JPH04112899A - マウスリンパ球表面抗原およびそれを認識するモノクローナル抗体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、新規なタンパク質とその遺伝子およびそれを
認識する抗体に関する。さらに詳しくは、本発明は、新
規なマウスリンパ球表面抗原を構成する新規なアミノ酸
配列を有するタンパク質とその遺伝子配列およびそれを
認識する抗体に関する。

すなわち本発明は、マウスのリンパ球表面抗原を特定化
し、そのタンパク質のアミノ酸配列とその遺伝子配列お
よびそれを認識する抗体を提供するものである。

し従来の技術］ 細胞は、その表面に様々な抗原を発現している。

これらの表面抗原分子の発現の有無により、細胞を分類
することができる。リンパ球細胞においても、特にリン
パ球特異的な抗原の存在が数多く知られており、これら
の発現によりＴ細胞とＢ細胞の分類のみならず、その細
胞の持っている特異的な機能までも特定することが可能
である。

また最近、表面抗原タンパク質の中で、その膜の結合様
式がホスファチジルイノシトール（ＰＩ）で細胞膜に錨
を下した型であるタンパク質（ＰＩアンカリングタンパ
ク質）の存在が知られている。これらのタンパク質が生
体内で重要な働きを持っていることが示唆されている。

例えば、Ｔｈｙ−１抗原やＬｙ−６抗原は、これらに対
する抗体を用いた実験からＴ細胞のシグナル伝達に重要
な役割を果たしていることが報告されている（Ｇｕｎｔ
ｅｒ　、　Ｋ、Ｃ、ら、　Ｎａｔｕｒｅ、　３２６．５
０５゜１９８７　；　Ｍａｌｅｋ、Ｔ、Ｒ，ら、　Ｊ、
　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、、　１６４．７０９−７２２．１
９８８）。またＮ−ＣＡＭ抗原は、細胞接着に関与する
分子であることが明らかにされている（ＥＭＢＯＪ、、
　５．２４８９．１９８６）。

ＰＩ−アンカリングタンパク質は、細胞膜貫通領域と細
胞内領域を持たず、ＰＩ特異的ホスフオリパーセＣ（Ｐ
Ｉ−ＰＬＣ）により切断され、細胞表面から消失すると
いう特徴を有しているが、そのほかに共通した特徴は持
たない（Ｌｏｗ、Ｍ、Ｇ、ら。

５ｃｉｅｎｃｅ、　２３９　、２６８．１９８８）　ｏ
　このタンパク質の切断には、ｉｎ　　ｖｉｔｒｏでは
専らバクテリア由来のＰ　Ｉ−ＰＬＣが用いられている
が、最近、真核生物の細胞膜からＰ　Ｉ−ＰＬＣが精製
された（Ｐｏｘ、Ｊ、Ａ、ら、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ
、Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、。

８４、２６８３．１９８７）。このことは、生体内にお
けるＰＩ−アンカリングタンパク質の切断は、この酵素
によって調節されていることを示唆している。

これまでに数多くのリンパ球表面抗原分子について、あ
るものはｃＤＮＡクローニングにより分子構造が明らか
にされ、あるものはそれを認識するモノクローナル抗体
が作製されているが、未だに同定されていない膜表面抗
原が多数存在していることは明らかである。膜表面抗原
は、細胞の活性化、抗原の認識、細胞間接着など免疫系
において非常に重要な機能を有している。中でもＰＩア
ンカリングタンパク質は、細胞の活性化や細胞間接着に
密接に関わっていることが明らかにされつつある。この
ような膜表面抗原を同定し、その機能を明らかにするこ
とは、免疫系の研究にとって重要な進展がなされること
が期待できる。マウスの免疫系の研究の進歩は、ひいて
はヒトの免疫系の研究の進歩につながる可能性がある。

［発明か解決しようとする課題］ 本発明は、新規なマウスリンパ球ＰＩ−アンカリング表
面抗原を同定し、その細胞分布および機能を明らかにす
ることを目的とする。

［課題を解決するための手段］ 本発明者らは、マウスリンパ球に特異的に発現している
ＰＩ−アンカリングタンパク質に対するモノクローナル
抗体を作製し、これを利用し、その遺伝子をクローニン
グすることによって全遺伝子配列を明らかにし、同時に
全アミノ酸配列を明らかにすることによってタンパク質
としての全容を明らかにしたことをもって、本発明を完
成するに至った。

すなわち本発明は、第１図に示すアミノ酸配列を有する
新規なマウスリンパ球のＰＩ−アンカリング表面抗原お
よびその同効物、さらにそれをコードする遺伝子を提供
するものである。本発明の遺伝子配列の一例を第２図に
示す。

本発明のマウスリンパ球表面抗原は、実質的にこれと同
等の機能を有するのであればアミノ酸配列の置換、欠失
、挿入があっても本発明に含まれる。

本発明のマウスリンパ球表面抗原（Ｂ７抗原と名付け、
以下Ｂ７抗原と記す）は、分子量的１２〜１５ｋｄのＰ
Ｉ−アンカリングタンパク質である。

Ｂ７抗原は、正常マウスの肺臓細胞の約６０％、成獣の
胸腺細胞の約１０％に発現し、骨髄細胞では発現を認め
ない（第３図）。また、未熟なＴ細胞であるダブルネガ
ティブ細胞（ＣＤ４陰性、ＣＤ８陰性）でも発現を認め
ないことから、成熟リンパ球に発現している分化抗原で
あることが示唆される。

一方、Ｂ７抗原は、コンカナバリンＡなどのマイトジェ
ン刺激により肺臓細胞の表面より速やかに消失する。こ
れには、活性化依存性のダウンレギュレーションが働い
ていることが考えられる。

これまでに、リンパ球活性化依存性のダウンレギュレー
ションを受ける表面抗原としては、ホーミンダレセプタ
ーのＭ　Ｅ　Ｌ　−１４（Ｊｕｎｇ、Ｔ、Ｍ、ら。

Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、、　１４１．４１１０．１９８
８）が知られている。

本発明のＢ７抗原は、Ｂ７抗原を認識するモノクローナ
ル抗体により同定することができる。以下に８７抗体の
作製方法について詳しく説明する。

本発明の新規な表面抗原を認識するモノクローナル抗体
を得るための免疫源としては、マウスのリンパ球が利用
できる。用いるマウスの系統としては、いずれを用いて
もかまわない。リンパ球細胞は、肝臓または胸腺より一
般的な方法で取得することができる。リンパ球細胞をコ
カナバリンＡなどのマイトジェンや、インターロイキン
２などのサイトカインで刺激したものを用いてもよい。

免疫は一般的な方法により、哺乳動物に腹腔内、皮下、
皮内、静脈内注射により投与することができる。

哺乳動物としては、マウス、ラット、モルモットなど一
般に用いられている動物が使用できる。

最終免疫後３〜４日目に肝臓を摘出し、抗体産生細胞と
して使用する。この抗体産生細胞と骨髄腫細胞との融合
反応は、公知の方法、例えはＭｉｌｓｔｅｉｎらの方法
（Ｍｅｔｈｏｄ　Ｅｎｚｙｍｏｌ、　７３．　ｐ３．１
９８１）などに準じて行なうことかできる。融合後の細
胞を公知のＨＡＴ選択培地にて培養を行ない、複数のハ
イブリドーマを得ることができる。この中から、マウス
リンパ球表面に存在し、かつＰＩ−アカンリングタンパ
ク質である抗原を認識する抗体を産生ずるハイブリドー
マのスクリーニングを行なう。スクリーニングの方法と
しては、例えは抗ラットＩｇＧを用いた間接法を用いる
ことができる。得られたハイブリドーマを限界希釈法に
より単一クローンとする。このようにして得られたクロ
ーンをＢ７抗体と名付け、以下Ｂ７抗体と記す。

このＢ７抗原の遺伝子構造は、そのｃＤＮＡをクローニ
ングすることにより明らかにすることができる。以下、
Ｂ７抗原のｃＤＮＡのクローニング方法について詳しく
説明する。

コンカナバリンＡで刺激したマウスの牌細胞から、公知
の方法でポリ（Ａ）”　ＲＡＮを調製する。

このポリ（Ａ）”　ＲＡＮを用いて、公知の方法で二本
鎖ｃＤＮＡを合成することができる。この二本鎖ｃＤＮ
Ａを適当なベクターに組み込むことにより、ｃＤＮＡラ
イブラリーを作製する。ｃＤＮＡのスクリーニングの方
法としては、タンパク質を発現させ、それを抗体により
検出する方法が利用できる。そのためのベクターとして
は、ファージベクターとしてλｇｔｌｌ、λＺＡＰなど
が利用できる。動物細胞の直接発現ベクターとして、ｐ
ｃＤＳＣＤＭ８などが利用できる。

例えば、ＣＤＭ８ベクターを用いたｃＤＮＡライブラリ
ーをブライアン・シードの方法（Ａｒｕｆｆｏ。

Ａ、と５ｅｅｄ、Ｂ、、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａ
ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、。

８４、８５７８．１９８７）で作製することができる。

このｃＤＮＡライブラリーをサルのＣ０８１の細胞に導
入後、Ｂ７抗体を用いたパンニングの手法（前述文献）
によりスクリーニングを行ない、Ｂ７抗原をコードする
遺伝子を含むｐＢ７を得ることができる。ｃＤＮＡ部分
の配列を公知のダイデオキシ法により決定し、Ｂ７抗原
のｃＤＮＡは４９１塩基対（第２図）よりなり、そのう
ち翻訳領域は２２２塩基対で、これより推測されるアミ
ノ酸は７４残基である（第１図）。このアミノ酸配列に
ついて、ソフトウェア開発■のＧＥＮＥＴＹＸプログラ
ムを用いて疎水性／親水性解析を行なうと、Ｎ末端とＣ
末端に弾線水性部分があり、Ｎ末端は分泌シグナル配列
で、Ｃ末端はＰＩ−アンカリングシグナル配列（池原征
夫、実験医学、　、７．１ｌｌ−１１６、１９８９）と
考えられる。この推測されるアミノ酸配列は、Ｎａｔｉ
ｏｎａｌ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　
Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　　（ＮＢＲＦ）データベースに
登録されているどのアミノ酸配列とも相同性がなく、全
く新規のタンパク質であることを示している。

本発明の遺伝子を遺伝子工学的に発現せることは常法の
手段によって達成可能であり、そのことは当然本発明に
含まれる。本発明で得られたＢ７抗原のｃＤＮＡのうち
シグナルペプチドを含む全タンパク質配列をコードする
部分を、動物細胞中で遺伝子を発現するため設計された
ベクターに組み込み、こうして得られた発現ヘクターを
適当な（例えばＣＯ５，Ｌ、Ａ３１など）細胞に導入す
ることによって、Ｂ７抗原を細胞表面に一過的にもしく
は恒久的に発現する形質転換細胞株が得られる。

また、Ｂ７抗原の遺伝子工学的発現は動物細胞以外にも
他の通常の発現手段と宿主によって達成できる。例えば
、大腸菌、酵母、枯草菌、昆虫細胞、カイコなど昆虫を
用いて達成できる。

今回得られたｃＤＮＡをプローブとして用いたノザンハ
イブリダイゼーションにより、各臓器におけるＢ７抗原
の発現を調べることができる。また、各種疾患モデルマ
ウスにおけるＢ７抗原の発現と病態との関連を調べるこ
とが可能である。また、マウスのｃＤＮＡをプローブと
してマウスＢ７に対応する他の哺乳類の遺伝子をクロー
ニングすることも可能である。

［実　施　例］ 以下、実施例を挙げて本発明を説明する。

実施例１ Ｂ７抗体を産生ずるハイブリドーマ細胞株の樹立ヒトイ
ンターロイキン２（ＩＬ２）受容体α鎖を導入したトラ
ンスジェニックマウス（Ｎｉｓｈｉ、Ｍ。

ら、　Ｎａｔｕｒｅ、　ｖｏ１２６７、　ｐ３３１．１
９８８）より肺臓細胞を取り出した。抗ＣＤ８抗体と補
体を用いて、これらと反応する細胞を取り除いた。残り
の細胞を集め、これにインターロイキン２（、ＩＬ２）
を添加し、１０日間培養した。このようにして調製した
マウス細胞をウィスターラットの腹腔内に注入した。３
週間後、同様に調製した細胞を先のウィスターラットの
腹腔内に注入し、ブーストをかけた。３日後に肺臓細胞
を取り出し、ポリエチレングリコールを用いた通常の方
法で、マウスミエローマ細胞Ｐ３Ｕ１との融合を行なっ
た。ＨＡＴ（ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ−ａｍｊｎｏｐ
ｔｅｒｉｎ−ｔｈｙｍｉ＋Ｈｎｅ）を含む培養液を用い
ることにより、融合細胞のみを選定した。限界希釈を繰
り返すことにより、Ｂ７抗体を産生ずるハイブリドーマ
細胞株を樹立した。Ｂ７抗体のサブクラスはＩｇＧ２ａ
であった。

実施例２ マウスより通常の方法で肺臓細胞を取り出し、ｌＸ１０
６細胞／ｍｌとなるように血清を含まないＲＰＭｌ１６
４０培地にッスイ）に懸濁した。

これにＣ１〜１００ｍｔＪ／ｍｌのＰＩ−ＰＬＣ（ベー
リンガーマンハイム）を添加し、３７°Ｃで６０分間イ
ンキュベーションした。細胞を３回洗った後、Ｂ７抗体
と螢光標識抗うッ）ＩｇＧ抗体を用いた間接螢光法によ
り、細胞表面上のＢ７抗原の発現をフロサイトメーター
（ＥｐｉｓＣ；コールタ−社）を用いて調べた。Ｂ７抗
原は２ｍＵ／ｍｌのＰＩ−ＰＬＣ処理により、その９０
％が細胞表面から消失した。この結果から、Ｂ７抗原は
ホスファチジルイノシトールアンカリングタンパク質で
あり、しかも前述酵素に対する感受性が非常に高いこと
がわかった。

実施例３ Ｂ７抗原の発現分布 実施例１で作製したＢ７抗体を用いて、正常マウスにお
けるＢ７抗原の発現分布を実施例２と同様な間接螢光法
により調べた。結果を第３図に示す。Ｂ７抗原は、正常
な脛臓細胞の約６０％（第３図（ｂ））　、成獣の胸腺
細胞の約１０〜２０％（第３図（ａ））で発現していた
が、骨髄細胞ではほとんど発現は認められなかった（第
３図（Ｃ））。肺臓細胞のＴ細胞のうちＣＤ４抗原陽性
の細胞のほとんどはＢ７抗原陽性であったが、ＣＤ８抗
原陽性細胞の中にはＢ７抗原陰性のものが存在した。肺
臓細胞のＢ細胞（１ｇＭ抗原）のうち６０％はＢ７抗原
陽性であった。胸腺細胞においては、ＣＤ３抗原強陽性
細胞（ＣＤ８陰性、ＣＤ４陽性が大部分を占める）のみ
がＢ７抗原陽性であった。ダブルネガティブ細胞（ＣＤ
８陰性、ＣＤ４陰性）はＢ７抗原陰性であった。

実施例４ 免疫沈降法によるＢ７抗原の同定 Ｂ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃマウスの胎児肝臓より樹立した
ＬＦＤ１４細胞株（Ｈａｔｔｏｒｉ、Ｍ、ら、　Ｉｎｔ
、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、。

ｖｏｌｌ、　ｐ１５１．１９８９）を、インターロイキ
ン２非添加のＲＰＭ１１６４０培地（１０％牛脂児血清
添加）で２週間培養した。５Ｘ１０７個の細胞を、ロイ
シンを含まないＲＰＭ１１６４０培地（ＲＰＭ　Ｉ　１
６４０　Ｓｅｌｅｃｔ−Ａｍｉｎｅ　Ｋｉｔ、　ＧＩＢ
ＣＯＬａｂ、。

Ｎ、Ｙ、）に１０％の透析血清、５Ｘ１０−５Ｍの２メ
ルカプトエタノール、５０μｃｉ／ｍｌの３Ｈ−ロイシ
ン（ＮＥＮ、　ＤｕＰｏｎｔ、　Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ
、　ＤＥ）を加えた培地で１８時間培養した。細胞を集
め３回洗った後、１ｍｌの溶解液（ｌｏｍＭ　Ｔｒｉｓ
−ＨＣＩ　、０．１５Ｍ　ＮａＣ１，０，１Ｍ　ＰＭＳ
Ｆ　、　ｌ叶トリプシンインヒビター、キモスタチン、
ロイペプチン、アンチパイン、１％トライトンＸ−１０
０あるいはトライトンＸ−１１４）により細胞を溶かし
た。細胞溶解液を正常ラットのＩｇＧを結合したプロテ
ィンＡ−セファロース４Ｂカラムに２回通した後、Ｂ７
抗体またはラットＩｇＧ抗体を結合したヤギ由来抗うッ
トＩｇＧセファロースビーズを用いて免疫沈降させた。

０．０５％ツイーン／ＰＢＳ液で洗った後、５ＤＳ−ポ
リアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）用のサ
ンプル緩衝液でタンパク質を融解した。これを３分間１
００℃で加熱した後、１５％５ＤＳ−ＰＡＧＥを行なっ
た。ゲルを乾燥させた後、Ｅｎｌｉｇｈｔｅｎｉｎｇ　
（ＮＥＮ、　ＤｕＰｏｎｔ、　Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ。

ＤＥ）を用いたフルオログラフィにより解析した。

トライトンＸ−１００を使用した場合には、分子量的１
２Ｋｄのところに８７抗体の特異的なバンドが得られた
。トライトンＸ−１１４を使用した場合には、約１５Ｋ
ｄ付近に特異的なバンドか得られた。

実施例５ コカナバリンＡ　（ＣｏｎＡ）で刺激したＩＣＲマウス
の肝臓から、通常の方法でポリ（Ａ）　”　ＲＮＡを調
整した。このポリ（Ａ）”　ＲＮＡを用いて、ブライア
ン・シードの方法（Ａｒｕｆｆｏ、Ａ、と５ｅｅｄ、Ｂ
、、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、
　ＵＳＡ、、　ｖｏ１８４゜ｐ８５７３．１９８７）で
ＣＤＭ８ベクターを使用したｃＤＮＡライブラリーを作
製した。ＣＯ３−１細胞に導入後、Ｂ７抗体（１００ｕ
　ｇ／ｍｌ）を吸着させたプレートを用いたパンニング
法（前述文献）によりスクリーニングを行ない、Ｂ７抗
原を発現する単一クローンｐＢ７を得た。ｐＢ７のｃＤ
ＮＡ部分の配列をダイデオキシ法により決定した。その
塩基配列を第２図に示す。ｃＤＮＡは４９１塩基対より
なり、５′側に７８塩基対、３′側に１９１塩基対の非
翻訳領域があり、翻訳領域は２２２塩基対であった。こ
れより推測されるアミノ酸は７４塩基であり、Ｎ末端側
の２２塩基は疎水性に富んでおり、典型的な分泌シグナ
ル配列と考えられた。また、Ｃ末端側にも疎水性に富ん
だ配列があり、Ｂ７抗原がＰＩ−アンカリングプロティ
ンである事実とよく一致した。アミノ酸配列を第１図に
示す。

実施例６ Ｂ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃマウスの様々な組織から通常の
方法を用いて全ＲＮＡを調整した。それぞれ１０Ｍｇの
ＲＮＡを１％ホルマリンアガロースを含む１％アガロー
スゲルで電気泳動後、ナイロン膜に転写した。３２ｐ−
ラベルしたＢ７のｃＤＮＡをプローブとしてハイブリダ
イゼーションを行なった。

胸腺、肝臓、骨髄て強＜Ｂ７ｍＲＮＡの発現が認められ
た。しかしながら、肝臓、腎臓、脳ではその発現は認め
られなかった。

「発明の効果」 本発明によって得られたモノクローナル抗体は、マウス
リンパ球の分類に利用できる。また、Ｂ７抗原はリンパ
球の活性化に伴ない細胞表面より消失することから、マ
ウスリンパ球の活性化機構の解明に有用である。また、
本発明によって得られたｃＤＮＡをプローブとして用い
ることにより、マウスＢ７に対応する他の哺乳類の遺伝
子をクロニングすることができる。

さらに、クローニングされた遺伝子を発現させることに
より、得られる抗原を用いて特異的抗体を作製すること
ができる。このような特異的抗体は、ヒトリンパ球の分
類やヒトリンパ球活性化機構の解明に重要な進展をもた
らすことが期待できる。また同時に、自己免疫疾患など
のリンパ球機能の亢進あるいは後天性免疫不全症候群な
どのリンパ球機能の低下がみられる各種病態との関連を
調べることにより、診断薬となることが期待できる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のマウスリンパ球表面抗原のアミノ酸配
列を、第２図はそれを暗号化する配列の１例を示す。 第３図は本発明のマウスリンパ球表面抗原の正常なマウ
ス細胞における発現分布を示すものであり、（ａ）は胸
腺細胞、（ｂ）肝臓細胞、（ｃ）は骨髄細胞における発
現分布を各々示し、破線はネガティブコントロールを示
す。 特許出願人　　東　し　株　式　会　社ＭｅｔＬｙｓＳ
ｅｒＰｈｅＬｅｕＬｅｕＰｈｅＬｅｕＴｈｒ　ｌ　ｌ　
ｅ　ｌ　ｌ　ｅＬｅｕＬｅｕＶａ　ｌＶａ　Ｉ　ｌ　ｌ
ｅＧ　ｌ　ｎｌ　ｌ　ｅＧ　ｌ　ｎＴｈｒＧｌｙＳｅｒ
ＬｅｕＧｌｙＧｌｎ＾１ａＴｈｒＴｈｒ＾１ａＡｌａＳ
ｅｒＧＩｙＴｈｒＡｓｎＬｙｓＡｓｎＳｅｒＴｈｒＳｅ
ｒＴｈｒしｙｓＬｙｓＴｈｒＰｒｏＬａｕＬｙｓＳｅｒ
ＧｌｙＡｌａＳｅｒＳｅｒｌ　ｌｅｔ　１ｅＡｓｐ＾１
ａＧｌｙ＾１ａＣｙｓＳｅｒＰｈｅＬｅｕＰｈｅＰｈｅ
＾ｌａＡｓｎＴｈｒＬｅｕＭｅｔＣｙｓＬｅｕＰｈｅＴ
ｙｒＬｅｕＳｅｒ第１図 ＋０　　　　　２０　　　　　３０　　　　　４０　　
　　　５０　　　　　６０ＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴ　　Ｃ
＾＾＾ＧＴＧＧＣＣＴＧＣＡＧＡＣＴＧＴ　　ＣＣＴＧ
＾＾ＣＴＣ＾　ＴＣＴＣＴＣＡＡＡＧ　　ＣＴＧＣＴＣ
ＣＡＧ＾７０　　　　　８０　　　　　９０　　　　　
１００　　　　　１１０　　　　　　＋２０ＧＣＣＣＡ
ＧＧ＾＾Ｇ　　ＡＴＴＴＣＡＧＧＡＴ　　ＧＡＡＧＡＧ
ＣＴＴＣＣ丁ＣＣ丁ＣＴＴＣＣＴＣＡＣＴＡＴＣＡＴ　
　ＴＣＴＴＣＴＧＧＴＴＧＴＧＡＴＴＣＡＧＡ　ＴＡＣ
Ａ＾＾ＣＡＧＧ＾ＴＣＣＴＴＧＧＧＡ　Ｃ＾＾ＧＣＣＡ
ＣＴ＾ＣＧＧＣＣＧＣＴＴＣＴＧＧＴ＾ＣＴ＾＾Ｃ＋９
０　　　　　２００　　　　　２１０　　　　　２２０
　　　　　２３０　　　　　２４０Ａ＾＾ＡＡＣＡＧＣ
Ａ　ＣＣＴＣＣＡＣＣ＾＾＾＾Ａ＾＾ＣＣＣＣＣＴＴ＾
＾＾ＧＡＧＴＧ　ＧＧＧＣＣＴＣＡＴＣＣＡＴＣＡＴＣ
ＧＡＴＧＣＧＧＧＴＧＣＣＴ　ＧＣＡＧＴＴＴＣＣＴ　
ＣＴＴＣＴＴＴＧＣＣ＾＾ＴＡＣＣＴＴ＾＾ＴＧＴＧＣ
ＣＴＣＴＴ　ＣＴＡＣＣＴＣＡＧＣＴＧＡＧＧＴＧ＾＾
Ｇ　ＧＣＧＣＡＧＣＴＴＣＴＧ＾＾ＧＣＣＣＣＧ　ＴＧ
ＣＴＣＣＡＣＣＣＡＣＴＧＣＴＧＣＣＡ　ＣＣＡＴＣＡ
ＧＴＡＧＣＧＡＧＡＧＡＣＡＴ　ＣＣＣ＾＾ＣＣＣＡＣ
ＧＧＧ＾＾ＧＧＧＴＴ　ＧＡＴＡＧＣＡＧＡＴ　ＡＴＣ
Ｃ＾＾ＧＧＡＧ　ＧＣＴ＾＾＾ＧＴＴＧ４３０　　　　
　　　　４４０　　　　　　　　４５０　　　　　　　
　４６０　　　　　　　　４了０　　　　　　　４８０
＾ＣＡＧＣＣ＾＾ＴＧ　ＧＣＣＧＧ＾＾ＴＧＧ　Ｇ＾＾
ＣＧＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＡＣＣＣ＾ＧＣＴＡＧＧＧＣ
ＡＣ＾＾ＴＡ＾＾ＧＴＴ＾ＴＡＣＴＴＡＴＧＣＴ　Ｔ （ａ） （ｂ） （ｃ） 第３図 第２図

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記アミノ酸配列を有するマウスリンパ球表面抗
   原もしくはその同効物。 【遺伝子配列があります。】
2. （２）請求項（１）記載のマウスリンパ球表面抗原また
   はその同効物を暗号化する遺伝子。
3. （３）第２図に示す塩基配列を有する請求項（２）記載
   の遺伝子。
4. （４）請求項（１）記載のマウスリンパ球表面抗原もし
   くはその同効物を認識するモノクローナル抗体。
5. （５）請求項（４）記載のモノクローナル抗体を産生す
   るハイブリドーマ。
6. （６）請求項（１）記載のマウスリンパ球表面抗原によ
   り認識される抗体を産生する能力のある抗原。