JPH03501490A - ８，１０‐ジデアザテトラヒドロ葉酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 一ジー　０−−５２口　■ １９７４年１２月２４日に特許されたミード（Ｍｅａｄ）の米国特許第３．８５ ６．９５９号は、１２．５〜１６００■／　ｋｇ　／　ｉ　ｎ　ｊ　／　ｄ　ｉ ｅｍの投与養生にて注射可能剤として利用される５−メチルテトラヒドロホモ葉 酸を用いて、マウスにおけるメトトレキセート感受性白血病Ｌ１２１０並びにＬ １２１０から誘導されたメトトレキセート耐性白血病例えば変異型Ｌ１２１０／ ＦＲ−８，１，１２１０／Ｍ−４６−Ｒ，Ｌ１２１０／Ｃ−９５及びＬ１２１０ ／Ｍ−６６−３Ａを阻害する方法を提供する。

ミード（Ｍｅａｄ）は、次のことを注目している。現代の白血病の治療において 、数年間の比較標準薬としてメトトレキセート（アミドプテリン）が用いられて きた。酵素反応におけるこの化合物の生体内の作用１！樺ではジヒドロ葉酸還元 酵素の作用を阻害することであり、そして葉酸の４−アミノ類似体を構成するこ の薬及び同様な薬は４−アミノ−アンチ葉酸として知られている。白血病が４− アミノ−アンチ葉酸に対して強耐性でありかつ高レベルのジヒドロ葉酸還元酵素 により特徴づけられる場合、成るホモ葉酸誘導体が実質的な抗白血病効果を示す 、ということが最近認識された（ジエイ・エイ・アール・ミード（Ｊ、　Ａ、　 Ｒ，Ｍｅａｄ）、アン・エフ・ワイ（Ａｎｎ、　Ｎ、　Ｙ、　）　。

“アカド・サイ（Ａｃａｄ、５ｃｉ）　”　、　ｌｆｌ！ｌｉ、５１４−５１５ ．１９７１年１１月号）。

テトラヒドロホモ葉酸が試験管内でのチミジル酸シンテターゼの酵素反応におい て効能のある阻害剤でありそしてこの酵素がジヒドロ葉酸還元酵素の作用を代謝 的に上回るかあるいは下回ることが示されている。か（して、生体内でのチミジ ル酸合成の特異的阻害剤への変換によりジヒドロホモ葉酸及び恐らくホモ葉酸は 、高レベルのジヒドロ葉酸還元酵素を有するアメトブテリン耐性細胞の生長を妨 げ得る、と考えられ得る（ジェイ・エイ・アール・ミード（Ｊ、　Ａ、　Ｒ，Ｍ ｅａｄ）等、″′ガン研究（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）、２３７４〜２ ３７９（１９６６））　。

利用される上記の公知の化合物はミード（Ｍｅａｄ）のチャートＩにおいて（２ ）において活性であるのに対し、テトラヒドロホモ葉酸は（３）において活性で あり、そしてミードは５−メチルテトラヒドロホモ葉酸（５−ＭｅＴＥＩ）ＩＰ ）はメチオニンシンテターゼの作用に関して（４）において活性であると確信し た。

上上二上上 葉酸の酵素反応 ＰｔｅＧ１ｕｓ□■−→ＰｔｅＧｔｕ １、コンシュガーゼ ２、ジヒドロ葉酸還元酵素 ３、チミジル酸シンテターゼ ４、メチオニンシンテターゼ ５、ホルミルグルタミン酸ホルミル転移酵素６、Ｎｓ、Ｎ＋ｏ−メチレンテトラ ヒドロ葉酸還元酵素７、Ｌ−セリンヒドロキシメチル転移酵素８、ホルムイミノ グルタミン酸ホルムイミノ転移酵素９、Ｎ、＊−ホルミルテトラヒドロ葉酸シン テターゼ１０、　Ｎｓ−ホルミルテトラヒドロ葉酸イソメラーゼ１１、　Ｎｓ、 Ｎ＋＊−メチレンテトラヒドロ葉酸脱水素酵素１２、　Ｎｓ−ホルムイミノテト ラヒドロ葉酸シクロデアミナーゼ１３、　Ｎａ、Ｎ１ｏ−メテニルテトラヒドロ 葉酸シクロヒドロラーゼ１４．５−アミノ−４−イミダゾールカルボキシアミド リボヌクレオチドトランスホルミラーゼ １５、グリシンアミドリボヌレオチドトランスホＪレミラーゼ５−メチルテトラ ヒドロホモ葉酸は、式０式％ １９８３年１月１８日に特許されたデグロー・ジュニア（ＤｅＧｒｏｗ、　Ｊｒ 、）等の米国特許第４．３６９．３１９号は、白血病並びに腹水痘性のものを含 めて他の腫瘍系を処置するために１０−デアザアミノプテリン及びその１０−ア ルキル誘導体を用いる方法及び組成物並びに１０−デアザアミノプテリン化合物 を製造す“　る方法を提供する。

これらの１０−デアザアミノプテリン化合物は、の構造を有する。

化合物１０−デアザアミノプテリンにおいては、Ｒ１及びＲ１が両方とも水素で ある。アルキル誘導体においては、Ｒ８及びＲ３の一方又は両方が１個ないし約 ８個好ましくは１個又は２個の炭素原子を有するアルキルであり得る。Ｒ１及び Ｒ１の一方のみがアルキルである場合、他方は水素である。

１９８４年２月１４日に特許されたテンプル（７ｅｍｐｌｅ）等の米国特許第４ ，４３１．８０５号は、葉酸、Ｎｌ１１−メチル葉酸、アミノプテリン、メトト レキセート及びアミノプテリンのジエチルエステルの５−デアザ類似体がヒトの 扁平上皮細胞ガンの細胞Ｎ１１２の生長を阻害し、また実験室の動物において白 血病に対して活性である、ことを報告している０葉酸、Ｎ１６−メチル葉酸、ア ミノプテリン及びメトトレキセートの５−デアザ類似体は、次の構造 〔ここで、Ｒは水素又はメチルのいずれかである。〕を有する。

１９８４年７月１７日に特許されたデグロ−（ＤｅＧｒａｗ）等の米国特許第４ ．４６０，５９１号並びに１９８５年７月３０日に特許されたデグロー等の米国 特許第４，５３２．２４１号は、次式Ｃ式中、Ｒは水素又は１個ないし約８個の 炭素を有するアルキルである。〕 のｌＯ−アルキル−８，ｌＯ−ジブアザアミノプテリンを提供し、またそれらの カルボン酸塩及び酸付加塩が記載されている。

これらの化合物は、メトトレキセートと同様なしかし一層効果のある抗新生物活 性を示す。

デグロ−（ＤｅＧｒａｗ）等は、次のことを注目している。アミノプテリン及び そのＮ−１０−メチル誘導体即ちメトトレキセートは、強力な抗新生物剤として 以前から長（認められてきた。メトトレキセートは、臨床的に有用な抗ガン剤と して約３０年間容認されてきた。これらの薬は、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＰ Ｒ）を阻害する抗代謝物質である。それらは、新生物組織及び正常な宿主組織の 両方に影響を及ぼす。

葉酸のプテリジン環の改変についても研究されている。８−デアザ葉酸の合成及 びアンチ葉酸活性はジェイ・アイ・デグロ（Ｊ、１．ＤｅＧｒａｗ）、アール・ エル・キスリウク（Ｒ，ＬＪｉｓｌｉｕｋ）、ワイ・ゴーモント（Ｙ、Ｇａｕｇ ｈｏｎｔ）及びシー・エム・パフ（Ｃ，Ｍ、Ｂａ−ｕｇｈ）により「ジェイ・メ ト・ケム（Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｗ）、（１９７４）、ｌｌ、４７０Ｊにおいて報 告されており、そして８．１０−ジブアザ葉酸はジエイ・アイ・デグロ−（Ｊ、 Ｉ、Ｄｅｇｒｏｗ）、アール・エル・キスリウク（Ｒ，Ｌ、Ｋ１５ｌｉｕｋ）　 、ブイ・エイチ・ブラウン（Ｖ、Ｈ，Ｂｒｏｗｎ）及びワイ・ゴーモント（Ｙ、 Ｇａｕｍｏｒ＋ｔ）により「ケム・パイオル・プテリジン類（Ｃｈｅｗ　Ｂｉｏ ｌ　Ｐｔｅｒｉｄｉｎｅｓ）Ｊ、２２９（１９７９）　」において報告されてい る。これらの化合物の両方とも活性なアンチ葉酸であるが、ＤＨＦＲに有意的に は影響を及ぼさなかった。エイ・スリニヴアサン（＾、５ｒｉｎｉｖａｓａｎ） 及びエイ・ディー・ブルーム（Ａ、Ｄ。

Ｂｒｏｏｍ）は、「ジエイ・オーダ・ケム（Ｊ　Ｏｒｇ　Ｃｈｅｗ）、　４ｆｉ 、　１７７７（１９８１）　Ｊにおいて８−デアザアミノプテリン及び８−デア ザメトトレキレートの製造を報告しているが、これらの化合物についての生物学 的活性は報告していない。

１９８５年７月２日に特許されたテンプル（Ｔｅｍｐｌｅ）等の米国特許第４． ５２６．９６４号並びに１９８５年８月２０日に特許されたテンプル等の米国特 許第４．５３６．５７５号は、次のことを指摘している。葉酸Ｎ′６−置換葉酸 、アミノプテリン、Ｎ　ｌ　６−置換アミノプテリン及びアミノプテリンのジエ チルエステルの５−デアザ類似体はヒトの扁平上皮細胞ガンの細胞隘２の生長を 阻害し、また実験室の動物において白血病に対して活性である。ここで言及され る葉酸及びＮ”−置換葉酸の５−デアザ類似体は次の構造 を有し、そしてここで言及されるアミノプテリンおよびＮｌ０−置換アミノプテ リンの５−デアザ類似体は次の構造を有し、しかしてＲは水素、ＣＨ３、ＣＨｓ ＣＨｚ、ＣＨｓＣＨｚＣＨｔ　。

ＣＨｚ−ＣＨＣＨｔ又はＣＩ（＝ＣＣＨ１である。

１９８７年８月４日に特許されたタイラー（Ｔａｙｌｏｒ）等の米国特許第４． ６８４．６５３号は次のものを提供する：〔式中、ＲＩはアミノ又はヒドロキシ でありそしてＲ３は水素、メチル又はエチルであり、＊で指摘される炭素原子の 回りの立体配置はしてある。〕 のピリド（２，３−ｄ）ピリミジン、 〔式中、Ｒ１はアミン又はヒドロキシでありそしてＲ＠は水素、メチル又はエチ ルであり、＊で指摘される炭素原子の回りの立体配置はＬである。〕 の５．６．７．８−テトラ１ニトロピリド（２，３−ｄ）−ピリミジン、 （ｉｉ）それらの互変異性形並びに （ｉｔｉ）製薬的に許容可能なそれらのアルカリ金属、アルカリ土類金属、非毒 性金属、アンモニウム及び置換アンモニウムの塩。

これらの化合物は抗新生物剤であり、また基質として葉酸及び特に葉酸の代謝性 誘導体を利用する一種又はそれ以上の酵素（ジヒドロ葉酸還元酵素、チミジル酸 シンテターゼ及び葉酸ポリグルタミン酸シンテターゼを含めて）に影響を及ぼす 。

特にＮ−（４−（２−（２−アミノ−４−ヒドロキシ−５゜６．７．８−テトラ ヒドロピリド〔２゜３−ｄ〕ピリミジン−６−イル）−エチル〕ベンゾイル）− Ｌ−グルタミン酸は、無類の抗代謝物質である。この化合物は、メトトレキセー トに匹敵するＬ−１２１０白血病に対する良好な活性を維持する一方、ジヒドロ 葉酸還元酵素の弱阻害剤であってＤＨＦＲ以外の葉酸関連酵素の標的に対して有 望な活性を示す。

本発明によると、式 〔式中、Ｒ１及びＲＺは１個ないし約８個の炭素原子を有するアルキル及び水素 から選択される。〕 の８，１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸誘導体並びにそれらのカルボン酸塩及び 酸付加塩が提供される。

これらの化合物は、２．４−ジアミノアンチ葉酸及び５−メチルテトラヒドロホ モ葉酸のような従来の葉酸誘導体とは異なり、ジヒドロ葉酸還元酵素及びチミジ ル酸シンターゼ酵素の非有意的阻害しか示さず、驚くべきことにＬ１２１０ネズ ミ白血病細胞の強い培養阻害並びにグリシンアミドリボチドトランスホルミラー ゼ及びアミノイミダゾールカルボキシアミドリボチド転移酵素の適度の阻害を示 す。

本発明の範囲に入る８、１０−ジデアザテトラヒドロ葉酸誘導体の例には次のも のがある： 並びにそれらのカルボン酸塩及び酸付加塩。

本発明によると、価値ある独特の性質例えばＬ１２１０ネズミ白血病細胞の生長 の阻害に有意的に効果がある性質を有する式ｌの８．１０−ジデアザテトラヒロ ド葉酸誘導体が新規化合物として提供される。

本発明によるとまた、式ｌの８，１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸誘導体をもた らす合成が提供される。

従って、これらの８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸誘導体はヒトのガンの処 置に利用性があると期待される。

従って、本発明はまた、白血病及び腹水症性の腫瘍を処置する方法において、異 常な割合の白血球又は悪性の他の証拠を有する温血動物に治療的でかつ無毒的な 量の式Ｉの８．ｌＯ−ジブアザテトラヒドロ葉酸誘導体をそのまま又は製薬的に 許容可能なそのカルボン酸塩又は酸付加塩の形態にて投与することを特徴とする 上記方法を提供する。該カルボン酸塩はＣ００）ｌ蟇の一方又は両方の中和によ り形成され、そして該酸付加塩は該８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸誘導体 の一つ又はそれ以上の遊離ＮＨオ基でもって形成される。

８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸誘導体の製造のための本発明の方法は、Ｒ １がメチル即ちＣＨｓとしてかつＲ３が水素として例示されている次の工程を含 む合成である。

上記の合成の概要が示すように、熱１０％ＮａＯＨでの２．４−ジアミノ−４− デオキシ−８，１０−ジデアザプテロイン酸（１）の加水分解は４−ＮＨよ基の ４−ＯＨへの置換をもたらし、８．１０−ジデアザプテロイン酸（２）を生じる 。化合物（２）は、このベンゾエートのカルボキシル基がイソブチルクロ１ホー メートによって形成されるその混合無水物として活性化されてジエチルし一グル タメートとカップリングされ、ジエチル８，１０−ジブアザ葉酸エステル（３） を生じる。ｌＮ−ＮａＯＨを含有する２−メトキシエタノール中での該ジエステ ル（３）のケン化は、８．１０−ジブアザ葉酸（４）を生じる。酸性媒質中当量 のホルムアルデヒドの存在下白金触媒上での（４）の水素化は、５−Ｎ−メチル テトラヒドロ−８，１０−ジブアザ葉酸（５）を生じる。

ホルムアルデヒドの不存在下での葉酸中間体（４）の水素化は、テトラヒドロ− ８，１０−ジブアザ葉酸（Ｒ１及びＲ１がＨである。

）それ自体を生じる。

上記の概要においてＲ，及びＲ２に対する他のアルキル基の置換は当業者にとっ て明らかであり、水素及びアルキル又は異なるアルキルがＲ，及びＲ１として組 合わされる。

工程１において、ピリミジン環の４−アミノ基の加水分解は、５０〜１５０℃の 温度にて適当なアルカリ金属水酸化物での処理により行われ得る。該加水分解は また、同様な温度にて鉱酸のような強酸性媒質中で行われ得るｅ　ｐｇがアルキ ルである式（１）の１０−アルキル置換類似体が用いられる場合は、工程１にお ける生成物及びそれに続く工程はｌＯ−アルキル置換体をもたらす。

工程２において、安息香酸部は、そのトリエチルアミン塩を極性有機溶媒中イソ ブチルクロロホーメートで処理することによって混合無水物に変換させることに より活性化される。クロロギ酸の他のエステルが用いられ得るのと同様に、トリ ブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、コリジンのような他の有機第３級アミン 塩基も用いられ得る。該混合無水物は常温にてジエチルし一グルタメートと反応 せしめられ、そしてその生成物は最も良好にはシリカゲル上でクロマトグラフィ ーにより精製される。

工程３において、エステル化基の加水分解は、室温又はそれより高い温度にて水 性アルカリで行われる。当該ジエステルは、２−メトキシエタノールのような適 当な溶媒中に溶解されそして加水分解が完了するまで該水性アルカリの存在下で 保持され得る。当該加水分解生成物である葉酸類似体は、次いで酢酸又は塩化水 素酸のような酸の添加により沈澱され得る。その沈澱物は、回収され、洗浄され そして乾燥され得る。

工程５において、基質である当該葉酸類似体は、水性の酸媒質中好ましくは補助 溶剤として酢酸を含有する媒質中室部かつ大気圧にて水素化される。酸化白金又 はパラジウムのような触媒が用いられ得る。還元アルキル化により５−Ｎ−アル キル生成物を得るためには、当量のホルムアルデヒド、アセトアルデヒド等のよ うな適切なアルデヒドを添加することが必要である。

アルデヒド試薬が除かれる場合は、５位においてＮＯを含有する目的化合物が得 られる。

処理操作を以下に例示する。

■ −ジー゛アザ　−ロイン ０．８８　ｇ即ち′２．８ミリモルの２．４−ジアミノ−４−デオキシ−８，１ ０−ジデアザプテロイン酸（１）を、アルゴン雰囲気下で１５ｍ１の１０％Ｎａ ＯＨ溶液とともに８５〜９０°に加熱した。

この反応についてのＨＰＬＣ（高圧クロマトグラフィー）分析は、５時間後最大 変換度を示した。反応混合物を、５°Ｃに４８時間冷却した。生じた沈澱物（ジ ナトリウム塩）を集めそして氷のように冷たい少量の１０％　ＮａＯＨ溶液で洗 浄した。この沈澱物を少量のＨＪとともにかくはんし、そしてそのｐａｌをＨＯ Ａｃの添加により５に調整した。懸濁している固体を１０分間かくはんし、次い で集め、少量のＩ（ｔＯで洗浄し、そして乾燥後０．５２　ｇの明灰色の固体を 得た。質量スペクトルは、３１０のｖａ／ｅ　（計算値３１０）であった、Ｃい ＨｒａＮａＯｓ・ｏ、５Ｈｔｏの分析は、計算値はＣ６０，２，Ｈ４，４２，Ｎ １７．５でありそして測定値はＣ６０，２，Ｈ４，５１゜Ｎ１７．５であった。

−−ジー゛　ジエ　ルエスール３ ０、５２　ｇ即ち１．７ミリモルの８．１０−ジデアザプテロイン酸（２）を、 アルゴン雰囲気下で１５−ｌの乾燥ＤＭＦとともにかくはんした。トリエチルア ミン（０，６９ｇ即ち６．８ミリモル）を添加しそしてその混合物を１５分間か くはんし、次いでイソブチルクロロホーメート（０，８７ｇ、６．４ミリモル） を添加した。１時間後、一部のみが溶解している液が得られた。引き続いて、反 応混合物をトリエチルアミン（０，０１７ｇ即ち１．７ミリモル）及びイソブチ ルクロロホーメート（０，２３ｇ即ち１．７ミリモル）で処理した。２０分後、 完全な溶液となった。トリエチルアミン（０，８１ｇ即ち８．１ミリモル）及び 次いでｌＯ−！のＤＭＦ中のジエチル−し−グルタミン酸ジエチルエステルを添 加し、そして生じた溶液を２０分間かくはんした。溶媒を４０゜（０，１１）に て除去し、そして残渣をＣＨＣＪ２ｓ中に溶解し、次いでＩ（ｔｏ及び希ｆｆＮ Ｈ，ｉ０８で洗浄し、乾燥しそして溶液を真空下で蒸発させた。ガム状残渣を、 ＣＩ（（ｌｓを含むシリカゲル上でＣ）＋３０Ｈ−ＣＨＣ１ｓ　Ｒ離液にてクロ マトグラフにかけた。１１０■の黄色固体の生成物が、２：９８のＣＨｓＯＨｉ ＣＨＣ１３にて溶離された。　Ｃａ５ｔ（ｚＪｓＯ＊・０．５Ｆ１２０の分析は 、計算値はＣ５９゜５．Ｎ５゜９９゜Ｎ１３．９でありそして測定値はＣ５９， ３，Ｎ５．８０．　Ｎ１３，６であった。

−ジー゛ア゛ １１０■即ち０．２２ミリモルの８．１０−ジブアザ葉酸ジエチルエステル（３ ）を、１　ｍｌのｌＮ−ＮａＯＨ溶液及び１　ｖｂＱの２−メトキシエタノール で処理した。その溶液を１５時間かくはんし、次いで溶媒を４０”　（０，１ｍ ｍ）にて除去した。残渣を１ｔａｉｌのＨ！Ｏで処理し、そしてＨＯＡｃでｐＨ ５，５まで酸性化した。生じた沈澱物を集め、ＨｇＯで洗浄しそして乾燥して７ ４１ｇの生成物を黄色固体として得た。ＣｔｌＨｚｒＮｓＯｈ・２ＨｚＯの分析 は、計算値はＣ５３，１，Ｎ５．３０．　Ｎ１４゜７でありそして測定値はＣ５ ３，４，Ｈ４，６７、Ｎ１４．５であった。

−メ　ル−　−ジー゛　ジーｒ　７　−＋　＋ｌ二上旦果鼠皿 ７４■即ち０．１７ミリモルの８．ｌＯ−ジブアザ葉酸（４）を、０．２４ミリ モルのＦｌｉを含有する２１１乏のＵＺＯ及び８　ｓ＋４の酢酸中に溶解した。

　ＰｔＯ＊　（２４■）を添加し、そしてその混合物を大気圧にて水素化した。

１５ｍｆの１１よ（理論量１２．４ｍ１）の９収後水素の吸収は止み、そしてホ ルムアルデヒド（３５％のホルムアルデヒド０．０１ｈβ即ち０．２０ミリモル ）を添加した。

引き続き水素化すると、４　ｍｌのＨｌ（理論量３．８＋＋／りが速やかに吸収 した。その混合物をセライトを通じて濾過し、そして溶媒を４０°　（０，１閣 ）にて除去した。残渣を２ｍｌのｏｚＯで２回処理しそして各回乾燥すると、９ ０１ｇの白色固体が得られた。

質量スペクトルは、４５７のｍ／ｅ（ＴＭＳ）　（計算値４５７）であった、　 ＣｚＪｘＪｓＯｂＣｆ　・ＨｔＯの分析は、計算値はＣ５１，６，Ｎ５．９０゜ Ｎ１３．６でありそして測定値はＣ５１゜４．　Ｎ５．８２．及びＮ１３．２で あった。

０−ジー゛アザ−ｒ　７　−−−ヒ゛口１０ｍｊ！のＨＯＡＣ％　９　ｍｌのＮ ２０及び２ｍｊ！（０，２４ミリモル）のＨＣ１溶液中に溶解された１００１１ ｇ即ち０．２３ミリモルの８゜１０−ジブアザ葉酸（４）を、２５ｇのＰｔＯ， 上で大気圧にて水素化した。１時間後、１５１！のＯＸ（理論量１５ｍｆｆ１） が吸収した。

その混合物をセライトを通じて濾過し、次いで０．１ｍの圧力（４０°）にて乾 燥した。残渣を１０−１のｔ１２０で２回処理しそして各回乾燥すると、１００ ｍの白色固体が得られた。質量スペクトルは、４４３の−／ｅ　（計算値４４３ ）であった。

８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸は、それ自体であるいは製薬的に許容可能 な希釈剤又は担体と一緒にして投与され得る。従って、本発明はまた、投与量単 位当たり０．１ないし約５００１１ｇの８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸を 製薬的に許容可能な無毒で不活性な担体又は希釈剤と一緒に含んでなる投与量単 位の形態の製薬組成物を提供する。

８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸は、そのままあるいはそれらのカルボン酸 塩又は酸付加塩の形態で用いられ得る。カルボン酸塩は、Ｃｏｏ）ｌ基の一つ又 は二つをアルカリ金属又はアルカリ土類金属又はアンモニア又は低級脂肪族アミ ンで中和することにより形成される。酸付加塩は、テトラヒドロ葉酸分子の一つ 又はそれ以上の遊ｊｌＮ）１．でもって形成される。

酸付加塩は好ましくは適当な酸との製薬的に許容可能な無毒の付加塩であって、 例えば無機酸（例えば塩化水素酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸及びリン酸）との付 加塩、並びに有機カルボン酸（例えばグリコール酸、マレイン酸、ヒドロキシマ レイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、サリチル酸、Ｏ−アセチルオキシ安息 香酸、ニコチン酸及びイソニコチン酸）及び有機スルホン酸〔例えばメタンスル ホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシェタンスルホン酸、トルエン−ｐ− スルホン酸及びナフタレン−２−スルホン酸〕のような有機酸との付加塩である 。　− 酸付加塩は公知の方法に従って遊離化合物に変換され得、例えば金属の水酸化物 又はアルコキシド（例えばアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物例えば 水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は水酸化カルシウム）、 金属炭酸塩（例えばアルカリ金属又はアルカリ土類金属の炭酸塩又は炭酸水素塩 例えばナトリウム、カリウム又はカルシウムの炭酸塩又は炭酸水素塩）、アンモ ニア又はヒドロキシルイオン交換樹脂のような塩基であるいは他の適当な試薬で 処理することである。

酸付加塩はまた公知の方法に従って別の酸付加塩に変換され得、例えば無機酸と の塩は適当な希釈剤（生じる無機塩が不溶性でありかくして反応媒質から除去さ れるところの希釈剤）中で酸の金属塩例えばナトリウム塩、バリウム塩又は銀塩 で処理され得る。ｒＩＩ付加塩はまた、アニオン交換調製物での処理により別の 酸付加塩に変換され得る。

’８．１０−ジデアザテトラヒドロ葉酸あるいはそのカルボン酸塩又は酸付加塩 は、経口投与及び非経口投与（静脈内、腹膜腔内、皮下及び筋肉内）を含めてい かなる利用可能な経路によっても動物に投与され得る。投与量は、白血病又は腹 水症性の腫瘍を快方させるのに充分な量であり、白血病のタイプ、動物の種及び 動物の重量に依存する０例えば、ヒトの投与においては、１日当たり約０．１ｇ ／ｋｇないし約５００　ｇ／ｋｇの範囲内の８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉 酸の投与量で充分であるはずである。５００■／ｋｇに近づく上記範囲の上方部 の投与量は、通常毒性を低減させるためにロイコバラン（ジー５−ホルミルテト ラヒドロ葉酸）とともに投与される。下等試験動物の処置において、同様な投与 量範囲が治療的である。投与量の上限は、有害な副作用により課せられそしてヒ トを含めて処置されるべき動物についての試行錯誤により決められ得る。

投与を容易にするため、８，１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸あるいはそのカル ボン酸塩又は酸付加塩は組成物の形態で好ましくは投与量単位の形態で提供され 得る。当該化合物はそれ自体投与され得るけれども、該化合物を希釈しそして取 り扱いを容易にするところの製薬的に許容可能な担体とともに通常投与される。

「製薬的に許容可能な」という用語は、担体（並びに生じる組成物）が無菌でか つ無毒であることを意味する。

担体又は希釈剤は、固体、半固体又は液体であり得そして８゜１０−ジブアザテ トラヒドロ葉酸のためのビヒクル、賦形剤又は媒質として働き得る。希釈剤及び 担体の例には、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビット、マンニ ット、でん粉、アラビアゴム、硫酸カルシウム、鉱油、カカオ脂、テレオブロマ 油、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、シロップ、メチルセルロース、ポ リオキシエチレンソルビタンモノラウレート、メチル−及びプロピル−ヒドロキ シベンゾエート、タルク及びステアリン酸マグネシウムがある。

取り扱い上の都合のため、８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸と担体又は希釈 剤は、特に投与量単位での使用が意図される場合、カプセル、サツシェ、カッシ エ、ゼラチン、紙又は他の容器中に包まれ又は封入され得る。投与量単位は、例 えばタブレット、カプセル、座薬又はカッシエの形態を取り得る。

次の例は、投与量単位で８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸あるいはカルボン 酸塩又は酸付加塩が調製され得るところの種々の形態を例示する。

８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸　１５ラクトース　８６ コーンスターチ（乾燥）　４５．５ ゼラチン　２・５ ステアリン酸マグネシウム　１．０ ８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸が、粉末化され、メツシュふるいに通され そしてラクトース及び３０■のコーンスターチ（両方ともふるいに通されたもの ）と充分に混合される。

混合された粉末は、ゼラチンが１０％−／ｗ　’Ｒ液になるようにゼラチンを水 中でか（はんかつ加熱することによって調製された温かいゼラチン溶液で塊にさ れる。この塊がふるいに通すことにより顆粒化され、そしてこれらの湿った顆粒 が４０°Ｃにて乾燥される。

これらの乾燥された顆粒はふるいに通すことにより再顆粒化され、残りのでんぷ ん（即ちコーンスターチ）及びステアリン酸マグネシウムが添加されそして充分 に混合される。

これらの顆粒は、各タブレットが１５０１ｇの重量になるように圧縮されてタブ レットにされる。

例２ ゛し・　の几　１区りど二３−二とニルＬシ己−上一８．１０−ジブアザテトラ ヒドロ葉酸　１００ラクトース　３９ コーンスターチ（乾燥）８０ ゼラチン　４・０ ステアリン酸マグネシウム　２．０ 調製法は、６０ｇのでんぷんが顆粒化においてそして２０ｇがタブレット化にお いて用いられる以外は例１の調製法と同一である。

例３ 左１立土坐処方隻　亙／左１立土 ８、ｌＯ−ジブアザテトラヒドロ葉酸　２５０ラクトース　１５０ ８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸及びラクトースがふるいに通されそしてこ れらの粉末が一緒に充分混合された後、各カプセルが４００ｇの混合粉末を含む ように適当な大きさの硬質ゼラチンカプセル中に充填される。

８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸　５０テオブロマ油　９５０ ８、ｌＯ−ジブアザテトラヒドロ葉酸が、粉末化され、ふるいに通されそして４ ５℃にて溶融テオブロマ油とともにすりつぶされてなめらかな懸濁物にされる。

この混合物が、充分にかくはんされそして公称１ｇ容量の各モールド中に注がれ て座薬にされる。

例５ 左−と」二五　亙Ｚ左ヱ之五 ８、ｌＯ−ジブアザテトラヒドロ葉酸　１０Ｇラクトース　４００ ８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸が、メツシュふるいに通され、前もってふ るいに通されたラクトースと混合されそして各カッシェが５００ｇを含むように 適当な大きさのカツシュ中に充填される。

例６ 筋肉内注射 ビヒ　ル　の　等　亙 ８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸　１０クエン酸ナトリウム　５．７ ナトリウムカルボキシメチルセルロース（低粘度等級）２．０ メチルパラ−ヒドロキシベンゾエート　１．５プロピルバラ−ヒドロキシベンゾ エート１．Ｑ＋ｍｆｆ１になる量の注射用の木偶７ 腹膜腔内、静脈内又は皮下注射 Ｂｖ′″　の　・六ご ８．１０−ジブアザテトラヒドロ葉酸 クエン酸ナトリウム ナトリウムカルボキシメチルセルロース（低粘度等級） メチルバラ−ヒドロキシベンゾエート プロビルバラ−ヒドロキシベンゾエート１００ｍｆになる量の注射用の水 ０．２　国際調ｆｗ＆告 国際調査報告

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. １．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ１及びＲ２は１個ないし約８個の炭素原子を有するアルキル及び水素 から選択される。〕 の８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物並びにそれらのカルボン酸塩及び 酸付加塩。
2. ２．Ｒ１が水素でありそしてＲ２がアルキルである、請求の範囲１記載の８，１ ０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物。
3. ３．アルキルがメチルである、請求の範囲２記載の８，１０−シデアザテトラヒ ドロ葉酸化合物。
4. ４．Ｒ１及びＲ２が各々水素である、請求の範囲１記載の８，１０−シデアザテ トラヒドロ葉酸化合物。
5. ５．Ｒ１及びＲ２が各々アルキルである、請求の範囲１記載の８，１０−シデア ザテトラヒドロ葉酸化合物。
6. ６．白血病又は腹水症性の腫瘍を処置するための投与量単位の形態の製薬組成物 において、白血病又は腹水症性の腫瘍を快方するのに治療的に有効な量である投 与量単位当たり約０．１ないし約５００ｍｇの範囲の量の請求の範囲１記載の８ ，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物を製薬的に許容可能な無毒の担体又は 希釈剤と一緒に含んでなることを特徴とする上記製薬組成物。
7. ７．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸が、製薬的に許容可能な酸付加塩の形 態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
8. ８．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸が、製薬的に許容可能なカルボン酸塩 の形態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
9. ９．タブレット形態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
10. １０．カプセルの形態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
11. １１．座薬の形態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
12. １２．カッシェの形態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
13. １３．無菌の水性の形態にある、請求の範囲６記載の製薬組成物。
14. １４．白血病及び腹水症性の腫瘍を処置する方法において、異常な割合の白血球 又は悪性の他の証拠を有する混血動物に治療的でかつ比較的無毒的な量の請求の 範囲１記載の８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物を投与して白血病又は 腹水症性の腫瘍を快方することを特徴とする上記方法。
15. １５．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物が、製薬的に許容可能な酸付 加塩として投与される。請求の範囲１４記載の方法。
16. １６．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物が、製薬的に許容可能なカル ボン酸塩として投与される、請求の範囲１４記載の方法。
17. １７．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物が１日当たり約０．１ないし 約５００ｍｇの範囲の量で投与される、請求の範囲１４記載の方法。
18. １８．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物が不活性な希釈剤又は担体と ともに投与される、請求の範囲１４記載の方法。
19. １９．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物が経口的に投与される、請求 の範囲１４記載の方法。
20. ２０．８，１０−シデアザテトラヒドロ葉酸化合物が非経口的に投与される、請 求の範囲１４記載の方法。