JPH03279331A - ギンクゴ・ビロバ葉からの抽出物、その製造方法及び抽出物を含有する薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

［０００１］

【産業上の利用分野】

本発明はギンゴ・ビロバ（Ｇｉｎｋｇｏ　　ｂｉｌｏｂ
ａ）葉からの改良された抽出物、抽出物の製造方法及び
抽出物を含有する薬剤に関する。 ［０００２］

【従来の技術】

ギンゴ・ビロバの葉から得られる抽出物は、長い間末梢
および脳動脈血循環障害の治療に使用されてきた。有効
成分としてフラボン配糖体を非常に豊富に含むギンゴ・
ビロバ抽出物の製造方法は公知である。ＤＥ−Ｂ１７６
７０９８およびＤＥ−Ｂ２１１７４２９参照。また、こ
れらの抽出物は、ギンゴ・ビロバ・モノ抽出物とも呼ば
れる。 ［０００３］ ＥＰ−ＡＯ３２４１９７には、葉の抽出後に得られた低
級アルコールまたはケトンの水溶液を微粒の珪藻土の存
在下で濃縮する、ギンゴ・ビロバの葉の抽出物の製造方
法が記載されている。生成した水性懸濁液を微粒の珪藻
土によりろ過しろ液をブタノンで抽出し、抽出物から溶
媒を除く。 ［０００４］ ＥＰ−Ａ３３０５６７は、粉砕した葉を水性ケトン化合
物により抽出する、ギンゴ・ビロバの葉の抽出物の製造
方法に関するものである。ビフラボンおよび疎水性化合
物が沈澱するまでこの抽出物を濃縮する。ろ通抜、水性
濃縮物をアルカリ性にすることにより、プロアントシア
ニジンが沈澱する。 ［０００５］ 沈澱物を分離し、ろ液を酸性化した後、硫酸アンモニウ
ムの存在下Ｃ４−６ケトン化合物により液体−液体−抽
出を行う。ケトン化合物を除去した後、抽出物が得られ
る。 ［０００６］ ＤＥ−Ａ３５１４０５４は、ラクトン構造を有するテル
ペノイド物質であるギンゴ・ビロバ葉の既知成分、ギン
ゴリド（中面、「ピュア・アンド・アプライド。 ケミストリーＪ　（Ｐｕｒｅ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ
　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第１４巻（１９６７）、８９
−１１３、および先山等、「テトラヘドロン・レターズ
Ｊ　（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ６ｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ）　（
１９６７）、２９９−３０２および３０３−３１９、お
よび間部等、［ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエテ
ィーＪ（Ｊ　、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、）（１９６７）
、２２０１−２２０６参照）が、ＰＡＦ（血小板活性化
因子）により誘発される疾患および類似症状の処置に使
用され得ることを開示している。 ［０００７］ ギンゴ・ビロバ葉に含まれるその先の物質、ビロバリド
の用途は、ＤＥ−Ａ３３　３８　９９５及び対応するＵ
Ｓ−Ａ　　４　５７１　４０７がら脱髄神経病、脳疾患
及び脳浮腫の処置に関して知られている。ビロバリドは
構造的にギンゴリドに関連するセスキテルペンラクトン
である（ケイ、ナカニシ等、アール、ティー、マイヤー
等及びケイ、ウニインダス等、ジャーナル・オブ・アメ
リカン・ケミカル・ソサイティＪ　　（Ｊ、Ａｍ、Ｃｈ
ｅｍ、Ｓｏｃ、）９３巻（１９７１）、３５４４−３５
４６参照）。 ［０００８］ 上記化合物に加えて、ギンゴ・ビロバの葉はまた、いわ
ゆるギンゴール酸（アナカルド酸）を含む。これらの化
合物は、０〜３個の二重結合を有するｎ　　Ｃ１３−〜
ｎ　　Ｃ１９−アルキル基を含む６−アルキルサリチル
酸である。ゲラ−マン等、「フィトケミストリーＪ　（
Ｐ　ｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第１５巻（１９７
６）、１９５９−１９６１頁および「アナリティカル・
ケミストリーｊ　（Ａｎａｌｙｔｉｃ、　Ｃｈｅｍ、　
）、第４０巻く１９６８）、７３９−７４３頁参照。 ［０００９］ 「ギンゴール」、すなわち対応するアルキル基により置
換されたフェノールは、ギンゴール酸の脱カルボキシル
化により生合成的に、またはギンゴ・ビロバ葉の精製処
理中に得られる。汚材、日本、「ジャーナル・オブ・ケ
ミストリー」（Ｊ。 Ｃｈｅｍ、）、第３巻（１９２８）、９１−９３頁参照
。 ［００１０３ ギンゴ・ビロバにおけるギンゴール酸およびギンゴール
は、４位に別のフェノール性ヒドロキシル基を有する対
応する誘導体、６−アルキルレゾルシン酸または５−ア
ルキルレゾルシンに随伴する。ゲラ−マン等、「フィト
ケミストリー」（Ｐ　ｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、
第１５巻（１９７６）、１９５９−１９６１頁参照。こ
れらのレゾルシン誘導体は、トキシコデンドロン植物が
誘発する毒性作用並びに特に強いアレルギーおよび接触
性皮膚炎に関与する。ヒル等、「ジャーナル・オブ・ア
メリカン・ケミカル・ソサエティＪ（Ｊ、　Ａｍ、　Ｃ
ｈｅｍ、　Ｓｏｃ、）、第５６巻（１９３４）、２７３
６−２７３８頁参照。 ［００１１］ ギンゴ・ビロバの果実との接触後に生じる強いアレルギ
ー反応の症例は周知である。ソウアーズ等、［アーカイ
ブス・オブ・ダーマトロジーＪ（Ａｒｃｈ、　Ｄｅｒｍ
ａｔ。 １、）、第９１巻（１９６５）、４５２−４５６頁およ
び中村、「コンタクト・ダーマテイテイスＪ（Ｃｏｎｔ
ａｃｔ　Ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）、第１２巻（１９８５
）、２８１−２８２頁参照。ギンゴ・ビロバの果実を食
べた後の重い粘膜障害が記載されている。ベラカーおよ
びスキップワース、「ジャーナル・オブ・アメリカン・
メディカル・アソシエーションＪ（Ｊ、　Ａｍ、　Ｍｅ
ｄ、　Ａｓ５ｏｃ、）、第２３１巻（１９７５）、１１
６２−１１６３頁参照。また、ギンゴ・ビロバの葉を集
めたり手を触れたときにアレルギー性皮膚反応が生じる
ことも多い。 ［００１２］ ウルシ科（ａｎａｃａｒｄｉａｃｅａｅ）およびギンゴ
°ビロバ科（ｇｉｎｋｇｏａｃｅａｅ）由来のアルキル
フェノール化合物により誘発されるアレルギーの重要性
は、アルキルフェノール化合物により誘発されるアレル
ギーに対する特許文献に記載された（ＵＳ−Ａ４４２８
９６５参照）脱感作の物質および方法の開発により明白
である。 ［００１３］ ギンゴ・ビロバ葉から得られた市販の抽出物は、５０な
いし１１００００ｐｐのギンゴール酸を含有する。 ［００１４］ ＤＥ−Ｂ１７６７０９８およびＤＥ−Ｂ２１１７４２９
における公知方法により製造されたギンゴ・ビロバ葉か
らの抽出物は、抽出物の親油性成分が、実質的に水非混
和性の親油性溶媒、例えば含塩素脂肪族低級炭化水素、
例えば四塩化炭素による水性アセトン抽出物の液体−液
体−抽出により除去されるため、アルキルフェノール化
合物を実質的に含まない。しかしながら、この段階で、
治療上貴重なギンゴリドおよびビロバリドはまた、かな
り低減化されるため、ＤＥ−Ｂ２１１７４２９の実施例
１における最終生成物中のそれらの含有率は、ギンゴリ
ドＡ、Ｂ、ＣおよびＪの場合全部で最大０．５％および
ビロバリドの場合的０．３％である。しかしながら、フ
ラボン配糖体の量は、この段階中にかなりの程度まです
なわち粗抽出物中３〜４％から最終生成物巾約２４％ま
で増加する。 ［００１５］ それゆえ、本発明の目的は、実質的にアルキルフェノー
ル化合物を含まず、高含量のフラボン配糖体を有し、用
いられた葉中に存在する実質的に全てのギンゴリドとビ
ロバリドを含むギンゴ・ビロバ葉の抽出物を提供するこ
とである。 ［００１６］ 本発明のその上の目的は、実質的にアルキルフェノール
化合物を含まず、高含量のフラボン配糖体、ギンゴリド
及びビロバリドを有するギンゴ・ビロバ基の抽出物の製
造方法を提供することである。本発明の方法は、ＤＥ−
Ｂ１７６７０９８及びＤＥ−Ｂ２１　１７　４２９の既
知方法と異なり、クロル化脂肪族炭化水素を使用するこ
となくアルキルフェノール化合物を除去することに成功
したものである。技術方法でクロル化炭化水素を用いる
ことは、職業医療での危険、これら化合物の環境に対す
る潜在的危険並びに薬剤中への望ましくない残留の可能
性の故に非常に問題がある。 ［００１７］ 最後に本発明の目的は、高含量のフラボン配糖体、ギン
ゴリド及びビロバリドを有し、正にアルキルフェノール
化合物が除去されていることがら、実質的にアレルギー
反応の危険がない本ギンゴ・ビロバ抽出物を含む薬剤を
提供することである。 ［００１８］ それゆえ本発明は、実質的にアルキルフェノール化合物
が含まれず、高フラボン配糖体含量を有し、且つ集中に
元から存在するギンゴリドとビロバリドのほとんどを含
有するギンゴ・ビロバ葉の抽出物に関する。好ましくは
本発明における抽出物は、 ２０−３０重量％、特に２２−２６重量％のフラボン配
糖体２．５−４．５重量％のギンゴリドＡ、Ｂ、Ｃ及び
Ｊ（全針）２．０−４．０重量％のビロバリド １０ｐｐｍ未満、特に１　ｐｐｍ未満のアルキルフェノ
ール化合物及び１０重重量未満のプロアントシアニジン
を含む。 ［００１９］ さらに本発明は、請求項３−５に記載されるステップを
含む、ギンゴ・ビロバ葉から本ギンゴ・ビロバ抽出物の
製造方法に関する。ＤＥ−Ｂ１７　６７　０９８に記載
される親油性成分の分離方法とは異なり、水性アルコー
ル又は水性アセトン粗抽出物はクロル化脂肪族炭化水素
による液−液抽出に直接さらされないでむしろほとんど
の親油性成分は、有機溶媒成分の蒸留及び最大含量１０
重量％好ましくは５重量％までの水による希釈で沈澱し
、濾過により分別される。アルキルフェノール化合物、
クロロフィル、脂肪酸誘導体及びビフラボンは、それら
が水に低溶解性であることから沈澱し、濾過により分別
できる。これらの条件下で、ギンゴ・ビロバ抽出物の要
望される成分は依然として溶解している。アルキルフェ
ノール化合物は続く除去段階で１０ｐｐｍ未満の含量に
までさらに減少する。 ［００２０１ ＤＥ−Ｂ１７　６７　０９８の実施例５に従って、メチ
ルエチルケトン／アセトンによる水性溶液の抽出で得ら
れる抽出物は、蒸留により溶媒が除かれる。残渣を２０
ないし６０％の水性エタノールに溶解して固体含量５−
２０％、好ましくは約１０％とし、この溶液にＤＥ−Ｂ
２１　１７　４２９の実施例１及び２のように、鉛塩の
水性溶液を加える。鉛沈澱を分離後、得られる水性エタ
ノール溶液を、直接又は水で好ましくは３０％のエタノ
ール含量に希釈後、脂肪族又は環状脂肪族炭化水素（は
ぼ６０ないし１００℃の沸点）により多段式液−液抽出
に付すことができる。実施例３（ＤＥ−Ｂ２１　１７　
４２９）に従って得られる沈澱は、直接又はエタノール
含量的３０％に調整後、同様に用いることができる。 ［００２１］ 薬理学的実験モデルで、本発明により製造された抽出物
は、ラジカルスカベンジャー作用ならびに血液環境を促
進し、虚血障害を防止し、又、血小板凝集を抑制する性
質を有する。 ［００２２］ さらに、本発明は、請求項６による、ギンゴ・ビロバ抽
出物の含量により特徴づけられる薬剤に関する。 ［００２３］ 本発明のギンゴ・ビロバ抽出物は、薬剤の調製にとって
普通の方法で、例えば液剤、被覆錠、錠剤又は注射製剤
にすることができる。本発明における薬剤は、抹消又は
脳動脈血流障害の処置に用いられる。実施例により本発
明を示す。部及びパーセントのデータは、特に説明しな
い限り重量による。 ［００２４］ 実施例１ １００ｋｇの乾燥ギンゴ・ビロバ葉を粉砕機で４ｍｍ未
満の粒径に粉砕する。７５０ｋｇの６０重量％　水性ア
セトンを添加後、混合物で５７−５９℃の温度で３０分
間激しく撹拌する。固形残渣を濾過又は遠心分離で分別
し、同一条件で２回目の抽出を行なう。第一と第二の抽
出からの抽出物を混合する。ギンゴール酸含量（乾燥抽
出物を基準として）は、はぼ１３．０００ｐｐｍに等し
い。抽出物を減圧下に濃縮して固形含量３０−４０％と
最大約５重量％アセトンとする。水を加える濃縮物を２
倍容量に希釈し、撹拌しながら約１２℃まで冷却する。 ギンゴール酸、即ち、集中に存在するアルキルフェノー
ル化合物のほとんどを含む沈澱が形成する。この温度で
１時間保った後、生じる沈澱を遠心分離除去により分離
する。 ［００２５］ 得られる水性上溝中のギンゴール酸含量（乾燥抽出物を
基準として）は、はぼ３２０ｐｐｍに等しい。 ［００２６］ ３０部の硫酸アンモニウムを１００部の水性溶液に加え
る。混合物を撹拌する。硫酸アンモニウム溶解後、メチ
ルエチルケトンとアセトンが６：４ないし１：１の比の
混合物を用い、液−液抽出を２回行ない、これにより加
えた有機溶媒は水性溶液の半分の容量に等しく、そして
激しく撹拌とポンピングを行なったのち、混合工程の完
了時に形成される有機上相を除去する。 ［００２７］ 次いでメチルエチルケトン溶液を減圧下に濃縮して固形
含量５０−７０％とする。この濃縮物を水と９５重量％
エタノールで希釈して５０重量％の水性エタノール中、
１０重量％乾燥抽出物の溶液を得る。この溶液に、激し
く撹拌しながら水酸化酢酸鉛（ｌｅａｄ　　ｈｙｄｒｏ
ｘｉｄｅ　　ａｃｅｔａｔｅ）の水性溶液を少量加えて
、色が褐色から黄褐色［緑の色合を伴った褐色（ｂｒｏ
ｗｎ　　ｗｉｔｈ　　ａ　　ｇｒｅｅｎ　　ｃａｓｔ）
］に変わる。形成する鉛−タンニン沈澱を遠心分離によ
り分離する。 ［００２８］ 鉛−タンニン沈澱からの上清を、アルキルフェノール化
合物をさらに除去するために、ｎ−ヘキサンで液−液抽
出する。この段階で、アルコール−水性濾液は少なくと
も３回、室温で、各回ｎ−ヘキサンの１７３の容量で、
撹拌する。 ［００２９］ 次いで水性−アルコール抽出溶液を、減圧下にアルコー
ル含量はぼ５％以下まで濃縮する。１００部の本溶液に
２０部の硫酸アンモニウムを溶解し、次いでメチルエチ
ルケトンとエタノールの、容量比６：４の混合物で液−
液抽出を行ないこの有機溶媒混合物による抽出は２回、
各回、水性溶液の半分の容量で実施する。有機相を分離
し、それの２０重量％の硫酸アンモニウムと共に撹拌す
る。水の可能相（ｐｏｓｓｉｂｌｅ　　ｐｈａｓｅ）と
未溶解の硫酸アンモニウムを分離する。 ［００３０１ 澄明な抽出溶液を濃縮して固形含量５０−７０重量％と
する。この濃縮物を、減圧下、最大生成物温度的６０−
８０℃で乾燥し、水分含量５％以下の乾燥抽出物とする
。 ［００３１］ １００ｋｇのギンゴ・ビロバ葉から、２．５ｋｇの、約
２４重量％のフラボン配糖体、約３．６重量％のギンゴ
リド、約２．９重量％のビロバリド、約６．５重量％の
プロアントシアニジン及び１　ｐｐｍ未満のアルキルフ
ェノール化合物を含むギンゴ・ビロバ抽出物が得られる
。 ［００３２］ 実施例２ 経口投与用溶剤： １００ｍ１溶液は以下を含有する。 ギンゴ・ビロバ抽出物　　　　４．０ｇエタノール　　
　　　　　　５０．０ｇ無機物を除いた水を加えて１０
０．０ｍｌとする。 ［００３３］ 実施例３ 被覆錠 １錠は以下を含有する。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ギンゴ・ビロバ葉中に元から存在するギン
   ゴリドとビロバリドのほとんどを含有することを特徴と
   する、実質的にアルキルフェノール化合物が含まれず、
   高含量のフラボン配糖体を有するギンゴ・ビロバ葉の抽
   出物。
2. 【請求項２】 ２０−３０重量％、特に２２−２６重量％のフラボン配
   糖体、２．５−４．５重量％のギンゴリドＡ、Ｂ、Ｃ及
   びＪ（合計）、２．０−４．０重量％のビロバリド、 １０ｐｐｍ未満、特に１ｐｐｍ未満のアルキルフェノー
   ル化合物及び１０重量％未満のプロアントシアニジン を含有する、請求項１の抽出物。
3. 【請求項３】実質的にアルキルフェノール化合物が含ま
   れず、高含量のフラボン配糖体と葉中に元から存在する
   ギンゴリドとビロバリドのほとんどに相当するこれらの
   成分の含量を有する、ギンゴ・ビロバ葉の抽出物の製造
   法であって、その方法は、水性アセトン、水性１−３Ｃ
   原子のアルカノール又は無水メタノールによる抽出、親
   油性物質の除去ステップ、少くとも１回の硫酸アンモニ
   ウムによる処理及びメチルエチルケトン又はメチルエチ
   ルケトンとアセトンの混合物によるそれに続く抽出並び
   に鉛化合物又は不溶性ポリアミドによる処理を含み、且
   つ該方法は、ほとんどの有機溶媒を水性有機溶媒を含む
   葉の抽出物から分別し、残っている水性溶液を固形含量
   ５−２５重量％、好ましくは約１５−２０重量％に希釈
   し、放冷し、そして水によく溶解しない親油性成分が沈
   殿を形成するまで放置し、次いでこの沈殿を分離するこ
   と、並びに続く、鉛化合物による処理で得られる水性ア
   ルコール溶液を、さらにアルキルフェノール化合物を分
   離するために、約６０−１００℃の沸点の脂肪族又は環
   状脂肪族溶媒で抽出することを特徴とする。
4. 【請求項４】 ２０−３０重量％、特に２２−２６重量％のフラボン配
   糖体、２．５−４．５重量％のギンゴリドＡ、Ｂ、Ｃ及
   美Ｊ（合計）、２．０−４．０重量％のビロバリド、 １０ｐｐｍ未満、特に１ｐｐｍ未満のアルキルフェノー
   ル化合物及び１０重量％未満のプロアントシアニジン を含むギンゴ・ビロバ葉の抽出物の製造法であって、以
   下を特徴とする。 （ａ）生又は乾燥、ギンゴ・ビロバ緑葉を約４０−１０
   ０℃の温度で水性アセトン、水性１−３Ｃ原子のアルカ
   ノール又は無水メタノールにより抽出する、（ｂ）有機
   溶媒のほとんどを抽出物から分離して最大含量１０重量
   ％、好ましくは最大５重量％とし、これにより最終の蒸
   留段階水をで添加できるようにする、（ｃ）残留する濃
   縮水性溶液を水で希釈して固形含量５−２５重量％、好
   ましくは１５−２０重量％とし、攪拌しながら２５℃以
   下の温度、好ましくは約１０−１２℃まで放冷し、沈殿
   が形成するまで放置し、水によく溶解しない親油性成分
   からなる生成する沈殿を除去する、 （ｄ）硫酸アンモニウムを残留する水性溶液に加えて３
   ０重量％の含量とし、形成する溶液をメチルエチルケト
   ン又はメチルエチルケトンとアセトンを９：１ないし４
   ：６、好ましくは６：４の割合で含む混合物で抽出する
   、（ｅ）得られる抽出物を濃縮して固形含量５０−７０
   ％とし、得られる濃縮物を水とエタノールで希釈して、
   ５０重量％の水と５０重量％のエタノールを含み固形含
   量１０重量の溶液を得る、 （ｆ）鉛塩、例えば酢酸鉛、水酸化酢酸鉛又は硝酸塩の
   水性溶液あるいは水酸化鉛の水性溶液、好ましくは水酸
   化酢酸鉛の溶液をこうして得られる溶液に、色が褐色が
   黄褐色に変化するまで加え、形成する沈殿を除去する、
   （ｇ）残留する水性−アルコール溶液を、さらにアルキ
   ルフェノール化合物を除去するために、沸点約６０−１
   ００℃の脂肪族又は環状脂肪族溶媒で抽出する、（ｈ）
   残留する水性−アルコール溶液を減圧下、最大エタノー
   ル含量約５％まで濃縮し、硫酸アンモニウムを２０重量
   ％含量まで加える、（ｉ）得られる溶液を、メチルエチ
   ルケトンとエタノールが８：２ないし５：５、好ましく
   は６：４の割合の混合物で抽出する、（ｋ）得られる有
   機相を、固形含量５０−７０重量％まで濃縮する。 （ｌ）得られる濃縮物を、減圧下、６０−８０℃の最大
   温度で乾燥し、水分含量５％以下の乾燥抽出物とする。
5. 【請求項５】ポリアミド、例えばポリアミド−６、ポリ
   アミド−６．６又は架橋ポリビニルピロリドン（ポリビ
   ドン）を段階（ｆ）で鉛塩の代りに使用することを特徴
   とする請求項４の方法。
6. 【請求項６】請求項１又は２の、あるいは請求項３ない
   し５のいずれか一に従って得られるギンゴ・ビロバ抽出
   分により特徴づけられる薬剤。