JPH03157379A - フタリド誘導体及びこれを有効成分とする子宮頚癌細胞の殺細胞剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は、ハリタケ科（Ｈｙｄｎａｃｓａｅ　）　、サ
ンゴハリタケ属（Ｈｅｒｉｃｉｕ■）のキノコであるヤ
マブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕ＠ｅｒｉｎａｃｅｕｓ）の
子実体中に存在するフタリド誘導体及び該フタリド誘導
体を有効成分とする子宮頚癌細胞の殺細胞剤に関する。

〈従来の技術〉 従来、キノコに含まれる化合物及び該化合物の癌細胞に
対する殺細胞効果について複数の報告がある０例えば、
サルノコシカケ科のキノコであるカワラタケ（Ｐｏｌｙ
ｐｏｒｕｓ　ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）にはエルゴステロ
ール誘導体が含まれており、該エルゴステロール誘導体
には肝臓癌細胞（Ｈｅｐａｔｏｍａ　ｃｅｌｌｓ）に対
する殺細胞効果のあることがテトラヘドロン（Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎ）３９　、２７７９〜２７８５　（１９
８３）に報告されている。またハラタケ科のキノコであ
るヒメマツタケ（Ａｇａｒｉｃｕｓｂｌａｚｅｉ）にも
エルゴステロール誘導体が含まれており、該エルゴステ
ロール誘導体には子宮頚癌細胞に対する殺細胞効果のあ
ることがフィトケミストリ （Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒ７）　２７　、２７７７
〜２７８９　（１９８８）に報告されている。そして同
様のことが特公昭４８−６７６６号公報、特開昭５５−
７１７０２号公報及び特開昭５８−６２１１８号公報等
にも報告されている。

〈発明が解決しようとする課題〉 しかし、ヤマブシタケについては上記のような報告がな
い、ヤマブシタケに含まれる化合物及びその癌細胞に対
する殺細胞効果については全く報告がないのである。

く課題を解決するための手段〉 しかして本発明者らは、以上の如き実情に鑑み、ヤマブ
シタケに含まれる化合物及びその癌細胞に対する殺細胞
効果について鋭意研究した結果、ヤマブシタケには特定
の化学構造から成る新規のフタリド誘導体が含まれてお
り、該フタリド誘導体は子宮頚癌細胞に対して優れた殺
細胞効果を有していることを見出した。

すなわち本発明は、下記構造式で示されるフタリド誘導
体、及び該フタリド誘導体を有効成分とする子宮頚癌細
胞の殺細胞剤に係わる。

上記構造式で示されるフタリド誘導体はヤマブシタケの
子実体を次のように処理することによって得られる。先
ず、ヤマブシタケの生成いは乾燥子叉体を水及び有機溶
媒の均一系で抽出処理し、濾過や遠心分離等で固液分離
したその抽出液から有機溶媒を蒸発して水相を得る。こ
の場合、水及び有機溶媒の均一系としては、８０〜８５
％メタノールやエタノール、８５％アセトン等がある。

抽出は通常室温で行なうが、加熱還流してもよく、抽出
時間は通常１〜７２時間である０例えば。

８５％エタノール中にヤマブシタケの生子実体を加え、
ホモジナイズ処理し、これを室温で一昼夜放置した後、
濾過して抽出液を得、該抽出液を減圧下に４０〜４５℃
で加熱してエタノールを蒸発することにより水相を得る
のである０次に、該水相を水及び有機溶媒の混合系で液
液分配抽出処理して有機溶媒層を分取し１＃有機溶媒層
から有機溶媒を蒸発して乾固物を得る。この場合、有機
溶媒としては、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエ
ーテル等があるが、収率の点でクロロホルムが好ましい
０例えば、上記水相にクロロホルムを加え、＃ｉ盪後、
放置して分層したクロロホルム層を分取し、該クロロホ
ルム層を減圧下に４０〜４５℃で加熱してクロロホルム
を蒸発することにより乾固物を得るのである。

上記乾固物はそれ自体が子宮癌細胞の殺細胞剤として有
効なものであるが、該乾固物から不純物を除去してその
子宮頚癌細胞に対する殺細胞効果を高めるために、該乾
固物をクロマト分画処理するのが好ましく、クロマト分
画処理したものを更に再結晶処理するのがより好ましい
、この場合、詳しくは実施例で後述するように、ヘキサ
ン、クロロホルム、クロロホルム／アセトン等を展開溶
媒とするシリカゲルクロマトグラフィー或いは薄層クロ
マトグラフィーを用いてクロマト分画処理することがで
き、またクロロホルム／ジエチルエーテルを用いて再結
晶処理することができる。

かくして再結晶処理することにより単離される化合物の
物理化学的性質及び構造解析結果は下記の通りである。

（１）分子量：３３０ （２）赤外線吸収スペクトル：　３３００−２８００．
１７６０．１８６０ｃｍ−１ （３）核磁気共鳴スペクトル（ｌ）ｆ−ＮＭＲ）：　ｔ
、８１（ｓ）。

１．９１（ｓ）、　　２．１７（ｓ）、　　３．１８（
ｓ）。

３．５９（ｄ、８．４１）、３．８９（ｓ）、５．２５
（ｓ）。

５．３０（ｔ、　　１３．４１）、　　８．０９（ｓ）
、　　Ｅｌ、！３７（ｓ）（４）溶媒に対する溶解性：
酢酸エチル、クロロホルム、アセトンに可溶、ヘキサン
、メタノール、エタノールにやや可溶、水に不溶 （５）呈色反応：フォーリン反応陽性 （６）塩基性、中性、酸性の区別：酸性物質（７）色及
び形状： 白色結晶（融点１００〜１０２℃） 上記の物理化学的性質及び構造解析結果から、単離され
る化合物は前記構造式で示されるフタリド誘導体であり
、６−［（２°Ｅ）−３°、７”ジメチル−５゛〜オキ
ソ〜２′、６゛−オクタジェニル］−７−ヒドロキシ−
５−メトキシフタリドであることが決定された。

〈実施例〉 ・フタリド誘導体の抽出及び単敲 ８５％エタノール６文にヤマブシタケの朱子実体７．３
ｋｇを加え、ホモジナイズ処理し、これを室温で一昼夜
放置した後、鑓過して抽出液を得た。残渣に８５％エタ
ノール４見を加え、同・様に抽出処理を行なって抽出液
を得、これを１回目の抽出液と合わせた。そして合わせ
た抽出液を減圧下に４０〜４５℃で加熱してエタノール
を蒸発することにより水相を得た。該水相にクロロホル
ム１文を加え、振盪後、放置して分層したクロロホルム
層を分取した。残渣にクロロホルム１９．を加え、同様
に液液分配抽出処理を行なってクロロホルム層を分取し
、１回目のクロロホルム層と合わせた。合わせたクロロ
ホルム層を減圧下に４０〜４５℃で加熱してクロロホル
ムを蒸発し、更にデシケータで乾燥して、乾固物（Ａ）
４．９９ｇを得た。

上記乾固物をヘキサンで溶解し、ワコーゲルＣ−２００
（和光紬薬社製）を用いてカラムクロマトグラフィーを
行なった。この際、展開溶媒として、順次極性が大きく
なるように、ヘキサン呻りロロホルム→クロロホルム／
アセトン（８／２）を各８０ｍ１用い、１０１の画分を
合計１８画分得た。このうちの第６及び７画分にについ
てクロロホルム／ジエチルエーテル（７／３）で再結晶
処理を行ない、この際の結晶析出の時間的ズレにより合
計３グループを得、このうちの第３グループから前記構
造式で示されるフタリド誘導体（Ｂ）３．０ｍｇを単離
した。

一評価 継代培養した子宮頚癌細胞を、細胞数が４×１０’／＋
ｓｌとなるように、牛胎児血清１０％を含むイーグルＭ
ＥＭ培地で稀釈して、懸濁液を調製し、該懸濁液をプラ
スチック製９６穴マイクロプレート（コーニング社製）
の各式にそれぞれ２００ＩＬ１注入した。これを５％炭
酸ガス培養器中で３７°Ｃ１２４時間培養後、この培養
液中に薬剤溶液をそれぞれ５ＩＬ＋加え、更に上記と同
様の条件下で７２時間培養した。そして培地上清を除い
た上で細胞をメタノールで固定化し、ギムザ染色後、細
胞増殖の状態を鏡検した。薬剤溶液は、前記乾固物（Ａ
）及び前記フタリド誘導体（Ｂ）をそれぞれ種々の濃度
となるようにメタノールに溶解して作製した。

上記の鏡検下で殺細胞効果を調べ、生細胞数が全く認め
られない培地中の薬剤の最小濃度を最終有効濃度とした
。最終有効濃度は、乾固物（Ａ）の場合に１２５　ｇｇ
　／層！であり、またフタリド誘導体（Ｂ）の場合にｌ
　００　ｐ、、ｇ　／ｍｌであった。

〈発明の効果〉 以上説明した通りであるから、本発明に係る新規のフタ
リド誘導体は子宮頚癌細胞に対して優れた殺細胞効果を
有するという効果がある。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記構造式で示されるフタリド誘導体。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ２、請求項１記載のフタリド誘導体を有効成分とする子
   宮頚癌細胞の殺細胞剤。