JPH04504849A - ウイルス感染に対する処置方法およびそのための組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ウィルス感染に対する処置方法およびそのための組成物 発明の背景 この出願は、米国特許出願一連番号第３２４゜１７７号（１９８９年３月１６日 出願）の一部継続出願である米国特許出願一連番号４１７，１６３号（１９８９ 年１０月４日）とともに係続中の一部継続出願である。

この発明は、抗ウイルス性化合物、組成および薬剤学的処方に関するもので、ま たこの薬剤学的処方は哺乳類動物におけるウィルス感染を治療もしくは予防する ための抗ウイルス性化合物の有効量を与えるものである。

ウィルスの能力は複製のために細胞内へ侵入してその細胞の生化学的機構を麻痺 させることであるが、このウィルスの能力は複製を選択的に阻害するための強力 な手段や方法によって制限される。

しかし、非感染細胞にとって毒性のない抗ウィルス剤はほとんど知られていない 。さらに、はとんどの抗ウィルス剤は、その効果が限定されている。

例えば、レトロウィルスはＤＮＡウィルスや他のＲＮＡウィルスと複製様式が異 なることから、抗ウィルス剤の標的とならないで、除外されてしまう。そのため 、レトロウィルスが細胞ゲノムに組み込まれてしまい、さらに細胞内酵素によっ て複製がなされてしまう。このことは宿主細胞からウィルスを除去する上での大 きな問題である。選択的抗レトロウイルス活性（すなわち、相対的に細胞毒性が ない）を有する化合物はほんのわずかしか、知られていない。アジドチミジンと して一般的には知られているヌクレオシド類似体３”−アジド−３′−ジオキシ チミジン（以下、ＡＺＴと略す）と、他のヌクレオシド類似体（例えばシトシン のジブオキシチジン類似体）とはウィルス性感染細胞に対して選択的に作用し、 宿主細胞の機る以上に効率よくレトロウィルスの機能（例えば１、逆転写酵素活 性）を阻害することができる。

そのようなヌクレオシド類似体の使用は、長期にわたる計画的投与の際に、適応 範囲の狭さと副作用とによって限界が生ずる。さらに、このようなヌクレオシド 類似体の長期にわたる使用は、これらの薬剤に対する抵抗性変異株を生じさせる 。

ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩ　Ｖ）はレトロウィルスに属するものであり、現在 、米国および世界中のいたるところに、その感染が広がっている。

このＨＩＶは、獲得免疫不全症候群（Ａ　Ｉ　ＤＳ）を引き起こす病原体であり 、２つの異なる血清型が知られており、それぞれＨＩ　Ｖ−１およびＨＩＶ−２ と同定されている。現在のところ、米国だけでも約１５０万人がＨＩＶに感染し ているものと思われる。そして、感染された人の多くは、やがてＡＩＤＳ症状が 現われ、危険な状態に陥る。

ＨＩＶに対する薬物として、現在のところ用いられているものはＡＺＴである。

しかしながら、ＡＺＴは毒性があり、また効果が限定されていることから、新し い抗ウィルス剤（少なくとも、毒性が低く、ＡＺＴと併用できるもの）がめられ ている。

さらに、ＡＺＴは毒性が高いため、ＡＩＤＳ症状を抑えるのには不適当であり、 新たな症状緩和剤がめられている。　さらに、最近になってＨＩＶのなかでＡＺ Ｔ抵抗抵抗性比現していることが報告された。

米国特許出願一連番号第０８２．７００号は、二つのアロマテイックボリサイク リックジオシ化合物の抗ウイルス性効果について開示している。これらの化合物 は、ヒペリシン（ＨＹ）とシェードヒベリシン（Ｐｓ）である。

米国特許出願一連番号第０８４，００８号（Ｄ、ラヴイ−（Ｄ、Ｌｉｖｉｅ）ら 、１９８７年８月１０日出願、第８２，７００号の分割出願）は、効果的な抗レ トロウィルス剤としてＨｙおよびＰｓの用途について開示している。

米国特許出願一連番号第１７２，０６４号（Ｄ、メル工ロ（Ｄ、Ｍｅｒｕｅｌｏ ）ら、１９８８年３月２３日出願）は、ＡＺＴのようなヌクレオシド類似体と組 ロウイルス性化合物と、レトロウィルス性感染に対する処置方法とについて開示 している。

さらに米国特許出願一連番号２９９，９７１号（ダニエルメルエロとガッドラヴ イ（Ｄａｎｉｅｌ　Ｍｅｒｕｅｌｏ　＆Ｇａｄ　Ｌａｖｉｅ）による、１９８９ 年１月１９日出願）は発明の名称が血液精製装置で、血液、その他の体液、およ びより一般的にいえば生物学的液体中に含まれるレトロウィルスとウィルスの不 活性化のための組成物と方法とを開示している。

その組成物には、ヒペリシン、シニードヒペリシン、およびアロマティックポリ サイクリックジオンの異性体、類似体、同族体、および誘導体と、それらの化合 物の混合したものからなる。そして、これらの化合物は本発明においても利用し た。

本発明は、生体内（インヴイボ系）において治療用または予防用の抗ウィルスお よび抗レトロウィルス剤として直接用いられる、ヒペリシンと構造的に類似した 化合物に関するものである。

よって、本発明の目的は、ウィルス感染の治療または予防に効果を示す新規な治 療薬を提供することである。

（以下、ウィルス及びウィルス性という言葉の意味には、レトロウィルスおよび レトロウィルス性という意味も含まれる。） 本発明の第二の目的は、ウィルス、特にＨＩＶに感染した哺乳類動物を処置する ための方法を提供することである。

さらに、本発明の第三の目的は、ウィルス性の感染を受けた患者を処置するため の薬剤学的処方を提供することである。

これらの、およびこれら以外の本発明の目的は、本明細書の記載のみならず特許 請求の範囲から当業者が容易に理解することができよう。

発明の要約 本発明は、哺乳類動物におけるウィルス感染を処置または予防するのに効果的な ある化合物を発見した。さらに、本発明は生体内での治療または予防的用途に最 適な新規な化合物を有するものである（そのような化合物を含む）。それらの化 合物はヒペリシンと関連するもので、前記した化合物およびそれらの混合物の同 族体、異性体、類似体、誘導体、塩と同様に、アンスラセン（ａｎｔｈｒａｃｅ ｎｅｓ）　、アンスラキノン（ａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓ　）およびアンス ロン（ａｎｔｈｒｏｎｅｓ）の単量体または二量体を含むものである（以下、こ れらの化合物を「抗ウィルス性アンスラキノン−またはアンスラセン−またアン スロン−化合物」と称し、またｒＡＡＢＪ　と省略する）。さらに、色々なアロ マティックポリサイクリックジオン化合物と同様にそのような化合物の同族体、 異性体、誘導体、塩おおび類似体、さらにはそれらの化合物の混合物も本発明の 目的に含まれるものである。

以下、ｒＡＡＢＪ化合物以外の本発明にもとづくすべての化合物は、「抗ウイル ス性ポリサイクリック化合物」またはｒＰＡＣＪ　と呼ぶことにする。本明細書 において「ポリサイクリック」とは少なくとも３つの環を有するものを指す。

本発明の第一の実施態様は、哺乳類動物に対するウィルス感染を予防または治療 するための方法であって、ＰＡＣ化合物とそれらの混合物から選択された化合物 を投与することからなり、ＰＡＣ化合物また混合物は単独の抗ウイルス活性成分 として、または他の抗ウイルス製剤と組み合わされて（またはＰＡＣ化合物およ び（または）他の抗ウイルス製剤の安定剤および（または）促進剤と組み合わさ れて）用いられるものである。

本発明の他の実施態様は、哺乳類動物に対するウィルス感染を予防また治療する ための薬剤学的組成物および処方に関するものであり、その組成物および処方は ＰＡＣ化合物およびその混合物および薬剤学的に許容な担体また希釈体からなる 群、から選択される抗ウイルス製剤の有効量からな、るものである。

発明の詳細な説明 本明細書において参照したすべての特許、特許出願および文献は引用文において 完全に記載した。

しかし、本文中において用語を定義するために意味を付したものについてはその 意味が優勢する（参照した特許出願の定義と矛盾する場合）。

本発明者は、ウィルス感染に対する治療（また予防）に対して有効なＰＡＣ化合 物を発見した。

ＡＡＢ化合物と多くのＰＡＣ化合物の構造は以下の一般式（Ｉ）によって表わさ れる。

（Ｉ） 式中、ｎは１または２である；Ａ、Ｂ、Ｃ，Ｄ。

Ｅ、Ｇ、Ｈ，Ｉ、１は　それぞれ水素、ヒドロキシ、低級アルキル（Ｃ，−Ｃ４ ）、アリル、アリルアルキル、アリルアミ八低級アルケン、アルコキシ、ヒドロ キシアルキル、ハロゲン、カルボキシ、アシル（アロマティックまたはアリファ テイック）、アミノ、アシルオキシ、アルコキシカルボヒル、アリルオキシカル ボニル（それぞれのものは置換、または未置換される）、そして二量体形成結合 からなる群から選択されるものである；ＢとＧは（ａ）酸素が付加される炭素環 にケト基を形成する酸素；　（ｂ）　２つの水素原子；（Ｃ）一つの水素原子と 一つのベルオロキシ基；（ｄ）アリル；（ｅ）シアノアルケニル：（ｈ）アリル アルケニル；（ｉ）低級アルキル；（ｊ）アルケニル；（ｋ）アシル；それぞれ のものは置換または未置換される；そして（１）二量体または単量体形成結合か らなる群から選択されるものである；ＡとＢ、ＢとＣ，ＡとＪ、　Ｃとり、Ｄと ８％　ＥとＦ、ＦとＧ％ＧとＨ，Ｈと工、■とＪの組み合わせのうち一つまたそ れ以上は、５ないし７個の炭素原子を有するアロマティック、アリサイクリック またへテロサイクリック環を形成するために結合しており、前記環は付加的にさ らに置換される；前記式において三つの環は飽和可能なＡ、Ｂ、Ｃ，Ｈ，Ｇ、Ｆ に隣接した環炭素原子の一つまたはそれ以上を形成する特定の結合を除くアロマ ティックである；ｎ＝２のとき、少なくともＨ，Ｇ、Ｆのうちの一つ、または少 なくともＡ、Ｂ、Ｃの一つは結合および（ｉ）　ＤとＥ（百）ＪとＩのどちらか あるいは両方が付加的に炭素原子に隣接した５ないし７個の原子を有するアロマ ティックまたはアリサイクリックまたはへテロサイクリック環を形成する。

前記式に包含されるいくつかの化合物は、アンスラセン、アンスラキノンまたは アンスロンの置換または未置換の単量体または二量体であると思われる。

例えば、ヒペリシンおよび置換ヒペリシン（例えばヒペリシンヘキサアセテート ） はすべての中間環が結合した（すなわち、ＨとＦとは単、二量体形成、結合おお び同時にＧは二重、二量体形成、結合）であるアンスラキノン（および置換アン スラキノン）の二量体と思われる。化合物ＸＩ、ＸＩＶ、　ＸＶ、　ＸＶＩＩと 同様に実施例２の化合物７−１０（’シリーズＣ）を見よ。

例えば、実施例２の化合物ＸＸはブロックマンの論文（Ｂｒｏｃｋｗａｎｎ；　 Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、　Ｉｎｆｒａ、）に記載されており 、１，３．８トリヒドロキ°シー６−ヒドロキシエチル−９−アンスロンの二量 体である。この化合物においてＨ，Ｇ、Ｆは全て結合している。

化合物ＸＸＩＩは１，３．８　トリヒドロキシ−６−メチル−９−アンスロンの 二量体である。この化合物においてＥは第二のアンスロン単量体の該当する側鎖 と別の環を形成する。

ＰＡＣ化合物の定義のなかに、式（Ｉ）の化合物の異性体、同族体、類似体、誘 導体および塩も含まれる。

「同族体」とは、式１（または他のＰＡＣ化合物）の化合物とは異なる構造式を 有する化合物であって、その異なる部位は一つまたはそれ以上の炭素原子と、一 つまたはそれ以上の水素原子または一対の水素原子とである（非限定的な例とし て、下記実施例２の化合物ＸＶとＸＶＩの場合を参照、また下記実施例２の米国 特許第２，７０７，７９４号（ブロックマンらによる。１９５５年５月３日発行 ）にもとづいて合成された化合物の表にある３対の化合物と、それらの一つまた はそれ以上のＲ基がＣＱ−Ｃ４アルキル基と置換される同族体を参照、　および 下記実施例２（シリーズＣ）のプロトヒペリシンの構造とヒペリシンの構造とを 比較参照）。

「異性体」とは、式Ｉ（または他のＰＡＣ化合物）の化合物と同様の分子式を有 する化合物であって、限定されることなく、構造的異性体、鏡像異性体、位置異 性体、光学異性体、および立体異性体（例えば、シスとトランス、十と−、ｄと １）がある（非限定的な例として、下記実施例２におけるサンタら（Ｓａｎｋｓ 　ｅｔａｌ、　１ｎｆｒａ）の化合物１７とその異性体で、例えば中央の水素原 子が紙面の上下両方向に位置している場合と、の下記実施例２におｚ５であって 、この化合物はいくつかの非対照的な炭素原子と複数の光学異性体とを有する場 合とがある）。

「類似体」とは、ＨｙおよびＰｇ　（例えば、ワイスら（Ｗｅｉｓｓ、　Ｕ、　 ｅｔ　ａｌ、　１ｎｆｒａ）に挙げられた化合物と、実施例１の化合物１−３６ から選択される化合物）と同様の活性を有する多環式芳香族化合物を含むもので ある。

「誘導体」とは、式１（または他のＰＡＣ化合物）の化合物とかなり構造的に類 似した化合物であって、一つまたはそれ以上の位置に一つまたはそれ以上の置換 基を有するものである（例えば、実施例におけるバンクスらの化合物７および化 合物９、下記実施例２（シリーズＡ）におけるブロックマク酸誘導体およびそれ に開示された他の化合物であってヒドロキシル化、エステル化、アルキル基置換 化、および他の置換誘導体を参照のこと）。

本発明において使用された化合物の非限定的なリストは、下記の実施例１および 実施例 ２に記載されている。

水溶性溶媒に溶解可能（上記化合物の塩）で、かつ生理学的に許容される塩（上 記化合物の塩）が特に好ましい。

「塩」とは、複合塩（ｃｏｍｐｌｅｘ　５ａｌｔ）　（例えば、実施例２のおい てワイスら（Ｗｅｉａｓ、　Ｕ、　ｅｔ　ａｌ。

１ｎｆｒａ）に挙げられた化合物）と、イオン性塩（ｉｏｎｉｃ　５ａｌｔ）で ある。

ＡＡＢ二量体化合物は下記の合成スキームのどれか一つを用いることによって合 成することが可能（スキームエ） エモジン　（２） （スキームＩＩ） ＪゴＬＲ−−ＣＢａ 圧入Ｒ・＋■ ↓　脱保護化 このスキームは原料となる物質がアンスラセン（ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ　）また はアンスロン（ａｎｔｈｒｏｎｅ）である場合にも適用可能である。

スキームエの保護化（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ）　／脱保護化（ｄｅｐｒｏｔｅｃ ｔｉｎｇ）段階は原料となる物質と目的とする産物とによって適用可能となる場 合と、適用不可となる場合とがある（例えば、もし原料となる物質がブロックマ ンら（Ｂｒｏｃｋｍａｎｎ、　ｅｔ　ａｔ、　１ｎｆｒａ　）の化合物１のよう な完全にアルコキシル化したエモジン誘導体（ａｌｋｏｘｙｌａｔｅｄ　ｅｍｏ ｄｉｎｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）であり、また目的産物が同参照文献の化合物７で ある場合、保護（ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）は必要とされない）。各部位における 反応性にもとづいて原料であるトリサイクリック（または他の）物質の二量体の 置換および二量体構造そのものの修飾が既知の方法によって可能である。

第３の一般的な反応スキームは以下の通りである。

（以下、余白） （スキームｌ１ｌ） 反応初期に用いられるモノマーは既知の方法によって合成するか、市販のものを 購入することが可能である。例えば、アンスロンは文献（Ｏｒｇ。

Ｓｙｎ、　Ｃｏ１１．１：　６０．１９４１）にもとづいて合成可能であり、ま たアルドリッヒケミカル社（カタログＮｏ、Ａ９，１２Ｇ−５）から入手可能で ある。アンスロンアンスラセンはフラールの文献（Ｅ、　Ｃ１ａｒ。

Ｃｈｅｗ、　Ｂｅｒ、　７２：　１６４５．１９５７およびＰｏ１ｙｃｙｃｌｉ ｃＤｉｏｎｅｓ、　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎ、Ｙ、　１９６４）に もとづいて合成可能であり、またアルドリッヒケミカル社（カタログＮｏ、Ａ８ ，９２２−（ｊ）から入手可能である。

アンスラセンジオン（例えば、アンスラセンジオン）はフリーデル−クラフッ反 応経由でＡｌＣｌ、中のフタレン酸およびベンゼンから合成することが可さらに 、ＰＡＣ化合物はレトロウィルスに対する処置の際に、ＡＺＴのようなヌクレオ シド類似体と組み合わせて適用（治療または予防用の薬剤として）することが可 能である。すなわち、一つまたはそれ以上のＰＡＣ化合物　を一つまたはそれ以 上のＡＺＴまたは他のヌクレオシド類似体と組み合わせて（ｉｎ　ｃｏｎｊｕｎ ｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ）投与することが可能である。「組み合わせて（ｉｎ　ｃ ｏｎｊｕｎｃｔｉｏｎｗｉｔｈ）　Ｊ　という言葉は異なる試料（それぞれの試 料は、ある型の活性成分、またはヌクレオシドあるいはＰＡＣ化合物を含む）を 同時投与（ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎまたはｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｎ ｅｏｕｓａｄ＋ｎ１ｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　）を意味するものである。

この同時投与方式は、つぎのような利点がある。

すなわち、その利点として治療または予防効果が相乗的であること、副作用が減 少されることが挙げられる。好適な同時投与に用いられる薬剤としてはＡＺＴお よびヒペリシンも含まれる。

現在、ＡＺＴはエイズまたはＡＲＣ（エイズ関連症候群、エイズシンドローム） の患者の治療に用いられている。ＡＺＴは、ある患者におけるＨＩＶ誘発神経マ ヒや、他のエイズ関連の臨床的異常や、免疫機能を少なくとも部分的に、改善す る効果を示している。しかしながら、　ＡＺＴの投与によって濃度依存性骨髄機 能抑制にもとづく貧血症および白血病が引き起こされる場合がある。そのため、 ＡＺＴによるエイズ治療には限界がある。ＡＺＴと、ＡＡＢおよび他のＰＡＣ化 合物との組み合わせによる投与は、付加的治療または予防効果を示すので、本発 明の化合物とＡＺＴとを組み合わせて用いることにより、抗ウイルス治療のＡＺ Ｔ有効量を単独投与の場合よりも低くすることが可能となる。これによって、心 配される副作用の発現を抑えることが可能となろう。

本発明の化合物とＡＺＴとの同時投与による効果は下記の実施例１に示した。実 施例１に示されるように、ＰＡＣ化合物はＡＺＴの効果発現を抑えなかった。

したがって、本発明はＰＡＣ化合物の有効量に関するものであり、すなわちその 有効量とはＰＡＣ化合物とＡＺＴまたは他のヌクレオシド類似体とを組み合わせ て、ウィルス（特にレトロウィルス）感染に対する治療の際に用いるあたっての ＰＡＣ化合物の有効量である。本発明において用いられるヌクレオシド類似体の 非限定的な例としては、２°、３゛−ジデオキシシチジン、２’、３’−ジデオ キシアデノシン、２°、３゛−ジデオキシチミジンおよび好ましくはアジドチミ ジン（ＡＺＴ、ブラッフウエルカムリサーチトライアングルパーク（Ｂｕｒｒｏ ｕｇｈｓＷｅｌｃｏ＋＊ｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｔｒｉａｎｇｌｅ　Ｐａｒｋ、 　ＮＣ）より入手可能）である。２’、３’−ジデオキシシチジン、２′、３′ −ジデオキシアデノシンはカルバイオケムーベーリング（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ −Ｂｅｈｒｉｎｇ　）Ｓａｎ　Ｄｉｅｇｏ、　ＣＡ））から商業的に入手可能で ある。　２’、３°−ジデオキシチミジンはファーマシアファインケミカルズ（ Ｐｈａｒｍａｃｉａ　Ｆｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ　（Ｐｉａｃａｔａｗａｙ 、　ＮＪ）　）から入手可能である。

本発明のＰＡＣ化合物は単独で使用の場合でも、ウィルスに対して幅広い効果を 示すものであり、特にエンベロープ化ウィルスに対して効果を示す。

エンベロープ化ウィルスはここでは脂質含有膜を有するウィルス（ＲＮＡウィル スおよびＤＮＡウィルスの両方を指す）を意味するものである。この脂質は宿主 細胞由来であり、一方膜タンパク質および糖タンパク質はウィルスのゲノム上の 遺伝子発現にもとづいて合成されたものである０本発明にもとづく化合物によっ て阻害されるエンベロープ化ウィルスの非限定的な例としては、サイトメガロウ ィルス、ヘルペスシンプレックスウィルス（Ｈ３Ｖ）、ワクシニアウィルス、イ ンフルエンザウィルス、ヴエシクラーストマチチスウイルス（ＶＳＶ）、ヘパチ チスＢウィルス、およびレトロウィルスが挙げられる。

レトロウィルスはＲＮＡゲノムおよびＲＮＡ依存ＤＮＡポリメラーゼ（逆転写酵 素）酵素的活性を特徴とするものである。すべてのレトロウィスは共通の形態学 的、生化学的、生理学的特性を有し、そのことから一つのウィルス属に包含され る。これらの特性は第１表（ワイス（Ｗｅｉｓｓ、　Ｒ，）ら編集：ｒＲＮ＾腫 瘍ウィルス」　（コールドスプリングハーバ−出版、ニューヨーク、１９８４年 ）の第２８頁からもっとも好ましいＡＡＢ化合物はヒペリシン、シュート°ヒペ リシン、ヒペリシンヘキサアセテート、およびプロトヒベリシンであり、特にヒ ペリシンがもっとも活性が高い。予防的に投与する場合は、ＡＡＢ化合物のうち 、ＡＺＴと比較してもっとも毒性の低いものが好ましく、ヒペリシン、シュート °ヒベリシンおよびプロトヒベリシンが好ましい。一般に、ある化合物が治療イ ンデックス（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｅ　１ｎｄｅｘ）が５以上の場合、その化合 物は毒性が低いといえる。ここで、治療インデックスとは有効濃度と顕著な毒性 を引く起こす濃度との関係を示すものであり、数値が５の場合は有効濃度が顕著 な毒性を引く起こす濃度よりも５倍低い濃度範囲であることを示す。

（以下、余白） 第１表 公知のレトロウィルスの一般的な物理的特性核酸　同一のサブユニット（３０ｓ 　−３５ｓ）からなる線状（＋）−重鎖ＲＮＡ　（６０ｓ　−７０ｓ）　；　５ 　’構造（ｍ’Ｇ’ｐｐｐ’ＮｍｐＮｐ）　；ポリアデニル化３′　末端；３′ 　及び５′末端に反復配列； ゲノム複合体に塩基対合されたｔＲＮＡ　；蛋白質　６，０重量％以上：　ｇａ ｇ　ｓ　内部構造蛋白質：ｐｏＬ逆転写酵素：　ｅｎｖ、エンベロープ蛋白質 脂質　約３５重量％；細胞膜から抽出 炭水化物　約４重量％：　エンベロープ蛋白質に結合物理化学的特性　ショ糖に おける密度１．１６−１．１８ｇ／ｍｌ、塩化セシウムにおける密度 １．１６−１．２１　ｇ／ｍｌ、脂肪溶剤及び洗浄剤に対する感受性を有す；熱 による不活性化（５６’Ｃ１３０分）；紫外線およびＸ線に対する高抵抗性 形態学的特性　エンベロープに囲まれている球状のウィルス粒子（直径８０８０ −１２０ｎ：種々の表面突起（直径８ｎｍ）：コア殻（核様体）を伴うリボ核蛋 白複合体を含む二十面体のさらに、ＨＩＶのゲノムは他のレトロウィルスに通常 認められるタンパク質以外に少なくとも５つのタンパク質をコードしている。こ れらの付加的なタンパク質に関する遺伝子は、ＴＡＴ、　ＡＲＴ／ＴＲ３，３’ −０ＲＦ、　ＳＯＲおよびＲと表わされる。また、ＨＴＬＶ　ＩはｐＸ遺伝子と いう付加的な遺伝子を有しており、この遺伝子は４つのタンパク質をコードして いると考えられる（参照文献：　Ｙａｒｃｈｏａｎ、　Ｒ。

１９８５　）。

すべてのレトロウィルスは、類似する化学的組成を有している。一般に、これら は約６０−７０％のタンパク質、３０−４０％の脂質、２−４％の炭水化物、お よび約１％のＲＮＡを含む、レトロウィルスはエンベロープ化されており、この エンベロープは細胞表層膜由来であり、すべてではないが、はとんどの場合、レ トロウィルス粒子の脂質はウィルスの単一膜エンベロープに局在している。レト ロウィルスの非限定的な例としては、フレンド白血病ウィルス（ＦＶ）、放射線 白血病ウィルス（ＲａｄＬＶ）、牛白血病ウィルス、ネコ白血病ウィルス、鳥骨 髄芽球症ウィルス、およびヒトＴ細胞すンパ栄養つィルス属（ｈｕｍａｎ　Ｔ− ｃｅｌｌ　ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐｉｃ　ｖｉｒｕｓｆａ＋ａｉｌｉｙ）　（ＨＴ ＬＶ　Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、および■ｖ；ＨＴＬＶ　ＩＩＩ　はヒト免疫不全ウィ ルスまたはＨＩＶとしても知られており、血清学的にざらにＨＩＶ−１およびＨ Ｉ　Ｖ−２とに分類される）が挙げられる、　ＨＴＬＶ　Ｉは、成人Ｔ−細胞白 血病とある種の神経学的疾患とを引き起こすものとして考えられており、またＨ ＴＬＶ　ＩＶはサル免疫不全ウィルスに関係しており、エイズに罹患したアフリ カ原住民において発見されており、このウィルスとＨＴＬＶ　ＩＩＩ　との関連 性は現在研究中である。

本発明は、ウィルス（またはレトロウィルス）に感染された哺乳動物を処置する ための方法を提供するもので複数のＰＡＣ化合物とそれらの混合物とからなる群 から選択される化合物をウィルス（またはレトロウィルス）に感染された哺乳動 物を治療または感染および発病予防のための処置を施すためにその哺乳動物に投 与する方法からなるものである。

与えられたウィルスに対する阻害的な効果はＰＡＣ化合物の単独投与もしくは複 数の化合物を組み合わせて投与することによって達成可能である。

一般に、標的となるウィルスに対して顕著な阻害効果を与えるために必要な投与 量は最小限にとどめなければならない、ここで、「顕著な阻害」とは、対象とな るウィルスによって異なる。例えば、フレンド白血病ウィルスによって誘発され る肺臓腫瘍の場合は少なくとも１５％である（ここで、このパーセント表示は実 施例２において与えられる式によってめられたものである）。ＨＩＶの顕著な阻 害はフリーのウィルス試料の感染力における少なくとも一つの対数的減少（ｌｏ （ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）として表わされる。また、一つ、二つ、あるいはそれ以 上の化合物を一緒に適用することも可能である。さらに、ＰＡＣ化合物または混 合物は本発明の単独活性成分を構成する。また、ウィルス複製阻害および（また は）ウィルス感染力を減少または除去するために他の抗ウィルス剤および（また は）他の成分と組み合わされて構成される場合もある。

本発明にもとづくウィルス感染哺乳動物の処置を行なう場合、感染に関与する特 定のウィルスまたはレトロウィルスを処理するためにもっとも効果的な化合物ま たは混合物は適当な実験モデルを用いた日常的な実験によって決定することがで きよう、そのような実験例としては、実施例５のＨＩＶに関する試験管内の試験 または実験動物を用いた実施例１のフレンド白血病ウィルスに関する実験がある 。

下記した処方のヒペリシンをエイズ、ヴイレミア（Ｖｉｒｅｍｉａ）　（すなわ ち、血流中に存在するウィルス）またはセプシス（ｓｅｐｓｉｓ）　（体液中に おけるウィルス汚染）に対する生体内適用する場合、ＰＡＣ化合物は経口投与、 局所投与、または好ましくは非経口経由で、そしてもっとも好ましくは静脈経由 で投与するのが望ましい。

ヒペリン含有抗つィルス組成物を唯一の活性成分として用いる場合の濃度は、− 回の処置（ｔｒｅａｔ＋ａｅｎｔ）あたり約０．００２ないし１０．０００μｇ 　／　ｋ　ｇ体重であり、好ましくは約２ｕｇ１ｋｇ体Ｍ／処置から約５Ｘ１０ ’　ｕ　ｇ　／　ｋｇ体重／処置までの濃度範囲が好ましい。

一つまたはそれ以上のＰＡＣ化合物を活性成分として用いる場合、濃度範囲はヒ ペリシンの場合と同じである。しかし、与えられるＰＡＣ化合物が、例えばヒペ リシンの二倍の活性がある場合は、最少有効量はヒペリシンの１／２となる。さ らに、本発明にもとづく治療または予防においてひとつの活性（抗ウィルス）成 分（すなわち、少なくともひとつの非ＰＡＣ抗ウィルス剤が適用される）が用い られる場合、ＰＡＣ化合物の最少量は必要に応じて減少される。複数の活性成分 を用いる場合、ＰＡＣ化合物と他の抗ウイルス成分またはただの成分との間にお いて相乗効果が生ずる（あるいは、ＰＡＣ化合化合心間いて）。たとえ、活性成 分がひとつだけでもその相乗効果は引き起こされ、最少有効量はさらに低くなる 。ＰＡＣ化合物とともに安定剤または増強剤（ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｎ（ａｇｅ ｎｔ）を投与することによって類似の最少有効量低下を得ることが可能である。

抗ウイルス性活性ヌクレオシド類似体とともに組み合わされたＰＡＣ化合物の投 与に関しての治療または予防用処方について検討する（ここで、「組み合わされ た」とは、同時投与または分離段一つまたは複数のヌクレオシド類似体を本発明 の化合物と組み合わせて用いる場合、ＰＡＣ化合物と組み合わさって投与される ヌクレオシド類似体の濃度は哺乳動物に対する一回の処置（ヒペリシンの場合を 基本とする）において約０．００１μｇ／ｋｇ体重から２０，０００μｇ／ｋｇ 体重の範囲内である。　このような条件下における好適な最少量は約１μｇ／ｋ ｇ体重から１００μｇ／ｋｇ体重の範囲内である。

投与期間は個々の場合によって異なり、病気の重症度、発病段階、患者の状態等 のみならず、ＰＡＣ化合物の特異的な抗ウィルス活性および毒性も関与する。そ れぞれの処置において必要とされる総投与量が複数回に分けられて、あるいは− 回で投与される。このような投与は毎日性なわれるか１、−日に一回以上あるい は週に一回以上行なわれるか、または患者の状態や発病段階に応じて決められる 。

本発明者らは、ヒペリシンの抗ウィルス活性が処置の頻度の関数として表わされ ることを発見した。例えば、マウスを用いた研究では、１０μｇ／マウスの一回 処置（ａ　５ｉｄｌｅ　ｄｏｓｅ）は１００　μｇ／マウスの一回処置よりも効 果が低い。しかし、１０日間にわたって毎日１０μｇを投与するほうが、１０μ ｇ／マウスの一回処置よりも効果が低い。それとは対照的に週に一度の１０μｇ 投与は、１０μｇ／マウスの一回処置とほぼ同様の効果を示す、このことは処置 の頻度がそれ自身の効力に影響することを示している。一方、マウスにおいて適 用される投与量および処置方法がそのままヒトなどの他の哺乳動物に適用される ものではないことは、当業者に容易に理解されることであり、また既知の方法に よってマウス以外の哺乳動物に適当な投与量および処置方法を決定することは容 易であろう。

また、本発明はウィルス感染に対する治療のための薬剤学的組成物と処方とを提 供するものである０本発明のＰＡＣ化合物は通常、個体または液体状（例えば、 錠剤、カプセル、注射液、経口投与に適した溶液）に加工されて、ウィルス感染 した哺乳動物の治療に用いられる。本発明の薬剤学的処方は、本発明のＰＡＣ化 合物の有効量を活性成分（単独で、あるいは他の活性成分との組み合わせによっ て）を含むものである。例えば、非経口経由による治療組成物では約ｏ、ｏｏｔ μｇから約１００，０００μｇの本発明のポリサイクリック化合物と約１００μ ｇから約ｓｏ　、　ｏｏｏμｇのヌクレオシド類似体とを含有する無菌等張塩溶 液を含むものである０個々の投与量に含まれる活性成分の単位量はそれ自身の有 効量をなすものではない。なぜなら、必要な有効量はカプセルや錠剤、注射等ま たはされらの組み合わせの集まったものとして到達されるものであるからである 。

本発明にもとづくそれぞれの処方は、薬剤学的に許容な担体、希釈体、充填剤、 塩、および他の既知物質を付加的に含む者で、それらの選択は、投与量および投 与形式等の当業者において容易に判断される事柄によって決定される０例えば、 錠剤の場合は、既知の固形担体によって形成される。

この固形担体の例としては、澱粉、糖、ベントナイト、シリカおよび他の通常用 いられる担体が挙げられる。プロピレングリコール、ベンジルアルコール、イソ プロパツール、エタノール、ジメチルスルフオキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルア セトアミド、または他の生物学的に許容な有機溶媒または水溶液（例えば、ｐＨ が７、好ましくは８になるように調製された水）を希釈剤、担体または溶媒とし て本発明にもとづく抗ウイルス組成物の固体状または液状の薬剤学的処方に用い ることが可能である。さらに、担体および希釈体の非限定的な例として、炭水化 物、アルブミンおよび（または）他の血漿タンパク質成分（例として、低密度リ ポタンパク質、高密度リポタンパク質、および血清タンパク質に結合した脂質） が挙げられる。血清タンパク質に結合した脂質としては、フォスファチジルコリ ン、フォスファチジルセリン、フォスファチジルエタノールアミンおよびトリグ リセリドのような中性脂質がある。付加的な脂質担体の非限定的な例としては、 トコフェノール、レチノイック酸（ｒｅｔｉｎｏｉｃ　ａｃｉｄ）およびシクロ デキストランが挙げられる。もちろん、半固形状あもの（例えば、座薬）に加工 することも可能である。

好ましい非経口的投与形態としては、例えば等張塩溶液が挙げられ、この溶液に 約０．１μｇから約１００．０００μｇの本発明のポリサイクリック化合物を含 ませる。

本発明において用いられるカプセルは薬剤学的に許容される物質、例えばゼラチ ンまたはセルロース誘導体のような物質からなるものである０口に含ませて、あ るいは皮膚より吸収させる様式をとることも可能である。

本発明の抗ウイルスポリサイクリック化合物は特別な場合において付加的にリポ ソーム内に取り込ませて使用することが可能である。そのようなリポソームは他 の活性剤、例えばウィルス感染細胞によって発現されたウィルス性タンパク質で あるＨＩＶ　ｐ１２０、ｐ２４およびｐ４１　（およびそれらのグリセル化した もの）に対する特異的物質として特異的抗ＨＩｖ抗体を取り込むことも可能であ る。

以下、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に 限定されるものではない。

（以下、余白） 実施例１：　本発明のポリサイクリック化合物の本発明にもとづく化合物を、フ レンド白血病ウィルス（ＦＶ）に感染した哺乳類動物に与えた場合の効果を調べ た。

フレンド白血病ウィルスは、Ｂ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃやＮＩＨスイスマウスのよ うな感受性味に対して重症の赤血白血病を誘導する攻撃的なレトロウィルスであ る（フレンドらの文献　Ｆｒ１ｅｎｄ、　Ｃ，Ｊ、、　Ｅｘｐ；　Ｆｒ１ｅｎｄ 、　Ｃ，ｅｔ　ａｌ、　Ｎａｔｌ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、　Ｍｏｎｇｒ形 質転換は肺臓腫瘍化ウィルス（Ｓｐｌｅｅｎ　Ｆｏｃｕａ　Ｖｉｒｕｓ；　Ｆ− ＭｕＬＶ）とエコトロピックなマウスフレンド白血病ヘルパーウィルス（Ｍｕｒ ｉｎｅ　Ｆｒ１ｅｎｄ　Ｌｅｕｋｅｍｉａ　Ｈｅ１ｐｅｒ　Ｖｉｒｕｓ；　Ｆ− ＭｕＬＶ）とによって引き起こされる。悪性の赤血白血病は肝牌腫（肝臓と牌臓 の肥大化）と悪性貧血によって特徴づけられる。

フレンド白血病ウィルスは、１０日前にＦＶを静脈注射することによって感染さ せたマウスの膵臓をホモゲナイゼーションすることによって調製した。このホモ ゲナイゼーションは単離された膵臓の重量に対して１０倍のリン酸緩衝液を加え てＢ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃマウス（ジャクソン研究所、パーバーバー、ＭＥ）の 膵臓肥大（膵臓腫）に対する本発明組成物の効果を調べた。この試験では、マウ スに対してウィルス（１０６腫瘍形成単位−ＦＦＵ）を静脈から接種し、第二表 に示した１００ミリグラムの化合物を２４時間後に間欠的に投与した。各化合物 を、二匹のマウスに対して一度に投与した。１０日後にマウスを屠殺して膵臓の 重量を測定した。第二表に示したそれぞれの化合物は５以上の芳香族環を持ち、 式Ｉの化合物の類似体である。

フレンドウィルス系が、本発明の化合物の活性試験に用いられるのに対して、正 確ん感染系に関しては、いくつかの点について述べなくてはならない。赤血球前 駆細胞の形質転換は、ウィルス接種後において急速に起こる。一度、ＦＶによっ て形質転換が起こると、発病するようである。よって、本発明の化合物によるＦ Ｖによって起こるウィルス性膵臓腫瘍の阻害に関しては、急激な発病に対して強 い有効性を有するものであることから、病気の進行を遅くらせるのに用いること が可能である。そのようなことから、本発明の化合物はＨ工ｖによって起こる病 状の進行を遅くらせたすすることが可能であろう。

本アッセイ法は、ヒベリシンまたはシェードヒペリシンを用いた同様のアッセイ 法を改良したもので、グループあたりの実験動物数を増やした（すなわち、４匹 ）、シかし、このアッセイ法では、１グループあたり２匹の実験動物で十分であ ることがわかった。

結果を下記の第二表に示した。

（以下、余白） 第２表 第２表で明らかなように、ＰＡＣ化合物１．３〜５．７．８および１０〜１５は 、ＦＶによッテ誘導される膵臓重傷を顕著に阻害した。第二表および実施例１（ ａ）および（ｂ）の表で用いられる平均阻害値（％）は、以下の式によって計算 した。

平均阻害値（％）　＝　（１−（ＡＳＷＥ−ＡＳＷＮＣ）／（ＡＳＷＰＣ−ＡＳ ＷＮＣ））　Ｘ　１００上記式中、　ＡＳＷＮＣは、負の対照群の平均膵臓重量 、ＡＳＷＥは実験（処理）体の平均膵臓重量、ＡＳＷＰＣは正の対照群の平均膵 臓重量である。平均膵臓重量は、それぞれの実験群（第二表では、一つの実験群 は２匹からなる）において測定された膵臓の重量の数量的平均値である。

米国特許出願一連番号第８４．００８号に記載されたヒペリシンとシュードヒベ リシンとを用いた同様の複数の実験の結果を以下に示す。

これらの実験では、ＢＡＬＢ／ｃマウスにウイルス（１０６ＦＦＵ）を静扉から 接種し、２４時間後に本発明の抗ウイルス性化合物を腹腔内に投与した。そして 、１０日後にマウスを層殺して肺臓を採取し、その重量を測定した。その結果は 、第二表（ａ）にまとめた。

シュードジペリシンは１％エタノール含有リン酸緩衝塩（ＰＢＳ）で希釈した。

（以下、余白） 第２表（ａ） 負の対象群マウス　正の対象群（ＦＶ接種）マウス（ＰＢＳ）　（１０６ＦＦＵ ） 平均値　０．１８４６＋０．０１７８　１．０８６５＋０．１２２６対象群との 実質的差＝０．９０１９ 負の対象群マウス　正の対象群（フレンド）マウス（Ｐ　Ｂ　Ｓ）　（２Ｘ１０ ’ＦＦＵ）平均値　０．１８４６＋０．０１７８　０．８６７＋０．５１３対象 群との実質的差＝０．６８５１ 第２表（ａ）は肺臓腫瘍性肥大の阻害を示すもので、Ｐｓをマウスあたり８０マ イクログラムの一回注射によって９３．８％の中間阻害（ｍｅｄｉａｎｉｎｈｉ ｂｉｔｉｏｎ）が認められた。０．５グラムのウィルス試料（２Ｘ　１０５　Ｆ ＦＵのウィルスに相当）を事前に接種されたマウスに一回の注射によって８０ミ リグラムのＰｓを投与した。その結果、８９゜６％の肺臓肥大に対して５０％阻 害が観察された。

−匹のマウスあたり８０ミリグラムのＰｓを毎日注射して肺臓肥大に対する５０ ％阻害の有無を調べたところ、２Ｘ１０’ＦＦＵを含むウィルス試料に関しては 、９０．７％であり、１０”ＦＦＵを含むウィルス試料に関しては、８１．７％ であった（第−表）。

上記結果は、注射２４時間後にＰｓを腹腔内に投与することによってフレンド白 血病ウィルスの膵臓肥大能が著しく減少することを示している。

同様の実験を他のＰＣＡ化合物の抗ウィルス活性の測定に利用可能であろう。

（２）フレンド白血病ウィルスとの共投与ＰｓをＦＶ複合体とともに同時に静脈 注射することを含む異なる実験系を用いた。

この系では、種々の濃度でウィルス試料をＰｓと混合し、この混合物を最終濃度 が０．５ｍｌとなるようにしてマウス尾部の動脈に注射した。１０日後、このマ ウスを層殺し、肺臓の重量、および肺臓腫瘍化の阻害程度を調べ、その結果を第 二表（ｂ）にまとめた。

第２表（ｂ） 肺臓重量（ダラム） 対象群　実験１　実験２　実験３ ＰＢＳ　ＰＢＳ　＋　１％ＥｔＯＨＦＶ　ＦＶ　＋　ＰＳ　５＋１１Ｃ［ＦＶ　 ＋　ＰＳ　２０ｎｃｇ　ＦＶ　＋　ＰＳ　５０ｍｃｇ平均値 第２表（ｂ）に示されたように、膵臓肥大化の１００％阻害はマウス（平均約５ ０グラム）に２０ミリグラムまた５０ミリグラム／マウスのＰｓをウィルス複合 体とともに投与した場合に認められた。７５．４４％の平均阻害は５ミリグラム ／マウスのＰｓをウィルスとともに投与した場合に認められた。

これらの結果から、本発明の化合物の効果は５ミリグラム／マウスの少量でも、 悪性ＲＮＡ腫瘍ウィルスによるウィルス性形質転換を阻害することができること がわかった。

つづいて、上記方法と同様にして次のような実験を行なった。すなわち、異なる 組み合わせのＰＡＣ化合物（下記第三表の１６から２９番および３０から３６番 ）を種々の濃度（すなわち、５０．１００．２００．２ｘｌＯＯ１あるいは１０ ０ミリグラムを２回）に調製し、間欠的に投与した。

化合物１６ないし２９は３ないし５つの閉じた芳香環を有し、また酸素またはヒ ドロキシ基以外の基を持っていない。一方、化合物３０ないし３６は３つの閉じ た芳香環を有し、側鎖として酸素、ヒドロキシルおよびメチルからなる群から選 択される。

これらの化合物を２回投与する場合、１回目の投与の後、２４ないし４８時間経 過後に第２回目の投与を行なう。そして、ウィルスを感染させ、第２表に示され たようにして膵臓肥大化を調べる。

このようにして行なつ゛た実験の結果を第三表に示す、第３表では、「プールさ れた平均パーセント阻害」は同じ化合物についてそれぞれの実験において得られ た平均パーセント阻害を足し、そして実験の総数（すなわち、４）でそれを割る ことによってめた。

それぞれの化合物において得られたすべてのデータ（すなわち、ひとつの化合物 において用いたすべての濃度に関して）をプールして計算することによって、標 準偏差をめた。よって、大きな濃度の範囲を出たデータの変位のみを反映する。

第３表に示された膵臓重量から、ＰＡＣ化合物は確かな阻害効果を示すことが判 った。

（以下、余白） 第３表 ２１、　１，４，５．８．９．１０− エ、論−テαｌ　父　０．９Ｓ　１．噛　リ　タ　２第３表の結果から、化合物 ３０ないし３６（３つの閉じた芳香環を有し、側鎖は酸素、ヒドロキシルおよび メチルからなる群から選択されるものが付加されている）は一般的に化合物１６ ないし２９（３ないし５つの閉じた芳香環を有し、また酸素またはヒドロキシ基 以外の基を持っていない）よりも効果的であることがわかる。褥記すべきことは 、この実施例に記載された実験において調べられたすべての化合物は少なくとも ある程度の抗レトロウイルス活性を示した。このような実験は他のＰＡＣ化合物 の抗ウィルス活性を調べるのに利用可能であろう。

実施例１（ａ）で用いた化合物は　米国ライスコンシン州ミルウオーキー所在の アルドリッヒケミカル株式会社（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、、 ）から入手したもので、Ｂシリーズの化合物として本明細書中において言及しで ある。これらの化合物の構造式は実施例２に示した。

（以下、余白） （ｂ）ポリサイクリック化合物をヌクレオシド類本発明の化合物（１００マイク ログラム／マウス）をＡＺＴ　（２０マイクログラム／マウス）と組み合わせて 、実施例１（ａ）と同様の方法で試験した０例として、化合物＃９（３−プロモ フエナンスロ（３，４−Ｃ）　、フェナンスレン）と化合物＄１０（ジインデノ （１，２，３−ＣＤ／ビ、２’、３’−ＩＭ）ペリレン）を選択した。　第二表 に示されているように、１００マイクログラム／マウスの化合物＃９の投与で、 弱い抗ウィルス活性が認められた。一方、同量の化合物＃１０の投与では、ＦＶ 誘導肺臓肥大に対して顕著な阻害効果（〉４０％）が認められた。この化合物は 腹腔内に一度だけ、あるいは５日間にわたり、日に一度づづ、化合物のみで、あ るいはＡＺＴ　（２０マイクログラム／マウスを５日間にわたり、日に２回）と ともに投与された。よって、本実験ではＡＺＴ投与に関しては、５日間にわたり 投与が行なわれ、各マウスに対する総投与量は１００マイクログラムとなった（ ＰＡＣ化合物に関しては、５００マイクログラム投与したことになる）。実験結 果ｉ主第四表に示した。

（以下、余白） 第４表 ５　Ｘ　ＡＺＴ（２０μｇ／’？？Ｘ）　１．３７４４　１．３８９５　３９１ ．４０４６ ５　Ｘ　（ＡＺＴ　＋　１１９）　０．９０９７　０．９３５８　６１（１９： 　２０μに／マウス　＋　１００μｇ／マウス）　０．９６１９第４表に示され ているが、化合物＃９は一回の投与でも、５日間にわたる５回の投与でも抗レト ロウイルス活性は弱かった（３％または２４％）。

しかし、この化合物＃９をＡＺＴとともに投与した場合、ＦＶ誘導牌膵臓大が実 質的に阻害された（６１％）。この阻害効果はＡＺＴのみでは達成されない。な ぜなら、同量のＡＺＴのみでは３９％の阻害しか認められなかったからである。

よって、本発明の化合物とＡＺＴとを一緒に投与することによって、少なくとも そぞれの化合物を単独で投与するよりもすぐれた効果が生ずることがわかった。

化合物＃１０（この化合物のみでも顕著な抗レトロウイルス効果が認められる） をＡＺＴと組み合わせて投与すると、実質的なレトロウィルス阻害（５７％）が 認められたが、この阻害効果は単独で投与した場合よりも高いものであった。

ＰＡＣ化合物を含む上記試験と（または）、ＡＺＴと組み合わせたヒペリシンと シュードヒベリシンとの試験とのそれぞれの結果から、他のＰＡＣ化合物をＡＺ Ｔもしくは他のヌクレオシド類似体と組み合わせて、治療または予防の際に用い ることによって少なくとも新たな活性を引き出すことが可能であろう。

このような観点から、第４表はレトロウィルス感染に対する処置の際にＡＺＴの ようなヌクレオシド類似体とＰＡＣ化合物を組み合わせることによって認められ た相乗効果を示している。　ヒベリシンとシュードヒベリシンとをＡＺＴととも に組み合わせて用いた場合の前記実験と同様の実験では、ヒペリシンおよびＡＺ Ｔ含有組成物はＰＡＣ化合物また前記類似体の活性よりも高い抗ウィルス活性お よび膵臓肥大化阻害活性を示した。

（以下、余白） 実施例２： 下記のリストの一連のＰＡＣ化合物を示すものである（シリーズＡ）。

ヒベリンとの類似性から、ウィルスおよびレトロウィルスに対する活性を有する ものと期待される。

これらの化合物は国立癌学会（Ｎａｔｉｏｎａｌ　ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕ ｔｅ、　Ｂｅｔｈｅｓｄａ、　ＭＤ）から入手可能であり、またこれらの化合物 の特性に関しては、クイズら載されている。

（以下、余白） 以ＣＬ！」Ｌｊ二立 Ａ１．　ＣｋＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、１４３４３９２１Ａ２．　ＣＡＳ　 Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、６３３６８４１Ａ３．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　 Ｎｏ、１４６４２７２９Ａ４．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、６３３６８ ７４Ａｓ、ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　６９４１４７５Ａ６．　ＣＡＳ 　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　４４７８７６６Ａ７．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒ ｙ　Ｎｏ、　２０１３５８３１８、ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　ＮＯ，６６７９ １４Ａ９．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　ｋコｏ、４３４８５５Ａ１０．　ＣＡ Ｓ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　３４３８０８２Ａ１１．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓ ｔｒｙ　Ｎｏ、　２４５４１１９３Ａ１２．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ 、ユ０３９５０２５Ａ１３．［ＮＳＣＮｏ、１２３３９９−Ｎ］Ａ１４．　ＣＡ Ｓ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　６９５４４８５０Ａ１５．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉ ｓｔｒｙ　Ｎｏ、　５５０４３４１９Ａ１６．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎ ｏ、　７１２０５３８４Ａ１７．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　５２２ ３６５４１ＡｌＢ、［ｔＪＳＣＮｏ、　２３１５７９−Ｙ］Ａ１９．　［ＮＳＣ Ｎｏ、　２４１０３９−１］Ａ２０．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　）ｉｏ、　 ２７５７５４６８Ａ２１．　［ＮＳＣＮｏ、　３０８７８７−ＶｌＡ２２．団Ｓ Ｃ？Ｊｏ、　３０８８０５−ＱｌＡ２３．　［ＮＳＣＮｏ、　３０ε８１４−Ｚ ｌＡ２４．　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　１４３４３９５４Ａ２Ｓ・　 ロードマイシン、２−ナフタセンカルボキシアミド　（ｌｏｄｏｗｙｃｉｎ、２ −Ｎａｐｂｔｈｉｃｅａｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄ＠）Ａ２６．　ＣＡＳ　Ｒｅｇ ｉｓｔｒｙ　Ｎｏ、　８１０９２８４４Ａ２７−　ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｔｒｙ 　Ｎｏ、　８１０９２８５５Ａ２ｇ、　［ＮＳＣ番号５０７４５ｇ−３］（以下 、余白） 下記のリストの一連のＰＡＣ化合物（ＡＡＢ化合物およびその類似体）および誘 導体を示すものである（シリーズ　Ｂ　）。

ヒペリンとの類似性から、ウィルスおよびレトロウィルスに対する活性を有する ものと期待される。これらの化合物はアルドリッヒケミカル株式会社（＾１ｄｒ ｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、）から入手可能であり、またこれらの化合物 の名称は実施例１の第２表および第３表に挙げられている。

（以下、余白） シリーズＢ化合物工ないし４ ２゜ コ。

シリーズＢ化合物５ないし＋１ シリーズＢ化合物１２ないし２１ １９、　２０．　２１゜ シリーズＢ化合物２２ないし２９ ２５、　２６．　２７゜ シリーズＢ化合物３０ないし３６ 下記の＾ＡＢ化合物１−２５の特性は、バンクらの文献（Ｂａｎｋａ、　Ｈ，Ｊ 、　ｅｔ　ａｌ、　Ａｕ５ｔ、　Ｊ、　Ｃｈｅａ、　２９：　１５０９−１５２ １．１９７６）に記載されている。

シリーズＣ化合物１ないし１９ シリーズＣ化合物２０ないし２５ ｃ　′　−−） （社） （２；） 上記化合物１−２５の合成および（または）単離にかんしては以下の文献１−２ ５を参照せよ。

１、エモジン アルドリッヒから商業的に入手可能 ３．５ジメトキシ−Ｏ−フタリックアンヒドライドとｍ−クレゾールとから合成 米国特許第２，７０７，７０４号（ブロックマンらによる） ２．７−ヒトロキシエモジン ３、ω−ヒドロキシメモジン バンクスらの文献：前掲 ４、アラテルニン（２−ヒドロキシエモジン）バンクスらの文献：前掲 ５、エモジン酸 エモジンから合成 アンスロウらの文献：　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、　３４：１５９、　１９４０ ２９５：　８５０．１９６２ バンクらの文献：前掲 エモジンビアンスロンから合成（０２，ＫＯＨ，ＨＣＩ処理、ＴＬクロマト、ゲ ル濾過）７、ヒペリシン プロツクマンの文献：前掲 アンスロウの文献：前掲 ８、ヒペリシン　モノカルボキシル酸 トンプソンらの文献：　Ｎａｔｕｒａｌｌｙ　ＯｃｃｕｒｒｉｎｇＱｕｉｎｏｎ ｅｓ、　２ｎｄ　Ｅｄ、　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｌｏｎｄｏｎ、１ ９７１ バンクスらの文献：　Ｉｎ５ｅｃｔ　Ｂｉｏｃｈｅｔｎ、　３：１３９．　１９ ７３ ６３、　１９７３ ９、ヒペリシンジカルボキシル酸 １０、シュードヒペリシン バンクスらの文献：前掲 １１、エモジンアンスロン ヒドリオシツク酸または塩化第一スズ によるエモジンの還元によって合成 アンスロウらの文献：前掲 ジャコブセンらの文献：　Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ。

１２、エモジン酸アンスロン ヒドリオシツク酸によるエモジンの還 元によって合成 アンスロウらの文献：前掲 １３、プロトヒペリシン バンクスらの文献：前掲 １４、プロトヒペリシンモノヵルボキシル酸パンクスらの文献：前掲 １５、プロトヒペリンジカルボキシル酸１６、ヒドリキシメチルプロトヒペリシ ンバンクスらの文献：前掲 １７、エモジンビアンスロン アンスロウらの文献：前掲 １８、エモジン酸ビアンスロン アンスロウらの文献：前掲 １９、エモジンビアンスロンジカルボキシル酸 アンスロウらの文献 ２０、バンクスらの文献：前掲 ２２．１０−ペロキシ−９−アンスロンベッドフォードの文献：　Ｊ、　Ｃｈｅ ｍ、　５ｏｃ２３、ベニシリオプシン バンクスらの文献：前掲 ２４、ヒペリロージヒドロジアンスロンバンクスらの文献：前掲 ２５、バンクスらの文献：前掲 （以下、余白） さらに、下記ノＡＡＢ化合物Ｘ−ＸＸＸＩＩ　（シリーズＤ）もまた、ヒペリシ ンと関連しており、抗ウィルス活性を有すると思われる。

（以下、余白） シリーズＤ　−化合物ＸＩＸ−ＸＸＸＩＩシリーズＤ−化合物Ｘ−Ｘ　Ｉ　Ｉ　 １上記化合物の合成はブロックマンの文献（Ｂｒｏｃｋｍａｎｎ、　Ｈ，Ｍ、、 　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。

Ｖｏｌ、　Ｉ、　Ｃｏｏｋ、　Ｊ、　Ｗ、　ｅｄ、、　６４−８２．１９５２） に記載されている。

シリーズＥ　−化合物１−７ （′−−） 第３実施例：プロトヒベリシンの抗ウィルス活性ヒペリシン類似体であるプロト ヒベリシンの抗ウィルス活性は以下のように調べた。

プロトヒペリシンはバンクスらの方法によって、合成した（Ａｕｓｔ、　Ｊ、　 Ｃｈｅｗ、　２９：　１５０９−１５７１．１９７５）。材料はシリカゲル６０ （メツシュ０．４−０．６）を用いたクロマトグラフィで精製し、使用直前まで 暗黒下で保存した。

放射線処理白血病ウィルス（ＲａｄＬＶ）を常時感染させたＢ１０．Ｔ（６Ｒ） 細胞（メルエロらの文献：　Ｍｅｒｕｅｌｏ　ｅｔ　ａｌ、　Ｊ、　Ｅｘｐ、　 Ｍｅｄ、　１４７：　４７０−４８７．１９７８）培養液を４℃、３５００ｒ、 ｐ、ｍ、　１５分間の遠心にかけて、その上滑（１０＋ａｌ／試験管）を得た。

上清の上２７３を取り除いて、その一部をヒペリシンまたはプロトヒペリシンの 一定量と、氷上で暗黒下のもとインキュベートした。なぜなら、光に曝されるこ とによってプロトヒペリンがヒペリシンに変換してしまう。その後、上清を遠心 １００，０００ｘｇで１時間遠心（ＴＩ７０ロータ、ベックマンインストロメン ツ）した。ペレットを別の容器に取り、逆転写酵素活性を下記の通りにして測定 した。

逆転写酵素活性は、下記の成分を含む１０ｍ１の容量で行なった。

（以下、余白） 試薬ストック　μｌ試薬／アッセイ　最終濃度／アッセイＳｏｌ’ｎ　Ａｔ　０ ．５０Ｍ　Ｔｒｉｓ／ＥＣＩ　ｐＨ７，８１０５０ｍＭＯ−６Ｍ　ＫＣＩ　６０ 　！ＩＬＭ ＳＯνｎ　Ｂ＝　２．０ｍＭ　Ｍｎ酢酸　１０　０．２　ｍＭＳｏｌ’ｎ　Ｃ： 　４０　ｍＭ　シ゛チオスレイトル　５　２ｍｌ−１Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００ （１０％ｌ　１　０．１％ｐｏｌｙ　（ｒＡ）”（ｄＴ）１２　（１０Ａ２６゜ ｕｎｉｔｓ／ｎｉｌ　４　０．４　Ａ、。ｕｎｉｔｓｄＴＴＰ　（２Ｘ１０−’ Ｍｌ　１０　２ＸＩＣＪ”ＳＭ［３Ｂ］−ＴＴＰ　（５００ｍ１ｃｒｏ　Ｃ１／ ｍ１１２１ｊｌ　Ｓ　ｍｃｘｏ　Ｃｉｌ　ファルマシアファインケミカル社より 入手２　ニューイングランドヌクレア社より入手逆転写酵素活性試験は、化合物 の抗ウィルス活性を測定を逆転転写酵素活性の減少によって行なうものである。

この試験の結果は下記の第５表に示した。

第５表では、ｒ　ＣＰＭ　Ｊは「カウント／分」を意味するものである。「平均 値」はそれぞれのグループ内の測定されたＣＰＭの値の平均値である。

第５表 プロトヒペリシンの抗ウイルス活性 添加（μｄ　ＣＰＭ　平均値　平７．害、あｔ、；：：：：：：　２゜９，２０ ０　＋＋＋（ｒｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　」はヒ勺シン、　ｒｐｒｏｔｏｈｉｐｅｒ ｉｃｉｎ」はプロトヒ勺シンを添加した場合を示す、）Ｚｏｏ　ｈｙｐａｒｉｃ ｉｎ　１，５０２２．１５Ｂ　１．！１３０　９９．０ ５０　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　Ｓ、４３４３．７１６　４，５７５　９フ、Ｂ １０　ｈｙｐ＠ｒｉｃｉｎ　８，９１２９．１０２　９，００７　９！５．７ ５　ｈｙｐ＠ｒｉｃｉｎ　１２，２２４１１．３３２　１１．フッ８　９４．４ １　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　４，５０４ ３．６９０　４，０９フ　９８．Ｏ Ｏ，５ｈｙｐ＠ｒｉｃｉａ　コ、１９０３．６６フ　３，４２８．５　９１１． ４０−１　ｈｙｐａｒｉｃｉｎ　Ｌ６６Ｅ１２．９９Ｂ　２，３３３　９！１． ９ ０．０５　ｈｙｐａｒｉｃｉｎ　２，８８２　３，０６７　９８．５３．２５２ Ｚｏｏ　ｐｒｏｔｏｈｙｐ＊ｒｉｃｉｎ　１１．ａｌＥｌｌｌ、フ４４　１０， ２８１　９５．１Ｓｏ　ｐｒｏｔｏｈｙｐ＠ｒｉｃｉｎ　７５Ｊ１６６７．４６ ６　フ１，６４１　ｊｓ、１１１０　ｐｒｏｔｏｈｙｐ＊ｒｉｃｉｎ　２０２， ６５６１６１１．４２２　１１ｍ５，５３９　１１．３５　ｐｒｏｔｏｈｙｐｅ ｒｉｅｉＩ１１１２，３５８！２，９０８　１２，６３３ ０トヒペリシンは顕著にＲａｄＬＶの逆転写酵素物の活性は同様の試験で実施で きるであろう（以下、４ 実施例４：ヒペリシンヘキサアセテートの抗つイヒペリシンヘキサアセテート（ ｈｙｐｅｒｉｃｉｎｈｅｘａａｃｅｔａｔｅ：ＨＨＡ）の抗ウィルス活性を下ｆ ；Ｉ　／ｌ’＋　）うにして試験した。

ヒペリシンヒキサアセテートは過剰の４物存在下において酸性触媒（例えば、硫 医つフッ化物）を加熱ヒペリシンに添加するよって合成できよう。選択的に融解 酢酸ナム、ピリジンまたはトリエチルアミンのよ基性触媒を用いることが可能で ある。また、クマンらの文献（Ｂｒｏｃｋｍａｎｎ、　Ｈ，、ｅｔａｌ、。

０−２４９１．１９５７）を参照せよ。

ＨＨＡの抗ウィルス活性は放射白血病ライ常時さらされて感染されたＡＱＲ細胞 （パツルエロの文献：　Ｂａｃｈ　＆　Ｍｅｒｕｅｌｏ、　Ｊ、　Ｅｘｐ。

ｔｔｉｏ：　２７０−２８５．１９８４）の逆転写酵素活性＆（調べることによ って試験した。この逆転）性試験は上記の実施例３にもとづいて行にこの試験結 果は第６表に示した。

第６表 ヒベシンヘキサアセテートの抗ウィルス活性ｔｌｄＪ：１　（ｐ　ｇ）　ＣＩＩ Ｍ　平均値　平均且否濃度実施例５：　本発明の組成物によるＨＩＶの阻害本発 明のＡＡＢ化合物のヒト免疫不全症候群ウィルス（ＨＩＶ）に対する活性は、以 下のようにして調べられた。

ＨＩＶ感染細胞、例えば０ＫＴＡ＋リンパ芽球細胞（すなわちクローンＨ９（ポ ポビックらの文献：Ｐ。

ｐｏｖｉｃ、　Ｍ、、　ｅｔ　ａｔ、、　５ｃｉｅｎｃｅ　２２４：　４９７− ５００゜１９８４）　）またはＨＵＴ７８細胞（ガズダールらの文献：Ｇａｘｄ ａｒ、＾Ｆ　ｅｔ　ａｌ、　Ｂｌｏｏｄ　５５：　４０９．１９８０）またはＭ ｏ１ｔ−７８（アメリカンタイプカルチャーコレクション、ロックビル、ＭＤか らＡＡＣＣＣＲＬ　１５８２として入手可能）を２０％牛脂児血清（フローラボ ラトリーズ社製；　Ｆｌｏｗ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｉｎ（ｌｅｗｏｏ ｄ。

Ｃ＾）含有ＲＰＭＩ−１６４０培地（ギブコ社製；　ＧＩＢＣＯｌＧｒａｎｄ　 Ｉａｌａｎｄ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）で維持した。約４　ｘ　１０’細胞ハｌと なるようにして細胞が播種された培地（以下、余白） を３つ用意し、これらの細胞をポリブレン（Ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ）　（２ｍｇ／ ｍｌ、　シグマケミカル社製）に曝し、かツ２　Ｘ　１０６　ＨＩＶ粒子／４ｘ ｌＯ’　細胞のＨＩＶ粒子を細胞に感染させる。そして、実施例１および実施例 ２の化合物の存在下または非存在下で培養する。

本発明の化合物の抗ウィルス活性は、サリンらの文献（Ｓａｒｉｎ、　Ｐ、Ｓ、 　ａｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｎａｔ、　Ｃａｎｃｅｒ　１ｎｓｔ、　７８：　６６ ３−６６５．１９８７）に記載されているように、逆転写酵素活性およびＨＩＶ タンパク質（ｐ２４およびｐ１７　）の発現をもとにして調べた。

ＨＩＶのＥＬＫタンパク質ｐ２４およびｐ１７の発現、ＨＩＶ感染または非感染 のＨＵＴ−７８、Ｍｏ１ｔ−４またはＨ９細胞（２Ｘ　１０５）を、本発明の化 合物（５Ｂおよび２００＋ｓｇ／ｍｌ　）に４日間つづけて曝した。それらの細 胞におけるＨＩＶのｐ２４およびｐ１７タンパク質の発現率はＨＩＶのｐ２４お よびｐ１７タンパク質に対するマウスモノクローン抗体（ＨＩＶ血清抗体検出試 薬としてデュポン社などから入手可能）を用いた間接免疫蛍光顕微鏡法によって 決定した。ＨＩＶのｐ２４およびｐ１７タンパク質産生に関して陽性の細胞は蛍 光標識したヒツジ抗マウスＩｇＧ抗体（カペルラボラトリーズ社製；　Ｃａｐｐ ｅｌｌ　Ｌａｂｏｒａｔｙｏｒｉｅａ、　Ｃｏｃｈｒａｎｖｉｌｌｅ、　ＰＡ） 処理によって可視化された。−回の実験において、同じ２つの試料に対して同時 平行して同じ処理を実施し、さらに同様の実験を３回繰り返すことによって、正 確な実験結果を得るように試みた。

逆転写酵素活性の測定 ＨＩＶに感染されたＨＵＴ−７８、Ｍｏ１ｔ−４またはＨ９細胞を、種々の濃度 の上記本発明化合物）に曝した。

処理開始後、４日日に培養液上清を採取し、上記遠心法においてポリエチレング リコールを利用することによって、ウィルス粒子を沈澱させた。そして、以下の ようにして逆転写酵素活性を測定した。

ウィルスからなる沈澱物（ペレット）を３００μｌの緩衝液（５０ｍＭ）リス− 塩酸（ｐＨ７，５）　、５ｍＭジチオスＬ／イトル、２５０ｍＭＫＣｌ、　０． ２５％トリドアに一１００含有）に懸濁した。これらの試料における逆転写酵素 活性は、５０ｍＭ　トリス−塩酸（ｐＨ７，５）　、５ｍＭジチオスレイトル、 １００ｍＭＫＣｌ、０．１％トリ　トンＸ−１００，１０μｌｄＴｉｇｒＡＩｌ （テンレートプライマーとして）　、１０ｍＭ　Ｍｇｃｌｇ　、　１５　μ＋ａ ｏｌｅ　［’［（コｄＴＴＰ　にニーイングランドヌク２フ社製；　Ｎｅｗ　Ｅ ｎｇｌａｎｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ、　Ｂｏｓｔｏｎ。

ＭＡ）　、および１０μｍのウィルス懸濁液を含む反応混合溶液（５０μｌ）に よって試料中の逆転写酵素活性を調べた。この反応混合溶液を３７℃、１時間の 条件でインキュベーションした後、つづけて５０μｇの酵母ｔＲＮＡ　（シグマ ケミカル社製；　Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｃａｌ、　Ｓｔ、　Ｌｏｉｓ、　ＭＯ） を添加した。非放射性標識のトリクロロ酢酸不溶性分画に対する放射活性の取り 込みを調べた。

一回の実験において、同じ２つの試料に対して同時平行して同じ処理を実施し、 さらに同様の実験を３回繰り返すことによって、正確な実験結果を得るように試 みた。

ネコ白血病ウィルス（ＰａＬｌ／と略す）　ｖｉｒｅｍｉａに対して陽性のネコ に、本発四の化合物（上記実施例１および２において示された化合物）をヌクレ オシド類似体存在下または非存在下において、５−２０曹に／ｋｇをに日に２回 投与するようにして種々の間隔時間（ｉｎｔｅｒｖａｌｓ　ｔｉｍｅ）を設定し て投与した。

これによってＦｅＬＶの血清レベルを追跡し、同様の処置をつづけるか、もしく はｖｉｒｅｍｉａ抑制のレベルに達したかどうかを検討した。血清レベルの追跡 期間は実験的な条件等をもとにして決定された。

少なくとも、６ｔ月間の追跡を実施した。

（以下、余白） 実施例７：ＡＡＢ化合物の化学合成 下記のＡＡＢ化合物、ＷＩＳ−１−ＷＩＳ−６を以下のようにして合成した。

ＷＩＳ−１−ヒペリシンージカルボキシル酸この化合物はバンクスらの文献（Ｂ ａｎｋｓ、　Ｈ−Ｊ。

ｅｔ　ａｌ、、Ａｕ５ｔ、Ｊ、Ｃｈｅｗ、２９：　１５０９−１５２１．１９７ ６）に記載されている。その化学構造式および合成法について述べる。

（以下、余白） λ、１８；メタノール中での波長吸収ピーク（モル消滅係数（ｓｏｌａｒ　ｅｘ ｔｉｎｃｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｅｎｔ）　）。

ｙ　（ＫＢｒ）　＋　１５９０．１７００３００　ｃ＋ａ−’γ８振動数（ｆｒ ｅｑｕｅｎｃｙ）、ｃｍ−’　。

＝ケミカルシフト（ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｈｉｆｔ）　ｐｐｍ（ｐａｒｔｓ　ｐ ｅｒ　ｍ１ｌｌｉｏｎ）ウィリアム、Ｄ、Ａ、ら編集「有機化学におけるスベク トロスコピイ方法Ｊ　４０−１２９ページ、マツフグロウヒル社、ロンドン、１ ９６６年（ＳｐｅｃｔｒｏａｅｏｐｉｃＭｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ 　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　Ｗｉｌｌｉａｍｓ、　Ｄ、Ａ。

ｅｔ　ａｌ、　（ｅｄｓ）　ｐｐ、　４０−１２９．　ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ 　Ｌｔｄ、。

Ｌｏｎｄｏｎ、　１９６６） ＷＩＳ−２−テトラヒドロキシージベンゾペリレンージ（ＷＩＳ−２−ｔｅｔｒ ａｈｙｄｒｏｘｙ−ｄｉｂｅｎｚｏｐｅｒｙｌｅｎｅ−ｄｉｏｎｅ　）テトラヒ ドキシ−ジベンゾペリレン−ジオン（Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙ−ｄｉｐｅｎｚ ｏｐ、ｅｒｙｌｅｎｅ−ｄｉｏｎｅ　）この化合物はロードワルドらの文献（Ｒ ｏｄｅｗａｌｄ、　Ｇ、　ｅｔ　ａｌ、、　ＡｎＨｅｗ、　Ｃｈｅｍ、　Ｉｎｔ 、　Ｅｄ、　１６：　４６−４７、１９７７）に記載されている。

５【のＩＪ−ジヒドロキシアンスラキノン（パー水（５ｇの　ポタシウムｔｅｒ ｔ−ブトキト含む）に溶解し、３ｇのヒドロキノンで処理する。この処理によっ て得られた濃赤色の溶液をガラスアンプルに注入し、さらにアルゴンガスでアン プル内を充満させた後、密閉した。密閉されたガラスアンプルをオイルバス（１ ２０℃）で２０日間にわたる加熱を行なった。加熱処理後、アンプルの内容物を １％塩酸溶液でｐＨ１にし、ブタノール：エタノール（１：ｌ）溶液で抽出し、 さらに蒸留水で中性となるまで洗浄した後、蒸留乾燥した。′４られた残さはシ リカゲルカラムクロマトグラフィにかけ、エチルアセテート：ブタノール（１０ ０：５）混合物で溶出を行なった。その結果、照射（ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ） 　シても変化しない３５０ｍｇの産物を得ることができた。物理的特性は前掲の 参照文献（ロードワルドらの文献）に記載されたものと同一であった。

（ＷＩＳ−３−ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　）１．３．８−トリヒ ドロキシアンスラキノンデスメチルヒペリシン この化合物はすでにカメロンらの文献（Ｃｉｍｅｒ。

ｎ、　Ｄ、Ｗ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ａｕ５ｔ、　Ｊ、　Ｃｈｅｗ、　２９：　１ ５２３−１５３３、１９７６）に記載され、その特性が報告されている。

１．３．８−トリヒドロキシアンスラキノン（３００ｍｇ　）水（０，５ｇのポ タシウムｔｅｒｔ−ブトキト含む）に溶解し、０．３ｇのヒドロキノンで処理す る。この処理によって得られた濃赤色の溶液をガラスアンプルに注入し、さらに アルゴンガスでアンプル内を充満させた後、密閉した。密閉されたガラスアンプ ルをオイルパス（１２０℃）で２１日間にわたる加熱を行なった。加熱処理後、 アンプルの内容物を１％塩酸溶液でｐＨ１にし、ブタノール：エタノール（ｌ： １）溶液で抽出し、さらに蒸留水で中性となるまで洗浄した後、蒸留乾燥した。

ｌ！られた浅さはシリカゲルカラムクロマトグラフィにかけ、エチルアセテート ：ブタノール（１００：５）混合物で溶出を行なった。その結果、プロトヒへ６ リシン（ｐｒｏｔｏｈｙｐｅｒｉｃｉｎ）のデスメチル類似体を５０ｍ（得るこ とがＷＩＳ−デスオキソヒペリシンーヘキサアセテートできた。この物質をエチ ルアセテートい溶解し、可視光で１時間の照射（ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ）処理 を行なった。溶媒を蒸留乾燥させ、４４Ｂのデスメチルヒペリシンを得た。この 化合物は濃赤色の非結晶個体（ａｍｏｒｐｈｏｕｓ　５ｏｌｉｄ）であった。

得られた物質の特性： λ、１８（メタノール）　：　５８０　（４５，０００）。

５３７　（２５，０００）、　４６８　（３０，０００）　ｎｍｙ　−ａｍ（Ｋ Ｂｒ）　：３４００．１６２０．１５９０．１５５０１ＨＮＭＲ：　（ＣＤ、Ｓ ｏ）　８．４８　（ｄ、　Ｊ＝８Ｈ）、　７．１５（ｄ、　Ｉ＝８Ｈｚ）、　６ ．５７（ｓ）ＥＩＥＩｍ （以下、余白） この化合物はすでにブロックマンらの文献（ＷＩＳ−ｄｅｓｏｘｏｈｙｐｅｒｉ ｃｉｎ−ｈｅｘａｃｅｔａｔｅ　）８．３．　７．４４．　７．９９　ｐｐｍ。

ＵＳ−５−デスオキソヒペリシン （ＷＩＳ−５−ｄｅｓｏｘｏｂｙｐｅｒｉｃｉｎ）デスオキソヒペリシンーヘキ サーアセテートデスオキソヒベリシン これは今までの文献には記載されていない新しい化合物で、デスオキソイヒベリ シンーへキサアセテート（ＷＩＳ−４）の加水分解によって合成される。

２０ｍｇおデスオキソヒベリシンヘキサアセテート（上記方法によって合成）を ８ｍｌのエタノール（２０ｍｇの水酸化ナトリウムを含む）に溶解した。この溶 液を室温に２４時間放置した。この時間内で、溶液中に含まれる酢酸基は加水分 解されてデスオキシヒベリシン（ｄｅａｏｘｙｈｙｐｅｒｉｃｉｎ）のナトリウ ム塩が生じた。この物質は溶液から単離されなかった。なぜなら、自然に、また は酢酸のｐＨで容易に分解されてしまうからである。

得られた物質の特性： ＵＶ　（エタノール、ｐＨ１０）　：　λｗａｘ　）８００．７５５．４３３　 ｎｍ。

（以下、余白） 実施例８：　生物学的活性 上記合成法によって合成されたＡＡＢ化合物の抗ウィルス活性について調べた。

上記実施例１において実施された方法と技術とによってフレンドウィルス誘導膵 臓腫（Ｆｒｉｅｎｄ　Ｖｉｒｕａ−ｉｎｄｕｃｅｄ　ｓｐｌｅｎｏｗｅ（ａｌｙ ）に対するＷＩＳ−２、Ｗ（Ｓ−３、ＷＩＳ−４、ｗｔｓ−ｓおよびＷＩＳ−６ の生物学的効果について調べた。この結果（１グループあたり、３匹のマウスを それぞれ異なる濃度の活性組成物で処理して調べた。また、対象群の場合は、１ グループあたり、２匹とした）は、第７表に示した。

（以下、余白） 第７表 ０−１９４７　０．１７５４　＋＋ Ｐｕｓ　負の対象群　。０．４６゜ 第８表 負の対象群　８２９・６４０　８１６・５６８８０３．４９６ 賀ｌ５−２　（５）　４．２７８　３，９２２　９Ｌ５３．５６６ 川Ｓ−４（２１２３６，３７４２３７，３６５７０，９２３８，３５６ ’ｈ１ＭＳ−４（１）　１７９，３１２　１８０，１８０　７７．９１Ｂ１，０ ４８ ＷＸＳ−４（０，５）　１９６，７４０　２０Ｂ、１１９　７４．５２１９．４ ９Ｂ ％４１Ｓ−４（０，１）　Ｚｏｏ、５０４　Ｌ４４，５１２　Ｂ２．３１８１１ ．５２０ ＷＩＳ−４（０，０５）　１５６，８３０　１６４，２１２　７９．９１？１， ５９４ 第８表に示された上記試験結果から、試験されたすべての化合物が放射線白血病 ウィルスの逆転写酵素活性に対する阻害効果を示すことがわかった。化合物ＷＩ Ｓ−２およびｗｒｓ−ｓは試験された化合物のなかでもっとも高い抗ウィルス活 性が示された。

（以下、余白） 実施例１Ｏ： 抗ウィルス活性に必要なヒペリシンの構造的特徴を調べるために、ヒベリシンの 多くの類似体と前駆体とに関して、生体内および試験管内の実験系によって調べ た。

実施した試験は、以下の（１）ないしく３）である。

（１）上記実施例３と同様の方法による試験管内でのレトロウィルス不活性化試 験。

（２）メルエロらの文献（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａａｄ、　Ｓｃｉ。

ＵＳＡ　８５：　５２３０−５２３４．１９８８）とラヴイらの文献（Ｐｒｏｃ 、　Ｎａｔｌ、　Ａａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　ａａ：　５９６３−５９６７、 １９８９）とにもとづいた試験管内ウィルス（ｖｉｒｕｓｂｕｄｄ　ｉｎｇ　） 出芽阻害実験、すなわち組織培養において、ウィルス産生細胞を種々の濃度の化 合物とともに３０分、３７℃でインキュベーションし、つづいて３０分経過後、 この、Ｊ胞を牛胎児血清、成長因子、および抗生物質を含むダルベツコ修飾イー グル培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ　Ｍｅｄｉｕ ｍ；　ＤＭ■）で３回の洗浄処理を施し、さらにこの培地で２４から４８時間培 養したの後、細胞を収集し、培養液上清中に含まれる逆転写酵素活性について上 記実施例３にもとづいて調べること。

（３）試験管内でのフレンドウィルス誘導膵臓腫（Ｆｒｉｅｎｄ　Ｖｉｒｕｓ− ｉｎｄｕｃｅｄ　ｍｐｌｅｎｏ＋ａｅｇａｌｙ）に対する阻害効果（化合物を感 染後に１−２時間間隔で投与すること以外は、実施例１と同じ）。

これらの化合物の合成および（または）単離に関しては上記した。

これらの試験の結果は、下記の第９表に示した。

（以下、余白） 第９表 ヒペリシン０．０６　０．２　０．１２ヒペリシン→ジカルボン酸　＞　ｉｏｏ 　−（ＷＩＳ−１） ヒペリシン逼ツアセテート　０．８５　−　−（ＷＩＳ−６） ヒペリシンー＼キサアセテート１２．９０　＞１９９デスメチルヒペリシン　０ ．０７　２　１？７信ｌ５−３） デスオキソヒペリシン　＞　２１　＞　３１６値ｌ５−５） デスオキソヒペリシン　６．９０　＞　２４２ヒドロキシメチノド　＞　４１　 １４５アンスラキノン アンスラキノン　＞　５１　２６７ ビアンスロン　＞　２６　＞　１００　９８上記第９表に示された結果は、ＥＣ ，。濃度で示されている。すななち、　ＥＣ，。濃度とはマイクロモル濃度での ウィルス５０％阻害を誘発する有効量である。

上記第９表に示された結果から明らかなように、類似体間で有効量が異なる。ヒ ペリシン、シュードヒペリシンおよびデスメチルヒペリシンのみが複数の試験に おいて高活性を示した。また、ヒペリシンからカルボニル基を取り除いたもの（ すなわち、デスオキソヒペリシン）では、試験管内逆転写酵素活性阻害効果に関 して顕著な減少が認められた。

この活性の減少は、ヒペリシンのへキサアセテート誘導体とデスオキソヘキサア セテート誘導体とを比較した場合においても明らかである。これらの知見から、 キノン構造（特に、ナフトジアンスロン（ｎａｐｈｔｈｏｄｉａｎｔｈｒｏｎｅ 　）骨格上にある場合）が芳香族多環状ジオン（ｄｉｏｎｅ）の抗ウィルス活性 に重要であることが示唆される。　さらに、メチル側鎖をカルボキシル基、アセ トキシ基、またはヒドロキシ基のようなより極性の高い基によって置換すること によってヒペリンジカルボン酸と１、ヒペリシンのジおよびヘキサアセテート誘 導体とにおいて観察された抗ウィルス活性を減少させることができる。

（以下、余白） 国際調査報告 リミテッド 合衆国　ニューヨーク　ニューヨーク　イースト　１５ス

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．ウィルスに感染した哺乳動物の処置（治療）のための方法であって、該方法 は式（Ｉ）：（Ｉ）▲数式、化学式、表等があります▼（式中、ｎは１または２ である；Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｊはそれぞれ水素、ヒドロキシ、低 級アルキル（Ｃ１−Ｃ４）、アリル、アリルアルキル、アリルアミノ、低級アル ケン、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、ハロゲン、カルボキシ、アシル（アロ マテイックまたはアリファテイック）、アミノ、アシルオキシ、アルコキシカル ボヒル、アリルオキシカルボニル（それぞれのものは置換、または未置換される ）、そして二量体形成結合からなる群から選択されるものである；ＢとＧは（ａ ）酸素が付加される炭素環にケト基を形成する酸素；（ｂ）２つの水素原子；（ ｃ）一つの水素原子と一つのべルオロキシ基；（ｄ）アリル；（ｅ）シアノアル ケニル；（ｈ）アリルアルケニル；（ｉ）低級アルキル；（ｊ）アルケニル；（ ｋ）アシル；それぞれのものは置換または未置換される；そして（１）二量体ま たは単量体形成結合からなる群から選択されるものである；ＡとＢ、ＢとＣ、Ａ とＪ、ＣとＤ、ＤとＥ、ＥとＦ、ＦとＧ、ＧとＨ、ＨとＩ、ＩとＪの組み合わせ のうち一つまたそれ以上は、５ないし７個の炭素原子を有するアロマテイック、 アリサイクリックまたヘテロサイクリック環を形成するために結合しており、前 記環は付加的にさらに置換される；前記式において三つの環は飽和可能なＡ、Ｂ 、Ｃ、Ｈ、Ｇ、Ｆに隣接した環炭素原子の一つまたはそれ以上を形成する特定の 結合を除くアロマテイックである；ｎ＝２のとき、少なくともＨ、Ｇ、Ｆのうち の一つ、または少なくともＡ、Ｂ、Ｃの一つは結合および（ｉ）ＤとＥ（ｉｉ） ＪとＩのどちらかあるいは両方が付加的に炭素原子に隣接した５ないし７個の原 子を有するアロマテイックまたはアリサイクリックまたはヘテロサイクリック環 を形成する） によって表わされる化合物からなる群から選択される化合物の前記治療に必要な 有効量を前記哺乳動物に投与することを特徴とするウィルス感染に対する処置方 法およびそのための組成物。
2. ２．請求の範囲第１項記載の方法において、前記化合物は非経口的に投与される ことを特徴とするウィルス感染に対する処置方法およびそのための組成物。
3. ３．請求の範囲第１項記載の方法において、前記化合物は経口的に投与されるこ とを特徴とするウィルス感染に対する処置方法およびそのための組成物。
4. ４．請求の範囲第１項記載の方法において、前記ウィルスはヒト免疫不全ウィル スであることを特徴とするウィルス感染に対する処置方法およびそのための組成 物。
5. ５．請求の範囲第１項記載の方法において、前記化合物とともにヌクレオシド類 似体の有効量の投与を含むことを特徴とするウィルス感染に対する処置方法およ びそのための組成物。
6. ６．請求の範囲第６項記載の方法において、前記ヌクレオシド類似体はアジドチ ミジンであることを特徴とするウィルス感染に対する処置方法およびそのための 組成物。
7. ７．ウィルスに感染した哺乳動物を処置するための薬剤学的処方であって、該処 方は式（Ｉ）：（Ｉ）▲数式、化学式、表等があります▼（式中、ｎは１または ２である；Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｊはそれぞれ水素、ヒドロキシ、 低級アルキル（Ｃ１−Ｃ４）、アリル、アリルアルキル、アリルアミノ、低級ア ルケン、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、ハロゲン、カルボキシ、アシル（ア ロマテイックまたはアリファテイック）、アミノ、アシルオキシ、アルコキシカ ルボヒル、アリルオキシカルボニル（それぞれのものは置換、または未置換され る）、そして二量体形成結合からなる群から選択されるものである；ＢとＧは（ ａ）酸素が付加される炭素環にケト基を形成する酸素；（ｂ）２つの水素原子； （ｃ）一つの水素原子と一つのべルオロキシ基；（ｄ）アリル；（ｅ）シアノア ルケニル；（ｈ）アリルアルケニル；（ｉ）低級アルキル；（ｊ）アルケニル； （ｋ）アシル；それぞれのものは置換または未置換される；そして（１）二量体 または単量体形成結合からなる群から選択されるものである；ＡとＢ、ＢとＣ、 ＡとＪ、ＣとＤ、ＤとＥ、ＥとＦ、ＦとＧ、ＧとＨ、ＨとＩ、ＩとＪの組み合わ せのうち一つまたそれ以上は、５ないし７個の炭素原子を有するアロマテイック 、アリサイクリックまたヘテロサイクリック環を形成するために結合しており、 前記環は付加的にさらに置換される；前記式において三つの環は飽和可能なＡ、 Ｂ、Ｃ、Ｈ、Ｇ、Ｆに隣接した環炭素原子の一つまたはそれ以上を形成する特定 の結合を除くアロマテイックである；ｎ＝２のとき、少なくともＨ、Ｇ、Ｆのう ちの一つ、または少なくともＡ、Ｂ、Ｃの一つは結合および（ｉ）ＤとＥ（ｉｉ ）ＪとＩのどちらかあるいは両方が付加的に炭素原子に隣接した５ないし７個の 原子を有するアロマテイックまたはアリサイクリックまたはヘテロサイクリック 環を形成する；） によって表わされる化合物からなる群から選択される化合物の有効量と、 前記式（Ｉ）の化合物の異性体、同族体、類似体、誘導体および塩含むこおよび それらの混合物と、 薬剤学的に許容される担体または希釈体とを含むことを特徴とするウィルスに感 染した哺乳動物を処置するための薬剤学的処方。
8. ８．請求の範囲第７項記載の薬剤学的処方において、該処方は非経口的投与量の 形態を含むことを特徴とするウィルスに感染した哺乳動物を処置するための薬剤 学的処方。
9. ９．請求の範囲第７項記載の薬剤学的処方において、該処方は経口的投与量の形 態を含むことを特徴とするウィルスに感染した哺乳動物を処置するための薬剤学 的処方。
10. １０．請求の範囲第７項記載の薬剤学的処方において、該処方はヌクレオシド類 似体の有効量を含むことを特徴とするウィルスに感染した哺乳動物を処置するた めの薬剤学的処方。
11. １１．請求の範囲第１０項記載の薬剤学的処方において、前記ヌクレオシド類似 体はアジドチジンであることを特徴とするウィルスに感染した哺乳動物を処置す るための薬剤学的処方。
12. １２．デキソキソヒペリシンを含むことを特徴とするウィルス感染に対する処置 のための組成物。