JPH03178931A

JPH03178931A - 睡眠増加剤

Info

Publication number: JPH03178931A
Application number: JP2094958A
Authority: JP
Inventors: Hidehiko Hibino; 日比野　英彦; Tokuji Hashimoto; 橋本　篤司; Osamu Nakachi; 仲地　理
Original assignee: Nippon Oil and Fats Co Ltd
Current assignee: NOF Corp
Priority date: 1989-09-08
Filing date: 1990-04-12
Publication date: 1991-08-02

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、睡眠増加剤に関する。更に詳しくは、種々の
睡眠障害を処置するための新規有用な医薬に関する。

（従来の技術）睡眠の促進や睡眠量の増加は、高等動物の中枢神経に作
用する化学物質によって制御出来ることが知られてきて
いる（高橋康部、神経精神薬理、互、２３５〜２４６　
（１９８４））。このことは、老人の不眠症、アルコー
ル中毒、うつ病、精神分裂症などの種々の神経疾患で、
総睡眠量やレム睡眠量の低下した中枢神経系においても
、化学物質により機能回復できることを意味している。

睡眠の促進や睡眠量の増加に有効な物質として、脳内か
ら発見されたタンパク質、ヌクレオチド、ペプチド、ア
ミノ酸、プロスタグランジンＤ２などを主体とする睡眠
物質（菰田泰夫、ファルマシア、■、４２３〜４２９　
（１９８５）及び長崎紘明、化学と工業、並、３５５〜
３５Ｂ　（１９８７））やセロトニンレベル増加組成物
（特開昭５８−２０１７１５号、「睡眠の向上方法」）
、有機ブロム化合物関連物質（鳥居鎮火、精神医学、２
５．１３５〜１４３　（１９８３））が、現在までに報
告されている。

レム睡眠の発現に対して、コリン作働性神経系が大きく
関与していることが知られている。そこで、コリン作動
性薬剤としてホスファチジルコリンのレム睡眠出現リズ
ムに与える効果が測定された。

その結果、ホスファチジルコリンはレム睡眠の出現をリ
ズミカルに調整し、入眠後、約９０分後に出現する第一
レム睡眠が出現しないような睡眠障害に対して、正しく
レム睡眠を発現させることが出来たく特開昭６３−２０
８５２４号、「睡眠リズム改善剤」および特開昭６３−
２０９５６０号、「睡眠リズム調整食品」）。

（発明が解決しようとする課題）現在までに、脳内および全身から非常に多数の睡眠物質
が発見されているが、それらの中で、どれが本質的な物
質であるか未だ生理学的に選定されていない。それらの
多くは構造未決定である。

また、一部の構造が決定された物質は非常に複雑な構造
であるため大量生産が困難な状況にある。

生体内で発見された多くの睡眠物質は水溶性の高いペプ
タイド系のため、末梢や経口からの投与によっては中枢
神経系で睡眠作用を発揮し難い。

−・方、化学合成物による睡眠薬は、精神安定剤の中か
ら催眠効果をもつものを求めて開発されてきた。最近の
睡眠薬は非特異的な中枢神経抑制剤であるため中毒量と
薬用量との幅が狭く、薬用量と差の少ない量で、しばし
ば昏睡や死を起こす危険な薬物が多い。また、急速に耐
性が生じ、増量しないかぎり無効となるため乱用される
。その結果、投薬中止後に数週間に及ぶ危険な症状が見
られる。

これらの薬物は速やかに代謝排泄されないため服用翌日
の覚醒時に悪影響を及ぼしたり、アレルギーや過敏性の
問題もある。睡眠薬を服用すると外見上、睡眠に似た行
動を示すが、ポリグラフィーによる基準からは正常睡眠
ではない。薬物による睡眠は自然睡眠との間に明瞭な相
違があり、この相違が前述の様な問題を引き起こしてい
る。

本発明者らは、レム睡眠の出現リズムをコリン作動性薬
剤でコンＩ・ロールすることを検討した。

その結果、生体リズムを変えずに生理的範囲内で自然に
近い睡眠リズムが、コリン作動性薬剤でもたらされるこ
とが判明した。しかし、この際に総睡眠量やしｌ、睡眠
量は増加しなかった。

従って本発明は、総睡眠量やレム睡眠量の増加に対して
長期に投与しても副作用が少なく、代謝や排泄に問題が
なく、生理的範囲内で自然に近い睡眠をもたらす睡眠増
加剤を提供することを目的とする。

（課題を解決するための手段）本発明は、有効成分として、天然又は台底のＳｎ１オレ
オイルＳｎ−２ドコザヘキサエノイルグリセロホスホコ
リンを含有して戊る睡眠増加剤である。この増加剤はリ
ポソーム、乳化液、顆粒剤等の形で製造することができ
る。

有効成分のＳｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエ
ノイルグリセロホスホコリンは、天然脂質原料中のリン
脂質画分に存在する。その単離は既知の方法で行うこと
ができる（特開平１−１６０９８９号「ドコサヘキザニ
ルホスファチジルコリンの製造法」）。また、Ｓｎ−１
オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグリセロホス
ホコリンは、オレイン酸、ドコサヘキサエン酸、グリセ
ロホスホコリン等を主原料として台底できる（特開昭６
２−１６４３９号「ホスファチジルコリンの製造方法」
）。このＳｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノ
イルグリセロホスホコリンは、単独で睡眠増加剤とする
ことができ、従って、睡眠量が低下している老人の不眠
症、アルコール中毒症、うつ病、精神分裂症などのいず
れかの治療剤とすることができる。

この睡眠増加剤は経口、非経口及び直腸投与に適した剤
型を含めて種々の製薬上許容しうる形で製造できる。経
口投与に適した形態は、錠剤、顆粒、粉末、カプセル、
懸濁液及び乳化液である。

非経口投与に適した形態は、アンプル、点滴瓶又は注射
器の中に入れた注射可能な懸濁液、乳化液及びリポソー
ム製剤である。直腸投与に適した形態には座薬又は直腸
カプセルがある。

Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグリ
セロホスホコリンは脂溶性で、脳内脂質の主要構成脂肪
酸であるドコサヘキサエン酸を、その構造中に含んでい
るホスファチジルコリンである。

脂質化学の研究からドコサヘキサエン酸及びホスファチ
ジルコリンは末梢投与により脳内に移行することが知ら
れている。また、このＳｎ−１オレオイ！ルＳｎ−２ド
コサヘキサエノイルグリセロホスホコリンは、脳内のリ
ン脂質のホスファチジルコリン分画から発見された生体
内Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグ
リセロホスホコリンと同一立体構造である。一般にポリ
エン酸を含むホスファチジルコリンは、経Ｉ」投与量の
９０％以上が２４時間以内に腸管から吸収され、陶管リ
ンパ管を経由して血液中に吸収される。吸収されたホス
ファチジルコリンは脂肪酸とグリセロホスホコリンに加
水分解され、さらにコリンとグリセロホスフェートに代
謝される。このようにホスファチジルコリンは速やかに
代謝排泄されるため覚醒時に悪影響したり、耐性が生じ
る問題はない。

Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコザヘキサエノイルグリ
セロホスホコリンは、毒性の面からも安全であり、ＳＤ
ラットに対する経口投与のＬＤ５゜は、５、０００ｍｇ
／Ｋｇ以上であり、腹腔投与のＬＤｓｅは、３、０００
ｍｇ／ｋｇ以」二である。それゆえ、Ｓｎ−１オレオイ
ルＳｎ−２ドコザヘキサエノイルグリセロホスホコリン
は単独で、あるいは他の薬剤と組合せて、経口、腹腔、
静脈、直腸からの投与など、通常の薬剤の体内への投与
に使用される方法を用いて投与することができる。

終夜睡眠ポリグラフィーを用いた睡眠障害者に関する研
究では、老人性痴呆症患者と脳機能の低下した老年者と
に睡眠時の脳波パターンに相関が見出されている。特に
睡眠時の脳波のうち、動物の寿命との相関が推測されて
いるレム睡眠量と睡眠障害者との関係が深いことが注１
］されている。

このような研究開発の見地から、老化の実験動物モデル
として高週令ラットを用いてＳｎ−１オレオイルＳｎ−
２ドコサヘキサエノイルグリセロホスホコリンによる睡
眠量の増加を検嗣した。

その結果、Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエ
ノイルグリセロホスホコリン投与中の睡眠は、ポリグラ
フィーによる基準から、正常睡眠状態と判定され、その
際に総睡眠量やレム睡眠量が有意に増加していることが
判明した。

（発明の効果）本発明の睡眠増加剤は、睡眠中のレム睡眠量を増加させ
ることが出来る。

また、レム睡眠量が低下している老人の不眠症、アルコ
ール中毒症、うつ病、精神分裂症など種々の睡眠障害の
治療への応用が可能である。

さらに、本発明の睡眠増加剤は睡眠量の増加に対して長
時間投与しても副作用や耐性が少なく、毒性も低く、作
用が緩和で、生理的範囲内で正常な睡眠をもたらす薬剤
として有用である。

（実施例）以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明する。

脱水したクロロホルム５０ｍ１中に１−オレオイル３−
グリセロホスホリルコリン７７６ｍｇ（１，４９ミリモ
ル）、ドコサヘキサエン酸無水物１，０４７ｍｇ（１，
６４ミリモル）、及びＮ、Ｎ−ジメチル−４−アミノピ
リジン２０３ｍｇ（１，６６ミリモル）を加え、室温で
撹拌しながら２４時間反応させた。

反応終了後、反応混合物中のＮ、Ｎ−ジメチル４−アミ
ノピリジンを除去するため、酸性陽イオン交換樹脂（ロ
ーム・アンド・ハース社製、登録商標アンバーライト２
００Ｃ）　２５ｍ１及び塩基性陰イオン交換樹脂（ロー
ム・アンド・ハース社製、登録商標アンバーライトＩＲ
Ｃ−５０及びアンバーライトＩＲＡ−９３の等景況合物
）５０ｍ１．を直径３．０ｃｍ、長さ５０ｃｍのガラス
カラムに充填した中を、クロロホルムを用いて流した。

この処理溶液をシリカゲル薄層クロマｌ−グラフィー（
展開溶媒はクロロホルム：メタノール：水−６５：２５
：４、発色はヨウ素）で分析した結果、Ｒｆ値０．１〜
０．３　　（Ｎ、　Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン
と酸無水物の複合体を示す）の紫色の発色が完全に消失
した。

クロロホルムを減圧留去し、残留物を２０ｍ１のシリカ
ゲルを充填した直径１．５ｃｍ、長さ５０ｃｍのガラス
カラムを用いて、クロロホルム５００ｍｊ！を用いてン
容出したものをフラクション１　　（Ｆｌ）、クロロホ
ルム：メタノール−１０：　１５００ｍｆを用いて溶出
したものをフラクション２（Ｆ２）、クロロホルム：メ
タノール＝　５　：　１．１５００ｍｊ！を用いて？容
出したものをフラクション３（Ｆ３）とした。

Ｆｌ　、Ｆ２　、Ｆｓを、シリカゲル薄層クロマトグラ
フィー（展開溶媒はクロロホルム：メタノ０ル：水−６５：２５：４、発色はヨウ素）で分析した結
果、目的物であるＳｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコザヘ
キザエノイルグリセロボスホコリンはＦ１中に含まれて
いた。

Ｆ３の溶媒を減圧留去しＳｎ−１オレオイルＳｎ２ドコ
サヘキサエノイルグリセロホスホコリン７”１３ｍｇ＠
　得ノこ。

庄■祖□珊−製薬理試験例の投与実験に用いる注射剤は次の様に調製し
た。

窒素気流下、ガラスピーズを多数人れた５０ｍ１のナス
型フラスコに、Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコザヘキ
サ工ノイルグリセロホスホコリン２０ｍｇを量りとり、
エチルアルコール１０ｍ１を添加して加熱撹拌しながら
溶解した。ユバボレーターで窒素気流下、溶媒を留去し
、この残留物に生理食塩水２０ｍ１を加え、ポルテック
ス貴キザーで８０℃、２０分間、超音波乳化を行った。

得られた牛乳様のザスペンションを３．０．２．０１１
．０．０．８．０．６．０．４．０．２．０．１．０．
０５ｐの各ボア】 −ザイズのフィルターを装着したリポソーム調製用の押
出成形機（エクストルーダー）を用い、各ポアーザイズ
のフィルターごとに５ＩｉＪｉ１１遇させた。

呆捏成基狙実験動物モデルは８〜１２週令の雌のＦ３４４系ラット
（体重２５０〜３００ｇ）を用いた。ラットは脳波記録
開始の１０〜１４８以上４；Ｉに、ネンブタール麻酔下
で、脳波記録用電極〈外径１ｍｍの銀ビス電極、ダイヤ
メディカル社製）を頭蓋骨に３本、頚背部の抗電力筋に
筋電測定用の銀線１対、側脳室用に薬物投与用のステン
レスカニユーレ（２９ケージ）１本を慢性留置した。脳
波記録用電極には約１ｃｍの配線でインピーダンス交換
用のプリアンプ（５Ｘ　１０　Ｘ　１９ｍｍ、特別注文
品）を接続し、電極と共にラット頭上に歯科用印象剤で
固定した。

手術後、ラットは飼育用ケージで飼われ、記録開始の２
日以上前に記録用ケージ（直径４０ｃｍ、深さ４０ｃｍ
、　ｐ底のステンレス筒）に移し、記録用の電線と薬物
投与用のポリエチレンチューブを接続した。接続後、細
胞室内へ無菌の４理食塩水を２゜μ１７ｍ１ｎで連続投
与した。実験室の温度は２４±１℃で行った。

接続後２日以上経ってから２４時間の連続記録を始めた
。対照実験は生理食塩水投与時の記録を用いた。

対照実験の記録終了の後、続けてＳｎ−１オレオイルＳ
ｎ−２ドコザヘキザエノイルグリセロポスホコリンの投
与実験を行った。

投与実験では、上記注射剤を用いてラット１匹あたり１
０ｐｇに相当するＳｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘ
キサエノイルグリセロホスホコリン量を２０μＵｍｉｎ
の速度で投与し、投与開始時から２４時間、脳電図、筋
電図を連続記録した。記録用紙の送り速度は０．５ｃｍ
／ｓｅｃとした。

記録終了後、筋電図と脳電図の記録を目察によりレム睡
眠用、ノンレム睡眠相、覚醒相に分類した。各相の判定
基準は下記に従って行った。

レム睡眠用は、脳電図が小振幅の速波を示し、かつ筋電
図に活動が記録されていない。

ノンレム睡眠相は、脳電図が大振幅の比較的低３周波の徐波を示し、かつ筋電図に活動が記録されていな
い。

覚醒相は、脳電図が小振幅の速波を示し、かつ筋電図に
活動が記録されている。

判定結果は表−１に記載した。実験番号のＣＩとＥｌ、
Ｃ２とＣ２、Ｃ３とＣ３、Ｃ４とＣ４は同時に実験を行
い、Ｃ群は対照群、Ｅ群は実験群である。各パラメータ
ーは下記に従って規定した。

ＴＳＴ　：総睡眠時間　　　　　　　〔分〕ＴＳＮ　：
総ノンレム睡眠時間　　　〔分〕ＴＳＲ：総レム睡眠時
間　　　　　〔分〕％ＳＮ　：ＴＳＮ／ＴＳＴの割合　
　〔％〕％ＳＲ：　ＴＳＲ／ＴＳＴの割合　　〔％〕以
上のパラメーターに関し、実験群は対照群に比して統計
的有意差が認められた。統計的有意差の判定にはステニ
ープントのｔ−検定を用いた。

表−１の結果から、ＴＳＴ、ＴＳＮ、ＴＳＲに有意の増
加が認められた。％ＳＲの増加と％ＳＨの低下が有意に
認められた。

４表−１実験番号　ＴＳＴ　　ＴＳＮ　　ＴＳＲ％ＳＮ　　％Ｓ
Ｒ２３４平均イ直標準偏差８５．９８３．７８６．０８５．６１．４ ■４．１（６，３１４，０１４，４１，４Ｅ２　　　　７５４Ｆ、３　　　　７３３Ｅ４　　　　７０７平Ｊ勺イ直　　　　　７２９９標準偏差　　２０６１３　　　　１４］５９６　　　　１３３５８０　　　　１２７５９８”　　　　１２９“ １４　　　　１１８１．３旧、９８２．０Ｅ１２．３　　” １．１１８．７１８．１１８．０１７．７１．１＊対照群との有意差あり（〈１％）以りの結果から、Ｓｎ−１オレオイルＳｒ＋−２トコ→
ノへキザエノイルグリセロホスホコリンの適量投与によ
って、睡眠時間、ノンレム睡眠時間、レム睡眠時間が増
加することが判明した。また総睡眠時間に占めるレム睡
眠時間の割合が有意に増加した。このことから、Ｓｎ−
１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグリセロホ
スホコリンは睡眠障害で低下するレム睡眠量を増加させ
治療することができる。

に１！理１」６ン１翫こ１ご［１リ−）３□実験動物モ
デルは８〜１２週令の碓のＦ３４４系ラット（体重２５
０〜３００ｇ）を用いた。ラットは脳波記録開始の１０
〜１４日以上前に、ネンブタール麻酔下で、脳波記録用
電極（外径１ｍｍの銀ビス電極、ダイヤメディカル社製
）を頭蓋骨に３本、頚背部の抗重力筋に筋電測定用の銀
線■対、細胞室用に薬物投与用のステンレスカニユーレ
（２９ゲージ）１本を慢性留置した。脳波記録用電極に
は約１ｃｍの配線でインピーダンス交換用のプリアンプ
（５Ｘ　１０　Ｘ　１９ｍｍ、特別注文品）を接続し、
電極と共にジノｌ−頭七に歯科用印象剤で固定した。

手術後、ラットは飼育用ゲージで飼われ、記録開始の２
　Ｂ以上前に記録用ゲージ（直径４０ｃｍ、深さ４０ｃ
ｍ、網底のステンレス筒）に移し、記録用の電線と薬物
投与用のポリエチレンチューブを接続した。接続後、側
胴室内へ無菌の生理食塩水を２０μｍ７ｍ１ｎで連続投
与した。実験室の温度ば２４±１°Ｃで行った。

接続後２日取−Ｌ経ってから２４時間の連続記録を始め
た。対照実験は生理食塩水投与時の記録を用いた。

対照実験の記録終了の後、続けてＳｎ−１オレオイルＳ
ｎ−２ドコザヘキサエノイルグリセロホスホコリンの投
与実験を行った。

投与実験では、前記注射剤を用いてラット１匹あたり５
　ｐｇ、１０ｕｔｇ、２５ｔｒｇ、５０ｔｔｇに相当す
るＳｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグ
リセロホスホコリン量を２０μＵｍｉｎの速度で投与し
、投与開始時から２４時間、脳電図、筋電図を連続記録
した。記録用紙の送り速度は０．５ｃｍ／ｓｅｃとした
。

記録終了後、筋電図と脳電図の記録を日東によりレム睡
眠用、ノンレム睡眠相、覚醒用に分類して集計した。各
相の判定基準は下記に従って行っ７た。

レム睡眠用は、脳電図が小振幅の速波を示し、かつ筋電
図に活動が記録されていない（第１図参照）。

ノンレム睡眠相は、脳電図が大振幅の比較的低周波の徐
波を示し、かつ筋電図に活動が記録されていない（第２
図参照）。

覚醒用は、脳電図が小振幅の速波を示し、かつ筋電図に
活動が記録されている（第３図参照）。

上記の結果は第４図に図示した。各投与量の実験群は４
匹で行った。各パラメーターは下記に従って規定した。

ＴＳＴ　：総睡眠時間　　　　　　　〔分〕Ｔ”　Ｓ　
Ｎ　：総ノンレム睡眠時間　　　〔分〕ＴＳＲ：総レム
睡眠時間　　　　　〔分〕％ＳＮ　：　ＴＳＮ／ＴＳＴ
の割合　　〔％〕％ＳＲ：ＴＳＲ／ＴＳＴの割合　　〔
％〕第２図の結果から、ラットＳｎ−１オレオイルＳｎ
２ドコサヘキサエノイルグリセロホスホコリン投与の全
ての実験群で総睡眠時間の増加が認めら８れる。特に１０μｇ投与群では％ＳＲの増加と％ＳＮの
低下が著しく有意に認められ、効果が最も高いことがわ
かる。

以上の結果から、Ｓｒ＋−１オレオイルＳｎ−２ドコサ
ヘキザエノイルグリセロポスホコリンは、睡眠障害で低
下するレム睡眠量を増加させ治療することができる。

Ｍ業−桝Ｉ）注射剤生理食塩水２０ｍ１中、Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ド
コサヘキサ工ノイルグリセロホスホコリン２０ｍｇを含
有するエクストルーダーで調製したリポソーム製剤。

２）　　ン主射斉り生理食塩水１００ｍｊ！中、卵黄レシチン１　、０００
ｍｇ、Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコザヘキサ工ノイ
ルグリセロホスホコリンＬｏｏｍｇを含有するエクスト
ルーダーで調製したリポソーム製剤。

３）　点滴用注射剤１バイアル３００ｍｊｉ中、Ｓｒ＋−１オレオイルＳｎ
−２９Ｆ゛”コザヘキザエノイルグリセロホスホコリン３．６
ｇ、精製大豆油３０ｇ、局方グリセリン７．５ｇを含有
するマントンゴーリーミキサーで調製した脂肪乳剤。

４）注射剤 ■アンプル２０摺！、中、Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２
ドコサヘキサ工ノイルグリセロホスホコリン４０ｍｇ、
精製サフラワー油４ｇ、Ｄ−ソルビトール１．６ｇ、デ
キストラン７０１ｇを含有するホモゲナイザーで調製し
た乳化液。

５）経口剤Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグリ
セロホスホコリン０．２ｇ、大豆レシチン０．２ｇ、カ
カオ脂２ｇを含有する顆粒製剤。

【図面の簡単な説明】

第１〜３図は、投与開始後から記録した脳電図と筋電図
から、レム睡眠相（第１図）、ノンレム睡眠相（第２図
）、覚醒用（第３図）の判定基準に使用した代表的なポ
リグラフのチャーＩ・である。第４図は、Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエ
ノイルグリセロホスホコリンの注射剤量と総０睡眠時間（ＴＳＴ）、総睡眠時間に占める総レム時間の
割合（ＳＲ）および総腫眠時間に占めるＩ、Ｃノンレム
時間の割合（Ｓ　Ｎ）との関係を示した図である。１

Claims

【特許請求の範囲】

Ｓｎ−１オレオイルＳｎ−２ドコサヘキサエノイルグリ
セロホスホコリンを含有することを特徴とする睡眠増加
剤。