合して用いることができる．その
他、菌株の生育を助け生理活性物質３８２２ＡおよびＢ
の生産を促進する有機物および無機塩を必要により添加
することができる．消泡剤としては、アデカノール、シ
リコンなどを用いることができる． 培養方法は振とう培養、通気攪拌培養などの好気培養が
適しており、ｐＨ５〜７、２５〜３０゜Ｃで、３〜４日
間培養する． この培養液中に生産された生理活性物質３８２２Ａおよ
びＢを単離するには、発酵生産物を採取する一般的な方
法に準じて行なえば良い。すなわち培養終了後、遠心分
離または濾過により分離した培養濾液を活性炭素などに
吸着させ、酢酸エチルエステル等にて溶出する。溶出さ
れた生理活性物質３８２２Ａの画分を濃縮してシロップ
状とする。このシロップを再度、酢酸エチルエステル、
メタノールなどの有機溶媒に溶解し、析出した沈殿物を
濾過後、シリカゲルを用いたカラムクロマトグラフ、セ
ファデックスＬＨ−２０（商品名；ファルマシア社製）
を用いたゲル濾過により、生理活性物質３８２２Ａおよ
びＢを精製単離することができる， 以上の精製法によって得られた生理活性物質３Ｂ２２Ａ
は、その元素分析値，分子量，紫外吸収スペクトル，赤
外吸収スペクトル，’Ｈ−ＮＭＲスペクトル，ＩＣ−ス
ペクトルの解析によりその構造式が次の如く決定された
。
は、大略して、一般発酵生産物を生産する場合に準じて
行なわれる． すなわち、各種の栄養物質を含む培地でＥｐｉｅｏｃｃ
ｕａ＋ ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ Ｆ−３８２２
株を好気的条件下で培養する． 培地は主として液体培地を用い、炭素源としてはグルフ
ース、廃糖蜜、スターチなどを単独または混合して用い
ることができる．窒素源としてはポリペブトン、大豆粉
、酵母エキスなどを単独かまたは混合して用いることが
できる．その他、菌株の生育を助け生理活性物質３８２
２ＡおよびＢの生産を促進する有機物および無機塩を必
要により添加または混合して用いることができる．その
他、菌株の生育を助け生理活性物質３８２２ＡおよびＢ
の生産を促進する有機物および無機塩を必要により添加
することができる．消泡剤としては、アデカノール、シ
リコンなどを用いることができる． 培養方法は振とう培養、通気攪拌培養などの好気培養が
適しており、ｐＨ５〜７、２５〜３０゜Ｃで、３〜４日
間培養する． この培養液中に生産された生理活性物質３８２２Ａおよ
びＢを単離するには、発酵生産物を採取する一般的な方
法に準じて行なえば良い。すなわち培養終了後、遠心分
離または濾過により分離した培養濾液を活性炭素などに
吸着させ、酢酸エチルエステル等にて溶出する。溶出さ
れた生理活性物質３８２２Ａの画分を濃縮してシロップ
状とする。このシロップを再度、酢酸エチルエステル、
メタノールなどの有機溶媒に溶解し、析出した沈殿物を
濾過後、シリカゲルを用いたカラムクロマトグラフ、セ
ファデックスＬＨ−２０（商品名；ファルマシア社製）
を用いたゲル濾過により、生理活性物質３８２２Ａおよ
びＢを精製単離することができる， 以上の精製法によって得られた生理活性物質３Ｂ２２Ａ
は、その元素分析値，分子量，紫外吸収スペクトル，赤
外吸収スペクトル，’Ｈ−ＮＭＲスペクトル，ＩＣ−ス
ペクトルの解析によりその構造式が次の如く決定された
。
（生理活性物質３ｇ２２Ａの構造式）
０
り
（生理活性物質３８２２Ａの理化学的性質）（１）外観
：白色粉末 （２〉融点；１６０゜Ｃ以上（分解） （３）質量分析値：陽イオンＦＡＢＭＳスペクトル：ジ
アセチル化物として測定した。
：白色粉末 （２〉融点；１６０゜Ｃ以上（分解） （３）質量分析値：陽イオンＦＡＢＭＳスペクトル：ジ
アセチル化物として測定した。
ｍ／ｚ ５０９（Ｍ＋Ｈ）”
（４）元素分析値；Ｃ＋ｓＨｔ。Ｎ．Ｓ．Ｏ．として計
算値（％） ； Ｃ ５０．９４，Ｈ ４．４７．Ｎ
６．６０，Ｓ Ｌ５．０９．０ ２２．６４．実測値：
Ｃ ４９．７１，Ｈ ４。７２．Ｎ ６．３２．Ｓ
１４．６９，０ ２４．５６（５）分子量＝４２４ （６〉 ［ α コ ：−４８０．４ ＠（ ｃ
＝０．０５．ＤＭＳＯ溶液） （７）ＵＶ吸収スペクトル：メタノール溶液で測定した
結果、 λ． ＝２１５ｎｍ（ε−９３２０）（８）ＩＲ吸収
スペクトル： ＫＢｒ錠中で測定したスペクトルを第１ｒｙＪに示す。
算値（％） ； Ｃ ５０．９４，Ｈ ４．４７．Ｎ
６．６０，Ｓ Ｌ５．０９．０ ２２．６４．実測値：
Ｃ ４９．７１，Ｈ ４。７２．Ｎ ６．３２．Ｓ
１４．６９，０ ２４．５６（５）分子量＝４２４ （６〉 ［ α コ ：−４８０．４ ＠（ ｃ
＝０．０５．ＤＭＳＯ溶液） （７）ＵＶ吸収スペクトル：メタノール溶液で測定した
結果、 λ． ＝２１５ｎｍ（ε−９３２０）（８）ＩＲ吸収
スペクトル： ＫＢｒ錠中で測定したスペクトルを第１ｒｙＪに示す。
（９）’Ｈ−ＮＭＲスペクトル：
重ジメチルスルフオキシドＣＤＭＳＯ−ｄｉ）中、４
０ ０ＭＨＺで測定したスペクトルを第２図に示す。
０ ０ＭＨＺで測定したスペクトルを第２図に示す。
（１０）”Ｃ − ＮＭＲスペクトル：重ジメチルスル
フオキシド中、ｔｏＯＭＨｚで測定したスペクトルを第
３１５０に示す。
フオキシド中、ｔｏＯＭＨｚで測定したスペクトルを第
３１５０に示す。
（１１〉溶解性：
ピリジン、ＤＭＳＯに易溶。
酢酸エチルエステル、メタノール、クロロホルム、アセ
トンに難溶。
トンに難溶。
ｎ−ヘキサン、石油エーテル、エチルエーテル、水に不
溶。
溶。
（１２）呈色反応：
陽性：硫酸、ヨウ素
陰性：ニンヒドリン
（１３）塩基性、酸性、中性の区別：中性また、生理活
性物質３８２２Ｂは、その元素分析値，分子量，紫外線
スペクトル，赤外線スペクトル，’Ｈ−ＮＭＲスペクト
ル，１８Ｃ−スペクトルの解析によりその構造式が次の
如く決定された． （生理活性物質３８２２Ｂの構造式） （生理活性物質３８２２Ｂの理化学的性質）（１〉外観
：黄色粉末 （２）融点＝６５〜７１℃ （３〉質量分析値：陽イオンＦＡＢＭＳスペクトノレ
ｍ／ ｚ ４ ０ ３ （Ｍ十Ｈ）”（４）元
素分析値； Ｃ ＊ ｍ Ｈ ＊ ｔ Ｎ ！ Ｓ ！
Ｏ ｓとして計算値（％） ； Ｃ ５９．６８．Ｈ
５．５１．Ｎ ６．９６ ．Ｓ １５．９３，０
１１．９２．実測値． Ｃ ５８．８４．Ｈ ５．５１
．Ｎ ６．６６，Ｓ Ｌ６．５３，０ １２．４４（５
）分子量：４０２ （６）［（２ コ ：−７４．６”（Ｃ謬０．
０５，クロロホルム溶液）（７）ＵＶ吸収スペクトル：
メタノール溶液で測定した結果、 ＾二，”，” ＝ ２ １ ５ｎｍ （
ε１２７００），（８）ＩＲ吸収スペクトル： ＫＢｒ錠中で測定したスペクトルを第４図に示す． （９）’Ｈ−ＮＭＲスペクトル： 重ジメチルスルフオキシド（ ＤＭＳＯ−ｄａ ） 中
、４００ＭＨｚで測定したスペクトルを第５図に示す． ＜１０）”Ｃ − ＮＭ Ｒスペクトル：重ジメチルス
ルフオキシド中、１００ＭＨｚで測定したスペクトルを
第６図に示す。
性物質３８２２Ｂは、その元素分析値，分子量，紫外線
スペクトル，赤外線スペクトル，’Ｈ−ＮＭＲスペクト
ル，１８Ｃ−スペクトルの解析によりその構造式が次の
如く決定された． （生理活性物質３８２２Ｂの構造式） （生理活性物質３８２２Ｂの理化学的性質）（１〉外観
：黄色粉末 （２）融点＝６５〜７１℃ （３〉質量分析値：陽イオンＦＡＢＭＳスペクトノレ
ｍ／ ｚ ４ ０ ３ （Ｍ十Ｈ）”（４）元
素分析値； Ｃ ＊ ｍ Ｈ ＊ ｔ Ｎ ！ Ｓ ！
Ｏ ｓとして計算値（％） ； Ｃ ５９．６８．Ｈ
５．５１．Ｎ ６．９６ ．Ｓ １５．９３，０
１１．９２．実測値． Ｃ ５８．８４．Ｈ ５．５１
．Ｎ ６．６６，Ｓ Ｌ６．５３，０ １２．４４（５
）分子量：４０２ （６）［（２ コ ：−７４．６”（Ｃ謬０．
０５，クロロホルム溶液）（７）ＵＶ吸収スペクトル：
メタノール溶液で測定した結果、 ＾二，”，” ＝ ２ １ ５ｎｍ （
ε１２７００），（８）ＩＲ吸収スペクトル： ＫＢｒ錠中で測定したスペクトルを第４図に示す． （９）’Ｈ−ＮＭＲスペクトル： 重ジメチルスルフオキシド（ ＤＭＳＯ−ｄａ ） 中
、４００ＭＨｚで測定したスペクトルを第５図に示す． ＜１０）”Ｃ − ＮＭ Ｒスペクトル：重ジメチルス
ルフオキシド中、１００ＭＨｚで測定したスペクトルを
第６図に示す。
（１ｌ）溶解性：
メタノール、クロロホルム、ＤＭＳＯに易溶．
クロロホルムに難溶。
ｎ−へキサン、水に不溶。
（１２）呈色反応：
陽性：硫酸、ヨウ素
（１３）塩基性、酸性、中性の区別：中性２ ６ ５ｎ
ｍ （ Ｅ３９００） ［発明の効果］ 本発明の生理活性物質３８２２ＡおよびＢは癌培養細胞
に対して増殖抑制作用を有し、また、ある種の真菌およ
びグラム陽性，陰性細菌に対しても増殖抑制作用を有す
るので医薬として有用である。
ｍ （ Ｅ３９００） ［発明の効果］ 本発明の生理活性物質３８２２ＡおよびＢは癌培養細胞
に対して増殖抑制作用を有し、また、ある種の真菌およ
びグラム陽性，陰性細菌に対しても増殖抑制作用を有す
るので医薬として有用である。
［実施例コ
以下、実施例および試験例を挙げて本発明を具体的に説
明する。
明する。
実施例１（３８２２Ａの単離、精製）
（１）１００ｒｄ当り、グルコース２ｇ、酵母エキス０
．２ｇ，硫酸マグネシウム０．０５ｇ，ポリペブトン０
．５ｇ， リン酸−カリ０．１ｇを含む無菌液体培地
にＦ３８２２株を接種し、２８゜Ｃ、９６時間振とう培
養した。次に内容量５０１のジャーファーメンタ−２基
を用いて種培地と同じ組成の無菌培地３０１に前記種培
地０．５１を接種し３０゜Ｃ１ ７２時間通攪拌、培養
した．ク２）培養終了後、２基分の培養液５５２を濾過
し、得られた濾液５（ｌを活性炭素（和光純薬工業株式
会社製）５００ｇに吸着させ、メタノール３ｌにて洗浄
し、その後、酢酸エチルエステル１０１で溶出した。溶
出液は、１１に濃縮し、析出した沈殿物を濾過し、濾液
は無水硫酸ナトリウムで脱水後、更に濃縮し黄色のシロ
ップ状物質４．５ｇを得た。
．２ｇ，硫酸マグネシウム０．０５ｇ，ポリペブトン０
．５ｇ， リン酸−カリ０．１ｇを含む無菌液体培地
にＦ３８２２株を接種し、２８゜Ｃ、９６時間振とう培
養した。次に内容量５０１のジャーファーメンタ−２基
を用いて種培地と同じ組成の無菌培地３０１に前記種培
地０．５１を接種し３０゜Ｃ１ ７２時間通攪拌、培養
した．ク２）培養終了後、２基分の培養液５５２を濾過
し、得られた濾液５（ｌを活性炭素（和光純薬工業株式
会社製）５００ｇに吸着させ、メタノール３ｌにて洗浄
し、その後、酢酸エチルエステル１０１で溶出した。溶
出液は、１１に濃縮し、析出した沈殿物を濾過し、濾液
は無水硫酸ナトリウムで脱水後、更に濃縮し黄色のシロ
ップ状物質４．５ｇを得た。
（３〉 シロップ状物質４．５ｇをメタノール１５ｍ
ｌに溶解し、ｎ−ヘキサンで調製したシリカゲル（商品
名；ワコーゲルＣ−２００，和光純薬工業株式会社製）
を充填した５００ｍＱのカラムに吸着させ、ｎ−ヘキサ
ンー酢酸エチルエステルの混合溶媒を酢酸エチルエステ
ルの濃度を徐々にあげながら（０〜１００％）溶出し、
活性画分を合わせ濃縮乾固し、黄色のシロップ状物質４
００■を得た。
ｌに溶解し、ｎ−ヘキサンで調製したシリカゲル（商品
名；ワコーゲルＣ−２００，和光純薬工業株式会社製）
を充填した５００ｍＱのカラムに吸着させ、ｎ−ヘキサ
ンー酢酸エチルエステルの混合溶媒を酢酸エチルエステ
ルの濃度を徐々にあげながら（０〜１００％）溶出し、
活性画分を合わせ濃縮乾固し、黄色のシロップ状物質４
００■を得た。
（４）前項の黄色のシロップ状物質４００■を、メタノ
ール１０ｍＱに溶解し、メタノールで調製したセファデ
ックスＬＨ−２ ０ Ｃ商品名，ファルマシア社製）を
充填した２００ｍｌｌのカラムを用いて、メタノールで
ゲル濾過を行なった。活性画分を集め、粗粉末１５０■
を得た。
ール１０ｍＱに溶解し、メタノールで調製したセファデ
ックスＬＨ−２ ０ Ｃ商品名，ファルマシア社製）を
充填した２００ｍｌｌのカラムを用いて、メタノールで
ゲル濾過を行なった。活性画分を集め、粗粉末１５０■
を得た。
（５）前項で得られた粗粉末１５０ｒ＋ｇをメタノール
で洗浄し、更にベンゼンで洗浄し、白色粉末９０■を得
た。
で洗浄し、更にベンゼンで洗浄し、白色粉末９０■を得
た。
実施例２（３９２２Ｂの単離、精製）
（１）および（紛は実施例１と同じ。
〈３） シロップ状物質４．５ｇをメタノール１５ｍ
ｌに溶解し、ｎ−ヘキサンで調製したシリカゲル（商品
名；ワフーゲルＣ−２００，和光純薬工業株式会社製）
を充填した５ ０ ０ｍｉｔのカラムに吸着させ、ｎ−
ヘキサンー酢酸エチルエステルの混合溶媒を酢酸エチル
エステルの濃度を徐々にあげながら（０〜１００％）溶
出し、活性画分を合わせ濃縮乾固し、黄色のシロップ状
物質１９０■を得た． （４）前項の黄色のシロップ状物質１９０■を、酢酸エ
チルエステル１０ｍＱに溶解し、ｎ−ヘキサンで調製し
たシリカゲル（商品名；ワコーゲルＣ−２００，和光純
薬工業株式会社製）を充填した９０ｍｌのカラムに吸着
させ、再び、ｎ−ヘキサンー酢酸エチルエステルの混合
溶媒にて溶出し、活性画分を集め、黄色のシロップ状物
質５５■を得た。
ｌに溶解し、ｎ−ヘキサンで調製したシリカゲル（商品
名；ワフーゲルＣ−２００，和光純薬工業株式会社製）
を充填した５ ０ ０ｍｉｔのカラムに吸着させ、ｎ−
ヘキサンー酢酸エチルエステルの混合溶媒を酢酸エチル
エステルの濃度を徐々にあげながら（０〜１００％）溶
出し、活性画分を合わせ濃縮乾固し、黄色のシロップ状
物質１９０■を得た． （４）前項の黄色のシロップ状物質１９０■を、酢酸エ
チルエステル１０ｍＱに溶解し、ｎ−ヘキサンで調製し
たシリカゲル（商品名；ワコーゲルＣ−２００，和光純
薬工業株式会社製）を充填した９０ｍｌのカラムに吸着
させ、再び、ｎ−ヘキサンー酢酸エチルエステルの混合
溶媒にて溶出し、活性画分を集め、黄色のシロップ状物
質５５■を得た。
（５）前項で得られた黄色のシロップ状物質５５■をメ
タノール：水−４５：５５の混液で調製したシリカゲル
（商品名；クロマトレックス ＦｕｊｉＤａｖｉｓｉｏ
ｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｔｄ．製）の５０ｍｌｌのカ
ラムに吸着させ、メタノールー水の混液をメタノールの
濃度を徐々にあげながら（５０〜７０％）溶出し、活性
画分を合わせて濃縮、溶媒除去し、当量の酢酸エチルエ
ステルで２回抽出を行ない、酢酸エチルエステル層を無
水硫酸ナトリウムにて脱水後、濃縮し、黄色の油状物質
３７．７■を得た．この油状物質をクロロホルムに溶解
後、濃縮乾固すると黄色の粉末３７．７■を得た。
タノール：水−４５：５５の混液で調製したシリカゲル
（商品名；クロマトレックス ＦｕｊｉＤａｖｉｓｉｏ
ｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｔｄ．製）の５０ｍｌｌのカ
ラムに吸着させ、メタノールー水の混液をメタノールの
濃度を徐々にあげながら（５０〜７０％）溶出し、活性
画分を合わせて濃縮、溶媒除去し、当量の酢酸エチルエ
ステルで２回抽出を行ない、酢酸エチルエステル層を無
水硫酸ナトリウムにて脱水後、濃縮し、黄色の油状物質
３７．７■を得た．この油状物質をクロロホルムに溶解
後、濃縮乾固すると黄色の粉末３７．７■を得た。
試験例１（各種培養細胞に対する増殖阻害作用）（検体
） 検体１；実施例１で得られた白色粉末１０■をメタノー
ルに溶解し、目的濃度となるように滅菌生理食塩水にて
希釈したものを用いた。
） 検体１；実施例１で得られた白色粉末１０■をメタノー
ルに溶解し、目的濃度となるように滅菌生理食塩水にて
希釈したものを用いた。
検体２；実施例２で得られた黄色粉末１０■をメタノー
ルに溶解し、目的濃度となるように滅菌生理食塩水にて
希釈したものを用いた。
ルに溶解し、目的濃度となるように滅菌生理食塩水にて
希釈したものを用いた。
（試験細胞）
■ Ｐ３８８ マウス白血病
■ Ｌ−１２１０ マウス白血病
■ ＨＬ−６０ ヒト白血病
■ ＫＢ ヒト口腔癌
（使用した培養液）
■ ＲＰＭＩ−１６４０培地
（試験方法）
前記培養液を用いて各種癌細胞を、２Ｘ１０’〜１×１
０ｓ／ｍｆＬとし、直径３５閣の６穴シャーレに２ｍｌ
ｌずつ分注した．次いで目的濃度にあらかじめ希釈した
検体ｓｏＰｆ１を、培養開始と同時に添加した． 試験細胞は、３７゜Ｃ， ５％炭酸ガス培養器内で３〜
４日間培養を続けた後、生細胞を測定し、試料濃度と阻
害率から、ＩＣｓ。値（５０％阻害のための濃度）を求
めた． （結果） 結果は表２に示す． 表２ 試験例２ （各種微生物に対する増殖抑制作用）（検体
） 検体１；実施例１で得られた白色粉末を目的濃度となる
よう＜ＤＭＳＯに溶解し、直径８ｍのペーパーディスク
に溶液をしみこませて使用した。
０ｓ／ｍｆＬとし、直径３５閣の６穴シャーレに２ｍｌ
ｌずつ分注した．次いで目的濃度にあらかじめ希釈した
検体ｓｏＰｆ１を、培養開始と同時に添加した． 試験細胞は、３７゜Ｃ， ５％炭酸ガス培養器内で３〜
４日間培養を続けた後、生細胞を測定し、試料濃度と阻
害率から、ＩＣｓ。値（５０％阻害のための濃度）を求
めた． （結果） 結果は表２に示す． 表２ 試験例２ （各種微生物に対する増殖抑制作用）（検体
） 検体１；実施例１で得られた白色粉末を目的濃度となる
よう＜ＤＭＳＯに溶解し、直径８ｍのペーパーディスク
に溶液をしみこませて使用した。
検体２；実施例２で得られた黄色粉末を目的濃度となる
ようにＤＭＳＯに溶解し、直径ｇｌｌｌｌのぺ一パーデ
ィスクに溶液をしみこませて使用した．（培地） （１）ハートインフユージョン寒天培地（細菌用）ｐＨ
７ ． ４ （２）サブロー寒天培地（真菌用） ｐＨ６．０（試
験方法） 前記寒天培地に、１０”セル／ＴＩＩＩｌに調製した菌
体懸濁液を１％加え、９ｃｍシャーレに１０ｍｌｌを分
注した。寒天に検体を浸みこませたペーパーディスクを
のせ、３０℃、２４〜４８時間培養し、できた阻止円の
直径を測定した． （結果） 結果を表３に示す。
ようにＤＭＳＯに溶解し、直径ｇｌｌｌｌのぺ一パーデ
ィスクに溶液をしみこませて使用した．（培地） （１）ハートインフユージョン寒天培地（細菌用）ｐＨ
７ ． ４ （２）サブロー寒天培地（真菌用） ｐＨ６．０（試
験方法） 前記寒天培地に、１０”セル／ＴＩＩＩｌに調製した菌
体懸濁液を１％加え、９ｃｍシャーレに１０ｍｌｌを分
注した。寒天に検体を浸みこませたペーパーディスクを
のせ、３０℃、２４〜４８時間培養し、できた阻止円の
直径を測定した． （結果） 結果を表３に示す。
第１図は、ＫＢｒ錠にて測定した３８２２ＡのＩＲスペ
クトルを示す。 第２図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ一ｄ．）中
、４００ＭＨｚで測定した３８２２Ａの’Ｈ−ＮＭＲス
ペクトルを示す。 第３図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ一ｄ，）中
、１００ＭＨｚで測定した３８２２Ａの”Ｃ − ＮＭ
Ｒスペクトルを示す。 第４図は、ＫＢｒ錠にて測定した３８２２ＢのＩＲスペ
クトルを示す。 第５図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ一ｄ１）中
、４００ＭＨｚで測定した３８２２Ｂの’Ｈ−ＮＭＲス
ペクトルを示す。 第６図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ．）中
、１００ＭＨｚで測定した３８２２Ｂの”Ｃ−ＮＭＲス
ペクトルを示す。
クトルを示す。 第２図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ一ｄ．）中
、４００ＭＨｚで測定した３８２２Ａの’Ｈ−ＮＭＲス
ペクトルを示す。 第３図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ一ｄ，）中
、１００ＭＨｚで測定した３８２２Ａの”Ｃ − ＮＭ
Ｒスペクトルを示す。 第４図は、ＫＢｒ錠にて測定した３８２２ＢのＩＲスペ
クトルを示す。 第５図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ一ｄ１）中
、４００ＭＨｚで測定した３８２２Ｂの’Ｈ−ＮＭＲス
ペクトルを示す。 第６図は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ．）中
、１００ＭＨｚで測定した３８２２Ｂの”Ｃ−ＮＭＲス
ペクトルを示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる３８２２Ａ物質。 ２）構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる３８２２Ｂ物質。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1147771A JPH0314588A (ja) | 1989-06-09 | 1989-06-09 | 生理活性物質３８２２ａ，ｂ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1147771A JPH0314588A (ja) | 1989-06-09 | 1989-06-09 | 生理活性物質３８２２ａ，ｂ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0314588A true JPH0314588A (ja) | 1991-01-23 |
Family
ID=15437812
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1147771A Pending JPH0314588A (ja) | 1989-06-09 | 1989-06-09 | 生理活性物質３８２２ａ，ｂ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0314588A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013513602A (ja) * | 2009-12-09 | 2013-04-22 | オークランド ユニサービシーズ リミティド | 殺真菌性化合物及びその使用方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4964478A (ja) * | 1972-06-14 | 1974-06-21 | ||
| JPS6010138A (ja) * | 1983-06-30 | 1985-01-19 | Toshiba Corp | 熱流束測定装置 |
| JPS61239127A (ja) * | 1985-04-15 | 1986-10-24 | Natl Space Dev Agency Japan<Nasda> | 熱流束センサ |
-
1989
- 1989-06-09 JP JP1147771A patent/JPH0314588A/ja active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4964478A (ja) * | 1972-06-14 | 1974-06-21 | ||
| JPS6010138A (ja) * | 1983-06-30 | 1985-01-19 | Toshiba Corp | 熱流束測定装置 |
| JPS61239127A (ja) * | 1985-04-15 | 1986-10-24 | Natl Space Dev Agency Japan<Nasda> | 熱流束センサ |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013513602A (ja) * | 2009-12-09 | 2013-04-22 | オークランド ユニサービシーズ リミティド | 殺真菌性化合物及びその使用方法 |
| US9255109B2 (en) | 2009-12-09 | 2016-02-09 | Auckland Uniservices Limited | Fungicidal compounds and methods of their use |
| US10477865B2 (en) | 2009-12-09 | 2019-11-19 | Auckland Uniservices Limited | Fungicidal compounds and methods of their use |
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