JPH04173799A

JPH04173799A - プロラクチン水溶液

Info

Publication number: JPH04173799A
Application number: JP2300721A
Authority: JP
Inventors: Sukehito Kurokawa; 祐人黒川
Original assignee: Sanyo Chemical Industries Ltd
Current assignee: Sanyo Chemical Industries Ltd
Priority date: 1990-11-05
Filing date: 1990-11-05
Publication date: 1992-06-22

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〈産業上の利用分野〉本発明はプロラクチン水溶液に関する。さらに詳しくは
プロラクチンを経口的に安定に貯蔵・保存できるプロラ
クチン水溶液に関する。

〈従来の技術〉従来、　　フ゛０５’）ｆンは凍結乾燥粉末状態で貯蔵
・保存されていた。

〈発明が解決しようとする課題〉免疫化学分析において、フ゛ロラクチンは通常、溶液状
態で使用される。近年、免疫化学分析の操作の簡便化の
要求が高まっているが、従来の凍結乾燥粉末状態である
７”　０う’）ｆンは使用時に溶液状態へ調製する操作
が必要であった。すなわち、分析操作時に溶解の手間が
余分にかかるという問題があった。

く課題を解決するための手段〉本発明者らは上記問題点を解決するため鋭意検討した結
果、本発明に到達した。

すなわち本発明は、　　アルブミン（ａ）と、　キレー
ト剤（ｂ）および／または一般式％式％〔式中、　Ａｒはへ゛ン七″ン環またはナフタレン環、
　Ｘは水素原子または炭素数１−１２のアルキル基、Ｙ
は塩を形成するカチオン、ｍはθ〜７の整数、ｎはθ〜
６の整数〕で表される化合物（ｃ）とを含有するフ゛ロ
ラクチン水溶液である。

本発明に於て、（ａ）としては、血清アルフ゛ミン、オ
ハ゛ルフ゛ミン、　　コナルフ゛ミン、　　ラクトアル
フ゛ミンな　どが挙げら　れる。　　これらのうち好ま
しものは血清アルブミンである。血清アルブミンの具体
例と　しては牛血清アルフ゛ミン、　　ウ号キ゛血清ア
ルフ゛ミン、　　マウス血清アルブミンなどが挙げられ
る。　　これらのうち特に好ましいものは牛血清アルブ
ミンである。

（ｂ）と　し　ては、　　シ′メチルキク′リオキシム
、　　シ゛チソ゛ン、　　オキシン、　　ア七チルアｔ
トン、　　り゛リシンおよびその塩、　　ニトリロ三酢
酸　［ＮＴＡＩおよびその塩、エチレンジ゛アミン四酢
酸［ＥＤＴＡ］およびその塩などが挙げられる。これら
のうち好ましいものはＥＤＴＡの塩であり、特に好まし
いものはＥＤＴＡ−２−ナトリウムである。（Ｃ）とし
て好ましいものは、−服代（１）において、式中のＸが
水素原子、メチル基またはエチル基（各々のＸは同じで
も異なっていても良い）であ　リ、　　Ｙ　がアンモニ
ウムイオン、　　ナトリウムイオン、　　カリウムイオ
ンであ　リ、ｍが０〜３の整数であり、ｎがθ〜２の整
数で各々表される一般式の化合物である。特に好ましい
ものは８−アニリー１−ナフタレンスルホン酸アンモニ
ウムであ　る。

本発明のフ゛ロラクヂン水溶液中の各成分の濃度は、通
常、（ａ）が１〜５０ｍｇ／ｍＩであり、（ｂ）が０．
０１〜ＩＯｒａｇ／ｍｌおよび／または（Ｃ）が０．０
０１−１ｍｇ／ｍｌである。

好ましくは、（ａ）が５〜２０ｍｇ／ｍｌであり、（ｂ
）が０．０５〜５Ｂ／ｍｌおよび／または（ｃ）が０．
００５〜０．５＋ｎｇ／ｍｌである。

本発明のプロラクチン水溶液は、　プロラクチンを通常
１ｎｇ／ｍｌ〜９００ｍｇ／ｉｔ含有する。また、他の
成分として通常はアジ化ナトリウムなどの防腐剤、リン
酸塩などの緩衝剤、　並びに塩化ナトリウムを含有する
。　アシ゛化ナトリウムなどの防腐剤は通常０．１〜２
．５ｍｇ／ｍｌであり、好ましくは０．５ｍｇ／ｍｌで
ある。　リン酸塩などの緩衝剤は通常０．００５〜０．
１ｍｏ１／ｌであり、好ましくは０．０２ｍｏｌ／Ｉで
ある。食塩は通常２〜４０ｍｇ／ｍ　ｌであり、好まし
くは１０Ｈ／ｍｌである。

本発明のプロラクチン水溶液の製法を例示すると、まず
、純水にリン酸塩などの緩衝剤および食塩を加え、リン
酸塩食塩水にする。次に、このリン酸塩食塩水にアシ′
化ナトリウムなどの防腐剤Ｌ　　プロラクチンおよび、
　　（１）と、（２）および／または（３）とを任意の
順序で添加し溶解することにより本発明のフ゛ロラクチ
ン水溶液が得られる。

拉発明のフ゛ロラクチン水溶液は、　　プロラクチン測
定用の臨床検査診断薬を保存する期間において、標準物
質であるプロラクチンの活性の安定性を維持するものと
して有用である。

〈実施例および比較例〉本発明を以下の実施例により更に具体的に説明する。実
施例および比較例におけるフ゛ロラクチン活性値の測定
は以下の方法により行った。

フ“ロラクチン　　主　　Ｍｌまずプロラクチン含有試料５０マイクロリフドル（μ　
ｌ）と　１０Ｂ／ｍｌの血清アルフ゛ミンを含有するリ
ン酸緩衝食塩水３００μ　１と抗プロラクチンモノクロ
ーナル抗体結合力゛ラスピース°（ａ）１個とを試験管
に順次分注し試験管中で３７°Ｃ，１５分間免疫反応さ
せａ−プロラクチン複合体を形成した。反応後、試験管
中の液をアスピレータ−で除きａ−プロラクチン複合体
を食塩水３ｍｌで３回洗浄した。

次に、　　試験管中ａ−プロラクチン複合体１個にへ°
ルオキシク゛−ｔ゛標識抗フ゛ロラクチンモノクローナ
ル抗体（ｂ）溶液３００μ　ｌを加え３７°Ｃ，１５分
間免疫反応させａ−フ゛ｏラクチンーｂ複合体を形成し
た。反応後、試験管中の液をアスピレータ−で除きａ−
７’Ｕラクチン−ｂ１合体を食塩水３ｍｌで３回洗浄し
た。

最後に、試験管中ａ−プロラクチン−ｂ複合体１個に０
．２ｍｇ／ｍｌの過酸化水素および３Ｂ／ｍｌのオルト
−フェニレンジアミンを含有するクエン酸−リン酸緩衝
液３００μｍを加え３７°Ｃ２１５分間発色反応させ、
反応後、１．５規定の硫酸３ｍｌを加えて酵素反応を停
止させ溶液の吸収を分光光度計を用い４９２ｎｍで測光
し、この値をフ゛ロラクチン活性値とした。

災ＪＩＳ」１：」初日のフ゛ロラクチン活性に対する４０°Ｃで１ケ月間
貯蔵した後のフ゛Ｕラクチン活性を実証するための実験
を行った。　　まず、　　アジ化ナトリウムを０．５ｍ
ｇ／ｍｌ、　　リン酸塩を０．２ｍｏｌ／Ｉｓ　　食塩
を１０ｍｇ／ｍｌおよびプロラクチンを０．１μｇ／ｍ
ｌを含む水溶液（ＢＡＳＥ）を調製した。　調製後、実
施例１ではそのＲＡＳＨに１０１１１ｇ／Ｉｌｌの牛血
清アルフ゛ミン（ＢＳＡ）、１Ｂ／ｍｌのエチレンジジ
アミン四酢酸ナトリウム　（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）および
０．１ｍｇ／ｍｌの８−アニリノ−１−ナフタレンスル
ホン酸アンモニウム（ＡＮＳ）が含まれる様に溶液を調
製し本発明のフ゛ロラクチン水溶液を得た。また、ＢＡ
ＳＥにｌ０ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、　　１ｍｇ／ｍｌのＥ
ＤＴＡ−２Ｎａが含まれる様にに溶液を調製したもの（
実施例２）と、ＢＡＳＥに１０ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、　
　０．１ｍｇ／ｍｌのＡＮＳが含まれる様に溶液を調製
したもの（実施例３）も調製し、各実施例における本発
明のプロラクチン水溶液を得た。　調製の直後、　各フ
゛ロラクチン水溶液のプロラクチン活性値を？ｌｔｌ定
した。また、この溶液を４０″Ｃで１ケ月間貯蔵した後
のプロラクチン活性値も測定した。これらの活性値なら
びに活性残存率（％）を第１表に示す。

この活性残存率は（４０°Ｃで１ケ月間貯蔵後の活性値
）／（初日の活性値）の百分率である。

比」気立」実施例１〜３と同様の方法で調製したＢＡＳＥｌｍｌづ
つを八′（フル瓶２本に分注して各々凍結乾燥し粉末状
態にした。次に、１本のバイアル瓶中の凍結乾燥粉末品
に脱イオン水を１ｍｌ加えて溶解し、この溶液のプロラ
クチン活性値を測定した。また、他１本のハ゛イアル瓶
中の凍結乾燥粉末品は４０°Ｃで１ケ月間貯蔵した。こ
の凍結乾燥粉末品に脱（１ン水を１ｍｌ加えて溶解し、
この溶液のプロラクチン活性値を測定した。これらの活
性値ならびに活性残存率（％）を第１表に示す。

飼τ工表実施例１〜３の結果と比較例の結果との比較かられかる
ように、本発明によるフ゛ロラクチン水溶液はプロラク
チン活性の経口的な安定性が凍結乾燥粉末状態に匹敵す
ることがわかる。

〈発明の効果〉本発明のフ゛ロラケチン水溶液は水溶液状態で保存して
もなおプロラクチン活性の経口安定性が凍結乾燥粉末品
に匹敵する。従って、例えば免疫化学分析において溶液
状態へ調製する操作が全くなくなり、従来の凍結乾燥粉
末品の場合のような手間を省くことができる。　本発明
のプロラクチン水溶液はフ゛ロラクチンを用いる免疫化
学分析等の操作の簡便化の要求に応えるものであり、有
用である。

角箭雷２殖丸　　ニ洋杷成・工１耀ぷ烹ノ１手続補正書平成２年１２月２Ｑ日平成２年特許願第３００７２１号２、発明の名称プロラクチン水溶液３、補正５をする者゛　　　事件との関係　　特許出願人４、補正命令の日付　　自発５、補正により増加する発明の数　　　０６、補正の対
象明細書の「特許請求の範囲」の欄および１）明細書第１
頁「特許請求の範囲」を下記のとおり訂正する。

「１、アルフミン（ａ）と、　什−ト剤（ｂ）および／ま
たは一般Ｃ式中、　　人ｒはへ゛ンｔ°ン環ま　たはナ
フタレンＢｉｂ　　Ｘは水素原子または炭素数１＝１２
のアルキル基、Ｙは塩を形成するカヂオン、ｍは０〜７
の整数、Ｄは０〜６の整数〕で表される化合物（ｃ）と
を含有するフ’　０５りｆン水溶液。

２、該水溶液に対して、ｈ）が１〜５０ｃ＋ｇ＃＋Ｉで
あり、（ｂ）が０．０１−１００ｇ／ｍｌおよび／また
は（Ｃ）が０．００１〜１ｍｇノロ、Ｉ−ｃある請求項
１記戴のブｏ５クチン水溶液四２）明細書箱２頁１６〜
１７行目の「　Ｘ隘　Ｘ　　　Ｘｎ人ｒ　　　　Ｎ　　　　　Ａｒ　　　　ＳＯ３ＹＪなる
記載をに訂正する。

Claims

【特許請求の範囲】１、アルブミン（ａ）と、キレート剤（ｂ）および／ま
たは一般式▲数式、化学式、表等があります▼（１）〔式中、Ａｒはベンゼン環またはナフタレン環、Ｘは水
素原子または炭素数１〜１２のアルキル基、Ｙは塩を形
成するカチオン、ｍは０〜７の整数、ｎは０〜６の整数
〕で表される化合物（ｃ）とを含有するプロラクチン水
溶液。２、該水溶液に対して、（ａ）が１〜５０ｍｇ／ｍｌで
あり、（ｂ）が０．０１〜１０ｍｇ／ｍｌおよび／また
は（ｃ）が０．００１〜１ｍｇ／ｍｌである請求項１記
載のプロラクチン水溶液。