JPH044891A - 醗酵法によるオロチン酸および／またはオロチジンの製造法 - Google Patents
醗酵法によるオロチン酸および／またはオロチジンの製造法Info
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- JPH044891A JPH044891A JP2106720A JP10672090A JPH044891A JP H044891 A JPH044891 A JP H044891A JP 2106720 A JP2106720 A JP 2106720A JP 10672090 A JP10672090 A JP 10672090A JP H044891 A JPH044891 A JP H044891A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、肝臓薬、生化学試薬、あるいは各種ピリミジ
ン系化合物製造の原料物質として有用なオロチン酸およ
びオロチジンの醗酵法による製造法およびその製造法に
用いるバチルス属細菌に関する。
ン系化合物製造の原料物質として有用なオロチン酸およ
びオロチジンの醗酵法による製造法およびその製造法に
用いるバチルス属細菌に関する。
従来の技術
これまで、様々な微生物においてピリミジン要求性変異
株を誘導した場合、ある種の変異株がオロチン酸および
／またはオロチジンを生成蓄積することが報告されてい
る（アミノ酸、核酸集談会編、核酸醗酵、９１７８、講
談社すイエンティフィク（１９７６））。また、バチル
ス属細菌については、バチルス・ズブチリスのウラシル
要求株がオロチン酸およびオロチジンを蓄積すること（
日本農芸化学会誌、第３９巻、ｐｌ！８、（＋９６５）
）ならびにバチルス・ズブチリス、バチルス・プミルス
、バチルス・リケニフＡルミスのウラシル要求株が第１
−１ヂン酸およびオロチジンを蓄積すること［アグリ力
ルチコラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（
Ａｇｒｉｃ、 Ｂ ｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）５２．１
４７９（１９８８）］が報告されている。
株を誘導した場合、ある種の変異株がオロチン酸および
／またはオロチジンを生成蓄積することが報告されてい
る（アミノ酸、核酸集談会編、核酸醗酵、９１７８、講
談社すイエンティフィク（１９７６））。また、バチル
ス属細菌については、バチルス・ズブチリスのウラシル
要求株がオロチン酸およびオロチジンを蓄積すること（
日本農芸化学会誌、第３９巻、ｐｌ！８、（＋９６５）
）ならびにバチルス・ズブチリス、バチルス・プミルス
、バチルス・リケニフＡルミスのウラシル要求株が第１
−１ヂン酸およびオロチジンを蓄積すること［アグリ力
ルチコラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（
Ａｇｒｉｃ、 Ｂ ｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）５２．１
４７９（１９８８）］が報告されている。
（、かじながら、これらの報告によると、蓄積するオロ
チン酸およびオロチジンの量は僅かであり、改善の余地
が残されている。また、一般に醗酵法でオロチン酸およ
び／またはオロチジンを蓄積させる場合は、供試菌とし
てウラシル要求株が用いられるため、ウラシル等のピリ
ミジン系化合物またはそれを含有する酵母エギス、酵母
菌体、リボ核酸などを培地に添加する必要があるが、こ
の際に問題となるのは、それらの添加量によってオロチ
ン酸および／またはオロチジンの生産量が大きく変動す
るために、培地に添加するウラシル類の濃度を特定の範
囲に厳密にコントロールする必要があることである。
チン酸およびオロチジンの量は僅かであり、改善の余地
が残されている。また、一般に醗酵法でオロチン酸およ
び／またはオロチジンを蓄積させる場合は、供試菌とし
てウラシル要求株が用いられるため、ウラシル等のピリ
ミジン系化合物またはそれを含有する酵母エギス、酵母
菌体、リボ核酸などを培地に添加する必要があるが、こ
の際に問題となるのは、それらの添加量によってオロチ
ン酸および／またはオロチジンの生産量が大きく変動す
るために、培地に添加するウラシル類の濃度を特定の範
囲に厳密にコントロールする必要があることである。
発明が解決しようとする課題
本発明は、バチルス属細菌を用い、オロチン酸および／
またはオロチジンを収率高く、（７かも、菌株の要求物
質であるウラノル等ピリミジン系化合物およびそれを含
有する物質の培地への添加量を制限する必要がない製造
法を提供しようとするものである。
またはオロチジンを収率高く、（７かも、菌株の要求物
質であるウラノル等ピリミジン系化合物およびそれを含
有する物質の培地への添加量を制限する必要がない製造
法を提供しようとするものである。
課題を解決するための手段
本発明者らは、バチルス属に属し、ウリジン５゛モノフ
オスフエート生合成にかかわる代謝制御が解除され、か
つ、オロヂン酸〕埼スフ］リポノルトランスフＪラーゼ
を欠損する微生物が培地中に著量のオロチン酸を生成蓄
積すること、ならびにバチルス属に属し、ウリジン５゛
−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御が解除
され、かつ、オ［１デシン５°−モノフォスフェートデ
力ルポギシラーゼを欠損する微生物が培地中に著量のオ
ロチン酸およびオロチジンを生成蓄積すること、さらに
、これらの菌株を培養するに当たって菌株の要求物質で
あるウラシル等ピリミジン系化合物おにびそれを含有す
る物質の培地への添加量を制限する必要がないことを見
いだＩ７、この知見に基づきさらに研究を続１１１本発
明を完成した。
オスフエート生合成にかかわる代謝制御が解除され、か
つ、オロヂン酸〕埼スフ］リポノルトランスフＪラーゼ
を欠損する微生物が培地中に著量のオロチン酸を生成蓄
積すること、ならびにバチルス属に属し、ウリジン５゛
−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御が解除
され、かつ、オ［１デシン５°−モノフォスフェートデ
力ルポギシラーゼを欠損する微生物が培地中に著量のオ
ロチン酸およびオロチジンを生成蓄積すること、さらに
、これらの菌株を培養するに当たって菌株の要求物質で
あるウラシル等ピリミジン系化合物おにびそれを含有す
る物質の培地への添加量を制限する必要がないことを見
いだＩ７、この知見に基づきさらに研究を続１１１本発
明を完成した。
すなわち、本発明は、（１）バチルス属に属し、ウリジ
ン５′−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御
が解除され、かつ、オロヂン酸フ４スフォリボシルトラ
ンスフェラーゼを欠損する微生物を培養し、培養物中に
オロチン酸を生成蓄積させ、これを採取することを特徴
とするオロチン酸の製造法、（２）バチルス属に属し、
ウリジン５モノフオスフエート生合成にかかわる代謝制
御が解除され、かつ、オロチジン５“−モノフォスフ、
−−トデカルボキシラーゼを欠損する微生物を培養し、
培養物中にオロチン酸およびオロチジンを生成蓄積させ
、これを採取することを特徴とするオロチン酸およびオ
ロチジンの製造法、（３）ウリジン５′−モノフォスフ
ェート生合成にかかわる代謝制御が解除され、かつ、オ
ロチン酸フオスフオリボシルトランスフエラーゼを欠損
するバチルス・ズブチリスおよび（４）ウリノン５−・
モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御が解除さ
れ、かつ、オロチジン５−モノフオスフゴートデ力ルポ
ギシラーゼを欠損するバチルス・ズブチリスである。
ン５′−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御
が解除され、かつ、オロヂン酸フ４スフォリボシルトラ
ンスフェラーゼを欠損する微生物を培養し、培養物中に
オロチン酸を生成蓄積させ、これを採取することを特徴
とするオロチン酸の製造法、（２）バチルス属に属し、
ウリジン５モノフオスフエート生合成にかかわる代謝制
御が解除され、かつ、オロチジン５“−モノフォスフ、
−−トデカルボキシラーゼを欠損する微生物を培養し、
培養物中にオロチン酸およびオロチジンを生成蓄積させ
、これを採取することを特徴とするオロチン酸およびオ
ロチジンの製造法、（３）ウリジン５′−モノフォスフ
ェート生合成にかかわる代謝制御が解除され、かつ、オ
ロチン酸フオスフオリボシルトランスフエラーゼを欠損
するバチルス・ズブチリスおよび（４）ウリノン５−・
モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御が解除さ
れ、かつ、オロチジン５−モノフオスフゴートデ力ルポ
ギシラーゼを欠損するバチルス・ズブチリスである。
本発明における「オロチン酸フ］スフ１リボシルトラン
スフＪラーゼ欠損株」ならびに「オ【１チンン５°−モ
ノフォスフェートデカルボキシラーゼ欠損株」とは、す
でに報告されている方法「アグリ力ルヂコラル・アンド
・バイオロンカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉ
ｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）、 ５３ 、 ９７（１９８
９）］において、当当該酵素性が００１ユニット／ｗｔ
９・タンパク以下の微生物をいう。これらの欠損株を誘
導するには、例えば、紫外線照射、Ｎ−メヂルーＮ′−
二トローＮ 、−二トロソグアニジン（ＮＴＧ）処理な
どの公知の変異操作を施１７た後、レプリカ操作によっ
てウラシル要求菌を選別することにより、目的とする菌
株を得ることができる。あるいは、ノエイ・デイ・ベー
ケ（Ｊ、Ｉ）Ｂ ｏｅｋｅ）らがサツカロマイセス・セ
レビセー（Ｓ ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅ
ｖｉｓｉａｅ）で示した［モレキュラー・アンド・ジェ
ネラル・ジエネティックス（Ｍｏ１．Ｇｅｎ、Ｇｅｎｅ
ｔ、）、 １９７．３４５（１９８４）］方法により５
−フルオロオロチン酸耐性株として選択することもでき
る。この方法でジェイ・デイ・ベーケらはオロチジン５
°−モノフォスフェートデカルボキシラーゼ欠損株を直
接的に選択できるとしているが、本発明者らは、この方
法でオロチン酸フォスフォリボシルトランスフェラーゼ
欠損株も直接的に選択できることをはじめて見いだした
。
スフＪラーゼ欠損株」ならびに「オ【１チンン５°−モ
ノフォスフェートデカルボキシラーゼ欠損株」とは、す
でに報告されている方法「アグリ力ルヂコラル・アンド
・バイオロンカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉ
ｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）、 ５３ 、 ９７（１９８
９）］において、当当該酵素性が００１ユニット／ｗｔ
９・タンパク以下の微生物をいう。これらの欠損株を誘
導するには、例えば、紫外線照射、Ｎ−メヂルーＮ′−
二トローＮ 、−二トロソグアニジン（ＮＴＧ）処理な
どの公知の変異操作を施１７た後、レプリカ操作によっ
てウラシル要求菌を選別することにより、目的とする菌
株を得ることができる。あるいは、ノエイ・デイ・ベー
ケ（Ｊ、Ｉ）Ｂ ｏｅｋｅ）らがサツカロマイセス・セ
レビセー（Ｓ ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅ
ｖｉｓｉａｅ）で示した［モレキュラー・アンド・ジェ
ネラル・ジエネティックス（Ｍｏ１．Ｇｅｎ、Ｇｅｎｅ
ｔ、）、 １９７．３４５（１９８４）］方法により５
−フルオロオロチン酸耐性株として選択することもでき
る。この方法でジェイ・デイ・ベーケらはオロチジン５
°−モノフォスフェートデカルボキシラーゼ欠損株を直
接的に選択できるとしているが、本発明者らは、この方
法でオロチン酸フォスフォリボシルトランスフェラーゼ
欠損株も直接的に選択できることをはじめて見いだした
。
オロチン酸はウリジン５°−モノフォスフェート生合成
の中間体であり、また、オロチジンは同じくウリジン５
゛−モノフォスフェート生合成の中間体であるオロチジ
ン５°−モノフォスフェートより脱リン酸反応によって
生じたものである。
の中間体であり、また、オロチジンは同じくウリジン５
゛−モノフォスフェート生合成の中間体であるオロチジ
ン５°−モノフォスフェートより脱リン酸反応によって
生じたものである。
これらの物質は前記のごとくウリジン５°−モノフォス
フェート生合成酵素の欠損株、具体的には、オロチン酸
フォスフォリボシルトランスフエラーゼ欠損株や、オロ
チジン５°−モノフォスフェートデカルボキシラーゼ欠
損株の培養物中に蓄積される。従って、オロチン酸およ
び／またはオロチジンの醗酵生産を行う場合は、それら
の菌株の生育を支えるための物質としてウラシル等のピ
リミジン系化合物あるいは、これらを含む物質を培地に
添加しなくてはならない。この場合、その添加濃度は厳
密に制御されていなければならず、ある濃度以上の添加
を行うとオロチン酸および／またはオロチジンの蓄積は
、強く抑制されてしまう［日本農芸化学会誌、第３９巻
、１１８（１９６５）あるいは、［アグリカルチュラル
・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ
、Ｂ ｉｏｌ、ｃｈｅｍ、）５２．１４７９（１９８８
）］。これは、ウラシルなどのピリミジン系物質あるい
は、その代謝産物がウリジン５゛−モノフォスフェート
生合成酵素のフィードバック阻害あるいは、フィードバ
ックリプレッションなどの代謝制御を行う物質として機
能するためである［バクテリオロジカル・レビューズ（
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、 Ｒｅｖ、）、 ３４ 、２７８
（１９７０）］。バチルス・ズブチリスのウリジン５−
モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御としては
、ウリジン５°−モノフォスフェート生合成系の初発酵
素であるカルバミルリン酸合成酵素がウリジン５°−モ
ノフォスフェートによってフィードバック阻害を受ける
こと、ならびに、ウリジン５°−モノフォスフェート生
合成にかかわる６つの酵素の生成が、ウラシルに由来す
る物質によってフィードバックリブレッンヨンを受ける
ことなどが知られている［アグリカルチュラル・アンド
・バイオロジカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ。
フェート生合成酵素の欠損株、具体的には、オロチン酸
フォスフォリボシルトランスフエラーゼ欠損株や、オロ
チジン５°−モノフォスフェートデカルボキシラーゼ欠
損株の培養物中に蓄積される。従って、オロチン酸およ
び／またはオロチジンの醗酵生産を行う場合は、それら
の菌株の生育を支えるための物質としてウラシル等のピ
リミジン系化合物あるいは、これらを含む物質を培地に
添加しなくてはならない。この場合、その添加濃度は厳
密に制御されていなければならず、ある濃度以上の添加
を行うとオロチン酸および／またはオロチジンの蓄積は
、強く抑制されてしまう［日本農芸化学会誌、第３９巻
、１１８（１９６５）あるいは、［アグリカルチュラル
・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ
、Ｂ ｉｏｌ、ｃｈｅｍ、）５２．１４７９（１９８８
）］。これは、ウラシルなどのピリミジン系物質あるい
は、その代謝産物がウリジン５゛−モノフォスフェート
生合成酵素のフィードバック阻害あるいは、フィードバ
ックリプレッションなどの代謝制御を行う物質として機
能するためである［バクテリオロジカル・レビューズ（
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、 Ｒｅｖ、）、 ３４ 、２７８
（１９７０）］。バチルス・ズブチリスのウリジン５−
モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御としては
、ウリジン５°−モノフォスフェート生合成系の初発酵
素であるカルバミルリン酸合成酵素がウリジン５°−モ
ノフォスフェートによってフィードバック阻害を受ける
こと、ならびに、ウリジン５°−モノフォスフェート生
合成にかかわる６つの酵素の生成が、ウラシルに由来す
る物質によってフィードバックリブレッンヨンを受ける
ことなどが知られている［アグリカルチュラル・アンド
・バイオロジカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ。
Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）、 ５３． ９７（１９
８９）］。従って、既知の方法でオロチン酸および／ま
たはオロチジンの醗酵生産を行う場合は、ウラシル等の
ピリミジン系化合物あるいは、これらを含む物質の添加
濃度を制御することが不可欠であり、特に酵母エキスな
どのように、ウラシル等のピリミジン系化合物の含有量
が一定でない物質をピリミジン源として用いる場合は、
生産管理が非常に困難となる。これに対し、ウリジン５
°−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御の解
除された菌株においては、菌株の要求する量を満たしさ
えすれば、いかなる量のウラシル等のピリミジン系化合
物あるいは、これらを含む物質を添加してもオロチン酸
および／またはオロチジンの蓄積量は影響を受けず、生
産管理は極めて簡潔なものとなる。
８９）］。従って、既知の方法でオロチン酸および／ま
たはオロチジンの醗酵生産を行う場合は、ウラシル等の
ピリミジン系化合物あるいは、これらを含む物質の添加
濃度を制御することが不可欠であり、特に酵母エキスな
どのように、ウラシル等のピリミジン系化合物の含有量
が一定でない物質をピリミジン源として用いる場合は、
生産管理が非常に困難となる。これに対し、ウリジン５
°−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御の解
除された菌株においては、菌株の要求する量を満たしさ
えすれば、いかなる量のウラシル等のピリミジン系化合
物あるいは、これらを含む物質を添加してもオロチン酸
および／またはオロチジンの蓄積量は影響を受けず、生
産管理は極めて簡潔なものとなる。
さらに、このような菌株ではウリジン５°−モノフォス
フェート生合成にかかわる代謝制御が解除されているこ
とにより、オロチン酸および／またはオロチジンの生産
を制御する機構がなくなり、きわめて著量のオロチン酸
および／またはオロチジンが蓄積することになる。ウリ
ジン５゛−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制
御を解除する方法としてはピリミジンアナログ耐性株を
誘導する方法［アプライド・マイクロバイオロジー・ア
ンド・バイオテクノロジー（Ａ ｐｐｌ 、 Ｍ １ｃ
ｒｏｂｉｏｌ 。
フェート生合成にかかわる代謝制御が解除されているこ
とにより、オロチン酸および／またはオロチジンの生産
を制御する機構がなくなり、きわめて著量のオロチン酸
および／またはオロチジンが蓄積することになる。ウリ
ジン５゛−モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制
御を解除する方法としてはピリミジンアナログ耐性株を
誘導する方法［アプライド・マイクロバイオロジー・ア
ンド・バイオテクノロジー（Ａ ｐｐｌ 、 Ｍ １ｃ
ｒｏｂｉｏｌ 。
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、）、 ３０ 、２３４ （１９
８９））があげられる。ここでいうピリミジンアナログ
とは、ウラシルやシトシン等のピリミジン塩基と類似の
構造を有する物質、例えば、６−アザウラシル、２ヂオ
ウラシル、５−フルオロノドンル、３−デアザウランル
、５−フルオロノドノンなどやこれらのりボサイドおよ
びリボタイトなとをいう、。
８９））があげられる。ここでいうピリミジンアナログ
とは、ウラシルやシトシン等のピリミジン塩基と類似の
構造を有する物質、例えば、６−アザウラシル、２ヂオ
ウラシル、５−フルオロノドンル、３−デアザウランル
、５−フルオロノドノンなどやこれらのりボサイドおよ
びリボタイトなとをいう、。
本発明で用いる微生物の具体例と１−では、ノくチルス
・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｉｓ
）ＳＴＡ１７Ｅ株（ＩＦＯＩ ５０２４．ＦＥＲＭ Ｐ
１１４０２）、バチルス・ズブチリスＱ３ａｃｉｌｌｕ
ｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｓ ＴΔ−１７Ｆ株（ＩＦＯ１５
０２５゜ＦＥＲＭ Ｐ−１１４０３）があげられる。Ｓ
Ｔ Ａ−１７Ｅ株、ならびに５ＴＡ−１７Ｆ株はノく
チルス・ズブチリスＳ Ｔ Ａ−１７株（ｌ Ｆ’０１
４３８８ ＦＥＲＭ Ｐ−７９０５）を親株として
誘導されたものである。５ＴＡ−１７Ｅ株は５ＴＡ−１
７株のオロチン酸フオスフオリボソルトランスフエラー
ゼ欠損株であり、また５ＴＡ１７Ｆ株は５ＴＡ−１７株
のオロチジン５−モノフ］スフゴートデカルボキンラー
ゼ欠損体である。これらの酵素の欠損を除けば５ＴＡ−
１７Ｅ株および５ＴＡ−１７Ｆ株の菌学的性質は５ＴＡ
１７株のそれと同じである。５ＴＡ−１７株はバチルス
・ズブチリスＮｏ、１２２株（ＩＦＯ１４３８６に’Ｅ
ＲＭ ｒ’−７９０８）力＼ら公知１の変異処理によ
りウリジンヌクレオシ・ドフオスフ、＋−リラーゼを欠
損しかつビリミンンアナログ耐性を示しウリジン生産能
を有する微生物と（７て誘導されたものである（特開昭
６ｌ−１０４７９１）。
・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｉｓ
）ＳＴＡ１７Ｅ株（ＩＦＯＩ ５０２４．ＦＥＲＭ Ｐ
１１４０２）、バチルス・ズブチリスＱ３ａｃｉｌｌｕ
ｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｓ ＴΔ−１７Ｆ株（ＩＦＯ１５
０２５゜ＦＥＲＭ Ｐ−１１４０３）があげられる。Ｓ
Ｔ Ａ−１７Ｅ株、ならびに５ＴＡ−１７Ｆ株はノく
チルス・ズブチリスＳ Ｔ Ａ−１７株（ｌ Ｆ’０１
４３８８ ＦＥＲＭ Ｐ−７９０５）を親株として
誘導されたものである。５ＴＡ−１７Ｅ株は５ＴＡ−１
７株のオロチン酸フオスフオリボソルトランスフエラー
ゼ欠損株であり、また５ＴＡ１７Ｆ株は５ＴＡ−１７株
のオロチジン５−モノフ］スフゴートデカルボキンラー
ゼ欠損体である。これらの酵素の欠損を除けば５ＴＡ−
１７Ｅ株および５ＴＡ−１７Ｆ株の菌学的性質は５ＴＡ
１７株のそれと同じである。５ＴＡ−１７株はバチルス
・ズブチリスＮｏ、１２２株（ＩＦＯ１４３８６に’Ｅ
ＲＭ ｒ’−７９０８）力＼ら公知１の変異処理によ
りウリジンヌクレオシ・ドフオスフ、＋−リラーゼを欠
損しかつビリミンンアナログ耐性を示しウリジン生産能
を有する微生物と（７て誘導されたものである（特開昭
６ｌ−１０４７９１）。
５ＴＡ−１７株はビリミジンアナＣ１グ耐性変−間を有
するためにウリジン５゛−モノフオスフゴー１−生合成
にかかわる代謝制御が解除された状態に〃）る。
するためにウリジン５゛−モノフオスフゴー１−生合成
にかかわる代謝制御が解除された状態に〃）る。
本発明においては、前記した微生物以外にも、種々のバ
チルス属細菌を親株として公知の変異処理を施すことに
よりウリノン５゛−モノフＡスフＪ−ト生合成にかかわ
る代謝制御が解除され、力１つ、オロチン酸フオスフオ
リポノルトランスフＪラーゼあるいはオロチジン５′−
モノフォスフｊ、 ｌ・デカルボキシラーゼを欠損し
オロチン酸お、及び／またはオロチジン生産能を有する
微生物を容易ζ、二誘導することができる。
チルス属細菌を親株として公知の変異処理を施すことに
よりウリノン５゛−モノフＡスフＪ−ト生合成にかかわ
る代謝制御が解除され、力１つ、オロチン酸フオスフオ
リポノルトランスフＪラーゼあるいはオロチジン５′−
モノフォスフｊ、 ｌ・デカルボキシラーゼを欠損し
オロチン酸お、及び／またはオロチジン生産能を有する
微生物を容易ζ、二誘導することができる。
なお、本明細書におけるＩＦＯ番号は財団法人発酵研究
所（Ｉ ＦＯ１大阪府大阪市淀川区十三本町２丁目１７
番８５号）への寄託名号であり、また、Ｆ Ｅ ＲＭ
Ｐ一番号は工業技術院微生物工業技術研究所（ＦＲＩ
、茨城県つくば電束１丁目１番３号）への寄託番号であ
る。
所（Ｉ ＦＯ１大阪府大阪市淀川区十三本町２丁目１７
番８５号）への寄託名号であり、また、Ｆ Ｅ ＲＭ
Ｐ一番号は工業技術院微生物工業技術研究所（ＦＲＩ
、茨城県つくば電束１丁目１番３号）への寄託番号であ
る。
かくして、得られたオロチン酸および／またはオロチジ
ン生産能の培養には、通常の微生物の培養と同様の方法
が用いられる。すなわち、培地としては炭素源、窒素源
、無機物、金属塩、ウラシル等のピリミジン系化合物あ
るいは、それを含む酵母エキス、酵母菌体、リボ核酸な
どの物質などのほかに、必要に応じてアミノ酸、ビタミ
ン類なとの栄養源を含有する培地が用いられる。例えば
、炭素源としては、グルコース、ソコークロース、マル
トース、ソルビトール、でんぷん、でんぷん糖化液、糖
蜜などが用いられる。窒素源と１．では、ヘプトン、コ
ーン・スヂーブ・リカー、大豆粉、尿素などの有機窒素
源のほかに、硫酸、硝酸、塩酸、炭酸などのアンモニウ
ム塩や、アンモニアガス、アンモニア水などの無機窒素
源が、それぞれ単独も（７くは混合して用いられる。そ
の他の栄養源としては、菌の生育に必要なウラシル等の
ピリミジン系化合物あるいは、それを含む酵母エキス、
酵Ｉす菌体、リボ核酸などの物質などのほかに、各種の
無機塩類、アミノ酸類、ビタミン類、などが適宜選択の
上、それぞれ単独もしくは混合（−で用いられる。さら
に、培地には、必要に応じてノリクンオイル、ポリアル
ギレングリコールエーテルなどの消泡剤や界面活性剤な
どを添加することかできる。培養は通常、振盪あるいは
通気撹拌深部培養等の好気的条件下に行われる。
ン生産能の培養には、通常の微生物の培養と同様の方法
が用いられる。すなわち、培地としては炭素源、窒素源
、無機物、金属塩、ウラシル等のピリミジン系化合物あ
るいは、それを含む酵母エキス、酵母菌体、リボ核酸な
どの物質などのほかに、必要に応じてアミノ酸、ビタミ
ン類なとの栄養源を含有する培地が用いられる。例えば
、炭素源としては、グルコース、ソコークロース、マル
トース、ソルビトール、でんぷん、でんぷん糖化液、糖
蜜などが用いられる。窒素源と１．では、ヘプトン、コ
ーン・スヂーブ・リカー、大豆粉、尿素などの有機窒素
源のほかに、硫酸、硝酸、塩酸、炭酸などのアンモニウ
ム塩や、アンモニアガス、アンモニア水などの無機窒素
源が、それぞれ単独も（７くは混合して用いられる。そ
の他の栄養源としては、菌の生育に必要なウラシル等の
ピリミジン系化合物あるいは、それを含む酵母エキス、
酵Ｉす菌体、リボ核酸などの物質などのほかに、各種の
無機塩類、アミノ酸類、ビタミン類、などが適宜選択の
上、それぞれ単独もしくは混合（−で用いられる。さら
に、培地には、必要に応じてノリクンオイル、ポリアル
ギレングリコールエーテルなどの消泡剤や界面活性剤な
どを添加することかできる。培養は通常、振盪あるいは
通気撹拌深部培養等の好気的条件下に行われる。
培地のｐＨは通常４〜９の範囲が好ましい。培養中にｐ
Ｉ（の変動が観察される場合には、こねを好ましい範
囲に修正するために、硫酸、炭酸カルシウム、水酸化ナ
トリウム、アンモニアガス、アンモニア水等を適宜添加
【２てもよい。培養温度は、通常、２０°Ｃ〜４５℃の
範囲から使用される微生物の生育およびオロチン酸およ
び／またはオロチジンの蓄積に好適な温度が選択される
。培養は実質的にオロチン酸および／またはオロチジン
蓄積量が最大になるまで行われるが、通常、２日間〜６
日間の培養で目的を達することができる。
Ｉ（の変動が観察される場合には、こねを好ましい範
囲に修正するために、硫酸、炭酸カルシウム、水酸化ナ
トリウム、アンモニアガス、アンモニア水等を適宜添加
【２てもよい。培養温度は、通常、２０°Ｃ〜４５℃の
範囲から使用される微生物の生育およびオロチン酸およ
び／またはオロチジンの蓄積に好適な温度が選択される
。培養は実質的にオロチン酸および／またはオロチジン
蓄積量が最大になるまで行われるが、通常、２日間〜６
日間の培養で目的を達することができる。
培養物からオロチン酸および／またはオロチジンを分離
、採取するにはすでに公知にされている通常の精製手段
、例えば、沈澱法、イオン交換樹脂や活性炭などによる
クロマトグラフィー法などの分離精製法が用いられる。
、採取するにはすでに公知にされている通常の精製手段
、例えば、沈澱法、イオン交換樹脂や活性炭などによる
クロマトグラフィー法などの分離精製法が用いられる。
Ｋ夜匹
以下に、実施例をもって本発明をさらに具体的に説明す
る。
る。
野生株バチルス・ズブチリスＮｏ、１２２株（ＩＦＯ１
４３８６，ＦＥＲＭ Ｐ−７９０８）から変異処理に
より、ウリジンヌクレオシドフォスフォリラーゼを欠損
し、かつ、ピリミジンアナログ耐性を示し、ウリジン生
産能を有する微生物として誘導されたバチルス・ズブチ
リス５ＴＡ１７株（ＩＦＯ１４３８８ＦＥＲＭ Ｐ７
９０５Ｘ特開昭６ｉ１０４７９５号）を５０μ９／酎の
ＮＴＧで３７℃で２０分間処理した後、以下に示す基本
培地（Ａ）に、０．１％の５−フルオロオロチン酸と０
．００５％のウラシルとを加えた培地に塗抹し３７°Ｃ
で５日間培養した。
４３８６，ＦＥＲＭ Ｐ−７９０８）から変異処理に
より、ウリジンヌクレオシドフォスフォリラーゼを欠損
し、かつ、ピリミジンアナログ耐性を示し、ウリジン生
産能を有する微生物として誘導されたバチルス・ズブチ
リス５ＴＡ１７株（ＩＦＯ１４３８８ＦＥＲＭ Ｐ７
９０５Ｘ特開昭６ｉ１０４７９５号）を５０μ９／酎の
ＮＴＧで３７℃で２０分間処理した後、以下に示す基本
培地（Ａ）に、０．１％の５−フルオロオロチン酸と０
．００５％のウラシルとを加えた培地に塗抹し３７°Ｃ
で５日間培養した。
基本培地（Ａ）
グルコース ０．５％
硫酸マグネシウム ０．０２％
硫酸マンガン ０．００５％硫酸亜鉛
０．００５％ビオチン ０
．００１％チアミン ０．０１％ リン酸ｌカリウム ０．６％ リン酸２カリウム １．４％ 硫酸アンモニウム ０．２％ こはく酸ナトリウム ０１％ 寒天 ２．０％ （ｐＨ７，０） 出現したコロニー（５−フルオロオロチン酸耐性株）の
中から、レプリカ法によって菌株のウラシル要求性を調
べたところ、得られた２３株のうち１８株がウラシル要
求性変異株であった。一方、対照としてバチルス・ズブ
チリスＮｏ、 １２２株より５ＴＡ−１７株に施したも
のと同様の処理を行い、５−フルオロオロチン酸耐性株
８株を得た。
０．００５％ビオチン ０
．００１％チアミン ０．０１％ リン酸ｌカリウム ０．６％ リン酸２カリウム １．４％ 硫酸アンモニウム ０．２％ こはく酸ナトリウム ０１％ 寒天 ２．０％ （ｐＨ７，０） 出現したコロニー（５−フルオロオロチン酸耐性株）の
中から、レプリカ法によって菌株のウラシル要求性を調
べたところ、得られた２３株のうち１８株がウラシル要
求性変異株であった。一方、対照としてバチルス・ズブ
チリスＮｏ、 １２２株より５ＴＡ−１７株に施したも
のと同様の処理を行い、５−フルオロオロチン酸耐性株
８株を得た。
この８株をレプリカ法によって菌株のウラシル要求性を
調べたところ、得られた８株のうち６株がウラシル要求
性変異株であった。これらのウラシル要求株を以下に示
す種培養培地５ｉ（を入れた試験管に植菌し、３７℃で
８時間培養した。その培養液を以下に示す生産培地２０
酎を含む２００ｘρ容フラスコにＩｘＱを植菌し、３７
℃で３日間培養した。培養したウラシル要求株は、いず
れもオロチン酸および／またはオロチジンを蓄積した。
調べたところ、得られた８株のうち６株がウラシル要求
性変異株であった。これらのウラシル要求株を以下に示
す種培養培地５ｉ（を入れた試験管に植菌し、３７℃で
８時間培養した。その培養液を以下に示す生産培地２０
酎を含む２００ｘρ容フラスコにＩｘＱを植菌し、３７
℃で３日間培養した。培養したウラシル要求株は、いず
れもオロチン酸および／またはオロチジンを蓄積した。
その中から代表株としてバチルス・ズブチリス１２２Ｅ
株、バチルス・ズブチリス１２２Ｆ’株、バチルス・ズ
ブチリス５ＴＡ−１７Ｅ株、バチルス・ズブチリス５Ｔ
Ａ−１７Ｆ株の４株を選択した。これら４株の培養結果
を表１に示す。
株、バチルス・ズブチリス１２２Ｆ’株、バチルス・ズ
ブチリス５ＴＡ−１７Ｅ株、バチルス・ズブチリス５Ｔ
Ａ−１７Ｆ株の４株を選択した。これら４株の培養結果
を表１に示す。
種培養培地
マルトース ２．０％
ペプトン １．０％
肉エキス
１．０％
ｐＨ７、０
生産培地
グルコース
コーン・スチープ・
尿素
炭酸カルシウム
ウラシル
１６０％
リカー ４０％
２．０％
０．５％
０００５％
ｐＨ７、０
表１
菌株名
ハ゛チルス・ス゛）゛チリス
ハ゛チルス・λ゛７゛ｆ７
゛ｆリスルス・ス＃７＃ｆリス
へ〇チルλ・λ′アリリス
２２Ｅ
２２Ｆ
ＳＴＡ−１７Ｅ
ＳＴＡ−１７Ｆ
オロチン酸 オＯｆシ゛ン
（ｉｇ／＊１２）
酵母エキス ０．３％
バチルス・ズブチリス１２２Ｅ株およびバチルス・ズブ
チリス１２２Ｆ株は、バチルス・ズブチリス１２２株よ
り得られた株である。バチルス・ズブチリス５ＴＡ−１
７Ｅ株およびバチルス・ズブチリス５ＴＡ−１フＰ株は
バチルス・ズブチリス５ＴＡ−１７株より得られた株で
ある。
チリス１２２Ｆ株は、バチルス・ズブチリス１２２株よ
り得られた株である。バチルス・ズブチリス５ＴＡ−１
７Ｅ株およびバチルス・ズブチリス５ＴＡ−１フＰ株は
バチルス・ズブチリス５ＴＡ−１７株より得られた株で
ある。
つぎに、これら４株のＡロチン酸フォスフォリボシルト
ランスフェラーセ活性ならびにオロチジン５′−モノフ
オスフエートデカルボキシラーゼ活性を調べたところ［
アグリカルチコラル・アンド・バイオロジカル・ケミス
トリー（ＡｇｒｉｅＲｉｏｔ、 Ｃｈｅｍ、）、５３．
９７（＋９８９）の方法による］表２に示す結果が得ら
れた。
ランスフェラーセ活性ならびにオロチジン５′−モノフ
オスフエートデカルボキシラーゼ活性を調べたところ［
アグリカルチコラル・アンド・バイオロジカル・ケミス
トリー（ＡｇｒｉｅＲｉｏｔ、 Ｃｈｅｍ、）、５３．
９７（＋９８９）の方法による］表２に示す結果が得ら
れた。
表２
菌株名
＊
０ＰＲＴアーゼ ＯＭＰ−ＤＣアーゼ＊（」ニブト／ｊ
１９・ タンハリ） ハ゛チルス・ス゛フ゛ヂリ１ １２２Ｅ
Ｏ，０１以下 ０．３１ビチル訃ス゛フ゛チリス
１２２Ｆ ８．０ ０．
０１以下ハ゛ｆルス・ス゛ノ゛チリス ５ＴＡ−１７Ｅ
Ｏ，０１以下 ６．２八゛チル１−１゛
７’チリス ５ＴＡ−１７Ｆ ９８．３
０．０１以下＊０ＰＲＴアーゼ、オロヂン酸フォ
スフイーリボシルトランスフェラーゼ ＊ＯＭＰ−ＤＣアーゼ、オロチジン５゛−モノフォスフ
ェートデカルボキンラーゼ バチルス・ズブチリス１２２Ｅ株およびバチルス・ズブ
チリス５ＴＡ−１７Ｉε株はオロヂン酸フォスフォリボ
ノルトランスフゴラーゼ欠損株であり、バチルス・ズブ
チリス１２２ Ｐ株およびバチルス・ズブチリス５ＴＡ
−１フＦ株はオロヂンン５モノフォスフェートデカルボ
キシラーゼ欠損株である。
１９・ タンハリ） ハ゛チルス・ス゛フ゛ヂリ１ １２２Ｅ
Ｏ，０１以下 ０．３１ビチル訃ス゛フ゛チリス
１２２Ｆ ８．０ ０．
０１以下ハ゛ｆルス・ス゛ノ゛チリス ５ＴＡ−１７Ｅ
Ｏ，０１以下 ６．２八゛チル１−１゛
７’チリス ５ＴＡ−１７Ｆ ９８．３
０．０１以下＊０ＰＲＴアーゼ、オロヂン酸フォ
スフイーリボシルトランスフェラーゼ ＊ＯＭＰ−ＤＣアーゼ、オロチジン５゛−モノフォスフ
ェートデカルボキンラーゼ バチルス・ズブチリス１２２Ｅ株およびバチルス・ズブ
チリス５ＴＡ−１７Ｉε株はオロヂン酸フォスフォリボ
ノルトランスフゴラーゼ欠損株であり、バチルス・ズブ
チリス１２２ Ｐ株およびバチルス・ズブチリス５ＴＡ
−１フＦ株はオロヂンン５モノフォスフェートデカルボ
キシラーゼ欠損株である。
つぎに、これら４株のウリジン５′−モノフ嗜スフエー
ト生合成にかかわる代謝制御について調べた［アグリ力
ルヂコラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（
Ａｇｒｉｃ、 Ｂ ｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）。
ト生合成にかかわる代謝制御について調べた［アグリ力
ルヂコラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（
Ａｇｒｉｃ、 Ｂ ｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）。
５３．９７（１９８９）の方法による」。まず、初発酵
素カルバミルリン酸合成酵素のウリジン５モノフオスフ
エート（５ｍＭ）による阻害率を調べた。その結果を表
３に示す。
素カルバミルリン酸合成酵素のウリジン５モノフオスフ
エート（５ｍＭ）による阻害率を調べた。その結果を表
３に示す。
表３
ノルを添加した場合の酵素活性の、無添加時に対する相
対値である。
対値である。
菌株名
阻害率（％）
ハ゛チルス・ス゛フ゛チリス
ハ゛チルス・ス゛フ゛チリス
へ′チルス・ス゛７”ｆリス
ハ′チルス・ス゛７゛チリス
１２２Ｅ ９５
１２２Ｆ ９６
ＳＴ＾−１７Ｅ ＜ ｌ
５ＴＡ−１７Ｆ ＜ １
ついで、ウリジン５゛−モノフォスフ、、−ト生合成に
かかわる６つの酵素の培地中へのウラシルの添加による
リプレッションについて調べた。その結果を表４に示す
。表中の値は、培地中にウラ表１．２．３および４から
明らかなごとく、バチルス・ズブチリス５ＴＡ−１７Ｅ
株はオロチン酸フォスフォリボノルトランスフェラーゼ
を欠損し、ウリノン５°−モノフオスフエート生合成に
かかわる代謝制御の解除された株であり、オロチン酸フ
ォスフォリホンルトランスフエラーゼを欠損しているが
、ウリジン５−モノフォスフェート生合成にかかわる代
謝制御の解除されていない株であるバチルス・ズブチリ
ス１２２Ｆ株と比べて表１に見られるようにオロチン酸
の蓄積量が大幅に増大している。一方、バチルス・ズブ
チリス５ＴＡ−１７Ｅ株はオロチジン５°−モノフオス
フエートデカルボキシラーゼを欠損し、ウリジン５′−
モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御の解除さ
れた株であり、オロチジン５°−モノフォスフェートデ
カルボキシラーゼを欠損しているが、ウリジン５゛−モ
ノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御の解除され
ていない株であるバチルス・ズブチリス１２２Ｆ株に比
べて表１に見られるようにオロチン酸およびオロチジン
の蓄積量が大幅に増大している。
かかわる６つの酵素の培地中へのウラシルの添加による
リプレッションについて調べた。その結果を表４に示す
。表中の値は、培地中にウラ表１．２．３および４から
明らかなごとく、バチルス・ズブチリス５ＴＡ−１７Ｅ
株はオロチン酸フォスフォリボノルトランスフェラーゼ
を欠損し、ウリノン５°−モノフオスフエート生合成に
かかわる代謝制御の解除された株であり、オロチン酸フ
ォスフォリホンルトランスフエラーゼを欠損しているが
、ウリジン５−モノフォスフェート生合成にかかわる代
謝制御の解除されていない株であるバチルス・ズブチリ
ス１２２Ｆ株と比べて表１に見られるようにオロチン酸
の蓄積量が大幅に増大している。一方、バチルス・ズブ
チリス５ＴＡ−１７Ｅ株はオロチジン５°−モノフオス
フエートデカルボキシラーゼを欠損し、ウリジン５′−
モノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御の解除さ
れた株であり、オロチジン５°−モノフォスフェートデ
カルボキシラーゼを欠損しているが、ウリジン５゛−モ
ノフォスフェート生合成にかかわる代謝制御の解除され
ていない株であるバチルス・ズブチリス１２２Ｆ株に比
べて表１に見られるようにオロチン酸およびオロチジン
の蓄積量が大幅に増大している。
つぎに、オロチン酸および／またはオロチジン生産菌の
要求物質であるところのウラノル等のピリミジン系化合
物あるいは、それを含む物質の培地中の濃度のオロチン
酸および／またはオロチジン蓄積に対する影響について
調べた。先に得られた４株のオロチン酸および／または
オロチジン生産菌を前記した方法で培養した。この際、
培地中にウラノルをさまざまな濃度で添加した。結果を
表５に示す。
要求物質であるところのウラノル等のピリミジン系化合
物あるいは、それを含む物質の培地中の濃度のオロチン
酸および／またはオロチジン蓄積に対する影響について
調べた。先に得られた４株のオロチン酸および／または
オロチジン生産菌を前記した方法で培養した。この際、
培地中にウラノルをさまざまな濃度で添加した。結果を
表５に示す。
表５にあるようにオロヂン酸フオスフオリボノルトラン
スフェラーゼを欠損（７、ウリジン５゛モノフォスフェ
−１・生合成にかかわる代謝制御の解除された株である
バチルス・ズブチリス５ＴＡ１７Ｅ株は菌株の要求する
量を満たせば、いかなる量のウラシルを添加しても著量
のオロチン酸を蓄積する。一方、オロヂン酸フオスフオ
リポシルトランスフェラーゼを欠損しているが、ウリノ
ン５゛−モノフオスフエート生合成にかかわる代謝制御
の解除されていない株であるバチルス・ズブチリス１２
２Ｅ株は、オロチン酸の生産に適したウラシルの添加濃
度は５０ｔｔｇ／ｍＱ付近に限定されており、それ以上
添加すると、オロチン酸の生産は強く抑制される。また
、オロチジン５モノフオスフエートデカルボキシラーゼ
を欠損しウリジン５゛−モノフォスフェート生合成にか
かわる代謝制御の解除されたバチルス・ズブチリスＳ
Ｔ Ａ −１７Ｆ株は、菌株の要求する量を満たせば、
いかなる量のウラシルを添加しても著量のオロチン酸お
よびオロチジンが蓄積される。しかしながら、オ［１チ
ノン５°−モノフォスフエートデカルボギノラーゼを欠
損しているが、ウリジン５゛−モノフオスフエ−１・生
合成にかかわる代謝制御の解除さねていない株であるバ
チルス・ズブチリス１２２Ｆ株では、オ［ｌチン酸およ
びオ「１チジンの生産に適したウラシルの添加濃度は５
０μ９／ｍ（ｌ付近に限定されており、それ以上添加す
ると、オロチン酸およびオロチジンの生産は強く抑制さ
れる。
スフェラーゼを欠損（７、ウリジン５゛モノフォスフェ
−１・生合成にかかわる代謝制御の解除された株である
バチルス・ズブチリス５ＴＡ１７Ｅ株は菌株の要求する
量を満たせば、いかなる量のウラシルを添加しても著量
のオロチン酸を蓄積する。一方、オロヂン酸フオスフオ
リポシルトランスフェラーゼを欠損しているが、ウリノ
ン５゛−モノフオスフエート生合成にかかわる代謝制御
の解除されていない株であるバチルス・ズブチリス１２
２Ｅ株は、オロチン酸の生産に適したウラシルの添加濃
度は５０ｔｔｇ／ｍＱ付近に限定されており、それ以上
添加すると、オロチン酸の生産は強く抑制される。また
、オロチジン５モノフオスフエートデカルボキシラーゼ
を欠損しウリジン５゛−モノフォスフェート生合成にか
かわる代謝制御の解除されたバチルス・ズブチリスＳ
Ｔ Ａ −１７Ｆ株は、菌株の要求する量を満たせば、
いかなる量のウラシルを添加しても著量のオロチン酸お
よびオロチジンが蓄積される。しかしながら、オ［１チ
ノン５°−モノフォスフエートデカルボギノラーゼを欠
損しているが、ウリジン５゛−モノフオスフエ−１・生
合成にかかわる代謝制御の解除さねていない株であるバ
チルス・ズブチリス１２２Ｆ株では、オ［ｌチン酸およ
びオ「１チジンの生産に適したウラシルの添加濃度は５
０μ９／ｍ（ｌ付近に限定されており、それ以上添加す
ると、オロチン酸およびオロチジンの生産は強く抑制さ
れる。
灸団ｐ涜米
本発明方法によりオロチン酸および／または１０手ジン
を高い収率で、しかも、菌株の要求物質であるウラシル
等のピリミジン系化合物およびそれを含有する物質の培
地への添加量を制限する必要がなく製造することができ
る。
を高い収率で、しかも、菌株の要求物質であるウラシル
等のピリミジン系化合物およびそれを含有する物質の培
地への添加量を制限する必要がなく製造することができ
る。
特許出願人武田薬品工業株式会社
Claims (4)
- （１）バチルス属に属し、ウリジン５′−モノフォスフ
ェート生合成にかかわる代謝制御が解除され、かつ、オ
ロチン酸フォスフォリボシルトランスフェラーゼを欠損
する微生物を培養し、培養物中にオロチン酸を生成蓄積
させ、これを採取することを特徴とするオロチン酸の製
造法。 - （２）バチルス属に属し、ウリジン５′−モノフォスフ
ェート生合成にかかわる代謝制御が解除され、かつ、オ
ロチジン５′−モノフォスフェートデカルボキシラーゼ
を欠損する微生物を培養し、培養物中にオロチン酸およ
びオロチジンを生成蓄積させ、これを採取することを特
徴とするオロチン酸およびオロチジンの製造法。 - （３）ウリジン５′−モノフォスフェート生合成にかか
わる代謝制御が解除され、かつ、オロチン酸フォスフォ
リボシルトランスフェラーゼを欠損するバチルス・ズブ
チリス。 - （４）ウリジン５′−モノフォスフェート生合成にかか
わる代謝制御が解除され、かつ、オロチジン５′−モノ
フォスフェートデカルボキシラーゼを欠損するバチルス
・ズブチリス。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2106720A JP2927882B2 (ja) | 1990-04-23 | 1990-04-23 | 醗酵法によるオロチン酸および／またはオロチジンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2106720A JP2927882B2 (ja) | 1990-04-23 | 1990-04-23 | 醗酵法によるオロチン酸および／またはオロチジンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH044891A true JPH044891A (ja) | 1992-01-09 |
| JP2927882B2 JP2927882B2 (ja) | 1999-07-28 |
Family
ID=14440792
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2106720A Expired - Fee Related JP2927882B2 (ja) | 1990-04-23 | 1990-04-23 | 醗酵法によるオロチン酸および／またはオロチジンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2927882B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06254369A (ja) * | 1993-03-09 | 1994-09-13 | Noritake Co Ltd | 混合分散用充填材 |
| JP2017112847A (ja) * | 2015-12-21 | 2017-06-29 | 花王株式会社 | プロテアーゼの製造方法 |
| JP2018093742A (ja) * | 2016-12-08 | 2018-06-21 | 株式会社古川リサーチオフィス | オロット酸カリウム塩含有組成物及びその製造方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3622957A4 (en) | 2017-05-12 | 2021-01-27 | Furukawa Research Office Co., Ltd. | IMPROVING THE DEGREE OF ARTERIAL SATURATION WITH OXYGEN |
-
1990
- 1990-04-23 JP JP2106720A patent/JP2927882B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06254369A (ja) * | 1993-03-09 | 1994-09-13 | Noritake Co Ltd | 混合分散用充填材 |
| JP2017112847A (ja) * | 2015-12-21 | 2017-06-29 | 花王株式会社 | プロテアーゼの製造方法 |
| JP2018093742A (ja) * | 2016-12-08 | 2018-06-21 | 株式会社古川リサーチオフィス | オロット酸カリウム塩含有組成物及びその製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2927882B2 (ja) | 1999-07-28 |
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