JPH0377880A - 水難溶性フラボノイドの溶解方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （イ）産業上の利用分野 この発明は、水難溶性フラボノイドの溶解方法に関する
。

（ロ）従来の技術 従来、水難溶性フラボノイドの代表的化合物であるルチ
ンは、抗酸化作用、血管強化作用等の薬理作用を有する
が、着色飲料の褪色防止剤としても繁用されている。褪
色防止剤として、使用する場合に、水溶液中にルチンを
少なくとも０．０１ｆ／Ｖ％程度存在さすことが望まれ
る。しかしルチンは、常温の水に対して溶解度かＱ、Ｏ
Ｑ８％程度で水難溶性である。

医薬を目的としたルチン自体の水溶化法として、アミノ
基を有する脂肪族化合物を加えて水溶性にする方法（特
公昭２５（６７７号公報）、ルチンにハロゲン酢酸やロ
ンガリットを作用ざ什て水溶性を増す方法（特公昭２６
−２７２４号公報；特公昭２９−１２８５号公報）があ
る。

さらに、ルチンにトランスグリコシダーゼの存在下にデ
キストリンを反応さｄ・、得られた反応物（ルチン、ル
チングリコシド、ルチンマルトミド及びルチンマルトト
リオシトの混合物）が水溶性であるという報告がある（
特公昭５４−３２０７３号公報）。

しかｊ２ながら、ルチンに少量のフラボノイド類似体を
添加してルチンの水溶性を向上させることは知られてい
ない。

（ハ）発明が解決１．ようとずろ課題 ルチンのような水離溶性フラボノイドを、着色飲料の退
色防止剤として使用するに当り、着色剤の退色防止効果
に影響なく、飲料としての衛生化学上の問題がｊＪ＜か
つ少量で所望の水溶性の改善がなしうる方法が望まれて
いた。

（ニ）課題を解決するための手段 かくしてこの発明によれば、水路溶性フラボノイドを一
般式 （ただし、ＧＬはグルコース残基、ｎは１以上の整数を
表す） で示されるケルセチン−３−〇−配糖体のＩＮ又は２種
以上の共存下に水性媒体に溶解ざ仕ることよりなる水靜
溶性フラボノイドの溶解方法が提供される。

この発明の水溶化改善の対象とする水難溶性フラボノイ
ドどは、ルチン及びその類似体を意味する。類似体には
ケルセチン、モリンなどが含まれる。

上記式（１）の化合物は、水難溶性フラボノイドに対し
て、通常１３〜２５ｆｆｉ量％、好ましくは１７〜２５
璽量％用いられる。これによって水、難溶性フラボノイ
ドは０゜Ｏｉ　＝Ｏ，Ｑ４Ｗ／Ｖ％の安定な水溶液とす
ることができる。

この発明における水性媒体とは、水又は水に他の溶質、
例えば炭酸ガス、果汁、糖、着色料、香料、有機酸、ビ
タミン類、動植物エキス成分、その他を１種以上含有し
たものでｔ５ろ。

一般式（１）の化合物は、ルチンにナリンギナーゼの様
な酵素を反応させて得られるケルセチン−３−０−モノ
グルコサイドを原料と１．て、これにグルコース源とグ
リコシダーゼ又はトランスグリコシダーゼ等のグルコー
ス残基転移性酵素を反応させてグルコース残基を等モル
以上転移させて得られる。

前記グルコース源としては、そのグルコシル残基の１分
子以上がケルセチン−３−〇−モノグルコサイド分子に
転移されうるものであればよく、例えばアミロース、ア
ミロペクチン、でん粉だけでなく、でん粉液化物、でん
粉糖化物、シクロデキストリンなども用いることができ
る。グルコース源の添加量は、ケルセチン−３−０−モ
ノグルコサイドに対して、通常、５０＝１０００１ｉ量
％の量でよく、ことに１００〜４００鴛置％涯度の量が
有利である。

前記グリコシグー署でとしては、例えばα〜アミラーゼ
（Ｅ、Ｃ，３，２，Ｌ、Ｒ，）、６Ｚ−グルコシダーゼ
（［Ｅ。

Ｃ，３，２，ｉ、２Ｑ）等を用いる。で、とができ、府
記トランスグリコシグーゼ２二（、≧ては、例えばシク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（Ｅ、Ｃ，
２，４，１゜１９）（以下ＣＧＴ−ａｙ＋ｅと略記する
）等を用いることができる。

ＣＧＴ−ａＩｌｅは、バチルス・ザーギュランス、バチ
ルス・マセランス、バチルス・ステアロサーモフィルス
、バチルス・メガテリウス、バチルス・ポリミキザなど
のバチルス属、クレプシーラ・ニスーモニアエなどのク
レプシーラ膜などの細菌によって生産されることが知ら
れており、いずれもこの発明に自由に使用することがで
き、必ず（７も精製する必要はなく、通常は、＠酵素で
使用することができる。Ｊミた、市販の酵素剤（例えば
、天野製薬株式会社製、コンヂザイム（商品名））を使
用することらできる。また、ケルセチン３−Ｏ−モノグ
ルコサイドとグルコース源を添加した培養液に、Ｃ０Ｔ
−ａｓｅを添加する代わりに、ＣＧＴ−ａｓｅ生産菌を
植菌し醗酵法により糖転移反応を行うこともでき、また
、ＣＧＴ−ａｓｅ生産菌を固定化したものを使用して反
応を進めることもできる。

この転移における反応系のＰＨは、約！ｌ以下ことに約
９〜２とするのが有利である。この際、ケルセチン３−
０−モノグルコサイドの反応作用を良好にするために、
未反応ルチン、残存ナリンギナーゼ、生成ラムノースを
除去してもよいことは明らかである。ＣＧＴ−ａｓｅの
添加量は、その酵素活性が、約６００単位の場合、添加
したグルコース源の約１００重量％以下ことに約６０〜
１０重量％程度の量が有利である。

このようにして得られたものは、ケルセチン−３−０−
モノグルコサイドのグルコース残基にさらにグルコース
が等モル以上結合したケルセチン−３−〇−配糖体混合
物であり、反応条件によってその量は異なるが、通常未
反応のケルセチン−３−〇−モノグルコサイドが含有さ
れる。ルチンの水溶解に対しては、一般式（ｒ）のｎが
２〜８のケルセチン−３−０−配糖体の添加が特に好ま
しいが、ｎが２以上のケルセチン−３−０−配糖体の混
合物を添加してもよく、未反応のケルセチン−３−〇−
モノグルコサイドが含有されたケルセチン−３−〇−配
糖体の混合物であってもこの発明の目的を達成すること
ができる。

（ホ）作用 ケルセチン−３−０−モノグルコサイドのグルコース残
基にさらにグルコースが等モル以上結合したケルセチン
−３−〇−配糖体が、水難溶性フラボノイドの水性媒体
に対する溶解性を高める。

（へ）実施例 実施例１ 一般式　Ｉ　の化合物の調製 水１１２（温度５５℃）にルチン５９を分散し、これに
ナリンギナーゼ（天野製薬株式会社製、商品名ナリンギ
ナーゼアマノ°）を１９添加した。

この系の９Ｈは７であった。これを５時間５０℃に保持
したのち、濃縮し、０．５＆とした。冷却したところケ
ルセチン−３−〇−モノグルコサイドが沈殿した。ケル
セチン−３−〇−モノグルコサイドを取り出し、０．２
Ｑの水を加え、コーンスターチ８ｇを添加し、均質にし
、これにＣＧＴ−ａＳｅ（天野製薬株式会社製、商品名
コンチザイム）２ｚＱを添加し温度４５℃に１２時間保
持した（ｐＨ６）。これを濃縮して２０ｙとした。

この濃縮物は、高速液体クロマトグラフ装置（ＨＰＬＣ
，日本分光株式会社製、型式ＴＲＩ　ＲＯＴＡＲ−Ｖ）
によって各構成成分に分け、それぞれの成分を質量分析
装置（ＭＳ、株式会社日立製作所製、型式Ｍ−８０Ｂ、
分析結果の一部を第１図に示した）及び核磁気共鳴装置
（ＮＭＲ，日本電子株式会社製、型式ＦＸ−２００）を
使用して分析した結果、未反応のケルセチン−３−０−
モノグルコサイド２４モル％以外に、一般式（Ｉ）にお
ける ｎ３＋２の化合物　２３モル％　ｎ＝６の化合物　７モ
ル％ｎ＝３の化合物　１７モル％　ｎ＝７の化合物　４
モル第ｎｗ４の化合物　１２モル％　ｎ＝８の化合物　
２モル第ｎｗ５の化合物　９モル％　ｎ＝９〜１１の化
合物２モル％からなるケルセチン−３−〇−配糖体の混
合物であった。この配糖体の混合物を配糖体Ｉと以後称
する。ｎ＝２及びｎ＝３の化合物の質量分析スペクトル
をそれぞれ第１図の（イ）及び（ロ）に示す。

ルチンの溶解 ５本の１ｏｏｘＱ試験管Ｎｏ、　ｌ　〜Ｎｏ、　５に、
１２１／Ｖ％のグラニユー糖及びＯＪＩ／Ｖ％のクエン
酸を含有する水のｌｏｏｍ（ずつを注入し、次にｌｏｔ
／Ｖ％のルチンエタノール溶液を０．４ｘＱ　（ルチン
０．Ｑ４９に相当する）ずつ加え、直ちに１３．４１／
Ｖ％の配糖体■　エタノール溶液をＮｏ、２〜Ｎ０９５
の試験管にそれぞれ０．０２４１１２．０．０３２ＪＩ
（２，０，０４ｉＱ及び０．０５ｘ（２（ルチンに対し
て配糖体Ｉの添加量はそれぞれ８．０重量％、１０．８
重量％、１３．５重量％及びｔａ、Ｏ重量％に相当する
）ずつ混合した。

混合直後これらの溶液は、配糖体Ｉを添加しなかったＮ
ｏ、　ｌもふくめすべて澄明であったが、２４時間放置
後一部に沈殿の析出が認められた。更に、室温で沈殿の
析出状態を観察しながら１４日間静置し、１４日間静置
後上澄液中のルチン濃度を高速液体クロマトグラブイで
測定１．／′：、。

この結果、第１表及び第２図に示すように、飲料として
の衛生学上の問題がなくかつ少触で所望の水溶性の改善
がなしうる水添溶性フラボノイドの溶解方法を提供する
ことができる。

【図面の簡単な説明】

第１図（イ）及び（ｒｌ）は、この発明の実施例で得ら
れたケルセチン−３−〇−配糖体で、一般式（りの化合
物のうちｎ＝２（第１図（イ））とｎ−３（第１図（ロ
））の化合物の質量分析スペクトルの図、第２図は、こ
の発明の実施例で得られたケルセチン−３−〇−配糖体
の農度に対するルチンの溶解度を示す図である。 注Ｘｉ殿の発生しないものを−、発生したものを十で示
す。 ルチンに対して１３．５重量％の配糖体Ｉの添加により
て少なくとも０．０４重藍％のルチンが安定に水に溶解
することが確認された。 （ト）発明の効果 この発明によれば、ルチンのような水難溶性フラボノイ
ドを、着色飲料の退色防止剤と１．て使用するに当り、
着色剤の退色防止効果に影響なく、（イ） 第 ヌ 図 （ロ） （ｍ／ｚ） 質 量 肚 （ｍ／ｚ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、水難溶性フラボノイドを一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ただし、ＧＬはグルコース残基、ｎは１以上の整数を
   表す） で示されるケルセチン−３−Ｏ−配糖体の１種又は２種
   以上の共存下に水性媒体に溶解させることよりなる水難
   溶性フラボノイドの溶解方法。 ２、ケルセチン−３−Ｏ−配糖体が、水難溶性フラボノ
   イドに対して１３〜２５重量％用いられる請求項１の方
   法。 ３、水難溶性フラボノイドがルチンである請求項１の方
   法。 ４、一般式（ I ）のケルセチン−３−Ｏ−配糖体が、
   ケルセチン−３−Ｏ−モノグリコサイドにグルコース源
   をグリコシダーゼまたはトランスグリコシダーゼの存在
   下に反応させて得られるものである請求項１の方法。