JPH0428279B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPH0428279B2
JPH0428279B2 JP58186383A JP18638383A JPH0428279B2 JP H0428279 B2 JPH0428279 B2 JP H0428279B2 JP 58186383 A JP58186383 A JP 58186383A JP 18638383 A JP18638383 A JP 18638383A JP H0428279 B2 JPH0428279 B2 JP H0428279B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
ifn
human
interferon
protein
monomer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP58186383A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS6079000A (ja
Inventor
Kyoshi Nara
Susumu Pponda
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Takeda Chemical Industries Ltd filed Critical Takeda Chemical Industries Ltd
Priority to JP58186383A priority Critical patent/JPS6079000A/ja
Priority to ZA847501A priority patent/ZA847501B/xx
Priority to US06/654,789 priority patent/US4686284A/en
Priority to DE8484111753T priority patent/DE3481193D1/de
Priority to EP84111753A priority patent/EP0136694B1/en
Priority to KR1019840006083A priority patent/KR910006603B1/ko
Priority to PT79298A priority patent/PT79298B/pt
Priority to AT84111753T priority patent/ATE49981T1/de
Priority to AU33804/84A priority patent/AU572196B2/en
Priority to PH31298A priority patent/PH20251A/en
Priority to ES536471A priority patent/ES536471A0/es
Priority to CA000464589A priority patent/CA1239094A/en
Priority to DK474384A priority patent/DK474384A/da
Priority to GR80545A priority patent/GR80545B/el
Priority to NZ209758A priority patent/NZ209758A/en
Priority to IL73166A priority patent/IL73166A/xx
Priority to CN198585101907A priority patent/CN85101907A/zh
Publication of JPS6079000A publication Critical patent/JPS6079000A/ja
Publication of JPH0428279B2 publication Critical patent/JPH0428279B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/113—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides without change of the primary structure
    • C07K1/1133—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides without change of the primary structure by redox-reactions involving cystein/cystin side chains
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/57—IFN-gamma
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C12N15/71—Expression systems using regulatory sequences derived from the trp-operon
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/811—Interferon
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/14—Lymphokine; related peptides
    • Y10S930/142—Interferon

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ヒトγ型インターフエロン単量体の
製造法に関する。
インターフエロン（以下IFNと略称することが
ある）は、高等動物の細胞がウイルスや核酸など
の刺激によつて誘発されて産生する蛋白であり、
抗ウイルス作用、抗腫瘍作用などを有する。
ヒトのインターフエロンには、現在α型、β型
およびγ型の３種の性状の異なるタイプが存在す
ることが知られている。
α型インターフエロン（以下IFN−αと略称す
る）、β型インターフエロン（以下IFN−βと略
称する）に関する研究は比較的すゝんでおり、精
製法もそれらの物性もかなり明らかになつて来て
いる。
γ型インターフエロン（以下IFN−γと略称す
ることがある。）はリンパ球の芽球化やリンホカ
イン産生が起るような状況下で、免疫担当細胞か
ら産生されるため免疫インターフエロンとも呼ば
れている。IFN−γはIFN−αやIFN−βと比較
して、抗細胞増殖活性や抗腫瘍活性が高いといわ
れており、臨床的応用面からより期待されてい
る。しかし、その産生に新鮮なリンパ球が必要で
あることなどの制約があるため、これまで効率の
よい産生系は確立されていない。また、異なる実
験系では、異なる細胞種が異なる分子種のIFN−
γを産生する可能性も示唆されており、その構造
や性質に関しても不明な点が数多く残されてい
る。
本発明者らは、遺伝子組み換え技術により生産
されたヒトIFN−γの精製につき技術開発研究を
行つている際、IFN−γが非常に多量化を起しや
すく、その結果得られるヒトIFN−γ単量体の収
量が悪いことを見出した。
ヒトIFN−γの性状に関する報告はあまりない
が、多量体が存在することは知られている。しか
し多量体を単量体に変換する方法、単量体の多量
体への移行を阻止する方法に関してはまつたく知
られていない。
本発明者らは、さらに研究を行いヒトIFN−γ
単量体の製造法を確立して本発明を完成した。
すなわち、本発明は、粗ヒトγ型インターフエ
ロンを還元性硫黄化合物および蛋白変性剤の共存
下にゲル過することを特徴とするヒトγ型イン
ターフエロン単量体の製造法である。
ここで粗ヒトγ型インターフエロンはヒトIFN
−γを含有するものであればいかなるものでもよ
い。天然に存在するヒトIFN−γを濃縮、分離し
たものや遺伝子組み換え技術によつて得られるヒ
トIFN−γ生産能を有する微生物の培養により製
造されたヒトIFN−γ〔特開昭58−189197号公
報；ヌクレイツク アシツドリサーチ、第10巻、
2487−2501頁（1982年）；ネイチヤ、第295巻、
503−508頁（1982年）参照〕を用いることができ
る。実用面からは、上記ヒトIFN−γ生産能を有
する微生物を培養して得られる菌体抽出液、硫安
分画液、抗体カラム溶出液、イオン交換溶出液を
粗ヒトIFN−γとして用いるが、不純蛋白量が多
いほど還元性硫黄化合物の量が多く必要になり経
済的ではないため、一般には抗体カラムあるいは
イオン交換カラム溶出液等を適用するのが好まし
い。また粗ヒトIFN−γは多量化していてもさし
つかえない。
還元性硫黄化合物としては、例えばシステイ
ン、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルホモ
システイン、還元型グルタチオン、チオエタノー
ルアミン、モノチオグリセロール、ジチオスレイ
トール、炭素数１〜７のチオアルカン、ロンガリ
ツトなどの有機含硫黄化合物やメタ重亜硫酸塩
（ナトリウム塩、カリウム塩）などの無機含硫黄
化合物があげられる。
蛋白変性剤としては、例えば、グアニジン塩
（塩酸塩、硫酸塩）、尿素、チオシアン酸塩（ナト
リウム塩、カリウム塩）などがあげられる。
ゲル過用のゲルとしては市販のものなどから
自由に選択されるが、デキストラン、ポリアクリ
ルアミド、アガロースなどのゲル粒子が好しい。
また、例えば遺伝子組み換え技術により製造され
るヒトIFN−γに適用する場合、その分子量が
17143であることや他の不純蛋白との分離効率を
考え、分画範囲1000〜80000程度の性能を有する
ものから選択して使用するのが好都合である。具
体的にはとりわけセフアデツクス（セフアデツク
ス、SEPHADEX、登録商標）Ｇ−50、Ｇ−75、
セフアクリル（SEPHACRYL、登録商標）Ｓ−
200、バイオゲル（バイオゲル、BIO−GEL、商
標登録出願中）Ｐ−10、Ｐ−30、Ｐ−60等があげ
られる。
使用するゲルの量は、通常付加するサンプルの
５〜100倍（Ｗ／Ｗ）好しくは10〜30倍（Ｗ／Ｗ）
量である。
ゲル過の方法は、通常用いられるカラム法が
適している。
すなわち、粗ヒトIFN−γを緩衝液などに溶解
し水溶液となし、展開溶媒であらかじめ平衡とし
たゲルカラムに付加する。これを展開溶媒により
溶出する。溶出速度は、サンプルの不純度、ゲル
の種類、量により異なるが、通常SV（スペース
ベロシテイ）0.1〜10、好しくは、SV0.5〜３であ
る。溶出液は通常の方法により分画する。
ヒトIFN−γの画分は、通常の方法、たとえば
O.D.280nｍの吸収等で溶出曲線として表わすこ
とにより容易に検出することができる。
ヒトIFN−γと還元性硫黄化合物および蛋白変
性剤を共存させるのは上記ゲル過操作のいずれ
の工程においてでもよいが、ヒトIFN−γをゲル
に付加するための水溶液および展開溶媒に還元性
硫黄化合物および蛋白変性剤を加えておくのが好
しい。
なお蛋白変性剤は、抽出、抗体カラム処理など
前処理で使用している場合には、カラムに付加す
るための水溶液に改めて加えることなくその溶液
のまま使用することが可能である。
上記付加用水溶液および展開溶媒は、PHについ
ては5.0〜8.0、とりわけ中性付近で、還元性硫黄
化合物を１〜100ｍＭとりわけ５〜20ｍＭの濃度
で含有させるのが好ましく、蛋白変性剤を0.1〜
7Mとりわけ１〜2Mの濃度で含有させることが好
ましい。
このようにして得られた精製されたヒトIFN−
γ単量体を含む溶出液は、還元性硫黄化合物と蛋
白変性剤が含まれているが、必要によりこれらを
除去することができる。これらの低分子化合物と
ヒトIFN−γのような高分子化合物の分離にはゲ
ル過によるのが好しい。
本ゲル過は、上記単量化のためのゲル過と
同様に行うことができるが、用いるゲルはとりわ
けセフアデツクス25など低分子化合物の除去に適
したものがあげられる。
さらに還元性硫黄化合物の除去を確実に行う必
要がある時は通常の操作により限外膜過に付す
ることもできる。
これらの低分子化合物とヒトIFN−γの分離操
作においては、ヒト血清アルブミン等を加えてヒ
トIFN−γの安定化を図ることもできる。
本ヒトIFN−γ単量体は、必要によりこれを凍
結乾燥により粉末とすることができる。
本発明により製造されるヒトIFN−γ単量体は
従来の方法で得られるIFN−γと同様の目的に同
様の用法により使用できるが、従来品に比し、夾
雑蛋白質、発熱物質が少ないので、注射剤原体等
としてより安全に使用される。
本発明により製造されるヒトIFN−γ単量体は
抗ウイルス、抗腫瘍、細胞増殖抑制および免疫増
強作用を示し、公知のIFN−γと同様にして投与
することができる。
本明細書中でIFNの活性としての抗ウイルス活
性；Ｕ／ml（ユニツト／ml）の出し方は以下の様
に行つた。ユニツトの確定した国際標準IFN−α
と白血球由来の粗IFN−γをヒト羊膜由来FL細
胞株に対するVSVの細胞変性効果阻止試験を用
いて測定し、その力価の比較から白血球由来粗
IFN−γの力価を決定しIFN−γの標準品とし
た。目的とする資料中のIFN−γの力価算定のた
めには、常にこの標準IFN−γを並べて前述の
WISH−VSVの系でアツセイを行い、その比率
から力価を算出した。
以下実施例および参考例により本発明をより具
体的に説明するが、これらにより本発明は制限さ
れるものではない。
なお実施例中に記載した抗体カラムAb（Moγ2
−11.1）は国際公開WO84／04745号公報、特開
昭59−80646号公報および米国特許第4681848号公
報記載の方法で調製した。
実施例 １ () 参考例１で得た凍結菌体100ｇに7M塩酸グ
アニジンおよび２ｍＭフエニルメチルスルホニ
ルフルオライドを含む100ｍＭトリス塩酸緩衝
液（PH7.0）を300ml加え、４℃で１時間撹拌し
たのち遠心分離機（17000rpm／３分）にかけ
澄明な上清液をえた。この上清液を137ｍＭ塩
化ナトリウム、2.7ｍＭ塩化カリウム、８ｍＭ
リン酸二ナトリウムおよび1.47ｍＭリン酸−カ
リウムから成る緩衝液（以下P.B.Sと略す）で
70倍に希釈し、生じてくる沈澱物をシヤープレ
ス遠心分離機（10000rpm）にかけ除去した。
次いでえられた上清液22をペリコン（ミリポ
ア社製、分画分子量：10000）で1.5にまで濃
縮した。この濃縮液を４℃で一夜放置し、生じ
た沈澱物をさらに遠心分離機（10000rpm／30
分）にかけて除去した。この上清液を予め充填
した抗体カラム（Ab（Mo γ2−11.1）；５×３
cm）に流速1000ml／時間で負荷したのち、
PBSの500ml、1M塩化ナトリウムおよび0.1％
ツイーン（TWEEN、登録商標）20を含んだ
10ｍＭリン酸緩衝液（PH7.0）の1000ml、PBS
の500ml、および0.5M塩酸グアニジンを含んだ
20ｍＭリン酸緩衝液（PH7.0）の500mlの各洗浄
液を遂次抗体カラムを通過させたのち、2M塩
酸グアニジンを含む20ｍＭリン酸緩衝液（PH
7.0）で溶出し、抗ウイルス活性を有する溶出
画分62mlを集めた。
() 実施例１（）で得たIFN−γの62mlの予
め１ｍＭエチレンジアミン四酢酸塩、150ｍＭ
塩化ナトリウム、10ｍＭシステイン塩酸塩およ
び2M塩酸グアニジンを含んだ25ｍＭ酢酸緩衝
液（PH5.0）で平衡化したセフアクリルＳ−200
（フアルマシア社製）のカラム（5.0×60.0cm）
に負荷し、同一緩衝液で溶出し、モノマー溶出
画分83mlを集めた。このようにしてえられた画
分はドデシル硫酸ナトリウムのスラブ電気泳動
法（以下SDS−PAGEと略す）でもモノマーに
収斂した（見かけ上の分子量約18000）。この分
子ふるい操作により比活性1.5×107U／mg・タ
ン白のIFN−γを3.7mg得た。なお実施例１
（）と同じ方法で得たIFN−γを実施例１
（）で使用したゲル過の展開剤のうち、10
ｍＭシステイン塩酸塩を除いたもので同様の処
理を行つたところ、ダイマーやオリゴマー画分
が溶出液全体の約90％を占め、モノマー画分は
約10％と少なかつた。この結果から、システイ
ン塩酸塩およびグアニジン塩酸塩の共存下にお
けるモノマーへの収斂効果が明らかとなつた。
() 実施例１（）でえたIFN−γの83mlを予
め10ｍＭシステイン塩酸塩、150ｍＭ塩化ナト
リウムおよび0.01％ツイーン20を含む25ｍＭ酢
酸緩衝液（PH6.0）で平衡化したセフアデツク
スＧ−25のカラム（5.0×60.0cm）に負荷し、
同一緩衝液で溶出し、塩酸グアニジンを除いた
IFN−γの溶出画分90ml（2.7mg）をえた。こ
のIFN−γの比活性は1.7×107U／mg・タン白
であつた。
() 実施例１（）でえたIFN−γ90mlにヒト血
清アルブミンを450mg量添加、溶解したのち、
ダイアフロー（DIAFLO、登録商標）PM−10
（アミコン社製限外過膜）の膜で限外過法
により60mlにまで濃縮した。この濃縮液を予め
150ｍＭ塩化ナトリウム25ｍＭリン酸緩衝液
（PH7.0）で平衡化したセフアデツクスＧ−75
（５×60cm）に負荷し、同一緩衝液で展開、溶
出し、IFN−γ画分を集めた。この操作で、実
施例１（）でえられたIFN−γに残存するシ
ステインは除かれ、代りにヒト血清アルブミン
を含んだ比活性1.5×107U／mg・タン白のIFN
−γ溶液33ml（2.2mg）をえた。
実施例 ２ 実施例１（）と同様の方法でえた抗体カラム
からの溶出液に還元型グルタチオンを10ｍＭ量添
加し、比活性3.0×106U／mg・タン白のモノマー
リツチな粗IFN−γを63ml（11mg）えた。次い
で、この粗IFN−γを実施例１（）と同様の方
法、但しゲル過用緩衝液のうちシステインを10
ｍＭ還元型グルタチオンに代えたものを用いモノ
マー溶出画分85mlを集めた。このようにして得ら
れた画分はSDS−PAGEでもモノマーに収斂した
（見かけ上の分子量約18000）。なお、ヒト血清ア
ルブミンを溶出画分（85ml）に425mg量添加し、
ゲル過を行い塩さグアニジンを除いた比活性
1.8×107U／mg・タン白のIFN−γ溶液を90ml得
た。
参考例 特開昭58−189197号公報実施例８記載の発現用
ヒトIFN−γ遺伝子を有する菌株RRI
（pRK248cIts、pRC231／IFI−900）をM9−グル
コース培地で30℃で菌体濃度が３−４×108細
胞／mlになるまで培養した後、グルコース、カザ
ミノ酸を濃度がそれぞれ1.0％、0.5％になるよう
に加えて42℃で１時間誘発させた。得られた培養
液を遠心分離にかけて菌体を集め、凍結して保存
した。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. １ 粗ヒトγ型インターフエロンを還元性硫黄化
    合物および蛋白変性剤の共存下にゲル過するこ
    とを特徴とするヒトγ型インターフエロン単量体
    の製造法。
JP58186383A 1983-10-04 1983-10-04 ヒトγ型インタ−フエロン単量体の製造法 Granted JPS6079000A (ja)

Priority Applications (17)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP58186383A JPS6079000A (ja) 1983-10-04 1983-10-04 ヒトγ型インタ−フエロン単量体の製造法
ZA847501A ZA847501B (en) 1983-10-04 1984-09-24 Production of monomeric human ypsilon-interferon
US06/654,789 US4686284A (en) 1983-10-04 1984-09-26 Production of monomeric human γ-interferon
DE8484111753T DE3481193D1 (de) 1983-10-04 1984-10-02 Herstellung menschlichen monomer-gamma-interferons.
EP84111753A EP0136694B1 (en) 1983-10-04 1984-10-02 Production of monomeric human gamma-interferon
KR1019840006083A KR910006603B1 (ko) 1983-10-04 1984-10-02 인체 γ-인터페론 단량체의 제조방법
PT79298A PT79298B (en) 1983-10-04 1984-10-02 Production of monomeric human gama-interferon
AT84111753T ATE49981T1 (de) 1983-10-04 1984-10-02 Herstellung menschlichen monomer-gammainterferons.
AU33804/84A AU572196B2 (en) 1983-10-04 1984-10-03 Production of monomeric human y-interferon
PH31298A PH20251A (en) 1983-10-04 1984-10-03 Production of monomeric human y-interferon
ES536471A ES536471A0 (es) 1983-10-04 1984-10-03 Un metodo para producir -interferon humano monomero
CA000464589A CA1239094A (en) 1983-10-04 1984-10-03 PRODUCTION OF MONOMERIC HUMAN .gamma.-INTERFERON
DK474384A DK474384A (da) 1983-10-04 1984-10-03 Fremgangsmaade til fremstilling af monomert humant gamma-interferon
GR80545A GR80545B (en) 1983-10-04 1984-10-03 Production of monomeric human g-interferon
NZ209758A NZ209758A (en) 1983-10-04 1984-10-03 Production of monomeric human #q#-interferon
IL73166A IL73166A (en) 1983-10-04 1984-10-04 Production of monomeric human ypsilon-interferon
CN198585101907A CN85101907A (zh) 1983-10-04 1985-04-01 单节显性人体γ-干扰素的制造

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP58186383A JPS6079000A (ja) 1983-10-04 1983-10-04 ヒトγ型インタ−フエロン単量体の製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS6079000A JPS6079000A (ja) 1985-05-04
JPH0428279B2 true JPH0428279B2 (ja) 1992-05-13

Family

ID=16187426

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP58186383A Granted JPS6079000A (ja) 1983-10-04 1983-10-04 ヒトγ型インタ−フエロン単量体の製造法

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4686284A (ja)
EP (1) EP0136694B1 (ja)
JP (1) JPS6079000A (ja)
KR (1) KR910006603B1 (ja)
CN (1) CN85101907A (ja)
AT (1) ATE49981T1 (ja)
AU (1) AU572196B2 (ja)
CA (1) CA1239094A (ja)
DE (1) DE3481193D1 (ja)
DK (1) DK474384A (ja)
ES (1) ES536471A0 (ja)
GR (1) GR80545B (ja)
IL (1) IL73166A (ja)
NZ (1) NZ209758A (ja)
PH (1) PH20251A (ja)
PT (1) PT79298B (ja)
ZA (1) ZA847501B (ja)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4855238A (en) 1983-12-16 1989-08-08 Genentech, Inc. Recombinant gamma interferons having enhanced stability and methods therefor
MX9203641A (es) * 1983-12-16 1992-07-01 Genentech Inc Interferones gamma recombinantes que poseen estabilidad mejorada y metodos biotecnologicos para su obtencion.
IL74094A0 (en) * 1984-01-23 1985-04-30 Takeda Chemical Industries Ltd Highly solubilised protein and production thereof
GB8414354D0 (en) * 1984-06-05 1984-07-11 Biogen Nv Purifying protein
GB8508340D0 (en) * 1985-03-29 1985-05-09 Creighton T E Production of protein
US4873312A (en) * 1985-04-25 1989-10-10 Amgen Method for purifying interferon and composition of matter produced thereby
US4766205A (en) * 1985-11-13 1988-08-23 Beatrice Companies, Inc. Method for isolation of recombinant polypeptides in biologically active forms
US4950470A (en) * 1986-10-06 1990-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions employing interferon-gamma
AU664021B2 (en) * 1990-09-05 1995-11-02 Natinco Nv Solubilization of proteins in active forms
AU648214B2 (en) * 1991-12-31 1994-04-14 Lucky Limited Recombinant gene coding for human alpha interferon and expression vector thereof, etc.
US5434249A (en) * 1992-05-27 1995-07-18 Viragen Inc. Method for modulating specific activity of inteferon alpha
JP3452779B2 (ja) * 1997-11-28 2003-09-29 株式会社東海理化電機製作所 回転量制限装置及びウエビング巻取装置

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL7404589A (nl) * 1974-04-03 1975-10-07 Stichting Rega V Z W Werkwijze voor het stabiliseren van interferon.
US4100150A (en) * 1975-11-04 1978-07-11 G. D. Searle & Co. Stabilization of interferon against mechanical stress using thioctic acid
US4278661A (en) * 1979-10-12 1981-07-14 E. I. Du Pont De Nemours And Company Purification of interferon
AU561343B2 (en) * 1981-10-19 1987-05-07 Genentech Inc. Human immune interferon by recombinant dna
EP0080879B1 (en) * 1981-11-28 1986-10-01 Sunstar Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition containing interferon in stable state
CA1210714A (en) * 1982-03-23 1986-09-02 Alan Sloma .alpha.-INTERFERON GX-1
US4432895A (en) * 1982-11-24 1984-02-21 Hoffmann-La Roche Inc. Monomeric interferons
US4476049A (en) * 1983-09-20 1984-10-09 Hoffmann-La Roche Inc. Method for the extraction of immune interferon

Also Published As

Publication number Publication date
JPS6079000A (ja) 1985-05-04
EP0136694B1 (en) 1990-01-31
ES8506195A1 (es) 1985-07-01
ATE49981T1 (de) 1990-02-15
PH20251A (en) 1986-11-10
EP0136694A3 (en) 1986-07-16
DK474384D0 (da) 1984-10-03
US4686284A (en) 1987-08-11
NZ209758A (en) 1988-02-29
AU3380484A (en) 1985-04-18
ZA847501B (en) 1986-05-28
IL73166A (en) 1989-02-28
IL73166A0 (en) 1985-01-31
EP0136694A2 (en) 1985-04-10
DK474384A (da) 1985-04-05
PT79298B (en) 1986-11-13
PT79298A (en) 1984-11-01
CN85101907A (zh) 1987-01-10
DE3481193D1 (de) 1990-03-08
AU572196B2 (en) 1988-05-05
CA1239094A (en) 1988-07-12
GR80545B (en) 1985-02-05
KR850003162A (ko) 1985-06-13
ES536471A0 (es) 1985-07-01
KR910006603B1 (ko) 1991-08-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR930007429B1 (ko) 인터페론의 정제방법
WO1993016107A1 (en) Improved alpha interferon composition and method for its production from human peripheral blood leukocytes
US4551271A (en) Purification of interferon by metal chelate chromatography
US5196323A (en) Process for preparing and purifying alpha-interferon
JPH0428279B2 (ja)
JPS63169995A (ja) β−インターフェロンの回収及び精製方法
US4296025A (en) Process for preparing human interferon
JPH0434560B2 (ja)
EP0087686A2 (en) Homogeneous human immune interferon and process therefor
JP2566919B2 (ja) α−インタ−フエロンの製造方法
Khan et al. Large-scale production of recombinant proteins: human leukocyte interferon
JPH0475920B2 (ja)
WO1980002375A1 (en) High purity animal interferons
JPH0751599B2 (ja) 均質ヒト免疫インターフェロンサブタイプ２６ｋ及びその製造法
EP0150066A2 (en) Highly solubilized protein and production thereof
JPS58502032A (ja) ヒトｒ−インタ−フェロンの製造方法
Yonehara Radioactive Human Lymphoblastoid Interferon: One‐Step Purification, Regulation of Heterogeneous Species Production and Its Use for Radioimmunoassay
JPH0480887B2 (ja)
KR900008571B1 (ko) 효모에서 발현된 인체 γ-인터페론의 정제방법
Traub et al. Isolation of Two Species of Human Lymphoblastoid (Namalva) Cell-Derived Interferon that Differ in Rates of Clearance, Size, and Cell Specificity.
AT391482B (de) Verfahren zur industriellen herstellung von hochreinem menschlichem leukozyteninterferon
YOSHIDA Purification and characterization of lymphokines
JPH064680B2 (ja) 高濃度ヒトγ型インターフェロンフラグメント水溶液の製造法
JPS62209097A (ja) 組換えヒトインタリユーキン−１αの精製法
Cohen et al. [21] Induction and characterization of bovine leukocyte interferon