JPH0315399A - 体液成分検査用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【産業上の利用分野】

本発明は、血液，リンパ液．尿等の体液中に含まれてい
る病理学的成分を検査する検査体に利用される体液成分
検査用組成物に関する．

【従来の技術】

血液，リンパ液，尿等の体液中に含まれている病理学的
成分を検査することは、疾病の診断や健康管理等におい
て欠かすことの出来ないものであり、各種の検査体を利
用した検査が行なｌ ２ われている． 前記病理学的成分を検査するための従来の検査体は、体
液中の目的とされる含有成分と試薬との間の化学反応に
よる色調の変化を利用するものであったが、近年、酵素
等の生理活性物質を利用する検査方法が、強酸や強アル
カリ等を使用する必要がなく、比較的緩やかな条件の下
で体液中の病理学的成分を検査できるという理由で、多
く利用されるようになっている．例えば、特公昭４５−
　１８７８号公報には、吸湿性材料に対して、液体の酵
素と、過酸化反応の働きを有する物質と，緩衝剤と，オ
ルトトリジンジヒドロ塩化物と，ポリビニルピロリドン
等の共重合体類と、界面活性剤とからなる液体混合物を
含浸さることによって得られるブドウ糖検出用の検査体
が説明されている． 前記従来の検査体は、被検査液中の検査目的物質の含有
量に応じて検査試薬層部分が色調変化するように、水・
アルコール系の混合溶液に酵素と指示薬等とを溶解させ
た溶液を、濾紙等の吸湿性材料に多段階的に含浸させた
後、得られた含浸紙を適当な大きさに切断し、これを検
査体用の基体に貼着させることによって作製されている
．

【発明が解決しようとする課題】

ところで、前記従来の酵素を利用する体液検査体におい
ては、該検査体を得る工程中において、水・アルコール
系の混合溶液に溶解している酵素が不安定であり、時間
の経過によって急速に変質するため，含浸用の溶液を調
製後に直ちに吸湿性材料に多段階含浸させなければなら
なく、その製造工程が煩雑であり、また、良好な試験精
度を有する信頼性のある体液検査体を得るためには、特
別な熟練を要する等の欠点がある． これに対して，本発明は、体液成分検査体を得る際に利
用される体液成分検査用組成物で、その保存性能におい
て極めて優れた作用を奏し，検査精度の高いしかも一定
した品質の体液成分検査体を、極めて容易に得ることの
できる体液成分検査用組成物を提供する．

【課題を解決するための手段】 本発明の体液成分検査用組成物は、体液成分検査体を得
る際に体液成分検査体用の基材に適用されるもので、酵
素等の生理活性物質と結合剤と吸水性の微粒子とを非水
溶媒中に分散，混練させた組成物からなるちのである． 前記構成からなる本発明の体液成分検査用組成物に利用
される各成分について、以下に説明する． よΔｉＬ扛ｌ 体液中に含有される病理学的成分、例えば、グルコース
，コレステロール，尿素．中性脂肪，リン脂質．アンモ
ニア，乳酸，ビルビン酸，シアル酸，　ＧＰＴ　，　Ｇ
ＯＴ　，コリンエステラーゼ，ロイシンアミノベブチタ
ーゼ，アミラーゼ，　ＬＣＡＴ．タレアチンホスホキナ
ーゼ等と反応する例えば酵素等による生理活性物質が利
用され、指示薬に対して色調変化を生ずるもの、あるい
は、前記反応によって生成する物質が、更に別の酵素等
の生理活性物質と反応し、指示薬に対して色調変化を生
ずるものが利用される． 結〕Ｌ削 結合剤は、本発明の体液成分検査用組成物を体液成分検
査体用の基材に固着させ、かつ、前記検査体用の基材に
固着される本発明の組成物が被検査液中に溶出するのを
防止するものであって、特に、前述の体液中に含有され
る病理学的成分並びに本発明の組成物中の他の成分、例
えば、酵素等の生理活性物質等に影響を及ぼすようなこ
とがなく、また、体液成分の検査を妨げることのないも
のが利用されることは勿論である． 結合剤については、前記した条件を満足するものである
か否かをその都度チェックして使用することが望ましい
が，本発明者らの実験では、例えば、ポリアクリル酸エ
ステル，ポリフェニルアセクール，ポリメタクリレート
．ポリアクリルアミド，ポリウレタン，ポリ塩化ビニル
，ポリスチレン，マレイン酸共重合体類，ポリ酢酸ビニ
ル，ポリビニルアルコール，ポリビニルビロリドン等の
合成高分子、メチルセルロース．エチルセルロース，プ
ロビルセルロース等のセルロース誘導体や澱粉エーテル
等の半合成高分子、澱粉，カゼイン．多糖類等の天然高
分子等が利用し得る． なかでも、インブチレンー無水マレイン酸共重合体やス
チレンーマレイン酸共重合体等のマレイン酸系共重合体
を結合剤として利用する場合には、該結合剤の良好な保
形性能と、液体の良好な浸透性とが得られるので、好都
合である． 吸』ｌ１公１０Ｌ± 吸′水性の微粒子は，本発明の体液成分検査用組成物を
検査体用の基材に適用することによって得られる検査区
域層の吸水性および保水性を高め、酵素等の生理活性物
質と指示薬と被検査中の検査目的成分である病理学的成
分との間の反応を円滑に進める作用を奏するものであり
、例えば、シリカ系クレー．炭酸カルシウム，ケイ酸ア
ルミニウム，ガラス，セルロース等の無機質系あるいは
有機質系微粉末が利用される． 本発明の体液成分検査用組成物は、酵素等の生理活性物
質と結合剤と吸水性の微粒子とを必須の成分として含有
する非水溶媒の混線物からなるものであり，前述の必須
の成分に加えて、例えば、緩衝剤や検査区域層の水濡れ
性，発色の均一性等を向上させるためのア二オン系，力
チオン系，非イオン系の界面活性剤等が必要に応じて添
加される． 前記成分の混線に利用される非水溶媒は、例えば、アル
コール類，ケトン類，芳香族系，エステル類，炭化水素
類等の有機溶剤であって、結合剤を溶解し得るの溶剤が
選択，利用される． なお、利用される非水溶媒中に水分が含まれていると、
組成物中の酵素等の生理活性物質の活性が急速に失われ
るので、予め脱水処理されている有機溶剤を利用するの
が好ましく、また、非水溶媒の中でも，メタノールは、
緩やかではあるが生理活性物質の活性を低下させる傾向
を有するので、できれば避ける方が好ましい． なおまた、本発明の体液成分検査用組成物を利用して得
られる体液成分検査体における呈色反応を行なうための
指示薬は、前記体液成分検査用組成物中に必須の成分と
共に含有されていてち良い． この指示薬には、前述の酵素等の生理活性物質が病理学
的成分と共に作用し、その色調が変化するものが利用さ
れる． 酵素等の生理活性物質および指示薬は、病理学的成分検
出用として知られている多くの組み合わせの中から、適
宜選択して利用されるものであり、例えば、グルコース
検出用としては、酵素・・・・・・グルコース才キシダ
ーゼベルオキシダーゼ 指示薬・・・・ペンジジン系 が利用され、グルコースオキシダーゼがグルコースを酸
化し、同時に生じた過酸化水素がベル才キシダーゼの存
在下にベンジジン系の指示薬を変色させるメカニズムが
利用される．また、尿酸検出用としては，ウリカーゼを
作用させ、生成する過酸化水素を、同様にクロモゲンを
配した反応系で発色させるメカニズムが利用される． さらに、コレステロール検出用としては、コレステロー
ルオキシダーゼを作用させ、生成する過酸化水素を、同
様にクロモゲンを配した反応系で発色させるメカニズム
利用される．本発明の体液成分検査用組成物は、生理活
性物質として、例えば、凍結乾燥されている酵素、およ
び必要に応じて添加される緩衝剤、指示薬等を粉砕し、
約２５μ以下の粒子に粉砕した後に、これらの粉砕物と
吸水性の微粒子等とを，結合剤を予め溶解させてある非
水溶媒中に分散．混練することによって容易に得られる
．なお、この分欣．混線の操作は、例えば、高速撹拌Ｉ
Ｉ．サンドミル，ボールミル．ホモゲナイザー，３本ロ
ール，超音波分散機等を利用して行なわれる． 前述の構成からなる本発明の体液成分検査用組成物を適
用する検査体用の基材には、前述の体液中に含有される
病理学的成分並びに本発明の体液成分検査用組成物等に
影響を及ぼすようなことがなく、また、体液検査を妨げ
ることのないちのであればいかなるものであっても良く
、例えば、紙，合成紙，各種のプラスチックフィルム．
これらの２種以上の複合体等が利用される． 前記本発明の体液成分検査用組成物を検査体用の基材に
適用するには、公知の印刷方法を利用するのが便利であ
る． 特に，比較的塗布量が多く、かつ，一定の塗布量で印刷
し得る印刷方法、すなわち、シルクスクリーン印刷，凹
版印刷，グラビア印刷等による印刷方法が好適である． なお、前記体液成分検査用組成物の塗布量は、通常２〜
３０ｇ（固形成分）７ｍ”程度゜に行なわれる．

【作　用】

本発明の体液成分検査用組成物は、体液成分検査体を得
る際に体液成分検査体用の基材に対して適用されるもの
で、酵素等の生理活性物質と結合剤と吸水性の微粒子と
を必須の成分として非水溶媒中に分散、混練させた組成
物からなる． 前記構成による本発明の体液成分検査用組成物は、該組
成物中における酵素等による生理活性物質が、変質し難
く安定しているため、該組成物の保存が可能であり、体
液成分検査体の製造時における組成物の取り扱いが容易
であることによって、品質の良好な体液成分検査体が容
易に得られる． 本発明の体液成分検査用組成物中において、すなわち、
非水溶媒による混線物からなる体液成分検査用組成物中
において、酵素等による生理活性物質が変質し難く、長
期間に亙って安定している理由は明らかではないが、非
水溶媒中における水溶性の生理活性物質は、非水溶媒に
溶解することなく分散状態で存在しているため、生理活
性物質を構成する蛋白質の高次構造および活性部位での
変性を受け難く、仮に、溶媒との界面付近の部位に変性
を受けたとしてち、生理活性物質の内部にまでは溶媒が
浸透し難く、生理活性物質の大部分において活性が損な
われることがないことによるものであると推定される． このことは、非水溶媒と水との混合溶媒中では、酵素等
による生理活性物質の活性が急速に低下する事実によっ
ても裏付けられる．

【実施例】

以下、本発明の体液成分検査用組成物の具体的な構成を
、実施例に基づいて説明し、併せ、該体液成分検査用組
成物による作用、および、該体液成分検査用組成物を利
用して得られた体液検査体の作用を説明する． 実施例ｌ 下記組成の組成物を、ホモミキサーで微細分散させるこ
とによって，本発明の１実施例品たるグルコース検出用
の検査用組成物［ａｌを調整した． グルコースオキシダーゼ・・・・・０．５重量部｛東洋
紡績　（株）　，　Ｇｒａｄｅ　ＩＩ　）ペル才キシダ
ーゼ・・・・・・・・・・・０．１重量部｛東洋紡績　
（株１　，　Ｇｒａｄｅ　ＩＩＩ　｝０−トリジン・・
・・・・・・・・・・・・・０．５重量部ポリオキシチ
レンソルビクン モノオレエート・・・・・１，０重量部イソブチレン／
無水マレイン酸 共重合体・・・・・・・・・・・３．０重量部｛クラレ
インブチレンケミカル， イソバン＃６０｝ ｎ−ブタノール・・・・・・・・・・・・・５０．０重
量部カオリン ４５．０重量部 ［実　　験　　１］ 厚さ３００μの白色ポリスチレンフィ・ルムによる検査
体用の基村上に、前記得られた検査用組成物［ａ］を利
用して、スックリーン印刷法によって、一辺が６１ＩＩ
Ｉ＋の正方形のパターンを印刷した後、８０℃で１時間
の乾燥に付した．なお、前記印刷の際に利用したスクリ
ーン版のメッシュは１００で、レジストとスクリーン紗
との厚さの合計は略１００μである． 次いで、前記白色ポリスチレンフィルムを、略６ｍｍＸ
　Ｉ　Ｏ　Ｏｍ＋ａの短冊状に、かつ，得られる短冊状
片の一方の端部に前記正方形のパターン印刷部が位置す
るようにして裁断し、体液成分検査体を得た． 得られた体液成分検査体を、既知のグルコース濃度を含
有する尿中に手早く浸漬し、３０秒後の色調を観察した
． 結果を第１表に示す． なお、第１表における色調の表示は、ＪＩＳ　Ｚ８７２
ｌによる標準色標による６のである．第　　　　　１　
　　　　　　表 第１表中に表示されている結果から、前記実施例品の体
液成分検査用組成物によって得られた試験体を利用する
ことにより、グルコース濃度０．０５％を含有する尿の
測定が可能であることが明らかである． 比較例ｌ 下記組成の組成物による含浸用溶液［ｂ］を調整した． グルコースオキシダーゼ・・・・・　０．６重量部｛東
洋紡績　｛株１　，　Ｇｒａｄｅ　ＩＩ　｝ペルオキシ
ダーゼ・・・・・・・・・・・｛東洋紡績　（株）， ０．１５重量部 Ｇｒａｄｅ　Ｉ■｝ ０−トリジンニ塩酸塩・・・・・・・ ０．５重量部 クエン酸一クエン酸ナトリウム緩衝液 （ｐｉ｛　＝　５．５１・・・・・・・・・・・・・　
８０重量部ゼラチン水溶液（５重量％）・ ８２．５重量部 蒸留水 ２０　重量部 エチルアルコール・・・・・・・・・・・２３．７重量
部 ［実　　験　　２】 得られた含浸用溶液［ｂｌを、濾紙（東洋ろ次いで、前
記含浸紙を一辺が６ｎ＋ｍの正方形に裁断した後、略６
！ＩＩＩＸ　１　０　０１１１１１の短冊状片をなす白
色ポリスチレンフィルムの一方の端部に、両面接着転写
テープ（スリーエム）を利用して貼着することによって
、体液成分検査体を得た． 比較例２ 下記組成のインキ組成物［ｃｌを調整した．グルコース
オキシダーゼ・・・・・０．４重量部｛東洋紡績　（株
１　，　Ｇｒａｄｅ　ＩＩ　１ペル才キシダーゼ・・・
・・・・・・・・０．・ｌ重量部｛東洋紡績　（株１　
，　Ｇｒａｄｅ　ＩＩＩ　｝０−トリジン・・・・・・
・・・・・・・・・０．５重量部スチレン／マレイン酸
共重合体樹脂溶液｛星光化学工業　（株１　，　Ｘ−１
２０２ＬＬｌ・・・・・・・・・３０．０重量部 ｐｕ緩衝液（ｐＨ＝　７．０１・・・・・・・・・２０
．０重量部エチルアルコール　・・・・・・・・・ｌ５
、８重量部カオリン　　・・・・・・・・・・・・・・
・１５．０重量部〔実　　験　　３］ 厚さ３００μの白色ポリスチレンフイルムによる検査体
用の基村上に、前記得られたインキ組成物［ｃｌによる
一辺が一一の正方形のパターンを印刷した後、４５℃で
２時間の乾燥に付した． なお、前記印刷の際に利用したスクリーン版のメッシュ
はｌ００で、レジストとスクリーン紗との厚さの合計は
略１００μである．次いで、前記白色ボリスチレンフイ
ルムを、略６＋＋＋ｍＸ　Ｉ　Ｏ　Ｏｓｍの短冊状に，
かつ、得られる短冊状片の一方の端部に前記正方形のパ
ターン印刷部が位置するようにして裁断し、体液成分検
査体を得た． ［実　　験　　４】 前述の［実験ｌ】，

【実験２】，［実験３］で得られた
各体液成分検査体を、既知のグルコース濃度を含有する
尿中に手早く浸漬し、それぞれ予め設定されている判定
時間経過時における色調を観察した． 結果を第２表に示す． なお、色調の判定に際しては、各試験体によるグルコー
スによる色調の変化が最も顕著となる経過時間を予め試
験しておき、その時間を判定に要する経過時間として選
択した． 第　　　　　２　　　　　　　表 前記第２表より、実施例ｌの体液成分検査用組成物を利
用して得られた体液成分検査体による検査結果が、優れ
た定量性を有していることが明らかであり、また、発色
後の色調の安定性も良好であった． 実施例２ 前記実施例ｌで得られた体液検査体用組成物［ａｌを調
整した後に、４０℃で１〜７日間放置し、本発明のさら
に別の実施例品である体液検査体用組成物を得た． ［実　　験　　５】 厚さ３００μの白色ポリスチレンフイルムによる検査体
用の基材と、前記得られた体液検査体用組成物とを利用
し、前述の

【実験ｌ】における対応する工程と同一の手
順により、体液成分検査体を得た． 比較例３ 前述の比較例１で得られた含浸用溶液［ｂｌを調整した
後に、４０℃で１〜７日間放置し、比較のための含浸用
溶液を得た．

【実　　験　　６］ 比較例３で得られた含浸用溶液と、濾紙（東洋ろ紙，　
Ｎｏ．５１）とを利用し、前述の［実験２］における対
応する工程と同一の手順により、体液成分検査体を得た
． 比較例４ 前記比較例２で得られたインキ組成物［ｃｌを調整した
後に、４０℃で１〜７日間放置し、比較のための体液成
分検査用組成物を得た．【実　　験　　７】 比較例４で得られた体液成分検査用組成物と厚さ３００
μの白色ポリスチレンフィルムとを利用し、前述の

【実
験３】における対応する工程と同一の手順により、体液
成分検査体を得た．［実　　験　　８】 前述の［実験５】，［実験６】，［実験７］で得られた
各体液成分検査体を、０．５％グルコース溶液中に手早
く浸漬し、それぞれ前述の［実験４］における対応する
判定時間経過時の着色濃度を反射型濃度計で測定し、先
の［実験４］で得られた着色濃度と比較した．

【実験４】で得られた着色濃度を１００としたときの各
体液成分検査体の相対濃度（％）を第３表に示す． 第　　　　　３　　　　　　　表 傘・・・・・インキのゲノレ化によって検査体の作成が
不可能 第３表に示される結果より，実施例２による体液成分検
査用組成物を利用して得られた体液成分検査体は、検査
用組成物の調整直後でなくても，品質の変わらない検査
体となるが、比較例３〜４による含浸用溶液やインキ組
成物を利用して得られた体液成分検査体は、含浸用溶液
やインキ組成物を調整直後に検査体用の基材に適用する
ことによって製造された検査体と比較して、その保存時
間が長くなるに従って，得られる体液成分検査体の品質
が低下することが明らかである．

【発明の効果】

本発明の体液成分検査体用組成物は、前記実施例および
比較例に基づく実験によって明らかなように、その保存
安定性が極めて良好であり、かつ、該組成物によって形
成される検査区域層の呈色反応が、被検査液中の含有量
に対応して明瞭であり、稍密な検査結果が手軽に得られ
る体液成分検査体となる． また、本発明の体液成分検査用組成物は、検査体用の基
材に対して、通常の印刷手段によって適用し得るもので
あるため、該組成物を利用する際の体液成分検査体の製
造がきわめて簡単であり、品質の良好な製品が工業的規
模で大量生産し得る．

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 生理活性物質と結合剤と吸水性の微粒子とを非水溶媒中
   に分散、混練させた組成物からなることを特徴とする体
   液成分検査用組成物。