JPH03503159A - 眼科用サイクロスポリン組成物 - Google Patents

Abstract

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Description

【発明の詳細な説明】 眼科用サイクロスポリン組成物 本発明は、患者の眼にサイクロスポリンを局所投与することによって涙の産生量 を増加させる方法、およびそのための組成物に関する。

光里■宵景 正常な眼の露出部分は常に薄い涙液の膜に覆われている。

この膜は角膜上皮及び結膜上皮を正常に保つのに重要であり。

角膜に、光学的に高質な表面を提供する。さらに、涙液膜の水性部分は、まばた きの際に瞼の潤滑剤として作用する。涙に含有されるある種の酵素１例えば、免 疫グロブリンＡやリゾチーム、β−リジンなどは静菌特性も有する。

涙液機構は分泌系（涙液源）２分配系および排泄系（排水溝（ｓｉｎｋ）　）か ら構成される。分泌系では、多量の涙液膜。

つまり水性涙液が主要涙腺及び副涙腺から供給される。水性涙液を持続的に産生 じ、そして排泄することは、角膜上皮および結膜上皮の湿潤状態を維持し、上皮 呼吸のための栄養を供給し、そして涙の流動による洗浄作用で眼球表面を洗浄す るという点で重要である。

涙液膜の異常として、乾性角結膜炎（すなわち、ＫＯ２）と呼ばれる。水性涙液 の産生の完全欠乏または部分的欠乏が挙げられる。比較的軽症の症例では、ＫＯ ２の主な症状は。

異物感または軽度の刺激感である。これがさらに進行すると。

常に強い灼熱感や刺激感が起こることもあり、患者を衰弱させる。さらに重症例 では、糸状角膜炎が進行し、角膜表面に多数の繊維状、あるいは糸状の物質が付 着し、疼痛症状をひきおこす。最近のデータは、これらの糸状物質が連続した正 常角膜上皮細胞に侵入することを示唆している。瞼の運動による剪断（ｓｈｅａ ｒ）がこれらの糸状物質を引っばり、疼痛を引き起こす。この段階のＫＯ２の治 療は非常に困難である。

ＫＯ２はしばしば二次感染を合併する。おそら＜、ＫＣ３Ｃ１０水性涙液中の抗 菌性リゾチーム濃度の低下に起因して。

眼の正常防御機構におけるいくつかの異常が、起こるようである。

ＫＯ２ば、他に明らかな全身性異常が存在しない場合にも発病し得るが、しばし ば全身疾患と関連している。ＫＯ２は眼の乾燥９口腔の乾燥および関節炎を特徴 とするシェーグレン症候群といった広範な全身性疾患（ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｉｎ ｖｏｌｖｅｍｅｎｔ）の一部として起こることがある。

組織学的にはＫＯ２（シェーグレン症候群の一部または単独疾患である）におい て、涙腺に見られる最初の変化は、腺組織の変性を伴うリンパ球細胞および形質 細胞の湿潤物の局所的な変化である。これらの変化は他の組織の自己免疫疾患で 見られる変化にＲ４ｕしており、ＫＯ２が自己免疫の基礎を有するのではないか との推測が生まれる。

シェーグレン症候群は一種の外分泌腺（ｅｘｏｃｒｉｎｅ　ｇｌａｄ）機能障害 とみなされている。特徴的には、涙腺では単核細胞の湿潤が認められ、最終的に 線構造が破壊される。

ＫＣ３に対する従来の治療法は対症療法である。通常、水分が不足して乾燥した 状態の眼を人工の涙代用物により治療する。しかし症状の緩和は、投与した人工 涙液の眼内保持時間により限定される。典型的には９点眼された人工涙液の作用 は急速に消散し、約３０分から４５分以内には消散してしまう。

このような製剤の効果は最初は有効であるが、十分長時間は持続しない。正常涙 液を補充するに必要な人工涙液を繰り返し投与する必要があり、患者にとって不 便である。しかも。

このような治療は単に乾燥した状態の眼の症状を緩和するだけの作用であり、そ の基礎にある疾患あるいは眼の乾燥状態の原因を治療するものではない。

このような症状を治療するために、コルチコステロイドの全身投与が提唱されて いる。しかし、乾燥した状態の眼にコルチコステロイドを全身投与する利点は、 まだ立証されていない。はとんどの乾燥した眼の症例では、抗炎症薬の長期使用 の危険性が、その潜在的利点を上回るようである。ピロカルピンの希釈溶液を経 口投与し自律神経系を刺激して水性涙液の産生を増加させることも示唆されてい る。ピロカルビン経口摂取による不愉快な副作用のため、この治療法はそれほど 広く受は入れられていない。

乾燥した状態の眼の治療に外科的処置も挙げられている。

深刻な粘膜破壊が存在する部分では、粘膜移植が提唱されている。乾燥した眼の 治療に耳下腺（唾液腺）管の移植が有用であり得ることも示唆されている。しか し、乾燥した状態の眼に対する外科的改変は非常に思い切った治療法であり、こ のような改変から得られる利益についても疑問視されていることから、このよう な方法は最終手段としてのみ用いるのが普通である。

サイクロスポリンは真菌種ｂｈＺ庶１ａｄｉｕｍ　ｉσ１江岬Ｇａ５５培養ブロ スから単離される代謝産物である。サイクロスポリンは１１個のアミノ酸残基を 有する中性の疎水性環状ペプチドであり、従来未知であった９個の炭素原子を有 するＮ−メチル化アミノ酸を包含する（Ｗｅｎｇｅｒ　　ｒサイクロスポリンＡ ｌｌ　１４〜２５頁「サイクロスポリン及び類慎体の合成Ｊ　、　Ｇｒｕｎｅ　 ＆　５ｔｒａｔｔｏｎ。

Ｉｎｃ、（Ｎｅｅｙ　Ｙｏｒｋ、　１９８３年）。最初のサイクロスポリン（Ｃ ｓＡ）が単離されて以来、別のサイクロスポリン（Ｂ、　Ｃ，Ｄ、　ＥおよびＧ ）がいくつか報告されている。１９７８年９月２６日Ｈａｒｒｉらによって発行 された米国特許第４．１１７．１１８号に記述されているように、サイクロスポ リンは通常の有機溶媒のほとんどに容易に溶解し２石油エーテルおよび水には実 質的に不溶性である。スイス、バーゼルの５ａｎｄｏｚ社がＳａｎｄｉｍｗｕｎ ｅの商品名で販売しているように、経口投与用のサイクロスポリンはオリーブオ イルに溶解されて２食物でさらに希釈され、静脈注射用のものはポリオキシエチ ル化ヒマシ油とエタノールとに溶解されている。

サイクロスポリンＡは当初、抗真菌剤としての使用が提案されたが、免疫抑制作 用の方が抗真菌力より著しいことが認められた。強力な免疫抑制剤であるサイク ロスポリンは、支間移植の生存時間を延長させるために用いられる。正確な作用 機構は不明であるが、実験データから、サイクロスポリンの効果は免疫適格細胞 （−次Ｔヘルパー細胞）に対する特異的可逆的阻害によると考えられている。リ ンフ才力イン産生。

γ−インターフェロン産生、およびインターロイキン−２またはＴ細胞成長因子 の放出もサイクロスポリンにより阻害される。

サイクロスポリンが免疫抑制特性を有することから、免疫システムに関連する疾 患に用いられるようになってきた。例えば、米国特許第４．６４９．０４７号に は、前眼部または後眼部での水晶体アナフィラキシ−性内眼球炎および葡萄膜炎 の治療方法について記載されており、ここではサイクロスポリンが点眼投与され る。その他の眼科用の用途では、サイクロスポリンは外販（例えば、角膜）疾患 の治療にのみ局所的に使用されている。

ＢｅｎＥｚｒａら（Ａｍｅｒ、　Ｊ、並ｈｔｈＥ山ｍｏ１．１０１：２７８−２ ８２　（１９８６）　）は１重症の春期角結膜炎における２％サイクロスポリン の点眼の効果について記述している。重症の春期角結膜炎は涙液欠乏に無関係の 季節性アレルギー疾患である。

Ｈｕｎｔｅｒら（ＣＩｉｎ、　Ｅｘ　、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　４５：１７３−１ ７７　（１９８１）　）は。

角膜移植の拒絶反応のウサギのモデルにおいてサイクロスポリンを点眼投与し、 陽性結果を得たことを記述している。

Ｂｉｏｓｊｏｌｙら（Ａｒｃｈ、　Ｏｈｔｈａｌｍｏｌ、１０２：１８０４−１ ８０７　　（１９８４）　）は、サイクロスポリンの局所投与が重症の間質型角 膜ヘルペス（ｈｅｒｐｅｔｉｃ　ｓｔｒｏｇｅａｌ　ｋｅｒａｔｉｔｉｓ）の治 療に対して有益な予防効果を有していることを報告している。

Ｍｏ５ｔｅｌｌｅｒら（Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ　Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ　 ５ｕｐｐ、　２５．３：３８（１９８４）　）は、ウサギの角膜同種間移植拒絶 反応を、瞼の盲管下部に１０％サイクロスポリンＡ軟膏を１回投与することによ り治療したことを記載している。

サイクロスポリンは、他の眼科用の用途で治療されるべき疾患が眼表面に限定さ れていない場合に全身的にも使用されている０例えば、　Ｎｅ５ｓｅｎｂｌａｔ ｔら（Ａｍｅｒ、　Ｊ、　Ｏｐｈｔｈａ１ｍｏｌ＋９６：２７５−２８２（１９ ８３）　）は、サイクロスポリンの全身投与後に患者の一部で非感染性後部葡萄 膜炎が臨床的に改善されたことを報告している。

サイクロスポリンは主に経口または注射投与される。残念ながら、サイクロスポ リンの全身投与は腎毒性（腎不全）の高い発生率、胛前性症例、リンパ腫瘍の発 生率の増加２日和見感染の発生率の増加などと関連づけられている。サイクロス ポリンはサイトキサンやアジオチオプリンなどの他の免疫抑制剤に比べ、その毒 性はごくわずか低いだけである。サイクロスポリンの全身投与の副作用は非常に 強く、一般的であるので、その使用は致命的疾患、あるいは場合によって失明の おそれのある重症疾患にのみ限定される。最後に、サイクロスポリンの全身投与 は、サイクロスポリンが極端に高価であることから限定される。

１９８７年３月１０日に発行されたＫａｓｗａｎの米国特許第４．６４９．０４ ７号に記載されているように、サイクロスポリンの局所投与は。

葡萄膜炎および水晶体アナフィラキシ−内眼球炎などの種々の眼の免疫媒介疾患 （ｉｍｍｕｎｅ　ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）の治療に有益である 。これは望ましくない副作用や全身投与のコストの問題を避けるのにも、好まし い投与方法である。

これまでのところ１局所投与、全身投与に関わらず２分泌腺機能障害、涙腺機能 障害あるいは水分が欠乏して眼が乾燥した状態をサイクロスポリンで治療するこ とは提案されていない。

サイクロスポリンはこれまでにビーナツツオイル、市販されている軟膏基剤、お よびヒマシ油などの種々な賦形剤とともに局所投与されてきたが１通常のキャリ アーはオリーブオイルである。残念ながら、オリーブオイル中のサイクロスポリ ンをヒトあるいはイヌの眼に局所投与することは、しばしば灼熱感、疼痛、およ び発赤を伴う。場合によっては、眼瞼水腫および眼周囲の脱毛などの他の副作用 が観察された。同様の問題が他の賦形剤によるサイクロスポリンの眼科用局所施 用でも起こっている。しかし現在では、このような不快な副作用はキャリアーに よるものであり、サイクロスポリンによるものではないことが証明されている。

残念ながら、サイクロスポリンの溶解性は非常に限定されており、眼科の用途で 認められるキャリアーの数が限られている。

従って１本発明の目的は、原因に関係なく正常な眼または涙液欠乏眼の涙液産生 を増加させる方法を提供することである。

本発明の他の目的は、全身性サイクロスポリン治療に関連する生理学的な悪影響 や経済的な問題を伴うことなく、サイクロスポリンに基づ（涙腺機能異常の治療 方法を提供するこである。

本発明の他の目的は、灼熱感や発赤あるいは刺激を引き起こさず、サイクロスポ リンの有効濃度を有する眼科用局所施用組成物を提供することである。

さらに本発明の他の目的は、保存中も安定な眼科用局所施用組成物を提供するこ とである。

さらに本発明の他の目的は、眼の上皮表面の正常治癒を促すような眼科用局所施 用組成物を提供することである。

（以下余白） 発Ｉ坏と１１ 本発明は１局所的にサイクロスポリンを患者の眼に投与することより患者の乾燥 状態の眼を治療することを目的とする。

この治療は、乾燥した眼の原因が何であるかにかかわらず有用であり、涙腺の自 己免疫機能障害に対する治療を包含する。

この治療は、正常な涙の産生の強化または回復、あるいは眼の表面の正常治癒に も有益である。

眼の局所投与に望ましい成分には、コーンオイルに溶解したサイクロスポリンが 含まれる。成分としてさらに酸化防止剤、潤滑剤、抗生物質、抗真菌剤、抗ウィ ルス剤、ピロカルピン、血管収縮剤、界面活性剤、湿潤剤、抗炎症剤（例えば。

コルチコステロイド）、　保存剤、粘液溶解、１７Ｊ（例えば、ブロムヘキシン 、アセチルシスティン）、　その他の成分を含むことがある。

最も好ましい組成としては、コーンオイル中の２％サイクロスポリン、１モル％ アルファ　トコフェロール、およびｏ、ｏｏｓ％メチルパラベンである。

剥ＵηＷ肌 第１図は、正常な雄ビーグル犬１２頭に局所的にサイクロスポリンを点眼した際 の、涙腺（ｌａｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ）に対する経時的（日数）効果（ＳＴＴ 　＋ｕｅ／５ｉｎ）を示すグラフである。治療を行わずに３日間にわたりベース ラインを測定した後、６頭のピーグル大にはオリーブオイル中の２％サイクロス ポリンを１日２回、残りの６頭には偽薬（オリーブオイル）を１日２回局所的に 投与することによって処置した。５ＴＴＯ値を、サイクロスポリン投与犬（■・ ・・　・・・■）及びオリーブオイル投与大（ム・・・　・・・ム）について１ 日２回測定した。７日後に。

すべてのピーグル大を、もう一方の治療グループとクロスオーバーして、さらに ３日間観察した。

第２図は、イヌの乾性角結膜炎の眼の様子を、２％サイクロスポリンで４週間治 療した前（第２図Ａ）と後（第２図Ｂ）とで比較したものである。

主恩Ω升■星脱ユ 本発明は、自己免疫疾患あるいは未知の原因による涙が不足する乾燥した眼に対 する。患者の眼ヘサイクロスポリンを局所的に投与する段階を包含する治療方法 を提供する。本発明は、コーンオイルをベースとするサイクロスポリン組成物を 含有し、これを眼に局所的に投与すると９従来のサイクロスポリン成分にまさる かなり増大した有益性を提供する。

化学構造が見かけ上位ているにも関わらず、オリーブオイルなど先に説明された キャリアー中のサイクロスポリンと。

コーンオイル中のサイクロスポリンとでは、保存剤や酸化防止剤の添加の有無に 関わらず、使用感及び副作用発生率が有意に異なることが、研究により実証され る。またこのような研究により、サイクロスポリンの局所的投与による正常治癒 の促進または実現、あるいは眼の表面の廠痕形成の予防または回復が可能である ことが確立される。

本発明によれば、サイクロスポリンは有効であればいずれの濃度でも３例えば薬 学的に許容し得る賦形剤中において０．０１から飽和濃度まで（例えば、サイク ロスポリン５０重量％まで）のいずれの濃度でも使用することができる。サイク ロスポリン１．１〜２０重量％が好ましい。好ましい賦形剤は前述のようにコー ンオイルであるが、他の薬学的に許容し得る賦形剤として９例えば動物油や植物 油、適当な有機または水性溶媒、サイクロスポリン可溶性の人工の涙液、天然ま たは合成ポリマーまたは適当な膜などが挙げられる。

このような薬学的に許容しうる賦形剤の例としては、オリーブオイル、ビーナツ ツオイル、ヒマシ油、鉱油、ワセリン。

ジメチルスルホキシド、発色団、　Ｍｉｇｌｙｏｌ　１８２　にュージャジー州 、　Ｍｏｎｔ　ＶａｌｅのＤｙｎａｍｉｔ　Ｎｏｂｅｌ　Ｋａｙ−Ｆｒｉｅｓ　 Ｃｈｅａ＋１ｃａｌ　Ｃｏｓ＋ｐａｎｙより入手）、アルコール（例えばエタノ ール、ｎ−プロピルアルコールまたはイソプロピルアルコール）、リポソームま たはリポソーム様の製剤、シリコーン流体及びその混合液などが挙げられる。

本発明の実施において有利に使用できる人工の涙液の賦形剤の例としては２等張 性食塩水、ヒドロキシプロピルメチルセルロースやヒドロキシエチルセルロース のようなセルロースエステル、ポリビニルアルコール、およびその他の市販の人 工涙液が挙げられる。有用なポリマー賦形剤の例としては。

ポリオキシエチル化ヒマシ油が挙げられる。本発明の実施において有利に利用で きる薬学的に許容し得る膜の例としては。

ミクロトン、人工脂質膜、ポリビニルアルコール、またはメチルセルロースが挙 げられる。

本発明の実施に有用なサイクロスポリンは、天然のサイクロスポリンあるいは合 成サイクロスポリンの両者を包含する。

本発明の実施ではサイクロスポリンＡが好ましい。他の型のサイクロスポリン（ 例えば、類似体及びサイクロスポリンＢ。

Ｃ，Ｄ、　ＥおよびＨのような異性体）を使用してもよい。異なるサイクロスポ リンの混合物を使用してもよい。

免疫媒介反応に関連する部位を１カ所を越える数で有する患者において、特異的 抗原に媒介された免疫反応の好ましい治療方法としては、サイクロスポリンを各 関連部位に局所投与する方法が好ましい。例えば、一方の眼だけが免疫媒介性Ｋ Ｃ５にかかっているような場合にも１両方の眼を治療すべきである。驚くべきこ とに、各関連部位がサイクロスポリンで治療されない限り、関連部位のいずれに おいてもサイクロスポリン治療による明らかな効果は得られない。例えば、関連 部位の一方の眼のみを治療する場合には、サイクロスポリンの効果はごくわずか しか得られない、このことは１局所的に投与されたサイクロスポリンが、免疫媒 介反応の引き金となる特異的抗原の求心性免疫認識（ａｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｍｍ ｕｎｅ　ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ）を干渉あるいは遮断していることを示す。特 異的抗原が生じるような部位の各々をサイクロスポリンで治療しない限り。

Ｔ細胞抗原シグナル関連部が未治療部位で連続して起こり。

特定の位置でリンフ才力イン産生を引き起こして連鎖反応的な全身免疫反応の引 き金となり、治療部及び未治療部の両者に対して悪影響を与える。

換言すると、サイクロスポリンの局所的投与１例えば眼の内部に投与すると、眼 内に配置された抗原が眼内のＭＨＣ抗原を有する副細胞と関連してＴ細胞に提供 されるような場合に。

連続求心性免疫反応を阻害するように作用する。しかし、未治療の眼または遠位 皮膚移植が抗原認識を開始させるのに用いられる場合には、求心性免疫反応が遠 位で始まって治療部位に至るまでＴ細胞が活性化されてリンフ才力インを産生じ 。

全身免疫反応が遠心性免疫反応にまで進んで両眼に影響を与えることになる。

従って、対照となる眼（同一の患者が有する）を使用する実験ではいずれも、全 身免疫抑制を引き起こすほどの量が投与されない限り、一方の眼の局所治療では 効果が減少することになる。しかも、同一患者の他方の眼のような同一患者の他 の部位に比べて、患者の一方の眼内または付近などの患者のある部位ではるかに 高度に存在する免疫媒介反応を治療する場合には、一部位についてのみの効果が 明らかとなるためには、サイクロスポリンはそれぞれの部位に対して、治療に効 果的な量が局所的に効果的に投与される。一方の眼のみに存在するように思われ る免疫反応は、治療に効果的な量のサイクロスポリンを患者の両眼に局所投与し て最大効果を得るごとにより有利に治療される。

免疫媒介反応により影響された患者の各部位に局所投与すれば１種々の免疫媒介 疾患の治療についてサイクロスポリンを有利に使用することができる。動物モデ ルにおいて、免疫媒介反応により影響された患者の各部位に対して、サイクロス ポリンを局所投与することにより治療に成功した眼疾患とては、ネコ及びイヌで の免疫媒介融解性潰瘍、ネコ及びイヌでの慢性新血管新生及び増殖性角膜炎、ネ コにおいて潰瘍性ヘルペス角膜炎に続いておこる間質性角膜炎、イヌにおいての 色素性角膜炎、およびイヌでのＫＣＳが挙げられる。

本発明の実施に伴い、多数の利点が生じる。本発明の方法は、それが前全身性反 応（ｐｉｅ−ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ）の活性化を局所的に予防で きる点で有用である。涙が不足した患者の眼へのサイクロスポリンの局所投与は 涙の産生を増加させる。

従って、このような治療はさらに、角膜の廠痕や角膜潰瘍。

角膜または結膜の炎症、糸状角膜症、粘液膜性分泌や角膜の血管新生（ｖａｓｃ ｕｌａｒｉｚａｔｔｏｎ）など、涙の不足やＫＣＳにより悪化するような角膜お よび結膜疾患の治療にも役立つ、しかも。

サイクロスポリンは角膜における肉芽形成や新血管新生（ｎｅｏ−ｖａｓｃｕｌ ａｒｉｚａｔｉｏｎ）の免疫反応を低下させる。

本発明のさらなる目的は、それに寄与する付加的特性及びそれから生じる利点と ともに２本発明の下記の実施例から明らかであろう。

（以下余白） 実施例１：サイクロスポリンを局所投与した場合の効能と分布 驚くべきことに、患者の眼への局所的投与はＫＣＳを治療する為に患者の涙腺へ 、サイクロスポリンを供給するのに優れた方法であることがわかった。まさにこ のような特徴により。

局所的投与は、全身投与を行った場合のように患者の全身にわたるサイクロスポ リンの分散を必要としないものであるから９本発明は、全身処置に関連した悪影 響による高い危険率や高い費用を伴うことなく、所望とする局部にサイクロスポ リンを処方する方法が提供される。

３匹のウサギの左右両方の眼にサイクロスポリンを両側に局所的投与した後、そ の眼を取り囲む種々の眼小室（ｅｙｅｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓ）および組織に ついて、サイクロスポリン濃度を測定した。各々のウサギの眼にサイクロスポリ ンを、オリーブオイル中２％の放射性標識サイクロスポリン溶液として滴下投与 （約１７μｌ）し、この滴下投与を１５分毎に６回行った。その′後、サイクロ スポリンを吸収させるために２時間おいた。ウサギを安楽死させた後、眼と眼の 周辺組織を摘出して、凍結した。解剖して眼と眼の周辺組織を各部に分けた。

次いで、得られた成分をコラゲナーゼ中で消化させ、得られた溶液についてシン チレーションカウンターを用いてサイクロスポリン含量について分析した。次に 示す組成により平均サイクロスポリン濃度が測定された： 副涙腺：　サイクロスポリン２８５０ｎｇ／組織ｇ眼窩骨膜脂肪：　　８００　 ｎｇ／ｇ 角膜：　　４７００　ｎｇ／ｇ 虹彩：　　１２００　ｎｇ／ｇ 網膜：５０ｎｇ／ｇ 眼房水：３０ｎｇ／ｇ ガラス体液：３００ｇ／ｇ 前強膜：　　３１５０　ｎｇ／ｇ　　および後強膜：　　１５５０　ｎｇ／ｇ 実施例２：抗炎症ステロイドとサイクロスポリンとを用いた。

乾燥した眼に対する処置の比較 結膜炎になっている一才の標準のメスブードル１匹は１両眼に軽い水性の涙欠乏 症を示した。このイヌは、シルマー涙試験の値が右眼で１５１ＩＩＩｏ／分であ り、左眼では１０　ｍ＋ｎ　／分であった。

シルマー涙試験は、水性の涙の産生試験である。この試験は、特定の時間に対し て眼の下方の瞼上に置いた濾紙細片の湿潤程度を観察することによる。標準化さ れた細片が市販されている。その細片を刻み目の印で折りたたんだ後、瞼の側面 において端から１／３のところに置く。通常、患者がかすかな明かりのなかでま っすぐ前を見ている期間、その細片はその場所に残ったままである。

濾紙の湿潤度は、刻み目からの閣で測定される。ヒト患者の場合、正常な終点は 、５分で湿潤５ｍｍである。イヌの患者の場合、正常な涙の産生は１分で湿潤１ ４〜２０肛である。

そのイヌは１日に４回両眼にデキサメタシンを局所投与する独特の方法で処置さ れた。初めは幾分効果的であったが。

その後、処置を中止した。すると、同じイヌが約６オのときに９両眼になおも結 膜炎を示し、シルマー涙試験の値は両眼とも３ＩＩＩＩＩ／分であった。その後 １両眼に１日２回、９週間局所的にデキサメタソンを投与したが効果は得られな かった。

それから、他のいずれの薬物治療もしないで、１日に１回。

そのイヌの両眼にオリーブオイル９２％サイクロスポリン溶液を局所投与した。

１０日後、そのイヌは著しい涙産生の増加を示し、シルマー涙試験の値は右眼が ２２ｍｍ／分であり、左眼が８ａｍ／分であった。

１日１回両眼にオリーブオイル中の２％サイクロスポリン溶液を局所投与する処 置をさらに３週間続けた。この時、イヌは十分な水性の涙の産生を示したので、 その処置を１週間中止した。１週間後、そのイヌのシルマー涙試験の値は、右眼 が１０国／分であり、左眼が９閣／分であった。

この時、１日１回両眼にオリーブオイル９２％サイクロスポリン溶液を局所投与 する処置を再開し、６日間続けた。６日後、そのイヌのシルマー涙試験の値は右 眼が２２Ｗ／分であり、左眼が１６ｍ１Ｉ＋／分であった。

この症例の場合、慢性涙液欠乏症にかかつているイヌで。

以前にコルチコステロイドを使用したが涙液の分泌を改善することができなかっ たイヌにおいて、サイクロスポリン処置によって涙の産生が驚くほどに増加した 。涙産生の増加は。

サイクロスポリン治療を続けている間でしか続かなかった。

−処置を１週間中止すると、その眼は再び涙液欠乏症になった。

しかしながら、処置を再開すると涙液産生が正常レベルにまで増加した。

実施例３：乾燥した眼の治療および局所サイクロスポリン治療を用いた角膜治癒 の増強 ８才のオスのラサアプソには、左眼に４才のネコによる掻き傷があり、右眼に活 性な４−の間質潰瘍があった。そのイヌの眼球テストは、粘液製分泌物、広範に 凹凸がある角膜表面９色素形成および左眼における角膜内での新血管新生を伴っ て両眼が結膜炎を示した。シルマー涙試験の値は、右眼が１２ａｍ／分であり、 左眼が３閣／分であった。

そのイヌは、１日１回のオリーブオイル９２％サイクロスポリン溶液、１日２回 のネオスポリン（ｎｅｏｓｐｏｒ　ｉｎ）　、眼科用ワセリンを両眼に局所投与 する処置を続けた。５日後、シルマー涙試験の値は、右眼が２２０ＸＩＩＩ／分 であり、左眼が２３■／分であった。さらに右眼の潰瘍は２ＩＩＩＩ１１にまで 治癒され、左眼で血管新生が減少したと評価された。

この症例では、サイクロスポリンは短時間に涙の産生を著しく増加させたことで ある。その上、コルチコステロイドと異なり、サイクロスポリンは角膜治癒を遅 らせ、また角膜コラゲナーゼも活性化しなかった。従ってサイクロスポリンは活 性な角膜潰瘍を有する眼に使用できる。

実施例４：ピロカルビン単独による乾燥した眼の治療とサイクロスボリンとの組 合せによる治療の比較ＫＣ３の長い病歴をもつ６オのオスの英国プルドッグでは 。

右眼が２ｍｓ＋／分であり左眼が３閣／分のシルマー涙試験の値を示した。

右眼は角膜全体にわたって新血管新生が起っていた。眼内細部は、不透明な角膜 を通して目で見ることができなかった。

その角膜は、総体的に厚く表面に凸凹を有していた。左眼では角膜の約半分を越 えたところで新血管新生が起き、はとんど軸のまわり（ａｘｉａｌｌｙ）で起こ った。

そのイヌに、２％ピロカルビン３滴を経口投与した。２時間後のシルマー涙試験 の値は、右眼がＯｍｍ／分であり左眼が１．０日ｍ　７分であった。

その後、１日１回両眼にオリーブオイル９２％サイクロスポリン溶液を局所的に 投与し、１日２回、２％ピロカルビン３滴を経口投与する処置をそのイヌに行な った。１２日後におけるシルマー涙試験の値は、右眼が１０　ｍｍ　７分であり 、左眼が１５ｍｍ／分であった。

この症例の場合、ピロカルビン単独で、左眼におけるシルマー涙試験の値が３ｍ ｍ／分から１００１０１／分となるように涙産生を増加させたが、ピロカルビン は右眼では涙の産生を増加させなかった。ピロカルビンとサイクロスポリンとを 併用すると、シルマー涙試験値が左眼では１５■／分まで涙の産生が増加し、右 眼ではＯｍｍ／分から１０−７分まで増加した。サイクロスポリンの使用によっ てピロカルビン単独で使用する場合に比べて、濃の産生が著しく増加した。

実施例５：乾燥した眼の矯正およびサイクロスポリンによる局所治療による正常 視力の回復 ７オの小型ブードルには６〜７力月間続いた重篤なＫＣＮ病歴があった。毎日６ 回人工涙液で処置したが、みかけ上の盲目であることに対して影響を及ぼさなか った。

そのイヌは両眼に著しい粘液製分泌物を示した。シルマー涙試験の値は両眼にお いて０ＩＩＩＩｌ／分であった。そのイヌの角膜は厚く、新血管新生のある凹凸 表面を有していた。眼内の細部は、不透明な角膜を通しては見ることができなか った。

そのイヌに１日に２回２％ピロカルピン１滴を経口投与し。

そして、１日に４回眼科用ワセリンによる処置を行なった。

２週間後に、シルマー涙試験の値は両眼ともＯａａ／分のままであった。角膜の 血管分布および癲痕は比較的不透明なままであり、イヌの眼の前眼房を見ること はできなかった。

次に、１日１回両眼にオリーブオイル中の２％サイクロスポリン溶液を局所投与 し、１日に２回ピロカルビン２滴を経口投与する処置をそのイヌに行なった。

２週間後に、シルマー涙試験の値は右眼が８閤／分、そして左眼が６閣／分であ った。角膜の血管新生および搬痕は残ったが、独彩とレンズについては改善され 、前の様にどちらの眼にも粘性分泌物はなく、ＫＣＳは医学的に改善されたと評 価された。

同様の処置をさらに２ケ月間行なうと、シルマー涙試験の値は右眼が１１閤／分 であり、左眼が１７ｍｍ／分であった。そのイヌの眼は、角膜の血管新生および 巖痕が最小であった。

この症例の場合、イヌは最初にピロカルビン処置を受けたが、ピロカルビン単独 では涙の産生において、その様に激しい改善を引き起こすことを知られていない 。サイクロスポリン処置後、そのイヌはどちらかの眼で流涙がない状態から両眼 で正常な涙の産生がなされる状態にまで改善された。そのヌは、角膜炎で盲目の 状態から両眼の非常に軽い角膜色素沈着まで改善された。サイクロスポリン処置 は、涙の産生を著しく増加させ、そのイヌを正常視力にまで回復させた。

（以下余白） 実施例６：正常イヌにおける催涙刺激 正常イヌの眼にオリーブオイル中の２％サイクロスポリンを局所投与した場合の 影響について研究を行なった。その結果を第１図に示す。ここでは６匹の正常な オスのピーグル大で涙液分泌に対する局所的なサイクロスポリンの効果を、オリ ーブオイル治療だけを数日間行なった前と後とで比較している０両方の研究の中 で１〜３日は基準線を確立するために治療を行なわなかった。４〜１０日で−ム −で示した場合には毎日２回（ＢＩＤ　）各々の眼にオリーブオイルを１滴投与 し。

１１〜１３日はオリーブオイル中２％サイクロスポリンの１滴を毎日２回投与し た。催涙（ｔｅａｒｉｎｇ）のかなりの増加が観察された。−１御で示した場合 には、４〜１０日ではオリーブオイル中２％サイクロスポリン１滴を毎日２回投 与し、１１〜１３日はオリーブオイル１滴を毎日２回各々の眼に投与した。４〜 ｌＯ日にわたって観察された催涙のかなりの増加は、サイクロスポリン治療を行 なわない１１〜１３日まで持続した。

これらのデータは１局所投与したサイクロスポリンが正常眼において腺機能即ち 涙液分泌を増加させることを決定的に示している。

サイクロスポリンは、眼に投与できるほとんどの溶液中で非常に低い溶解度しか 持たないので、サイクロスポリン局所投与の効力に関する研究の大部分で、サイ クロスポリンはオリーブオイル中に懸濁させた。残念なことに、オリーブオイル だけとサイクロスポリン併用の場合を比較する対照研究は。

賦形剤（オリーブオイル）から発赤と灼熱感が生じることが示されている。動物 の場合、痛みは、動物が眼を閉じたままでいることによって証明される。約５〜 １０％で約１０００カ月の治療を行なう場合、（１瓶が、約１カ月間毎日２回の 動物治療を行うに十分である獣医学的な使用に処方された２％サイクロスポリン の瓶数に基づいている）、他の副作用が観察された。この副作用には瞼浮腫、角 膜表面の凹凸、および眼周囲脱毛がある。

本発明には次の様な驚くべき発見がある。即ち、眼へのサイクロスポリン局所投 与のための賦形剤としてオリーブオイルの代わりにコーンオイルが使用でき、オ リーブオイル使用による望ましくない副作用を避けることができる。現在のとこ ろ、４力月までの間何らかの明白な副作用なしに毎日２回動物治療のために２％ サイクロスポリンの３０００瓶以上が処方されている。

サイクロスポリン溶液の安定性を高めるコーンオイルへの添加物には、α−トコ フェロールなどの抗酸化剤やメチルパラベンなどの防腐剤がある。他の抗酸化剤 は当業者に公知である。酸化性のラジカルが炎症性の損傷を増加させるのでα− トコフェロール（ビタミンＥ）は眼にも有益な効果があり得ることが示されてい る。角膜上皮に対するビタミンＡとＥとの経口投与の保護作用に関する予備的臨 床観察が最近ＧｅｒｈａｒｄｉｎｇｅｒらによってＡｃｔａ　Ｖｉｔａｍｉｎｏ ｌ　Ｅｎｚ　ｍｏｌ、　　７　（Ｓｕｐｐ）、　７ｌ−７４（１９８５）に発表 された。サイクロスポリン溶液に添加され得る他の化合物には、エモリエント剤 、粘度調整剤、抗酸化剤。

防腐剤、抗生物質、抗真菌剤、抗ウィルス剤、滑剤、界面活性剤、血管収縮剤、 　ＤＭＳＯ，謬１交感神経作動剤、コリン作動性剤、神経伝達物質、涙産生剤（ ｌａｃｒｉｍｏｇｅｎｉｃ　ａｇｅｎｔｓ）　、　Ｐ作動物質、Ｐ拮抗物質、粘 液溶解剤、プロスタグランジン拮抗剤、リボゲナーゼ阻害剤、サイクロオキシゲ ナーゼ阻害剤。

抗炎症剤、酸素スカベンジャー、水和剤、上皮刺激剤（ｅｐｉｔｈｅｌｉｏｔｒ ｏｐｉｃ　ａｇｅｎｔｓ）がある。特定の例として、α−トコフェロールとメチ ルパラベンに加えて、ビタミンＡ、レチン酸。

ピロカルビン、ヒアルロン酸、ポリビニルアルコール、メチルセルロース、ニレ トイシン２　フィサラエミン、ブロムヘキシン、ムコツルパン、アセチルシステ ィン５インドメタシンおよびコルチコステロイドがある。

眼に局所使用する場合、最も好ましい処方は、２％サイクロスポリン、１モル％ α−トコフェロール、　ｏ、ｏｏｓ％メチルパラベンから成る。しかしながら、 サイクロスポリン溶液は約０．０１重量％と飽和、すなわち約２０重量％との間 で調製され得る。特に、明記されなければ、ここで化合物の％はすべて重量％で ある。

化合物の通常の投与方法は眼の表面にサイクロスポリン滴を投与することによる が３選択された部位でサイクロスポリンを遅延放出または延長放出することも２ 重合体移植片、リポソーム、あるいはマイクロカプセル内にサイクロスポリン− オイル混合物を被包することによって実施され得る。

眼に使用するための重合体移植片の合成方法は、　Ｈｕｓｓａｉｎらの米国特許 第３．９６０．１５０に教示されている。非分解性の重合体と生分解性重合体と の両方が使用され得、それらにはポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン 、ポリアンハイドライド、ポリオルトエステル、ポリ乳酸およびポリグリコール 酸がある。リポソーム内に材料を被包する方法は、リポソームカンパニーによる ＰＣＴ／υ５８５１００２２０公開番号−０８５１０３６４０（１９８５年８月 ２９日）に教示されている。移植用のマイクロカプセル内に生物学的物質を被包 する方法は、　Ｌｔｍの米国特許第４．３５２，８８３に教示されている。他の 適当な方法および材料は当業者に公知である。

次に示す実施例は限定するものではないが、免疫障害の治療にコーンオイル中局 所サイクロスポリンの効果と利点、涙の産生の促進または回復、および眼表面の 正常治癒の促進又は効果を示す。

実施例６：正常イヌにおける催涙刺激 正常イヌの眼にオリーブオイル中の２％サイクロスポリンを局所投与した場合の 影響について研究を行なった。その結果を第１図に示す。ここでは６匹の正常な オスのピーグル大で涙液分泌に対する局所的なサイクロスポリンの効果を、オリ ーブオイル治療だけを数日間行なった前と後とで比較している。両方の研究の中 で１〜３日は基準線を確立するために治療を行なわなかった。４〜ｌＯ日で一ム −で示した場合には毎日２回（ＢＩＤ　）各々の眼にオリーブオイルを１滴投与 し。

１１〜１３日はオリーブオイル９２％サイクロスポリンの１滴を毎日２回投与し た。催涙（ｔｅａｒｔｎｇ）のかなりの増加が観察された。−ｍ−で示した場合 には、４〜１０日ではオリーブオイル中２％サイクロスポリン１滴を毎日２回投 与し、　１１〜１３日はオリーブオイル１滴を毎日２回各々の眼に投与した。４ 〜１０日にわたって観察された催涙のかなりの増加は、サイクロスポリン治療を 行なわない１１〜１３日まで持続した。

これらのデータは２局所投与したサイクロスポリンが正常眼において腺機能即ち 涙液分泌を増加させることを決定的に示している。

実施例７：局所的に適用されたサイクロスポリン：ＫＣＳをもつイヌにおける擬 製効果および角膜廠痕の回復 自然発生的なＫＣＳの２５症例（両眼２２症例２片眼２症例）をオリーブオイル ９２％サイクロスポリン溶液（ＣｓＡ）　、　　ＩｇｔｔＱＤ−ＢＩＤ、　ＯＵ で治療し、そして、シルマー涙試験（ＳＴＴ　”）によって測定した涙の産生に おける変化および眼球表面の変化を評価した。

サイクロスポリンの効果は２倍であった。すなわち、サイクロスポリンはイヌＫ Ｃ３の特発生症例の８４％で涙の産生を増加させ、角膜潰瘍の治癒を抑制するこ となく角膜病理（表在性顆粒組織、新血管新生、および色素沈着が含まれる）を 著しく後退させた。症例の病歴は表１に要約しである。

ＫＣＳの診断の後にＯ〜６０カ月（平均１．１年）　ＣｓＡを使用した。先立っ て行なわれた治療には次のものが含まれた。即ち。

２５匹中１６匹のイヌは人工涙液、１１匹は経口または局所ピロカルビン、１１ 匹は経口又は局所コルチコステロイド、９匹は局所抗生物質、あるいは５匹は前 処置なしであった。

予想に反して、　ＫＣＳの寿命には、治療に応じた逆の相関関係はなかった。サ イクロスポリン投与前の平均ＳＴＴは、右眼２．５４＋１１１／分、左眼２．４ ６ｍ／分であった。サイクロスポリン点眼薬を投与した期間中、平均ＳＴＴ値は 右眼１１．３８　ｍ７分左眼１１．５０　ｍ７分であった。ＳＴＴでの平均増加 量は右眼で８．８４ｍｍＺ分（関連測定に対するスチューデントＴ検定、ｔ＝７ ．５゜ｐ＜０．０００５）　、左眼で９．０４＋＋ｗ／分（ｔ　＝６．７　、　 ｐ＜０．０００５）であった、３８の眼は、ひどいＫＣＳをもつと最初に診断さ れた（　５ＴＴＯ〜４ｍ／分）、処置後、　ＳＴＴ値はひどく冒された眼の８４ ％で５ｍ／分より大きく増加した。イヌの場合、サイクロスポリン治療開始後初 めの３日から５６日までＳＴＴが増加することがわかった。無応答であると測定 された６眼（６／３８．１６％）のうち５眼はほんの短期間（７〜３５日）で評 価した。応答性の眼の、　ＳＴＴ値は治療の頻度や期間の増加に伴って増した（ 表１の症例２１と２２を参照）ので、８４％の成功率は過少評価かもしれない。

サイクロスポリンに対する応答でＳＴＴ値が増加した６匹のイヌの場合、治療を 中止するとＳＴＴ値は後退した。

サイクロスポリンを再び投与しはじめると、１症例では６時間、他の４症例では １〜７日でＳＴＴは最大レベルまで復帰増加した。１日おきにサイクロスポリン を投与された２匹のイヌの場合、　ＳＴＴ値は治療をしなかった日に減少した。

サイクロスポリン治療の投与を時々中断されてもイヌはサイクロスポリンに対す る応答性を失なわなかった。サイクロスポリンに応答するイヌの多くは以前、コ ルチコステロイドの局所投与、結膜上投与および非経口投与に対して無応答であ った。

表在性角膜顆粒組織をもつイヌの場合、サイクロスポリンの連続使用によって角 膜の異常な厚さと不透明度の減少が進行した。涙液分泌において増加が見られな かったイヌでさえ。

角膜疾患の緩和は一般的に明らかであった。目を見えなくする濃い色素沈着およ び表在生顆粒をもつ大部分のイヌにおいて数カ月治療すると角膜は明らかに透明 になった。３匹のイヌはサイクロスポリン処置開始時に角膜潰瘍があったが処置 開始４８時間以内にそれぞれ治癒された。長期間（８〜１２力月）治療を続けた イヌは、サイクロスポリンをやめると２〜３日以内にＫＣＳに逆戻りした。

（以下余白） 表１．イヌの乾性角結膜炎の２５症例における眼の治療歴およびサイクロスポリ ン点眼液を使用する前と使用中のシルマー涙試験（ＳＴＴ）の値。

表１．続き（頁２） 表１．続き（頁３） （以下余白） 実施例８：シェーグレン症候群にかかったヒトにおける催涙刺激 シェーグレン症候群は、単核白血球による外分泌腺、特に涙腺および唾液腺の、 慢性浸潤によって特徴付けられる。このプロセスは、腺組織の進行性破壊を引き 起こす。そして。

これは、乾性角結膜炎（ＫＣＳ）または「乾燥した眼」により特徴付けられる。

ステロイドを使った局所治療または非経口治療のいずれもが角膜表面の刺激を減 少させたり、角膜潰瘍形成を予防する際に完全に効果を有するというわけではな かった。実際に９局所または非経口投与したコルチコステロイドは流涙を高めず 、かつ角膜潰瘍の回復を遅らせ得る。このため、多くの眼科医はこのコルチコス テロイドを禁忌であるとみなしている。

第１期のシエーグレン症候群（口腔の乾燥を伴う乾燥した眼）にかかったヒト患 者にコーンオイル中２％サイクロスポリンの局所治療を行った。この患者は数年 間従来からの療法（人工涙液Ｑ　１５分）で治療されていた。過去の数ケ月間、 この患者のＳＴＴは２〜３胴１５分／眼であった。（ヒトの場合。

ＳＴＴは５分間測定するが、イヌの場合はわずか１分間しか測定しない。しかし 、予想した正常値は同様である。つまり。

正常値は１４ｍｍである。５ｍｍ以下の値は重症の乾燥した眼を示している。） 毎日２回の両眼治療を９日間続けた後には、この患者のＳＴＴは２０および２３ ｍｍ／　５分／眼であり、治療前の値にくらべてかなり増加していた。治療する 前に９両眼の角膜をフルオレセイン色素（角膜潰瘍の指標である）で全体的に染 色した。治療９日後１片方の眼は全く染色されておらず、もう一方の眼だけが表 面の１／３にわたって染色されていた。

重症の慢性の第■期シェーグレン症候群にかかった３人の婦人に、１モル％α− トコフェロールおよび０．００５％メチルパラベンを含有するコーンオイル中２ ％サイクロスポリンを用いた治療を毎日２回、１週間行った。３人のいずれもが 異常角膜であった。１番目の被験者は、治療していない角膜潰瘍を有していた。

この角膜潰瘍は、角膜をおおう表面上皮の全体にわたって浸透していた。この潰 瘍は治療開始２日以内に回復した。２番目の被験者は、「コンタクトレンズ角膜 症」。

すなわち、角膜周縁にへこみ（ｉｎｄｅｎｔａｔｉｏｎ）を有するものであった 。これは、コンタクトレンズをしていない時でも、コンタクトレンズをしている 眼のような外観を与え、傷あとに類似している。治療７日以内に、このへこみが 充填されたことが証明された。３番目の被験者は、角膜外傷（ｌｅｓｉｏｎ）を 有していたが、これもまた１週間以内に改善された。３人のいずれもがＳＴＴに おいて増加が見られた。

上の結果は、　ＫＣＳの症状を緩和したり、典型的な治療を促進したり、そして 実際に眼の表面で搬痕組織を減少させたりする場合に９局所的に投与されたサイ クロスポリンの効力を決定的に証明している。

実施例９：イヌにおいて正常催涙を回復せずに眼表面の正常治癒を促進させる １１才の卵巣切除された小型シュナウツア−（ＭｉｎｉａｔｕｒｅＳｃｈｎａｕ ｚｅｒ）は、入院前の８ケ月間ＫＣ３にかかっていたことが確認された。その当 時の粘膜を削りとることによって得られた標本の分析から、ジステンパーウィル スが見い出された。

このイヌは２％ピロカルビン（１ｇｔｔ　ＰＯｑ　１２　ｈ）で治療された。こ の治療は、最初にＳＴＴの値を両眼で８閣／分まで増加させたが、その後効力を 失った。例えば、　ＳＴＴは両眼で０１ｍ１１７分に減少した。治療は９両眼に デキサメタシン軟膏をＱ　１２ｈ１人工涙液を毎日約６回、そして就寝時にワセ リン軟膏を投与することにより行われた。入院時に眼を観察すると、　ＳＴＴは 右眼が２ｍｍ／分、左眼が０閣／分であり２両眼に粘液性結膜炎、角膜表面の約 ４０〜５０％に背側の角膜の色素沈着９両眼で角膜の背側の半分に約６ｎｏ広が った表在性新血管新生がわかった（第２Ｂ図）。その角膜表面は凹凸を有するが 、比較的透明（ｔｒａｎｓ　１ｕｃｅｎｔ）であり、明らかな視力欠損は見られ なかった。全部の血球算定および血清チロキシンは正常であり。

血清プロフィールで検出された唯一の異常は血清アルカリホスファターゼの値が 高いことであった（６６７■／Ｊ）。

必要に応じて、投与され得る人工涙液を用いてサイクロスポリン（２％１　ｇｔ ｔ　ＱＤ、両眼）を処方した。４週間以内に。

ＳＴＴは右眼で８ｍｍ／分にまで増加したが、左眼ではなおＯ〜１、ｍ／分のま まであった。結膜炎は改善され、迦が、左眼ではなお炎症の存在が明らかだった 。しかし１両眼の角膜表面は明らかに改善されていた（第２Ｂ図）。

この時、耳下腺管の移植が行われ、各まぶたの３分の１の涙腺についてバイオプ シーを行った。顕微鏡観察によると。

両方の腺は似ており、血漿細胞およびリンパ球のしばしば広汎で激しい管周囲性 （ｐｅｒ　１ｏｄｕｃｔａｌ）および介在性浸潤、さらに線屑および細管の繊維 形成を伴っていた。正常な線屑組織の病巣域は、各線で見られ、ある領域では、 偏平上皮で内側がおおわれた。拡散した細管が含まれていた。上記した実施例の 結果は９局所的に施用したサイクロスポリンが催涙を回復しない場合でさえも、 角膜潰瘍を消散するのに使用され得ることを確証した。第２Ａおよび２Ｂ図によ って非常に効果的に示されているように、眼の表面はより透明に、より滑らかに なり、そして視力は改善される。

（以下余白） 実施例１０：眼に局所使用するためのサイクロスポリンにおけるオリーブオイル 賦形剤とコーンオイル賦形剤との比較 オリーブオイル中のサイクロスポリンで処置した動物のうち、イヌ４匹とネコ１ 匹が、処置開始４日以内に次のことを含む眼の刺激反応を起こした：球粘膜の充 血、明らかな角膜水腫に伴う角膜表面の凹凸、そして、目の痛みを示す瞼のだの 痙牽。

各症例において治療を中止すると、これらの徴候は除かれた。コーンオイル中の サイクロスポリンを用いた治療を、眼の刺激反応が除かれた３匹のイヌに対して 始めた。イヌは３匹ともコーンオイル／サイクロスポリン混合物に対して許容的 であだ。

４番目のイヌの場合、飼い主はそのイヌが目を刺激されると考えたのでオリーブ オイル中のサイクロスポリンは１日に２回投与する処方より少ない頻度で不定期 的にそれを使用し続けた。使用２〜３週間後に両眼周囲の脱毛が起こり、瞼は激 しく充血した。オリーブオイル中のサイクロスポリンの使用を数週間中止した。

コーンオイル中のサイクロスポリンを両眼に１日に２度投与する方法で投与を始 めた。慢性角膜血管新生および表在性角膜炎は著しく回復し、　ＳＴＴが増加し た。

そして、再発、刺激、または脱毛はなかった。

オリーブオイルとコーンオイルとについてもまた。正常なヒトの眼において比較 した。オリーブオイルでは１５〜６０分続く灼熱感が生じた。コーンオイルでは １〜２分続くだけのもっと軽い感覚が生じた。

動物に対する使用のために処方されたコーンオイル中に２％のサイクロスポリン ３０００本の瓶のどれについても副作用は認められなかった。それに対して、動 物に対する使用のために処方されたオリーブオイル中２％のサイクロスポリン１ ０００本においては副作用の発生率が５〜１０％であだ。オリーブオイル及びコ ーンオイルの化学的性質は非常に似ているので。

２つのオイルの許容性に実質的な違いがあることは驚くべきことである。遊離脂 肪酸およびｐＨのレベルのテストによっては、オリーブオイルにおいて減少した 許容性を説明できる程のどのような有意差も示さない。精製オリーブオイル（Ｓ ｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ、、　Ｓｔ、　Ｌｏｕｉｓ、　ＭＯ，）又は最初 に絞り取ったオリーブオイルをベリオブランドオリーブオイル（Ｂｅｒｉｏ　ｂ ｒａｎｄ　ｏｌｉｖｅｏｉ！、食料品店から入手、これを最初に使用した）の代 わりに使用しても刺激は除去されなかった。

本発明（眼に局所使用するために改良されたサイクロスポリン組成物）の改変お よび変化は、前述の本発明の詳細な説明から当業者に明らかである。そのような 改変および変化は。

添付の請求の範囲内に入る。

Ｓ″＋　ｒ（ｍｍ／ｍｉｎ） ＦＩＧ、２Ａ ＦＩＧ−２Ｂ 補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）平成２年３月２日

Claims (24)

【特許請求の範囲】
1. １．涙腺の機能を高めまたは回復させる方法であって、該方法はサイクロスポリ ンを局所的に投与することを包含する。
2. ２．涙の不足した眼に涙の産生を増加させるための請求項１記載の方法であって 、該方法は治療に効果的な量のサイクロスポリンをその眼に局所的に投与するこ とを包含する。
3. ３．請求項１記載の方法であって、前妃サイクロスポリンは、薬学的に許容し得 る賦形剤中に約０．０１重量％と５０重量％と間の量のサイクロスポリンを含有 する溶液、懸濁液または軟膏として投与される。
4. ４．請求項３記載の方法であって、前記サイクロスポリンは０．１〜２０重量％ の量で投与される。
5. ５．請求項３記載の方法であって、前記薬学的に許容される賦形剤は、コーンオ イル、オリーブオイル、ピーナッツオイル、ヒマシ油、ポリオキシエチル化され たヒマシ油、鉱油、ワセリン、ジメチルスルホキシド、アルコール、リボソーム 、シリコン流体またはそれらの混合物である。
6. ６．請求項１記載の方法であって、前記サイクロスポリンはサイクロスポリンＡ である。
7. ７．涙腺の自己免疫機能障害にかかっている患者の眼に涙の産生を増加させるた めの請求項１記載の方法であって、該方法は治療に効果的な量のサイクロスポリ ンをその患者の眼に局所的に投与すること、を包含する。
8. ８．患者の乾性角結膜炎を治療する請求項１記載の方法であって、該方法に治療 に効果的な量のサイクロスポリンをその患者の両方の眼に局所的に投与する工程 、を包含する。
9. ９．患者の涙腺において過度の免疫活性によって引き起こされた疾患を治療する ための請求項１記載の方法であって、該方法は免疫活性を減少させるのに充分な 量のサイクロスボリンをその患者の両方の眼に局所的に投与する工程、を包含す る。
10. １０．患者の乾性角結膜炎によって悪化した疾患を治療するための請求項１記載 の方法であって、該方法は治療に効果的な量のサイクロスポリンをその患者の両 方の眼に局所的に投与して角膜の治癒を促進させること、を包含する。
11. １１．眼科用局所施用組成物であって、該組成物はコーンオイル基剤中のサイク ロスポリンを含有する。
12. １２．請求項１１記載の組成物であって、前記サイクロスポリンの濃度は約０． ０１％と飽和濃度との間である。
13. １３．請求項１１記載の組成物であって、該組成物は、さらに、エモリエント剤 、粘度調整剤、抗酸化剤、防腐剤、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、滑剤、 界面活性剤、血管収縮剤、ＤＭＳＯ、副交換神経作動剤、コリン作動剤、神経伝 達物質、涙産生剤（１ａｃｒｉｍｏｇｅｎｉｃａｇｅｎｔｓ）、Ｐ作動物質、Ｐ 拮抗物質、粘液溶解剤、プロスタグランジン拮抗剤、リボゲナーゼ阻害剤、サイ クロオキシゲナーゼ障害剤、抗炎症剤、酸素スカベンジャー、水和剤および上皮 刺激剤からなる群から選択された化合物を含有する。
14. １４．請求項１３記載の組成物であって、前記化合物はビタミンＡ、ビタミンＥ 、レチノイン酸、ピロカルピン、ヒアルロン酸、ポリビニルアルコール、メチル セルロース、メチルバラベン、エレドイシン、フィサラエミン（ｐｈｙｓａｌａ ｅｍｉｎ）、ブロモヘキシン（ｂｒｏｍｈｅｘｉｎｅ）、ムコソルバン（ｍｕｃ ｏｓｏｌｖａｎ）、アセチルシステイン、インドメタシンおよびコルチコステロ イドからなる群から選択される。
15. １５．請求項１１記載の組成物であって、該組成物はコーンオイル中の２％のサ イクロスポリンを含有する。
16. １６．請求項１５記載の組成物であって、該組成物はさらにアルファトコフェロ ールおよびメチルパラベンからなる群から選択される化合物を含有する。
17. １７．請求項１１記載の組成物であって、該組成物はカプセル化されている。
18. １８．請求項１７記載の組成物であって、該組成物は重合体マトリックスの中に カプセル化されている。
19. １９．請求項１８記載の組成物であって、該組成物はポリエチレン、ポリスチレ ン、ポリプロピレン、ポリアンヒドライド、ポリオルトエステル、ポリ乳酸およ びポリグリコール酸からなる群から選択されるポリマーで形成された重合マトリ ックスの中にカプセル化されている。
20. ２０．請求項１７記載の組成物であって、該組成物はリボソーム中にカプセル化 されている。
21. ２１．請求項１７記載の組成物であって、該組成物はマイクロカプセル化されて いる。
22. ２２．請求項１１記載の組成物であって、前記サイクロスポリンは傷の通常の治 癒を促進させる濃度である。
23. ２３．請求項２３記載の組成物であって、前記サイクロスポリンは涙腺活性を刺 激または回復させる濃度である。
24. ２４．請求項１１記載の組成物であって、前記サイクロスポリンは免疫疾患を抑 制する濃度である。