JPH0412950B2 - - Google Patents

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JPH0412950B2
JPH0412950B2 JP59223121A JP22312184A JPH0412950B2 JP H0412950 B2 JPH0412950 B2 JP H0412950B2 JP 59223121 A JP59223121 A JP 59223121A JP 22312184 A JP22312184 A JP 22312184A JP H0412950 B2 JPH0412950 B2 JP H0412950B2
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JP
Japan
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bacteria
concentration
freeze
ultrafiltration
concentrate
Prior art date
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JP59223121A
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English (en)
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JPS60118182A (ja
Inventor
Aman Jan
Kaboo Misheru
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UUROJIIMU
Original Assignee
UUROJIIMU
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Filing date
Publication date
Application filed by UUROJIIMU filed Critical UUROJIIMU
Publication of JPS60118182A publication Critical patent/JPS60118182A/ja
Publication of JPH0412950B2 publication Critical patent/JPH0412950B2/ja
Granted legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/005—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor after treatment of microbial biomass not covered by C12N1/02 - C12N1/08
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus

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  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
本発明は高濃度の凍結乾燥された微生物、特に
乳酸菌の製造方法に関する。特に本発明は予めバ
クテリアを接種しかつ25〜45℃、好ましくは30℃
程度の温度に保持された培地に、ラクトースと酵
母とからなる栄養源(nutritive substrate)と、
培地のPHを5.5〜7.5、特に6〜7の間で一定の値
に保持するための中和剤特にアンモニアまたはナ
トリウムを、全体を水で稀釈して供給し;微生物
が生産する阻害物質の濃度を絶えず測定すること
によつて中和剤に対する栄養源と水の供給量を調
節し、それによつて、第1段階において、後の生
長段階について選択された0.10〜0.50mの間のよ
り適度な増殖速度に対して許容し得る最大濃度に
相当する阻害物質の臨界濃度に達するまで、高い
増殖速度でバクテリアを増殖させついで培地の容
量を一定に保持しながら限外過操作を行つて阻
害物質の一部を除去する;ことからなる、高濃度
の凍結乾燥された微生物の製造方法に関する。 本発明の目的は培地についての及び最適の凍結
乾燥を行うことを可能にする必須の操作条件を特
定することにある。 本発明は前記の方法においてつぎの操作を行う
ことを特徴とする:すなわち; a 栄養源と水の供給を中止しかつ、その間、中
和剤を供給することによりPHを一定の値に保持
しそして b 冷却すると同時に限外過操作を行い、それ
によつて15〜20℃、好ましくは16℃程度の温度
において微生物の第1次の濃縮を行い、1m3当
りのバクテリアの乾燥重量を40〜80Kgとし; c 第1次濃縮物を、無機塩、アミノ酸、オリゴ
元素(oligo−elements)およびビタミンの混
合物を含有する洗浄溶液で洗浄し; d 前記工程b)と同一の温度に保持しながら、
限外過により最終濃縮を行つて、1m3当りの
バクテリアの乾燥重量を90〜220Kgとし; e バクテリア濃縮物を5℃程度の温度に冷却し
かつこれに濃縮された保護剤を添加し; f バクテリア濃縮物を深冷凍結して凍結乾燥す
る。 洗浄溶液の組成は例えばつぎの通りである:
【表】 ム
発明の効果 本発明によれば、PHを、5.5〜7.5の間の厳密な
値に制御することが可能となり、且つ、最初に高
い増殖速度を、そして、次に、0.10〜0.5の間の
適度な増殖速度を確実にする。 そのような制御は、最も速い発酵を可能にす
る。 本発明は又、その工程の間、阻害物質を除去す
ることを可能にする限外濾過による処理をも提供
する。 本発明は、その全工程の間で限外濾過を用いる
ことにより、高い細胞密度で発酵ステツプを行う
こと及びその結果生じたバイオマスを重大な細胞
保護を伴つて深冷凍結するまで処理することの二
重の利点を提供する。 全工程(発酵+濃縮)の間限外濾過を使用する
ことは、遠心分離を含む通常の工程よりも早い操
作を可能にする。 本発明の特徴はこのようであり、第一次濃縮物
を、40−80Kg/m3のバクテリア(約5×1010バク
テリア/ml)において洗浄を行ない、その後、
約90−220Kg/m3(約1×1011〜2×1011バクテ
リア/ml)の最終濃度に濃縮する。このことが
正しい引き続いての凍結乾燥へと導く。 上記の方法においてはPHを5.5〜7.5、特に6〜
7の間で一定に保持すること、特定の冷却と第1
次濃縮および洗浄と最終的濃度を行つて、経験的
にだけ示されるごとき微生物、特に乳酸菌を完全
に凍結乾燥することが連続的に行われる。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 予めバクテリアを接種し、かつ25〜45℃に保
    持されている培地に、ラクトースと酵母とからな
    る栄養源と、培地のPHを5.5〜7.5の間で一定の値
    に保持するための中和剤とを、全体を水で希釈し
    て供給し;阻害物質の濃度を絶えず測定すること
    によつて中和剤に対する栄養源と水の供給量を調
    節し、それによつて、第1段階において、後の増
    殖段階について選択された0.10〜0.50mの間のよ
    り適度な増殖速度に対して許容し得る最大濃度に
    相当する阻害物質の臨界濃度に達するまで、高い
    増殖速度でバクテリアを増殖させ;ついで培地の
    容量を一定に保持しながら限外過操作を行つて
    阻害物質の一部を除去する;ことからなる高濃度
    の凍結乾燥された微生物の製造方法において、微
    生物の発育のための操作の終了後、下記のステツ
    プ; a 栄養源と水の供給を中止しかつ、その間、中
    和剤を供給することによりPHを一定の値に保持
    してそして b 冷却すると同時に限外過操作を行い、それ
    によつて15〜20℃の温度において微生物の第1
    次の濃縮を行い1m3当りのバクテリアの乾燥重
    量を40〜80Kgとし; c 第一次濃縮物を、無機塩とアミノ酸の混合物
    を含有する洗浄溶液で洗浄し; d 限外過により最終濃度を行つて、1m3当り
    のバクテリアの乾燥重量を90〜220Kgとし; c バクテリア濃縮物を5℃程度の温度に冷却し
    かつこれに濃縮された保護剤を添加し; f バクテリア濃縮物を深冷凍結して凍結乾燥す
    る; が実施されることを特徴とする、凍結乾燥された
    微生物の製造方法。 2 洗浄溶液が酵母エキス、KH2PO4、Na2
    HPO4・12H2OおよびMgSO4・7H2Oを含有す
    る、特許請求の範囲第1項記載の方法。 3 洗浄溶液がNaClを含有する、特許請求の範
    囲第2項記載の方法。 4 洗浄溶液がグリセロ燐酸ナトリウムを含有す
    る、特許請求の範囲第3項記載の方法。 5 洗浄溶液がグルタミン酸ナトリウムを含有す
    る、特許請求の範囲第4項記載の方法。 6 洗浄溶液がアスコルビン酸ナトリウムを含有
    する、特許請求の範囲第5項記載の方法。
JP59223121A 1983-10-27 1984-10-25 高濃度の凍結乾燥された微生物の製造方法 Granted JPS60118182A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR8317156 1983-10-27
FR8317156A FR2554125B1 (fr) 1983-10-27 1983-10-27 Procede de preparation de concentres de micro-organismes lyophilises

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS60118182A JPS60118182A (ja) 1985-06-25
JPH0412950B2 true JPH0412950B2 (ja) 1992-03-06

Family

ID=9293596

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP59223121A Granted JPS60118182A (ja) 1983-10-27 1984-10-25 高濃度の凍結乾燥された微生物の製造方法

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4797364A (ja)
EP (1) EP0146420B1 (ja)
JP (1) JPS60118182A (ja)
AT (1) ATE26997T1 (ja)
AU (1) AU572210B2 (ja)
CA (1) CA1247027A (ja)
DE (1) DE3463526D1 (ja)
FR (1) FR2554125B1 (ja)
NZ (1) NZ209828A (ja)

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Also Published As

Publication number Publication date
DE3463526D1 (en) 1987-06-11
CA1247027A (fr) 1988-12-20
AU3455884A (en) 1985-05-09
US4797364A (en) 1989-01-10
ATE26997T1 (de) 1987-05-15
FR2554125A1 (fr) 1985-05-03
JPS60118182A (ja) 1985-06-25
AU572210B2 (en) 1988-05-05
EP0146420A1 (fr) 1985-06-26
EP0146420B1 (fr) 1987-05-06
NZ209828A (en) 1988-11-29
FR2554125B1 (fr) 1986-01-10

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