JPH03224481A - ワサビから分離された新規ラブドウイルス(Rhabdovirus) - Google Patents

ワサビから分離された新規ラブドウイルス(Rhabdovirus)

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JPH03224481A
JPH03224481A JP1720190A JP1720190A JPH03224481A JP H03224481 A JPH03224481 A JP H03224481A JP 1720190 A JP1720190 A JP 1720190A JP 1720190 A JP1720190 A JP 1720190A JP H03224481 A JPH03224481 A JP H03224481A
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日出男 岸良
Hiroko Nishida
浩子 西田
Toru Shimomura
徹 下村
Kanichirou Shiyouhara
匠原 監一郎
Shuichi Yamashita
修一 山下
Tsuneo Tsuchisaki
土崎 常男
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野] 本発明は、退化現象の現れたワサビから分離されたラブ
ドウィルス(PIlanL rhabdovirus)
に属する新規ウィルス及びその変異株に関する。
本発明のウィルスは、退化現象の原因となるこれらのウ
ィルスにワサビが感染しているか否かを検定するための
抗体作製用の抗原として利用することができる。さらに
、これらのワサビウィルス病を予防乃至治療するための
検体として利用することもできる。
〔従来の技術] ワサビ(Wasabia japonica)の多くの
品種は実生で増殖されているが、「真妻」等の優良品種
は株分けで増殖されている。しかし株分けを繰り返すこ
とによって根茎の肥大が悪くなり、子株もほとんど採れ
なくなるという、いわゆる退化現象が現われるので、優
良株分は品種は絶滅の危機に瀕している。この退化現象
の主な原因となっているのがウィルス感染によるウィル
ス病と考えられている。[鈴木春夫ら、静岡屡試研法η
2,55〜66(1976) ]ワサビから分離されて
いるウィルスはT?1V−W (ワサビ系タバコモザイ
クウィルス) CMV(キュウリモザイクウィルス)及
びTuMV (カブモザイクウィルス)の3種が報告さ
れている〔上掲誌、小室康雄ら、植物防疫酋、486〜
488(1966) 、栃原比呂志ら、関東東山病虫研
報11,46(1964) )。現在のところ、植物に
感染しているウィルスを殺滅し、ウイルス病を治療する
農薬はまだ見出されていない。
ウィルスに感染した植物からウィルスを除去するいわゆ
るウィルスフリー化のためのほとんど唯一の方法として
組織培養技術を利用した茎頂生長点培養法がラン、ユリ
、カーネーション等の花卉、ブドウ、リンゴ、ミカン等
の果樹、イチゴ、ヤマノイモ等の野菜、センキョウ、ジ
オウ等の薬用植物において実用化されている。ワサビに
おいても茎頂生長点培養法が適用され、ノリクロン法や
苗条原基法により実用化が進められている。
しかし茎頂生長点培養法により作出した苗が全てウィル
スフリーになるわけではなく、茎頂生長点培養法により
作出した苗のウィルス検定は必須である。ウィルス検定
法には、生物検定法、電子顕微鏡法及び抗血清試験法が
あり、対照とする植物とウィルスの種類により、これら
の方法を組合せて検定することが必要である。ワサビに
おいては前述のごとく3種類のウィルスすなわちTMV
−WCMV及びTuMVにのみ感染していることが知ら
れていたため、茎頂培養法により作出した培養菌がウィ
ルスフリーか否かの検定は当然これら3種類のウィルス
のみを対照として行なわれてきた。しかし、検定の結果
、ウィルスフリーと判断されても実際にはウィルスに感
染されていることが見出されている。
〔発明が解決しようとする課題〕
本発明は、ワサビのウィルス検定を確実なものとし、完
全にウィルスフリーなワサビを得ることを目的としてワ
サビに感染する新規なウィルスを検索し、これを獲得し
ようとするものである。そして得られたウィルスは、ワ
サビウィルス検定を行うための抗体作製用の抗原として
、またこれらのウィルス病の予防ないし治療のための検
体として利用しようとするものである。
〔課題を解決するための手段〕
本発明者らは、ワサビの新規ウィルスを取得することを
目的として静岡県湯ケ島町のワサビ田から得られたワサ
ビ(品種:真妻)について新規ウィルスの検索を行った
。その結果、棒状ウィルス、ひも状ウィルス及び桿菌状
〜弾丸状ウィルスの3種のウィルスが検出された。この
うち棒状ウィルスは、300rvX18rvの大きさで
TMV−の抗血清とよく反応したので、公知のtaba
co mosaic virusのワサビ系と同定した
。そして、ひも状ウィルス及び桿菌状〜弾丸状ウィルス
については後述するような検定の結果、文献未載の新種
のウィルスであることが確認され、本発明をなすに至っ
た。
本発明は、上記2種のウィルスのうち桿菌状〜弾丸状ウ
ィルスであるラブドウィルス(Pj!ant rhab
dovirus)に属する新規ウィルスに関する。
また、本発明のラブドウィルスは35〜37℃で5〜1
5日程度さらす高温処理、亜硝酸、ヒドロキシアミンで
処理する化学処理及びInν1tro nutagen
esis−reverse genetics法等によ
る遺伝子操作等で変異させることができるがこのような
変異株も本発明は包含する。
本発明のウィルスについて採取法及び形態等を示すと次
のとおりである。
a) ウィルスの採取及び検出 静岡県湯ケ島町のワサビ田から得られたワサビ(品種:
「真妻」)を10asX1m程度に細切し、さらにそれ
を切りきざんだ、スライドグラス上に0、1 so I
l/12リン酸緩衝液を一滴たらし、その中に上記切り
きざんだワサビを入れ、汁液をしみ出させた。
次いで、コロジオン支持膜を張り、カーボン補強した銅
製グリッドの膜面をこのワサビ汁液に接触させ、速やか
に余分の液を濾紙で吸いとり膜面を上にして風乾させた
。スライドグラス上に0.1tool/lリン酸緩衝液
に1%グルタルアルデヒドを溶かした固定液を数滴たら
し、その液面に風乾させたグリッドの試料面を下にして
3〜5分間浮かべ、固定させた。固定させた試料の乗っ
たグリッドを脱イオン蒸留水で3回洗浄した後、染色液
(2%リンタングステン酸水溶液、ドライウェル0.5
%添加pH7,0)で30秒間染色し、濾紙で余分の染
色液を吸いとり、膜面を上にして風乾させて検出のため
の試料とした。
b) ウィルスの形態の観察 この様にして作成した試料を透過型電子顕微鏡で検鏡し
、ウィルスの形態を観察した。
その結果、棒状ウィルス、ひも状ウィルス及び桿菌状〜
弾丸状の3種のウィルスが検出された。
棒状ウィルスは300nm X 18n閣の大きさで、
TMV−Hの抗血清とよく反応したことから既知のTM
V−と同定した。ワサビに感染していることが報告され
ているひも状ウィルスとしてはTuMVがあるが、Tu
MVの大きさが750nm X llnmであるのに対
し検出されたひも状ウィルスの大きさは650〜700
nm X 13jllllと大きく異なり、また、Tu
MVに感染した植物に特異的に見出される風車状封入体
は見出されなかった。さらに、TuMVの抗血清と全く
反応しなかった。以上のことからひも状ウィルスはTu
MVとは異なるカルラウィルス(Carlavirus
)に属するウィルスであると判断した。一方、本発明の
埠菌状〜弾丸状のウィルスは約230〜250nI11
×85〜9onIllで内部に約4.5nmのら旋構造
のヌクレオキャプシドと外部に被膜を有することから、
このウィルスはラブドウィルス(P l ant rh
abdovirus)に属するウィルスであると判断し
た。
C) 超薄切片法によるウィルスの細胞内所見グルタル
アルデヒドとオスミウム酸による二重固定法により固定
したワサビ試料をエポキシ樹脂に包埋・固化後、超薄切
片を作成した。この超薄切片を銅製グリッドにのせ酢酸
ウランとクエン酸鉛による二重染色法で染色した。この
様に作成した試料を透過型電子顕微鏡で検鏡し、ウィル
スの細胞内存在様式及びウィルス感染細胞の変化につい
て観察した。
本発明のラブドウィルス(P j! ant rhab
dovirus)に属する桿菌状〜弾丸状ウィルスは、
核、核膜間隙及び細胞質に見出された。核内にはウィル
ス粒子と共に被膜をかぶっていないヌクレオキャプシド
が認められた。以上の所見から、このウィルスは核内増
殖型のウィルスであることがわかった。
d)寄生範囲 本発明のラブドウィルス(P l ant rhabd
ovirus)が他の植物に感染するかどうかについて
アブラナ科植物を中心に6科29種の植物について接種
試験を行った。
すなわち、ラブドウィルス(P 1 ant rhab
dovirus)カルラウィルス(Carlaviru
s)及びTMV−に混合感染している親ワサビ[真妻」
 (品種名)を接種源としてアブラナ科植物を中心に6
科29種の植物に汁液接種した。その結果を第1表及び
第2表に示す。いずれの植物に対してもラブドウィルス
(P R−ant rhabdovirus)もカルラ
ウィルス(Carlavirus)も感染を認められな
かった。ラブドウィルス(PR−ant rhabdo
virus)がアブラナ科植物に感染することはヨーロ
ッパで、ブロッコリーネタロティツクイエロウスウィル
スとブラジルで、ラファナスSP、からの2種が報告さ
れているだけであり、本発明のラブドウィルス(P e
 ant rhabdovirus)は、第1表に示し
た通り、 ブロッコリーにもラフアナ ス (ダイコン)にも感染せず、 このことから零つ ィルスは新種のウィルスであることが明らかとなった。
Rhabdovirusす Carlavirus TMV ひかり νar匹囮江■1吐 クリスマススノー Rhabdovirus”Carlavirus  T
MVタバコ(Xanthi nc) + (Sunsun) + N1cotiana ■し±細息影し + トマト (福寿2号) + 乃ヱ挫土h floridana + センニチコウ ± キュウリ(画集) Cheno odiua+  amaranticol
orC,脛止坦 ササゲ(十人ササゲ) (ブラックアイカラピー) インゲン(topcrop) (大手亡) ソラマメ(−寸) エントウ(ウスイ) (Wisconsin Perfection)(Pe
rfected Wales) + + + e)新種ウィルスの現地発生調査 ワサビ栽培現地のウィルス発生調査を行なった。すなわ
ち、ワサビ5品種31検体についてDN法で検定を行な
ったところ、ラブドウィルス(Pfant rh−ab
dovirus)は「真妻」のみから検出され、退化現
象による収量低下が問題となっているこのワサビ品種に
とって、このウィルスは重要な影響を与えるウィルスで
あることが明らかとなった。
〔発明の効果〕
本発明は、退化現象の現れたワサビから分離されたラブ
ドウィルス(P l1ant rhabdovirus
)に属する新種のウィルスを提供するものである。本発
明の新種ウィルスは、栽培中のワサビがこのウィルスに
感染しているか否かの検定あるいは、組織培養により作
出した培養体がウィルスフリーになっているか否かの検
定のための抗体作製用抗原として利用することができる
。また、このウィルスに感染したワサビの治療乃至感染
予防のための研究の検体として利用することもできる。
その結果、ワサビの退化現象を予防し、ワサビの品質を
向上することができる。
【図面の簡単な説明】
第1図は、本発明の微生物ラブドウィルス(PR−an
t rhabdovirus)の形態を示す電子顕微鏡
写真である。(倍率220,000倍)

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)ワサビから分離され、ダイレクトネガティヴ法(
    DN法)で約230〜250×85〜90nmの桿菌状
    〜弾丸状形態を示し、内部にら旋構造のヌクレオキャプ
    シドと外部に被膜とを有するラブドウイルス(Rhab
    dovirus)に属するウィルスまたはその変異株
JP1720190A 1990-01-26 1990-01-26 ワサビから分離された新規ラブドウイルス(Rhabdovirus) Expired - Lifetime JPH0636735B2 (ja)

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Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9668926B2 (en) 2011-06-10 2017-06-06 The Procter & Gamble Company Method and apparatus for making absorbent structures with absorbent material
US9713556B2 (en) 2012-12-10 2017-07-25 The Procter & Gamble Company Absorbent core with high superabsorbent material content
US9713557B2 (en) 2012-12-10 2017-07-25 The Procter & Gamble Company Absorbent article with high absorbent material content
US9789009B2 (en) 2013-12-19 2017-10-17 The Procter & Gamble Company Absorbent articles having channel-forming areas and wetness indicator
US9789011B2 (en) 2013-08-27 2017-10-17 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US9974699B2 (en) 2011-06-10 2018-05-22 The Procter & Gamble Company Absorbent core for disposable absorbent articles
US9987176B2 (en) 2013-08-27 2018-06-05 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US10004647B2 (en) 2009-12-02 2018-06-26 The Procter & Gamble Company Apparatus and method for transferring particulate material
US10022280B2 (en) 2012-12-10 2018-07-17 The Procter & Gamble Company Absorbent article with high absorbent material content
US10245188B2 (en) 2011-06-10 2019-04-02 The Procter & Gamble Company Method and apparatus for making absorbent structures with absorbent material
US10292875B2 (en) 2013-09-16 2019-05-21 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels and signals
US10322040B2 (en) 2015-03-16 2019-06-18 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with improved cores
US10639215B2 (en) 2012-12-10 2020-05-05 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels and/or pockets
US10736795B2 (en) 2015-05-12 2020-08-11 The Procter & Gamble Company Absorbent article with improved core-to-backsheet adhesive
US11911250B2 (en) 2011-06-10 2024-02-27 The Procter & Gamble Company Absorbent structure for absorbent articles
US11944526B2 (en) 2013-09-19 2024-04-02 The Procter & Gamble Company Absorbent cores having material free areas
US11957551B2 (en) 2013-09-16 2024-04-16 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels and signals

Cited By (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10004647B2 (en) 2009-12-02 2018-06-26 The Procter & Gamble Company Apparatus and method for transferring particulate material
US10245188B2 (en) 2011-06-10 2019-04-02 The Procter & Gamble Company Method and apparatus for making absorbent structures with absorbent material
US11911250B2 (en) 2011-06-10 2024-02-27 The Procter & Gamble Company Absorbent structure for absorbent articles
US9668926B2 (en) 2011-06-10 2017-06-06 The Procter & Gamble Company Method and apparatus for making absorbent structures with absorbent material
US9974699B2 (en) 2011-06-10 2018-05-22 The Procter & Gamble Company Absorbent core for disposable absorbent articles
US9713556B2 (en) 2012-12-10 2017-07-25 The Procter & Gamble Company Absorbent core with high superabsorbent material content
US9713557B2 (en) 2012-12-10 2017-07-25 The Procter & Gamble Company Absorbent article with high absorbent material content
US10639215B2 (en) 2012-12-10 2020-05-05 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels and/or pockets
US10022280B2 (en) 2012-12-10 2018-07-17 The Procter & Gamble Company Absorbent article with high absorbent material content
US10765567B2 (en) 2013-08-27 2020-09-08 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US9987176B2 (en) 2013-08-27 2018-06-05 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US10736794B2 (en) 2013-08-27 2020-08-11 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US9789011B2 (en) 2013-08-27 2017-10-17 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US11612523B2 (en) 2013-08-27 2023-03-28 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US11759376B2 (en) 2013-08-27 2023-09-19 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels
US10292875B2 (en) 2013-09-16 2019-05-21 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels and signals
US11957551B2 (en) 2013-09-16 2024-04-16 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with channels and signals
US11944526B2 (en) 2013-09-19 2024-04-02 The Procter & Gamble Company Absorbent cores having material free areas
US11191679B2 (en) 2013-12-19 2021-12-07 The Procter & Gamble Company Absorbent articles having channel-forming areas and wetness indicator
US9789009B2 (en) 2013-12-19 2017-10-17 The Procter & Gamble Company Absorbent articles having channel-forming areas and wetness indicator
US10322040B2 (en) 2015-03-16 2019-06-18 The Procter & Gamble Company Absorbent articles with improved cores
US10736795B2 (en) 2015-05-12 2020-08-11 The Procter & Gamble Company Absorbent article with improved core-to-backsheet adhesive

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