JPH03187393A - 抗生物質ａ／１６６８６の回収方法 - Google Patents
抗生物質ａ／１６６８６の回収方法Info
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- JPH03187393A JPH03187393A JP2300035A JP30003590A JPH03187393A JP H03187393 A JPH03187393 A JP H03187393A JP 2300035 A JP2300035 A JP 2300035A JP 30003590 A JP30003590 A JP 30003590A JP H03187393 A JPH03187393 A JP H03187393A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、抗生物質Ａ／１６６８６と呼ぶグリコリポデ
プシペプチドに関し、そしてさらに詳しくは、それを含
有する発酵ブロスまたはプロセス流れからそれを回収す
る方法に関する。
プシペプチドに関し、そしてさらに詳しくは、それを含
有する発酵ブロスまたはプロセス流れからそれを回収す
る方法に関する。
本発明は、要約すれば、次の通りである二本発明は、ア
クチノプラネス（Ａｃ ｔ ｉ ｎｏｐ ｌ ａｎｅｓ
）種ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発
酵により産生された抗生物質またはその混合物を発酵ブ
ロスまたはプロセス流れから回収する方法に関し、この
方法は、抗生物質を水と混和性であるか、あるいは水中
に分散性でありかつ前記抗生物質を溶解することができ
る、非イオン性界面活性剤またはカチオン性界面活性剤
により抽出し、２相を形成し、それらの第１相中には前
記抗生物質および界面活性剤が存在し、そして適当な有
機溶媒の添加により前記抗生物質を界面抗生物質Ａ／１
６６８６は、メチルシリン抵抗性ブドウ球菌属（Ｓｔａ
ｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）およびアンピシリンおよびエ
リスロマイシンに対して抵抗性のバクテリアを包含する
、好気性および嫌気性のグラム陽性バクテリアに対して
活性であるアクチノプラネス（Ａｃ ｔ １ｎｏｐ １
ａｎｅＳ）種ＡＴＣＣ３３０７６により産生され、そ
して米国特許第４．３０３，６４６号に、その調製方法
およびそれを含有する製剤学的組成物と一緒に記載され
ている。
クチノプラネス（Ａｃ ｔ ｉ ｎｏｐ ｌ ａｎｅｓ
）種ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発
酵により産生された抗生物質またはその混合物を発酵ブ
ロスまたはプロセス流れから回収する方法に関し、この
方法は、抗生物質を水と混和性であるか、あるいは水中
に分散性でありかつ前記抗生物質を溶解することができ
る、非イオン性界面活性剤またはカチオン性界面活性剤
により抽出し、２相を形成し、それらの第１相中には前
記抗生物質および界面活性剤が存在し、そして適当な有
機溶媒の添加により前記抗生物質を界面抗生物質Ａ／１
６６８６は、メチルシリン抵抗性ブドウ球菌属（Ｓｔａ
ｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）およびアンピシリンおよびエ
リスロマイシンに対して抵抗性のバクテリアを包含する
、好気性および嫌気性のグラム陽性バクテリアに対して
活性であるアクチノプラネス（Ａｃ ｔ １ｎｏｐ １
ａｎｅＳ）種ＡＴＣＣ３３０７６により産生され、そ
して米国特許第４．３０３，６４６号に、その調製方法
およびそれを含有する製剤学的組成物と一緒に記載され
ている。
予備的物理化学的特性決定により、２つのＤ−マンノー
ス単位を有するペプチドコアにより形成されることが示
された［カバレリ（Ｃａｂａｌｌｅｒｉ）ら、ジャーナ
ル・アンチビオチフス（Ｊ。
ス単位を有するペプチドコアにより形成されることが示
された［カバレリ（Ｃａｂａｌｌｅｒｉ）ら、ジャーナ
ル・アンチビオチフス（Ｊ。
Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）３７：３０９−３１７．１９
８４］。
８４］。
次いで、３つの密接に関係する成分を抗生物質Ａ／１６
６８６から単離することができることが発見され、これ
らはＡ１、Ａ２およびＡ３と命名された。因子Ａ２（ラ
モプラニン）は主要量で得られる成分であり、そして生
物学的活性が最も関連するが、因子Ａ１およびＡ２は少
量で得られる。
６８６から単離することができることが発見され、これ
らはＡ１、Ａ２およびＡ３と命名された。因子Ａ２（ラ
モプラニン）は主要量で得られる成分であり、そして生
物学的活性が最も関連するが、因子Ａ１およびＡ２は少
量で得られる。
これらの物質ならびにそれらの調製および使用は米国特
許第４．４２７，６５６号に記載されている。
許第４．４２７，６５６号に記載されている。
抗生物質Ａ／１６６８６を産生する培養物に適当な前駆
体を添加することによって、抗生物質Ａ／１６６８６の
因子Ａ２および／またはＡ３の産生を増強する方法は、
欧州特許出願公開第２５９７８０号に記載されている。
体を添加することによって、抗生物質Ａ／１６６８６の
因子Ａ２および／またはＡ３の産生を増強する方法は、
欧州特許出願公開第２５９７８０号に記載されている。
最近研究によると、これらの３つの因子は１７のアミノ
酸およびジマンンノシル単位により構成された、共通の
環状デプシベプチドの骨格を有することが示された。３
つの異なる不飽和脂肪酸の残基は、複合体の３つの成分
を分別する。
酸およびジマンンノシル単位により構成された、共通の
環状デプシベプチドの骨格を有することが示された。３
つの異なる不飽和脂肪酸の残基は、複合体の３つの成分
を分別する。
デブシペプチドの骨格の同時の存在により特性決定され
る抗生物質は、脂肪酸および糖部分は、科学文献におい
て、グリコリポデブシベプチドの抗生物質として定義さ
れた［参照、シアパッチ（Ｃｉａｂａｔｔｉ）ら、ジャ
ーナル・アンチビオチフス（Ｊｏｕｒｎａｌ Ａｎｔ
ｉｂｉｏｔｉｃｓ）４２：２５４−２６７ １９８９
コ 。
る抗生物質は、脂肪酸および糖部分は、科学文献におい
て、グリコリポデブシベプチドの抗生物質として定義さ
れた［参照、シアパッチ（Ｃｉａｂａｔｔｉ）ら、ジャ
ーナル・アンチビオチフス（Ｊｏｕｒｎａｌ Ａｎｔ
ｉｂｉｏｔｉｃｓ）４２：２５４−２６７ １９８９
コ 。
次の式■は、抗生物質Ａ／１６６８６の３つの密接に関
係する成分のために示唆することができる： 式中、 Ｒは −ＣＯ−ＣＨ＝ Ｃ１−ＣＨ＝ ＣＨ−ＣＩ、−ＣＨ，
−ＣＨ，、−Ｃｏ−ＣＨ＝ ＣＨ−ＣＢ＝ ＣＨ−ＣＨ
ｚ−Ｃｆｌ（ＣＨａ） ｚ または−Ｃｏ−ＣＨ＝
ＣＩ−ＣＩ＝ ＣＨ−ＣＨｚ−ＣＨｚ−ＣＩＴ（Ｃｔｌ
ｓ） ！であり、そして Ｒｏはジンマンノシル部分である。
係する成分のために示唆することができる： 式中、 Ｒは −ＣＯ−ＣＨ＝ Ｃ１−ＣＨ＝ ＣＨ−ＣＩ、−ＣＨ，
−ＣＨ，、−Ｃｏ−ＣＨ＝ ＣＨ−ＣＢ＝ ＣＨ−ＣＨ
ｚ−Ｃｆｌ（ＣＨａ） ｚ または−Ｃｏ−ＣＨ＝
ＣＩ−ＣＩ＝ ＣＨ−ＣＨｚ−ＣＨｚ−ＣＩＴ（Ｃｔｌ
ｓ） ！であり、そして Ｒｏはジンマンノシル部分である。
欧州特許出願公開第３１８６８０号は、抗生物質Ａ／１
６６８６複合体に関する他の成分を記載している。
６６８６複合体に関する他の成分を記載している。
前記成分は、それぞれ、Ａ’ １、Ａ’ ２および
Ａ’ ３命名され、適当な条件下にアクチノプラネス
（Ａｃｔ １ｎｏｐｌａｎｅｓ）種ＡＴＣＣ３３０７６
により産生され、モしてＲｏがマンノシル部分である、
式■の因子Ａ１、Ａ２およびＡ３に相当する。
Ａ’ ３命名され、適当な条件下にアクチノプラネス
（Ａｃｔ １ｎｏｐｌａｎｅｓ）種ＡＴＣＣ３３０７６
により産生され、モしてＲｏがマンノシル部分である、
式■の因子Ａ１、Ａ２およびＡ３に相当する。
一般に、抗生物質をそれが産生される発酵ブロスから回
収するとき、最小の数の工程により最大量の抗生物質を
得るためにプロセスを最適化することが重要である。
収するとき、最小の数の工程により最大量の抗生物質を
得るためにプロセスを最適化することが重要である。
抗生物質を商業的目的で大規模で製造するとき、高い回
収収率はとくに重要である。
収収率はとくに重要である。
このような場合において、抗生物質を大量の複雑な発酵
混合物から単離しなくてはならず、この混合物は抗生物
質ばかりでなく、かつまた未反応の培地の栄養物質およ
び他の副生物の水溶液中に懸濁した不溶性菌糸体を含有
する。
混合物から単離しなくてはならず、この混合物は抗生物
質ばかりでなく、かつまた未反応の培地の栄養物質およ
び他の副生物の水溶液中に懸濁した不溶性菌糸体を含有
する。
抗生物質Ａ／１６６８６の場合におけるように、適当な
微生物株の発酵により産生される抗生物質の大部分がバ
イオマス中に止まる場合、回収プロセスはなおいっそう
複雑である。
微生物株の発酵により産生される抗生物質の大部分がバ
イオマス中に止まる場合、回収プロセスはなおいっそう
複雑である。
この場合において、抗生物質の回収収率を最適化するた
めに、１つは濾過したブロスおよび他方は菌糸体のケー
クについての２つの平行なプロセスを実施することが必
要である。
めに、１つは濾過したブロスおよび他方は菌糸体のケー
クについての２つの平行なプロセスを実施することが必
要である。
粗製の抗生物質Ａ／１６６８６を回収するために米国特
許第４．３０３．６４６号に記載されている方法は、２
つの別々の作業を包含し、それらの第１は発酵ブロスか
ら菌糸体を濾過により分離し、菌糸体の塊をメタノール
／水の混合物で抽出し、この抽出液から粗製の発酵産生
物を単離し、そして単離した粗生成物から抗生物質を分
離および精製することにある。第２の作業は、本質的に
、濾過したブロスをｎ−ブタノールで処理し、減圧下に
有機抽出液を濃縮し、石油エーテルを添加し、そして生
ずる沈澱物を分離することにある。こうして、生材料の
２つの収穫物が得られ、これをさらに別々に精製するこ
とができるか、あるいはこの目的で一緒にすることがで
きる。
許第４．３０３．６４６号に記載されている方法は、２
つの別々の作業を包含し、それらの第１は発酵ブロスか
ら菌糸体を濾過により分離し、菌糸体の塊をメタノール
／水の混合物で抽出し、この抽出液から粗製の発酵産生
物を単離し、そして単離した粗生成物から抗生物質を分
離および精製することにある。第２の作業は、本質的に
、濾過したブロスをｎ−ブタノールで処理し、減圧下に
有機抽出液を濃縮し、石油エーテルを添加し、そして生
ずる沈澱物を分離することにある。こうして、生材料の
２つの収穫物が得られ、これをさらに別々に精製するこ
とができるか、あるいはこの目的で一緒にすることがで
きる。
前述の方法は、商業的使用に要求されるような、大量の
抗生物質Ａ／１６６８６の製造に使用することができな
い。事実、バイオマスの濾過は極めて遅いので、この作
業は極めて困難であり、そして潜在的に安全ではない。
抗生物質Ａ／１６６８６の製造に使用することができな
い。事実、バイオマスの濾過は極めて遅いので、この作
業は極めて困難であり、そして潜在的に安全ではない。
驚くべきことには、生ずる発酵ブロスを直接処理するこ
とによって、濾過したブロスを菌糸体から分離しないで
、あるいはプロセス流れを処理することによって、抗生
物質Ａ／１６６８６を高い収率で回収することができる
ことが発見され、この古体ｌ＋ 塁醇ゴｎフホトｌ→プ
ｒｑ Ｊｙ ７襠りん（ａ）非イオン性界面活性剤、ま
たは （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させ、前
記界面活性剤は水と混和性であるか、あるいは水中に分
散性でありかつ前記抗生物質を溶解することができ、こ
の混合物の物理化学的条件を変更することによって前記
混合物の２相への分離を誘発させ、消耗したブロスを含
有する相を界面活性剤の相から分離し、そして前記抗生
物質がその中に不溶性である有機溶媒の添加により、前
記抗生物質を界面活性剤の相から回収することからなる
。
とによって、濾過したブロスを菌糸体から分離しないで
、あるいはプロセス流れを処理することによって、抗生
物質Ａ／１６６８６を高い収率で回収することができる
ことが発見され、この古体ｌ＋ 塁醇ゴｎフホトｌ→プ
ｒｑ Ｊｙ ７襠りん（ａ）非イオン性界面活性剤、ま
たは （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させ、前
記界面活性剤は水と混和性であるか、あるいは水中に分
散性でありかつ前記抗生物質を溶解することができ、こ
の混合物の物理化学的条件を変更することによって前記
混合物の２相への分離を誘発させ、消耗したブロスを含
有する相を界面活性剤の相から分離し、そして前記抗生
物質がその中に不溶性である有機溶媒の添加により、前
記抗生物質を界面活性剤の相から回収することからなる
。
前述の手順を越えた本発明の方法の利点は、本質的に、
次の通りである： 大量の菌糸体を取り扱わず、そして大量の溶媒を使用し
ない。
次の通りである： 大量の菌糸体を取り扱わず、そして大量の溶媒を使用し
ない。
アルコール−水の混合物からの重要な分離を回避するこ
とができること。
とができること。
この分野において、バイオマスからの生物学的産串鞠の
ｇ＊ｃ擢；体すストめ１７柿田ア缶スー什堂的および機
械的の両者の多数の分解技術が記載されている：例えば
、浸透の衝撃による膜の破裂、酵素による細胞壁の消化
、アニオン性、カチオン性または非イオン性の洗浄剤に
よる細胞膜の可溶化、有機溶媒による脂質の溶解、アル
カリ処理による鹸化、超音波処理など。そして、抗生物
質の大部分が微生物を産生ずるバイオマス中に捕捉され
るとき、抗生物質を回収する最も可能な手段を予測する
ことは困難である［バイオセレプション（Ｂｉｏｓｅｐ
ａｒａｔ １ｏｎ） 、第４章、ベルター（Ｂｅｌｔｅ
ｒ）ら、ウィリー・アンド・サンズ（Ｗｉ Ｉ ｅｙ
ａｎｄ ５ｏｎｓ） 、１９８８、ニューヨーク）
。さらに、これらの方法は、特定の方法で、遺伝子操作
されたバクテリアまたは簡単なバクテリアにより産生さ
れるタンパク質を言及しているが、より複雑な性質をも
つ物質、例えば、グリコリポデブシペブチド抗生物質に
ついて使用すべき最良の技術に関するものについての示
唆は存在しない。
ｇ＊ｃ擢；体すストめ１７柿田ア缶スー什堂的および機
械的の両者の多数の分解技術が記載されている：例えば
、浸透の衝撃による膜の破裂、酵素による細胞壁の消化
、アニオン性、カチオン性または非イオン性の洗浄剤に
よる細胞膜の可溶化、有機溶媒による脂質の溶解、アル
カリ処理による鹸化、超音波処理など。そして、抗生物
質の大部分が微生物を産生ずるバイオマス中に捕捉され
るとき、抗生物質を回収する最も可能な手段を予測する
ことは困難である［バイオセレプション（Ｂｉｏｓｅｐ
ａｒａｔ １ｏｎ） 、第４章、ベルター（Ｂｅｌｔｅ
ｒ）ら、ウィリー・アンド・サンズ（Ｗｉ Ｉ ｅｙ
ａｎｄ ５ｏｎｓ） 、１９８８、ニューヨーク）
。さらに、これらの方法は、特定の方法で、遺伝子操作
されたバクテリアまたは簡単なバクテリアにより産生さ
れるタンパク質を言及しているが、より複雑な性質をも
つ物質、例えば、グリコリポデブシペブチド抗生物質に
ついて使用すべき最良の技術に関するものについての示
唆は存在しない。
米国特許第４．７４６．５５１号には、エステル結合を
通して１４〜１９個の炭素原子を有する脂肪酸と結合し
たＤ−アラビノースおよびＤ−マンノースを含有する多
糖類により形成された、抗腫瘍物質である、リポ多糖が
記載されており、これはアクチノプラネス（Ａｃ ｔ
ｉｎｏｍｙｃｅ ｔｅｓ）バクテリアの細胞本体の成分
から除去される。
通して１４〜１９個の炭素原子を有する脂肪酸と結合し
たＤ−アラビノースおよびＤ−マンノースを含有する多
糖類により形成された、抗腫瘍物質である、リポ多糖が
記載されており、これはアクチノプラネス（Ａｃ ｔ
ｉｎｏｍｙｃｅ ｔｅｓ）バクテリアの細胞本体の成分
から除去される。
米国特許第４，７４６，５５１号によれば、前記成分は
、抗生物質Ａ／１６６８６と完全に異なり、細胞壁成分
であり、したがって非イオン性界面活性剤をあるバクテ
リア細胞の成分の抽出において使用できるという、米国
特許第４，７４６゜５５１号の教示から、当業者は、バ
イオマス中に捕捉された抗生物質の回収に、同様な抽出
方法を適用しようとしないであろう。なぜなら、前記抽
出が起こってとしてさえ、それは細胞壁材料の抽出を伴
い、こうして細胞の可溶化されたｃｏｎからの分離のそ
れ以上の問題を発生させるからである。
、抗生物質Ａ／１６６８６と完全に異なり、細胞壁成分
であり、したがって非イオン性界面活性剤をあるバクテ
リア細胞の成分の抽出において使用できるという、米国
特許第４，７４６゜５５１号の教示から、当業者は、バ
イオマス中に捕捉された抗生物質の回収に、同様な抽出
方法を適用しようとしないであろう。なぜなら、前記抽
出が起こってとしてさえ、それは細胞壁材料の抽出を伴
い、こうして細胞の可溶化されたｃｏｎからの分離のそ
れ以上の問題を発生させるからである。
チェコスロバキア特許第２３１，２７９号（Ｃｈｅｍｉ
ｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ）２１６１８０Ｊ
Ｖｏｌ、１０７．１９８７）において、抗生物質のチロ
シン（これは本発明のグリコリポデブシペプチド抗生物
質と異なるマクリジドの抗生物質である）は、ＨＣＨＯ
およびＡｌｔ（ＳＯ４）３の存在下にカチオン洗浄剤（
トリメチルドデシルヘキサ−デシルアンモニウムクロラ
イド）の添加により、発酵培地から分離される。次いで
、この混合物をＢｕＯＡｃにより抽出し、酒石酸により
沈澱させ、水中に溶解し、活性炭で濾過し、そして再び
ＮａＣ１の添加により沈澱させる。
ｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ）２１６１８０Ｊ
Ｖｏｌ、１０７．１９８７）において、抗生物質のチロ
シン（これは本発明のグリコリポデブシペプチド抗生物
質と異なるマクリジドの抗生物質である）は、ＨＣＨＯ
およびＡｌｔ（ＳＯ４）３の存在下にカチオン洗浄剤（
トリメチルドデシルヘキサ−デシルアンモニウムクロラ
イド）の添加により、発酵培地から分離される。次いで
、この混合物をＢｕＯＡｃにより抽出し、酒石酸により
沈澱させ、水中に溶解し、活性炭で濾過し、そして再び
ＮａＣ１の添加により沈澱させる。
この分野において、グリコペプチドの抗生物質をその発
酵ブロスからの直接の抽出のために界面活性剤を使用し
て、有機−水混合物から所望の産生物の単離に大量の溶
媒の使用を回避することは示唆されない。
酵ブロスからの直接の抽出のために界面活性剤を使用し
て、有機−水混合物から所望の産生物の単離に大量の溶
媒の使用を回避することは示唆されない。
本発明の改良された方法は、既知の技術により菌株ＡＴ
ＣＣ３３０７６を培養するとき得られた抗生物質Ａ／１
６６８６を抽出し、この抽出は、発酵バッチを、 （ａ）非イオン性界面活性剤、または （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させこと
により実施し、前記界面活性剤は水と混和性であるか、
あるいは水中に分散性でありかつ前記抗生物質を溶解す
ることができ、混合物の２相への分離を誘発させ、消耗
したブロスを含有する相を界面活性剤の相から分離し、
そして有機溶媒の添加により、前記抗生物質を界面活性
剤の相から回収することからなる。
ＣＣ３３０７６を培養するとき得られた抗生物質Ａ／１
６６８６を抽出し、この抽出は、発酵バッチを、 （ａ）非イオン性界面活性剤、または （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させこと
により実施し、前記界面活性剤は水と混和性であるか、
あるいは水中に分散性でありかつ前記抗生物質を溶解す
ることができ、混合物の２相への分離を誘発させ、消耗
したブロスを含有する相を界面活性剤の相から分離し、
そして有機溶媒の添加により、前記抗生物質を界面活性
剤の相から回収することからなる。
アクチノプラネス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ）種ＡＴ
ＣＣ３３０７６（この菌株は米国特許第４゜３０３．６
４６号に記載されているように永久的培養物収集所ＡＴ
ＣＣに受託されており、そして現在１９８１年１月３１
日のブダペスト条約の規定の下に自由に入手可能であり
かつ受は取ることができる）の発酵により産生される抗
生物質またはその混合物またはその産生突然変異体（す
なわ熱度異体）は、本発明の方法を適用することによっ
て回収することができ、すなわち、抗生物質Ａ／１６６
８６複合体、米国特許第４． ３０３． ６４６号およ
び米国特許第４．４２７，６５６号に記載されている、
３つの関係する因子Ａ１、Ａ２、およびＡ３の各または
任意の比率のそれらの混合物、欧州特許出願公開第２５
９７８０号に記載されている、単一の因子の産生を増大
するために適当な前駆体を培養物に添加して得られる、
単一の成分に富んだ混合物、および欧州特許出願公開第
３１８６８０号に記載されている、抗生物質Ａ／１６６
８６の因子Ａ’ １、Ａ’ ２およびＡ’ ３゜
本発明の方法は、発酵ブロスに、あるいは前記抗生物質
を含有する任意のプロセス流れまたはそれらの混合物に
適用することができる。
ＣＣ３３０７６（この菌株は米国特許第４゜３０３．６
４６号に記載されているように永久的培養物収集所ＡＴ
ＣＣに受託されており、そして現在１９８１年１月３１
日のブダペスト条約の規定の下に自由に入手可能であり
かつ受は取ることができる）の発酵により産生される抗
生物質またはその混合物またはその産生突然変異体（す
なわ熱度異体）は、本発明の方法を適用することによっ
て回収することができ、すなわち、抗生物質Ａ／１６６
８６複合体、米国特許第４． ３０３． ６４６号およ
び米国特許第４．４２７，６５６号に記載されている、
３つの関係する因子Ａ１、Ａ２、およびＡ３の各または
任意の比率のそれらの混合物、欧州特許出願公開第２５
９７８０号に記載されている、単一の因子の産生を増大
するために適当な前駆体を培養物に添加して得られる、
単一の成分に富んだ混合物、および欧州特許出願公開第
３１８６８０号に記載されている、抗生物質Ａ／１６６
８６の因子Ａ’ １、Ａ’ ２およびＡ’ ３゜
本発明の方法は、発酵ブロスに、あるいは前記抗生物質
を含有する任意のプロセス流れまたはそれらの混合物に
適用することができる。
明細書および特許請求の範囲において、用語「非イオン
性界面活性剤」は、水性媒質中に溶解したとき、本質的
に電荷もたず、そして疎水性部分（例えば、アルキルベ
ンゼン部分）および親水性部分（例えば、ポリオキシ−
低級アルキレン部分）を有する水溶性ポリマーに基づく
、表面活性物質である。したがって、用語「カチオン性
界面活性剤」は、明細書および特許請求の範囲において
、溶液中で正に帯電した表面活性イオンを形成する洗浄
剤を意味する。明細書および特許請求の範囲において、
一般用語「界面活性剤」と呼ぶとき、それは上に定義し
た非イオン性界面活性剤（ａ）およびカチオン性界面活
性剤（ｂ）の両者を構成する。
性界面活性剤」は、水性媒質中に溶解したとき、本質的
に電荷もたず、そして疎水性部分（例えば、アルキルベ
ンゼン部分）および親水性部分（例えば、ポリオキシ−
低級アルキレン部分）を有する水溶性ポリマーに基づく
、表面活性物質である。したがって、用語「カチオン性
界面活性剤」は、明細書および特許請求の範囲において
、溶液中で正に帯電した表面活性イオンを形成する洗浄
剤を意味する。明細書および特許請求の範囲において、
一般用語「界面活性剤」と呼ぶとき、それは上に定義し
た非イオン性界面活性剤（ａ）およびカチオン性界面活
性剤（ｂ）の両者を構成する。
本発明に従い使用する界面活性剤は、水と混和性である
か、あるいは水中に分散することができなくてはならな
い。これが意味するように、適当な界面活性剤は、エネ
ルギー消費、産生物の安定性、および安全性の観点から
、工業的回収プロセスの通常の条件と適合する温度にお
いて、水と透明な溶液または安定な分散液を形成する。
か、あるいは水中に分散することができなくてはならな
い。これが意味するように、適当な界面活性剤は、エネ
ルギー消費、産生物の安定性、および安全性の観点から
、工業的回収プロセスの通常の条件と適合する温度にお
いて、水と透明な溶液または安定な分散液を形成する。
一般に、工業的規模の方法において、０℃〜９０℃の温
度において水と混和性である界面活性剤を使用すること
は好ましいが、この範囲外の温度は本発明の方法の首尾
よい達成において排除されない。本発明における使用の
最も好ましい界面活性剤は、０℃〜６５℃の温度におい
て任意の比率で水と混和性（または分散性）である。
度において水と混和性である界面活性剤を使用すること
は好ましいが、この範囲外の温度は本発明の方法の首尾
よい達成において排除されない。本発明における使用の
最も好ましい界面活性剤は、０℃〜６５℃の温度におい
て任意の比率で水と混和性（または分散性）である。
表現「抗生物質を溶解することができる」は、界面活性
剤がそれ自体の相中に抗生物質の大部分を保持できなく
てはならないことを意味する。この能力は、発酵ブロス
の試料のついて１系列の界面活性剤を使用して実施した
試験により、そして界面活性剤の相中の抗生物質の含量
を通常の分析方法、例えば、ＨＰＬＣにより決定するこ
とによって決定できる。
剤がそれ自体の相中に抗生物質の大部分を保持できなく
てはならないことを意味する。この能力は、発酵ブロス
の試料のついて１系列の界面活性剤を使用して実施した
試験により、そして界面活性剤の相中の抗生物質の含量
を通常の分析方法、例えば、ＨＰＬＣにより決定するこ
とによって決定できる。
用語「適当な量）は、抽出工程において、発酵ブロスに
添加する界面活性剤の量が、バイオマス中に捕捉された
抗生物質の解放を促進しそして、もちろん、２相への分
離が起こったとき、それを抽出するために十分でなくて
はならないことを意味する。
添加する界面活性剤の量が、バイオマス中に捕捉された
抗生物質の解放を促進しそして、もちろん、２相への分
離が起こったとき、それを抽出するために十分でなくて
はならないことを意味する。
非イオン性界面活性剤（ａ）のうちで、ポリオキシエチ
レン界面活性剤、例えば、アルキルフェノキシポリ（エ
チレンオキシ）エタノール（エトキシル化アルキルフェ
ノール）は好ましい。
レン界面活性剤、例えば、アルキルフェノキシポリ（エ
チレンオキシ）エタノール（エトキシル化アルキルフェ
ノール）は好ましい。
ポリオキシエチレンの非イオン性界面活性剤の水溶性は
、ポリオキシエチレン鎖中のエーテル結合に依存するこ
とは知られている。これらのエーテル結合は室温におい
て容易に水和され、そして室温における生成物の水溶性
はこのような水和されたエーテル結合の数に依存する。
、ポリオキシエチレン鎖中のエーテル結合に依存するこ
とは知られている。これらのエーテル結合は室温におい
て容易に水和され、そして室温における生成物の水溶性
はこのような水和されたエーテル結合の数に依存する。
こうして、その値が０（完全に親油性または油を好む）
〜２０（完全に親水性または水を好む）の範囲である、
親水性−親油性バランス（ＨＬＰ）を定義することがで
きる。ＨＬＢ値は、次の方程式により計算される： ＨＬＢ＝−（シー４５． ７）／２． ３にこでνは界
面張力である［参照、製剤科学雑誌（Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ５ｃｉｅ
ｎｃｅ）、Ｖｏｌ、５０、Ｎｏ、９．１９６１年９月、
ｐｐ、７３２−７３６）。
〜２０（完全に親水性または水を好む）の範囲である、
親水性−親油性バランス（ＨＬＰ）を定義することがで
きる。ＨＬＢ値は、次の方程式により計算される： ＨＬＢ＝−（シー４５． ７）／２． ３にこでνは界
面張力である［参照、製剤科学雑誌（Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ５ｃｉｅ
ｎｃｅ）、Ｖｏｌ、５０、Ｎｏ、９．１９６１年９月、
ｐｐ、７３２−７３６）。
実際的目的で、それは界面活性剤の分子中のエチレンオ
キシドの重量％を５で割ることによって概算することが
できる。
キシドの重量％を５で割ることによって概算することが
できる。
一般に、本発明において使用するポリオキシエチレン界
面活性剤は少なくとも１０のＨＬＢを有する。
面活性剤は少なくとも１０のＨＬＢを有する。
とくに、アルキル基が、Ｃ，−Ｃ，アルキル、好ましく
はオクチル、ｔ−オクチル、イソ−オクチル、およびノ
ニルであり、そしてエチレンオキシド単位の数は６〜３
０、好ましくは７〜１３の範囲である、エトキシル化ア
ルキルフェノールは好ましい。
はオクチル、ｔ−オクチル、イソ−オクチル、およびノ
ニルであり、そしてエチレンオキシド単位の数は６〜３
０、好ましくは７〜１３の範囲である、エトキシル化ア
ルキルフェノールは好ましい。
本発明の好ましい実施態様において、非イオン性界面活
性剤は、親水性部分の１モルのたり７〜１０のエチレン
オキシド単位を含有するポリオキシエチレンｔ−オクチ
ルフェニルエーテル、例えば、トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ
＠）Ｘ−１００およびトリトンＸ−１１４（ローム・ア
ンド・ハース）として商業的知られているである。
性剤は、親水性部分の１モルのたり７〜１０のエチレン
オキシド単位を含有するポリオキシエチレンｔ−オクチ
ルフェニルエーテル、例えば、トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ
＠）Ｘ−１００およびトリトンＸ−１１４（ローム・ア
ンド・ハース）として商業的知られているである。
非イオン性界面活性剤のうちで、また、エトキシル化ア
ンヒドロソルビトールエステルの界面活性剤、例えば、
ソルビタンエステルがモノオレエートである、エトキシ
ル化ソルビタン脂肪酸エステルの界面活性剤を便利に使
用できる。
ンヒドロソルビトールエステルの界面活性剤、例えば、
ソルビタンエステルがモノオレエートである、エトキシ
ル化ソルビタン脂肪酸エステルの界面活性剤を便利に使
用できる。
例えば、エステルの１モル当たり２０オキシ工チレン単
位を含有するソルビタンモノオレエートのポリオキシエ
チレン誘導体を本発明の方法において、非イオン性の水
混和性界面活性剤として使用できる。
位を含有するソルビタンモノオレエートのポリオキシエ
チレン誘導体を本発明の方法において、非イオン性の水
混和性界面活性剤として使用できる。
カチオン性界面活性剤のうちで、アミンオキシドおよび
ポリオキシエチレンアミンは好ましい。
ポリオキシエチレンアミンは好ましい。
アミンオキシドはとくに好ましい。
アミンオキシドはよく知られているカチオン性界面活性
剤であり、また、強い二極性の窒素−酸素結合を有する
非イオン性化合物として考えることができ、ｐＨに依存
して水溶液中で非イオン性またはカチオン性の特性を示
す。ｐＨ３において、カチオンの形態は主要比率を占め
るが、より高いｐＨ値（例えば、中性以上）において、
非イオン性の形態が主要比率を占める。
剤であり、また、強い二極性の窒素−酸素結合を有する
非イオン性化合物として考えることができ、ｐＨに依存
して水溶液中で非イオン性またはカチオン性の特性を示
す。ｐＨ３において、カチオンの形態は主要比率を占め
るが、より高いｐＨ値（例えば、中性以上）において、
非イオン性の形態が主要比率を占める。
本発明において便利に使用できる、適当なアミンオキシ
ドの例は、−数式Ｉ： Ｉ 式中、ＲおよびＲ１は、各々独立に、（Ｃ１−Ｃ４）ア
ルキル、好ましくはメチルまたは（ＣＩＣ４）ヒドロキ
シアルキル、一般にヒドロキシエチルであり、モしてＲ
２は１０〜２５個の炭素原子を有し、必要に応じてアミ
ド基を含有するアルキル鎖である、 を有する。
ドの例は、−数式Ｉ： Ｉ 式中、ＲおよびＲ１は、各々独立に、（Ｃ１−Ｃ４）ア
ルキル、好ましくはメチルまたは（ＣＩＣ４）ヒドロキ
シアルキル、一般にヒドロキシエチルであり、モしてＲ
２は１０〜２５個の炭素原子を有し、必要に応じてアミ
ド基を含有するアルキル鎖である、 を有する。
より好ましくは、本発明の方法において使用するアミン
オキシドは、式： ％式％ 式中、Ｘは工１〜１７である、 のアルキルジメチルアミンオキシド、例えば、ラウリル
ジメチルアミンオキシド、アンモニクス（Ａｍｍｏｎｙ
ｘ＠）ＬＯ（ＯＮＹＸ Ｃｈｅｍ、Ｃ００）として商
業的に知られている、または式：式中、ｙは６〜１６の
整数である、 のアルキルアミドプロピルジメチルアミンオキシドであ
り、例えば、アシル部分が、それぞれ、ヤシ油およびタ
ロウ油の加水分解から生ずる脂肪酸混合物から誘導され
る、アンモニクス（Ａｍｍ。
オキシドは、式： ％式％ 式中、Ｘは工１〜１７である、 のアルキルジメチルアミンオキシド、例えば、ラウリル
ジメチルアミンオキシド、アンモニクス（Ａｍｍｏｎｙ
ｘ＠）ＬＯ（ＯＮＹＸ Ｃｈｅｍ、Ｃ００）として商
業的に知られている、または式：式中、ｙは６〜１６の
整数である、 のアルキルアミドプロピルジメチルアミンオキシドであ
り、例えば、アシル部分が、それぞれ、ヤシ油およびタ
ロウ油の加水分解から生ずる脂肪酸混合物から誘導され
る、アンモニクス（Ａｍｍ。
ｎｙｘ＠）ＣＤＯまたはＴＤＯ（ＯＮＹＸ Ｃｈｅｍ
、Ｃｏ、）として知られている商品である。
、Ｃｏ、）として知られている商品である。
他の好ましいカチオン性界面活性剤は、ポリオキシエチ
レンアミンである。とくに、ポリオキシエチレンの線状
アルキルアミンまたはポリオキシエチレンの脂肪族ｔ−
アルキルアミンを使用することができる。
レンアミンである。とくに、ポリオキシエチレンの線状
アルキルアミンまたはポリオキシエチレンの脂肪族ｔ−
アルキルアミンを使用することができる。
エトキシル化アミンは、ポリオキシエチレン含量が増加
するにつれて、水溶性を増加する特性を有する。
するにつれて、水溶性を増加する特性を有する。
また、これらのカチオン性界面活性剤（ｂ）について、
上に定義した親木性−親油性バランス（ＨＬＰ）の方程
式を定義することができそして、般に、本発明に従い使
用する適当なカチオン性界面活性剤は１９．４以下、好
ましくは１４〜１８のＨＬＢ値を有する。
上に定義した親木性−親油性バランス（ＨＬＰ）の方程
式を定義することができそして、般に、本発明に従い使
用する適当なカチオン性界面活性剤は１９．４以下、好
ましくは１４〜１８のＨＬＢ値を有する。
この方法の実際の条件下に、非イオン性界面活性剤（ａ
）の濃度は、発酵ブロスに関して、２％〜１０％ｖ／ｖ
、好ましくは３％〜６％ｖ ／ ｖの範囲であるが、カ
チオン性界面活性剤（ｂ）について、その濃度は、発酵
ブロスに関して、０．５％〜１０％ｖ ／ ｖ 、好ま
しくは１％〜７％ｖ／ｖの範囲である。
）の濃度は、発酵ブロスに関して、２％〜１０％ｖ／ｖ
、好ましくは３％〜６％ｖ ／ ｖの範囲であるが、カ
チオン性界面活性剤（ｂ）について、その濃度は、発酵
ブロスに関して、０．５％〜１０％ｖ ／ ｖ 、好ま
しくは１％〜７％ｖ／ｖの範囲である。
室温に近いかまたはそれより多少低い温度、例えば、０
℃〜３０℃の温度において抽出を実施して、ブロスの熱
劣化を誘発しつる操業温度の使用を回避することが望ま
しい。
℃〜３０℃の温度において抽出を実施して、ブロスの熱
劣化を誘発しつる操業温度の使用を回避することが望ま
しい。
そのうえ、抽出は酸性媒質中で実施することが好ましく
、より好ましくは発酵ブロスのｐＨは１〜３範囲の値に
調節する。事実、より高いｐＨを適用するとき、抽出は
界面活性剤の同一濃度において不完全であることがある
。
、より好ましくは発酵ブロスのｐＨは１〜３範囲の値に
調節する。事実、より高いｐＨを適用するとき、抽出は
界面活性剤の同一濃度において不完全であることがある
。
一般に、適当な量の界面活性剤の添加後、この混合物を
撹拌しながら３０〜６０分間維持し、この期間は抗生物
質の完全抽出を達成するためにほぼ十分である。
撹拌しながら３０〜６０分間維持し、この期間は抗生物
質の完全抽出を達成するためにほぼ十分である。
抽出が完結した後、この混合物を濾過して残留する湿っ
た菌糸体を排除することは有用であることがある。した
がって、界面活性剤および発酵プロセスを通して産生さ
れた抗生物質の大部分を含有する水溶液（または分散液
）が得られる。
た菌糸体を排除することは有用であることがある。した
がって、界面活性剤および発酵プロセスを通して産生さ
れた抗生物質の大部分を含有する水溶液（または分散液
）が得られる。
濾過は、既知の技術に従い、濾過助剤、例えば、ケイ藻
±（例えば、Ｃ１ａｒｃｅｌ Ｆｌｏ−Ｍａ）、例え
ば、既に引用した米国特許第４．３０３．６４６号に従
い実施する。
±（例えば、Ｃ１ａｒｃｅｌ Ｆｌｏ−Ｍａ）、例え
ば、既に引用した米国特許第４．３０３．６４６号に従
い実施する。
本発明の重要な面は、界面活性剤を含有する水性混合物
からの抗生物質の取り出しに関する。これは解くべき重
要な問題である。なぜなら、抗生物質Ａ／１６６８６お
よび界面活性剤の両者は水中に可溶性または分散性であ
るからである。
からの抗生物質の取り出しに関する。これは解くべき重
要な問題である。なぜなら、抗生物質Ａ／１６６８６お
よび界面活性剤の両者は水中に可溶性または分散性であ
るからである。
樹脂上へ吸着は選択的でないことが証明された。
大量の非溶媒の添加は抗生物質を沈澱させることができ
るであろうが、この作業は経済的および安全性の両者の
理由で工業的規模においてほとんど可能ではない。
るであろうが、この作業は経済的および安全性の両者の
理由で工業的規模においてほとんど可能ではない。
この問題の満足すべき回答は、水性混合物の物理化学的
条件を変更して、その２相への分離を誘発し、その１つ
は発酵ブロス中に本来存在する抗生物質の大部分を含有
する。この相は引き続いて仕上げて所望の抗生物質を回
収する。混合物の２相への分離を誘発する物理化学的条
件の変更は、例えば、温度を増加することによって達成
できる。
条件を変更して、その２相への分離を誘発し、その１つ
は発酵ブロス中に本来存在する抗生物質の大部分を含有
する。この相は引き続いて仕上げて所望の抗生物質を回
収する。混合物の２相への分離を誘発する物理化学的条
件の変更は、例えば、温度を増加することによって達成
できる。
温度の増加は水和力を減少し、そして表面活性剤の水性
混合物中の溶解度は減少するようになり、次いで混合物
は有機層および水性層に分離する。
混合物中の溶解度は減少するようになり、次いで混合物
は有機層および水性層に分離する。
本発明によれば、実質的な量の抗生物質は界面活性剤の
相により保持され、そして水性層は排除することができ
る。
相により保持され、そして水性層は排除することができ
る。
もちろん１分離工程の熱分解を回避するために、温度を
限界値にのみに上昇させることが好ましい。
限界値にのみに上昇させることが好ましい。
通常、抽出工程を室温において実施するとき、抗生物質
の安定性に影響を与えない、相分離のための温度は室温
より１５℃〜３０℃上である。抽出工程を室温より低い
温度で実施する場合、２相への分離を誘発するための温
度上昇は３０℃〜５５℃程度である。
の安定性に影響を与えない、相分離のための温度は室温
より１５℃〜３０℃上である。抽出工程を室温より低い
温度で実施する場合、２相への分離を誘発するための温
度上昇は３０℃〜５５℃程度である。
温度を上昇させ過ぎないために、抽出から生ずる水−界
面活性剤の混合物へ電解質を添加することは、前記混合
物の２相への分離を促進に対して有用な方法であろう。
面活性剤の混合物へ電解質を添加することは、前記混合
物の２相への分離を促進に対して有用な方法であろう。
非イオン性界面活性剤として、それらは、通常、「曇り
点」により特性決定し、この曇り点はそれより上である
と、すべてであるが、非常に希薄な水溶液が２相を形成
する温度である。非イオン性界面活性剤の水溶性への溶
解した塩類の作用は、温度の上昇に類似する；事実、そ
れらは非イオン性界面活性剤中のエーテル結合より大き
い水に対する親和性を有する。したがって、電解質の存
在および／または非イオン性界面活性剤の水溶液への添
加は「曇り点」を低下させて、温度を上昇させ過ぎない
で、２相への分離を可能とする。
点」により特性決定し、この曇り点はそれより上である
と、すべてであるが、非常に希薄な水溶液が２相を形成
する温度である。非イオン性界面活性剤の水溶性への溶
解した塩類の作用は、温度の上昇に類似する；事実、そ
れらは非イオン性界面活性剤中のエーテル結合より大き
い水に対する親和性を有する。したがって、電解質の存
在および／または非イオン性界面活性剤の水溶液への添
加は「曇り点」を低下させて、温度を上昇させ過ぎない
で、２相への分離を可能とする。
一般に、本発明の方法において有用に使用できる、非イ
オン性界面活性剤は、少なくとも５℃、好ましくは１０
℃〜８０℃、より好ましくは１５℃〜７０℃を有するが
、また、抗生物質がこのような温度において実質的な安
定性を示す場合、８０℃を越える曇り点を有する界面活
性剤を使用できる。
オン性界面活性剤は、少なくとも５℃、好ましくは１０
℃〜８０℃、より好ましくは１５℃〜７０℃を有するが
、また、抗生物質がこのような温度において実質的な安
定性を示す場合、８０℃を越える曇り点を有する界面活
性剤を使用できる。
カチオン性界面活性剤に関すると、２相への分離を誘発
する混合物中の塩の最終濃度は、温度ばかりでなく、か
つまた使用する特定のカチオン性界面活性剤のＨＬＢ値
に依存することは明らかである。カチオン性界面活性剤
が高いＨＬＢ値を示す場合、２相の分離はより困難であ
り、そして大量の電解質を添加しなくてはならない。カ
チオン性界面活性剤が約１６〜１７のＨＬＢを示す場合
、より少ない量の塩が必要である。
する混合物中の塩の最終濃度は、温度ばかりでなく、か
つまた使用する特定のカチオン性界面活性剤のＨＬＢ値
に依存することは明らかである。カチオン性界面活性剤
が高いＨＬＢ値を示す場合、２相の分離はより困難であ
り、そして大量の電解質を添加しなくてはならない。カ
チオン性界面活性剤が約１６〜１７のＨＬＢを示す場合
、より少ない量の塩が必要である。
通常、２相への分離を促進するために添加する電解質は
、抗生物質と反応しないか、あるいはその安定性に影響
を与ない水溶性塩である。
、抗生物質と反応しないか、あるいはその安定性に影響
を与ない水溶性塩である。
無機の水溶性塩、例えば、アルカリ金属およびアンモニ
ウムのハライドは一般に低いコストおよび高い有効性の
ために好ましい。
ウムのハライドは一般に低いコストおよび高い有効性の
ために好ましい。
使用できるアルカリ金属塩は、ナトリウム塩が好ましい
場合でさえ、Ｌｉ、ＮａおよびＫの塩である。
場合でさえ、Ｌｉ、ＮａおよびＫの塩である。
反対イオンとして使用するハロゲンはＣＩ、Ｂｒおよび
Ｉの間で選択することができ、塩素は好ましい。
Ｉの間で選択することができ、塩素は好ましい。
添加する最終濃度は、また、もとのブロスの塩濃度に依
存する。通常の発酵条件下に、非イオン性界面活性剤（
ａ）を含有する抽出混合物中の添加する塩の濃度は、一
般に、１０％〜３０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは約１５〜
２０％である。カチオン性界面活性剤（ｂ）を含有する
抽出混合物中の添加した濃度は、一般に、５％〜飽和濃
度であるが、好ましくは、約２５〜３０％（ｗ／ｖ）を
使用することは好ましい。
存する。通常の発酵条件下に、非イオン性界面活性剤（
ａ）を含有する抽出混合物中の添加する塩の濃度は、一
般に、１０％〜３０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは約１５〜
２０％である。カチオン性界面活性剤（ｂ）を含有する
抽出混合物中の添加した濃度は、一般に、５％〜飽和濃
度であるが、好ましくは、約２５〜３０％（ｗ／ｖ）を
使用することは好ましい。
分離工程の実施に好ましい温度は、室温〜７０℃である
ことができる。
ことができる。
試料の濃度の低下は、相分離のためにより高い温度を必
要とする。
要とする。
相分離工程の間、７より低いｐＨを維持して、物質の起
こり得る化学的分解を回避することは望ましい。
こり得る化学的分解を回避することは望ましい。
この手順後、もとの混合物の合計の体積の約１０％であ
りかつ実際にすべての抗生物質を含有する界面活性剤の
相、および廃棄できる５％より少ない抗生物質を含有す
る相を分離することができる。
りかつ実際にすべての抗生物質を含有する界面活性剤の
相、および廃棄できる５％より少ない抗生物質を含有す
る相を分離することができる。
本発明の好ましい実施態様において、非イオン性界面活
性剤としてポリオキシエチレン−ｔ−オクチル−フェニ
ルエステルの使用、合計の抽出混合物中の２５０ｇ／ｊ
！までの濃度に相当する量の塩化ナトリウムの添加、お
よび２０℃〜４０℃の温度の増加はすぐれた結果を与え
る；この場合において、加熱を３０〜６０分間延長して
分離を完結することは有用であることがある。
性剤としてポリオキシエチレン−ｔ−オクチル−フェニ
ルエステルの使用、合計の抽出混合物中の２５０ｇ／ｊ
！までの濃度に相当する量の塩化ナトリウムの添加、お
よび２０℃〜４０℃の温度の増加はすぐれた結果を与え
る；この場合において、加熱を３０〜６０分間延長して
分離を完結することは有用であることがある。
さらに本発明の好ましい実施態様において、カチオン性
界面活性剤としてアミドプロピルジメチルアミンオキシ
ドの使用、合計の抽出混合物中の２０％までの濃度に相
当する量の塩化ナトリウムの添加、および４０℃の温度
の増加はすぐれた結果を与える：この場合において、加
熱を３０〜６０分間延長して分離を完結することは有用
であることがある。
界面活性剤としてアミドプロピルジメチルアミンオキシ
ドの使用、合計の抽出混合物中の２０％までの濃度に相
当する量の塩化ナトリウムの添加、および４０℃の温度
の増加はすぐれた結果を与える：この場合において、加
熱を３０〜６０分間延長して分離を完結することは有用
であることがある。
実際に、この工程は、労力を要する抽出および濃縮の手
順を必要としないで、発酵プロセスにより産生される実
質的な量の抗生物質を比較的小さい体積で集めることが
できるようにする。
順を必要としないで、発酵プロセスにより産生される実
質的な量の抗生物質を比較的小さい体積で集めることが
できるようにする。
最終工程は、界面活性剤層の除去、および抗生物質と界
面活性剤との選択的分離からなり、前記分離は界面活性
剤の相と混和性の有機溶媒の添加により実施し、ここで
抗生物質は有機溶媒中に不溶性であり、これは抗生物質
の沈澱を誘発する。
面活性剤との選択的分離からなり、前記分離は界面活性
剤の相と混和性の有機溶媒の添加により実施し、ここで
抗生物質は有機溶媒中に不溶性であり、これは抗生物質
の沈澱を誘発する。
この目的に通常使用する溶媒は、水と混和性である、不
活性の有機溶媒、例えば、アセトン、アセトニトリル、
低級アルカノール、および水と不混和性の不活性の有機
溶媒、例えば、トルエン、酢酸エチルを使用できる。
活性の有機溶媒、例えば、アセトン、アセトニトリル、
低級アルカノール、および水と不混和性の不活性の有機
溶媒、例えば、トルエン、酢酸エチルを使用できる。
有機の非プロトン性溶媒、例えば、アセトンは大体好ま
しい。なぜなら、抗生物質のラクトン部分との化学的相
互作用の危険がないからである。
しい。なぜなら、抗生物質のラクトン部分との化学的相
互作用の危険がないからである。
水と混和性の有機溶媒をを使用して抗生物質と界面活性
剤との分離を完全にするとき、少なくとも５／１〜９
／ １ ｖ ／ ｖの有機溶媒／界面活性剤の比を使用
することは好ましい。水と混和性ではない有機溶媒を使
用するとき、２つの異なる相が形成する。下の相は本質
的に水から成る（これは廃棄する）が、上の相は有機溶
媒、水、界面活性剤および固体の抗生物質から本質的に
成る。水は上の相から同一有機溶媒の連続的添加にまり
共沸蒸留により除去できる。蒸留の終わりにおいて、透
明な相が得られ、これを濃縮する。
剤との分離を完全にするとき、少なくとも５／１〜９
／ １ ｖ ／ ｖの有機溶媒／界面活性剤の比を使用
することは好ましい。水と混和性ではない有機溶媒を使
用するとき、２つの異なる相が形成する。下の相は本質
的に水から成る（これは廃棄する）が、上の相は有機溶
媒、水、界面活性剤および固体の抗生物質から本質的に
成る。水は上の相から同一有機溶媒の連続的添加にまり
共沸蒸留により除去できる。蒸留の終わりにおいて、透
明な相が得られ、これを濃縮する。
沈澱する固体は、既知の技術に従い、濾過により集め、
同一有機溶媒で洗浄し、そして４０℃において真空下に
乾燥する。抗生物質は塩化工程において使用する塩とと
もに沈澱し、この塩は粗生成物の重量の大部分を表す。
同一有機溶媒で洗浄し、そして４０℃において真空下に
乾燥する。抗生物質は塩化工程において使用する塩とと
もに沈澱し、この塩は粗生成物の重量の大部分を表す。
抗生物質と塩との分離は、よく知られている脱塩手順に
より、容易に達成することができる。これは限外ろ過（
例えば、Ｆｉｌｍｔｅｃ Ｃｏ。
より、容易に達成することができる。これは限外ろ過（
例えば、Ｆｉｌｍｔｅｃ Ｃｏ。
の膜）によるか、あるいは抗生物質を含有する溶液を非
イオン発生マクロ網状架橋樹脂（例えば、Ａｍｂｅｒｌ
ｉｔｅ ＸＡＤ−７または他のこの型の樹脂）を通し
て注ぐことによって、実施することができ、ここでグリ
コリボデプシベブチド抗生物質を水性混合物から吸着さ
せ、そしてアセトン／水の混合物で溶離する。
イオン発生マクロ網状架橋樹脂（例えば、Ａｍｂｅｒｌ
ｉｔｅ ＸＡＤ−７または他のこの型の樹脂）を通し
て注ぐことによって、実施することができ、ここでグリ
コリボデプシベブチド抗生物質を水性混合物から吸着さ
せ、そしてアセトン／水の混合物で溶離する。
次の実施例によって、本発明をさらに説明する。
実施例１
欧州特許出願公開第２５９７８０号に記載するようにし
て得られ、Ｈｚｓ Ｏ４（３３％）でｐＨ２゜６に調節
した、因子Ａ２が濃縮された（３３０ｐｐｍＳＨＰＬＣ
の推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、６
００ｍ／のトリトンＸ−１００を１０℃において添加す
る。この混合物を室温にし、そして１時間後、この混合
物をブフナー漏斗でクラルセル（Ｃｌａｒｃｅｌ）Ｆｌ
ｏ−Ｍａ濾過助剤のケークを通して濾過した。生ずる溶
液は１７．５ｊ！の体積を有し、そして最初の活性の約
９０％を回収した。消耗した菌糸体を廃棄した。濾液を
４０℃に加熱し、撹拌し、その間２゜８ｋｇの塩化ナト
リウムを添加した；次いで、濾液を室温において一夜放
置して２相に分離した。
て得られ、Ｈｚｓ Ｏ４（３３％）でｐＨ２゜６に調節
した、因子Ａ２が濃縮された（３３０ｐｐｍＳＨＰＬＣ
の推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、６
００ｍ／のトリトンＸ−１００を１０℃において添加す
る。この混合物を室温にし、そして１時間後、この混合
物をブフナー漏斗でクラルセル（Ｃｌａｒｃｅｌ）Ｆｌ
ｏ−Ｍａ濾過助剤のケークを通して濾過した。生ずる溶
液は１７．５ｊ！の体積を有し、そして最初の活性の約
９０％を回収した。消耗した菌糸体を廃棄した。濾液を
４０℃に加熱し、撹拌し、その間２゜８ｋｇの塩化ナト
リウムを添加した；次いで、濾液を室温において一夜放
置して２相に分離した。
重い相（１６，４４りを廃棄し、一方はとんどすべての
抗生物質Ａ／１６６８６およびトリトンＸ−１００を含
有する、軽い相（１，９７りを９２のアセトンで希釈し
た。沈澱した固体を濾過により集め、１１のアセトンで
洗浄し、そして真空下に４０℃において４時間乾燥して
、次の１９１゜３ｇの組成を有する粗製の抗生物質Ａ／
１６６８６を得た。 ＨＰＬＣの力価（因子Ａ２と呼ぶ
）１．９％ 溶媒十水 約１０％ ＮａＣ１８５〜９０％ ＨＰ３３５７計算システムに接続した、ヘラレット−パ
ラカード（Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ）１０９０
型の液体クロマトグラフにより、ＨＰＬＣを実施した。
抗生物質Ａ／１６６８６およびトリトンＸ−１００を含
有する、軽い相（１，９７りを９２のアセトンで希釈し
た。沈澱した固体を濾過により集め、１１のアセトンで
洗浄し、そして真空下に４０℃において４時間乾燥して
、次の１９１゜３ｇの組成を有する粗製の抗生物質Ａ／
１６６８６を得た。 ＨＰＬＣの力価（因子Ａ２と呼ぶ
）１．９％ 溶媒十水 約１０％ ＮａＣ１８５〜９０％ ＨＰ３３５７計算システムに接続した、ヘラレット−パ
ラカード（Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ）１０９０
型の液体クロマトグラフにより、ＨＰＬＣを実施した。
クロマトグラフィーの条件は、次の通りであった：
実施例２
欧州特許出願公開第２５９７８０号に記載するようにし
て得られ、ＨｚＳ０４（３３％）でｐＨ２゜６に調節し
た、因子Ａ２が濃縮された（３５４ｐｐｍ、ＨＰＬＣの
推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、１２
０ｍ１！のトリトンＸ−１００を１０℃において添加す
る。この混合物を室温にし、そして１時間後、この混合
物をブフナー漏斗でクラルセル（Ｃ１ａｒｃｅｌ）Ｆｌ
ｏ−Ｍａ濾過助剤のケークを通して濾過した。濾液を４
０℃に加熱し、撹拌し、その間７３０ｇの塩化ナトリウ
ムを添加した；次いで、濾液を室温において一夜放置し
て２相に分離した。
て得られ、ＨｚＳ０４（３３％）でｐＨ２゜６に調節し
た、因子Ａ２が濃縮された（３５４ｐｐｍ、ＨＰＬＣの
推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、１２
０ｍ１！のトリトンＸ−１００を１０℃において添加す
る。この混合物を室温にし、そして１時間後、この混合
物をブフナー漏斗でクラルセル（Ｃ１ａｒｃｅｌ）Ｆｌ
ｏ−Ｍａ濾過助剤のケークを通して濾過した。濾液を４
０℃に加熱し、撹拌し、その間７３０ｇの塩化ナトリウ
ムを添加した；次いで、濾液を室温において一夜放置し
て２相に分離した。
重い相（３３００ｍｌ）を廃棄し、一方はとんどすべて
の抗生物質Ａ／１６６８６およびトリトンＸ−１００を
含有する、軽い相（４３０ｍｊ）を４３０ｒｒ＋１！の
アセトンで希釈した。沈澱した固体を濾過により集め、
４３０ｍｊ！のアセトンで洗浄した。
の抗生物質Ａ／１６６８６およびトリトンＸ−１００を
含有する、軽い相（４３０ｍｊ）を４３０ｒｒ＋１！の
アセトンで希釈した。沈澱した固体を濾過により集め、
４３０ｍｊ！のアセトンで洗浄した。
２相が形成した：低い相（３００ｍｌ）および上の相（
５６０ｍｊり。
５６０ｍｊり。
水を含有する下の相を廃棄した。
上の有機相は乳濁液であり、これは水、トルエンおよび
トリトンおよび固体の抗生物質を含有する。前記有機相
を減圧下にトルエン（１１）の添加にまり共沸蒸留して
、水を排除した。
トリトンおよび固体の抗生物質を含有する。前記有機相
を減圧下にトルエン（１１）の添加にまり共沸蒸留して
、水を排除した。
生ずる濃縮した溶液（５００ｒ＋ｌ）が得られた。
沈澱した固体を濾過により集め、５０ｍ１のトルエンで
洗浄し、そして真空下にに４０℃で４時間乾燥して、１
９．４ｇの６．７％ｂ、ｗ、のＨＰＬＣ力価を有する粗
製抗生物質Ａ／１６６８６が得られた。
洗浄し、そして真空下にに４０℃で４時間乾燥して、１
９．４ｇの６．７％ｂ、ｗ、のＨＰＬＣ力価を有する粗
製抗生物質Ａ／１６６８６が得られた。
実施例３
欧州特許出願公開第２５９７８０号に記載するようにし
て得られ、Ｈ２Ｓ０４（３３％）でｐＨ２゜６に調節し
た、因子Ａ２が濃縮された（３３０ｐｐｍ、ＨＰＬＣの
推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、６０
０ｍ１のトリトンＸ−１１４を４℃において添加する。
て得られ、Ｈ２Ｓ０４（３３％）でｐＨ２゜６に調節し
た、因子Ａ２が濃縮された（３３０ｐｐｍ、ＨＰＬＣの
推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、６０
０ｍ１のトリトンＸ−１１４を４℃において添加する。
この混合物を４℃において２時間撹拌した。この混合物
をブフナー漏斗でクラルセル（Ｃ１ａｒｃｅｌ）Ｆｌｏ
−Ｍａ濾過助剤のケークを通して濾過した。生ずる溶液
は１８Ｎの体積を有し、そして最初の活性の約８５％を
含有した。濾液を６０℃に加熱し、５０℃〜６０℃に一
夜保持し、こうして２相が分離した。軽い相（１６，２
Ｊ）を廃棄し、一方はとんどすべての抗生物質Ａ／１６
６８６およびトリトンＸ−１１４を含有する、重い相（
１，８ｍｊりを１１Ｊ２のアセトンで希釈し、そして真
空下にに４０℃で乾燥して、２５ｇの１６．９％のＨＰ
ＬＣアッセイを有する粗製抗生物質Ａ／１６６８６が得
られた。
をブフナー漏斗でクラルセル（Ｃ１ａｒｃｅｌ）Ｆｌｏ
−Ｍａ濾過助剤のケークを通して濾過した。生ずる溶液
は１８Ｎの体積を有し、そして最初の活性の約８５％を
含有した。濾液を６０℃に加熱し、５０℃〜６０℃に一
夜保持し、こうして２相が分離した。軽い相（１６，２
Ｊ）を廃棄し、一方はとんどすべての抗生物質Ａ／１６
６８６およびトリトンＸ−１１４を含有する、重い相（
１，８ｍｊりを１１Ｊ２のアセトンで希釈し、そして真
空下にに４０℃で乾燥して、２５ｇの１６．９％のＨＰ
ＬＣアッセイを有する粗製抗生物質Ａ／１６６８６が得
られた。
実施例４
欧州特許出願公開第２５９７８０号に記載するようにし
て得られ、Ｈ２Ｓ０４（３３％）でｐＨ２゜６に調節し
た、因子Ａ２が濃縮された（３５４ ｐｐｍ、ＨＰＬＣ
の推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、１
０５ｍ１！のアンモニクス（Ａｍｍｏｎｙｘ＠）ＣＤＯ
（１，６％）を１０℃において添加する。この混合物を
室温にし、そして１時間後、この混合物をブフナー漏斗
でクラルセル（Ｃ１ａｒｃｅｌ）Ｆｌｏ−Ｍａ濾過助剤
のケークを通して濾過した。濾液を４０℃に加熱し、撹
拌し、その間５４０ｇの塩化ナトリウムを添加した：次
いで、濾液を室温において一夜放置して２相に分離した
。
て得られ、Ｈ２Ｓ０４（３３％）でｐＨ２゜６に調節し
た、因子Ａ２が濃縮された（３５４ ｐｐｍ、ＨＰＬＣ
の推定）抗生物質Ａ／１６６８６の撹拌した溶液に、１
０５ｍ１！のアンモニクス（Ａｍｍｏｎｙｘ＠）ＣＤＯ
（１，６％）を１０℃において添加する。この混合物を
室温にし、そして１時間後、この混合物をブフナー漏斗
でクラルセル（Ｃ１ａｒｃｅｌ）Ｆｌｏ−Ｍａ濾過助剤
のケークを通して濾過した。濾液を４０℃に加熱し、撹
拌し、その間５４０ｇの塩化ナトリウムを添加した：次
いで、濾液を室温において一夜放置して２相に分離した
。
重い相（１，８４りを廃棄し、一方はとんどすｘ−ｒ／
７’ｌ Ｆｒ ｌ：ｋ ＆ ’ｔｌΔ／ Ｉ Ｑ Ａ
Ｑ Ｑ ｋ ） ｒＫ ？ ’／ ニー ／７ス（Ａｍ
ｍｏｎｙｘ＠）ＣＤＯを含有する、軽い相（７５ｍ１）
をアセトンで希釈し、そして真空下にに４０℃で４時間
乾燥して、１５８ｇの１゜３６％ｂ、ｗ、のＨＰＬＣ力
価（因子Ａ２に関して）を有する粗製抗生物質Ａ／１６
６８６が得られた。
７’ｌ Ｆｒ ｌ：ｋ ＆ ’ｔｌΔ／ Ｉ Ｑ Ａ
Ｑ Ｑ ｋ ） ｒＫ ？ ’／ ニー ／７ス（Ａｍ
ｍｏｎｙｘ＠）ＣＤＯを含有する、軽い相（７５ｍ１）
をアセトンで希釈し、そして真空下にに４０℃で４時間
乾燥して、１５８ｇの１゜３６％ｂ、ｗ、のＨＰＬＣ力
価（因子Ａ２に関して）を有する粗製抗生物質Ａ／１６
６８６が得られた。
本発明の主な特徴および態様は、次の通りである。
１、アクチノプラネス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ）種
ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発酵に
より産生された抗生物質またはその混合物を発酵ブロス
またはプロセス流れから回収する方法であって、工程： 発酵ブロスまたはプロセス流れを、 （ａ）非イオン性界面活性剤、または （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させ、前
記界面活性剤は水と混和性であるか、あるいは水中に分
散性でありかつ前記抗生物質を溶解ナス−Ｊ−＾（ア専
−の迎さ蜘の伽卯ル堂的名赴ｔ変更することによって
前記混合物の２相への分離を誘発させ、消耗したブロス
を含有する相を界面活性剤の相から分離し、そして前記
抗生物質がその中に不溶性である有機溶媒の添加により
、前記抗生物質を界面活性剤の相から回収する、からな
る方法。
ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発酵に
より産生された抗生物質またはその混合物を発酵ブロス
またはプロセス流れから回収する方法であって、工程： 発酵ブロスまたはプロセス流れを、 （ａ）非イオン性界面活性剤、または （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させ、前
記界面活性剤は水と混和性であるか、あるいは水中に分
散性でありかつ前記抗生物質を溶解ナス−Ｊ−＾（ア専
−の迎さ蜘の伽卯ル堂的名赴ｔ変更することによって
前記混合物の２相への分離を誘発させ、消耗したブロス
を含有する相を界面活性剤の相から分離し、そして前記
抗生物質がその中に不溶性である有機溶媒の添加により
、前記抗生物質を界面活性剤の相から回収する、からな
る方法。
２、アクチノプラネス（Ａｃｔ １ｎｏｐｌａｎｅｓ）
種ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発酵
により産生される抗生物質は、抗生物質Ａ／１６６８６
、単一の因子ＡＩ、Ａ２、Ａ３、Ａ’ １、Ａ’
２、Ａ’ ３の各々またはその任意の混合物である、
上記第１項記載の方法。
種ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発酵
により産生される抗生物質は、抗生物質Ａ／１６６８６
、単一の因子ＡＩ、Ａ２、Ａ３、Ａ’ １、Ａ’
２、Ａ’ ３の各々またはその任意の混合物である、
上記第１項記載の方法。
３、抽出混合物の２相への分離を誘発するためのその物
理化学的条件の変更は、温度の上昇および任意の電解質
の添加にある、上記第１または２項記載の方法。
理化学的条件の変更は、温度の上昇および任意の電解質
の添加にある、上記第１または２項記載の方法。
４、界面活性剤との接触は０℃〜３０℃の温度において
行う、上記第１〜３項のいずれかに記載の方法。
行う、上記第１〜３項のいずれかに記載の方法。
５、抽出混合物の温度はＯ℃〜３０℃だけ上昇させて２
相への分離を促進する、上記第１〜４項のいずれかに記
載の方法。
相への分離を促進する、上記第１〜４項のいずれかに記
載の方法。
６、電解質を添加して２相への分離を促進する、上記第
５項記載の方法。
５項記載の方法。
７、電解質は水溶性無機塩、好ましくはアルカリ金属ま
たはアンモニウムのハライド、好ましくは塩化ナトリウ
ムである、上記第６項記載の方法。
たはアンモニウムのハライド、好ましくは塩化ナトリウ
ムである、上記第６項記載の方法。
８、界面活性剤の相からの抗生物質の回収は、アセトン
、アセトニトリル、エタノール、トルエン、および酢酸
エチルから選択される有機溶媒の添加により達成する、
上記第１〜７項のいずれかに記載の方法。
、アセトニトリル、エタノール、トルエン、および酢酸
エチルから選択される有機溶媒の添加により達成する、
上記第１〜７項のいずれかに記載の方法。
９、界面活性剤の相に添加する溶媒はアセトンである、
上記第８項記載の方法。
上記第８項記載の方法。
１０、相分離の間の界面活性剤の相のｐＨは７より低い
、上記第１〜９項のいずれかに記載の方法。
、上記第１〜９項のいずれかに記載の方法。
１１、非イオン性界面活性剤は、ポリオキシエチレン界
面活性剤、好ましくは、少なくとも１０の親水性−親油
性バランス（ＨＬＰ）を有するエトキシル化アルキル−
フェノールであり、そして発酵ブロスまたはプロセス流
れのｐＨを１〜３の範囲の値に調節する、上記第１〜１
０項のいずれかに記載の方法。
面活性剤、好ましくは、少なくとも１０の親水性−親油
性バランス（ＨＬＰ）を有するエトキシル化アルキル−
フェノールであり、そして発酵ブロスまたはプロセス流
れのｐＨを１〜３の範囲の値に調節する、上記第１〜１
０項のいずれかに記載の方法。
１２、エトキシル化アルキル−フェノールのアルキル基
は、Ｃ，−Ｃ，アルキル、好ましくは、オクチル、ｔ−
オクチル、イソ−オクチル、およびノニルであり、そし
てエチレンオキシド単位の数は６〜３０の範囲である、
上記第１１項記載の方法。
は、Ｃ，−Ｃ，アルキル、好ましくは、オクチル、ｔ−
オクチル、イソ−オクチル、およびノニルであり、そし
てエチレンオキシド単位の数は６〜３０の範囲である、
上記第１１項記載の方法。
１３、非イオン性界面活性剤は、７〜１０のエチレンオ
キシド単位を含有するポリオキシエチレンｔ−オクチル
フェニルエーテルである、上記第１２項記載の方法。
キシド単位を含有するポリオキシエチレンｔ−オクチル
フェニルエーテルである、上記第１２項記載の方法。
１４、界面活性剤は非イオン性界面活性剤であり、そし
てさらに、非イオン性界面活性剤の濃度は、混合物の合
計の体積に関して、２％〜１０％、好ましくは３％〜６
％の範囲であることを特徴とする、上記第１〜１３項の
いずれかに記載の方法。
てさらに、非イオン性界面活性剤の濃度は、混合物の合
計の体積に関して、２％〜１０％、好ましくは３％〜６
％の範囲であることを特徴とする、上記第１〜１３項の
いずれかに記載の方法。
１へ 細円す７．−１にイナ・ノ妊児面妊妊割Ｉｆ ／
Ｉ）ｆ） ／とも５℃、好ましくは１０℃〜８０℃のの
曇り点を有する、上記第１１〜１４項のいずれかに記載
の方法。
Ｉ）ｆ） ／とも５℃、好ましくは１０℃〜８０℃のの
曇り点を有する、上記第１１〜１４項のいずれかに記載
の方法。
１６、さらに、抽出混合物中の添加する塩の濃度は１０
％〜３０％（ｗ ／ ｖ ）であることを特徴とする、
上記第１１〜１５項のいずれかに記載の方法。
％〜３０％（ｗ ／ ｖ ）であることを特徴とする、
上記第１１〜１５項のいずれかに記載の方法。
１７、カチオン性界面活性剤は、１９．４以下、好まし
くは１４〜１８の親水性−親油性バランス（ＨＬ Ｐ）
を有するアミンオキシドおよびポリオキシエチレンアミ
ンから選択され、そして発酵ブロスまたはプロセス流れ
のｐＨを１〜３の範囲の値に調節する、上記第１〜１０
項のいずれかに記載の方法。
くは１４〜１８の親水性−親油性バランス（ＨＬ Ｐ）
を有するアミンオキシドおよびポリオキシエチレンアミ
ンから選択され、そして発酵ブロスまたはプロセス流れ
のｐＨを１〜３の範囲の値に調節する、上記第１〜１０
項のいずれかに記載の方法。
１８、アミンオキシドは、−数式：
式中、ＲおよびＲ１は、各々独立に、（Ｃ＋−Ｃ□）フ
ルキル−妊ｔＬ＜はメチルまたは（ＣＩＣ４）ヒドロキ
シアルキル、一般にヒドロキシエチルであり、モしてＲ
２は１０〜２５個の炭素原子を有し、必要に応じてアミ
ド基を含有するアルキル鎖である、 を有する、上記第１７項記載の方法。
ルキル−妊ｔＬ＜はメチルまたは（ＣＩＣ４）ヒドロキ
シアルキル、一般にヒドロキシエチルであり、モしてＲ
２は１０〜２５個の炭素原子を有し、必要に応じてアミ
ド基を含有するアルキル鎖である、 を有する、上記第１７項記載の方法。
１９、アミンオキシド界面活性剤は、
式中、ｙは６〜１６である、
である、上記第１７または１８項記載の方法。
２０、界面活性剤はカチオン性界面活性剤であり、そし
てさらに、カチオン性界面活性剤の濃度は、混合物の合
計の体積に関して、０． ５％〜１０％、好ましくは１
％〜７％の範囲である、上記第１〜１７項のいずれかに
記載の方法。
てさらに、カチオン性界面活性剤の濃度は、混合物の合
計の体積に関して、０． ５％〜１０％、好ましくは１
％〜７％の範囲である、上記第１〜１７項のいずれかに
記載の方法。
２１、さらに、溶液中の添加する塩の濃度は３％〜５％
（ｗ／ｖ）である、上記第１７〜２０項のいずれかに記
載の方法。
（ｗ／ｖ）である、上記第１７〜２０項のいずれかに記
載の方法。
２２、界面活性剤はアンモニクス（Ａｍｍｏｎｙｘ＠）
ＣＤＯである、
上記第１７〜２１項のい
ずれかに記載の方法。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、アクチノプラネス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ）種
ＡＴＣＣ３３０７６またはその産生突然変異体の発酵に
より産生された抗生物質またはその混合物を発酵ブロス
またはプロセス流れから回収する方法であって、工程： 発酵ブロスまたはプロセス流れを、 （ａ）非イオン性界面活性剤、または （ｂ）カチオン性界面活性剤、 から選択される、適当な量の界面活性剤と接触させ、前
記界面活性剤は水と混和性であるか、あるいは水中に分
散性でありかつ前記抗生物質を溶解することができ、こ
の混合物の物理化学的条件を変更することによって前記
混合物の２相への分離を誘発させ、消耗したブロスを含
有する相を界面活性剤の相から分離し、そして前記抗生
物質がその中に不溶性である有機溶媒の添加により、前
記抗生物質を界面活性剤の相から回収する、からなる方
法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP89120577 | 1989-11-07 | ||
| EP89120577.5 | 1989-11-07 | ||
| EP89123994 | 1989-12-27 | ||
| EP89123994.9 | 1989-12-27 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03187393A true JPH03187393A (ja) | 1991-08-15 |
| JP3107564B2 JP3107564B2 (ja) | 2000-11-13 |
Family
ID=26120727
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP02300035A Expired - Fee Related JP3107564B2 (ja) | 1989-11-07 | 1990-11-07 | 抗生物質ａ／１６６８６の回収方法 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5539087A (ja) |
| EP (1) | EP0427142B1 (ja) |
| JP (1) | JP3107564B2 (ja) |
| KR (1) | KR910009935A (ja) |
| AT (1) | ATE122685T1 (ja) |
| CA (1) | CA2029408C (ja) |
| DE (1) | DE69019464T2 (ja) |
| ES (1) | ES2072348T3 (ja) |
| IE (1) | IE903999A1 (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8621911D0 (en) * | 1986-09-11 | 1986-10-15 | Lepetit Spa | Increasing ratio of components of anti-biotic complex |
| US5679254A (en) * | 1995-11-20 | 1997-10-21 | Chakrabarti; Debtosh | Desalination of seawater by nonionic surfactant aided phase separation |
| DK0912604T3 (da) | 1996-04-23 | 2002-03-25 | Biosearch Italia Spa | Forbedret kemisk fremgangsmåde til fremstilling af amidderivater af A 40926 antibiotikum |
| US7078185B2 (en) | 2000-10-13 | 2006-07-18 | Ecopia Biosciences Inc. | Gene encoding a nonribosomal peptide synthetase for the production of ramoplanin |
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