JPH0430733A - 顕花植物の培養方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は顕花植物の培養方法に関し、更に詳細には植物
体の組織切片を培養して顕花植物を生育開花させる方法
に関する。

〔従来の技術〕

近年の植物組織培養技術の進展により、クローン増殖に
よる優良種苗の大量生産や細胞培養・細胞融合による新
品種の開発が可能となり、既に多くの植物について実用
化されている。

一方、植物組織培養に於て花芽を誘導し開花に至らしめ
ることは一般に困難とされ、開花がｆｉｆＬ認されてい
る植物種の例は極めて少ない。例えば顕花植物であるト
レニアを組織培養により開花させる方法が圧出らによっ
て報告されている［２゜Ｐｌａｎｚｅｎｐｈｙｓｉｏｌ
、、　Ｂｄ、　９５．　Ｓ、　３：３〜４１（１９７９
）；Ｐｌａｎｔ　＆　Ｃｅ１ｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ、、　
２２（３）、　　５３３〜５４Ｈ１９８１）等〕。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかしながら、この原画らの方法には、再生植物体の生
成頻度（再分化率）や花芽誘導・開花の効率が低く、さ
らにかくして得られた花は日持ちが悪いという欠点があ
った。そのため、組織培養技術を用いて顕花植物の組織
より得られた再生植物体を化粧容器内で培養し、花芽誘
導・開花させたものを室内インテリア等の観賞用として
大量生産することはできなかった。

従って、再分化効率及び花芽誘導・開花効率の良好な顕
花植物の培養方法の開発が望まれていた。

〔課題を解決するための手段〕

かかる現状において、本発明者らは上記課題を解決すべ
く鋭意研究した結果、再分化培養と開花培養との培養条
件を相違させる、いわゆる二段培養法を採用すれば、再
分化効率及び花芽誘導・開花効率が飛躍的に向上し、得
られた花の日持ちが良くなることを見出し、本発明を完
成した。

すなわち、本発明は顕花植物体の組織切片又はこれを培
養して得られる再生植物体の組織切片を培地にて培養し
て再分化せしめて再生植物体を得、次いで当該再生植物
体を再分化時とは異なる組成を有する培地で培養して開
花せしめることを特徴とする顕花植物の培養方法を提供
するものである。

本発明において顕花植物としては、特に限定されるもの
ではないが、花を観賞するために用いられる植物、例え
ばウマノスグサ科、ナデシコ科、ナス科等に属する植物
が挙げられ、特にトレニア属に属する植物が好ましい。

本発明の培養法においては、まず顕花植物体の組織切片
又はこれを培養して得られる再生植物体の組織切片を培
地にて培養して再分化せしめて再生植物体を得る（以下
、これを「再分化培養」という）。再分化培養に付され
る組織切片は、顕花植物体の一部、例えば根、茎、葉、
好ましくは花茎の一部を切り出すことにより作製される
。組織切片の作製にあたっては、例えば次亜塩素酸ナト
リウム、塩化ベンザルコニウム、エチルアルコールなど
の植物細胞に直接影響のない任意の滅菌剤を用いて滅菌
し、滅菌水で十分洗浄した後、滅菌したメス、ビンセッ
トなどで組織を適量切除すればよい。なお、当該組織切
片は、再分化により得られた再生植物体より採取しても
よい。このことは、外植片を得る為に必要な親植物を栽
培維持する必要が無いことを示しており、周年にわたっ
て安定に外植片を得ることが可能であるだけでなく、栽
培に必要な一部や温室などの設備や栽培に関わる諸費用
も不要で、大量製造を考える上で非常に重要である。

再分化培養の条件は、上記組織切片の再分化のた約に最
適な条件を選択すればよい。基本培地としては、通常植
物の組織培養に用いられる任意の培地を用いることがで
きるが、好ましい培地はムラシゲ−スクーグ培地である
。培地の炭素源としては主に糖類を用いることができる
が、特に好ましい炭素源の具体例はシュークロースであ
る。この培地には植物生長調節物質を添加するが、その
様な物質としては、オーキシン類、サイトカイニン類、
ジベレリン類などを例示することができる。

本発明においては、オーキシン類（例えば、インドール
−３−酢酸、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸、１−ナ
フタレン酢酸など）とサイトカイニン類（６−ベンジル
アデニン、ゼアチン、カイネチンなど）を組み合せて用
いるのが好ましい。以上の方法で調製された培地は、任
意の滅菌法により滅菌を行った後、これに組織片を移植
して培養に付すのが好ましい。培養は２０〜２５℃で３
．０００〜１０、０００ルクス、１２時間照明、１２時
間暗所の光同期で行うのが好ましい。約１ケ月の再分化
培養により再生植物体が得られる。

次に再分化培養によって得られた再生植物体を、再分化
培養に用いた培地とは異なる組成を有する培地に移植し
て培養し、開花せしめる（以下、これを「開花培養」と
いう）。開花培養に用いられる培地は、ムラシゲ−スク
ーグ培地から硝酸アンモニウム、ミオイノシトール、グ
リシン、塩酸ピリドキシン、ニコチン酸及び塩酸チアミ
ンを除去した培地が好ましい。また塩化カルシウムと硫
酸マグネシウム以外の無機成分の濃度は１１５に希釈し
て用いるのが好ましい。なお、当該培地において、炭素
源としてはシュークロースを用い、ゲル化剤としては寒
天又はジェルライトを用いるのが好ましい。培養は２０
〜２５℃、３．０００〜１０．０００ルクス、８〜１２
時間光照射の短日条件下で行うのが好ましい。培養約１
カ月で花芽が生じ、開花に至る。

また、開花培養を内部が見える化粧版等の容器内で行い
、花芽誘導・開花させれば、得られた顕花植物はそのま
ま室内インテリア等の観賞用品とすることができる。こ
のとき、通常、組織培養が無菌状態の密封容器内で行わ
れ、しかも容器内の湿度は極めて高いため若干の温度変
化によっても容器の壁面に凝結水が付着する。従って観
賞用として用いるためには、容器内部を曇り止め処理、
例えば親水性界面活性剤処理しておくのが好ましい。か
かる親水性界面活性剤としては、デカグリセリルモノラ
ウリン酸等のポリグリ七リル脂肪酸などが挙げられる。

〔実施例〕

次に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれ
に限定されるものではない。

比較例 原田らにより報告されているトレ＝アの花芽誘導・開花
培養条件に従って、トレニア開花株から第２節間部（約
５順）を切り出し、滅菌処理した後、硝酸アンモニウム
、有機成分を除去すると共に１１５に希釈したムラシゲ
−スクーグ培地（糖類として６％（Ｗ／Ｖ）のシューク
ロース、ゲル化剤として１％（ｗ／ｖ）寒天を含む）に
置床し２０〜２５℃、１２時間照明条件下で培養を行っ
た。

その結果、花色の違いに基づくトレニアの品種間で、再
分化効率に著しい違いが認められ、全く再分化が観察さ
れないものも認められた。また再分化が観察された品種
に於てもその効率は非常に低く約１５％が再分化するに
すぎなかった。尚、外植片１個あたりの再生植物体数は
１〜２本（はとんどの場合１本）にすぎなかった。しか
しながら再分化した植物体は全て培養２〜３力月で花芽
を生じ開花に至った。

以上の結果より、原田らによって報告されている培養法
は、花芽誘導・開花という観点からは非常に効率が高い
方法ではあるが、再分化効率が非常に低く培養期間も長
いなどの欠点を有し、室内インテリアなどの観賞用品を
大量製造する場合には適用が困難であると結論された。

実施例１ 再分化培養における培地の検討： ムラシゲ−スクーグ培地を基本とする種々の培地条件を
用いて再分化植物体の大量増殖法を検討した。なお、培
養条件は、２０〜２５℃、３．０００〜１０、０００ル
クス、８〜１２時間の光照射の短日条件とした。

その結果、完全ムラシゲ−スクーグ培地にオーキシンと
して１−ナフタレン酢酸を、サイトカイニントシて６−
ペンジルアプニンヲ各々Ｏ，１ｍｇ／ｌ加え、糖類とし
てシュークロースを３％（Ｗ／Ｖ）、ゲル化剤として寒
天（１％（ｗ／ｖ））あるいはジェルライ）　（０，３
％（ｗ／ｖ））を加えた固形培地を用いることにより、
全ての品種に於て９５％以上の効率で再分化植物体が得
られることが明らかとなった。また再分化速度も早まり
、培養４〜６週間で再生植物体が出現した。

実施例２ 外植片が再生植物体の生成効率に及ぼす影響：実施例１
の条件を用いて、外植片の差異による再生植物体の生成
効率への影響を検討した結果、葉片を用いた場合が最も
良好で、１個の葉片から２０〜３０個体の再生植物体が
得られることが確認された。

実施例３ 開花培養： 開花培養に用いる培地は硝酸アンモニウムと有機成分を
除去し、塩化カルシウム及び硫酸マグネシウム以外の無
機塩類を１１５に希釈したムラシゲスクーグ培地を基本
とし、糖類として６％（＋Ｖ／Ｖ）のシュークロース、
ゲル化剤として０．３％（Ｗ／Ｖ）のジェルライトを添
加したものを用いた。また培養は２０〜２５℃、３．０
００〜１０．０００ルクスで９時間光照射を行う短日条
件下で行った。

また移植再生植物体は上記再分化培養条件下で４〜５週
間培養を行って得られたものを用いた。

開花培養約１ケ月によりほぼ１００％の再生植物体が開
花し・た。また得られた花は日持ち（約１０日）も良好
であった。

実施例４ 透明ガラス瓶を、０．１％デカグリセリルモノラウリン
酸水溶液に浸漬後、約５０℃で風乾した。このガラス瓶
内で実施例３と同様にして開花培養を行った。その結果
、容器に凝結水の付着がほとんどなく、室内インテリア
として良好な観賞用トレニＴが得られた。また界面活性
剤処理によって再生植物体の生長、花芽の誘導・開花は
全く影響を受けなかった。

〔発明の効果〕

本発明により、組織培養により、良好な再分化効率及び
花芽誘導・開花効率で顕花植物を周年に渡って、しかも
大量に開花させることができる。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、顕花植物体の組織切片又はこれを培養して得られる
   再生植物体の組織切片を培地にて培養して再分化せしめ
   て再生植物体を得、次いで当該再生植物体を再分化時と
   は異なる組成を有する培地で培養して開花せしめること
   を特徴とする顕花植物の培養方法。 ２、再分化培養に用いる培地が、オーキシン類及びサイ
   トカイニン類を含有する完全ムラシゲースクーグ培地で
   ある請求項１記載の顕花植物の培養方法。 ３、開花培養に用いる培地が、硝酸アンモニウム、ミオ
   イノシトール、グリシン、塩酸ピリドキシン、ニコチン
   酸及び塩酸チアミンを含まないムラシゲースクーグ培地
   である請求項１記載の顕花植物の培養方法。 ４、顕花植物がトレニア属植物である請求項１記載の顕
   花植物の培養方法。