JPH03157336A - 細胞成長阻害物質として有用なスフィンゴシンおよびｎ―メチル―スフィンゴシン - Google Patents
細胞成長阻害物質として有用なスフィンゴシンおよびｎ―メチル―スフィンゴシンInfo
- Publication number
- JPH03157336A JPH03157336A JP2025010A JP2501090A JPH03157336A JP H03157336 A JPH03157336 A JP H03157336A JP 2025010 A JP2025010 A JP 2025010A JP 2501090 A JP2501090 A JP 2501090A JP H03157336 A JPH03157336 A JP H03157336A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sphingosine
- cell growth
- pharmaceutically acceptable
- sphingolipids
- acceptable salts
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 139
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 title claims abstract description 136
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 104
- PTGGMPLMNDBPGB-CXISOLTFSA-N n-[(e,2s,3r)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]formamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@H](CO)NC=O PTGGMPLMNDBPGB-CXISOLTFSA-N 0.000 title claims abstract description 94
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 claims abstract description 160
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 112
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims abstract description 99
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 76
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 67
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 63
- YRXOQXUDKDCXME-YIVRLKKSSA-N N,N-dimethylsphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@H](CO)N(C)C YRXOQXUDKDCXME-YIVRLKKSSA-N 0.000 claims abstract description 59
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 40
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims abstract description 33
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 claims abstract description 24
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims abstract description 16
- 239000002257 antimetastatic agent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 142
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 133
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 56
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 56
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 42
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 36
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 32
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 32
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 25
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 claims description 24
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 claims description 21
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 claims description 18
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 claims description 18
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 17
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims description 17
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 15
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 15
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 claims description 13
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 11
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 11
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 7
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 claims description 7
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000002683 reaction inhibitor Substances 0.000 claims 8
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 25
- GOFULTXVCBGMEW-OHTUTNNSSA-N C(=O)N([C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC)C=O.C(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC Chemical compound C(=O)N([C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC)C=O.C(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC GOFULTXVCBGMEW-OHTUTNNSSA-N 0.000 abstract 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 20
- 150000003410 sphingosines Chemical class 0.000 description 20
- BLTCBVOJNNKFKC-QUDYQQOWSA-N N-acetylsphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O BLTCBVOJNNKFKC-QUDYQQOWSA-N 0.000 description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 15
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 12
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 11
- 210000005104 human peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 9
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZKVKFPZCVMFTCI-CWFJQSRLSA-N (E,3R,4R)-3-amino-2,4-dihydroxynonadec-5-enal Chemical compound C(=O)C(O)[C@H](N)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC ZKVKFPZCVMFTCI-CWFJQSRLSA-N 0.000 description 8
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 8
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 7
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 7
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 7
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 7
- JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N (2r)-2-hydroxy-n-[(2s,3r,4e,8e)-3-hydroxy-9-methyl-1-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoctadeca-4,8-dien-2-yl]heptadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)C(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CC\C=C(/C)CCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N cerebroside D Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC)COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 5
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 4
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 4
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 238000006140 methanolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004201 Ceramidases Human genes 0.000 description 3
- 108090000751 Ceramidases Proteins 0.000 description 3
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000002966 varnish Substances 0.000 description 3
- JKBAAUMLHIUPKO-AWHXWDPHSA-N 2-[(E,1R,2R)-1-amino-2-hydroxyheptadec-3-enyl]-2-hydroxypropanedial Chemical compound C(=O)C(O)([C@H](N)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)C=O JKBAAUMLHIUPKO-AWHXWDPHSA-N 0.000 description 2
- -1 C-kinase Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 238000005684 Liebig rearrangement reaction Methods 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 description 2
- 150000001784 cerebrosides Chemical class 0.000 description 2
- ISNBJLXHBBZKSL-UHFFFAOYSA-N ethyl n-[2-(1,3-benzothiazole-2-carbonylamino)thiophene-3-carbonyl]carbamate Chemical compound C1=CSC(NC(=O)C=2SC3=CC=CC=C3N=2)=C1C(=O)NC(=O)OCC ISNBJLXHBBZKSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 2
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- NVNPEYQWKCQBBU-ADMXJUBYSA-N (2r,4s,5r,6r)-2-[(2s,3s,4r,5r,6s)-2-[(2r,3s,4s,5s,6s)-3-acetamido-2-[(2s,3r,4s,5s,6r)-4-[(2r,4s,5r,6r)-5-amino-2-carboxy-4-hydroxy-6-(1,2,3-trihydroxypropyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(e)-3-hydroxy-1-(octadecanoyl Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(CNC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@]2(O[C@H]([C@H](N)[C@@H](O)C2)C(O)C(O)CO)C(O)=O)[C@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@@H]3[C@H]([C@H](O[C@@]4(O[C@H]([C@H](N)[C@@H](O)C4)C(O)C(O)O[C@@]4(O[C@H]([C@H](N)[C@@H](O)C4)C(O)C(O)CO)C(O)=O)C(O)=O)[C@H](O)[C@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@H](CO)O1 NVNPEYQWKCQBBU-ADMXJUBYSA-N 0.000 description 1
- MQKSCOKUMZMISB-GPWKTZPCSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(e,2s,3r)-2-amino-3-hydroxyoctadec-4-enoxy]-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@H](N)[C@H](O)/C=C/CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MQKSCOKUMZMISB-GPWKTZPCSA-N 0.000 description 1
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- AFSHUZFNMVJNKX-LLWMBOQKSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC AFSHUZFNMVJNKX-LLWMBOQKSA-N 0.000 description 1
- AFSHUZFNMVJNKX-CLFAGFIQSA-N 1,2-dioleoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC AFSHUZFNMVJNKX-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- XPDYLGZWYWKOFM-PPQGUHKJSA-N N-[(E,2S,3R)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]-N-formylformamide Chemical class CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@H](CO)N(C=O)C=O XPDYLGZWYWKOFM-PPQGUHKJSA-N 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- BLAKAEFIFWAFGH-UHFFFAOYSA-N acetyl acetate;pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1.CC(=O)OC(C)=O BLAKAEFIFWAFGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 description 1
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000031990 negative regulation of inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 229940070376 protein Drugs 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000006485 reductive methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 108700026239 src Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003760 tallow Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Oncology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、一部はある種の蛋白質キナーゼの阻害による
が、その他はまた未だ探求されていないメカニズムによ
る細胞成長の阻害物質に関する。
が、その他はまた未だ探求されていないメカニズムによ
る細胞成長の阻害物質に関する。
特に、本発明は、Ｎ−メチル−スフィンゴシンおよびス
フィンゴシンが、腫瘍細胞、免疫応答に係わる細胞、炎
症反応に係わる細胞などの多くの細胞の成長に対して特
に強力な阻害物質であるという本発明者の最近の研究結
果に関する。この知見から、上記のような細胞の有効な
成長阻害物質としてこれらの化合物を用いる可能性が示
される。
フィンゴシンが、腫瘍細胞、免疫応答に係わる細胞、炎
症反応に係わる細胞などの多くの細胞の成長に対して特
に強力な阻害物質であるという本発明者の最近の研究結
果に関する。この知見から、上記のような細胞の有効な
成長阻害物質としてこれらの化合物を用いる可能性が示
される。
特にことわらない限り、″スフィンゴシン“とは、Ｄ一
体またはＬ一体或いはエリスロ一体またはトレオ一体の
立体構造とは関係なく、全ての“スフィンゴシン″を意
味する。また、特にことわらない限り、“Ｎ−メチル−
スフィンゴシン“とけ、Ｄ一体またはＬ一体或いはエリ
スロ一体またはトレオ一体の立体構造とは関係なく、Ｎ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンまたはＮ−モノメチル
−スフィンゴシンをいう。
体またはＬ一体或いはエリスロ一体またはトレオ一体の
立体構造とは関係なく、全ての“スフィンゴシン″を意
味する。また、特にことわらない限り、“Ｎ−メチル−
スフィンゴシン“とけ、Ｄ一体またはＬ一体或いはエリ
スロ一体またはトレオ一体の立体構造とは関係なく、Ｎ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンまたはＮ−モノメチル
−スフィンゴシンをいう。
従来技術
スフィンゴシンおよびスフィンゴイド塩基は、Ｃ−キナ
ーゼおよびＥＧＦレセプター関連チロシンキナーゼの阻
害物質として認められている（ハンナン（ＩＩａｎｎ、
ｕｎ）およびベル（Ｂｅｌｌ）、サイエンス（Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ）、 ２３５．６７０−６７４．１９８７ ；
ハンナン（ｌｌａｎｎｕｎ）ら、ジャーナル オブ
バイオロジカルケミストリー（ＪＢＣ）、 ２６１．１
２６０４−１２６０９．１９８６ 。
ーゼおよびＥＧＦレセプター関連チロシンキナーゼの阻
害物質として認められている（ハンナン（ＩＩａｎｎ、
ｕｎ）およびベル（Ｂｅｌｌ）、サイエンス（Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ）、 ２３５．６７０−６７４．１９８７ ；
ハンナン（ｌｌａｎｎｕｎ）ら、ジャーナル オブ
バイオロジカルケミストリー（ＪＢＣ）、 ２６１．１
２６０４−１２６０９．１９８６ 。
クロイタ−（Ｋｒａｕｔｔｅｒ）ら、 ＪＢＣ，２６２
，１６３２−１８３７゜１９８７ ）。しかしながら、
これらの研究においては、用いられたスフィンゴシンは
市販のもの（シグマ ケミカル社（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｃ
ｎ＋１ｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ））であった。該製剤は
、３−Ｏ−メチル−スフィンコシン、５−０−メチル−
スフィンゴシン、Ｎ−メチル−スフィンゴシンなどの種
々の不純物質を含有していた。何故ならば、市販のスフ
ィンゴシンは、スフィンゴミエリンまたはセレブロシド
をメタノール分解した後に製造され、上記の不純物質が
メタノール分解中に混じるからである。更に、スフィン
ゴシンの基本骨格（ｂａｃｋｂｏｎｅ ５ｔｒｕｃｔｕ
ｒｅ）、即ちＤ−エリスロ一体は、Ｄ−ルオ構造に部分
的に変換される。従って、これらの変換および市販のス
フィンゴシンに存在する種々の構造のために、スフィン
ゴシンがＣ−キナーゼおよびＥＧＦ−レセプターキナー
ゼの重要な阻害物質であるとの主張は十分に確認された
ものとはいえない。
，１６３２−１８３７゜１９８７ ）。しかしながら、
これらの研究においては、用いられたスフィンゴシンは
市販のもの（シグマ ケミカル社（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｃ
ｎ＋１ｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ））であった。該製剤は
、３−Ｏ−メチル−スフィンコシン、５−０−メチル−
スフィンゴシン、Ｎ−メチル−スフィンゴシンなどの種
々の不純物質を含有していた。何故ならば、市販のスフ
ィンゴシンは、スフィンゴミエリンまたはセレブロシド
をメタノール分解した後に製造され、上記の不純物質が
メタノール分解中に混じるからである。更に、スフィン
ゴシンの基本骨格（ｂａｃｋｂｏｎｅ ５ｔｒｕｃｔｕ
ｒｅ）、即ちＤ−エリスロ一体は、Ｄ−ルオ構造に部分
的に変換される。従って、これらの変換および市販のス
フィンゴシンに存在する種々の構造のために、スフィン
ゴシンがＣ−キナーゼおよびＥＧＦ−レセプターキナー
ゼの重要な阻害物質であるとの主張は十分に確認された
ものとはいえない。
しかしながら、スフィンゴシンおよびスフィンゴイド塩
基の潜在的な細胞成長変化活性および細胞成長を調整す
るためのこれらの化合物の適用可能性の故に、この分野
は、興味深い研究分野となっている。
基の潜在的な細胞成長変化活性および細胞成長を調整す
るためのこれらの化合物の適用可能性の故に、この分野
は、興味深い研究分野となっている。
従って、合成的に製造されたおよび／または天然で産生
されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン、
スフィンゴシン塩基および／またはその誘導体が、種々
の細胞に対して強い作用を有することを疑問の余地なく
明らかにすることが望まれている。その結果、これらの
化合物の細胞成長の調整への具体的適用が確認され、実
際の目的に使用できる。
されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン、
スフィンゴシン塩基および／またはその誘導体が、種々
の細胞に対して強い作用を有することを疑問の余地なく
明らかにすることが望まれている。その結果、これらの
化合物の細胞成長の調整への具体的適用が確認され、実
際の目的に使用できる。
発明の開示
従って、本発明の一つの目的は、合成され十分に確認さ
れている化合物を用いるか、或いは天然に生産されるス
フィンゴ脂質から製造された化合物を用いるかして得ら
れたスフィンゴシン、スフィンゴイド塩基および／また
はそれらの誘導体の細胞成長調整活性についての情報を
提供することにある。
れている化合物を用いるか、或いは天然に生産されるス
フィンゴ脂質から製造された化合物を用いるかして得ら
れたスフィンゴシン、スフィンゴイド塩基および／また
はそれらの誘導体の細胞成長調整活性についての情報を
提供することにある。
本発明の他の目的は、広い範囲の細胞タイプに対する強
い成長阻害活性を有するこれらの化合物の誘導体のイン
ビトロの適用を提供することにある。
い成長阻害活性を有するこれらの化合物の誘導体のイン
ビトロの適用を提供することにある。
本発明の上記目的および他の目的は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的、に
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供するこ
とにより、達成される。
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供するこ
とにより、達成される。
また本発明は、
（１）合成的に製造、されたスフィンゴシン、合成的に
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物腫瘍の成長阻害剤を提供する
。
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物腫瘍の成長阻害剤を提供する
。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボでのヒトおよび動物腫瘍の転移阻害
剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボでのヒトおよび動物腫瘍の転移阻害
剤を提供する。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２〉薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形を含
有する、少くとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒ
トおよび動物の免疫応答阻害剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２〉薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形を含
有する、少くとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒ
トおよび動物の免疫応答阻害剤を提供する。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少くとも一部は顆粒球および／またはリン
パ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻害
剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少くとも一部は顆粒球および／またはリン
パ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻害
剤を提供する。
さらに、一つの実施態様において、本発明は、ヒトまた
は動物細胞を、合成的に製造されたスフィンゴシン、合
成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそ
の薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質
の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させるこ
とを含む該細胞の成長を阻害する方法をも提供する。
は動物細胞を、合成的に製造されたスフィンゴシン、合
成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそ
の薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質
の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させるこ
とを含む該細胞の成長を阻害する方法をも提供する。
また本発明は、ヒトまたは動物腫瘍を、合成的に製造さ
れたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ−メチル−
スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩か
ら選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細
胞成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける
該腫瘍の成長を阻害する方法を提供する。
れたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ−メチル−
スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩か
ら選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細
胞成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける
該腫瘍の成長を阻害する方法を提供する。
また本発明は、ヒトまたは動物腫瘍を、合成的に製造さ
れたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ−メチル−
スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩か
ら選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細
胞成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける
該腫瘍の転移を阻害する方法を提供する。
れたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ−メチル−
スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩か
ら選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細
胞成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける
該腫瘍の転移を阻害する方法を提供する。
また本発明は、リンパ球を、合成的に製造されたスフィ
ンゴシン、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害
量と接触させることを含む、少なくとも一部はリンパ球
有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答を阻害す
る方法を提供する。
ンゴシン、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害
量と接触させることを含む、少なくとも一部はリンパ球
有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答を阻害す
る方法を提供する。
また本発明は、顆粒球および／またはリンパ球を、合成
的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容
される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２
種以上の細胞成長阻害量と接触させることを含む、少な
くとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分裂誘
発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方法を提
供する。
的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容
される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２
種以上の細胞成長阻害量と接触させることを含む、少な
くとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分裂誘
発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方法を提
供する。
好ましい実施態様において、成長阻害物質としては、合
成的に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−ス
フィンゲニン、合成的にｆＪＪ造されたＮ、Ｎ−’、；
メチルーＬ−エリスロ−スフィンゲニン、それらの薬学
的に許容される塩などが挙げられる。その内特に好まし
いものは、合成的に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−
エリスロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容され
る塩である。
成的に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−ス
フィンゲニン、合成的にｆＪＪ造されたＮ、Ｎ−’、；
メチルーＬ−エリスロ−スフィンゲニン、それらの薬学
的に許容される塩などが挙げられる。その内特に好まし
いものは、合成的に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−
エリスロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容され
る塩である。
さらに別の一実施態様において、本発明は、（１）天然
に産生されるスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシ
ン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−
メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容さ
れる塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種
以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供する。
に産生されるスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシ
ン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−
メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容さ
れる塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種
以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供する。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍成長
阻害剤を提供する。
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍成長
阻害剤を提供する。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍転移
阻害剤を提供する。
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍転移
阻害剤を提供する。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量 （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも１部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答阻害剤を提供する。
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量 （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも１部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答阻害剤を提供する。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも１部は顆粒球および／またはリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻
害剤を提供する。
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも１部は顆粒球および／またはリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻
害剤を提供する。
さらに別の一実施態様において、本発明は、ヒトまたは
動物細胞を、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得ら
れたスフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質
から得られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれら
の薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質
の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させるこ
とを含む該細胞の成長を阻害する方法を提供する。
動物細胞を、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得ら
れたスフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質
から得られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれら
の薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質
の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させるこ
とを含む該細胞の成長を阻害する方法を提供する。
また本発明は、ヒトまたは動物腫瘍を、天然に産生され
るスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシン、天然に
産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−メチル−ス
フィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から
選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞
成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける該
腫瘍の成長を阻害する方法を提供する。
るスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシン、天然に
産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−メチル−ス
フィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から
選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞
成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける該
腫瘍の成長を阻害する方法を提供する。
また本発明は、ヒトまたは動物腫瘍を、天然に産生され
るスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシン、天然に
産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−メチル−ス
フィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から
選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞
成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける該
腫瘍の転移を阻害する方法を提供する。
るスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシン、天然に
産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−メチル−ス
フィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から
選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞
成長阻害量と接触させることを含むインビボにおける該
腫瘍の転移を阻害する方法を提供する。
また本発明は、リンパ球を、天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から得られたスフィンゴシン、天然に産生される
スフィンゴ脂質から得られたＮ−メチル−スフィンゴシ
ンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた細
胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害量
と接触させることを含む、少なくとも一部はリンパ球有
糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答を阻害する
方法を提供する。
ゴ脂質から得られたスフィンゴシン、天然に産生される
スフィンゴ脂質から得られたＮ−メチル−スフィンゴシ
ンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた細
胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害量
と接触させることを含む、少なくとも一部はリンパ球有
糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答を阻害する
方法を提供する。
また本発明は、顆粒球および／またはリンパ球を、天然
に産生されるスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシ
ン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−
メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容さ
れる塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種
以上の細胞成長阻害量と接触させることを含む、少なく
とも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分裂誘発
によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方法を提供
する。
に産生されるスフィンゴ脂質から得られたスフィンゴシ
ン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ−
メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容さ
れる塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種
以上の細胞成長阻害量と接触させることを含む、少なく
とも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分裂誘発
によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方法を提供
する。
好ましい実施態様において、細胞成長阻害剤としては、
天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−
ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴシン、
それらの薬学的に許容される塩などが用いられる。特に
好ましいのは、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ。
天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−
ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴシン、
それらの薬学的に許容される塩などが用いられる。特に
好ましいのは、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ。
Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許容
される塩である。
される塩である。
本明細書において、′スフィンゴシン“とは、Ｄ体また
はＬ体或いはエリスロ体またはトレオ体の立体構造とは
無関係に、スフィンゴシンを意味する。
はＬ体或いはエリスロ体またはトレオ体の立体構造とは
無関係に、スフィンゴシンを意味する。
本明細書において、“Ｎ−メチル−スフィンゴシン”と
は、Ｄ体またはＬ体或いはエリスロ体またはトレオ体の
立体構造とは無関係に、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴ
シンまたはＮ−モノメチル−スフィンゴシンを意味する
。
は、Ｄ体またはＬ体或いはエリスロ体またはトレオ体の
立体構造とは無関係に、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴ
シンまたはＮ−モノメチル−スフィンゴシンを意味する
。
本明細書において、“阻害する“とは、“妨げるおよび
／または遅らせる″ことを意味する。
／または遅らせる″ことを意味する。
さらに、本明細書において、“合成的に製造され（得ら
れ）だ″Ｎ−メチルースフィンゴシンとは、合成的に製
造されたスフィンゴシン基本性格から製造された（即ち
基本構造が合成化合物である）Ｎ−メチル−スフィンゴ
シンを意味する。
れ）だ″Ｎ−メチルースフィンゴシンとは、合成的に製
造されたスフィンゴシン基本性格から製造された（即ち
基本構造が合成化合物である）Ｎ−メチル−スフィンゴ
シンを意味する。
“天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造され（得ら
れ）た“Ｎ−メチル−スフィンゴシンとは、スフィンゴ
ミエリン、セレブロシドなどの天然に産生されるスフィ
ンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンを
意味する。
れ）た“Ｎ−メチル−スフィンゴシンとは、スフィンゴ
ミエリン、セレブロシドなどの天然に産生されるスフィ
ンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンを
意味する。
スフィンゴシンが、Ｃ−キナーゼ、ＥＧＦ−レセプター
キナーゼなどの蛋白質キナーゼの重要な阻害物質であり
、従って細胞成長を阻害するための潜在的候補物質とな
り得るか否かに関しての不明確さを解消するために、本
発明者は、第１図に示すように、合成的に製造された化
学的に十分にわかっているＤ−およびＬ−エリスロー並
びにトレオースフィンゴシンおよびそのＮ、Ｎ−ジメチ
ル誘導体並びに天然に産生ずるスフィンゴ脂質から製造
されたスフィンゴシンを用いて、これらの化合物の蛋白
質キナーゼの阻害活性を評価した。
キナーゼなどの蛋白質キナーゼの重要な阻害物質であり
、従って細胞成長を阻害するための潜在的候補物質とな
り得るか否かに関しての不明確さを解消するために、本
発明者は、第１図に示すように、合成的に製造された化
学的に十分にわかっているＤ−およびＬ−エリスロー並
びにトレオースフィンゴシンおよびそのＮ、Ｎ−ジメチ
ル誘導体並びに天然に産生ずるスフィンゴ脂質から製造
されたスフィンゴシンを用いて、これらの化合物の蛋白
質キナーゼの阻害活性を評価した。
化学的によくわかっている合成的に製造されたスフィン
ゴシンの立体異性体およびその誘導体について、Ａ４１
３細胞（ヒト表皮癌細胞）から得られたＣ−キナーゼ活
性に対する効果の比較を第２図、第３図、第１表および
第ｎ表に示す（実施例２を参照）。
ゴシンの立体異性体およびその誘導体について、Ａ４１
３細胞（ヒト表皮癌細胞）から得られたＣ−キナーゼ活
性に対する効果の比較を第２図、第３図、第１表および
第ｎ表に示す（実施例２を参照）。
また、本発明者の一人は、ＳＲＣ腫瘍遺伝子キナーゼ活
性が、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシンにより阻害されることを観察した。
性が、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシンにより阻害されることを観察した。
下記の結論が得られた：
１、Ｄ−エリスロおよびＬ−エリスロ−スフィンゲニン
は、弱い類似の阻害活性を示した。
は、弱い類似の阻害活性を示した。
２、合成的に製造されたＮ、 Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよび天然に生産されるスフィン
ゴ脂質から製造されたスフィンゴシンのみが、Ｃ−キナ
ーゼに対する極めて強い阻害活性を示した。合成的に製
造されたＮ、 Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィ
ンゲニンは、より弱い阻害活性を示したが、遊離アミノ
基を持つ非置換スフィンゲニンに比べてより強い阻害活
性を示した。
スロ−スフィンゲニンおよび天然に生産されるスフィン
ゴ脂質から製造されたスフィンゴシンのみが、Ｃ−キナ
ーゼに対する極めて強い阻害活性を示した。合成的に製
造されたＮ、 Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィ
ンゲニンは、より弱い阻害活性を示したが、遊離アミノ
基を持つ非置換スフィンゲニンに比べてより強い阻害活
性を示した。
３、合成的に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニンは、Ｎ−アセチル−ＧＭ、 、Ｎ−
グリコリル−ＧＭ、およびＧＤ、、ガングリオシドより
も阻害活性が高いが、最も阻害活性が高いガングリオシ
ドＧＴ１゜と類似の範囲にある阻害活性を示した。
ロ−スフィンゲニンは、Ｎ−アセチル−ＧＭ、 、Ｎ−
グリコリル−ＧＭ、およびＧＤ、、ガングリオシドより
も阻害活性が高いが、最も阻害活性が高いガングリオシ
ドＧＴ１゜と類似の範囲にある阻害活性を示した。
４、上記から類推すると、合成的に製造されたＮ、Ｎ−
ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィンゲニンおよび合成的
に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィ
ンゲニンは、ＥＧＦレセプターキナーゼに対する類似の
活性を有することが予想される。
ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィンゲニンおよび合成的
に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィ
ンゲニンは、ＥＧＦレセプターキナーゼに対する類似の
活性を有することが予想される。
５、上記から類推すると、合成的に製造されたスフィン
ゴシンは、Ｃ−キナーゼを阻害することが予想される。
ゴシンは、Ｃ−キナーゼを阻害することが予想される。
Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィンゲニン、Ｎ
−メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンなどの合成的
に製造されたＮ−メチル−スフィンゲニンは、対応する
メチル化されていないスフィンゴシン（例えば、それぞ
れＤ（＋）−エリスロ−スフィンゲニンおよびＬ （−
）−エリスロ−スフィンゲニン）をホルムアルデヒドお
よび水素化ホウ素ナトリウムの存在下に還元メチル化す
ることを含む公知の方法（ミーンズ（Ｍｅａｎｓ）およ
びフィーニイ（Ｆｅｅｎｅｙ）、バイオケミストリー（
Ｂｉｏｃｈｅｍｌｓｔｒｙ）、７ 、２１９２．１９６
８ 、 “蛋白質の化学的修飾（Ｃｈｅｍｉｃａｌ
１４ｏｄ１ｆ’Ｉｅａｔ１ｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ） ” 、 ホールデンーデイ、インコーポ
レーティド（Ｉｌｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ、 Ｉｎｃ、）、
サンフランシスコ、ｐ２１７．１９７１ ）により製造
できる。得れらた合成的に製造されたＮ。
−メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンなどの合成的
に製造されたＮ−メチル−スフィンゲニンは、対応する
メチル化されていないスフィンゴシン（例えば、それぞ
れＤ（＋）−エリスロ−スフィンゲニンおよびＬ （−
）−エリスロ−スフィンゲニン）をホルムアルデヒドお
よび水素化ホウ素ナトリウムの存在下に還元メチル化す
ることを含む公知の方法（ミーンズ（Ｍｅａｎｓ）およ
びフィーニイ（Ｆｅｅｎｅｙ）、バイオケミストリー（
Ｂｉｏｃｈｅｍｌｓｔｒｙ）、７ 、２１９２．１９６
８ 、 “蛋白質の化学的修飾（Ｃｈｅｍｉｃａｌ
１４ｏｄ１ｆ’Ｉｅａｔ１ｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ） ” 、 ホールデンーデイ、インコーポ
レーティド（Ｉｌｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ、 Ｉｎｃ、）、
サンフランシスコ、ｐ２１７．１９７１ ）により製造
できる。得れらた合成的に製造されたＮ。
Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンまたはスフィンゲニン誘
導体は、ＴＬＣまたはＨＰＬＣにより精製できる。Ｎ−
モノメチル誘導体は、基本骨格スフィンゲニンを出発物
質とし、Ｎ −ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル化（
ジーｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート−ＮａＨＣＯ３）
、Ｏ−アセチル化（無水酢酸−ピリジン）、Ｎ−メチ
ル化（ヨウ化メチル−水素化ナトリウム−ジメチルホル
ムアルデヒド）および脱保護を続けて行うことにより、
合成された。得られた化合物もまたＴＬＣまたはＨＰＬ
Ｃにより精製された。
導体は、ＴＬＣまたはＨＰＬＣにより精製できる。Ｎ−
モノメチル誘導体は、基本骨格スフィンゲニンを出発物
質とし、Ｎ −ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル化（
ジーｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート−ＮａＨＣＯ３）
、Ｏ−アセチル化（無水酢酸−ピリジン）、Ｎ−メチ
ル化（ヨウ化メチル−水素化ナトリウム−ジメチルホル
ムアルデヒド）および脱保護を続けて行うことにより、
合成された。得られた化合物もまたＴＬＣまたはＨＰＬ
Ｃにより精製された。
合成的に製造された基本骨格スフィンゲニン・、即ちＤ
（＋）−エリスロ−スフィンゲニンおよびＬ（−）−
エリスロ−スフィンゲニンは、Ｌ−セリンを出発物質と
するか（ラデュンツ エイチーイー（Ｒａｄｕｎｚ ｔ
（−Ｅ）、デヴアント アール エム（Ｄｅｖａｎｔ
ＲＭ）、 アイチーマン ケイ（ＥｌｅｒｍａｎｎＶ）
、 Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ Ｃｈｅｗ、 １１０３−
１１０５．１９８８ ；エムカー ニス（Ｎｌｍｋａ
ｒ Ｓ）、メナルディノ デイ（Ｍｅｎａｌｄ４ｎｏ
Ｄ） 、メリル ニー エイチ（Ｍｅｒｒｉｌｌ Ａ
Ｈ） 、リオッタ デイ（Ｌｉｏｔｔａ Ｄ）、テトラ
ヘドロン レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔ
ｔ） 。
（＋）−エリスロ−スフィンゲニンおよびＬ（−）−
エリスロ−スフィンゲニンは、Ｌ−セリンを出発物質と
するか（ラデュンツ エイチーイー（Ｒａｄｕｎｚ ｔ
（−Ｅ）、デヴアント アール エム（Ｄｅｖａｎｔ
ＲＭ）、 アイチーマン ケイ（ＥｌｅｒｍａｎｎＶ）
、 Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ Ｃｈｅｗ、 １１０３−
１１０５．１９８８ ；エムカー ニス（Ｎｌｍｋａ
ｒ Ｓ）、メナルディノ デイ（Ｍｅｎａｌｄ４ｎｏ
Ｄ） 、メリル ニー エイチ（Ｍｅｒｒｉｌｌ Ａ
Ｈ） 、リオッタ デイ（Ｌｉｏｔｔａ Ｄ）、テトラ
ヘドロン レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔ
ｔ） 。
２９、３０３７−３０４０．１９８８ ； ヘｏルド
ビー（）ｌｅｒｏ）ｄＰ）、ｔｌｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃ
ｈｌｍｌｃａ Ａｃｔａ、 ７１．３５４−３６２゜１
９８８ ） 、或いはＤ−グルコースを出発物質とする
（コイケ ケイ（Ｋｏｉｋｅ Ｋ）ら、カーボヒドレー
ト リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅ５ｅａ
ｒｃｈ） ；コイケケイら、“Ｄ−グルコーズからのセ
ラミドの能率的な合成（Ａｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ５
ｙｎｔｈｅｓ１ｓ ｏｆｃｅｒａｍｌｄｅ ｆｒｏｍ
Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ） ” 、グリココンジュゲート
ジャーナル（Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｊｏｕｒ
ｎａｌ）、１．１０７−１０９．１９８４ ’）ことに
より、種々の公知方法で製造できる。スフィンゴシンお
よびＮ−メチル誘導体の構造は、ＮＭＲスペクトル分析
、ファブ質量分析（ｆａｓｔ ａｔｏｍ ｂｏｍｂａｒ
ｄｍｅｎｔ ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏａ＋ｅｔｒｙ）に
より確認できる。
ビー（）ｌｅｒｏ）ｄＰ）、ｔｌｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃ
ｈｌｍｌｃａ Ａｃｔａ、 ７１．３５４−３６２゜１
９８８ ） 、或いはＤ−グルコースを出発物質とする
（コイケ ケイ（Ｋｏｉｋｅ Ｋ）ら、カーボヒドレー
ト リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅ５ｅａ
ｒｃｈ） ；コイケケイら、“Ｄ−グルコーズからのセ
ラミドの能率的な合成（Ａｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ５
ｙｎｔｈｅｓ１ｓ ｏｆｃｅｒａｍｌｄｅ ｆｒｏｍ
Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ） ” 、グリココンジュゲート
ジャーナル（Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｊｏｕｒ
ｎａｌ）、１．１０７−１０９．１９８４ ’）ことに
より、種々の公知方法で製造できる。スフィンゴシンお
よびＮ−メチル誘導体の構造は、ＮＭＲスペクトル分析
、ファブ質量分析（ｆａｓｔ ａｔｏｍ ｂｏｍｂａｒ
ｄｍｅｎｔ ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏａ＋ｅｔｒｙ）に
より確認できる。
スフィンゴシンおよび種々のスフィンゴシン誘導体が蛋
白質キナーゼ活性に対して阻害効果を有するという本発
明者による発見事項に基づいて、本発明は、 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供する。
白質キナーゼ活性に対して阻害効果を有するという本発
明者による発見事項に基づいて、本発明は、 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供する。
同様にまた、本発明は、ヒトまたは動物細胞を、合成的
に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ−
メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容さ
れる塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種
以上の細胞成長阻害量と接触させることを含むヒトおよ
び動物細胞の成長を阻害する方法を提供する。
に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ−
メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容さ
れる塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種
以上の細胞成長阻害量と接触させることを含むヒトおよ
び動物細胞の成長を阻害する方法を提供する。
ヒトおよび動物細胞の成長阻害のための上記製剤および
方法は、哺乳類細胞の治療および悪性並びに良性腫瘍細
胞の治療に特に適用できる。
方法は、哺乳類細胞の治療および悪性並びに良性腫瘍細
胞の治療に特に適用できる。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍成長
阻害剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍成長
阻害剤を提供する。
同様にまた、本発明は、ヒトまたは動物の腫瘍を、合成
的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容
される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２
種以上の細胞成長阻害量と接触させることを含むインビ
ボにおけるヒトおよび動物の腫瘍の成長を阻害する方法
を提供する。
的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容
される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２
種以上の細胞成長阻害量と接触させることを含むインビ
ボにおけるヒトおよび動物の腫瘍の成長を阻害する方法
を提供する。
インビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍の成長阻害のた
めの上記製剤および方法は、哺乳類腫瘍の治療および悪
性および良性腫瘍細胞の治療に特に適用できる。
めの上記製剤および方法は、哺乳類腫瘍の治療および悪
性および良性腫瘍細胞の治療に特に適用できる。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍転移
阻害剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物の腫瘍転移
阻害剤を提供する。
同様にまた、本発明は、ヒトまたは動物の腫瘍を、合成
的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容
される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２
種以上の細胞成長阻害量と接触させることを含むインビ
ボにおけるヒトおよび動物の腫瘍の転移を阻害する方法
を提供する。
的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容
される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２
種以上の細胞成長阻害量と接触させることを含むインビ
ボにおけるヒトおよび動物の腫瘍の転移を阻害する方法
を提供する。
ヒトおよび動物の腫瘍の転移阻害のための上記製剤およ
び方法は、哺乳類腫瘍の治療並びに悪性および良性腫瘍
細胞の治療に特に適用できる。
び方法は、哺乳類腫瘍の治療並びに悪性および良性腫瘍
細胞の治療に特に適用できる。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答阻害剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答阻害剤を提供する。
同様にまた、本発明は、ヒトまたは動物の顆粒球および
／またはリンパ球を、合成的に製造されたスフィンゴシ
ン、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンお
よびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成
長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接
触させることを含む、少なくとも一部は顆粒球および／
またはリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免
疫応答を阻害する方法を提供する。
／またはリンパ球を、合成的に製造されたスフィンゴシ
ン、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンお
よびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成
長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接
触させることを含む、少なくとも一部は顆粒球および／
またはリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免
疫応答を阻害する方法を提供する。
少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよ
び動物の免疫応答阻害のための上記製剤および方法は、
コンカナバリンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘
発およびフィトヘムアグルチニンＡにより惹起されるリ
ンパ球有糸分裂誘発に特に適用できる。
び動物の免疫応答阻害のための上記製剤および方法は、
コンカナバリンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘
発およびフィトヘムアグルチニンＡにより惹起されるリ
ンパ球有糸分裂誘発に特に適用できる。
更に、少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒ
トおよび動物の免疫応答阻害のための上記製剤および方
法は、自己免疫応答にも適用でき、少なくとも一部はコ
ンカナバリンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発
、フィトヘムアグルチニンＡにより惹起されるリンパ球
有糸分裂誘発およびＩＬ−２依存性Ｔ細胞成長による自
己免疫応答に特に適用できる。
トおよび動物の免疫応答阻害のための上記製剤および方
法は、自己免疫応答にも適用でき、少なくとも一部はコ
ンカナバリンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発
、フィトヘムアグルチニンＡにより惹起されるリンパ球
有糸分裂誘発およびＩＬ−２依存性Ｔ細胞成長による自
己免疫応答に特に適用できる。
更に、上記の少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答および自己免疫応答の阻
害のだめの製剤および方法は、特に哺乳類における免疫
応答に適用できる。
よるヒトおよび動物の免疫応答および自己免疫応答の阻
害のだめの製剤および方法は、特に哺乳類における免疫
応答に適用できる。
また本発明は、
（１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部は顆粒球および／またはリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻
害剤を提供する。
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部は顆粒球および／またはリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻
害剤を提供する。
同様にまた、本発明は、ヒトまたは動物の顆粒球および
／またはリンパ球を、合成的に製造されたスフィンゴシ
ン、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンお
よびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成
長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接
触させることを含む、少なくとも一部は顆粒球および／
またはリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎
症反応を阻害する方法を提供する。
／またはリンパ球を、合成的に製造されたスフィンゴシ
ン、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンお
よびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成
長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長阻害量と接
触させることを含む、少なくとも一部は顆粒球および／
またはリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎
症反応を阻害する方法を提供する。
少なくとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分
裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻害のための上
記製剤および方法は、哺乳類における炎症反応に特に適
用でき、とりわけコンカナバリンＡにより惹起されるリ
ンパ球有糸分裂誘発およびフィトヘムアグルチニンＡに
より惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応に
適用できる。
裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応阻害のための上
記製剤および方法は、哺乳類における炎症反応に特に適
用でき、とりわけコンカナバリンＡにより惹起されるリ
ンパ球有糸分裂誘発およびフィトヘムアグルチニンＡに
より惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応に
適用できる。
上記の全ての製剤および方法では、合成的に製造された
Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィンゲニン、Ｎ
、Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよび
それらの薬学的に許容される塩が好ましく、合成的に製
造されたＮ、 Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィン
ゲニンおよびその薬学的に許容される塩が特に好ましい
。
Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィンゲニン、Ｎ
、Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよび
それらの薬学的に許容される塩が好ましく、合成的に製
造されたＮ、 Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロ−スフィン
ゲニンおよびその薬学的に許容される塩が特に好ましい
。
上記に加えて、本発明者は、天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から製造されたスフィンゴシンおよび天然に産生
されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−スフ
ィンゴシンは、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィ
ンゴシンと実質的に類似する作用を有していることを見
出した。
ゴ脂質から製造されたスフィンゴシンおよび天然に産生
されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−スフ
ィンゴシンは、合成的に製造されたＮ−メチル−スフィ
ンゴシンと実質的に類似する作用を有していることを見
出した。
スフィンゴシン基本骨格は、下記の２ｍの公知方法によ
り製造できる。即ち、（１）ティールフエルダー エイ
チ（Ｔｉｅｌｆｃｌｄｅｒ Ｈ）およびクレンクイー（
Ｋｌｅｎｋ Ｅ）の手法（“セレブロシドおよびホスフ
ァチドの化学（Ｄｉｅ ＣｈｅＩＩｌｉｅ ｄｅｒ Ｃ
ｅｒｅｂｒｏ−ｃｉｄｅ ａｎｄ Ｐｈｏｓｐｈａｔｉ
ｄｅ） ” 、Ｊ、 Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、ベルリン、１
９３０ ’）およびゲイヴチー アール シー（Ｇａｖ
ｅｒ ＲＣ）およびスウィーリー シー シー（Ｓｗｅ
ｅｌｙ ＣＣ）の改良手法（Ｊ、 Ａｍ、 ０ｉｌｓ
Ｃｈｅｆｌｌ。
り製造できる。即ち、（１）ティールフエルダー エイ
チ（Ｔｉｅｌｆｃｌｄｅｒ Ｈ）およびクレンクイー（
Ｋｌｅｎｋ Ｅ）の手法（“セレブロシドおよびホスフ
ァチドの化学（Ｄｉｅ ＣｈｅＩＩｌｉｅ ｄｅｒ Ｃ
ｅｒｅｂｒｏ−ｃｉｄｅ ａｎｄ Ｐｈｏｓｐｈａｔｉ
ｄｅ） ” 、Ｊ、 Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、ベルリン、１
９３０ ’）およびゲイヴチー アール シー（Ｇａｖ
ｅｒ ＲＣ）およびスウィーリー シー シー（Ｓｗｅ
ｅｌｙ ＣＣ）の改良手法（Ｊ、 Ａｍ、 ０ｉｌｓ
Ｃｈｅｆｌｌ。
Ｓｏｃ、、 ４２．２９４−２９８．１９６５ ）によ
る天然スフィンゴ脂質のメタノール分解および（２）カ
ンファー（Ｋａｎｆｅｒ）およびハコモリ（ｌＩａｋｏ
ｍｏｒｉ）の手法（ハンドブック オブ リピッド リ
サーチ（Ｈａｎｄｂｏｏｋｏｆ Ｌｌｐｉｄ Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈ）、“スフィンゴ脂質の生化学（Ｓｈｉｎｇｏ
−１ｉｐｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）”、カンフ
ァージエイ エヌ（Ｋａｎｆｅｒ Ｊ Ｎ）およびハコ
モリ ニス（ＨａｋｏｍｏｒＩ Ｓ） （！！ｉ：集）
、プレナム（ＰＩ ｅｎｕｍ）、ニューヨーク、ｐｐ１
６７−２４７．１９８３ ）によるグリコシダーゼおよ
びセラミダーゼを用いる天然スフィンゴ脂質の酵素加水
分解である。
る天然スフィンゴ脂質のメタノール分解および（２）カ
ンファー（Ｋａｎｆｅｒ）およびハコモリ（ｌＩａｋｏ
ｍｏｒｉ）の手法（ハンドブック オブ リピッド リ
サーチ（Ｈａｎｄｂｏｏｋｏｆ Ｌｌｐｉｄ Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈ）、“スフィンゴ脂質の生化学（Ｓｈｉｎｇｏ
−１ｉｐｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）”、カンフ
ァージエイ エヌ（Ｋａｎｆｅｒ Ｊ Ｎ）およびハコ
モリ ニス（ＨａｋｏｍｏｒＩ Ｓ） （！！ｉ：集）
、プレナム（ＰＩ ｅｎｕｍ）、ニューヨーク、ｐｐ１
６７−２４７．１９８３ ）によるグリコシダーゼおよ
びセラミダーゼを用いる天然スフィンゴ脂質の酵素加水
分解である。
Ｎ−メチル−スフィンゴシンは、天然に産生されるスフ
ィンゴ脂質をホルムアルデヒドおよび水素化ホウ素ナト
リウムの存在下にＮ−メチル化することにより製造でき
る（ミーンズ ジー イー（Ｍｅａｎｓ Ｇ Ｅ）およ
びフィーエイ アール イー（Ｆｅｅｎｅｙ Ｒ［Ｅ）
、旧ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 ７．２１９２−２２０１
゜１９８８ ）。
ィンゴ脂質をホルムアルデヒドおよび水素化ホウ素ナト
リウムの存在下にＮ−メチル化することにより製造でき
る（ミーンズ ジー イー（Ｍｅａｎｓ Ｇ Ｅ）およ
びフィーエイ アール イー（Ｆｅｅｎｅｙ Ｒ［Ｅ）
、旧ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 ７．２１９２−２２０１
゜１９８８ ）。
天然に産生されるスフィンゴ脂質の適当な供給源として
は、脳、腎臓、牌臓、血球および動物の他の器官および
組織などが挙げられる。酵母および穀粒も天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質の供給源として適当であることが予
想できる。
は、脳、腎臓、牌臓、血球および動物の他の器官および
組織などが挙げられる。酵母および穀粒も天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質の供給源として適当であることが予
想できる。
スフィンゴシンまたはＮ−メチル−スフィンゴシンの構
造は、質量分析および’Ｈ−ＮＭＲ分析により確認する
ことができる。
造は、質量分析および’Ｈ−ＮＭＲ分析により確認する
ことができる。
本発明者は、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造
されたＮ−メチル−スフィンゴシンの効果をメチル化さ
れていないスフィンゴシンの効果と比較した。この比較
を第４図から第７図に示す。
されたＮ−メチル−スフィンゴシンの効果をメチル化さ
れていないスフィンゴシンの効果と比較した。この比較
を第４図から第７図に示す。
これらのデータから、下記の結論が導かれる：（１）天
然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジ
メチル−スフィンゴシン、Ｎ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびＮ、Ｎ−ジメチルトートレオ−スフィンゴシ
ンは、インビトロにおけるヒト結腸癌細胞の成長に対し
て強い阻害活性を示した。
然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジ
メチル−スフィンゴシン、Ｎ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびＮ、Ｎ−ジメチルトートレオ−スフィンゴシ
ンは、インビトロにおけるヒト結腸癌細胞の成長に対し
て強い阻害活性を示した。
（１ｉ）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヌードマウスに
おけるヒト腫瘍細胞のインビボの成長に対する統計学的
に有意な阻害効果を示した。
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヌードマウスに
おけるヒト腫瘍細胞のインビボの成長に対する統計学的
に有意な阻害効果を示した。
（ｉｉｉ）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造す
れたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血
リンパ球およびマウス牌細胞のコンカナバリンＡにより
惹起される有糸分裂誘発に対する強い阻害作用を示した
。
れたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血
リンパ球およびマウス牌細胞のコンカナバリンＡにより
惹起される有糸分裂誘発に対する強い阻害作用を示した
。
（ｈ）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血リン
パ球およびマウス牌細胞のＩ Ｌ−２依存性合糸分裂誘
発に対する強い阻害作用を示した。
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血リン
パ球およびマウス牌細胞のＩ Ｌ−２依存性合糸分裂誘
発に対する強い阻害作用を示した。
また、本発明者は、天然に産生されるスフィンゴ脂質か
ら製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンが、種々の治
療に用いられる薬物として有用であることを見出した。
ら製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンが、種々の治
療に用いられる薬物として有用であることを見出した。
従って、本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害■および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供する。
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害■および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物細胞成長阻害剤を提供する。
同様に本発明は、ヒトまたは動物細胞を、天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン、天
然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチ
ル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される
塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上
の細胞成長阻害量と接触させることを含むヒトおよび動
物細胞の成長を阻害する方法をも提供する。
れるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン、天
然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチ
ル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される
塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上
の細胞成長阻害量と接触させることを含むヒトおよび動
物細胞の成長を阻害する方法をも提供する。
上記の阻害剤および方法は、哺乳類細胞の治療および悪
性または良性腫瘍細胞の治療に特に適用できる。
性または良性腫瘍細胞の治療に特に適用できる。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物腫瘍成長阻
害剤を提供する。
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するインビボにおけるヒトおよび動物腫瘍成長阻
害剤を提供する。
同様に本発明は、インビボにおいてヒトまたは動物腫瘍
を、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させることを
含むヒトおよび動物腫瘍の成長を阻害する方法をも提供
する。
を、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させることを
含むヒトおよび動物腫瘍の成長を阻害する方法をも提供
する。
インビボでのヒトおよび動物腫瘍の成長を阻害するため
の上記の製剤および方法は、哺乳類腫瘍の治療および良
性および悪性腫瘍の治療に特に適用できる。
の上記の製剤および方法は、哺乳類腫瘍の治療および良
性および悪性腫瘍の治療に特に適用できる。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物腫瘍転移阻害剤を提供する。
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有するヒトおよび動物腫瘍転移阻害剤を提供する。
同様に本発明は、インビボにおいてヒトまたは動物腫瘍
を、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させることを
含むヒトおよび動物腫瘍の転移を阻害する方法をも提供
する。
を、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量と接触させることを
含むヒトおよび動物腫瘍の転移を阻害する方法をも提供
する。
ヒトおよび動物腫瘍の転移を阻害するための上記の製剤
および方法は、哺乳類腫瘍の治療および良性および悪性
腫瘍の治療に特に適用できる。
および方法は、哺乳類腫瘍の治療および良性および悪性
腫瘍の治療に特に適用できる。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害口および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答の阻害剤を提供する。
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害口および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発に
よるヒトおよび動物の免疫応答の阻害剤を提供する。
同様に本発明は、リンパ球を、天然に産生されるスフィ
ンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン、天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−スフィ
ンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ば
れた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長
阻害量と接触させることを含む、少なくとも一部はリン
パ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答を阻
害する方法をも提供する。
ンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン、天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−スフィ
ンゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ば
れた細胞成長阻害物質の１種または２種以上の細胞成長
阻害量と接触させることを含む、少なくとも一部はリン
パ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答を阻
害する方法をも提供する。
少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよ
び動物の免疫応答を阻害するための上記の製剤および方
法は、コンカナバリンＡにより惹起されるリンパ球有糸
分裂誘発およびフィトヘムアグルチニンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発に特に適用できる。
び動物の免疫応答を阻害するための上記の製剤および方
法は、コンカナバリンＡにより惹起されるリンパ球有糸
分裂誘発およびフィトヘムアグルチニンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発に特に適用できる。
また、少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒ
トおよび動物の免疫応答を阻害するための上記の製剤お
よび方法は、自己免疫応答にも適用でき、特にコンカナ
バリンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発および
フィトヘムアグルチニンＡにより惹起されるリンパ球有
糸分裂誘発およびＩ Ｌ−２に依存するＴ細胞成長によ
る自己免疫応答に特に適用できる。
トおよび動物の免疫応答を阻害するための上記の製剤お
よび方法は、自己免疫応答にも適用でき、特にコンカナ
バリンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発および
フィトヘムアグルチニンＡにより惹起されるリンパ球有
糸分裂誘発およびＩ Ｌ−２に依存するＴ細胞成長によ
る自己免疫応答に特に適用できる。
少なくとも一部はリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよ
び動物の免疫応答を阻害するための上記の製剤および方
法は、削乳順における免疫応答に特に適用できる。
び動物の免疫応答を阻害するための上記の製剤および方
法は、削乳順における免疫応答に特に適用できる。
また本発明は、
（１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチルースフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害琶および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部は顆粒球および／またはリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応の
阻害剤を提供する。
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
製造されたＮ−メチルースフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上の細胞成長阻害琶および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有する、少なくとも一部は顆粒球および／またはリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応の
阻害剤を提供する。
同様に本発明は、顆粒球および／またはリンパ球を、天
然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィン
ゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造され
たＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に
許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種また
は２種以上の細胞阻害量と接触させることを含む、少な
くとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分裂誘
発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方法をも
提供する。
然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィン
ゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造され
たＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学的に
許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種また
は２種以上の細胞阻害量と接触させることを含む、少な
くとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分裂誘
発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方法をも
提供する。
少なくとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸分
裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害するため
の上記の製剤および方法は、補乳順における炎症反応に
特に適用でき、特にコンカナバリンＡにより惹起される
リンパ球有糸分裂誘発およびフィトヘムアグルチニンＡ
により惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応
に適用できる。
裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害するため
の上記の製剤および方法は、補乳順における炎症反応に
特に適用でき、特にコンカナバリンＡにより惹起される
リンパ球有糸分裂誘発およびフィトヘムアグルチニンＡ
により惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応
に適用できる。
天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィ
ンゴシンおよびＮ−メチル−スフィンゴシンに関する上
記全てのの製剤および方法について、天然に産生される
スフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフ
ィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造
されたＮ−モノメチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩が好ましく、なかでも天然に産生
されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル
−スフィンゴシンおよびその薬学的に許容される塩が特
に好ましい。
ンゴシンおよびＮ−メチル−スフィンゴシンに関する上
記全てのの製剤および方法について、天然に産生される
スフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフ
ィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造
されたＮ−モノメチル−スフィンゴシンおよびそれらの
薬学的に許容される塩が好ましく、なかでも天然に産生
されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル
−スフィンゴシンおよびその薬学的に許容される塩が特
に好ましい。
また、腫瘍細胞および腫瘍の成長阻害並びに腫瘍の転移
阻害のためには、本発明の製剤および方法は、マイトマ
イシン、５−フルオロウラシルなどの既存の化学療法剤
と併用するとき、特に有効であると予測される。
阻害のためには、本発明の製剤および方法は、マイトマ
イシン、５−フルオロウラシルなどの既存の化学療法剤
と併用するとき、特に有効であると予測される。
合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製造され
たＮ−メチル−スフィンゴシン、天然に産生されるスフ
ィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシンおよび天然に
産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−
スフィンゴシンの薬学的に許容される適当な塩は、当業
者にとって自明である。
たＮ−メチル−スフィンゴシン、天然に産生されるスフ
ィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシンおよび天然に
産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ−メチル−
スフィンゴシンの薬学的に許容される適当な塩は、当業
者にとって自明である。
本発明の製剤に用いられる適当な薬学的に許容される担
体、希釈剤または賦形剤は、製剤の用法に依存し、当業
者にとって自明である。
体、希釈剤または賦形剤は、製剤の用法に依存し、当業
者にとって自明である。
本発明の製剤の投与方法は、用法により定まり、当業者
にとって自明である。
にとって自明である。
本発明の薬剤の適当な用量は、用法、患者の体重などに
依存し、当業者にとって自明である。例えば、天然に産
生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン
および合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシン
については第２図および第１表に記載されるようなイン
ビトロのデータなどから、天然に産生されるスフィンゴ
脂質から製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンについ
ては第４図に示されるようなインビトロのデータなどか
ら、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンについて上第５図に示される
ようなインビボのデータなどからの外挿法により、用量
を決定することができる。
依存し、当業者にとって自明である。例えば、天然に産
生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン
および合成的に製造されたＮ−メチル−スフィンゴシン
については第２図および第１表に記載されるようなイン
ビトロのデータなどから、天然に産生されるスフィンゴ
脂質から製造されたＮ−メチル−スフィンゴシンについ
ては第４図に示されるようなインビトロのデータなどか
ら、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
−メチル−スフィンゴシンについて上第５図に示される
ようなインビボのデータなどからの外挿法により、用量
を決定することができる。
実施例
下記に実施例を挙げて、本発明を説明するが、本発明は
これに限定されるものではない。
これに限定されるものではない。
特にことわらない限り、全ての％、割合などは重量によ
る。
る。
実施例１
合成的に得られたスフィンゴシン誘導体の合成り（＋）
−エリスロ−スフィンゲニン、Ｌ（−）−エリスロ−ス
フィンゲニン、Ｌ（−）−トレオースフィンゲニンおよ
びＬ（−）−トレオースフィンガニンを、前述したよう
に合成した（コイケ ケイ（Ｋｏｉｋｅ Ｋ）ら、 Ｃ
ａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 １５８
゜１１３−１２３．１９８６．コイケ ケイら、 “Ａ
ｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ５ｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ
ｃｅｒａｍｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｄ−Ｇｌｕｃｏ
ｓｅ 、 ｃ＋ｙｃｏｃｏｎ、＋ｕｇａｔｅ Ｊｏｕ
ｒｎａｌ、 １．１０７−１０９、１９８４ ’）。Ｎ
、Ｎ−ジメチル誘導体は、ホルムアルデヒドおよび水素
化ナトリウムの存在下に、−エリスロ−スフィンゲニン
の還元メチル化により製造された（ミーンズ（Ｍｅａｎ
ｓ）およびフィーエイ（Ｆｅｅｎｅｙ）、 Ｂｌｏｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ、 ７．２１９２．１９６８；Ｃｈｅｍ
１ｃａｌ Ｍｏｄｌｆｉｃａｔｌｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ ホールデンーデイ、インコーポレーテッ
ド（Ｉｌｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ、 Ｉｎｃ、）、サンフラ
ンシスコ、 ｐ２１７．１９７１）。
−エリスロ−スフィンゲニン、Ｌ（−）−エリスロ−ス
フィンゲニン、Ｌ（−）−トレオースフィンゲニンおよ
びＬ（−）−トレオースフィンガニンを、前述したよう
に合成した（コイケ ケイ（Ｋｏｉｋｅ Ｋ）ら、 Ｃ
ａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 １５８
゜１１３−１２３．１９８６．コイケ ケイら、 “Ａ
ｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ５ｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ
ｃｅｒａｍｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｄ−Ｇｌｕｃｏ
ｓｅ 、 ｃ＋ｙｃｏｃｏｎ、＋ｕｇａｔｅ Ｊｏｕ
ｒｎａｌ、 １．１０７−１０９、１９８４ ’）。Ｎ
、Ｎ−ジメチル誘導体は、ホルムアルデヒドおよび水素
化ナトリウムの存在下に、−エリスロ−スフィンゲニン
の還元メチル化により製造された（ミーンズ（Ｍｅａｎ
ｓ）およびフィーエイ（Ｆｅｅｎｅｙ）、 Ｂｌｏｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ、 ７．２１９２．１９６８；Ｃｈｅｍ
１ｃａｌ Ｍｏｄｌｆｉｃａｔｌｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ ホールデンーデイ、インコーポレーテッ
ド（Ｉｌｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ、 Ｉｎｃ、）、サンフラ
ンシスコ、 ｐ２１７．１９７１）。
また、合成的に製造された基本骨格スフィンゲニン、即
ちＤ （＋）−エリスロ−スフィンゲニンおよびＬ （
−）−エリスロ−スフィンゲニンは、Ｌ−セリンを出発
物質とするか（ラデュンツ エイチーイー（Ｒａｄｕｎ
ｚ ＩＩ−Ｅ）、デヴアント アール エム（Ｄｅｖａ
ｎｔ ＲＭ）、アイチーマン ケイ（Ｅｌｅｒｍａｎｎ
Ｖ）、 Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ Ｃｈｅｍ、 １１
０３−１１０５．１９８８ ；エムカエス（Ｎｌｍｋ
ａｒ Ｓ）、セナルディノ デイ（Ｓｅｎａｌｄｉｎｏ
Ｄ） 、メリル ニー エイチ（ＭｅｒｒｉｌＡ Ｈ
）、リオッタ デイ化１ｏｔｔａ Ｄ）、 Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ、 ２９．３０３７−３０４０．
１９８８ ；ヘロルド ピー（ｌｌａｒｏｌｄ Ｐ）
、Ｈｅ！ｖｅｔｉｅａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ、
７１．３５４−３６２、１９８８ ）或いはＤ−グルコ
ースを出発物質とする（コイケ ケイら、同上）ことに
よっても製造できる。
ちＤ （＋）−エリスロ−スフィンゲニンおよびＬ （
−）−エリスロ−スフィンゲニンは、Ｌ−セリンを出発
物質とするか（ラデュンツ エイチーイー（Ｒａｄｕｎ
ｚ ＩＩ−Ｅ）、デヴアント アール エム（Ｄｅｖａ
ｎｔ ＲＭ）、アイチーマン ケイ（Ｅｌｅｒｍａｎｎ
Ｖ）、 Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ Ｃｈｅｍ、 １１
０３−１１０５．１９８８ ；エムカエス（Ｎｌｍｋ
ａｒ Ｓ）、セナルディノ デイ（Ｓｅｎａｌｄｉｎｏ
Ｄ） 、メリル ニー エイチ（ＭｅｒｒｉｌＡ Ｈ
）、リオッタ デイ化１ｏｔｔａ Ｄ）、 Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ、 ２９．３０３７−３０４０．
１９８８ ；ヘロルド ピー（ｌｌａｒｏｌｄ Ｐ）
、Ｈｅ！ｖｅｔｉｅａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ、
７１．３５４−３６２、１９８８ ）或いはＤ−グルコ
ースを出発物質とする（コイケ ケイら、同上）ことに
よっても製造できる。
比較のため、粗スフィンゴシンが、ティアフエルダー（
Ｔｉｅｒｆｅｌｄｅｒ）およびクレンク（Ｋｌｅｎｋ）
の方法（“セレブロシドとホスファチドの化学（Ｄｉｅ
Ｃｈｃｍｉｅ ｄｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｓｉｄｅ ｕｎｄ
Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｅ） ’スプリンゲア フェア
ラーク（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ）、ベルリン
、１９３２）に従って、セレブロシドをメタノール分解
することにより製造された。
Ｔｉｅｒｆｅｌｄｅｒ）およびクレンク（Ｋｌｅｎｋ）
の方法（“セレブロシドとホスファチドの化学（Ｄｉｅ
Ｃｈｃｍｉｅ ｄｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｓｉｄｅ ｕｎｄ
Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｅ） ’スプリンゲア フェア
ラーク（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ）、ベルリン
、１９３２）に従って、セレブロシドをメタノール分解
することにより製造された。
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン誘導体の構造は、Ｎ
ＭＲスペクトル分析およびファブ質量分析により確認さ
れた。
ＭＲスペクトル分析およびファブ質量分析により確認さ
れた。
実施例２
スフィンゴシンおよび合成的に製造されたスフィＡ４３
１細胞を、１０％牛脂児血清（Ｆｅ２）を補われたハム
のＦ−１２培地とＤＭＥとの混合物（重量割合１：１）
中で成長させた。Ｃ−キナーゼの部分精製のために、ク
ロイッター（Ｋｒｅｕｔｔｅｒ）らの方法により（ＪＢ
Ｃ，２８２，１６３３−１６３７、１９８７） 、５０
個の直径１５０ｃ口の培養皿から集めた細胞を同時に処
理した。簡単に述べれば、細胞をゴム製ポリスマンでか
きとって、２ｏ［ＩＩ）ｌトリス−塩酸（ｐＨ７，５）
、２ｍＭ ＥＤＴＡ 、 ０．５ｍＭ ＥＧＴＡ。
１細胞を、１０％牛脂児血清（Ｆｅ２）を補われたハム
のＦ−１２培地とＤＭＥとの混合物（重量割合１：１）
中で成長させた。Ｃ−キナーゼの部分精製のために、ク
ロイッター（Ｋｒｅｕｔｔｅｒ）らの方法により（ＪＢ
Ｃ，２８２，１６３３−１６３７、１９８７） 、５０
個の直径１５０ｃ口の培養皿から集めた細胞を同時に処
理した。簡単に述べれば、細胞をゴム製ポリスマンでか
きとって、２ｏ［ＩＩ）ｌトリス−塩酸（ｐＨ７，５）
、２ｍＭ ＥＤＴＡ 、 ０．５ｍＭ ＥＧＴＡ。
０．１５Ｕ／ｍｌアプロチニンおよび０．２５Ｍショ糖
からなる混合物５０ｍ１に懸濁した。デュンス ホモジ
エナイザー（Ｄｏｕｎｃｅ Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ
、大きさ４０−ｍ ｌ、フィートン（Ｗｈｅａｔｏｎ）
製）中で４℃にて５０回ストロークさせることにより、
懸濁液を均質化した。
からなる混合物５０ｍ１に懸濁した。デュンス ホモジ
エナイザー（Ｄｏｕｎｃｅ Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ
、大きさ４０−ｍ ｌ、フィートン（Ｗｈｅａｔｏｎ）
製）中で４℃にて５０回ストロークさせることにより、
懸濁液を均質化した。
均質化した細胞をＬＯＯＯＯＯｇで６０分間遠心分離し
た。２０ｍＭ トリス−塩酸（ｐＨ７，５） −２ｍＭ
ＩＥＤＴＡ −０，５ｍＭ ＥＧＴＡ （緩衝液Ｂ）
で平衡化させたＤＥ５２カラムにて上清みを精製して、
同じ緩衝液で十分に洗浄した。Ｃ−キナーゼ活性は、０
．１ＭＮａｃｉ）を含有する緩衝液Ｂと共に溶離した。
た。２０ｍＭ トリス−塩酸（ｐＨ７，５） −２ｍＭ
ＩＥＤＴＡ −０，５ｍＭ ＥＧＴＡ （緩衝液Ｂ）
で平衡化させたＤＥ５２カラムにて上清みを精製して、
同じ緩衝液で十分に洗浄した。Ｃ−キナーゼ活性は、０
．１ＭＮａｃｉ）を含有する緩衝液Ｂと共に溶離した。
このフラクション中の活性は、２００〜５００ ｐｍｏ
ｌ Ｐ／分／ｍｇ蛋白質であった。Ａ−キナーゼおよび
他のキナーゼを含有しない該フラクションは、分別され
、−８０°Ｃに保持された。
ｌ Ｐ／分／ｍｇ蛋白質であった。Ａ−キナーゼおよび
他のキナーゼを含有しない該フラクションは、分別され
、−８０°Ｃに保持された。
スフィンゴシンおよびスフィンゴシン誘導体のＣ−キナ
ーゼに及ぼす阻害効果の測定 ベル（Ｂｅｌｌ）およびハンナン（Ｈａｎｎｕｎ）
（サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ） 、２３５．６７０−
６７４． Ｌ９８７ ）により公表されているように、
混合されたミセル系で得られた非常に様々の結果に鑑み
て、クロイッター（Ｋｒｅｕｔｔｅｒ）らによる標準リ
ポソーム法（ＪＩ３Ｃ。
ーゼに及ぼす阻害効果の測定 ベル（Ｂｅｌｌ）およびハンナン（Ｈａｎｎｕｎ）
（サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ） 、２３５．６７０−
６７４． Ｌ９８７ ）により公表されているように、
混合されたミセル系で得られた非常に様々の結果に鑑み
て、クロイッター（Ｋｒｅｕｔｔｅｒ）らによる標準リ
ポソーム法（ＪＩ３Ｃ。
２８０、５９７９−５９８８．１９８５ ＞をやや改変
して、スフィンゴシンおよびスフィンゴシン誘導体（非
グリコジル化およびグリコジル化）を下記の条件で試験
した。三角チューブ（容ｆｆ１１．５ｍｌ 、サアステ
ット（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）製）中で、適量のスフィンゴ
シン（後記実施例３に記載されるように、天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン）、
その誘導体またはスルファチドの存在下あるいは不在下
に、ホスファチジルセリン（５μｇノチューブ）および
１，２−ジオレイン（０，０５μｇ／チューブ）を有機
溶媒（エタノールまたはクロロホルム−メタノール）中
に加えて、混合物を窒素気流下に蒸留した。脂質混合物
を２０ｍＭ、）’Ｊスス−酸（ｐ）ｌ ７．５） ３０
μρ中で３０分間超音波処理した。チューブ中のリポソ
ームは、上記反応混合物で補われ、２５ｍＭトリス−塩
酸（ｐｉｆ ７．５）、１０ｍＭ 塩化マグネシウム
、４００μＭ ＥＤＴＡ、５０μＭＥＧＴＡ、 ５００
８Ｍ塩化カルシウム、２００ μｇ／ｍｌヒストンｍ−
ｓおよび２０μＭγ−［３２ＰＩ −ＡＴＰ （２ｘｔ
ｏ６ｃｐｍ）から成り、最終容量９０μｇであった。
して、スフィンゴシンおよびスフィンゴシン誘導体（非
グリコジル化およびグリコジル化）を下記の条件で試験
した。三角チューブ（容ｆｆ１１．５ｍｌ 、サアステ
ット（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）製）中で、適量のスフィンゴ
シン（後記実施例３に記載されるように、天然に産生さ
れるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン）、
その誘導体またはスルファチドの存在下あるいは不在下
に、ホスファチジルセリン（５μｇノチューブ）および
１，２−ジオレイン（０，０５μｇ／チューブ）を有機
溶媒（エタノールまたはクロロホルム−メタノール）中
に加えて、混合物を窒素気流下に蒸留した。脂質混合物
を２０ｍＭ、）’Ｊスス−酸（ｐ）ｌ ７．５） ３０
μρ中で３０分間超音波処理した。チューブ中のリポソ
ームは、上記反応混合物で補われ、２５ｍＭトリス−塩
酸（ｐｉｆ ７．５）、１０ｍＭ 塩化マグネシウム
、４００μＭ ＥＤＴＡ、５０μＭＥＧＴＡ、 ５００
８Ｍ塩化カルシウム、２００ μｇ／ｍｌヒストンｍ−
ｓおよび２０μＭγ−［３２ＰＩ −ＡＴＰ （２ｘｔ
ｏ６ｃｐｍ）から成り、最終容量９０μｇであった。
上記と同様にして得られたＣ−キナーゼフラクション１
０μΩ （１〜２μｇ蛋白質含有）を加えることにより
、反応を開始した。反応混合物を３０℃にて１０分間培
養した。１％ＢＳＡを含有する１ｍＭ ＡＴＰ溶液（
ｐＨ７，５）２００μΩとともに２５％ＴＣＡ１ｍｌを
加えることにより、反応を終了させた。沈澱物を遠心分
離し、２５％ＴＣＡ１［１１１で２度洗浄し、僅かに加
熱しつつ（８０℃、１０分間）、０．１％デオキシコー
ル酸塩を含有するＩＮ水酸化ナトリウムＩＩＩＩｌ中に
溶解して、シンチレーションカウンターで計数した。ホ
スファチジルセリン、１゜２−ジオレインまたはＣａ”
＋を用いない値を対照値とした。スフィンゴシンおよび
スフィンゴシン誘導体の効果を第２図および第３図に示
し、下記第１表および第■表に要約した。
０μΩ （１〜２μｇ蛋白質含有）を加えることにより
、反応を開始した。反応混合物を３０℃にて１０分間培
養した。１％ＢＳＡを含有する１ｍＭ ＡＴＰ溶液（
ｐＨ７，５）２００μΩとともに２５％ＴＣＡ１ｍｌを
加えることにより、反応を終了させた。沈澱物を遠心分
離し、２５％ＴＣＡ１［１１１で２度洗浄し、僅かに加
熱しつつ（８０℃、１０分間）、０．１％デオキシコー
ル酸塩を含有するＩＮ水酸化ナトリウムＩＩＩＩｌ中に
溶解して、シンチレーションカウンターで計数した。ホ
スファチジルセリン、１゜２−ジオレインまたはＣａ”
＋を用いない値を対照値とした。スフィンゴシンおよび
スフィンゴシン誘導体の効果を第２図および第３図に示
し、下記第１表および第■表に要約した。
Ｂ。
第１表
Ｃ−キナーゼ活性に対するスフィンゴシンおよびセラミ
ド スフィンゴシン Ｄ−エリスロ、 σＳＭ）スフィン
ゴシン Ｄ−エリスロ、 σＣｅｒ）スフィンゴシン
Ｄ−工］ノスロ） スフィンゴシン Ｌ＝エリスロ） スフィンゲニン Ｌ−）レオ） スフィンゴシン Ｌ−トレオ） スフィンゲニン ＤＬ−エリスロ、σ）Ｎ−アセチルス
フィンゴシン Ｄ−エリスローＮ、Ｎ−ジメチルースフィンゴシ／Ｌ−
エリスローＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン天然に産
生されるスフィン珊から得られたスフィンゴシングリコ
ジル化した誘導体 ラクトシルスフィンゴシン ０Ｍ３ （Ｎ−アセチル） ０Ｍ３ （Ｎ−グリコリル） ＧＤｌ。
ド スフィンゴシン Ｄ−エリスロ、 σＳＭ）スフィン
ゴシン Ｄ−エリスロ、 σＣｅｒ）スフィンゴシン
Ｄ−工］ノスロ） スフィンゴシン Ｌ＝エリスロ） スフィンゲニン Ｌ−）レオ） スフィンゴシン Ｌ−トレオ） スフィンゲニン ＤＬ−エリスロ、σ）Ｎ−アセチルス
フィンゴシン Ｄ−エリスローＮ、Ｎ−ジメチルースフィンゴシ／Ｌ−
エリスローＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン天然に産
生されるスフィン珊から得られたスフィンゴシングリコ
ジル化した誘導体 ラクトシルスフィンゴシン ０Ｍ３ （Ｎ−アセチル） ０Ｍ３ （Ｎ−グリコリル） ＧＤｌ。
阻害せず
５
５
５
５
０
０
データ無し
阻害せず
−１０
５
−１０
阻害せず
０
５
０
第■表
スフィンゴシンによるＣ−キナーゼ活性の阻害添加され
た脂質 ホスファチジルセリン、ジオレインｔｅａ”Ｄ−エリス
トスフィンゲニン Ｌ−エリスロ−スフィンゲニン Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリストスフィンゲニン（Ｉ
ｓｏ＝ １０ μＭ） Ｎ、 Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニン（
Ｉｓｏ＝２５μＭ） 水 明細書本文参照 量 Ｃ−キナーゼ ％ ３９６２０土４１５６ １８７５４±２１８４ １８５４９士２７６０ ３４２０６±１２２０ ２０５６３±１１７３ １５２１４± ３７７ ２５４ ３７３５４土１４２０ ２５５８３±１９３１ ２１７４３±５７７ １０２０ １００士１０ ４７± ６ ４７士 ７ ８６± ３ ５２士 ３ ３８士 ｌ ３ ９５±４ ６５± ５ ５５± ２ ８ 第１表および第■表に示されるデータおよび第２図およ
び第３図に示される結果から、下記の結論が導かれる。
た脂質 ホスファチジルセリン、ジオレインｔｅａ”Ｄ−エリス
トスフィンゲニン Ｌ−エリスロ−スフィンゲニン Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリストスフィンゲニン（Ｉ
ｓｏ＝ １０ μＭ） Ｎ、 Ｎ−ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニン（
Ｉｓｏ＝２５μＭ） 水 明細書本文参照 量 Ｃ−キナーゼ ％ ３９６２０土４１５６ １８７５４±２１８４ １８５４９士２７６０ ３４２０６±１２２０ ２０５６３±１１７３ １５２１４± ３７７ ２５４ ３７３５４土１４２０ ２５５８３±１９３１ ２１７４３±５７７ １０２０ １００士１０ ４７± ６ ４７士 ７ ８６± ３ ５２士 ３ ３８士 ｌ ３ ９５±４ ６５± ５ ５５± ２ ８ 第１表および第■表に示されるデータおよび第２図およ
び第３図に示される結果から、下記の結論が導かれる。
１、合成的に製造されたＤ−エリスロおよびＬ−エリス
ロ−スフィンゲニンは、類似の弱い阻害活性を示した。
ロ−スフィンゲニンは、類似の弱い阻害活性を示した。
２、合成的に製造されたＮ、 Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよび天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から製造されたスフィンゴシンのみが極めて強い
Ｃ−キナーゼ阻害活性を示した。Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｌ
−エリスロ−スフィンゲニンはより弱い阻害活性を示し
たが、遊離アミノ基を有する置換されていないスフィン
ゲニンよりもさらに強い阻害活性を示した。
スロ−スフィンゲニンおよび天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から製造されたスフィンゴシンのみが極めて強い
Ｃ−キナーゼ阻害活性を示した。Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｌ
−エリスロ−スフィンゲニンはより弱い阻害活性を示し
たが、遊離アミノ基を有する置換されていないスフィン
ゲニンよりもさらに強い阻害活性を示した。
３、合成的に製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニンの阻害活性は、Ｎ−アセチル−ＧＭ
３、Ｎ−グリコリル−ＧＭ３およびＧＤ、、ガングリオ
シドよりも高かったが、最も強力な阻害活性を有するガ
ングリオシドＧ Ｔ １ｂと同程度の阻害活性を示した
。
ロ−スフィンゲニンの阻害活性は、Ｎ−アセチル−ＧＭ
３、Ｎ−グリコリル−ＧＭ３およびＧＤ、、ガングリオ
シドよりも高かったが、最も強力な阻害活性を有するガ
ングリオシドＧ Ｔ １ｂと同程度の阻害活性を示した
。
実施例３
天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィ
ンゴシン誘導体の合成 ティアフエルダー エイチ（Ｔｈｉｅｒ、ｆｅｌｄｅｒ
ＩＩ）およびクレンク イー（Ｋｌｅｎｋ Ｅ）の方
法（“ＤｉｅＣｈｅｍｉｅ ｄｅｒ Ｃｅｒｅｂｒｏｓ
ｉｄｅ ｕｎｄ Ｐｈｏｓｐｈａｔｌｄｅ” 、 Ｊ。
ンゴシン誘導体の合成 ティアフエルダー エイチ（Ｔｈｉｅｒ、ｆｅｌｄｅｒ
ＩＩ）およびクレンク イー（Ｋｌｅｎｋ Ｅ）の方
法（“ＤｉｅＣｈｅｍｉｅ ｄｅｒ Ｃｅｒｅｂｒｏｓ
ｉｄｅ ｕｎｄ Ｐｈｏｓｐｈａｔｌｄｅ” 、 Ｊ。
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、 ベルリン、１９３０）並びにゲ
イヴチーアール シー（Ｇａｖｅｒ ＲＣ）およびスウ
ィーリーシー シー（Ｓｖｃｅｌｅｙ ＣＣ）による上
記の改良方法（Ｊ、 ＡＯＩ、 Ｏｌｌ Ｃｈｅａｌ、
Ｓｏｃ、 、 ４２．２９４−２９８゜１９Ｂ５ ）
に従って、脳スフィンゴ脂質フラクションを加水分解し
た後、スフィンゴシンを製造した。
イヴチーアール シー（Ｇａｖｅｒ ＲＣ）およびスウ
ィーリーシー シー（Ｓｖｃｅｌｅｙ ＣＣ）による上
記の改良方法（Ｊ、 ＡＯＩ、 Ｏｌｌ Ｃｈｅａｌ、
Ｓｏｃ、 、 ４２．２９４−２９８゜１９Ｂ５ ）
に従って、脳スフィンゴ脂質フラクションを加水分解し
た後、スフィンゴシンを製造した。
簡単に述べれば、粗スフィンゴ脂質を０．１ Ｍ塩酸（
濃縮塩酸水溶液から製造）を含有するメタノールに溶解
して、還流下に一晩加熱した。メタノール性塩酸溶液を
石油エーテル（ヘキサン）とともに振とうして、脂肪酸
を除去した。下層を中和し、水酸化ナトリウムでｐＨ１
０に調整し、エチルエーテルととともに振とうした。ス
フィンゴシン塩基を含有するエチルエーテル層（上層）
を蒸発乾固し、さらにＨＰＬＣで精製して、Ｄ−エリス
トスフィンゲニンに対応するピークを単離した。
濃縮塩酸水溶液から製造）を含有するメタノールに溶解
して、還流下に一晩加熱した。メタノール性塩酸溶液を
石油エーテル（ヘキサン）とともに振とうして、脂肪酸
を除去した。下層を中和し、水酸化ナトリウムでｐＨ１
０に調整し、エチルエーテルととともに振とうした。ス
フィンゴシン塩基を含有するエチルエーテル層（上層）
を蒸発乾固し、さらにＨＰＬＣで精製して、Ｄ−エリス
トスフィンゲニンに対応するピークを単離した。
また、スフィンゴシンは、グリコシダーゼおよびホスホ
ジェステラーゼでスフィンゴ脂質を加水分解して、セラ
ミダーゼで処理することによっても製造できる（カンフ
ァー〜ジェイ エヌ（Ｋａｎｆｅｒ Ｊ Ｎ）、ｐｐｌ
Ｂ？−２４７、カンファー ジエイエヌ（Ｋａｎｆｅｒ
Ｊ Ｎ）およびハコモリ ニス（Ｈａｋｏｍｏｒｉ
Ｓ）編集、“スフィンゴ脂質の生化学（Ｓｈｉｎｇｏｌ
ｉｐｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）” 、 Ｈａｎ
ｄｂｏｏｋ ｏｆＬｌｐｉｄ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 ｖ
ｏｌ、３、プレナム（Ｐｌｅｎｕｍ）、ニューヨーク、
１９８３）。簡単に述べれば、セレブロシドは、トリト
ンＸ −１００の存在下にβ−ガラクトシダーゼまたは
β−グルコシダーゼで処理することができる。スフィン
ゴミエリンは、トリトンＸ−１００の存在下にホスホジ
ェステラーゼで処理することができる。従って、次いで
、遊離したセラミドをセラミダーゼで加水分解して、ス
フィンゴシンを遊離する。もっと最近に、スフィンゴ脂
質に直接的に作用するセラミドがノカルデイア（Ｎｏｃ
ａｒｄ４ａ）族に発見された（ヒラバヤシ ワイ（Ｉｌ
ｌｒａｂａｙａｓｈＩ Ｙ）ら、ジャーナル オブ バ
イオケミストリー（東京） （Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｃｍ、
）、 １０３゜１−４．１９８８ ）。
ジェステラーゼでスフィンゴ脂質を加水分解して、セラ
ミダーゼで処理することによっても製造できる（カンフ
ァー〜ジェイ エヌ（Ｋａｎｆｅｒ Ｊ Ｎ）、ｐｐｌ
Ｂ？−２４７、カンファー ジエイエヌ（Ｋａｎｆｅｒ
Ｊ Ｎ）およびハコモリ ニス（Ｈａｋｏｍｏｒｉ
Ｓ）編集、“スフィンゴ脂質の生化学（Ｓｈｉｎｇｏｌ
ｉｐｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）” 、 Ｈａｎ
ｄｂｏｏｋ ｏｆＬｌｐｉｄ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 ｖ
ｏｌ、３、プレナム（Ｐｌｅｎｕｍ）、ニューヨーク、
１９８３）。簡単に述べれば、セレブロシドは、トリト
ンＸ −１００の存在下にβ−ガラクトシダーゼまたは
β−グルコシダーゼで処理することができる。スフィン
ゴミエリンは、トリトンＸ−１００の存在下にホスホジ
ェステラーゼで処理することができる。従って、次いで
、遊離したセラミドをセラミダーゼで加水分解して、ス
フィンゴシンを遊離する。もっと最近に、スフィンゴ脂
質に直接的に作用するセラミドがノカルデイア（Ｎｏｃ
ａｒｄ４ａ）族に発見された（ヒラバヤシ ワイ（Ｉｌ
ｌｒａｂａｙａｓｈＩ Ｙ）ら、ジャーナル オブ バ
イオケミストリー（東京） （Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｃｍ、
）、 １０３゜１−４．１９８８ ）。
実施例４〜７に用いられたＮ、Ｎ−ジメチルおよびＮ−
モノメチル−スフィンゴシンは、専ら脳スフィンゴ脂質
由来のスフィンゴシン製剤を原料として、ホルムアルデ
ヒドと水素化ナトリウムの存在下にＮ−メチル化するこ
とによって製造され（ミーンズ ジー イーおよびフィ
ーエイ アール イー、Ｂｌｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、
７．２１９２−２２０１．１９６８ ）、その構造は質
量分析およびＩＨ−ＮＭＲスペクトル分析により確認さ
れた。
モノメチル−スフィンゴシンは、専ら脳スフィンゴ脂質
由来のスフィンゴシン製剤を原料として、ホルムアルデ
ヒドと水素化ナトリウムの存在下にＮ−メチル化するこ
とによって製造され（ミーンズ ジー イーおよびフィ
ーエイ アール イー、Ｂｌｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、
７．２１９２−２２０１．１９６８ ）、その構造は質
量分析およびＩＨ−ＮＭＲスペクトル分析により確認さ
れた。
実施例４
スフィンゴシンおよび天然に産生されるスフィンゴ脂質
から製造されたスフィンゴシン誘導体によるヒト結腸癌
細胞成長阻害のｉｉ［ｌＪ定Ｎ、 Ｎ−ジメチルースフ
ンゴシン、Ｎ−モノメチル−スフィンゴシンおよびＮ、
Ｎ−ジメチル−し−トレオースフィンゴシン（全ての化
合物は、実施例３に従って、天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から製造された）について、ヒト結腸癌細胞ＨＲ
Ｔ−１８（ＡＴＣＣから入手）の成長に及ぼす影響をダ
ルベツコのイーグル修飾培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ
ｍｏｄｉｆｌｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ）中
で下記の通りに試論した。
から製造されたスフィンゴシン誘導体によるヒト結腸癌
細胞成長阻害のｉｉ［ｌＪ定Ｎ、 Ｎ−ジメチルースフ
ンゴシン、Ｎ−モノメチル−スフィンゴシンおよびＮ、
Ｎ−ジメチル−し−トレオースフィンゴシン（全ての化
合物は、実施例３に従って、天然に産生されるスフィン
ゴ脂質から製造された）について、ヒト結腸癌細胞ＨＲ
Ｔ−１８（ＡＴＣＣから入手）の成長に及ぼす影響をダ
ルベツコのイーグル修飾培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ
ｍｏｄｉｆｌｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ）中
で下記の通りに試論した。
１０％ＦＣ３を補われたダルベツコのイーグル修飾培地
のプレートにＨＲＴ−１８細胞を植えた（５×１０５細
胞／３ｃｍプレート）。細胞を一晩培養した後、第４図
に示すように、種々の濃度のＮ、Ｎ−ジメチル−スフィ
ンゴシン、Ｎ−モノメチル−スフィンゴシン、Ｎ−アセ
チルスフィンゴシンまたはセラミドを含有する同一培地
で置換した。３日間培養を続けて、細胞数を数えた。試
薬の存在下における細胞数の阻害率をスフィンゴシン誘
導体を含有しない対照培養皿の百分率として計算した。
のプレートにＨＲＴ−１８細胞を植えた（５×１０５細
胞／３ｃｍプレート）。細胞を一晩培養した後、第４図
に示すように、種々の濃度のＮ、Ｎ−ジメチル−スフィ
ンゴシン、Ｎ−モノメチル−スフィンゴシン、Ｎ−アセ
チルスフィンゴシンまたはセラミドを含有する同一培地
で置換した。３日間培養を続けて、細胞数を数えた。試
薬の存在下における細胞数の阻害率をスフィンゴシン誘
導体を含有しない対照培養皿の百分率として計算した。
結果を第４図に示す。
第４図において、横軸はスフィンゴシンまたはセラミド
の濃度をμＭで表わし、縦軸は細胞成長の相対的阻害率
（％）で表わした。白丸：セラミド（Ｃｏｒ） ；白玉
角；Ｎ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｃ）；黒四角：
天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ
−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ、Ｎ−ＤｉＭｅ）；黒
丸：天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
−モノメチル−スフィンゴシン（Ｎ−ＭｏｎｏＭｅ）；
白画角：天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造され
たＮ、Ｎ〜ジメチル−Ｌ−）レオ−スフィンゴシン（Ｎ
、Ｎ−ＤｉＭｅ−Ｌ−トレオ）。
の濃度をμＭで表わし、縦軸は細胞成長の相対的阻害率
（％）で表わした。白丸：セラミド（Ｃｏｒ） ；白玉
角；Ｎ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｃ）；黒四角：
天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ
−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ、Ｎ−ＤｉＭｅ）；黒
丸：天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
−モノメチル−スフィンゴシン（Ｎ−ＭｏｎｏＭｅ）；
白画角：天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造され
たＮ、Ｎ〜ジメチル−Ｌ−）レオ−スフィンゴシン（Ｎ
、Ｎ−ＤｉＭｅ−Ｌ−トレオ）。
Ｎ、 Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン並びにＮ−モノ
メチル−スフィンゴシンおよびＮ、Ｎ−ジメチル−Ｌ−
トレオースフィンゴシンは、１２．５μＭで有意な阻害
活性を示したが、セラミドまたはＮ−アセチルスフィン
ゴシンは、１５０μＭでも最低の阻害活性しか示さなか
った。
メチル−スフィンゴシンおよびＮ、Ｎ−ジメチル−Ｌ−
トレオースフィンゴシンは、１２．５μＭで有意な阻害
活性を示したが、セラミドまたはＮ−アセチルスフィン
ゴシンは、１５０μＭでも最低の阻害活性しか示さなか
った。
実施例５
スフィンゴシンおよび天然に産生されるスフィンゴ脂質
から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによ
るヌードマウスにおけるヒト結腸癌細胞の成長阻害の測
定 Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（実施例３に従って
、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された）に
よるヌードマウスにおけるＨＲＴ１８腫瘍細胞のインビ
ボでの成長に及ぼす影響を下記の通りに測定した。
から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによ
るヌードマウスにおけるヒト結腸癌細胞の成長阻害の測
定 Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（実施例３に従って
、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された）に
よるヌードマウスにおけるＨＲＴ１８腫瘍細胞のインビ
ボでの成長に及ぼす影響を下記の通りに測定した。
０８目に、ＨＲＴ−１８ヒト結腸癌細胞１×１０６個を
公知の方法によりヌードマウスに接種した。リン酸緩衝
生理食塩水（Ｐ Ｂ Ｓ）に乳化させたＮ、Ｎ−ジメチ
ル−スフィンゴシン（４４μｇ／２００μｌ）を７．１
１および１５日目に注射した。
公知の方法によりヌードマウスに接種した。リン酸緩衝
生理食塩水（Ｐ Ｂ Ｓ）に乳化させたＮ、Ｎ−ジメチ
ル−スフィンゴシン（４４μｇ／２００μｌ）を７．１
１および１５日目に注射した。
腫瘍成長型ｆｆｉ（ｍｇ）を腫瘍の大きさから算出した
。
。
各群は１０匹で構成されていた。
結果を第５図に示す。
第５図において、横軸は日数を表わし、縦軸は腫瘍重量
（ｍｇ）を表わす。白丸はＰＢＳのみの対照を示す。黒
丸はＮ’、 Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ、Ｎ−
ＤｉＭｅ）を示す。
（ｍｇ）を表わす。白丸はＰＢＳのみの対照を示す。黒
丸はＮ’、 Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ、Ｎ−
ＤｉＭｅ）を示す。
結果から、ヌードマウスにおけるＨＲＴ１８腫瘍細胞の
インビボでの成長が、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシ
ンにより阻害されることがわかった。成長阻害率は５０
％よりも高く、統計処理により、その阻害が有意である
ことがわかった（ｐ〉０．００５ ）。
インビボでの成長が、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシ
ンにより阻害されることがわかった。成長阻害率は５０
％よりも高く、統計処理により、その阻害が有意である
ことがわかった（ｐ〉０．００５ ）。
実施例６
天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ、Ｎ
−ジメチル−スフィンゴシンによる、ヒト末梢血リンパ
球およびマウス牌細胞のコンカナバリンＡにより惹起さ
れる有糸分裂誘発に対する阻害の測定 コンカナバリンＡ （ｃｏｎ−Ａ）に対するＮ、Ｎ−ジ
メチル−スフィンゴシン（実施例３の記載に従って、天
然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された）の効果
を、ヒト末梢血リンパ球およびマウス牌細胞を用いて試
験した。
−ジメチル−スフィンゴシンによる、ヒト末梢血リンパ
球およびマウス牌細胞のコンカナバリンＡにより惹起さ
れる有糸分裂誘発に対する阻害の測定 コンカナバリンＡ （ｃｏｎ−Ａ）に対するＮ、Ｎ−ジ
メチル−スフィンゴシン（実施例３の記載に従って、天
然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された）の効果
を、ヒト末梢血リンパ球およびマウス牌細胞を用いて試
験した。
公知の方法によりヒト血から単離した末梢血リンパ球を
増殖ウェル（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｗｏｌｌｓ）内のｃｏ
ｎ−Ａ２μｇ／ｍｌを含有するＲＰＭＩ中で１８時間培
養した。次いで、第６図に示すように、種々の濃度のＮ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、スフィンゴシンまた
はＮ−アセチルスフィンゴシンを培地に添加して、５時
間培養を続け、３Ｈ−チミジンを加えた。５時間に亘る
チミジン摂取を測定した。
増殖ウェル（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｗｏｌｌｓ）内のｃｏ
ｎ−Ａ２μｇ／ｍｌを含有するＲＰＭＩ中で１８時間培
養した。次いで、第６図に示すように、種々の濃度のＮ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、スフィンゴシンまた
はＮ−アセチルスフィンゴシンを培地に添加して、５時
間培養を続け、３Ｈ−チミジンを加えた。５時間に亘る
チミジン摂取を測定した。
有糸分裂誘発の阻害率（％）を対照値（阻害物質を添加
していない）に基づいて計算した。
していない）に基づいて計算した。
マウス牌細胞のｃｏｎ−Ａにより惹起される有糸分裂誘
発の阻害を同様の方法で測定した。
発の阻害を同様の方法で測定した。
末梢血リンパ球の結果を第６図に示す。
第６図において、横軸は、天然に産生されるスフィンゴ
脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン
（Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉＭｅ ：黒丸）、スフィンゴシン（
白三角）またはＮ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｃ：
白丸）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合成の相対的阻
害を％で表わす。
脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン
（Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉＭｅ ：黒丸）、スフィンゴシン（
白三角）またはＮ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｃ：
白丸）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合成の相対的阻
害を％で表わす。
第６図のデータは、コンカナバリンＡ依存性成長刺激が
、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンの存在下に大きく
阻害されるが、置換されていないスフィンゴシンまたは
Ｎ−アセチルスフィンゴシンの存在下では阻害されなか
ったことを示す。
、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンの存在下に大きく
阻害されるが、置換されていないスフィンゴシンまたは
Ｎ−アセチルスフィンゴシンの存在下では阻害されなか
ったことを示す。
同様の結果がマウス牌細胞でも得られた。
実施例７
天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ。
Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによる、ヒト末梢血リン
パ球およびマウス牌細胞のＩ Ｌ−２依存性有余分裂誘
発の阻害の測定 Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（実施例３に従って
、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた）のＩ
Ｌ−２依存性有余分裂誘発に及ぼす影響をヒト末梢血リ
ンパ球およびマウス牌細胞を用いて試験した。
パ球およびマウス牌細胞のＩ Ｌ−２依存性有余分裂誘
発の阻害の測定 Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（実施例３に従って
、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた）のＩ
Ｌ−２依存性有余分裂誘発に及ぼす影響をヒト末梢血リ
ンパ球およびマウス牌細胞を用いて試験した。
公知方法によりヒト血から単離されたヒト末梢血リンパ
球をＩ Ｌ −２０，５ＬＩ／ｍｌを含有するＲＰＭｌ
中で培養した。次いで、第７図に示される様に、種々の
濃度のＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、スフィンゴ
シンまたはＮ−アセチルスフィンゴシンを含有する培地
で上記培地を置換した後、３Ｈ−チミジンを加えた。５
時間に亘って、ＤＮＡ内への３Ｈ−チミジンの取込みに
より、有糸分裂誘発を測定した。対照値（阻害物質を添
加していない）と比較して阻害率を測定した。
球をＩ Ｌ −２０，５ＬＩ／ｍｌを含有するＲＰＭｌ
中で培養した。次いで、第７図に示される様に、種々の
濃度のＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、スフィンゴ
シンまたはＮ−アセチルスフィンゴシンを含有する培地
で上記培地を置換した後、３Ｈ−チミジンを加えた。５
時間に亘って、ＤＮＡ内への３Ｈ−チミジンの取込みに
より、有糸分裂誘発を測定した。対照値（阻害物質を添
加していない）と比較して阻害率を測定した。
マウス牌細胞におけるＩ Ｌ−２により惹起される有糸
分裂誘発の阻害を同様に測定した。
分裂誘発の阻害を同様に測定した。
末梢血リンパ球の結果を第７図に示す。
第７図において、横軸は、天然に産生されるスフィンゴ
脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン
（Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉ Ｍｅ ：黒丸）、スフィンゴシン
（白三角）またはＮ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｅ
：白丸）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合成の相対的
阻害を％で表わす。
脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン
（Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉ Ｍｅ ：黒丸）、スフィンゴシン
（白三角）またはＮ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｅ
：白丸）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合成の相対的
阻害を％で表わす。
第７図のデータから、有糸分裂誘発は、Ｎ、 Ｎ−ジメ
チル−スフィンゴシンの存在下では常に阻害されるが、
置換されていないスフィンゴシンまたはＮ−アセチルス
フィンゴシンの存在下では阻害されにくいことがわかる
。
チル−スフィンゴシンの存在下では常に阻害されるが、
置換されていないスフィンゴシンまたはＮ−アセチルス
フィンゴシンの存在下では阻害されにくいことがわかる
。
マウス牌細胞でも同様の結果が得られた。
実施例４〜７の結果から、下記の結論が導かれた：
１、Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、Ｎ−モノメチ
ル−スフィンゴシンおよび天然に産生されるスフィンゴ
脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｌ−）レオ−ス
フィンゴシンは、インビトロにおけるヒト結腸癌細胞の
成長に対する強い阻害活性を示した。
ル−スフィンゴシンおよび天然に産生されるスフィンゴ
脂質から製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｌ−）レオ−ス
フィンゴシンは、インビトロにおけるヒト結腸癌細胞の
成長に対する強い阻害活性を示した。
２、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヌードマウスにお
けるヒト腫瘍細胞のインビボでの成長に対して、統計学
的に有意な阻害効果を示した。
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヌードマウスにお
けるヒト腫瘍細胞のインビボでの成長に対して、統計学
的に有意な阻害効果を示した。
３、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血リンパ
球およびマウス牌細胞において、コンカナバリンＡによ
り惹起される有糸分裂誘発に対する強い阻害作用を示し
た。
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血リンパ
球およびマウス牌細胞において、コンカナバリンＡによ
り惹起される有糸分裂誘発に対する強い阻害作用を示し
た。
４、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造されたＮ
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血リンパ
球およびマウス牌細胞のＩ Ｌ−２依存性台系分裂誘発
に対して、強い阻害作用を示した。
、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンは、ヒト末梢血リンパ
球およびマウス牌細胞のＩ Ｌ−２依存性台系分裂誘発
に対して、強い阻害作用を示した。
上記に特定の実施態様を挙げて、本発明の詳細な説明し
たが、本発明の目的および趣旨の範囲を越えない程度に
おいて、種々の改変などを行ってもよいことは当業者に
とって自明である。
たが、本発明の目的および趣旨の範囲を越えない程度に
おいて、種々の改変などを行ってもよいことは当業者に
とって自明である。
第１図は、スフィンゴシンおよび種々の合成的に製造さ
れたスフィンゴシン誘導体の構造を示す。 第２図は、スフィンゴシンおよび種々の合成的に製造さ
れたスフィンゴシン誘導体のＣ−キナーゼ活性に対する
阻害効果を示すグラフである。横軸は、スフィンゴシン
、合成的に製造されたスフィンゴシン誘導体、天然に産
生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン
またはスルファチドの濃度をμＭで表わす。縦軸は、Ｃ
−キナーゼの相対活性を％で表わす。黒丸：合成的に製
造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロースフィンゲ
、＝、７ （Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉＭｅ−Ｄ−エリスロ）
または天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン（スフィンゴシン）；白丸二Ｎ、 Ｎ−
ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニン（Ｎ、 Ｎ−
Ｄ ｉＭｅ−Ｌ−エリスロ）；黒四角：Ｌ−エリスロ−
スフィンゲニン（Ｌ−エリスロ）；白画角：Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニン（Ｄ−エリスロ）；白三角：スルフ
ァチド。 第３図は、ガングリオシドおよびスルファチドのＣ−キ
ナーゼの活性に対する阻害効果を示すグラフである。横
軸は、ガングリオシドまたはスルファチドの濃度をμＭ
で表わす。縦軸は、Ｃ−キナーゼの相対活性を％で表わ
す。黒丸：ＧＴｌ、。 白丸：ＧＭ３：白三角：スルファチド。糖脂質はスヴエ
ンナーホルム、エル、 （Ｓｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍ、
Ｌ、）のシステム（ジャーナル オブ ニュウロケミス
トリー（Ｊ、 Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、） 、 １０．
６１３−６２３．１９６３ ）に従って略号化する。 第４図は、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造さ
れたＮ−メチル−スフィンゴシンのヒト結腸癌細胞ＨＲ
Ｔ−１８の成長に及ぼす影響を示すグラフである。横軸
は、スフィンゴシン誘導体またはセラミドの濃度をμＭ
で表わす。縦軸は、細胞成長の相対的阻害を％で表わす
。白丸：セラミド（ｃｅｒ）；白玉角：Ｎ−アセチルス
フィンゴシン（ＮＡｃ）；黒画角：天然に産生ずるスフ
ィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴ
シン（Ｎ、Ｎ−ＤｉＭｅ）；黒丸：天然に産生ずるスフ
ィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチルスフィンゴシン
（Ｎ−ＭｏｎｏＭｅ）；白四角：天然に産生ずるスフィ
ンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジメチル−し−トレオー
スフィンゴシン（Ｎ、Ｎ−ＤｉＭｅ−Ｌ−）レオ）。 第５図は、天然に産生ずるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ。 Ｎ−ＤｊＭｅ）によるヌードマウスにおけるヒト癌細胞
の成長阻害を示すグラフである。横軸は日を表わす。縦
軸は腫瘍重量（ｍｇ）を表わす。対照は、リン酸緩衝生
理食塩水（ＰＢＳ）であった。 第６図は、天然に産生ずるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによるヒト末梢血リ
ンパ球のコンカナバリンＡにより惹起される有糸分裂誘
発の阻害を示すグラフである。横軸は、天然に産生され
るスフィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジメチル−スフ
ィンゴシン（Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉ Ｍｅ ：黒丸）、スフ
ィンゴシン（白三角）またはＮ−アセチルスフィンゴシ
ン（ＮＡｃ：白丸）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合
成の相対的阻害を％で表わす。 第７図は、天然に産生ずるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによるヒト末梢血リ
ンパ球のＩ Ｌ−２惹起有余分裂誘発の阻害を示すグラ
フである。横軸は、天然に産生されるスフィンゴ脂質か
ら製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ、
Ｎ−Ｄ ｉ Ｍｅ ：黒丸）、スフィンゴシン（白三
角）またはＮ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｃ：白丸
）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合成の相対的阻害を
％で表わす。 （以 上） Ｆｉへ・ １ ＤＣ＋’）− −エリスロ−スフィンゲニン スフィンゲニン
れたスフィンゴシン誘導体の構造を示す。 第２図は、スフィンゴシンおよび種々の合成的に製造さ
れたスフィンゴシン誘導体のＣ−キナーゼ活性に対する
阻害効果を示すグラフである。横軸は、スフィンゴシン
、合成的に製造されたスフィンゴシン誘導体、天然に産
生されるスフィンゴ脂質から製造されたスフィンゴシン
またはスルファチドの濃度をμＭで表わす。縦軸は、Ｃ
−キナーゼの相対活性を％で表わす。黒丸：合成的に製
造されたＮ、Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリスロースフィンゲ
、＝、７ （Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉＭｅ−Ｄ−エリスロ）
または天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造された
スフィンゴシン（スフィンゴシン）；白丸二Ｎ、 Ｎ−
ジメチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニン（Ｎ、 Ｎ−
Ｄ ｉＭｅ−Ｌ−エリスロ）；黒四角：Ｌ−エリスロ−
スフィンゲニン（Ｌ−エリスロ）；白画角：Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニン（Ｄ−エリスロ）；白三角：スルフ
ァチド。 第３図は、ガングリオシドおよびスルファチドのＣ−キ
ナーゼの活性に対する阻害効果を示すグラフである。横
軸は、ガングリオシドまたはスルファチドの濃度をμＭ
で表わす。縦軸は、Ｃ−キナーゼの相対活性を％で表わ
す。黒丸：ＧＴｌ、。 白丸：ＧＭ３：白三角：スルファチド。糖脂質はスヴエ
ンナーホルム、エル、 （Ｓｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍ、
Ｌ、）のシステム（ジャーナル オブ ニュウロケミス
トリー（Ｊ、 Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、） 、 １０．
６１３−６２３．１９６３ ）に従って略号化する。 第４図は、天然に産生されるスフィンゴ脂質から製造さ
れたＮ−メチル−スフィンゴシンのヒト結腸癌細胞ＨＲ
Ｔ−１８の成長に及ぼす影響を示すグラフである。横軸
は、スフィンゴシン誘導体またはセラミドの濃度をμＭ
で表わす。縦軸は、細胞成長の相対的阻害を％で表わす
。白丸：セラミド（ｃｅｒ）；白玉角：Ｎ−アセチルス
フィンゴシン（ＮＡｃ）；黒画角：天然に産生ずるスフ
ィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴ
シン（Ｎ、Ｎ−ＤｉＭｅ）；黒丸：天然に産生ずるスフ
ィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチルスフィンゴシン
（Ｎ−ＭｏｎｏＭｅ）；白四角：天然に産生ずるスフィ
ンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジメチル−し−トレオー
スフィンゴシン（Ｎ、Ｎ−ＤｉＭｅ−Ｌ−）レオ）。 第５図は、天然に産生ずるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ。 Ｎ−ＤｊＭｅ）によるヌードマウスにおけるヒト癌細胞
の成長阻害を示すグラフである。横軸は日を表わす。縦
軸は腫瘍重量（ｍｇ）を表わす。対照は、リン酸緩衝生
理食塩水（ＰＢＳ）であった。 第６図は、天然に産生ずるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによるヒト末梢血リ
ンパ球のコンカナバリンＡにより惹起される有糸分裂誘
発の阻害を示すグラフである。横軸は、天然に産生され
るスフィンゴ脂質から得られたＮ、Ｎ−ジメチル−スフ
ィンゴシン（Ｎ、 Ｎ−Ｄ ｉ Ｍｅ ：黒丸）、スフ
ィンゴシン（白三角）またはＮ−アセチルスフィンゴシ
ン（ＮＡｃ：白丸）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合
成の相対的阻害を％で表わす。 第７図は、天然に産生ずるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンによるヒト末梢血リ
ンパ球のＩ Ｌ−２惹起有余分裂誘発の阻害を示すグラ
フである。横軸は、天然に産生されるスフィンゴ脂質か
ら製造されたＮ、Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン（Ｎ、
Ｎ−Ｄ ｉ Ｍｅ ：黒丸）、スフィンゴシン（白三
角）またはＮ−アセチルスフィンゴシン（ＮＡｃ：白丸
）をμＭで表わす。縦軸は、ＤＮＡ合成の相対的阻害を
％で表わす。 （以 上） Ｆｉへ・ １ ＤＣ＋’）− −エリスロ−スフィンゲニン スフィンゲニン
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記成分 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とするヒト細胞および動物細胞の
成長阻害剤。 ２ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメ
チル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上を含有する請求項１に記載の細胞成長
阻害剤。 ３ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩か
ら選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含
有する請求項２に記載の細胞成長阻害剤。 ４ 哺乳類の細胞の成長を阻害する請求項１乃至３のい
ずれかに記載の成長阻害剤。 ５ 良性または悪性腫瘍細胞の成長を阻害する請求項１
乃至３のいずれかに記載の細胞成長阻害剤。 ６ 下記成分 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とするヒトおよび動物の腫瘍成長
阻害剤。 ７ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメ
チル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上を含有する請求項６に記載の腫瘍成長
阻害剤。 ８ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリス
ロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩か
ら選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含
有する請求項７に記載の腫瘍成長阻害剤。 ９ 哺乳類腫瘍の成長を阻害する請求項６乃至８のいず
れかに記載の腫瘍成長阻害剤。 １０ 良性または悪性腫瘍の成長を阻害する請求項６乃
至８のいずれかに記載の腫瘍成長阻害剤。 １１ 下記成分 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とする、インビボでのヒトおよび
動物の腫瘍転移阻害剤。 １２ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を含有する請求項１１に記載の腫瘍
転移阻害剤。 １３ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
含有する請求項１２に記載の腫瘍転移阻害剤。 １４ 哺乳類の腫瘍の転移を阻害する請求項１１乃至１
３のいずれかに記載の腫瘍転移阻害剤。 １５ 良性または悪性腫瘍の転移を阻害する請求項１１
乃至１３のいずれかに記載の腫瘍転移阻害剤。 １６ 下記成分 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とする、少なくとも一部はリンパ
球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答阻害剤
。 １７ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を含有する請求項１６に記載の免疫
応答阻害剤。 １８ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
含有する請求項１７に記載の免疫応答阻害剤。 １９ 哺乳類の免疫応答を阻害する請求項１６乃至１８
のいずれかに記載の免疫応答阻害剤。 ２０ 少なくとも一部はコンカナバリンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻害する請
求項１６乃至１８のいずれかに記載の免疫応答阻害剤。 ２１ 少なくとも一部はフィトヘムアグルチニンＡによ
り惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻
害する請求項１６乃至１８のいずれかに記載の免疫応答
阻害剤。 ２２ 免疫応答が自己免疫応答である請求項１６乃至１
８のいずれかに記載の免疫応答阻害剤。 ２３ 自己免疫応答が、少なくとも一部はコンカナバリ
ンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発によるもの
である請求項２２に記載の免疫応答阻害剤。 ２４ 自己免疫応答が、少なくとも一部はフィトヘムア
グルチニンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発に
よるものである請求項２２に記載の免疫応答阻害剤。 ２５ 自己免疫応答が、少なくとも一部はＩＬ−２依存
性Ｔ細胞成長によるものである請求項２２に記載の免疫
応答阻害剤。 ２６ 下記成分 （１）合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とする、少なくとも一部は顆粒球
および／またはリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび
動物の炎症反応阻害剤。 ２７ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を含有する請求項２６に記載の炎症
反応阻害剤。 ２８ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
含有する請求項２７に記載の炎症反応阻害剤。 ２９ 哺乳類の炎症応答を阻害する請求項２６乃至２８
のいずれかに記載の炎症反応阻害剤。 ３０ 少なくとも一部はコンカナバリンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応を阻害する請
求項２６乃至２８のいずれかに記載の炎症反応阻害剤。 ３１ 少なくとも一部はフィトヘムアグルチニンＡによ
り惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応を阻
害する請求項２６乃至２８のいずれかに記載の炎症反応
阻害剤。 ３２ 合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
細胞を接触させることを含む該細胞の成長を阻害する方
法。 ３３ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を用いる請求項３２に記載の方法。 ３４ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
用いる請求項３３に記載の方法。 ３５ 細胞が哺乳類の細胞である請求項３２乃至３４の
いずれかに記載の方法。 ３６ 細胞が良性または悪性腫瘍細胞である請求項３２
乃至３４のいずれかに記載の方法。 ３７ 合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
腫瘍を接触させることを含む該腫瘍胞の成長をインビボ
で阻害する方法。 ３８ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を用いる請求項３７に記載の方法。 ３９ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
用いる請求項３８に記載の方法。 ４０ 腫瘍が哺乳類の腫瘍である請求項３７乃至３９の
いずれかに記載の方法。 ４１ 腫瘍が良性または悪性腫瘍である請求項３７乃至
３９のいずれかに記載の方法。 ４２ 合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
腫瘍を接触させることを含むインビボにおける該腫瘍の
転移を阻害する方法。 ４３ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を用いる請求項４２に記載の方法。 ４４ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
用いる請求項４３に記載の方法。 ４５ 哺乳類の腫瘍の転移を阻害する請求項４２乃至４
４のいずれかに記載の方法。 ４６ 良性または悪性腫瘍の転移を阻害する請求項４２
乃至４４のいずれかに記載の方法。 ４７ 合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
リンパ球を接触させることを含む、少なくとも一部はリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトまたは動物の免疫応答を
阻害する方法。 ４８ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を用いる請求項４７に記載の方法。 ４９ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
用いる請求項４８に記載の方法。 ５０ 哺乳類の免疫応答を阻害する請求項４７乃至４９
のいずれかに記載の方法。 ５１ 少なくとも一部がコンカナバリンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻害する請
求項４７乃至４９のいずれかに記載の方法。 ５２ 少なくとも一部がフィトヘムアグルチニンＡによ
り惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻
害する請求項４７乃至４９のいずれかに記載の方法。 ５３ 免疫応答が自己免疫応答である請求項４７乃至４
９のいずれかに記載の方法。 ５４ 自己免疫応答が、少なくとも一部はコンカナバリ
ンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発によるもの
である請求項５３に記載の方法。 ５５ 自己免疫応答が、少なくとも一部はフィトヘムア
グルチニンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発に
よるものである請求項５３に記載の方法。 ５６ 自己免疫応答が、少なくとも一部はＩＬ−２依存
性Ｔ細胞成長によるものである請求項５３に記載の方法
。 ５７ 合成的に製造されたスフィンゴシン、合成的に製
造されたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
顆粒球および／またはリンパ球を接触させることを含む
、少なくとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸
分裂誘発によるヒトまたは動物の炎症反応を阻害する方
法。 ５８ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニン、合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジ
メチル−Ｌ−エリスロ−スフィンゲニンおよびそれらの
薬学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の
１種または２種以上を用いる請求項５７に記載の方法。 ５９ 合成的に製造されたＮ，Ｎ−ジメチル−Ｄ−エリ
スロ−スフィンゲニンおよびその薬学的に許容される塩
から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または２種以上を
用いる請求項５８に記載の方法。 ６０ 哺乳類の炎症反応を阻害する請求項５７乃至５９
のいずれかに記載の方法。 ６１ 少なくとも一部がコンカナバリンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応を阻害する請
求項５７乃至５９のいずれかに記載の方法。 ６２ 少なくとも一部がフィトヘムアグルチニンＡによ
り惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻
害する請求項５７乃至５９のいずれかに記載の方法。 ６３ 下記成分 （１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とするヒト細胞および動物細胞成
長阻害剤。 ６４ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるス
フィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含有する請求
項６３に記載の細胞成長阻害剤。 ６５ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許
容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または
２種以上を含有する請求項６４に記載の細胞成長阻害剤
。 ６６ 哺乳類の細胞の成長を阻害する請求項６３乃至６
５のいずれかに記載の成長阻害剤。 ６７ 良性または悪性腫瘍細胞の成長を阻害する請求項
６３乃至６５のいずれかに記載の細胞成長阻害剤。 ６８ 下記成分 （１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とするインビボでのヒトおよび動
物の腫瘍成長阻害剤。 ６９ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるス
フィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含有する請求
項６８に記載の腫瘍成長阻害剤。 ７０ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許
容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または
２種以上を含有する請求項６９に記載の腫瘍成長阻害剤
。 ７１ 哺乳類腫瘍の成長を阻害する請求項６８乃至７０
のいずれかに記載の腫瘍成長阻害剤。 ７２ 良性腫瘍または悪性腫瘍の成長を阻害する請求項
６８乃至７０のいずれかに記載の腫瘍成長阻害剤。 ７３ 下記成分 （１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とする、インビボでのヒトおよび
動物の腫瘍転移阻害剤。 ７４ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるス
フィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含有する請求
項７３に記載の腫瘍転移阻害剤。 ７５ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許
容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または
２種以上を含有する請求項７４に記載の腫瘍転移阻害剤
。 ７６ 哺乳類の腫瘍の転移を阻害する請求項７３乃至７
５のいずれかに記載の腫瘍転移阻害剤。 ７７ 良性腫瘍または悪性腫瘍の転移を阻害する請求項
７３乃至７５のいずれかに記載の腫瘍転移阻害剤。 ７８ 下記成分 （１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とする、少なくとも一部はリンパ
球有糸分裂誘発によるヒトおよび動物の免疫応答阻害剤
。 ７９ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるス
フィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含有する請求
項７８に記載の免疫応答阻害剤。 ８０ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許
容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または
２種以上を含有する請求項７９に記載の免疫応答阻害剤
。 ８１ 哺乳類の免疫応答を阻害する請求項７８乃至８０
のいずれかに記載の免疫応答阻害剤。 ８２ 少なくとも一部はコンカナバリンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻害する請
求項７８乃至８０のいずれかに記載の免疫応答阻害剤。 ８３ 少なくとも一部はフィトヘムアグルチニンＡによ
り惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻
害する請求項７８乃至８０のいずれかに記載の免疫応答
阻害剤。 ８４ 免疫応答が自己免疫応答である請求項７８乃至８
０のいずれかに記載の免疫応答阻害剤。 ８５ 自己免疫応答が、少なくとも一部はコンカナバリ
ンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発によるもの
である請求項８４に記載の免疫応答阻害剤。 ８６ 自己免疫応答が、少なくとも一部はフィトヘムア
グルチニンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発に
よるものである請求項８４に記載の免疫応答阻害剤。 ８７ 自己免疫応答が、少なくとも一部はＩＬ−２依存
性Ｔ細胞成長によるものである請求項８４に記載の免疫
応答阻害剤。 ８８ 下記成分 （１）天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種
または２種以上の細胞成長阻害量および （２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤 を含有することを特徴とする、少なくとも一部は顆粒球
および／またはリンパ球有糸分裂誘発によるヒトおよび
動物の炎症反応阻害剤。 ８９ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるス
フィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上を含有する請求
項８８に記載の炎症反応阻害剤。 ９０ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許
容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または
２種以上を含有する請求項８９に記載の炎症反応阻害剤
。 ９１ 哺乳類の炎症応答を阻害する請求項８８乃至９０
のいずれかに記載の炎症反応阻害剤。 ９２ 少なくとも一部はコンカナバリンＡにより惹起さ
れるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応を阻害する請
求項８８乃至９０のいずれかに記載の炎症反応阻害剤。 ９３ 少なくとも一部はフィトヘムアグルチニンＡによ
り惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応を阻
害する請求項８８乃至９０のいずれかに記載の炎症反応
阻害剤。 ９４ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の少な
くとも１種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトま
たは動物細胞を接触させることを含む該細胞の成長を阻
害する方法。 ９５ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生されるス
フィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィンゴ
シンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた
細胞成長阻害物質の１種または２種以上を用いる請求項
９４に記載の方法。 ９６ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたＮ
，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に許
容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種または
２種以上を用いる請求項９５に記載の方法。 ９７ 細胞が哺乳類の細胞である請求項９４乃至９６の
いずれかに記載の方法。 ９８ 細胞が良性または悪性腫瘍細胞である請求項９４
乃至９６のいずれかに記載の方法。 ９９ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られたス
フィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から得
られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬学
的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の少な
くとも１種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトま
たは動物腫瘍を接触させることを含む該腫瘍の成長をイ
ンビボで阻害する方法。 １００ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生される
スフィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィン
ゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれ
た細胞成長阻害物質の１種または２種以上を用いる請求
項９９に記載の方法。 １０１ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に
許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種また
は２種以上を用いる請求項１００に記載の方法。 １０２ 腫瘍が哺乳類の腫瘍である請求項９９乃至１０
１のいずれかに記載の方法。 １０３ 腫瘍が良性または悪性腫瘍である請求項９９乃
至１０１のいずれかに記載の方法。 １０４ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
得られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびその薬学的
に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の少なく
とも１種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまた
は動物腫瘍を接触させることを含むインビボにおける該
腫瘍胞の転移を阻害する方法。 １０５ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生される
スフィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィン
ゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれ
た細胞成長阻害物質の１種または２種以上を用いる請求
項１０４に記載の方法。 １０６ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に
許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種また
は２種以上を用いる請求項１０５に記載の方法。 １０７ 哺乳類の腫瘍の転移を阻害する請求項１０４乃
至１０６のいずれかに記載の方法。 １０８ 良性または悪性腫瘍の転移を阻害する請求項１
０４乃至１０６のいずれかに記載の方法。 １０９ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
得られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
リンパ球を接触させることを含む、少なくとも一部はリ
ンパ球有糸分裂誘発によるヒトまたは動物の免疫応答を
阻害する方法。 １１０ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生される
スフィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィン
ゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれ
た細胞成長阻害物質の１種または２種以上を用いる請求
項１０９に記載の方法。 １１１ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に
許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種また
は２種以上を用いる請求項１１０に記載の方法。 １１２ 哺乳類の免疫応答を阻害する請求項１０９乃至
１１１のいずれかに記載の方法。 １１３ 少なくとも一部がコンカナバリンＡにより惹起
されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を阻害する
請求項１０９乃至１１１のいずれかに記載の方法。 １１４ 少なくとも一部がフィトヘムアグルチニンＡに
より惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を
阻害する請求項１０９乃至１１１のいずれかに記載の方
法。 １１５ 免疫応答が自己免疫応答である請求項１０９乃
至１１１のいずれかに記載の方法。 １１６ 自己免疫応答が、少なくとも一部はコンカナバ
リンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発によるも
のである請求項１１５に記載の方法。 １１７ 自己免疫応答が、少なくとも一部はフィトヘム
アグルチニンＡにより惹起されるリンパ球有糸分裂誘発
によるものである請求項１１５に記載の方法。 １１８ 自己免疫応答が、少なくとも一部はＩＬ−２依
存性Ｔ細胞成長によるものである請求項１１５に記載の
方法。 １１９ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
スフィンゴシン、天然に産生されるスフィンゴ脂質から
得られたＮ−メチル−スフィンゴシンおよびそれらの薬
学的に許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１
種または２種以上の細胞成長阻害量に、ヒトまたは動物
顆粒球および／またはリンパ球を接触させることを含む
、少なくとも一部は顆粒球および／またはリンパ球有糸
分裂誘発によるヒトおよび動物の炎症反応を阻害する方
法。 １２０ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシン、天然に産生される
スフィンゴ脂質から得られたＮ−モノメチル−スフィン
ゴシンおよびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれ
た細胞成長阻害物質の１種または２種以上を用いる請求
項１１９に記載の方法。 １２１ 天然に産生されるスフィンゴ脂質から得られた
Ｎ，Ｎ−ジメチル−スフィンゴシンおよびその薬学的に
許容される塩から選ばれた細胞成長阻害物質の１種また
は２種以上を用いる請求項１２０に記載の方法。 １２２ 哺乳類の炎症反応を阻害する請求項１１９乃至
１２１のいずれかに記載の方法。 １２３ 少なくとも一部がコンカナバリンＡにより惹起
されるリンパ球有糸分裂誘発による炎症反応を阻害する
請求項１１９乃至１２１のいずれかに記載の方法。 １２４ 少なくとも一部がフィトヘムアグルチニンＡに
より惹起されるリンパ球有糸分裂誘発による免疫応答を
阻害する請求項１１９乃至１２１のいずれかに記載の方
法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US30637889A | 1989-02-03 | 1989-02-03 | |
| US306,378 | 1989-02-03 | ||
| US39013589A | 1989-08-07 | 1989-08-07 | |
| US390,135 | 1989-08-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03157336A true JPH03157336A (ja) | 1991-07-05 |
| JP2976055B2 JP2976055B2 (ja) | 1999-11-10 |
Family
ID=26975128
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2025010A Expired - Fee Related JP2976055B2 (ja) | 1989-02-03 | 1990-02-02 | 細胞成長阻害物質として有用なスフィンゴシンおよびｎ―メチル―スフィンゴシン |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0381514B1 (ja) |
| JP (1) | JP2976055B2 (ja) |
| AT (1) | ATE122560T1 (ja) |
| CA (1) | CA2007507C (ja) |
| DE (1) | DE69019388T2 (ja) |
| DK (1) | DK0381514T3 (ja) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5583160A (en) * | 1989-02-03 | 1996-12-10 | The Biomembrane Institute | Methylsphingosine used to treat apoptosis |
| US5151360A (en) * | 1990-12-31 | 1992-09-29 | Biomembrane Institute | Effect of n,n,n-trimethylsphingosine on protein kinase-c activity, melanoma cell growth in vitro, metastatic potential in vivo and human platelet aggregation |
| US5260288A (en) * | 1992-04-03 | 1993-11-09 | The Biomembrane Institute | Method for inhibition of cell motility by sphingosine-1-phosphate and derivatives |
| IL121320A (en) | 1997-02-23 | 2000-12-06 | Ibr Ltd | Extracts from cells or tissue of organisms which are capable of entering dormancy for inhibition of proliferation of target cells or tissue |
| US6107520A (en) * | 1997-04-15 | 2000-08-22 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Spisulosine compounds |
| US6800661B1 (en) | 1997-04-15 | 2004-10-05 | Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Spisulosine compounds |
| USRE38793E1 (en) | 1997-04-15 | 2005-09-06 | Rinehart Kenneth L | Spisulosine compounds |
| AUPO900297A0 (en) * | 1997-09-08 | 1997-10-02 | Medvet Science Pty. Ltd. | A method of modulating cellular activity |
| US6649362B2 (en) | 1997-09-08 | 2003-11-18 | Medvet Science Pty. Ltd. | Screening method for an agent having an effect on a sphingosine kinase signaling pathway |
| US6864283B2 (en) * | 2000-02-16 | 2005-03-08 | Pharma Mar, S.A. | Oxy-and amino-substituted tetrahydrofuryl derivatives with antitumour activity |
| EP1195604A1 (en) * | 2000-09-29 | 2002-04-10 | Warner-Lambert Company | Methods and compositions for screening modulators of lipid kinases |
| WO2002060405A1 (en) * | 2001-01-29 | 2002-08-08 | Cosmoferm B.V. | Veterinary dermatologic composition comprising a sphingoid base and/or a sphingoid base derivative |
| KR100457113B1 (ko) * | 2001-12-27 | 2004-11-16 | 한국원자력연구소 | 세라마이드류 또는 그 유도체와 다이메틸스핑고신을 유효성분으로 포함하는 방사선민감도 증진제 |
| KR100459484B1 (ko) * | 2002-05-20 | 2004-12-03 | 한국원자력연구소 | 엔-아세틸 파이토스핑고신과 다이메틸 파이토스핑고신을유효 성분으로 포함하는 방사선 치료 민감제 조성물 |
| EP1426053A1 (en) * | 2002-12-03 | 2004-06-09 | Fresenius Kabi Deutschland GmbH | Use of amphiphilic lipids for reducing tumor metastasis |
| JP2008521888A (ja) | 2004-11-30 | 2008-06-26 | ネーデルランドセ オルガニサティエ フォール トエゲパストナトールヴェテンシャッペリク オンデルゾエク ティエヌオー | 脂肪症の、又は肝毒性及びその後遺症の治療及び予防におけるスフィンゴ脂質 |
| JP2013510878A (ja) * | 2009-11-12 | 2013-03-28 | テキサス テック ユニバーシティー | 高増殖性障害を処置する組成物および方法 |
| HRP20231233T1 (hr) | 2017-04-27 | 2024-01-19 | Pharma Mar, S.A. | Antitumorski spojevi |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4816450A (en) * | 1986-09-15 | 1989-03-28 | Duke University | Inhibition of protein kinase C by long-chain bases |
-
1990
- 1990-01-10 CA CA002007507A patent/CA2007507C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-02-02 DK DK90301099.9T patent/DK0381514T3/da active
- 1990-02-02 DE DE69019388T patent/DE69019388T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-02-02 JP JP2025010A patent/JP2976055B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1990-02-02 AT AT90301099T patent/ATE122560T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-02-02 EP EP90301099A patent/EP0381514B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK0381514T3 (da) | 1995-09-04 |
| CA2007507C (en) | 1998-05-19 |
| DE69019388T2 (de) | 1996-01-04 |
| DE69019388D1 (de) | 1995-06-22 |
| ATE122560T1 (de) | 1995-06-15 |
| EP0381514A2 (en) | 1990-08-08 |
| JP2976055B2 (ja) | 1999-11-10 |
| EP0381514A3 (en) | 1991-07-17 |
| CA2007507A1 (en) | 1990-08-03 |
| EP0381514B1 (en) | 1995-05-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH03157336A (ja) | 細胞成長阻害物質として有用なスフィンゴシンおよびｎ―メチル―スフィンゴシン | |
| EP1414426B1 (en) | Carbocyclic hydrazino inhibitors of copper-containing amine oxidases | |
| HUT73527A (en) | Remedy for nervous diseases | |
| JP2020189873A (ja) | グルコシルセラミドシンターゼの阻害剤としての非晶質及び結晶型のｇｅｎｚ１１２６３８ヘミ酒石酸塩 | |
| CZ212394A3 (en) | Enantiomeric hydroxy-xanthine derivatives | |
| JPH01254623A (ja) | スフインゴ糖脂質代謝の阻害剤を有効成分として含有する癌治療薬 | |
| CN102368905B (zh) | 酸性神经酰胺酶的向溶酶体抑制剂 | |
| US5216023A (en) | Polyunsaturated fatty acid derivatives, pharmaceutical compositions containing the same, method for the preparation thereof, and their use as medicament | |
| US11365177B2 (en) | Chemical uncouplers of respiration and methods of use thereof | |
| JPWO1995005177A1 (ja) | 神経疾患治療剤 | |
| JPH09501653A (ja) | 薬学的組成物 | |
| US6127578A (en) | Method of altering sphingolipid metabolism and detecting fumonisin ingestion and contamination | |
| JPH10510805A (ja) | スフィンゴシン、メチルスフィンゴシンおよびアポトーシス | |
| JPH05148200A (ja) | 筋障害および神経退行変性の処置のためのアシル−ｌ−カルニチン誘導体 | |
| JP2001508448A (ja) | フェチュインと治療剤との複合体及び組合せ物 | |
| JPH06509350A (ja) | 新規なガングリオシド誘導体 | |
| JP2011126886A (ja) | サフィンゴールの医薬組成物およびその使用方法 | |
| WO2022093809A1 (en) | Enhanced hyt-induced protein degradation using lipid nanoparticle delivery | |
| JPH0317019A (ja) | 製薬学的組成物 | |
| US6346547B1 (en) | N-substituted amino acids, antioxidant pharmaceutical compositions containing n-substituted amino acids and methods for preventing cardiovascular diseases and/or preventing and/or treating antioxidant responsive diseases therewith | |
| JP2002535251A (ja) | 癌治療のための新規化合物 | |
| AU661089B2 (en) | Ganglioside-GM3-fortified nutrient composition | |
| JPH02215711A (ja) | プロテインキナーゼ阻害剤としての、ｎ‐メチル‐スフィンゴシン誘導体及びその立体異性体 | |
| Patrizio et al. | Selective enhancement by serum factors of cyclic AMP accumulation in rat microglial cultures | |
| JPS61286324A (ja) | 免疫刺激剤として使用するためのスラミンナトリウム |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |