JPH0365192A - １，３―プロパンジオールの発酵的製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、好ましくは嫌気性の微生物によって工業的規
模でグリセロールを１．３−プロパンジオールに変換す
る方法に関する。

［従来の技術］ 脂肪酸トリグリセリドの脂肪酸誘導体（例えば脂肪酸メ
チルエステルまたは脂肪アルコール）への油脂化学的変
換において、該トリグリセリドの分解によってグリセロ
ールが生成する。

とりわけ嫌気性微生物を含む多くの微生物がグリセロー
ルによって増殖可能であり、その過程でグリセロールを
他の生成物に変換し得ることは、科学文献により既知で
ある。この過程において見られる代謝産物の一つが１．
３−プロパンジオールである。

１．３−プロパンジオールは、多くの用途を持つジオー
ルであり、原則としてエチレングリコール、プロピレン
グリコールまたはブタンジオールと同様の目的に使用し
得る。これまで、１．３−プロパンジオールは、アクロ
レインに水を付加し、次いで水素化することによって得
ていた。しかし、その化学的工程には非常に費用がかか
るので、得られる最終生成物は、その高価格の故に多く
の適用には不適当である。

微生物によるグリセロールの１．３−プロパンジオール
への変換は、科学文献において若干の記載がある。すな
わち、ケモスタット培養におけるクレブシェラ・アエロ
ゲネスＮＣＴＣ４１８によるグリセロールの代謝が、ス
トリークストラ（Ｈ。

Ｓ　ｔｒｅｅｋｓｔｒａ）ら、アーカイブズ・オブ・ミ
クロビオロジー（Ａｒｃｈ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）
（１９８７）、１４７：２６８〜２７５に記載されてい
る。この文献には、種々の培地における特定のクレブシ
ェラ・アエロゲネス株のグリセロールに対する作用が記
載されているが、工業的工程のためのそのような微生物
の特定の代謝作用について当業者が評価し得るようなこ
とは記載されていない。

［発明が解決しようとする課題］ 本発明の課題は、グリセロールを１．３−プロパンジオ
ールに変換するための工業的に行い得る方法を提供する
ことである。とりわけ、そのような方法は、トリグリセ
リドの工業的加工において生じるグリセロール水を出発
物質として使用することを意図するものである。

とりわけ、本発明の課題は、工業的規模での発酵が容易
であり、標準的な発酵条件下に０．５ｇ／ｈ／４以上の
体積／時間収率でグリセロールをプロパンジオールに変
換し得る株、例えば酪酸クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍ　　ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）Ｓ　Ｉ−１１（
１）９Ｍ５４３１）およびＡＫ１（ＤＳＭ５４３０）並
びにクレブシェラ・ニューモニエ（Ｋ　１ｅｂｓｉｅｌ
　ｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｄ　Ｓ　Ｍ　２０２６の
ようなりレブシエラ・ニューモニエ株およびクレブシェ
ラ・オキシトカ（Ｋ　、　ｏｘｙｔｏｃａ）Ｎ　ｎ　Ｃ
Ｃ３００６を用いる前記のような方法を提供することで
ある。

［課題を解決するための手段］ 従って、本発明は、微生物によりグリセロール１．３−
プロパンジオールに変換する方法であって、まず、標準
的な発酵条件下に５重量％グリセロール溶液を単一の炭
素源として体積／時間収率０　、５　ｇ／ｈ／（！以上
でグリセロールを１．３−プロパンジオールに変換する
微生物株を、クロストリジウム、エンテロバクテリウム
（Ｅ　ｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｕ１１ｌ）、ラクトバ
チルス（Ｌ　ａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、バチルス（
Ｂ　ａｃｉｌｌｕｓ）、シトロバクタ−（Ｃ１ｔｒｏｂ
ａｃｔｅｒ）、アエロバクタ−（Ａ　ｅｒｏｂａｃｔｅ
ｒ）およびクレブシェラ属から選択し、次いで、その株
を、嫌気的条件下に一定のｌ）Ｈでグリセロールを単一
の炭素源として５〜２０重量％グリセロール溶液の工業
的な変換に用い、グリセロールが殆ど消費された後、生
成したバイオマスを分離し、生成物混合物を蒸留により
処理することを特徴とする方法に関する。

広義の態様においては、本発明は、多くの嫌気性微生物
およびいくつかの好気性微生物は、グリセロールを１．
３−プロパンジオールに変換し得る酵素を供給するとい
う基本概念に基づいている。

従って、本発明により、第１の工程において、微生物株
の能力に基づいて適当と思われる株を選択する。この目
的のために、クロストリジウム、エンテロバクテリウム
、ラクトバチルス、ノ＜チルス、シトロバクタ−、アエ
ロバクタ−および／またはクレブシェラ属から株を選択
し、標準的な発酵条件下に５％グリセロール溶液を単一
の炭素源として増殖させ、体積／時間収率を測定し、前
記の値を越える体積／時間収率を示す株を選択する。本
発明において、標準的な発酵条件下とは、例えば菌寄死
所が提案するような標準的な培地で培養後、微生物を、
窒素源（例えば酵母エキス）をも含有するが炭素および
エネルギー源としてはグリセロールのみを含有する塩培
地に移すことを意味する。

とりわけクレブシェラに適当な標準培地（よ、実施例２
（発酵摺培地）に記載されている。このことは、文献の
データに従って他の株にも適用し得る。

本発明によると、ｐｔ−ｉ値を、工業的発酵条件下に一
定に保つか、または調節しなければならない。

適当なｐｎ値は６〜９、好ましくは６．５〜８の範囲内
である。

本発明によると、特に適当な株は、以下の微生物属から
選択し得ることがわかった：クロストリジウム・パーフ
リンジェンス（Ｃ、ｐｅｒ４ｒｉｎｇｅｎｓ）、クロス
トリジウム・パストイリアヌム（Ｃ。

ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｍ）、クロストリジウム・アセ
トブチリクム（Ｃ、ａｃｅＬｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ）、
クロストリジウム・プヂリクム（Ｃ、ｂｕｔｙｌｉｃｕ
ｍ）、酪酸クロストリジウム、クロストリジウム・パイ
エリンキ（Ｃ。

ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、クロストリジウム・カン
トントイ（Ｃ、ｋａｎｔｏｎｔｏｉ）、ラクトバチルス
・ブレビス（Ｌ、　ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・
ブフネリ（Ｌ。

ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、シトロバクター・フロインディ（
Ｃ。

ｆｒｅｕｎｄｉｉ）、アエロバクター・アエロゲネス（
Ａ。

ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、クレブシェラ・ニューモニエ、
シトロバクター・インターメジウム（Ｃ、ｉｎｔｅｒｍ
ｅｄｉｕｍ）、クレブシェラ・アエロゲネス（Ｋ、　ａ
ｅｒｏｇｅｎｅｓ）およびクレブシェラ・オキシトカ。

これらのうち、クレブシェラ・ニューモニより５Ｍ２０
２６およびクレブシェラ・オキシトカＮＲＣＣ３００６
およびシトロバククー・フロインデイ（ＤＳＭ３００４
０または３００３９）並びにそれらの突然変異体または
変種が特に好ましい。他の適当な株は、クレブシェラ・
プランティコラ（Ｋ　、　ｐｌａｎｔｉｃｏｌａ）、と
りわけクレブシェラ・プランティコラＩＡＭ１１３３並
びにその突然変異体および変種である。

株の酵素供給が重要な選択基準であることは、当業者に
明らかである。従って、本発明において使用する株は、
遺伝子工学手法によりグリセロールの！、３−プロパン
ジオールへの変換のために重要な酵素供給を付与された
株をも包含する。

本発明の方法を行うのに特に好ましい株は、酪酸クロス
トリジウムＳＨ１（ＤＳＭ５４３１）およびＡＫｌ（Ｄ
ＳＭ５４３０）である。これらの株は、土壌および泥の
試料をパスツール殺菌後、グリセロール含有培地中で、
該試料からプロパンジオール生成のために濃厚化された
ものである。このような株は、次のような性質を示す：
炭水化物なしにＰＹ培地で増殖する、グルコース鉱酸塩
ビオチン培地で増殖する、ゼラチンを加水分解しない、
朝刊用スペクトルが、糖メレジトースおよびリボースに
関してクロストリジウム・アセトプチリクムに相当する
。前記株は、クレブシェラ株よりも非常に好ましいので
、リスククラス１（２に対して）とし得る。これらは、
本発明の方法において、特に高いグリセロール変換を示
す。

本発明によると、微生物学的基準とは異なり、２０重量
％まで、好ましくは５〜１５重量％、より好ましくは１
０〜１５重量％の非常に高濃度のグリセロールを使用し
得ることがわかった。このことは、このような高濃度で
は通例異化（カタボライト）抑制が起こると考えられる
限りにおいて、なおさら驚くべきことである。

本発明の方法は、純朴なグリセロールの溶液を用いて行
い得るだけでなく、通例、トリグリセリドの工業的加工
により、例えば脂肪酸トリグリセリドの蒸気による水素
化、または脂肪酸トリグリセリドのエステル交換により
生じるグリセロール水を用いて行い得る。このようなグ
リセロール水は、主として水およびグリセロールを含有
するが、出発物質または工程に由来する不純物も少し含
む。

本発明によると、未処理グリセロール水が出発物質とし
て好ましく、獣脂およびラウリン酸含量の低い他のトリ
グリセリドの水素化によって生じるものが出発物質とし
て特に好ましいことがわかった。

本発明の方法を行うために、本発明に従って選択した微
生物株を、まず前培養培地で培養することが好ましい。

適当な前培養培地は、グリセロールおよび／または他の
炭素源（例えばグルコース）および窒素源（例えば酵母
エキス）を更に含有する塩培地である。

この前培養工程は、発酵槽に導入するのに充分なバイオ
マスが生成するまで続けることが好ましい。通例、前培
養の炭素源が完全にまたは実質的に完全に消費されてか
ら発酵槽に導入する。

発酵槽培地は、前培養培地とは異なり、比較的少量のホ
スフェートおよびカリウムを含有する。

通例、前培養培地および発酵槽培地のいずれもが、ナト
リウム、カリウム、アンモニウム、マグネシウムおよび
カルシウムのカヂオン並びにホスフェート、スルフェー
トおよびクロリドのアニオンを含有し得る。

更に、発酵槽培地は、微量元素、とりわけ亜鉛、鉄、マ
ンガン、銅、コバルト、ホウ素および／またはモリブデ
ンをも含有することが好ましい。

発酵培地の詳しい組成は、当業者が、関連文献から、ま
たは微生物株寄託の提案から知ることができる。例えば
次の文献を参照し得る：エバンス（Ｃ，Ｇ、　Ｔ、　Ｅ
ｖａｎｓ）、ヘパ−）（Ｄ、　１ｌｅｂｅｒｔ）および
テンペスト（Ｄ、　Ｗ、　Ｔｅｍｐｅｓｔ）、１９７０
ｒザ・コンティニュアス・カルティベーション・オン・
ミクローオーガニズムズ、２．コンストラクション・オ
ン・ア・ケモスタット（Ｔｈｅ　Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ
　Ｃｕ１ｔｉ−ｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｉｃｒｏ−ｏｒ
ｇａｎｉｓｍｓ、　２．　Ｃｏｎ５ｔｒｕｃｔｉｏｎｏ
ｆ　ａ　Ｃｈｅｍｏｓｔａｔ）Ｊ、メソッズ・イン・ミ
クロビオロジー（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌｏｇｙ）、２、アカデミツク・プレス（Ａｃａｄ
ｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、２７７〜３２７頁およびスト
リークストラ、タイクセイラ・デ・マツトス（Ｍ、　Ｊ
、　Ｔｅ１ｘｅｉｒａ　ｄｅ　Ｍａｔｔｏ′ｓ）、ネイ
ッセル（０，Ｍ、　Ｎｅ１ｊｓｓｅｌ）およびテンペス
ト、１９８７１オーバーフロー・メタボリズム・デユー
リング・アンエアロビック・グロース・オン・クレブシ
ェラ・エアロゲネスＮＴＣＣ４１８・オン・グリセロー
ル・アンド・ジヒドロキシアセトン・イン・ケモスタッ
ト・カルチ’ｒ　−（Ｏｖｅｒｆ　ｌｏｗ　ＭｅＬａｂ
ｏｌｉｓｍ　ｄｕｒｉｎｇ　Ａｎａｅｒｏｂｉｃ　Ｇｒ
ｏｗｔｈ　ｏｒ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａａｅｒｏｇｅｎ
ｅｓ　ＮＴＣＣ４１８ｏｎ　Ｇｌｙｃｅｒｏｌ　ａｎｄ
　Ｄｉｈｙｄｒ。

ｘｙａｃｅｔｏｎｅ　ｉｎ　Ｃｈｅｍｏｓｔａｔ　Ｃｕ
１ｔｕｒｅ）Ｊ、アーカイブズ・オン・ミクロビオロジ
ー（Ａｒｃｈｉｖｅｓ　ｏｆ　Ｍｉｃ−ｒｏｂｉｏｌｏ
ｇｙ）、１４７．２６８〜２７５頁。

嫌気性株を使用する場合、発酵は、酸素の不存在下に、
好ましくは窒素雰囲気中で行う。好ましい一態様におい
ては、発酵を気体状の発酵副生成物の雰囲気中で行う。

本発明の方法を工業的規模で行うために、前培養器に適
当な接種物を導入し、次いで栄養溶液と組み合わせ得る
。接種物の量は、バッチ全量に対して、好ましくは５〜
２０体積％、より好ましくは８〜１５体積％である。溶
液中に生成する微生物懸濁液を、次いでグリセロールと
共に発酵タンクまたは発酵タンクのカスケードに導入す
る。次いで、他の助剤を発酵槽またはカスケードに添加
し得る。例えば、抑泡剤または濾過助剤を添加し得る。

次いで、回収のために、培養液を、メンブランフィルタ
−プレス内でバイオマスから連続的に分離するか、また
は濾過（例えばミクロ濾過）によって有用生成物を連続
的に分離する。生成したバイオマスを洗浄して洗液を濾
液と合した後、水および低沸点成分を、蒸発器内で連続
的または非連続的に、少なくとも部分的に除去し得る。

蒸発器内に残る比較的高沸点の成分、すなわち栄養塩と
発酵生成物との混合物を、次いで例えば薄層蒸発器に導
入し得る。得られる濃縮物を、稍留および短路蒸留（ｋ
ｕｒｚｗｅｇｄｅｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）によって分離
して、１．３−プロパンジオールおよび要すれば２．３
−ブタンジオールのような副生成物を得ることができる
。

本発明の方法によると、グリセロールを実質的に化学量
論的に１．３−プロパンジオールに変換することが可能
である。１．３−プロパンジオールの収量は、しばしば
グリセロール３モルにつき２モルのオーダーである。本
発明においては、実質的に少なくとも８０％、好ましく
は９５％、とりわけ９９％以上のグリセロール消費を意
図すると理解される。

１．３−プロパンジオールに加えて、２．３−ブタンジ
オール、アセトイン、エタノールまたは酢酸および／ま
たは乳酸のような他の重要な有用生成物も生成し得る。

発酵は、剪断速度の小さい層流撹拌機付き発酵槽中で行
うのが最もよいことがわかった。この種の撹拌機は、当
業者によく知られている。高い剪断速度は本発明におい
て悪影響を及ぼすが、層流によりそのようなことが避け
られる。

更に、エネルギー供給を小さく保つことが好ましい。当
業者は、エネルギー供給を、発酵温度２７〜４０℃、好
ましくは３３〜３８℃で、エネルギー供給が発酵温度を
上昇することなく保つように調節し碍る。すなわち、エ
ネルギー供給は、好ましくは１ＫＷｈ／ｍ３以下、より
好ましくは０．７５〜０　、２　ＫＷｈ／ｍ’である。

［実施例コ 実施例１ 種々のグリセロール源によるクレブシェラ・ニューモニ
エの増殖のボトル試験 微生物：クレブシェラ・ニューモニよりＳＭ２２６ 培地： に、ＨＰｏ、　　　　　　　　３．３８３（ｇ／Ｃ）Ｋ
Ｈ＊Ｐ　０４　　　　　　　１　、２９３ＮＨ，ＣＱ５
．３５ ＮａｔＳＯ，”　　　ｌ　　ＯＨ＊ＯＯ，６４クエン酸
・ｒ−ｔｗｏ　　　　　　Ｏ，４２ＭｇＣＱｔ　　　　
　　　　　　０　、１２ＧａＣＱｔ　　　　　　　　　
　０．００２２酵母エキス　　　　　　　１．００ グルコース　　　　　　　３．００ この培地をオートクレーブに入れる前にＩ）Ｈ７２に調
節した。

培養 微生物を、前記塩培地で一晩培養した。培地は、１００
ｘｆｆ培養ボトル中で嫌気的条件下（Ｎ、ガス相）に３
７℃でインキュベートした。インキュベーション後、増
殖試験の接種物として培養液１ｘ（ｌを使用した。２試
験を行い、各場合において異なるグリセロール源を用い
た。使用した培地は、前記塩培地であるが、グルコース
を２０ｇ１Ｑ量のグリセロール、蒸気による牛脂の水素
化によって得られるグリセロール、および過熱蒸気によ
るヤシ油の水素化により得られるグリセロールに代えた
ものを用いた。

尖施例２ グリセロールから１．３−プロパンジオールへのバッチ
式発酵 微生物：クレブシェラ・ニューモニより９Ｍ２２６ 培地； 前培養培地： に、ＨＰｏ、　　　　　　　　３．３８３（ｇ／１２）
Ｋ＋ｒ、ｐｏ、　　　　　　　　１．２９３ＮＨ，ＣＱ
　　　　　　　　　５．３５ＮａｔＳＯ，”　ｌ　０ｌ
−（ｔｏ　　　０．６４クエン酸・トｒ、ｏ　　　　　
　Ｏ，４２ＭｇＣＩ２．　　　　　　　　　０．１２Ｇ
ａＣＱｔ　　　　　　　　　　Ｏ，００２２グリセロー
ル　　　　　　　２０．００酔母エキス　　　　　　　
１．００ グルコース　　　　　　　　３．００ この培地をオートクレーブに入れる前にｐｔ−ｔ　７　
。

２に調節した。

発酵槽培地： ＮａＨｔＰ　０４　”　２０！Ｏ Ｈ４ＣＱ Ｃｅ Ｎａｔ６０４　”　　ｌ　ＯＩ’ｌｔＯクエン酸・Ｈ２
Ｏ Ｍ　ｇ　ＣＱ　ｔ ａＣ１２ｔ グリセロール 醇母エキス 微量元素濃度： いずれの培地も、 していた： ＺｎＣｌ２＊ ＦｅＣｌ２３−６ＨｔＯ ＭｎＣＱｔ　”　４　Ｈｔ。

ＣｕＣＱ＊　・２ＨｔＯ ＣＯＣＱ２”　６Ｈ１Ｏ Ｈａ　Ｂ　Ｏｓ Ｎａ、Ｍｏｂ。

抑泡剤： 以下の濃度の微量元素を含有 １　、５６　（ｇ／１２） ５．３５ ０．７５ ０．６４ ０．４２ ０．１２ ０．００２２ 表参照 １．００ ３　、４２　Ｃｘ９／　Ｃ） ２７．００ １　０．００ ０．８５ ２．３８ ０．３１ ０．０２ 発酵中に市販の抑泡剤の添加を行った。

培養： 培養ボトル中嫌気的条件（Ｎ２ガス相）下に３７°Ｃで
約２４時間培養することによって接種物（５％）を調製
した。

ＳＧＩ［セトリング・ジエニー・インダストリアル（Ｓ
　ｅｔｒｉｃ　　Ｇ　ｅｎｉｅ　　Ｉ　ｎｄｕｓｔｒｉ
ｅｌ）］の温度、ｐｔｌおよびｒｐｍ測定および調節装
置付きのＳＧＩ製４．５Ｑ発酵槽内で発酵を行った。発
酵は、嫌気的条件（Ｎ２ガス相）下に３７℃／ｐＨ７（
２，５Ｎ−Ｎ　ａ　Ｏ［（添加により調節）で、グリセ
ロール（ｐ、Ａ、）５０．１００．１５０および２００
ｇ／（！を含有する塩培地（酔母エキス０．１％）を用
いて行った。

発酵の結果を次の表に示す。

５０および１００ｇ／Ｃのグリセロールを用いた発酵に
おいては、基質の９９％が変換された。１５０ｇ／ｌの
場合ｉよ、約９０％のグリセロールが変換された。

ｍ　高０）　ｌ　、　３−プロパンジオール濃度は、１
５０ｇ／１２において達成され（７５９ｍＭまたは５８
ｇ１０、最高の体積／時間収率（ＶＴＹ）は、グリセロ
ール濃度１００ｇ／ｌにおいて達成された（２．３ｇ／
ｈ／＆）。

同様のバッチ式発酵を、ＩＱ規模でシトロバクター・フ
ロインディの株を用いて行った。シトロバクター・フロ
インディＤＳＭ３００３９株は、５０ｇ／Ｃのグリセロ
ールを用いる発酵において好ましい結果を示した。

実施例３ 実施例２と同様の条件下に発酵を行った。発酵は、３Ｑ
の規模で、３７℃／ｐＨ７（５Ｎ−Ｎａ０Ｉ−１添加に
より調節）で２００回転／分で撹拌しながら行った。試
験中、反応器を窒素でパージ（０，３ＮＬ／分）して、
嫌気的条件を保持した。

牛脂に由来する粗グリセロールを使用し、グリセロール
濃度を変えて（９０および１４０ｇ／ｆ２）発酵を行っ
た。いずれの試験においても、グリセロール９０％以上
が代謝された。得られた結果を次表Ｉこ示す： 実施例４ 酪酸クロストリジウムＳＨＩおよびＡＫＩをノくツチ式
培養に用いて、ＩＱ発酔槽（ＢＣＣ）内で試験を行った
。培養体積は約７００ｔｔｒＱであった。培地の組成は
以下の通りであった（１１２当たり）：に、ｔｌＰｏ、
　　　　　　　Ｉｇ Ｋ　ｔｌ　ｔＰ　Ｏ４０、５ｇ （ＮＨ４）ｔｓ　０４　　　　５ｇ／ｌｏｎｇグリセロ
ールＭ　ｇ　Ｓ　Ｏ４・７１（ｔｏ　　　　０．２ｇＣ
ａＣＱ１２１（ｔｏ　　　　２０ｍｇＦｅ５Ｏ１７Ｈｔ
Ｏ５ｍｇ 酔母エキス　　　　　　１ｇ 微量元素溶肢 グリセロール　　　　　表示量。

ｐ　Ｉ−１値はいずれの場合も７に一定に保ち、温度は
３２°Ｃとした。グリセロールを供給しながらのＦＥＤ
バッチ培養を同様に行った。結果を第４〜７表に示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、微生物によりグリセロールを１，３−プロパンジオ
   ールに変換する方法であって、まず、標準的な発酵条件
   下に５重量％グリセロール溶液を単一の炭素源として体
   積／時間収率０．５ｇ／ｈ／ｌ以上でグリセロールを１
   ，３−プロパンジオールに変換する微生物株を、クロス
   トリジウム、エンテロバクテリウム、ラクトバチルス、
   バチルス、シトロバクター、アエロバクターおよびクレ
   ブシェラ属から選択し、次いで、その株を、嫌気的条件
   下に一定のｐＨでグリセロールを単一の炭素源として５
   〜２０重量％グリセロール溶液の工業的な変換に用い、
   グリセロールが殆ど消費された後、生成したバイオマス
   を分離し、生成物混合物を蒸留により処理することを特
   徴とする方法。 ２、工業用グリセロール、とりわけトリグリセリドの工
   業的加工により得られる工業用グリセロール溶液をグリ
   セロール溶液として使用する請求項１記載の方法。 ３、脂肪をケン化および／またはエステル交換すること
   によって得られるグリセロール溶液を、該グリセロール
   水相の後処理を行うことなくグリセロール溶液として使
   用する請求項１または２記載の方法。 ４、ラウリン酸含量の低い脂肪をケン化することによっ
   て得られるグリセロール溶液をグリセロール溶液として
   使用する請求項１〜３のいずれかに記載の方法。 ５、グリセロール濃度を５〜２０重量％、好ましくは１
   ０〜１５重量％とする請求項１〜４のいずれかに記載の
   方法。 ６、ｐＨを６〜９、好ましくは６．５〜８の範囲内で一
   定に保つ請求項１〜５のいずれかに記載の方法。 ７、微生物株を、クロストリジウム・パーフリンジェン
   ス、クロストリジウム・パストイリアヌム、クロストリ
   ジウム・アセトブチリクム、クロストリジウム・ブチリ
   クム、酪酸クロストリジウム、クロストリジウム・バイ
   エリンキ、クロストリジウム・カントントイ、ラクトバ
   チルス・ブレビス、ラクトバチルス・ブフネリ、シトロ
   バクター・フロインディ、アエロバクター・アエロゲネ
   ス、クレブシェラ・ニューモニエ、シトロバクター・イ
   ンターメジウム、クレブシェラ・アエロゲネスおよびク
   レブシェラ・オキシトカから成る群から選択する請求項
   １〜６のいずれかに記載の方法。 ８、酪酸クロストリジウムＳＨ１（ＤＳＭ５４３１）お
   よび／または酪酸クロストリジウムＡＫ１（ＤＳＭ５４
   ３０）、および／または１，３−プロパンジオールを生
   成し得るそれらの突然変異体または変種を使用する請求
   項１〜７のいずれかに記載の方法。 ９、クレブシェラ・ニューモニエ（ＤＳＭ２０２６）お
   よび／または１，３−プロパンジオールを生成し得るそ
   れらの突然変異体または変種を使用する請求項１〜７の
   いずれかに記載の方法。 １０、クレブシェラ・オキシトカＮＲＣＣ３００６およ
   び／または１，３−プロパンジオールを生成し得るそれ
   らの突然変異体または変種を使用する請求項１〜７のい
   ずれかに記載の方法。 １１、窒素源として酵母エキスを含有する塩発酵培地の
   存在下に行う請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。 １２、微量元素亜鉛、鉄、マンガン、銅、コバルト、ホ
   ウ素およびモリブデンの存在下に発酵を行う請求項１〜
   １１のいずれかに記載の方法。 １３、撹拌エネルギー供給により、２７〜４０℃の発酵
   温度を保つ請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。 １４、生成するバイオマスをメンブランフィルタープレ
   スによってバッチ式に分離するか、またはミクロ濾過に
   よって連続的に分離する請求項１〜１３のいずれかに記
   載の方法。１５、バイオマスの分離後、有用生成物を含
   有する液相から、蒸発器内で水の一部と低沸点成分とを
   除去し、次いで薄層蒸発器内で不揮発性成分を分離し、
   その後濃縮物を１，３−プロパンジオールと他の低揮発
   性成分とに分留する請求項１〜１４のいずれかに記載の
   方法。 １６、低エネルギー供給、好ましくはエネルギー供給１
   ．０ＫＷｈ／ｍ＾３・ｈ、より好ましくは０．７５〜０
   ．２ＫＷｈ／ｍ＾３・ｈで発酵槽内で発酵を行う請求項
   １〜１５のいずれかに記載の方法。 １７、層流撹拌機付き発酵槽内で発酵を行う請求項１〜
   １６のいずれかに記載の方法。 １８、発酵のための接種物の量が５〜２０体積％、好ま
   しくは８〜１０体積％である請求項１〜１７のいずれか
   に記載の方法。