JPH04271787A - Ｄ−乳酸の製造法及びシュードモナス属細菌 - Google Patents
Ｄ−乳酸の製造法及びシュードモナス属細菌Info
- Publication number
- JPH04271787A JPH04271787A JP5572191A JP5572191A JPH04271787A JP H04271787 A JPH04271787 A JP H04271787A JP 5572191 A JP5572191 A JP 5572191A JP 5572191 A JP5572191 A JP 5572191A JP H04271787 A JPH04271787 A JP H04271787A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lactic acid
- pseudomonas
- propanediol
- cultured
- strain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、シュードモナス （Ｐ
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属細菌を培養して、１，２−プ
ロパンジオールから高選択率でＤ−乳酸を製造する方法
、及びこれに用いる新規なシュードモナス・ＳＰ．Ｔ−
１３５菌株に関する。 【０００２】近年、Ｄ−乳酸は医農薬の分野において需
要が高まってきている。本発明によれば、高選択率でＤ
−乳酸を安価に製造することができる。 【０００３】 【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】１，２
−プロパンジオールからの乳酸の生成に関しては、バク
テリウム・テルモ（Ｂａｃｔｅｒｉｕｎ ｔｅｒｍｏ）
による生成（Ｌｅ Ｂｅｌｓ Ｃｏｍｐｔ． ｒｅｎ
ｄ．，９２，５３２（１８８１）） 、酵母による生成
（石井ら．農芸化学会誌、３３，８８９（１９５９））
土壌細菌による生成（福井ら．Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．
Ｔｅｃｈｎｏｌ．，５３，３５４（１９７５））が報告
されているが、これらはいずれも定性的な報告であり、
生成量についての記載はない。 【０００４】また発酵生産的見地からは、アースロバク
ター・オキシダンス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒｏｘｙ
ｄａｎｓ） による生成（八木ら、Ａｇｒｉｃｕｌｔｕ
ｒａｌ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
３３，１５８７（１９６９）；同誌４３，５７１（１９
７９））が報告されているが、生成乳酸の光学活性（Ｄ
体又はＬ体）に関する記載はない。 【０００５】 【課題を解決するための手段】本発明者らは、シュード
モナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に属する微生物を
利用するＤ−乳酸の製造について鋭意研究を重ねた。そ
の結果、１，２−プロパンジオールからＤ−乳酸生成能
を有する新細菌を見い出し、これを利用することにより
高選択率でＤ−乳酸を製造し得ることを見出し、本発明
を完成した。 【０００６】本発明は、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ）属に属するＤ−乳酸生成能を有する細菌を
、１，２−プロパンジオールを含有する培地に培養し、
該培養物からＤ−乳酸を採取することを特徴とするＤ−
乳酸の製造法である。 【０００７】本発明に用いられる微生物としては、シュ
ードモナス属に属し、１，２−プロパンジオールからＤ
−乳酸生成能を有するものであれば特に制限はないが、
特にシュードモナス・ＳＰ．ＴＢ−１３５菌株が挙げら
れる。 【０００８】シュードモナス・ＳＰ．ＴＢ−１３５菌株
の菌学的性質及び分類学的性質は以下のとおりである。 【０００９】Ｉ．顕微鏡的性質 ａ）細胞の形及び大きさ：桿菌、０．７〜０．８×２〜
３μｍ ｂ）運動性：有り、極鞭毛１本 ｃ）胞子形成：無し ｄ）グラム染色：陰性 【００１０】ＩＩ．培養的性質 ａ）肉汁寒天培地：生育良好 ｂ）ポテト・グルコース寒天培地：生育良好ｃ）ＹＭ培
地：生育良好 【００１１】ＩＩＩ．生理学的性質 ａ）酸素要求性：好気性 ｂ）色素の生成：− ｃ）オキシダーゼ：＋ ｄ）カタラーゼ：＋ ｅ）ＶＰテスト：− ｆ）ＯＦテスト：酸化 ｇ）ＭＲテスト：− ｈ）硝酸塩の還元：＋ ｉ）ゼラチンの液化：− ｊ）デンプンの分解：＋ ｋ）インドールの生成：− ｌ）炭素源の資化性 グルコース、ジェラニオール、β−アラニン及びＤＬ−
アルギニンを資化し、トレハロース、２−ケトグルコン
酸、ｍｅｓｏ−イノシトール及びＬ−バリンを資化しな
い。 【００１２】ＩＶ． 化学分類的性質 ａ）ＤＮＡ中グアニン・シトシン（ＧＣ）含量：６７．
８ｍｏｌ ％ ｂ）脂肪酸組成：直鎖型 ｃ）キノン型：Ｑ９ ｄ）３−ヒドロキシ酸：Ｃ１０，Ｃ１２ 【００１３
】以上の諸性質を「バージェイズ・マニュアル・オブ・
システマティク・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ
Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）」第２巻（１９８６年）より検索
した。その結果、本菌はシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属に属する菌株であると同定されたが、
種については炭素源の資化性等が既知の種と異なる点が
あり、新種と考えられた。従って、本発明においてはシ
ュードモナス・ＳＰ．ＴＢ−１３５と命名した。本菌株
は工業技術院微生物工業技術研究所に微生物受託番号「
微工研菌寄第１１９６４号（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９６４
）」として寄託されている。 【００１４】上記の微生物を培養するための培地として
は、炭素源として少なくとも１，２−プロパンジオール
が含まれていればよく、その濃度は例えば培養の開始時
に０．０１〜２０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．０５〜
１０％（Ｗ／Ｖ）程度である。窒素源としては塩化アン
モニウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、アン
モニアのような無機窒素源、ペプトン、肉エキス、コー
ンスティープリカー、カザミノ酸のような有機窒素源等
を；無機物としてリン酸カリウム、リン酸一水素カリウ
ム、リン酸二水素カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第
二鉄等を；また必要に応じて各種ビタミン等の栄養素を
含有した培地が好適に使用される。 【００１５】培養は通気撹拌、振盪等の好気的条件下で
行い、培養温度は通常２０〜４０℃、好ましくは２５〜
３５℃である。培養途中のｐＨは通常５〜１０、好まし
くは６〜８付近であり、培養中のｐＨの調整には酸、ア
ルカリを添加して行うことができる。培養期間は通常１
〜７日間、好ましくは２〜５日間である。 【００１６】上述の本発明に用いる各微生物は、各酵素
活性を向上させた変異、遺伝子組み換え、細胞融合など
の手法により得られた微生物であってもよい。 【００１７】この培養物からＤ−乳酸を分離・精製する
には、それ自体既知の方法、例えばイオン交換樹脂処理
法等により行うことができる。 【００１８】 【実施例】以下、実施例により本発明を更に詳細に説明
するが、これらの実施例は本発明の範囲を何ら制限する
ものではない。 【００１９】実施例１ 下記培地組成Ａの培地５０ｍｌを５００ｍｌ容三角フラ
スコに分注して、１２０℃、１５分間滅菌処理したもの
に、シュードモナス・ＳＰ・ＴＢ−１３５菌株を一白金
耳量接種し、３０℃で２日間振盪培養（前培養とする）
後、上記を同じ培地組成Ａの培地５０ｍｌを５００ｍｌ
容三角フラスコに分注して１２０℃で１５分間滅菌処理
したものに、上記前培養物２ｍｌを接種して、更に３０
℃で５日間振盪培養した。 【００２０】上記培養液を硫酸酸性（ｐＨ２．０）に調
整後、遠心分離で菌体を分離した上清液について、生成
乳酸量をＨＰＬＣ（ バイオラッド、ＨＰＸ８７Ｈカラ
ム）により測定し、Ｄ−乳酸をＤ−乳酸脱水素酵素を用
いる酵素法で測定した。この結果、培養４日目で２１ｇ
／ｌ の乳酸が生成し、１００％Ｄ−体であることが確
認された。原料１，２−プロパンジオールの（Ｒ）−（
−）体に対するモル収率は９０％であった。 【００２１】 培地組成Ａ １，２−プロパンジオール
４．０ ％（Ｗ／Ｖ）
ＫＨ２ ＰＯ４
０．０２％
Ｋ２ Ｈ
ＰＯ４
０．８４％
ＮＨ４ ＮＯ３
０．２ ％
Ｍｇ
ＳＯ４ ７Ｈ２ Ｏ
０．０１％
酵母エキス
０．２ ％
ＣａＣＯ
３ ＊
２．０ ％
（ｐＨ ８．０）
＊別に殺菌して添加
【００２２】 【発明の効果】本発明によれば、１，２−プロパンジオ
ールから高選択率でＤ−乳酸を製造することができる。
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属細菌を培養して、１，２−プ
ロパンジオールから高選択率でＤ−乳酸を製造する方法
、及びこれに用いる新規なシュードモナス・ＳＰ．Ｔ−
１３５菌株に関する。 【０００２】近年、Ｄ−乳酸は医農薬の分野において需
要が高まってきている。本発明によれば、高選択率でＤ
−乳酸を安価に製造することができる。 【０００３】 【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】１，２
−プロパンジオールからの乳酸の生成に関しては、バク
テリウム・テルモ（Ｂａｃｔｅｒｉｕｎ ｔｅｒｍｏ）
による生成（Ｌｅ Ｂｅｌｓ Ｃｏｍｐｔ． ｒｅｎ
ｄ．，９２，５３２（１８８１）） 、酵母による生成
（石井ら．農芸化学会誌、３３，８８９（１９５９））
土壌細菌による生成（福井ら．Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．
Ｔｅｃｈｎｏｌ．，５３，３５４（１９７５））が報告
されているが、これらはいずれも定性的な報告であり、
生成量についての記載はない。 【０００４】また発酵生産的見地からは、アースロバク
ター・オキシダンス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒｏｘｙ
ｄａｎｓ） による生成（八木ら、Ａｇｒｉｃｕｌｔｕ
ｒａｌ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
３３，１５８７（１９６９）；同誌４３，５７１（１９
７９））が報告されているが、生成乳酸の光学活性（Ｄ
体又はＬ体）に関する記載はない。 【０００５】 【課題を解決するための手段】本発明者らは、シュード
モナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に属する微生物を
利用するＤ−乳酸の製造について鋭意研究を重ねた。そ
の結果、１，２−プロパンジオールからＤ−乳酸生成能
を有する新細菌を見い出し、これを利用することにより
高選択率でＤ−乳酸を製造し得ることを見出し、本発明
を完成した。 【０００６】本発明は、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ）属に属するＤ−乳酸生成能を有する細菌を
、１，２−プロパンジオールを含有する培地に培養し、
該培養物からＤ−乳酸を採取することを特徴とするＤ−
乳酸の製造法である。 【０００７】本発明に用いられる微生物としては、シュ
ードモナス属に属し、１，２−プロパンジオールからＤ
−乳酸生成能を有するものであれば特に制限はないが、
特にシュードモナス・ＳＰ．ＴＢ−１３５菌株が挙げら
れる。 【０００８】シュードモナス・ＳＰ．ＴＢ−１３５菌株
の菌学的性質及び分類学的性質は以下のとおりである。 【０００９】Ｉ．顕微鏡的性質 ａ）細胞の形及び大きさ：桿菌、０．７〜０．８×２〜
３μｍ ｂ）運動性：有り、極鞭毛１本 ｃ）胞子形成：無し ｄ）グラム染色：陰性 【００１０】ＩＩ．培養的性質 ａ）肉汁寒天培地：生育良好 ｂ）ポテト・グルコース寒天培地：生育良好ｃ）ＹＭ培
地：生育良好 【００１１】ＩＩＩ．生理学的性質 ａ）酸素要求性：好気性 ｂ）色素の生成：− ｃ）オキシダーゼ：＋ ｄ）カタラーゼ：＋ ｅ）ＶＰテスト：− ｆ）ＯＦテスト：酸化 ｇ）ＭＲテスト：− ｈ）硝酸塩の還元：＋ ｉ）ゼラチンの液化：− ｊ）デンプンの分解：＋ ｋ）インドールの生成：− ｌ）炭素源の資化性 グルコース、ジェラニオール、β−アラニン及びＤＬ−
アルギニンを資化し、トレハロース、２−ケトグルコン
酸、ｍｅｓｏ−イノシトール及びＬ−バリンを資化しな
い。 【００１２】ＩＶ． 化学分類的性質 ａ）ＤＮＡ中グアニン・シトシン（ＧＣ）含量：６７．
８ｍｏｌ ％ ｂ）脂肪酸組成：直鎖型 ｃ）キノン型：Ｑ９ ｄ）３−ヒドロキシ酸：Ｃ１０，Ｃ１２ 【００１３
】以上の諸性質を「バージェイズ・マニュアル・オブ・
システマティク・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ
Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）」第２巻（１９８６年）より検索
した。その結果、本菌はシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属に属する菌株であると同定されたが、
種については炭素源の資化性等が既知の種と異なる点が
あり、新種と考えられた。従って、本発明においてはシ
ュードモナス・ＳＰ．ＴＢ−１３５と命名した。本菌株
は工業技術院微生物工業技術研究所に微生物受託番号「
微工研菌寄第１１９６４号（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９６４
）」として寄託されている。 【００１４】上記の微生物を培養するための培地として
は、炭素源として少なくとも１，２−プロパンジオール
が含まれていればよく、その濃度は例えば培養の開始時
に０．０１〜２０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．０５〜
１０％（Ｗ／Ｖ）程度である。窒素源としては塩化アン
モニウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、アン
モニアのような無機窒素源、ペプトン、肉エキス、コー
ンスティープリカー、カザミノ酸のような有機窒素源等
を；無機物としてリン酸カリウム、リン酸一水素カリウ
ム、リン酸二水素カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第
二鉄等を；また必要に応じて各種ビタミン等の栄養素を
含有した培地が好適に使用される。 【００１５】培養は通気撹拌、振盪等の好気的条件下で
行い、培養温度は通常２０〜４０℃、好ましくは２５〜
３５℃である。培養途中のｐＨは通常５〜１０、好まし
くは６〜８付近であり、培養中のｐＨの調整には酸、ア
ルカリを添加して行うことができる。培養期間は通常１
〜７日間、好ましくは２〜５日間である。 【００１６】上述の本発明に用いる各微生物は、各酵素
活性を向上させた変異、遺伝子組み換え、細胞融合など
の手法により得られた微生物であってもよい。 【００１７】この培養物からＤ−乳酸を分離・精製する
には、それ自体既知の方法、例えばイオン交換樹脂処理
法等により行うことができる。 【００１８】 【実施例】以下、実施例により本発明を更に詳細に説明
するが、これらの実施例は本発明の範囲を何ら制限する
ものではない。 【００１９】実施例１ 下記培地組成Ａの培地５０ｍｌを５００ｍｌ容三角フラ
スコに分注して、１２０℃、１５分間滅菌処理したもの
に、シュードモナス・ＳＰ・ＴＢ−１３５菌株を一白金
耳量接種し、３０℃で２日間振盪培養（前培養とする）
後、上記を同じ培地組成Ａの培地５０ｍｌを５００ｍｌ
容三角フラスコに分注して１２０℃で１５分間滅菌処理
したものに、上記前培養物２ｍｌを接種して、更に３０
℃で５日間振盪培養した。 【００２０】上記培養液を硫酸酸性（ｐＨ２．０）に調
整後、遠心分離で菌体を分離した上清液について、生成
乳酸量をＨＰＬＣ（ バイオラッド、ＨＰＸ８７Ｈカラ
ム）により測定し、Ｄ−乳酸をＤ−乳酸脱水素酵素を用
いる酵素法で測定した。この結果、培養４日目で２１ｇ
／ｌ の乳酸が生成し、１００％Ｄ−体であることが確
認された。原料１，２−プロパンジオールの（Ｒ）−（
−）体に対するモル収率は９０％であった。 【００２１】 培地組成Ａ １，２−プロパンジオール
４．０ ％（Ｗ／Ｖ）
ＫＨ２ ＰＯ４
０．０２％
Ｋ２ Ｈ
ＰＯ４
０．８４％
ＮＨ４ ＮＯ３
０．２ ％
Ｍｇ
ＳＯ４ ７Ｈ２ Ｏ
０．０１％
酵母エキス
０．２ ％
ＣａＣＯ
３ ＊
２．０ ％
（ｐＨ ８．０）
＊別に殺菌して添加
【００２２】 【発明の効果】本発明によれば、１，２−プロパンジオ
ールから高選択率でＤ−乳酸を製造することができる。
Claims (2)
- 【請求項１】 シュードモナス属に属するＤ−乳酸生
成菌を、１，２−プロパンジオールを含有する培地に培
養し、該培養物からＤ−乳酸を採取することを特徴とす
るＤ−乳酸の製造法。 - 【請求項２】 １，２−プロパンジオールからＤ
−乳酸生成能を有するシュードモナス・ＳＰ・ＴＢ−１
３５菌株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5572191A JPH04271787A (ja) | 1991-02-28 | 1991-02-28 | Ｄ−乳酸の製造法及びシュードモナス属細菌 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5572191A JPH04271787A (ja) | 1991-02-28 | 1991-02-28 | Ｄ−乳酸の製造法及びシュードモナス属細菌 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04271787A true JPH04271787A (ja) | 1992-09-28 |
Family
ID=13006732
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5572191A Pending JPH04271787A (ja) | 1991-02-28 | 1991-02-28 | Ｄ−乳酸の製造法及びシュードモナス属細菌 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04271787A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999019503A1 (en) * | 1997-10-14 | 1999-04-22 | Cargill, Incorporated | Low ph lactic acid fermentation |
| WO2004104202A1 (ja) | 2003-05-22 | 2004-12-02 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | D-乳酸脱水素酵素活性を有するタンパク質をコードするdna及びその利用 |
| WO2011043443A1 (ja) * | 2009-10-07 | 2011-04-14 | 三菱化学株式会社 | 脂肪族ジカルボン酸の製造方法 |
-
1991
- 1991-02-28 JP JP5572191A patent/JPH04271787A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999019503A1 (en) * | 1997-10-14 | 1999-04-22 | Cargill, Incorporated | Low ph lactic acid fermentation |
| WO2004104202A1 (ja) | 2003-05-22 | 2004-12-02 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | D-乳酸脱水素酵素活性を有するタンパク質をコードするdna及びその利用 |
| US7964382B2 (en) | 2003-05-22 | 2011-06-21 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | DNA encoding a protein having D-lactate dehydrogenase activity and uses thereof |
| WO2011043443A1 (ja) * | 2009-10-07 | 2011-04-14 | 三菱化学株式会社 | 脂肪族ジカルボン酸の製造方法 |
| JP5724876B2 (ja) * | 2009-10-07 | 2015-05-27 | 三菱化学株式会社 | コハク酸の製造方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE68925002T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von optisch-aktiven alpha-substituierten organischen Säuren und Mikroorganismen und Enzyme, die dafür verwendet werden. | |
| JP3026190B2 (ja) | ５−アミノレブリン酸生産微生物及びこれを用いた５−アミノレブリン酸の製造法 | |
| JP3014171B2 (ja) | ４−ハロ−３−ヒドロキシブチルアミドの製造法 | |
| DE69738080T2 (de) | Biokatalysatoren mit amin-acylase aktivität | |
| Terasawa et al. | Living cell reaction process forl-isoleucine andl-valine production | |
| JPH03191794A (ja) | 微生物処理によるｒ―（―）―３―ハロゲノ―１，２―プロパンジオールの製法 | |
| IT9021728A1 (it) | L-carnitina deidrogenasi e procedimento per la sua produzione. | |
| WO1998054297A1 (en) | Microorganisms producing 5-aminolevulinic acid and processes for producing 5-aminolevulinic acid by using the same | |
| US4918012A (en) | Method for producing carnitine, L-carnitinamide hydrolase and method for producing same | |
| JP3245254B2 (ja) | 新規微生物及びこれを用いるヌートカトンの製造法 | |
| US5246843A (en) | Process for preparation of R-(-)-3-halogeno-1,2,-propanediol by treatment with microorganism | |
| JP2708536B2 (ja) | ロドコッカス属細菌及びそれを用いる２―ヒドロキシ酪酸の製造法 | |
| JP2840723B2 (ja) | ４‐ハロ‐３‐ヒドロキシブチロニトリルの製造法 | |
| JP3090761B2 (ja) | 光学活性乳酸の製造法 | |
| JP3413294B2 (ja) | ２，５−ジヒドロキシピリジンの製造法および２，５−ジヒドロキシピリジン生産菌 | |
| EP0972065A1 (de) | Mikrobielles verfahren zur herstellung von polyhydroxyalkanoaten | |
| JPH02100674A (ja) | 細菌の培養法 | |
| JP4269416B2 (ja) | α−ハロ−α，β−飽和カルボニル化合物の製造方法 | |
| JP2993766B2 (ja) | ｓｅｃ−セドレノールの製造法 | |
| JP3743172B2 (ja) | Ｌ−ホモシステインの製造方法 | |
| JP2981298B2 (ja) | 新規微生物 | |
| US4916067A (en) | Method for the preparation of sorbic acid by oxidizing 2,4-hexadienal with a microorganism | |
| JP3022513B1 (ja) | パルプの白色度低下を防止した微生物によるピッチコントロール法 | |
| JPH04287690A (ja) | 酵素法によるインジゴの製造法 | |
| JPH04349879A (ja) | ブレビバクテリウム属微生物の培養法 |