JPH0366284B2 - - Google Patents

Description

請求の範囲 １ 皮膚細胞のDNA修復プロセスを促進する作
用物質複合体としてビフイドバクテリウム
（BifidoBakterium）属のバクテリアの不活化培
養物を含むことを特徴する化粧品。

明細書 過度の日射が慢性皮膚障害をひき起こし、それ
が表皮の病変、例えば萎縮、色素の変化、膠原変
性をもたらし、遂には細胞のデオキシリボ核酸
（DNA）の永久的障害をひき起こすことがあるこ
とは知られている。DNAの二重らせん構造のブ
ロツクの順序は周知のように細胞分裂の際に、遺
伝的に符号化された遺伝基質の正しい再現を保証
する。皮膚に対する紫外線の激しい作用は、
DNAの２個の隣接するチミジン・ブロツク間に
付加環化によりチミジンの二量体化をもたらす。
核酸のこうした構造変化は細胞の死滅或いは遺伝
性の細胞障害をもたらすことがある。

ところがあらゆる細胞は、チミジン二量体を
DNA鎖から切り取つて、チミジン単量体で置き
換えるための、一連の酵素制御反応から成る、い
わゆる内因性修復システムを有する。

しかしこのDNAの自然の修復機構は限られた
能力しかなく、日光の過度に強い作用によつて、
この能力がほとんど消尽される。更に、ジエイ・
ピー・リトルの「老人学」（J.B.Little
「Gerontology」）、22、28〜55（1976）の研究か
ら、細胞の老化と正常な修復プロセスをもたらす
その能力との間には密接な関係があることが知ら
れているが、細胞の修復機能の減少が老化の直接
の原因であるのか単に老化の促進要因であるのか
は未だ明らかではない。

そこで本発明の根底にあるのは、過度の光の影
響によつて減退した身体固有の上記の皮膚細胞
DNA修復能力を再び生理的に必要な程度にし、
こうして永久的細胞障害の発生を予防し、光に起
因する皮膚の老化過程を緩慢にすることができる
製剤を提供する問題である。

この課題は、皮膚の細胞のDNA修復プロセス
を促進する作用物質複合体を含ませた化粧品を通
じて皮膚に局所的に塗布することにより解決され
る。特に、ビフイドバクテリウム（Bifido−
Bakterium）属のバクテリアの不活化培養から
得られた作用物質が適当であることが判明した。
この作用物質は、光の作用によつて減退した身体
固有の皮膚細胞DNA修復能力の所期の増強を生
じさせることができる。

この化粧品を適用することによつて、永久的皮
膚障害の発生に対して予防的に対抗し、光に起因
する皮膚の老化過程を緩慢にすることができる。
このことは化粧品の観点から見て、この化粧品に
高い実用的価値を付与する。修復過程を促進す
る、本発明の本質をなす作用物質複合体は、例え
ばビフイドバクテリウム・ロンガム（ロイター）
〔Bifidobacterium longum（Reuter）〕種
（ATCC15707）のようなビフイドバクテリウム
（Bifido−Bakterium）属の不活化菌から成る。
この不活化菌は細胞質分と酵素、例えば乳酸脱水
素酵素、フオスフアターゼ、フオスフオケトラー
ゼ、トランスアルドラーゼ、並びにムレインおよ
び多糖類を含む。

例えば嫌気的に得たビフイドバクテリア
（Bifidobakterion）の表面培養物を生理的食塩水
で洗浄し、遠心分離し、再び生理的食塩水に受
け、水浴で０℃に冷却しつつ超音波（20KHz）で
繁殖力あるすべての生物が完全に死滅するまで処
理することによつて、不活化細胞を得ることがで
きる。この場合、溶液100ml当り約20分の時間が
必要である。文献に記載された別の機械的な調製
方法、例えばジエイ・アール・ノリス（Ｊ・Ｒ・
Norris）及びデー・タブリユ・リボンズ（Ｄ・
Ｗ・Ribbons）の「微生物学の諸方法」
（Methods in Microbiology）第５巻、１〜54
頁、1971、アカデミツクプレス（ロンドン、ニユ
ーヨーク）に公知の調製方法を用いてもよい。

広汎な試験管内および生体試験系列に基づき、
化粧品中に含有せしめた作用物質複合体の外因的
供給により自然的DNA修復率を著しく高めるこ
とができることが証明された。個々の試験系列で
は100％を超える上昇率が得られた。

即ち、本発明による作用物質複合体の修復促進
効果は、次の試験系列により証明することができ
た。

マウス脾臓細胞、人体リンパ球及び人体線維
芽細胞の試験管内試験系列 類似の試験においてそれぞれ試験物質を溶剤中
に懸濁させ、試験すべき作用物質複合体としてビ
フイドバクテリウム・ロンガムの不活化培養物を
混ぜ、これに254nmの紫外線ランプで照射した。
対照用として、作用物質複合体を含まない同様に
作成した夫々の対照細胞系列を使用した。

プログラムDNA複製、いわゆる半保存合成を
抑制するために、抑制剤としてヒドロキシ尿素を
添加した。ここでもつぱら生起する、いわゆる非
プログラム合成が、切除修復過程の直接的尺度で
ある。

照射の後、各バツチに三重水素化H³−チミジ
ンを添加した。この放射性標識チミジンは修復過
程の経過中に、欠陥あるチミジン二量体と交換さ
れた。標識に基づいて測定しうるDNAへのH³−
チミジンの組入れ率が、修復率の尺度である。

その結果、すべての場合に作用物質複合体が対
照に比して、H³−チミジンの組入れ率の高度に
有意な増加を示すことが確認された。

ラツトの生体試験系列 動物の背中の剃毛部分に被検物質、すなわち作
用物質複合体としてビフイドバクテリウム・ロン
ガムの不活化培養物およびそれと並んでかかる作
用物質含有量５％及び10％の化粧品を塗布した。
結果の相対表示のために、それぞれ当該の盲験物
質を使用した。それと共に作用物質と盲験物質の
絶対的基準として、同様に処理したが未照射のラ
ツトの体表面を使用した。

照射の前に10匹の試験群に４時間おきにそれぞ
れ50mgの試験物質と盲験物質を、所定の体表面に
塗布した。最初の物質適用の72時間後に紫外線照
射を行つた。対照群は未照射のままとした。照射
の後、試験群と対照群の動物にH³−チミジン溶
液と、プログラムDNA合成の抑制のためにヒド
ロキシ尿素を注射した。全てのラツト群は、照射
後24時間エーテル麻酔下におかれた。この場合
も、検出されるH₃−チミジン組入れ率が試験物
質の修復活動度の尺度である。

その結果、作用物質複合体は対照に比して、修
復能力の統計的に有意な増加を示すことが確認さ
れた。もう一つの重要な結果は、修復促進作用物
質複合体10％を含む化粧品が作用物質複合体その
ものより４倍高い修復活動度を、また５％を含む
化粧品は２倍高い修復活動度を示すことであつ
た。

下記の処方は本発明の実施例である。

例 １ 上記のデータに従つて調製した修復促進作用物
質複合体10％を含むＯ／Ｗ型クリーム。

次の成分を使用した。

ａ セチルステアリルアルコール 9.0％ セチルステアリル硫酸ナトリウム 1.0％ オレイン酸デシルエステル 10.0％ 羊毛脂 2.0％ 分留ヤシ油脂肪酸のトリグリセリド 5.0％ 保存剤 十分量 ｂ 蒸留水 57.7％ 70％ソルビール溶液 5.0％ ｃ 修復促進作用物質複合体（ビフイドバクテリ
ウム・ロンガム） 10.0％ 初めに上記ａ）の成分組成物を溶融し、次
で、約70℃に加温し、次にこれに、70℃に加熱
した前記ｂ）成分の溶液を添加する。この混合
物は、クリームが約35℃に冷えるまで更に撹拌
する。その後、該ｃ）成分を添加し、均一に分
散されるまで撹拌することにより、上記製品は
調合される。

例 ２ 前述のデータに従つて調製した修復促進作用物
質複合体10％を含むＷ／Ｏ型クリーム。

下記の成分を使用した。

ａ 主としてペンタエリトリツト脂肪酸エステ
ル、クエン酸アルコールエステルの混合エステ
ル及び鉱物性脂肪の高分子エステル混合物
20.0％ オレフイン酸デシルエステル 5.0％ 植物油 5.0％ 白色ワセリン 5.0％ 保存剤 十分量 ｂ 蒸留水 55.0％ ｃ 修復促進作用物質複合体（ビフイドバクテリ
ウム・ロンガム） 10.0％ 例１に示した方法で上記製品は調合される。

例 ３ 修復促進作用物質複合体を含むゲル。

ａ 保存蒸留水 50.0％ カルボボル940（ポリアクリル酸） 0.5％ フエノニツプ（保存剤） 0.3％ ｂ 保存蒸留水 28.2％ トリエタノールアミン 1.0％ ｃ 修復促進作用物質複合体（ビフイドバクテリ
ウム・ロンガム） 20.0％ ａ）成分をｂ）成分ｃ）成分とを順次添加し急
速に撹拌して上記製品は調合される。

例 ４ 修復促進作用物質複合体を含むローシヨン。

ａ 96容量％エタノール 15.0％ ｂ 保存蒸留水 76.4％ クエン酸 0.3％ フエノニツプ 0.3％ １，２−プロピレングリコール 3.0％ ｃ 修復促進作用物質複合体（ビフイドバクテリ
ウム・ロンガム） 5.0％ ｂ）の細胞で溶液を作り、次にまず成分ａ）、
続いて成分ｃ）を加えることにより上記製品は
調合される。