JPH03501259A - 新規なシクロペンタノ‐ビタミンｄ類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 新規なシクロペンタノ−ビタミンＤ類似体この発明はデパートメント・オン・ヘ ルス・エンド・ヒユーマン・サービセスからの補助金ないし授与金により援助さ れた研究中においてなされた。米国政府はこの発明に所定の権利を有している。

この発明は新規で生物学的に活性なビタミンＤ化合物に関する。

より詳しくは、この発明は側鎖部分としてシクロペンクン環を含有する１−ヒド ロキシビタミンＤ類似体に関する。これらの化合物はビタミンＤ活性の種々の分 析で高度の効能を示し、したがって公知のビタミンＤ化合物の新規な代替品とな るものである。

賢一旦 ビタミンＤは正常な骨の成長及び発育並びに血液カルシウムのレベルを正常な生 理的範囲内に維持するために不可欠であることは周知である。またビタミンＤの この活性はそのビタミンが生物学的に活性な代謝生成物への代謝転化によるもの であることも公知である。特に、動物又はヒトの体中でビタミンＤ、かう普通に 形成されるジヒドロキジル化代謝生成物である１α、２５−ジヒドロキシビタミ ンＤａ　（１，２５−（ＯＨ）！　Ｄ、）は腸内でのカルシウム輸送及び骨から のカルシウム吸収（骨流通）、それによる生物体の全血液カルシウムのレベルの 調節及びカルシウムホメオスタシス維持を保証する役割を果す活性な種であるこ とが示されている。（これらのビタミンＤ代謝生成物又は類似体のカルシウム関 連活性は、以下の説明において、化合物の「カルセミツク（ｃａｌｃｅｍｉｃ） 活性」と総括的に呼ぶ。）ビタミンＤの生物学的活性代謝生成物の発見は例えば 側鎖が異る類似体とともに１α−ヒドロキシビタミンＤ１．１α−ヒドロキシビ タミンＤａ、フッ素化ビタミンＤ誘導体などの多くの合成類似体の調製のための 研究を刺激し、数種の合成化合物同様いくつかの天然化合物について生物学的活 性及びカルシウムバランスに対する有益な効果の故に種々のカルシウム代謝及び 腎性骨異栄養症、ビタミンＤ−抵抗くる病、骨そしよう症及び関連疾病などの骨 の病気又は処置の治療剤としての用途が見出され、又は提案されている。

また１、２５−　（ＯＨ）２　Ｄａ及びある種の関連類似体が、その上記に要約 した「カルセミツク活性」に加えてまた悪性細胞の細胞増殖を抑制し、正常細胞 への分化（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｔａｔｉｏｎ）を誘発する強力な活性を示すこ とが明らかにされた。（この活性を今後ビタミンＤ化合物の「分化活性」と呼ぶ 。）１α−ヒドロキシビタミンＤ化合物は、分化誘発剤として顕著な能力を有す る故に、少なくともあるタイプのがんに対する抗がん剤とて提案されてきた（ス ダら米国特許第４，３９１，８０２号）。さらに最近例えば分化誘発剤として優 先的に活性であると報告されている１、２５−　（ＯＨ）ｔ　Ｄｓの２４−ホモ −１２６−ホモ−１２６，２７−シメチルー、及び２６．２７−ジエチル類似体 を含む多数のビタミンＤ側鎖同族体が開示された［デル−力ら米国特許第４．７ １７，７２１号、サイら：ケミカル・ファーマシューティカル・プレチン、３３ ，８７８（１９８５）、イケカワら：ケミカル・ファーマシューティカル・プレ チン、旦、４３６２　（１９８７）］。これに加えて、１α−ヒドロキシビタミ ンＤ化合物が乾せんなどのある種の皮膚病の治療用に提案されている［デクステ ィン及びハルツシュターフ米国特許第４，６１０，９７８号］。このビタミンＤ 化合物の広い活性範囲及び種々の有力な用途はさらに望ましい生物学的性質をも つ新規な類似体研究を刺激してきた。

及肛立皿逐 通常のビタミンＤ分析において極度に高い活性を示す新しいビタミンＤ化合物が ここに調製された。詳しくは、これらの化合物は天然の代謝生成物１．２５−　 （ＯＨ）！　Ｄ、よりもカルミック活性、分化活性の両方とも強力である。この 新しい化合物は側鎖にシクロペンタン環を含有する１α、２５−ジヒドロキシビ タミンＤ類似体であり、次の一般構造式で表わすことができる：式中Ｒ１、Ｒ１ 及びＲ３はそれぞれ水素又はヒドロキシ−保護基からなる群から選ばれ、Ｘ及び Ｙはともに水素を表わし又は互いに結合して炭素−炭素結合を形成する。

本発明はまた上記化合物の調製に有用な新規な合成中間体を提供する。これらの 中間体は上記構造においてＸがフェニルスルホニル（ｐｈｓｏ□）基であり、Ｙ が水素、ヒドロキシ又は保護されたヒドロキシ基からなる群から選ばれることを 特徴とする。

この説明及び請求の範囲において用いるヒドロキシ−保護基は、例えば、アシル 基、又はアルキルシリル基、又はアルコキシアルキル基などのヒドロキシ官能を 保護するのに使用されるすべての基類である。保護されたヒドロキシ基はこれら のヒドロキシ−保護基の１つによって誘導されたすべてのヒドロキシ官能基であ る。適用することができるヒドロキシ−保護基の例は、例えばアセチル、プロピ オニル、ブチリルなど炭素原子数１〜６のアルカノイル基、又はベンゾイル−又 はアルキル−、ハロー又はニトロ−置換ベンゾイル基、トリメチルシリル、トリ エチルシリル、ジメチルエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル及び類似基な どのアルキルシリル基、及びメトキシメチル、エトキシメチル、メトキシエトキ シメチル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニルなどのアルコキシアル キル基がある。この明細書で用いる用語「アルキル」はすべての形の異性体を含 む炭素原子数１〜６の炭化水素ラジカルを表わす。本発明の新規な化合物の特定 かつ好ましい例は以下に示す構造式１を有するシクロペンタノ−１，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ、である： もう１つの好ましい例は対応する２２．２３−デヒドロ類似体、すなわち、以下 に示す構造式■を有する、シクロベンクツ−１゜２５−ジヒドロキシ−２２−デ ヒドロビタミンＤ、である二上記の化合物（又はそのヒドロキシ−保護誘導体） は予め形成された炭素２２に適当な官能基を有するビタミンＤ核に適切な側鎖フ ラグメントをカップリングさせることによって調製することができる。上記のク イブエ及びＨの化合物の合成用として適切なビタミンＤ核は、それぞれ、１α− ヒドロキシビタミンＤ−２２−トシレート及び１α−ヒドロキシビタミンＤ−２ ２−アルデヒドであり、次の構造式で表わすことができる： 式中Ｒ１及びＲ２はヒドロキシ保護基である。

適切な側鎖フラグメントは次の構造のフェニルスルホニＪし誘導体で式中Ｒ３は ヒドロキシ保護基である。

シビタミンＤ−２２−トシレートとのカップリングは２つの基本的段階で構造工 の新しいビタミンＤ−シクロペンタノ類似体（又Ｃまそのヒドロキシ−保護され た誘導体）を与える。同様に、同じフェニルスルホニル側鎖ユニットの上記した １α−ヒドロキシビタミンＤ−２２−アルデヒドとのカップリングはクツトナー ら［テトラヘドロン・レクーズ　旦、６１２９　（１９８７）］の一般的条件を 用い構造■の２２．２３＝不飽和シクロペンタノ−ビタミンＤ類似体（又はその ヒドロキシ−保護された誘導体）を与える。

ビタミンＤ−２２−）シレート又はビタミンＤ−２２−アルデヒドの出発物質の 調製はスキームＩ［同じ（クツトナーら：テトラヘドロン・レターズ　１旦、６ １２９−６１３２　（１９８７）参照］に図式で示し、またフェニルスルホニル 側鎖ユニットの調製はスキーム■に概要を示すようにして行われる。これら材料 間の上記のクイブエ及びＨの目的のビタミンＤ側鎖類似体を得るためのカップリ ング反応はスキーム■に示す。これら化合物の調製を以下の例において詳細に説 明する。これらの例において用いる出発物質又は生成物を指示するアラビア数字 （例えば、化合物上、λ、旦など）は工程スキームＩ、■及び■での同じ数字の 構造に対応する。

茅　なビタミン　Ｌ′Ｉ　び■の・　にＩＪＬＩＩＩ　：　赤外線スペクトル（ Ｉ　Ｒ）はニコレットＭＸ−ＩＦＴ−Ｉ　Ｒ分光計で油状物質の適切なフィルム を用いて得た。紫外線（ＵＶ）吸収スペクトルは日立モデル６Ｏ−１００ＵＶ− ＶＩＳ分光計を用い記録した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは記載の溶媒中 でプルカーＷＨ−２７０又はＡＭ−４００分光計を用い２７０又は４００ＭＨｚ において記録した。化学シフト（δ）はＭ　ｅ　４Ｓｉ（δ０．００）からダウ ンフィールドで記録した。低分解能及び高分解能質量スペクトルはクラトスＤＳ −５５データシステムを装備したクラトスＭＳ−５０ＴＣ計を用い（特記しない 限り）７０ｅＶで記録した。高分解能データはピークマツチングによって得た。

試料は直接挿入プローブを経て１２０−１５０℃に保持したイオン源中に導入し た。

シリカゲル６０（メルク、７０−２３０又は２３０−４００メッシュ）をカラム クロマトグラフィーに使用した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）はＥＭサイ エンス（ギブスタウン、ＮＪ）のＵＶインジケーターをプレコートしたアルミニ ウム・シリカゲル・シートを使用して行った。使用した溶媒系は、Ａ：クロロポ ルム−エタノール８５　：　１５　（ｖ／ｖ）　、　Ｂ　：ヘキサンー酢酸エチ ル１：１、Ｃ：ヘキサンー酢酸エチル３：ｌである。高性能液体クロマトグラフ ィー（ＨＰＬＣ）はモデル６０００Ａ溶媒分配システム、モデル６ＵＫユニバー サルインジエクター及びモデル４５０可変波長デテクターを装備したウォーター ズ・アソシェーツ・液体クロマトグラフ装置を使用して行った。ゾルパックス− シリカ（フェノメネックス）カラム（６，２ｍｍｘ２０ｃｍ及び１０ｍｍｘ２＝ ５ｃｍ）を使用した。溶媒系：　Ａ：ヘキサン中３％の２−プロパツール、Ｂ： ヘキサン中２％の２−プロパツール、Ｃ：ヘキサン中６％の２−プロパツール、 Ｄ：ヘキサン中１０％の２−プロパツール、Ｅ：ヘキサン中２０％の２−プロパ ツール、Ｆ：ヘキサン中２％の酢酸エチル。シリカゲル・セブパック（ウォータ ーズ・アソシェーツ）をＨＰＬＣ試料の予備ろ過に使用した。

３β−アセトキシ−２２，２３−ビスツルー５−コレン酸はステラロイズ（ウィ ルトン、ＮＨ）から購入した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）はベンゾフェノン ケチルナトリウムから蒸留した。その他の溶媒は標準法によって精製した。ヘキ サン中のニーブチルリチウム（アルドリッチ）はアルゴン下でＴＨＦ中１，１ｏ −フェナントロリンの存在下で旦−プロパツールで滴定した。

ラヘドロン・レターズ　旦、６１２９−６１３２　（１９８７）に記載の一般的 方法に従って３β−アセトキシ−２２，２３−ビスツルー５−コレン酸から調製 した。

医ｌ ビタミンＤ−２２−アルコール（λ）　びそのトシレート（旦）（７）ル：エス テル（１）１３６．２ｍｇ　（０，２３ｍｍｏβ）の無水ＴＨＦ５ｍｊ２溶液に アルゴン雰囲気下Ｏ℃で溶液を撹拌しながらリチウムアルミニウムハイドライド ２５ｍｇ　（０，６５ｍｍｏβ）を添加した。懸濁液を０℃で１５分間撹拌し、 過剰の試薬をＴＭＦ中の１０％ＨｔＯを滴加することによって分解した。懸濁液 を１０ｍｇのＴＨＦで希釈し、室温で撹拌をさらに１５分間続けた。生成物を酢 酸エチルを用い標準抽出操作によって単離した。ヘキサ２９１０％酢酸エチルで のシリカゲル・セブパックろ過で２２−アルコール（ス）（１１８，４ｍｇ、９ １％）を無色油として得た：ＩＲ（フィルム）　３４５０．　２９５２．　２８ ８６．　１４４７．　１２５ｇ、１１０５．　１０８５．　８３４ｃ＋ｎ−’　 ；　Ｕ　Ｖ　（ＥｔＯＨ）　λｗａｘ　２６４　ｎｍ、λ−＋−２２７ｎｍ、　 Ａ２６４／Ａ２２７：１．５７　、’ＨＮＭＲ（ＣＤ（１，）６０．００　（１ ２Ｈ，ｓ、　５ｉ−ＣＨｓ）、　０．５３（３Ｈ，ｓ、　１８−ＣＨｓ）、　０ ．８５　［１６Ｈ，ｓ、　５ｉ−Ｃ（ＧＨｚ）ｓ］、　１．０４　（３Ｈ，ｄ、 　Ｊ：６．４　Ｈｚ、２ｌ−ＣＨｓ）、３．３７　および　３．６３　（ＩＨお よび　ＬＨ，おのおの　ｍ、２２−ＣＨ，）。

４．１７（ＬＨ，ｍ、　３−Ｈ）、　４．３５　（ＩＨ，ｍ、　１−Ｈ）、　４ ．８４　（ＩＨ，ｂｒ　ｓ、　１９２−Ｈ）。

５．１６（ＬＨ，ｂｒ　ｓ、　１９Ｅ−Ｈ）、　６．００　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ： １２．２　Ｈｚ、　７−Ｈ）、　６．２１（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝　１２．２　Ｈｚ 、６−Ｈ）；　ＭＳ、　ｍ／ｚ、５７４　（Ｍ”、１７）、４４２　（６７）。

３８３　（１１）、３０８　（１７）、２４８　（１００）。

乾燥ピリジン５０μ℃中のｐ−）ルエンスルホニルクロライド４２．７ｍｇ　（ ０，２２ｍｍｏＡ）の氷温溶液を窒素雰囲気下０’Ｃでアルコール（λ）の撹拌 溶液中へ添加した。混合物を５℃で２２時間撹拌し一１ＴＬＣ（システムＣ）で 監視した。反応混合物を氷温飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯｓ水溶液上へ注ぎ、さらに３０ 分間撹拌を続けた。

生成物をエチルエーテル−ヘキサン１：１（ｖ／ｖ）で抽出した。

有機相を飽和ＮａＣρで洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　０４上で乾燥した。溶媒を減圧下 で除去し、ピリジンを窒素流中で除去した。粗生成物をシリカゲル・セブパック ろ過（ヘキサン中５％酢酸エチル）精製して純粋なトシレート　（旦）　（５４ ｍｇ、９８％）を得た：ＩＲ（フィルム）２９５０、１５ｇ０．１３６７、１２ ６７、１１８９．１１７８．１０９９．１０８５．８３５　ｃｍ−’　；ＵＶ　 （へＮサン）　λｅａｍｘ　２６３　ｎ１１１．　λ、、、ｌ　２３６　ｎｍ　 ；　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｊ２ｇ）。

６０．００　（１２Ｈ，ｓ、　５ｉ−ＣＨ，）、　０．４３　（３Ｈ，ｓ、　ｌ ８−ＣＨ，）、　０．８１　［１８Ｈ。

ｓ、　５ｉ−Ｃ（ＣＨａ）−］、　０．９４　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．８　Ｈ２ ，２−ＣＨ５）、　２．４０　（３Ｈ，ｓ。

Ａｒ−ＣＨ５）、３．６４　および　３．９１　（ＩＨおよび　ＩＨ，おのおの 　ｍ、２２−ＣＨ２）、４．１３（ＩＨ。

ｍ、　３−Ｈ）、　４．３１　（１）１．　ｍ、　１−Ｈ）、　４．７９　（Ｌ Ｈ，ｂｒｓ、　１９２−Ｈ）、　５．１３（ＩＨ。

ｂｒｓ、　１９Ｅ−Ｈ）、　５．９４　（ＩＨ，ｄ、　に１２．８　Ｈｚ、　７ −Ｈ）、　６．１７　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝１２．８　Ｈｚ、６−Ｈ）、７．４３ 　および　７．８４　（２ＨＪよび　２Ｈ，おのおの　ｍ、Ａｒ−Ｈ）；ＭＳ、 　ｍ／ｚ、　７２ｇ（６）、　５６９（３０）、　５５６（７）、　４６４（７ ）、　４２４（４４）、　３６７（１９）、　２９２（２３）、　２４８（１０ ０）；　Ｃ４＋ＨａｓＯｓＳｉｚＳとして正確な質量：計算値　７２８．４３３ ８；実測値７２８．４３２６゜凱ユ ビタミンＤ−アルデヒド（４）　ｑ週ｌニジクロロメタン０．５ｍｊ２中のオキ サリルクロリド３０μρ（０，３４ｍｍｏρ）の溶液な窒素雰囲気下、−６０℃ でジクロロメクン３ｍｊ２中のＤＭＳＯ５０μρ（０，７ｍｍｏβ）の溶液へ撹 拌下で滴加した。混合物を一６０℃で１ｏ分間撹拌後、ジクロロメタン１ｍβ中 のアルコール（ヱ）２７ｍｇ　（０，０５ｍｍｏ忍）の溶液をゆっくりと添加し た。混合物を一６０℃で３０分間撹拌し、トリエチルアミン０．２ｍＡを添加し た。生成物を酢酸エチルで抽出し、洗浄（ＮａＣｊ２）し、乾燥（ＭｇＳＯ，” ）Ｌ、た。シリカゲル・セブバックろ過で純粋な（丘）（１７ｍｇ、６２％）を 無色油として得た：ＩＲ（フィルム）２９５４、２９２９．２８８４．１７２７ ．１４７２．１３７５．１２５６．１０ｇ５．９０９．８８０゜８３５　ａｍ− ’　；Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＤＣｊ２　＊）δ　０．００　（１２Ｈ，ｓ、　５ｉ−Ｃ Ｈ，）、　０．６０　（３Ｈ。

ｓ、１８−ＣＨ２）、　０．８８　［１８）１．　ｓ、　５Ｌ−Ｃ（ＣＨｘ）ｘ ］、　１．１１　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．９　Ｈｚ。

２ｌ−ＣＨ＝）、　４．２３　（ＩＨ，ｒｎ、　３−Ｈ）、　４．４３　（ＩＬ 　ｍ、　１−Ｈ）、　４．９３　（ＩＨ。

ｂｒ　ｓ、　１９２−Ｈ）、　５．１９　（ＩＨ，ｂｒ　ｓ、　１９Ｅ−Ｈ）、 　６．０７　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝１０．０２２−Ｈ）；ＵＶ　（へキサン）　λ ＋ａａｘ　２６４　ｎｍ、ん、。　２２７　ｎｍ、Ａ２６４／Ａ２２７−１．９ ；ＭＳ、　ｍ／ｚ、　５７２　（Ｍ”、　１３）、　４４０（５３）、　３８３ （１１）、　３０８（１４）、　２４８（１００）；　Ｃ，４Ｈ，。０ａＳｉｚ として正確な質量：計算値　５７２．４０８１；実測値５７２．４１１？。

アルデヒド（丘）の収率向上が上記酸化操作を下記の条件で行った時得られた： 無水ジクロロメタン０．７５ｍｊ２中のオキサリルクロリド１５μＡ　（０，１ ７ｍｍｏＩ２）の溶液をアルゴン雰囲気下、−６０℃で無水ジクロロメタン０． ２５ｍＪ２中のジメチルスルホキシド２５μｌ２（０，３６ｍｍｏβ）の溶液へ 撹拌下で滴加した。混合物を一６０℃で１０分間撹拌後、無水ジクロロメタン０ ．５ｍβ中のアルコール（２）２０．３ｍｇ　（０，０３５ｍｍｏＪ２）の溶液 をゆっくり添加し、フラスコを余分の同じ溶媒０．２ｍｇですすいだ。得られた 混合物を一６０℃で３０分間撹拌し、トリエチルアミン０．３ｍｊ２　（２，１ ５ｍｍｏβ）を添加した（−６０℃）。混合物を５分間撹拌し、０℃に温め、エ ーテルで抽出した。エーテル相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）Ｌ、シ リカゲル・セブバックろ過で（丘）を無色油として得、これをさらにＨＰＬＣ（ ゾルパックス−シル０．９４ｘ２５ｃｍ、ヘキサ２９１０％酢酸エチル）で精製 して純粋なアルデヒド（４）（１９ｍｇ、収率９６％）を得た。痕跡程度の出発 物質アルコール（０，１２ｍｇ）を回収した。

医Ａ フェニルスルホニル１３フラグメント（１旦）ΩＵ＝ヒドロキシー保護された側 鎖フラグメントを出発物質としてのβ−プロピオラクトン（旦）から調製した。

ラクトン（旦）を公知の方法［ビー。

カノンら：ジャーナル・オン・オルガニック・ケミストリ一旦。

１８２８’（１９８０）］に準じて１，４−ビス（ブロムマグネシウム）ブタン を用いる反応によってジオール（旦）に転換した。さらに化合物（旦）の目的の 側鎖ユニット（１旦）への転換はクツトナーら：テトラヘドロン・レクーズ　λ ８．６１２９　（１９８７）に報告された一般的方法によって行った。すなわち 、ジオール（旦）の第１級アルコール官能基をトシレート（ヱ）に転換し、トシ レートをチオフェノールアニオンで置換してフェニルスルフィド誘導体（旦）を 得た。後者なｎ−クロロ過安息香酸で酸化した後、対応のフェニルスルホン（３ Ｌ）を得て、これを転換（ジメチルホルムアミド中過剰の塩化トリエチルシリル 及びイミダゾールを用い、室温で約２時間）によって目的のヒドロキシ−保護さ れた形に転換し、トリシリル誘導体、化合物（２）にした。保護されたスルホン （旦）は全収率４８％で濃い無色油として得たた：　Ｉ　Ｒ（７（ルム）３０５ ０、２９００．１４４０．１４０５．１３００．１２３０．１０４５．１０００ 　ｃｍ−’　；　’ＨＮ　Ｍ　Ｒ（ＣＤｆ４　ｍ）δ０．４７　（６Ｈ，Ｊ’５ ．７　Ｈｚ、　５Ｌ−ＣＨｔ）、　０．８６　（９Ｈ，ｔ。

Ｊ：５．７　Ｈｚ、　ＣＨ−）、　１．４６−１．５７　（４Ｈ，ｍ）、　１． ６３−１．７１　（４Ｈ，ｍ）、　１．８６−１．８９　（２８，ｍ）、　３． ２３−３．２６　（２８，ｍ）、　７．５８　（２８，ｔ、　Ｊ＝　７．３　） １ｚ、　Ａｒ−Ｈ９メク）、７．６６　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝７．３　Ｈｚ、Ａｒ− Ｈ，バラ）、７．９２　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、　Ａｒ−Ｈ，オルソ）； 　ＭＳ、　ｍ／ｚ、　（３０ｅＶ、相対強度）、　３６ｇ　（Ｍ”″。

０．０１）、　３３９　（Ｍ”−Ｅｔ、　１００）、　２２７（８）、　１９９ （８）、　１６３（１７）、　１３５（１０）。

１１５（９）、　９５（１３）、　８７（１２）、　７５（１４）；　Ｃ，、Ｈ ，，０，ＳＳｉとして正確な質量：計算値　３６Ｌ１８４１．実測値３６８．１ ９３６゜凱五 シクロペンタノ−１２５−ジヒドロキシビタミンＤ、Ｌ′　Ｉの諷刺：ジソプロ ビルアミン（８μ℃）を指示薬として１．１０フエナントロリンを含有するｎ　 −ＢｕＬｉ　（４１ＬＬρ；ヘキサン中１．３５Ｍ）溶液へ一７８℃、アルゴン 雰囲気下で撹拌しながら添加した。アルゴン雰囲気下で３０分間撹拌後、ＴＨＦ 　（２００μＣ）中のフェニルスルホン誘導体（２８ｍｇ）（１０）溶液を添加 した。得られた褐色の混合物を一７８℃、アルゴン雰囲気下で３０分間撹拌後、 冷却浴をＣＣｌ２．／ドライアイス浴に変えた。

１５分間、−２１℃で撹拌後、トシレート（１１ｍｇ）（３）のＴＭＦ溶液を反 応混合物の色が赤に戻った時に添加した。溶液を−２０〜−１０℃で３．５時間 撹拌後、−１０℃で飽和ＮＨ４Ｃ℃液を添加し、混合物をヘキサンで抽出した。

有機相を飽和ＮａＣｆｆで洗浄し、シリカゲル・セブバックカートリッジを通じ てろ過し、中間品的なスルホン誘導体（１上）をＣ−２３鏡像異性体の混合物と して得た。この生成物は５％ナトリウムアマルガムを用い直接税スルホニル化し た。メタノール（５００μ℃）中の飽和Ｎａ、ＨＰｏ４溶液を無水ＴＨＦ　（５ ００μ℃）中のスルホン誘導体（上↓）の溶液へ撹拌下で添加し、続いてさらに 粉末Ｎａｇ　ＨＰＯ４を添加した。混合物をアルゴン雰囲気下で３０分間撹拌し 、Ｏ”Ｃに冷却した０次に新たな５％ナトリウムアマルガムを添加し、５℃で撹 拌を３時間続けた。反応の進行はＴＬＣ（システムＣ）で監視し、反応完了時に 混合物をヘキサンで希釈し、さらに１５分間撹拌した。ヘキサン層をデカントし 、メタノール贋を数部のヘキサンで洗浄した。ヘキサン抽出物を統合して氷冷し た飽和ＮａＣβ溶液で洗浄した後、シリカゲル・セブパックカートリッジを通じ てろ過してヒドロキシ−保護されたトリオール（１０５μｇ）（よス）を得た。

保護基を（１２）のＴＨＦ　（５００μβ）溶液をテトラブチルアンモニウムフ ルオリドのＴＨＦ溶液（１０μ２；１Ｍ溶液）で処理することにより除去した。

アルゴン雰囲気下、５０℃で５０分間撹拌後、エーテルを加え、有機層をＮａＣ ｎ溶液で洗浄した。次に溶媒を蒸発させ、残留物をシリカゲル・セブパックカー トリッジ（ヘキサン中１０％の２−プロパツール）を通する過により単離し、そ の後、生成物、目的のビタミン類似体Ｉ、を分取ＨＰＬＣ（１０ｍｍｘ２５ｃｍ カラム、システムＤ）で精製した。１２％収率（旦から）で得られたトリオール エ（５４μｇ）は次のような物性を示した　：ＩＲ（フィルム）　３３６０．　 ２９３０．　１６０５．　１４４２．　１３７ｇ、１２９１．　１１４５゜１１ ０５、　１０１３０．　１０６２　ｃｍ−’　；　ＵＶ　（ヘキサ２９１０％２ −プロパツール）　え、、、２６４ｎｍ、λｍ１ｌｌ　２２８ｎｍ、　Ａ２６４ ／Ａ２２８　＝１．７１　；　’）Ｉ　ＮＭＲ（ＣＤｓＯＤ）δ０．４８　（３ Ｈ，ｓ、　１８−ＣＨｓ）、　０．８７　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．４　Ｈｚ、　 ２ｌ−ＣＨｓ）、　４．０３（ＩＨ，ｍ、　３−Ｈ）、　４．２５　（ＩＨ，ｍ 、　１−Ｈ）、　４．８０　（ＩＨ，ｂｒ　ｓ、　１９Ｚ−Ｈ）。

５．１９　（ｉｔ（、ｂｒ　ｓ、　１９Ｅ−Ｈ）、　５．９８　（ＩＨ，ｄ、　 Ｊ＝１１．２　Ｈｚ、　？−Ｈ）、　６．２３（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝１１．１　Ｈ ｚ、　６−Ｈ）；　ＭＳ、　ｍ／ｚ　（相対強度）　、　４４２　（Ｍ”。

５）、　４２４　（４３）、　４０Ｂ　（３ｇ）、　３８８　（７）、　３７３ 　（７）、　２９ｇ　（６）、　２８５　（１２）。

２６９（２０）、２５１　（２４）、　１３４　（１００）、　８５　（２８） ；　Ｃ＊＊Ｈ４ａＯｓとして正確な質量：計算値　４４２．３４４７．実測値　 ４４２．３４３８゜医ｌ シクロペンタノ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ、　ｒ　 ■の・。“：　３００ｕｊ２の無水テトラヒドロフラン（指示薬として１，１ｏ −フェナンスロリンを含む）中の１−［−（フェニルスルホニル）エチル］−１ −［（１−リエチルシリル）オキシ］−シクロペンクン（旦）２７ｍｇ　（７３ μｍｏｊｌりの溶液へ撹拌しながら、アルゴン雰囲気下、−７８℃で１１ＬＬＡ のジイソプロピルアミン（８０μｍｏＩ２）を添加し、続いて６２μβのｎ　− ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．３Ｍ）（８０μｍｏ忍）を添加した。溶液をアルゴン 雰囲気下、−７８℃で３０分間撹拌した後、３００μρの無水テトラヒドロフラ ン中の１．８ｍｇアルデヒド（丘）（３μｍＯρ）を添加し、−７８℃で１時間 撹拌した。混合物は飽和ＮＨ，Ｃβ溶液１ｍＪ２の添加によって分解させ、０℃ に温め、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルをブライン及び水で洗浄し、無水Ｍ 　ｇ　Ｓ　Ｏ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発させた。分取ＨＰＬＣ（ゾルパックス −シル、９．４ｍｍｘ２５ｃｍカラム、ベキ９２９１０％酢酸エチルの溶媒系） により０．５ｍｇの未反応アルデヒドと鏡像異性体の混合物としての２．３ｍｇ のヒドロキシスルホン（旦）を得た。

メタノール（１，０ｍｊ２）中の飽和Ｎａ２ＨＰＯ４溶液を無水ＴＨＦ１．Ｏｍ ｎ中のヒドロキシスルホン（１３）（２，３ｍｇ）の溶液中へ撹拌しながら添加 した。混合物をアルゴン雰囲気下で３０分間撹拌し、０℃に冷却した。次に新た なナトリウムアマルガム（約２．３ｍｇ）を添加し、混合物を５℃で１６時間撹 拌した。混合物を５ｍｊ２のヘキサンで希釈し、撹拌を１５分間続けた。溶剤を デカントし、固形物質をヘキサン（３ｘ５ｍβ）で洗浄した。有機溶液を統合し 氷とブラインを添加した。有機層を分離し、ヘキサン中でセブパックカートリッ ジを通した。ＨＰＬＣ精製で１２６μｇの２２−ヒドロキシル化生成物とともに ２６０μｇの化合物上Ａが得られた（ゾルパックス−シル、９．４ｍｍｘ２５ｃ ｍカラム、ベキ９２９１０％酢酸エチル）が得られた。保護されたトリオール（ ｉ’４）を１．０ｍｊ２の無水ＴＨＦ中に溶解し、テトラブチルアンモニウムフ ルオリドの無水ＴＨＦ溶液（５０μ℃、１Ｍ溶液）を添加した。混合物をアルゴ ン雰囲気下、５０℃で１時間撹拌した。次いでエーテル（５ｍｊ２）を添加し、 有機相をブラインで洗浄した。

溶媒を除去し、残留物を１＝１の２−プロパツール／ヘキサンに溶解し、シリカ セフパックカートリッジ中を通した。分取ＨＰＬＣ（ゾルパックス−シル９．４ ｍｍｘ２５ｃｍカラム、ヘキサン中２０％の２−プロパツール）によって２２Ｅ −デヒドロ−トリオール（ＩＩ）（１１０ｇｇ）を得た：　ＬＩＶ　（ＥｔＯｌ （）　λ１１１１１１２６４　ｎｍ。

ん、＋Ｉ、２２８　ｎｍ、　Ａ２６４／Ａ２２ｇ　＝１．７　；　’ＨＮＭＲ（ ＣＤＣｊ２＊）　δ　０，５６（３Ｈ，ｓ、　１ｇ−ＣＨ５）、　１．０４　（ ３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．５　Ｈ２，２ｌ−ＣＨ３）、　４．２３　（１４（。

ｍ、　３−Ｈ）、　４．４４　（ＩＨ，ｍ、　１−Ｈ）、　４．９９　（ＩＨ， ｂｒ　ｓ、　１．９２−Ｈ）、　５．３２（ＩＨ，ｂｒ　ｓ、１９Ｅ−Ｈ）、５ ．４１　（２Ｈ，ｍ、２２　および　２３　Ｈ）、６．０１　（ＩＨ，ｄ。

Ｊ−１１，３Ｈｚ、　７−Ｈ）、　６．３７　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ：１１．２　Ｈ ｚ、　６−Ｈ）；　ＭＳ、　ｍ／ｚ（相対強度）　、　４４０　（Ｍ″″、　１ ４）、　４２２　（５１１，４０４（２０）、　２８７　（１０）。

２６９　（２２）、　２５１　（１８）、　１５２　（３０）、　１３４　（１ ００）、　１１６　（８）、　８５　（９ｇ）。

Ｃ，、Ｈ４４０，として正確な質量：計算値　４４０．３２９０．実測値４４０ ．３３０５゜ましいビタミンＤ　ｒ　の　“・ゞ性 新しいビタミンＤ類似体であるシクロペンタノ−１，２５−ジヒドロキシビタミ ンＤ、（化合物Ｉ）及びシクロベンクツ−１，２５−ジヒドロキシ−２２Ｅ−デ ヒドロ−ビタミンＤｓ　（化合物■）をこの分野で確立された公知の方法を使用 してカルセミツク活性及び分化活性の両方について分析した。分析方法及び得ら れた結果を以下の例で述べる。

皿ユ Ａ　Ｉ　び■の　のカルシウム　゛び　のカルシウム。

通造葺 オスの乳離れしたラット（ハーランースブラギュ・ドーレー社、マデイラン、Ｗ Ｉから購入）にスダら（ジャーナル・オス・ニュートリジ３ン、上旦没、１０４ ９−１０５２．１９７０）記載した低カルシウム、ビタミンＤ欠乏飼料（０，０ ２％Ｃａ、０，３％Ｐ）を合計４週間にわたり無制限に与えた。３週間口の終り にこれらの動物を無作為に６つのグループに分けた。１つのグループ（コントロ ールグループ）には腹膜下（ｉｎｔｅｒ、ｐｅｒｉｔｏｎｅｌ）　（ｉ　、　ｐ 、　）注射によって毎日溶媒ビヒクル（９５％プロピレングリコール１５％エタ ノールの０．１ｍＩ？、）投与を合計７日間行った。その他のグループは第１表 に示す量の試験化合物（すなわち、１．２５−（ＯＨ）ｚＤｓ化合物Ｉ又は化合 物■）を同じ溶媒ビヒクル中に溶解して毎日の注射により７日間にわたり投与し た。動物たちは最後の注射後２４時間で殺し、腸のカルシウム輸送測定のため腸 を取り出し、骨のカルシウム流通分析（血清カルシュムレベルの測定）のため血 液を採集した。腸のカルシウム輸送はハロラン及びデルーカークスｌ立溢、４７ ７−４８６　（１９８１）］による記載の裏返し十二指腸のう法（ｅｖｅｒｔｅ ｄ　ｇｕｔ　ｓａｃ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）　［マーチン＆デルーカニアメリカ ン・ジャーナル・フィジオロジー主上玉、１３５１（１９６９）］によって測定 した。結果は通常の様式である紫膜／粘膜カルシウム濃度比で表わし、下記の第 １表に示した。骨のカルシウム流通は血清カルシウムレベルを標準法、すなわち 血清の０．１ｍｊ２アリコートなＬ　ａ　Ｃ忍ｍの０．１％水溶液１．９ｍｎに 溶解し、次いでカルシウム濃度を直接原子吸光光度計で定量する方法で測定する ことにより分析した。結果はｍｇ％で表わし、下記の第１表に示した。

第１表 シクロペンタノ−ビタミンＤ類似体の腸のカルシウム輸送投与　量　Ｃａ輸送　 血清カルシ’）人化合物　ｎｇ／日　［Ｃａ漿膜／Ｃａ粘膜］　ｍｇ％平均±Ｓ 、　Ｅ、　Ｍ、　平均±Ｓ、　Ｅ、　Ｍ。

なし　（コントロール）　０　２．４±０．２２　３．７±０．０６１．２５− （ＯＨ）、Ｄｓ　５０　８．３±０．４３　４．６±０．１０シクロペンタノ− １，２５−（ＯＨ）ｔＤ−２５７，７±０．３７　５．５±０．３１（化合物Ｉ ）　１２５　１０．４±０．１０　７．４±０．０６シクロベンクノー１．２５ −（ＯＨ）１−　５０　８．３±０．８１　５．９±０．１４２２−デヒドロ− Ｄ、　（化合物■） 俸１ｆｉ イＡ　Ｉ　び■の　ゞ 試験化合物に応じるＨＬ−６０細胞（ヒトの白血病細胞）の分化の程度を３種の 異った分析法：　ＮＢＴ還元、エステラーゼ活性及び食細胞作用活性で評価した 。ＮＢＴ還元と食作用分析はデル−力らの米国特許第４，７１７，７２１号に記 載のようにして行った。分化の程度のマーカーとして非特異酸エステラーゼを測 定する３番目の分析はセントルイス、ＭＯのシグマ・ケミカル社から入手できる シグマ、キットＮｏ、９０に示された方法によって行った［オストレムら：プロ シーディンクス・ナショナル・アカデミ−・オン・サイエンス・ＵＳＡ旦４．２ ６１０　（１９８７）；オストレムら：ジャーナル・オン・ジイオロジカル・ケ ミストリー２６２，１４１６４（１９８７）も参照］。結果は下記の第２表に示 す。３種の分析データは種々の濃度の１．２５−（ＯＨ）ｚ　Ｄｓ　（比較標準 として使用）又はシクロペンタノ−ビタミンＤ類似体工及び■の処理の結果の分 化細胞のパーセントで表わした。

前述の試験結果は新しいシクロペンタノ類似体が高度のカルセミ第２表 ＨＬ−６０細胞培養におけるシクロペンタノ−１，２５−（ＯＨ）！　Ｄ、（化 合物Ｉ）及びシクロペンタノ−１，２５−（ＯＨ）ｚ−２２−デヒドロ−Ｄｘ（ 化合物■）の分化活性 化合物　（モル）　ＮＢＴ　エステラーゼ　食作用１．２５−（ＯＨ）Ｊｓ　１ ｘｌＯ−’　８９±３９３±２　８８±３１ｘｌｏ−”　５８±４６３±４　５ ９±３１ｘｌＯ−’　３４±３　３７±３　３４±２シクロペンクツ−１，２５ −１ｘｌＯ−’　９０±４　８８±４　８６±３（ＯＨ）　２Ｄ３　１ｘｌＯ− ”　８１±３８０±４８２±４（化合物Ｉ）　１ｘ１０−＠６３±２６６±４６ ５±４１ｘｌＯ−’　４６±２４５±３４５±３シクロベンクツ−１，２５−１ ｘｌＯ−’　９５±３　９５±３　９２±６−　（ＯＨ）、−２２−デヒドロ− Ｄｓ　１ｘｌＯ−’　９０±３　９１±２　８９±３（化合物■）　１ｘｌＯ− ’　８０±３７６±４７８±４１ｘｌＯ−’　６３±２６７±４６３±３１ｘｌ Ｏ−’　４７±３４５±２４９±３１ｘｌＯ−”　３９±３３９±３　４０±３ 治療目的のため、これら化合物はこの技術分野で公知の常法によツク活性及び分 化活性を保持していることを実証している。事実、第１表及び第２表に掲げた結 果はカルセミツク活性及び分化活性に関して２種のシクロペンタノビタミンＤ類 似体は天然ホルモン１゜２５−　（ＯＨ）！　Ｄ、よりも強力であることを示し ている。こうして、類似体重及び■によりもたらされるカルシウム輸送応答（第 １表）は１．２５−（ＯＨ）！　Ｄ、により得られるのとほぼ同じであるが、骨 からのカルシウム流通に対する効果（第１表）は１．２５（ｏＨ）ｔ　Ｄｓより も明白に強力である。同様に、第２表のデータは類似体重及び■が白血病細胞の 分化の誘発では１．２５−（ＯＨ）２　Ｄａよりも約５倍も強力であることを示 している。これは、例えば、両方の化合物工及び■が５ｘｌＯ−”Ｍの濃度で９ ０％の分化を達成するが、１．２５−　（ＯＨ）、Ｄａは同程度の分化を生成さ せるのに約５倍の高濃度（ｌｘｌ（Ｉ’Ｍ）を必要とすることを示すデータから 明らかである。

これらの結果に基いて新しいシクロペンタノ類似体は両方ともカルシウム調整剤 又は分化誘発剤として有効に使用することができると結論できる。こうして新し い類似体は腎臓骨異栄養症、ビタミンＤ−抵抗くる病、骨そしよう症及び関連疾 病などのカルシウム代謝不調症の予防又は治療に用いることができる。同様に、 それらの悪性細胞から正常細胞への分化を誘発する高能力はこのシクロペンクツ 類似体が新生細胞疾病、特に白血病の治療用の１．２５−（ＯＨ）ｚ　Ｄｓのよ うな公知の化合物の代りに使用できることを示している。

す、無害の溶媒での溶液として、又は適切かつ無害な溶媒及び担体でのエマルシ ョン、懸濁液又は分散液として、又は丸薬、錠剤又はカプセルとして調合するこ とができる。このような調合にはその他の不活性担体などの薬学的に許容される 賦形剤、又は安定剤、酸化防止剤、結合剤、着色剤又は乳化剤又は整味剤などを 含むことができる。

この化合物は適当な無菌溶液での注射、静脈内注入又は丸薬、錠剤又はカプセル として飲み薬の形で都合よ（投与される。カルシウム代謝不調症の治療又は予防 にはこの化合物はその疾病の改善又は予防に十分な投与料量で患者に投与される 。適切な用量範囲は治療すべき容体又は患者の応答に依存して０．１から１０μ ｇである。

同様な用量が悪性形質疾病の治療に本発明の新規な化合物を使用するのに適当で ある。

Ｎ 国際調査報告

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. １．次の構造を有する化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ２は、同じでも異っていてもよく、それぞれ水素及びヒ ドロキシ−保護基からなる群から選ばれ、Ｘは水素及びフェニルスルホニルから なる群から選ばれ、Ｙは水素、ヒドロキシ及び保護されたヒドロキシからなる群 から選ばれ、Ｘ及びＹか互いに結合して炭素−炭素結合を形成することかある。
2. ２．ヒドロキシ−保護基がアシル基又はアルコキシアルキル基である請求項１記 載の化合物。
3. ３．ヒドロキシ−保護基かアルキルシリル基である請求項１記載の化合物。
4. ４．次の構造を有する化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼
5. ５．次の構造を有する化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼
6. ６．医薬的に許容される賦形剤とともに少なくとも１つの請求項１記載の化合物 を含有する医薬組成物。
7. ７．化合物か、単独又は組み合せで、約０．１から約１０μｇの量で存在する請 求項６記載の医薬組成物。
8. ８．医薬的に許容される賦形剤とともに請求項４の化合物を含有する医薬組成物 。
9. ９．化合物が約０．１から約１０μｇの量で存在する請求項８記載の医薬組成物 。
10. １０．医薬的に許容される賦形剤とともに請求項５の化合物を含有する医薬組成 物。
11. １１．化合物が約０．１から約１０μｇの量で存在する請求項１０記載の医薬組 成物。