JPS58501675A

JPS58501675A - 物質ｐ「きつ」抗質からなる薬材

Info

Publication number: JPS58501675A
Application number: JP50331281A
Authority: JP
Inventors: ハカンソン・ロルフ; ヘリグ・ヨアヒム
Original assignee: フエ−リング・ア−ベ−
Priority date: 1981-10-09
Filing date: 1981-10-09
Publication date: 1983-10-06
Also published as: BE894602A; IT8223678A1; IT8223678A0; WO1983001252A1; IT1191028B; EP0090798A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】物質Ｐ拮抗質からなる薬剤本発明は物質Ｐにより解放される疾病の予防または治療処理用の薬剤に用いる物質、Ｐ拮抗質（ＳｕｂｓｔａｎｃｅＰ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）　、かかる疾病を予防的にまたは治療的に処理する方法、および炎症を予防的にまたは治療的に処理する薬剤に関する″。特に、本発明は物質Ｐに関して、位置２のＬ−プロリンをＤ−プロリンで置換し、位置７のＬ−フェニルアラニンおよび位Ｎ９のグリコールをＤ−）リプトファンで置換した構造を有する物質Ｐ拮抗質に関する。

本発明の物質Ｐ拮抗質は次式：％式％を有する（Ｄ−ＰｒＯ２，Ｄ−Ｔｒｐ７＋９）物質Ｐである。

バックグラウンド最近、神経系に信号を伝達する物質、いわゆる、伝達物質はアドレナリンおよびアセチルコリンに関する物質（アドレナリン作用性およびコリン作用性神経のそれぞれ）のみならず、ペプチド結合により結合した一連のアミ°ノ酸から作った化学物質、すなわち、ポリペプチドまたはオリゴペプチドからなることが知られている。多くの場合、ペプチドのみが神経伝達物質として作用することができる。この作用を有する。全系列のペプチドはすでに知られている（例えば、［ザ　ニュー　イングランド　ジャーナル　オブ　メゾシン（ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）Ｊ　、ｖＯｌ、８０４゜ｐ、　８７６〜８８５および９４４〜９５１に報告された論文参照）。

現今、ポリペプチドと称する物質Ｐは伝達物質に分類することができる。この理由としては、神経において伝達衝動（ｔｒａｎｓｍｉｔｔｉｎｇ　ｉｍｐｕｌｓｅｓ）を体の末梢部から脳（輸入管（ａｆｆｅｒｅｎｔｓ）　）におよび脳から異なる末梢器官（輸出管（ｅｆｆｅｒｅｎｔＥｉ）　）に延長する神経に生ずることが知られているためである。

物質Ｐは末梢から脳に苦痛刺激を伝達する重要な役割を演するものと思われる。

物質Ｐを含有する輸出神経は内分泌腺からの分泌を刺激することができ、および平滑筋の血管拡張および収縮を生ずることができる。

物質Ｐは１９３１年にすでに７オン　ユーレー（Ｖｏｎ　Ｅｕ１ｅｒ）およびガダム（Ｇａｄｄｕｍ）氏によって発見されているけれども（ｒＪ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、Ｊ　７２　、７４（１９８１））、次式：％式％で示す物質Ｐの構造はチャック（Ｃｈａｎｇ）氏等により１９７１年までには発見されていない（［ＮａｔｕｒｅＮｅｗ　Ｂｉｏｌ、Ｊ　２３２　、８　ｅ　（１９７ｉ　）。

神経伝達物質によって生ずる刺激作用を減少または中断できることは以前から知られている。神経衝動またはその作用のかかる遮断は伝達物質自体に対し密接な化学的関係にあり、かつこのためにセンサー（受体）と反応する物質によって達成することができ、かかるセンサーを介して伝達物質は衝動を神経シナプスＧこ伝達し、またはその標的に作用する。神経伝達物質に遮断（拮抗）作用を有する多数の物質は知られているが、その多くはアドレナリン作用性またはコリン作用性神経における神経伝達物質に属、する。

従　来　技　術物質ＰＧ二対する拮抗質は数年前に見出されている。

物質Ｐに対するある種の拮抗質についての研究の結果、最近これらの拮抗質は物質Ｐ−誘導分泌に、および物質Ｐにより刺激された平滑筋に対する抑制作用を有することが報告されている（　Ｋ、フォルカース（Ｋ　、　Ｔｏｌｋ−〜５０６（１９８１））。

本明細書に記載する構造（Ｄ　−ＰｒＯ２１Ｄ−Ｔｒｐ”）物質Ｐを有する化合物とは物質Ｐに対する拮抗質を意味する。この化合物は、特に生体内でロカス　、コエリュレン神経単位（ｌｏｃｕｓ　ｃｏｅｒｕｌｅｎｓ　ｎｅｕｒｏｎｓ）　ノ物質Ｐ誘導刺激を遮断し、このために物質ＰＧこ対するＣＮＳ拮抗質であると考察されている。

これまで、物質Ｐに対する拮抗質について報告されている研究は、もっばら拮抗質を見出すのに向けており、このために体の生理学的作用を物質Ｐにより制御および影響を及ぼすことを達成することができるが、しかし任意の効果的な薬剤の開発に向けられていない。

発明の開示本発明者らが合成した物質（Ｄ　−Ｐｒｏ　、　Ｄ　−Ｔｒｐ７＋９）物質Ｐは体、特に皮膚、上部気道、腸および目における炎症状態に対して抑制作用を有する極めて驚くべきことを見出した。

このために、本発明は物質Ｐによって解放される疾病の予防または治療処理用薬剤に用いる物質Ｐ拮抗質（Ｄ　−Ｐｒｏ２．　Ｄ　−Ｔｒｐ７＋’　）物質Ｐ　ニ関する。更に、本発明は炎症、特に目の炎症の予防または治療処理用薬剤に関する。更に、本発明は物質Ｐにより解放される疾病、特に皮膚、上部気道、腸および／または目における炎症の如き病気を予防的にまたは治療的に処理する方法に関する。本発明の薬剤を投与する適当な形態は局所的適用によるものである。

本発明の物質Ｐ拮抗質の製造次に示す略語を用いる：ＤＣＣジシクロへキシル　カルボジイミドＡＣ２０無水酢酸ＢＯＣ”、−ブチルオキシカルボニルＴＦＡ　）リフルオロ酢酸ＤＭＦ　ジメチルホルムアミドＢＨＡ　ベンズヒドリルアミン次式：％式％を有する（　Ｄ　−Ｐｒｏ２．　Ｄ　−Ｔｒｐ７＋９）物質Ｐはこの特定分野における通常の手段によって、すなわち、ＲｌＢ、メリフィルド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ　）氏により報告された固相方法（「Ｊ、　Ａｍ−Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、　Ｊ　８５　、２１４９〜２１５４（１９６３））によって作ることができる。

使用する固相はモナハン（ＭＯｎａｈａｎ）氏はかにより報告されたベンズヒドリルアミンｍ脂であル（「Ｂｌｏｃｈｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、ＲｅＳ、　Ｃｏｍ、　Ｊ　４８　、１１　ｏ　Ｏ〜１１０５（１９７２））。

製造において用いる出発材料としてはスエーデン国マルメのフェーリング・アーベー（Ｆｅｒｒｉｎｇ　ＡＢ　）社がら（７）　ＢＯＣ−Ａｒｇ−ＴＯ８、Ｂｏｃ’−Ｇｌｎ−ＯＮｐおよびＢｏｃ−Ｌｅｕ　ｉドイツ連邦共和国のメルク　ダルムスタッ）　（ＭｅｒｃｋＤａｒｍｓｔａｄｔ　）社からのＤ　−Ｐｒｏ　、　ｐｒｏ　、　Ｄ　−ＴｒｐおよびＰｈｅ　；およびベクマン社（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｉｎｃ、）がらのベンズヒドリルアミン樹脂を用いた。

ｔ−ブチルオキシカルボニル保護基（Ｂｏａ　）は２−（ｔ−ブチルオキシカルボニル　オキシイミ／）−２−フェニルアセトニトリル（Ｂｏｃ−ＯＮ）によってＤ　−Ｐｒｏ　、　Ｐｒｏ　、　ＰｈｅおよびＤ　−Ｔｒｐに結合させた（　Ｍ−伊藤、Ｄ、萩原およびＴ、神屋氏［テトラヘドロンＬ／　タース（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　）　Ｊ　４３９３（１，９７５）　）。

合成は５９　ＢＨＡ樹脂、０．５１−　ｍｅｑ、ＮＨ２／ｌから出発する段階において行い、本発明の化合物におけるアミノ酸を次に示す予定段階に従って結合させた。

ｌ　Ｂｏｃ−Ｍｅｔ　−ＮＨ−Ｂ）ＬＡ２　Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ−ＢＨＡ３　Ｂｏａ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｍｅ仁−ＮＨ−ＢＨＡ７　Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ−Ｂ）ＩＡｌ、ＯＢｏｃ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｄ− Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ−ＢＨＡｌｌ　Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ−ＢＨＡ結合段階後、ペプチドを樹脂から分離し、ペプチドをゲル濾過、カラムクロマトグラフィーおよび凍結乾燥によって精製した後、所望の生成物を得、次いで分力ラム　：μｍボンダバック（Ｂｏｎｄａｐａｋ）　Ｃｌ　８１（ウォータース）、２．４Ｘ３００ｍｍ移動相：　３２％ＣＨ３０Ｎ　、６８％リン酸塩緩衝剤０．１　Ｍ　、ｐＨ３ −０流　ｉｉ　：　１．５　ｍｌ１分検　出　：２１０ｎｍこのシステムにおいて、物質は８．１４．分の滞留時間を有していた。９８．１面積率（ａｒｅａ　ｐｅｒｃｅｎｔ）の整数を有する単一対称無ショルダー　ビークを与えた。

薄層クロマトグラフィー薄層クロマトグラフィーをメルクＨＰＴＬＣプレート（シリカゲル６０）上で行った。操作距離：１５ｃｍ０物質を次に示す溶剤系において均質にした：ＣＨＣｌ　８−濃ＮＨａ−ＣＨａＯＨ＝　６０／２０／４５　Ｒｆ：　０．４ＥｔＯＡｃ−Ｐｙ−ＡｃＯＨ−Ｈ○−５１５／１／３　Ｒｒ：　０．７８ｎ−ＢｕＯＨ− ＥｔＯＡｃ−ＡＣＯＨ−ＨＯ＝２／２／１／Ｉ　Ｒｆ：０．０２ｎ−ＢｕＯＨ− Ｐｙ−ＡＣＯＨ−Ｈ２Ｏ−３０／３／’６／２４’　Ｒｆ：、０．５９２−ＰｒＯＨ−ＩＮ　ｈｃｏＨ＝　２／Ｉ　Ｒｆ：ｏ、ｏａアミノ酸分析分析のために、物質（１■）を封管中１２０°Ｃで２４時間にわたって０．２％トリプタミンを含有する４Ｍメタンスルホン酸１ｆｒＬ！、中において加水分解した。アミノ酸分析はビオトロニツターＬＣ−２０００アミノ酸アナライザーで行った。個々のアミノ酸に対して次に示す結果を得た：Ｇｌｕ　：　２．０８　ｉ　ＰｒＯ：　２．００　ｉ　Ｍｅｔ　：　１．０５　ｉ　Ｌｅｕ　：　０．９９　＋Ｐｈｅ　：　１．０１　；　Ａｒｇ　：　１．０６　；　Ｔｒｐ　：　１．９材料のペプチド含有母はトリアセテートに対して８６．７％であった。

旋光測定はパーキング−ニルマー旋光計を用いて行った。

測定のために、１０Ｔｎ９の物質を１艷のメタノールに溶解し、１０ｃｍの層厚さで測定した。

温度＝２５°Ｃ炎症における（　Ｄ　−Ｐｒｏ”　、　Ｄ−Ｔｒｐ７＋９）物質Ｐの効見本発明において用いる物質Ｐ拮抗質は次の試験により炎症を抑制しまたけちゆすることを確めた。

物質Ｐをうさぎの目の硝子体に注入して炎症反応を誘発させる。炎症効果はちゆする縮瞳、およびチャン特表昭５８−５０１６７５（４）バー流体（ｃｈａｍｂｅｒ　ｒｌｕｉｄ）内のたん白質の増加量を基準として記録した。瞳孔直径の変化を定規で測定し、チャンバー流体中のたん白質の量を、いわゆる、光路（ｌｉｇｈｔ　ｐａｔｈ）を測定することによって評価しｔｏかかる光路は、明るい光線を目に通してアイ　チャンバー　（ｅｙｅ　Ｃｈａｍｂｅｒ）におけるチンダル現象を記録して測定する。このチンダル現象はチャンバー流体中のたん白質の光線反射能の結果による。この反射現象はアンジョー（Ａｎｊｏｕ）およびクラカラ（Ｋｒａｋａｕ）氏により予じめ記載された方法による基準によって測定しかつ関類似する炎症性反応を絞り上に制限された面積の赤外線によって誘発することができる。

３匹のうさぎの左目の硝子体に３０ｎモルの本発明の物質Ｐ拮抗質を、および右目の硝子体に０．９％食塩水（ｓａｌｉｎｅ）を注入した。３時間後、３ｎモルの物質Ｐを同じ場所に注入した。１時間後、両目の瞳孔直径の差を測定し、左目の瞳孔直径が約Ｑ、５ｍｍ程度まで減少したのに対して、右目の瞳孔直径は約２．１ｍｍ程度まで減少したこと、および右目におけるチャンバー流体中のたん白質の母が左目におけるその母の２倍に増加したことを確めた。これらの試験によって、本発明の物質Ｐ拮抗質はそれ自体目に対して優れた作用を与えうろことを確めた。

９０ｎモルの本発明の物質Ｐ拮抗質を３匹のうさぎの左目の硝子体に注入した。

対照の目的のため、に、右目には０．９％食塩水を与えた。３時間後、両目の絞りを赤外線に曝した。照射後、１時間してチャンバー流体中のたん白質の量を測定した所、左目（処理した目）のいわゆる光路は殆んど変化していないのに対して、右の対照目では３倍であったことを確めた。

類似試験を、物質Ｐ拮抗質および食塩水をアイ　ドロップ（ｅｙｅ　ｄｒｏｐｓ）状態で投与して行い、いわゆる、光路は対照目においては処理目の大きさの２倍以上であることを確めた。

炎症を赤外線により誘発する試験を行い、試験において記録しうる効果の最小投与量を食塩水において０．９ｎモルの物質Ｐ拮抗質にし、これに対して最大効果に対する最小投与量を食塩水において９０ｎモルにした。拮抗質の効果は投与量に依存するが、むしろ直線的であることを確めた。

要約すると、物質Ｐを硝子体に注入することによって、または絞りの赤外線照射によって誘発した目の炎症は、硝子体に注入またはアイ　ドロンブ状態で投与する本発明の物質Ｐ拮抗質によって抑制またけちゆできることを確めた。

局所的適用する溶液の調製凍結乾燥状態に維持した精製物質（１）　−ｐｒｏ”　。

Ｄ　−Ｔｒｐ７・９）物質を食塩水に適当な濃度で溶解した。

この溶液を無菌条件下で濾過し、滅菌びんに充填し、上述する試験に用いた。

上述する試験において、本発明の物質Ｐ拮抗質は注入によりおよびアイドロップで投与するために食塩水に溶解して用いたが、しかし噴霧、吸入、点滴注入、ガス注入および注射により局所的適用で投与する他の投与手段を用いることができる。更に、軟膏、クリーム、座薬、錠剤、カプセル剤および粒剤に調製でき、この場合の有効成分を本発明の物質Ｐ拮抗質とし、他の成分を通常の不活性担体、稀釈剤、賦形剤等とする。

国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】Ｌ　物質Ｐによって解放される疾病の予防または治療処理用薬剤に用いる物質Ｐ拮抗質において、１次式：％式％を有する（　Ｄ−Ｐｒｏ２．　Ｄ　−Ｔｒｐ７，９　）物質Ｐかラナルことを特徴とする物質Ｐ拮抗質。２　有効成分としての（Ｄ　−Ｐｒｏ２．　Ｄ、　−Ｔｒｐ７　、９　）物質Ｐおよび不活性担体または賦形剤からなることを特徴とする炎症の予防または治療処理用薬剤。３　有効成分としての（Ｄ−Ｐｒｏ２．　Ｄ−Ｔｒｐ”９）物質Ｐおよび不活性担体または賦形剤か′らなることを特徴とする目における炎症の予防または治療処理用薬剤。４　局所的適用に適当な形態で用いる請求の範囲第２または３項記載の薬剤。５　予防的にまたは治療的に有効量の（Ｄ　−Ｐｒｏ２．。Ｄ　−Ｔｒｐ７・９）物質Ｐを投与することを特徴とする物質Ｐにより解放される疾病の予防または治療処理方法。６、　予防的にまたは治療的に有効量の（Ｄ−ｐｒｏ琴。Ｄ　−Ｔｒｐ７・９）物質Ｐを局所的適用によって投与する請求の範囲第５項記載の方法。７　予防的にまたは治療的に有効量の（Ｄ　−Ｐｒｏ２゜Ｄ　−Ｔｒｐ７・９）物質Ｐを投与することを特徴とする炎症の予防または治療処理方法。８　予防的にまたは治療的に有効量の（Ｄ　−Ｐｒｏ２゜Ｄ　−Ｔｒｐ７・９）物質Ｐを局所的適用によって投与する請求の範囲第７項記載の方法。９　予防的にまたは治療的に有効量の（Ｄ　−Ｐｒｏ２゜ｐ　−Ｔｒｐ７．９　）物質Ｐを投与することを特徴とする目における炎症を予防または治療処理する方法。ＩＯ予防的にまたは治療的に有効量の（１）　−Ｐｒｏ”　。Ｄ−Ｔｒｐ７・９）物質Ｐを局所的適用によって投与する請求の範囲第９項記載の方法。