JPH0347197A - ペプチド、その製造方法及びこれを含有する治療用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＳＤＫペプチド、　その製造方法及びこれを含
有する治療用組成物に関する。

本明細書中で使用されている略号は生化学命名法（Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｎａｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ）につ
いてのＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ合同委員会（Ｊｏｉｎｔ　Ｃ
ｏｍｍ１ｓｓｉｏｎ）により提唱された、アミノ酸ペプ
チドの符号化の際の命名法（Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ
　ｏｎ　Ｓｙｍｂｏｌｉｓｍ　ｆｏｒ　Ａｍ１ｎｏ　Ａ
ｃ１ｄｓＰｅｐｔｉｄｅｓ）についての１９８３年の勧
告（Ｒｅｃｏｏ＋ｍｅｎｄａｔｉｏｎ）（Ｂｕｒ、　Ｊ
、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　１３８．９−３７（１９８４）
参照）に準拠したものである。しかしながら、理解を容
易にするために、これらの略号の幾つかとその意味を以
下に示す。

Ａｓｐ又はＤ　　　　アスパラギン酸 Ｓｅｔ又はＳ　　　　セリン Ｌｙｓ又はに　　　　リシン Ｐｒｏ又はＰ　　　　プロリン Ｔｈｒ又はＴ　　　スレオニン ２　　　　　　　ベンジルオキシカルボニルＢｏｃ　　
　　　　　ｔ−ブトキシカルボニル０Ｂｚｌ　　　　　
　ベンジルオキシ Ａｃ　　　　　　　　アセチル 本明細書中で使用されている他の略号としては下記のも
のが挙げられる； ＤＭＦ　　　　　　　ジメチルホルムアミドＤＣＭ　　
　　　　　ジクロルメタン ＮＭＭ　　　　　　　Ｎ−メチルモルホリンＴＦＡ　　
　　　　　トリフルオル酢酸ＴＬＣ薄層クロマトグラフ
ィー ＦＡＢ　　　　　　　高速原子ボンバード（ｆａｓｔ　
ａｔｏｍ　ｂｏａ＋ｂａｒｄｍｅｎｔ）本発明によれば
、一般式（Ｉ）： Ｈ，Ｎ−１ｌ−３ｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｘ−ＯＲ（１
）Ｈ３Ｎ−Ｗ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ残基又は原子価
結合（ｖａｌｅｎｃｅｂｏｎｄ）を表わし；すはＴｈｒ
又はＰｒｏ残基又は原子価結合を表わす；但し、ＸがＰ
ｒｏ残基を表わすときは、すもＰｒ６残基を表わす）を
有するペプチド提供される。

一般式（Ｉ）中に包含されるペプチドとしては下記のも
のを挙げ得る； Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ　　　　　　　　　　　（ｉ　
）Ｓａｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ　　　　　　　　　
（ｉｉ　）Ｐｒｏ＝Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ　
　　　　　　（ｉｎ　）Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙ
ｓ−Ｌｙｓ　　　　　　　（ｔｖ　）Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−
Ａｓｐ−Ｌｙｓ　　　　　　　　　（Ｖ　）Ｔｈｒ−３
ｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ　　　　　　　　　（ｖｉ　）Ｐ
ｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ　　　　　　　
（ｖｉ）一般式（１）のペプチドの薬学的に許容され得
る塩も本発明に包含される。

トリペプチド（ｉ）（本発明の他のペプチドはこのペプ
チドに基づいている）は今日まで、単離あるいは調製さ
れたことがないものである。しかしながら、これらの配
列のアミノ酸は種々の生体蛋白質中に存在している；　
例えばＳｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓは１９２３球膜蛋白質中
に存在しており、その作用はリンパ球のある種の特定の
レセプターについての位置を占める特定の配列からなる
、ＣＤ、リンパ球及びＴ−レセプターのα−又はｒ−サ
ブユニットのごときリンパ球マーカーの一部であるとき
に発現する。これらのアミノ酸配列はウィルスの蛋白質
のごとき種々の蛋白質中及び補体（ｃｏａ＋ｐｌｅｍｅ
ｎｔ）又は腫瘍壊死図１檎ある種の蛋白質中にも存在し
得る。

従って、特定のアミノ酸配列の活性を研究することは特
に興味のあることである；本発明によれば、これらのア
ミノ酸配列は免疫学的研究の結果から明らかなごどく免
疫変！１ｌ（ｉ＋ａａ＋ｕｎｏ−ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ
）の分野で活性な作用を示すことが認められた。

本発明によれば、更に、通常の反応ルートに従って、下
記の式Ｉ〜■； Ｉ　　Ｂｏａに（Ｚ）−Ｘ−（）−ＯＨＩＩ　Ｂｏｃ　
Ｄ（ＯＢｚｌ）−Ｋ（Ｚ）−Ｘ（）−０）（ｍ　Ｂｏｃ
Ｓ（Ｂｚｌ）−Ｄ（ＯＢｚｌ）−Ｋ（Ｚ）−Ｘ（）−Ｏ
ＨＩＶ　Ｂｏｃ　Ｖ（）−５（Ｂｚｌ）−Ｄ（ＯＢｚｌ
）−Ｋ（Ｚ）−Ｘ（）−ＯＨの化合物を形成させる工程
を連続的に行うこと（但し、上記の式中、 ａ）ＩＪ及びＸがＰｒｏを表わすときは、す又はＸの次
の（）は存在しないものであり；υがＴｈｒを表わすと
きは、Ｖの次の（）内にＢｚｌが含有されており、Ｘが
Ｌｙｓを表わすときは、Ｘの次の（）内にＺが含有され
ているものとする；また。

ｂ）Ｉｉ及び／又はＸが原子価結合を表わすときは、対
応する工程は省略されるものとする）を特徴とする前記
ペプチドの製造方法が提供される。

治療学的に許容され得る塩、例えばアセチル化物を製造
する場合には塩化は最終の脱保護工程の前に行うべきで
ある。

上記の方法で使用される溶剤はプレックス品質（Ｐｕｒ
ｅｘ　ｑｕａｌｉｔｙ）のものである、　ＤＭＦは３及
び４大分子篩上に貯蔵される。

ＴＬＣは市販の分析用プレート上で行われる。プレート
を２５４ｍでｉｌｌ察しかつニンヒドリン溶液をＡ　：
　ＤＣＭ／メタノール（容量比８／２）Ｂ：ｎ−ブタノ
ール／ＡｃＯＨ／水（容量比４／１／１）及びＣ：ｎ−
ブタノール／ＡｃＯＨ／水／ピリジン（容量比１／１／
ｌ／１） 中間生成物は、必要に応じて、シリカラム（シリカ６０
Ａ（４０−６０μ）　５ＤＳ）上で精製し、かつ高速原
子ボンバード（ＦＡＢ）による質量スペクトル（分子ピ
ーク又はＭ）ｌ”）により同定する。

最終生成物は準調整カラム（ｓｅｍｉ−ｐｒｅｐａｒａ
ｔｉｖｅｃｏｌｕｍｎ）（７，２ｍｍ　Ｘ　２５０ｍ）
Ｃ，，００ＳＨｙｐｅｒｓｉｌ　Ｌｏμ５ＦＣＣを使用
してかつ定濃度法（ｉｓｏｃｒａｔｉｃ　ｍｏｄｅ）又
は傾斜溶離（ｇｒａｄｉｅｎｔ）法を使用して、ＨＰＬ
Ｃによす酸加水分解した後、　ＨＰＬＣ装置上で１１０
℃で１２時間行う。

最後に１本発明によれば、活性成分としての十分な量の
前記ペプチドと選択された投与方法に適当な担体とから
なる治療用組成物が提供される。

本発明は以下に述べるＳｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ（ｉ　）
の調製についての説明により、より良好に理解されるで
あろう。

さプｊ」５針釦虐 クロル！ｉｆｉ酸イソブチルを使用する混合無水物法又
はＮ−ヒドロキシスクシンイミドを使用する活性エステ
ル法により、ペプチドを段階的に調製した。

保護アミノ酸は市販品である。

１菌Ｉ Ｂｏａ基はＴＦＡを使用する酸分解により脱離された：
ペプチドをＤＣＭ　／　ＴＦＡの混合物（容量比で１／
１）　（１０〜３０当量）を使用して室温で１〜２時間
処理した。

ＺＢｚｌ又は０Ｂｚｌ基は水素化分解した。ペプチドを
メタノール／水（容量比９／１）混合物中に溶解して１
０％のＰｄ／Ｃの存在下で水素化分解した。

ヱ文±上化 アセチル化はＤＭＦ中で、　トリエチルアミンで中和さ
れたアミンのトリフルオルアセテートにアセチルイミダ
ゾールを作用さることにより行った。

ＢｏｃＤＯＢｚｌにｚｌの ＢｏｃＤ（ＯＢｚｌ）のＮ−ヒドロキシスクシンイミド
のエステル（１モル）を２．５社のＤＭＦに溶解した。

この溶液に懸濁しているＫ（Ｚ）　（１，１当量）を添
加し、水浴中に浸漬しついで撹拌しながら１．１当量の
トリエチルアミンを添加した。２４時間撹拌を行った後
、反応混合物を減圧下で蒸発させた。ついで残渣を酢酸
エチル及び０．５Ｎ　ＨＣＩ溶液で処理した。有機層を
水及び塩化ナトリウムの飽和溶液で順次洗浄し。

硫酸ナトリウム上で乾燥しついで最後に減圧下で蒸発さ
せた。残渣をシリカゲルカラム上でのクロマトグラフィ
ーにかけ、ＤＣＭ　／メタノール（容量比９５１５）混
合物で溶離した。ＴＬＣがらの均質なフラクションを捕
集した：収量：　０．５４０　ｇ。

Ｂｏｃ　Ｓ　Ｂｚｌ　Ｄ　０Ｂｚｌ　Ｋ　Ｚ　２の０．
５ｍＭの上をＴＦＡ　／　ＤＣＭ　（容量比１／１）混
合物１．４２（２０当量）で処理した。室温で６０分後
、溶剤を減圧下で蒸発させた。残渣をＤＣＭで２回処理
しついでＫＯＨの存在下、減圧下で乾燥させた。

Ｂｏａ　５（Ｂｚｌ）のＮ−ヒドロキシスクシンイミド
のエステル（１，２当量）と上記で得られた一トリフル
オロアセテートとを１　、３ｔＱのＤＭＦ中に溶解させ
た。磁気撹拌機で撹拌しながら１当量のトリエチルアミ
ンを添加した。２４時間撹拌を行なった後、反応混合物
を１の場合と同様に処理した。残渣をシリカゲル上での
クロマトグラフィーにかけついで得られた生成物をジエ
チルエーテル／メタノール（容量比８／２）混合物で溶
離した。　ＴＬＣからの均質なフラクションを捕集した
（収量：　０．３１８　ｇ、収率８３％）。

ペンタンと研和した場合、固体（０，２７ｇ　）が得ら
れた。質量分析（ＭＳ）　（ＦＡＢ）ＭＨ”　；理論値
は７６３であり、実測値は７６３及び７６３．１００で
あった（ＭＨ”−Ｂｏａ）。

ＮＡｃ　Ｓ　Ｂｚｌｌ　Ｄ　０Ｂｚｎ　Ｋ　Ｚ　３の前
記で得た生成物１４テトラヒドロフラン中で３、ＩＮＩ
（ＣΩ溶液（２０当量）により脱保護した。溶液を室温
で６．５時間撹拌した後、反応混合物をＫＯＨの存在下
、減圧下で一夜、蒸発させ、乾燥させた。かく得られた
塩酸塩と１．１当量のアセチルイミダゾールとをｌｌＩ
ｎのＤＭＦ中に溶解させた。　この溶液のｐＨをトリエ
チルアミンで７．５とした。混合物を２２時間撹拌しつ
いで反応混合物を蒸発させ、残渣を酢酸エチル及び０．
５ＮＨＣＱ溶液で処理した。有機相を水及びついで飽和
塩化ナトリウム溶液で洗浄しついで硫酸ナトリウム上で
乾燥した。　ＭＳ　：　ＦＡＢＭＨ”；理論値７０５：
実測値７０５゜ＮＡｃ　ＳＤＫ　４の１ ３ｉのメタノールと１＠ｎの水との混合物中に溶解させ
た０、１４０ｇの３　（０，２ミリモル）を１０％Ｐｄ
／Ｃの存在下で２２時間水素化分解した。触媒をセライ
トパッド上で濾別しついで溶剤を減圧下で蒸発させた。

収量：　０．０７９　ｇ　、　ＴＬＣはニンヒドリンに
対して２つのスポットでの感受性を示した。

生成物をＨＰＬＣ（定濃度溶離（ｉｓｏｃｒａｔｉｃ　
ｍｏｄｅ）　；溶離剤、水：　ＴＦＡ　Ｏ，１％；流率
４ｍＵ／分；ｔ＝８分）により精製した。

アミノ酸の分析：　Ｓ　：　０．９（１）　；　Ｄ　：
　１．３（１）　；　Ｋ　：１．３（１）。

ＭＳ　：　ＦＡＢ　ＭＨ”　：理論値３９１；実測値３
９１゜鎧Ｌト久４段 トリペプチド又を最初、ＴＦＡ／ＤＣＭ　（容量比１：
１）混合物で１．５時間処理した；ついで溶剤を減圧下
で蒸発させ、残渣をトルエンで処理した；溶剤を蒸発さ
せた後、残渣を３＠ｎのメタノールと０．３＠ｎの水と
からなる溶液中で、０．０３０　ｇのＰｄ／Ｃの存在下
、室温で２０時間水素化分解した。触媒をセライトパッ
ド上で濾別しついで溶剤を減圧下で蒸発させた。収量：
　０．０９０　ｇ。

ＭＳ　ＭＨ”　：理論値３４９；実測値３４９゜上記で
得た生成物旦をＨＰＬＣにより精製した（定濃度法；溶
離剤、水；　ＴＦＡ　Ｏ，１０％；流率２ｃＱ／分；ｔ
＝６分）。

アミノ酸の分析：　Ｓ　：　１（１）；　Ｄ　：０．８
（１）；Ｋ　：１．３（１）。

本発明の他のペプチドをＳＤＫと同様の方法で調製した
。

本発明のペプチドの免疫学的試験の結果を以下に示す。

ＲＰＭ１１６４０又はＲＢＳ又はハンクス液＋抗生物質
中でヒツジ赤血球細胞（ＲＢＣ）を３回洗浄した。つい
で３０００ｒｐｍで７分間、遠心分離した。

細胞サップ（ｓａｐ）を懸濁させ、その数を数えた。

子牛血清（Ｆｅ２）のＲＰＭＩ中の２０％溶液１ａ＋Ｑ
当りのＲＢＣの濃度を２．１０”とした（最初に、１＠
ｎのＲＢＣサップ上に４ｍｊ２吸着させ、３０分水浴上
に放置しついで３０００ｒｐｎ＋で　７分間遠心分離し
ついで殺菌状態で回収した）。

■−ジャーカート　Ｊｕｒｋａｔ　　Ｔ　　　の培地中
のジャーカットＴ細胞のアリコートを採取した。トリパ
ンブルーで生存率を測定した。

ついで実際の操作に必要な容量の細胞を採取した。　　
ＲＰＭ１１６４０又はＰＢＳ又はハンクス液＋抗生物質
中で３回洗浄しついで９００ｒｐｍで７分間遠心分離し
た。

細胞サップを懸濁させた。吸着されたＦｅ２のＲＰＭＩ
中の２０％φ溶液１ａＭ当りのジャーカットＴ細胞の濃
度を２．１０’とした。

■−二グ孟且立災Ｉ 抑制溶液（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　５ｏｌｕｔｉｏｎ）
＝ＳＤＫ　（２，１０−’モル） 評価すべきペプチドをＲＰＭＩ１６４０中に適当な濃度
で溶解させた。

Ｉｎ立蒸 ２００μαの抑制溶液とＲＰＭＩ中の２．１０’Ｍのジ
ャーカットＴ細胞の溶液１００μＱと２０％ＦＣ５とを
試験管に装入し、水浴上で１０分間放置した。　ＲＰＭ
Ｉ中の２、ｌＯ”Ｍ（７）ＲＢＣ（７）ｌ液１００μ１
２ト２０％ＦＣＳトヲ’ｆｆｓ加した。

５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、４℃で一夜放置した
。

■−旦還ｌ」８Ｌ１致 顕微鏡の設定：接眼ｊｉ：　ｘｅ 対物鏡：×７ 軽打することにより細胞を注意深く懸濁状態にしついで
しばらく放置した。

１％トルイジソブルー３０μＱを（リンパ球を染色する
ために）チューブに添加し、軽打した。

マラセックス（Ｍａｌａｓｓｅｘ）血球計数器を使用し
て。

１箇所の試験点（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｐａｉｎ
ｔ）について３回測定した。

得られた結果を下記の第１表に示す。

第一」−二煮 （）内：抑制率％ ＊：α＜０．００１ 本書：　α＜ｏ、ｏｉ 本書本：　α（０，０５ 血液をＰＢＳ中で１／２の濃度に稀釈した。

３５鳳Ｑの稀釈血液を１５閣Ωのフィコール−ハイバッ
ク（Ｆｉｃｏｌｌ　Ｈｙｐａｑｕｓ）上に注入しツイテ
室温テ、１８００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。単核
細胞（ＭＮＣ）に相当する環（ｒｉｎｇ）をパスツール
ピペットで取出した。ついでＰＢＳ中で３回洗浄した（
１８００ｒｐｍで１０分間遠心分離）。ＲＰＭＩ　１６
４０“完全”媒体（”　ｃ　ｏｒａ　ｐ　ｌ　ｅ　ｔ　
ｅ　”ｍｅｄｉｕｍ）　＋　１０％ＳＶＦを用いて２．
１０＠細胞／＋ｓｌｔとした。

■−反症作支弐隻 ＰＨＡ−Ｍ　：凍結乾燥した５鳳Ｑビンに５Ｉｌｆｉの
“完全″媒体を装入、１００％溶液、ｖ＆釈して０．４
％溶液とした。

ペプチド： ＳＤＫ　：　１０’モルと４．３５ｍＡの“完全″媒体
をチューブに装入、溶液 ２．３　Ｘ　１０−’Ｍ ついで連続的に稀釈した：４５０μａの“媒体”＋５０
μＱの稀釈。

■−１旦］≦し二度 ウェル（ｗｅｌｌ）数９６の殺菌ボックスＮＵＮＣ中ニ
ー１００μΩのＭＮＣ：細胞濃度２．ｌＯ“／ｍＱ（細
胞２．１０”）−５０μαの０．４％ＰＨＡ　（最終０
．１％）−５０ｔｔＱの媒体（ＩＩＩｅｄｉｕｍ）　―
奔奏−３０μＱのペプチド（３，１０−’Ｍ）空気／Ｃ
ｏ、　（９５１５）雰囲気中で３７℃で３日間保温した
。最後の２４時間中に〔１Ｈ〕チミジン：１μｃｉ／ウ
エルを添加した。ウェルをフィルター上に取出し、カウ
ンターで数えた。

得られた結果を下記の第２表に示す。

■−又−敷 Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ（ＳＤ）Ｃ）及びＰｒｏ−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ哨ｋ　　；　α（０，００
１ 林：α＜０．０２ ネ＊＊：α（０，０１ ＭＮＣ：単核細胞 ｈｕａｉｏｒａｌ　　ｒｅｓ　　ｏｎｃｅ生後６〜８箇
月のＢ６Ｄ２Ｆ１種のマウスを０８目に、ハンクスの塩
溶液中のヒツジ赤血球の懸濁液（細胞１０”）０．２ｍ
Ｍで感作させた。

５ｅｔ−Ａｓｐ−ＬｙｓとＰｒｏ−５ａｒ−Ａｓｐ−Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏペプチド（３μｇ／ｋｇ）を生理的血清中
の溶液の形で、０．２Ｉｌρの量をＩＰ（腹腔内）投与
により指定された時間に注射した。

４日後、マウスを殺し、１ｇＭ免疫グロブリンを分泌す
るＢリンパ球の数を溶血斑点（ｈｅａ＋ｏｌｙｓｉｓｐ
ｌａｑｕｅ）法（Ｊａｒｎｅ法）により数えた。

マウス８匹／バッチ、動物１匹当り、４回測定。

反復試験（ｒｅｍａｄｅ　ｔｅｓｔ）　：　１ポイント
当り、２回実験。

得られた結果を、下記の第３表に示す。

碧−」Ｌ二瓦 Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ及びＰｒｏ−３ｅｒ−Ａｓｐ−
Ｌｙｓ−Ｐｒｏペプチドになる、ヒツジ赤血球細胞Ｔ−
依存抗原（Ｔ　ｄｅｑｅｕｄｏｎｔ　ａｎｔｉｇｅｎ）
に対する、マウスにおける体液性応答ペプチド濃度：３
μｇ／ｋｇ 皇−１ 本発明のペプチドをラットとマウスに経口投与により、
最大投与量で投与した場合、そのいずれについても毒性
は認めら九なかった。腹腔内（ＩＰ）投与によりラット
とマウスにＩｇ／ｋｇ投与した場合にも死亡例は認めら
れなかった。

反蔓友蒸二狡王１ Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓペプチドだけは経口投与が可能
であり、実質的に分解することなしにその対象部位に到
達する；１０■のＳｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓを含有する投
与単位の錠剤及びゼラチンカプセルが適当である。

（２０＋＋＋ｇ）を必要とする。１日当りの投与量は１
０〜１００■（ＳＤＫ）であり、より高級なペプチドに
ついては２０〜２００■である。腹腔内投与の場合、１
日の投与量は直接的作用については１〜１０．であるが
。

持続放出型薬剤（マイクロカプセル、微粒球等）では、
長時間放出型の場合、３００■まで含有し得る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（ I ） Ｈ＿３Ｎ−Ｗ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｘ−ＯＨ（
   I ）（式中、ＸはＰｒｏ又はＬｙｓ残基又は原子価結合
   を表わし；ＷはＴｈｒ又はＰｒｏ残基又は原子価結合を
   表わす；但しＸがＰｒｏ残基を表わすときはＷもＰｒｏ
   残基を表わす）を有するペプチド及びその治療学的に許
   容される塩。 ２、１、Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ ２、Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ ３、Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ４、Ｔｈ
   ｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ５、Ｐｒｏ−Ｓｅ
   ｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ ６、Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ又は ７、Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏである、
   請求項１記載のペプチド。 ３、通常の反応ルートに従って、下記の I 〜IV： I Ｂ
   ｏｃＫ（Ｚ）−Ｘ−（）−ＯＨ IIＢｏｃＤ（ＯＢｚｌ）−Ｋ（Ｚ）−Ｘ（）−ＯＨIII
   ＢｏｃＳ（Ｂｚｌ）−Ｄ（ＯＢｚｌ）−Ｋ（Ｚ）−Ｘ（
   ）−ＯＨIVＢｏｃＷ（）−Ｓ（Ｂｚｌ）−Ｄ（ＯＢｚｌ
   ）−Ｋ（Ｚ）−Ｘ（）−ＯＨの化合物を形成させる工程
   を連続的に行うこと（但し、上記の式中、 ａ）Ｗ及びＸがＰｒｏを表わすときは、Ｗ又はＸの次の
   （）は存在しないものであり；ＷがＴｈｒを表わすとき
   は、Ｗの次の（）にＢｚｌが含有されており；ＸがＬｙ
   ｓを表わすときは、Ｘの次の（）内にＺが含有されてい
   るものとする；また、 ｂ）Ｗ及び／又はＸが原子価結合を表わすときは、対応
   する工程は省略されるものとする）を特徴とする、請求
   項１記載のペプチドの製造方法。 ４、クロル蟻酸イソブチルを使用して、混合無水物法に
   より行われる、請求項３記載の方法。 ５、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを使用して、活性エ
   ステル法により行われる請求項３記載の方法。 ６、活性成分としての請求項１又は２に記載のペプチド
   １〜３００ｍｇと選択された投与方法に適当な担体とか
   らなる免疫変調活性を有する、治療用組成物。 ７、１０〜２００ｍｇの活性成分を含有する、経口投与
   するための請求項６記載の組成物。 ８、１〜３００ｍｇの活性成分を含有する、１Ｐ投与す
   るための、請求項６記載の組成物。