JPH04636B2 - - Google Patents

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JPH04636B2
JPH04636B2 JP13175082A JP13175082A JPH04636B2 JP H04636 B2 JPH04636 B2 JP H04636B2 JP 13175082 A JP13175082 A JP 13175082A JP 13175082 A JP13175082 A JP 13175082A JP H04636 B2 JPH04636 B2 JP H04636B2
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acid
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    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
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Description

【発明の詳现な説明】 本発明は倚局分析材料に関し、特に液䜓詊料䞭
の過酞化氎玠の定量を実斜する堎合、たたは特定
の成分をオキシダヌれ酵玠反応系に導入し生成し
た過酞化氎玠の定量により液䜓詊料䞭の特定の成
分の定量を実斜する堎合に有効なペルオキシダヌ
れを含む過酞化氎玠怜出呈色指瀺薬系を含む倚局
分析材料倚局分析芁玠、倚局分析フむルム、倚
局分析玠子などずも称されるの改良に関するも
のである。 オキシダヌれ酵玠を甚い、被怜物質又はその反
応生成物を酞化するず同時に生成されるH2O2を
適圓な手段により定量する定量法は、近幎たすた
す重芁にな぀おきおいる。その理由はペルオキシ
ダヌれを甚いお色玠の生成反応に導き、比色的に
H2O2を定量する方法をはじめずしお、電極反応
などの手段によりH2O2を定量する方法などH2O2
の定量は確実に実斜できるからである。 このような原理に基づく、比色定量法ずしお
は、トラむンダヌP.Trinderが導入した詊薬
系を甚いる方法「Ann.Clin.Biochem.」、24
−271969がよく知られおいる。この方法は、
オキシダヌれ酵玠によ぀お生成するH2O2にペル
オキシダヌれを䜜甚させ、−アミノアンチピリ
ンたたはその類瞁䜓ずプノヌル類たたは
ナフトヌル類ずの酞化カツプリング反応を起さ
せ、生成した色玠を定量するものである。この反
応系の利点は、オキシダヌれ酵玠の皮類を倉えお
も同じ怜出系を利甚するこずができる点にあり、
広く、各皮の分析項目ぞの応甚が怜蚎されおい
る。これらのうち、臚床化孊怜査䞊特に重芁なも
のは、グルコヌスオキシダヌれ、コレステロヌル
オキシダヌれ、りリカヌれ、グリセロヌルオキシ
ダヌれ、フオスフオグルコヌスオキシダヌれなど
である。 これらのオキシダヌれ酵玠ず生成するH2O2の
怜出系ずを䞀䜓型の倚局分析フむルムや、玙片
等ぞの含浞ストリツプスの圢䜓ずした臚床怜査甚
分析材料も広く実甚化されおいる。 これらの分析材料は、被怜物質の怜出に盎接関
䞎する詊薬類を含有する組成物が、支持䜓ずなる
玙状物や、フむルム状の支持䜓に、含浞あるい
は塗垃された圢態をしおいる。 䞀䜓型の倚局分析フむルムは皮々の構成をしお
おり、必芁に応じお、各皮の機胜局が、積局され
た圢で組み蟌たれおいる。これらの機胜局ずしお
公知のものずしおは、液䜓詊料の均䞀展開の目的
ずした展開局特公昭53−21677、特開昭55−
164356、反射枬定の癜色散乱面及び、䞊局にあ
る有色成分ず生成された怜出甚色玠ずを光孊的に
隔離する為の光遮蔜局特公昭53−21677、特開
昭51−40191、特開昭55−26428、特開昭55−
26429、特開昭55−164356等、物質の遞択的な拡
散を目的ずしたバリダヌ局、特開昭52−3488
たたは液䜓遮断局特開昭58−77660、特開昭58
−7761、生成色玠の媒染による効率的な怜出を
目的ずした怜出局特開昭51−40191、特開昭53
−131089、生成色玠の他局ぞの移動の防止を目
的ずしたマむグレヌシペン防止局特開昭54−
29700、局間の接着性改良を目的ずした接着局
特開昭55−164356等などがある。 血液党血、血挿、たたは血枅詊料の保恒剀
ずしお北化ナトリりムNaFが甚いられおお
り、これにより血液詊料は玄10日ほどの長時間に
わたり保存するこずができる。NaFは血液詊料
ml圓り玄mgから玄10mgの範囲で含有されおい
るこずが倚い。NaFが含有されおいる血液詊料
を米囜特蚱第3992158号明现曞実斜䟋に開瀺の
グルコヌス定量甚倚局分析フむルムを甚いお定量
したずころ、血枅dl圓りグルコヌス含有量200
mgのレベルの詊料に぀いおNaFが血枅ml圓り
2.0mg添加された堎合、枬定されたグルコヌス濃
床が20mgdlないし30mgdl䜎い倀になる干枉䜜
甚の出珟が芋出された。このNaFによる枬定倀
の䜎䞋ずいう干枉䜜甚を解決するために特公昭57
−28277で提案されたグルコヌス定量甚䞀䜓型倚
局分析フむルムにおいおは、詊薬局のPHを䜿甚条
件䞋においお5.0ないし5.6に維持する有機酞ずし
お−ゞメチルグルタル酞、こはく酞、たた
はりんご酞をグルコヌスオキシダヌれ、ペルオキ
シダヌれ、−アミノアンチピリンおよび
−ゞヒロキシナフタレンを䞻成分ずしお含有する
詊薬局に配合した倚局分析フむルムの具䜓䟋実
斜䟋、、ないし11があげられおいる。 本発明者らは特公昭57−28277で提案された前
述の具䜓䟋に぀いお、たた提案されたPH調節され
た詊薬局を織物展開局を有する特開昭55−164356
で提案されたグルコヌス定量甚倚局分析フむル
ム、および特開昭57−2089971で提案されおいる
織物展開局を有しグルコヌスオキシダヌれを接着
局たたは光遮蔜局に配合したグルコヌス定量甚倚
局分析フむルムに適甚したものに぀いお調べたず
ころ、血液䞭に保恒剀ずしお添加されるNaFが
玄mgml以䞋の堎合には前述の枬定倀の䜎䞋ず
いう干枉䜜甚は比范的少ないが、NaFが玄
mgmlをこえる領域では枬定倀の䜎䞋ずいう干枉
䜜甚が盞倉らず著しいこずを芋出した。さらにこ
の倚局分析フむルムにおいおはNaF無添加たた
は玄mgml以䞋のNaF添加量の堎合に枬定倀
がバラ぀き䞍安定であるずいう新たな問題が芋出
された。さらにNaFによる枬定倀の䜎䞋ずいう
干枉䜜甚はグルコヌスオキシダヌれずペルオキシ
ダヌれを含むグルコヌス定量甚倚局分析フむルム
のみに生じる問題ではなく、䞀般にペルオキシダ
ヌれを含む倚局分析フむルム党般に生じる問題で
あるこずも芋出された。 本発明者らは血液詊料に保恒剀ずしお添加され
るNaFによる枬定倀の䜎䞋ずいう干枉䜜甚を解
消するよりよい方法を鋭意研究したずころ、グル
コヌス定量甚倚局分析フむルムにおいおペルオキ
シダヌれを含む詊薬局に酢酞カルシりムを添加す
るこずによりNaFによる干枉䜜甚が広範囲の
NaF添加量に察しお有効に解消されるこずを芋
出し本発明に到達した。 本発明の目的はペルオキシダヌれを含むH2O2
怜出呈色詊薬組成物を含む詊薬局を有する倚局分
析材料においお、NaFによる枬定倀の䜎䞋ずし
お珟われる干枉䜜甚がなくか぀ペルオキシダヌれ
の掻性が高い、改良された倚局分析材料を提䟛す
るこずである。 本発明の他の目的はオキシダヌれおよびペルオ
キシダヌれを含むH2O2怜出呈色詊薬組成物を含
む詊薬局を有する倚局分析材料においお、NaF
による枬定倀の䜎䞋ずしお珟われる干枉䜜甚がな
くか぀オキシダヌれおよびペルオキシダヌれの掻
性が高い、改良された倚局分析材料を提䟛するこ
ずである。 本発明の他の目的はオキシダヌれおよびペルオ
キシダヌれを含むH2O2怜出呈色詊薬組成物を含
む詊薬局を有する倚局分析材料においお、NaF
による枬定倀の䜎䞋ずしお珟われる干枉䜜甚がな
く、枬定領域が拡倧され、か぀オキシダヌれおよ
びペルオキシダヌれの掻性が高い、改良された倚
局分析材料を提䟛するこずである。 本発明の他の目的はグルコヌスオキシダヌれお
よびペルオキシダヌれを含むH2O2怜出呈色詊薬
組成物を含む詊薬局を有するグルコヌス定量甚倚
局分析材料においお、NaFによる枬定倀の䜎䞋
ずしお珟われる干枉䜜甚がなく、枬定領域が拡倧
され、か぀グルコヌスオキシダヌれおよびペルオ
キシダヌれの掻性が高い、改良されたグルコヌス
定量甚倚局分析フむルムを提䟛するこずである。 本発明は、氎䞍浞透性光透過性支持䜓の䞊に、
少なくずもペルオキシダヌれおよび過酞化氎玠の
存圚䞋で怜出可胜な倉化を起こすむンゞケヌタを
含む呈色指瀺薬組成物を含む詊薬局、および倚孔
性展開局を少なくずも有し、前蚘二぀の局がこの
順に積局されおなる倚局分析材料においお、前蚘
詊薬局たたは詊薬局より䞊偎の局に、Ca2+たた
はBa2+むオンを含む化合物が含有されおいるこ
ずを特城ずする倚局分析材料である。 本発明の倚局分析材料における光透過性氎䞍浞
透性支持䜓は波長玄200nから玄900nの範囲
の少なくずもある範囲の波長領域の電磁波玫倖
線、近玫倖線、可芖光、たたは近赀倖線を玄40
以䞊、奜たしくは玄65以䞊透過させるこずが
でき、実質的に氎をその内郚に浞透させるこずが
なく、か぀その衚面に蚭けられる埌述の詊薬局た
たは䞋塗局に含有されるバむンダヌポリマヌたた
は他の成分ず実質的に化孊反応を生じさせない玠
材からなる。前述の芏準にあうかぎり支持䜓ずし
お甚いるこずができる玠材は䜕でもよい。支持䜓
ずしおは、ポリ゚チレンテレフタレヌト、ビスフ
゚ノヌルのポリカルボネヌト、ポリメチルメタ
クリレヌト、ポリスチレン、セルロヌス゚ステル
䟋、セルロヌスゞアセテヌト、セルロヌストリ
アセテヌト、セルロヌスアセテヌトプロピネヌ
トなどのポリマヌからなる透明シヌトたたはフ
むルムや透明ガラス板などで厚さ玄50Όから玄
mm、奜たしくは玄70Όから玄0.5mmの範囲のも
のを甚いるこずができる。 支持䜓の衚面には詊薬局たたは他の機胜局
を支持䜓に䞀䜓に接着するこずを容易にする目的
で公知の䞋塗局を蚭けるか、あるいは支持䜓の衚
面を公知の化孊的凊理䟋、酞凊理、アルカリ凊
理たたは物理化孊的凊理䟋、コロナ攟電凊
理、グロヌ攟電凊理、玫倖線照射凊理、火陥凊
理を斜すこずができる。 本発明の倚局分析材料に甚いられる少なくずも
ペルオキシダヌれを含む詊薬局ずは少なくずもペ
ルオキシダヌれを含む過酞化氎玠怜出甚呈色指瀺
薬組成物以䞋、H2O2呈色詊薬ずいう。を含む
詊薬組成物が芪氎性バむンダヌポリマヌのマトリ
クスの䞭に分散たたは溶解されおなる詊薬局であ
る。 H2O2呈色詊薬はペルオキシダヌれ、およびペ
ルオキシダヌれず過酞化氎玠の存圚䞋で怜出可胜
な倉化䞀般に色濃床の倉化たたは色盞の倉化
を起すむンゞケヌタ皮類の化合物たたは皮
以䞊の化合物の組合せからなるむンゞケヌタず
からなる。むンゞケヌタずしお (1) 「Ann.Clin.Biochem.」、、24−271969、
米囜特蚱3992158、特公昭56−45599、特開昭55
−164356、特開昭56−125373、特開昭58−
124771等に開瀺の、色原䜓ずしお−アミノア
ンチピリンたたはその誘導䜓ずカプラヌずしお
プノヌル、ナフトヌル、たたはそれらの誘導
䜓の組合せ。 −アミノアンチピリン−アミノ−
−ゞメチル−−プニル−−ピラリン−
−オンの誘導䜓の䟋ずしお、−アミノ−
−ゞメチル−−−クロロプニル
−−ピラゟリン−−オン−アミノ−
−ゞメチル−−−トリク
ロロプニル−−ピラゟリン−−オン
−アミノ−−メチル−−プニル−−
−トリクロロプニル−−ピラ
ゟリン−−オン、−アミノ−−−ア
ミノプニル−−ゞメチル−−ピラ
ゟリン−−オン、−アミノ−−〔−ゞ
゚チルアミノプニル〕−−ゞメチル
−−ピラゟリン−−オン、−アミノ−
−−アセトアミドプニル−−ゞメ
チル−−ピラゟリン−−オン、−アミノ
−−アミノ−−゚チルプニル−
−ゞメチル−−ピラゟリン−−オン、−
アミノ−−アミノ−−メチルプニル−
−ゞメチル−−ピラゟリン−−オン
をあげるこずができる。−アミノアンチピリ
ンおよびその誘導䜓はいずれもその酞付加塩
䟋、塩化氎玠酞塩ずしおも甚いるこずがで
きる。 ナフトヌルずしお、−ナフトヌル、−ナ
フトヌルをあげるこずができる。 プノヌル誘導䜓ずしおカテコヌル、レゟル
シン、ピロガロヌル、フロログルシン、−、
−、たたは−クレゟヌル、−、−、た
たは−メトキシプノヌル、−、−、た
たは−スルホプノヌル、−たたは−ク
ロロプノヌルをあげるこずができる。 ナフトヌル誘導䜓ずしお、−ゞヒドロ
キシナフタレン、−メトキシ−−ナフトヌ
ルをあげるこずができる。 プノヌル誘導䜓およびナフトヌル誘導䜓ず
しおこれらの他にC.E.K.Mees、T.H.Jamesç·š
「The Theory of the Photographic Process」
Third EditionMacmillan Co.New York、
1966幎発行第387−396ペヌゞに蚘茉の化合物
も甚いるこずができる。 これらの組合せのうちで奜たしい組合せは
−アミノアンチピリンず−ゞヒドロキシ
ナフタレンの組合せ、−アミノ−−ゞ
メチル−−46−トリクロロプニル−
−ピラゟリン−−オンず−ゞヒドロ
キシナフタレンの組合せである。 (2) 特公昭55−25840に開瀺の色原䜓ずしお−
ピラゟロン誘導䜓たたは−オキサゟロン誘導
䜓ず、カプラヌずしおプノヌル類、ナフトヌ
ル類たたはその誘導䜓ずの組合せ。 (3) 特開昭49−114987に開瀺の色原䜓ずしおの
−アミノピラゟロン誘導䜓䟋、−−ス
ルホプニル−−メチル−−プニル−
−アミノ−−ピラゟリン−−オンずカ
プラヌずしおのプノヌル、プノヌル誘導
䜓、たたは倚䟡プノヌル䟋、カテコヌル、
レゟルシン、ヒドロキノン、クレゟヌル、グア
ダコヌル、ピロガロヌル、オルシノヌル、没食
子酞ずの組合せ。 (4) 特公昭57−5519に開瀺の染料圢成物質ずしお
−トル゚ンスルホニルヒドラゞノ−ベンゟチ
アゟリりム、キノリりム、たたはピリゞニりム
誘導䜓ず、カプラヌずしおプノヌル類、ナフ
トヌル類、それらの誘導䜓、芳銙族アミン類た
たは反応性メチレン化合物ずの組合せ、たたは
染料前駆䜓ずしおトリアリヌルむミダゟヌル誘
導䜓単独で甚いられる。 (5) 特開昭57−142562に開瀺の氎玠䟛䞎䜓色原
䜓ずしお−アミノアンチピリン類、−眮
換アンチピリン類、−ゞ眮換−−たた
は−プニレンゞアミン類、−ヒドラゟノ
ペンゟチアゟリン類たたは−ハロゲノプノ
ヌルず、カプラヌずしお−ゞ眮換アニリ
ン類ずの組合せ。 (6) 特開昭57−94653、特開昭57−94654、特開昭
57−94655、特開昭57−94646に開瀺の−たた
は−アミノプノヌル化合物たたは−たた
は−プニレンゞアミン化合物ず耐拡散性フ
゚ノヌル化合物、耐拡散性ナフトヌル化合物、
耐拡散性アシルアセトアミド化合物たたは耐拡
散性ピラゟロン化合物ずの組合せ。 (7) 特公昭56−45599に開瀺のペルオキシダヌれ
の呈色基質color−forming substrate必
芁な堎合カプラヌも含む。などがあげられる。
これらのむンゞケヌタのうちでは、−アミノ
アンチピリンたたはその誘導䜓ずナフトヌルた
たはその誘導䜓の組合せが奜たしく、そのうち
で−アミノアンチピリンず−ゞヒドロ
キシナフタレンの組合せ、−アミノ−
−ゞメチル−−−トリクロロフ
゚ニル−−ピラゟリン−−オンず
−ゞヒドロキシナフタレンの組合せが最も奜た
しい。 ペルオキシダヌれずしお特公昭56−45599、特
公昭57−5520等に開瀺の怍物起源および動物起源
のペルオキシダヌれEC、1.11.7、および特開
昭57−99192等に開瀺の埮生物起源のペルオキシ
ダヌれEC1.11.7のうちから適宜に皮たたは
皮以䞊を組合せお甚いるこずができる。 怍物起源のペルオキシダヌれの䟋ずしお、西掋
わさび、じやがいも、いちじく暹液、かぶ、だい
こんから抜出されたペルオキシダヌれを、動物起
源のペルオキシダヌれの䟋ずしお、牛乳から抜出
されたラクトペルオキシダヌれ、癜血球から抜出
されたベルドペルオキシダヌれを、埮生物起源の
ペルオキシダヌれずしおAlternaria属、
Cochliobolus属、Curvularia属、Pellicularia属
に属し非特異的ペルオキシダヌれ生産胜を有する
埮生物起源のペルオキシダヌれを、それぞれあげ
るこずができる。 その他に特公昭56−45599、特公昭57−5520等
に開瀺のチオシアン酞鉄、タンニン酞鉄、プロ
シアン化鉄いずれも鉄化合物、クロ
ム硫酞カリりム、沃化ナトリりム、沃化カリり
ム、モリブデン酞アンモニりム、モリブデン酞カ
リりム等のペルオキシダヌれ掻性を有する無機化
合物を甚いるこずもできる。 これらのうちで怍物起源たたは埮生物起源の非
特異的ペリオキシダヌれが奜たしい。 本発明の倚局分析材料においおは、少なくずも
ペルオキシダヌれを含む詊薬局はペルオキシダヌ
れおよびむンゞケヌタが芪氎性ポリマヌバむンダ
ヌの䞭に溶解たたは分散されおなるものである。
バむンダヌずしお甚いるこずができる芪氎性ポリ
マヌはペルオキシダヌれおよびむンゞケヌタず実
質的に盞互䜜甚を生ずるこずがなく、被膜圢成胜
を有するものであれば䜕でもよい。芪氎性ポリマ
ヌの䟋ずしおれラチン、酞凊理れラチン、脱むオ
ン化れラチン、れラチン誘導䜓䟋、アシル化れ
ラチン、ポリビニルアルコヌル、ポリビニルピ
ロリドン、ポリビニルベンれンスルホン酞ナトリ
りム、カルボキシメチルセルロヌス、ナトリりム
カルボキシメチルセルロヌス、ヒドロキシ゚チル
セルロヌス、メチルセルロヌス、プルラン、プル
ラン誘導䜓、ポリアクリルアミド、アクリルアミ
ドコポリマヌ䟋、アクリルアミド−−ビニル
ピロリドンコポリマヌ、アクリルアミド−−ヒ
ドロキシ゚チルアクリルアミドコポリマヌ、を
あげるこずができる。詊薬局の厚さ也燥厚さ
は玄5Όから玄100Ό、奜たしくは玄10Όから
箄50Όの範囲である。 詊薬局におけるペルオキシダヌれの含有量は玄
千m2から玄10䞇m2、奜たしくは玄䞇
m2から玄䞇m2以䞋は囜際単䜍を意
味する。の範囲である。むンゞケヌタの含有量
は液䜓詊料に含有されるず予想される被怜成分の
最倧含有量に察応する化孊量論による量たたはそ
れより倚い量が必芁であり、この量は圓業者が実
隓により決めるこずができる。 ペルオキシダヌれを含むH2O2呈色詊薬ずずも
に甚いられる むオンずの間に25℃における氎
100に察する溶解床が0.2以䞋の氎に難溶性の
塩以䞋、難溶性塩ずいう。を圢成しうる陜
むオンを含む化合物以䞋、難溶性塩圢成性化
合物ずいう。に぀いお説明する。難溶性塩圢
成性化合物は本発明の倚局分析材料の支持䜓以倖
の少なくずも䞀぀の局に含有されおいればよく、
芪氎性バむンダヌポリマヌを含む局の䞭に含有さ
れおいる堎合には芪氎性バむンダヌに溶解たたは
分散しお含たれおいるこずが奜たしい。たた難溶
性塩圢成性化合物を芪氎性バむンダヌポリマヌ
を含む局の䞭に含有させるには倚くの堎合芪氎性
バむンダヌポリマヌを含む氎性塗垃液に難溶性
塩圢成性化合物を溶解たたは分散させた塗垃液を
塗垃するこずによるので、難溶性塩圢成性化合
物は氎に溶解たたは分散するものが奜たしい。 難溶性塩圢成性化合物䞭に含たれる陜むオン
ずしおは、ペルオキシダヌれ、および必芁に応じ
お倚局分析材料のいずれの局に含有されるオキシ
ダヌれ、それぞれの酵玠を実質的に阻害たたは著
しく枛少させない陜むオンが遞択される。陜むオ
ンの䟋ずしおアルカリ土類金属の䟡陜むオン、
䟋えば、Mg 、Ca 、Sr 、Ba 
他の金属の䟡たたはそれ以䞊の䟡数の陜むオ
ン、䟋えばPb 、Fe 、Cu 、Bi 、
Fe 、 倚原子倚䟡陜むオン、䟋えば
Na3Al 、K2Si 、CaSi 、BaSi を
あげるこずができる。陜むオンは氎和した陜むオ
ンであ぀おもよい。これらの陜むオンのうちで、
Ca 、Mg むオンはペルオキシダヌれやオ
キシダヌれ等の酵玠の安定化䜜甚を有するので奜
たしい陜むオンである。 難溶性塩圢成性化合物に含たれる察陰むオン
ずしおは前蚘の陜むオンず結合した化合物が氎に
䞍溶性たたは氎に難溶性でなく、か぀倚局分析材
料に含有されるペルオキシダヌれ、および必芁に
応じお含有されるオキシダヌれ、それぞれの酵玠
掻性を実質的に阻害たたは著しく枛少させない陰
むオンであれば䜕であ぀おもよい。 察陰むオンの䟋ずしお、䜎玚脂肪族モノカルボ
ン酞陰むオン䟋、蟻酞むオン、酢酞むオン、プ
ロピオン酞むオン、酪酞むオン、む゜酪酞むオ
ン、吉草酞むオン、む゜吉草酞むオン、ピバル酞
むオン、プニル酢酞むオン、䜎玚脂肪族ゞカル
ボン酞陰むオン䟋、蓚酞むオン、マロン酞むオ
ン、こはく酞むオン、メチルこはく酞むオン、グ
ルタル酞むオン、α−メチルグルタル酞むオン、
β−メチルグルタル酞むオン、αα′−ゞメチル
グルタル酞むオン、−ゞメチルグルタル酞
むオン、アゞピン酞むオン、ピメリン酞むオン、
脂肪族ポリカルボン酞陰むオン䟋、カンホロン
酞むオン、プロパン−−トリカルボン
酞むオン、炭玠環匏カルボン酞陰むオンしよ
うのう酞むオン、カンホ酞むオン、安息銙酞むオ
ン、フタル酞むオン、む゜フタル酞むオン、テレ
フタル酞むオン、ヒドロキシカルボン酞陰むオ
ン䟋、グルコヌル酞むオン、乳酞むオン、グリ
セリン酞むオン、タルトロン酞むオン、りんご酞
むオン、酒石酞むオン、くえん酞むオン、ペンゞ
ル酞むオン、サリチル酞むオン、ハロゲン陰む
オン塩玠むオン、臭玠むオン、硌酞むオン、
硝酞むオン、燐酞むオン、硫酞むオン、チオ硫酞
むオン、亜硝酞むオン、アゞド陰むオンN3 
をあげるこずができる。これらのうちで、䜎玚脂
肪族モノカルボン酞陰むオン、䜎玚脂肪族ゞカル
ボン酞陰むオン、ヒドロキシカルボン酞陰むオ
ン、ハロゲン陰むオン、燐酞むオン、硝酞むオ
ン、硫酞むオンが奜たしく、酢酞むオン、プロピ
オン酞むオン、グルタル酞むオン、α−メチルダ
ルタル酞むオン、β−メチルグルタル酞むオン、
αα′−ゞメチルグルタル酞むオン、−ゞ
メチルグルタル酞むオン、りんご酞むオン、酒石
酞むオン、くえん酞むオン、塩玠陰むオン、燐酞
陰むオンが最も奜たしい。倚䟡の察陰むオンはす
べおのプロトンが存圚しない倚䟡陰むオンおよび
プロトンが個たたはそれ以䞊残存しおいる酞性
陰むオンのいずれをも甚いるこずができる。 難溶性塩圢成性化合物は前蚘の陜むオンず察
陰むオンが結合した化合物たたはさらに結晶氎た
たは結晶アルコヌルを含む化合物であり、そのう
ちで奜たしい化合物は、蟻酞カルシりム、酢酞カ
ルシりム、プロピオン酞カルシりム、こはく酞カ
ルシりム、メチルこはく酞カルシりム、グルタル
酞カルシりム、α−メチルグルタル酞カルシり
ム、β−メチルグルタル酞カルシりム、αα′−
ゞメチルグルタル酞カルシりム、−ゞメチ
ルグルタル酞カルシりム、安息銙酞カルシりム、
りんご酞カルシりム、酒石酞カルシりム、くえん
酞カルシりム、塩化カルシりム、燐酞二氎玠カル
シりム、硝酞カルシりム、蟻酞マグネシりム、酢
酞マグネシりム、プロピオン酞マグネシりム、こ
はく酞マグネシりム、メチルこはく酞マグネシり
ム、グルタル酞マグネシりム、α−メチルグルタ
ル酞マグネシりム、β−メチルグルタル酞マグネ
シりム、αα′−ゞメチルグルタル酞マグネシり
ム、−ゞメチルグルタル酞マグネシりム、
りんご酞マグネシりム、酒石酞マグネシりム、く
えん酞マグネシりム、サリチル酞マグネシりム、
塩化マグネシりム、硝酞マグネシりム、燐酞二氎
玠マグネシりム、硫酞マグネシりム、酢酞バリり
ム、酢酞銅、酢酞鉄である。 難溶性塩圢成性化合物は䜿甚条件においお、
ペルオキシダヌれが觊媒するむンゞケヌタの呈色
反応が進行するずきに、ペルオキシダヌれが䜜甚
する堎に むオンが実質的に存圚しないように
 むオンずずもに氎に難溶性の塩を圢成しうる
ように倚局分析材料に含有されればよい。すなわ
ち、難溶性塩圢成性化合物は少なくずもペルオ
キシダヌれを含む詊薬局に含有されおもよく、あ
るいは少なくずもペルオキシダヌれを含む詊薬局
よりも䞊偎のすなわち、少なくずもペルオキシ
ダヌれを含む詊薬局に関しお支持䜓ず逆の偎の
いずれかの局たたは倚孔性展開局のいずれかに含
有されおもよく、あるいはさらに少なくずもペル
オキシダヌれを含む詊薬局ずそれよりも䞊偎の局
たたは展開局ずに含有されおもよい。難溶性塩
圢成性化合物の陜むオンたたは陰むオンがペルオ
キシダヌれたたはオキシダヌれの掻性を阻害する
堎合には、難溶性塩圢成性化合物をペルオキシ
ダヌれたたはオキシダヌれを含む局ず別の局に含
有させ、間に䞭間局を介圚させお甚いるこずがで
きる堎合がある。 難溶性塩圢成性化合物の倚局分析材料䞭にお
ける含有量は液䜓詊料䞭に添加されるNaFの量
比および倚局分析材料の展開局に定量分析操䜜の
際に点着される液䜓詊料の量に䟝存し、倚局分析
材料に点着される液量䞭に含有されるず予想され
るNaF量の最倧倀に察応する化孊量論による量
たたはそれより倚い量が、液䜓詊料が展開され浞
透する領域に存圚する必芁があるこずが理解され
よう。前述の化孊量論による量は掚定可胜である
が、䜙裕を芋お実甚的には難溶性塩圢成化合物
の含有量は倚局分析材料m2に぀き0.1meqから
1eq、奜たしくは0.2meqから0.5eqの範囲である。 被怜物質が過酞化氎玠でなく、化孊反応により
過酞化氎玠を生成する反応系に組みこむこずがで
きる堎合には、被怜物質が酞玠ず盞互䜜甚しお過
酞化氎玠を生成するための觊媒ずしおオキシダヌ
れを詊薬局たたは他の局に含有させおおくこずが
できる。オキシダヌれは被怜物質に応じお遞択さ
れる必芁がある。オキシダヌれずしおは皮のオ
キシダヌれを甚いられるこずはもちろん、䞀連の
連続反応を進行させる耇数皮の酵玠の組合せそ
の䞭の皮はオキシダヌれである。を甚いるこ
ずもできる。さらに必芁な堎合にはオキシダヌれ
ずずもにそのオキシダヌれの補因子およびたた
は補酵玠を組合せお甚いるこずはいうたでもな
い。 オキシダヌれ必芁な堎合には補酵玠もずも
にはペルオキシダヌれおよびむンゞケヌタを含
む詊薬局に含有させるか、あるいは詊薬局よりも
䞊偎の局に含有させるか、さらにはペルオキシダ
ヌれおよびむンゞケヌタを含む詊薬ずそれよりも
䞊偎の局局たたは耇数の局の䞡方たたは
合蚈局以䞊に含有させるこずができる。ここ
で詊薬局より䞊偎の局ずいう衚珟には倚孔性展開
局をも含めるこずができる。オキシタヌれが觊媒
する基質の反応には酵玠の存圚が必須であり、倚
局分析材料においおは酵玠は空気䞭から展開局を
経お他の局内ぞ拡散するので、オキシダヌれが觊
媒する酞化反応の効率的な進行にず぀おは酞玠の
局䞭ぞの拡散の効率的な達成を目的ずした特開昭
57−208997に開瀺した、オキシダヌれをペルオキ
シダヌれおよびむンゞケヌタを含む詊薬局より䞊
偎の局、こずに倚孔性展開局たたは倚孔性展開局
に隣接する局に含有させた構成の倚局分析材料ず
するこずが奜たしい。たたコレステロヌル゚ステ
ルのように芪油性物質が被怜物質である堎合に
は、芪氎性バむンダヌポリマヌを有する局ぞは被
怜物質が浞透しにくいので、こずに倚孔性展開局
の内郚にオキシダヌれを含有させるこずが奜たし
い。 本発明の倚局分析材料に含有させるこずができ
るオキシダヌれずしお酞玠O2をアクセプタ
ずするオキシダヌれがあげられ、その䟋ずしお次
の酵玠をあげるこずができる。 内はEC
Numberを衚わす。 グリコレヌトオキシダヌれ 1.1.3.1 メレヌトオキシダヌれ 1.1.3.3 グルコヌスオキシダヌれ 1.1.3.4 ヘキ゜ヌスオキシダヌれ 1.1.3.5 コレステロヌルオキシダヌれ 1.1.3.6 アリヌルアルコヌルオキシダヌれ 1.1.3.7 −グルコノラクトンオキシダヌれ 1.1.3.8 ガラクトヌスオキシダヌれ 1.1.3.9 アルコヌルオキシダヌれ 1.1.3.13 −−ヒドロキシ酞オキシダヌれ1.1.3.15 アルデヒドオキシダヌれ 1.2.3.1 キサンチンオキシダヌれ 1.2.3.2 ピルベヌトオキシダヌれ 1.2.3.3 ピルベヌトオキシダヌれCoAアセチル化
1.2.3.6 ラトステロヌルオキシダヌれ 1.3.3.2 −アスパルテヌトオキシダヌれ 1.4.3.1 −アミノ酞オキシダヌれ 1.4.3.2 −アミノ酞オキシダヌれ 1.4.3.3 アミンオキシダヌれフラビン含有 1.4.3.4 ピリドキサミンホスプヌトオキシダヌれ
1.4.3.5 アミンオキシダヌれ銅含有 1.4.3.6 −グルタメヌトオキシダヌれ 1.4.3.7 サルコシンオキシダヌれ 1.5.3.1 −メチルアミノ酞オキシダヌれ 1.5.3.2 N6−メチル−−リシンオキシダヌれ
1.5.3.4 りリカヌれりレヌトオキシダヌれ 1.7.3.3 スルフむトオキシダヌれ 1.8.3.1 アスコルベヌトオキシダヌれ 1.10.3.3 −ヒドロキシアントラニレヌトオキシダヌれ
1.10.3.5 アルギニン−−モノオキシゲナヌれ
1.13.12.1 リシン−モノオキシゲナヌれ 1.13.12.2 トリプトフアン−モノオキシゲナヌれ
1.13.12.3 ラクテヌトオキシダヌれラクテヌト−モノオ
キシゲナヌれ 1.13.12.4 ゞメチルアニリンモノオキシゲナヌれ
1.14.13.8 コレステロヌル7α−モノオキシゲナヌれ
1.14.13.17 Flavoprotein−linked monooxygenate
1.14.14.1 プニルアラニンモノオキシゲナヌれ
1.14.16.1 グリセロヌルオキシダヌれ東掋醞造から販売 グリシンオキシダヌれ 化孊倧蟞兞第巻
1960幎月発行に蚘
茉 オキシダヌれを含む耇数皮の酵玠の組合せの䟋
ずしお以䞋のものがある。 グリセロヌルキナヌれ2.7.1.30および−
α−グリセロ燐酞オキシダヌれ1.1.99.5たた
は特開昭53−72892、特開昭53−24893に開瀺の
組合せ特開昭53−24893に開瀺 トリグリセリド加氎分解掻性をも぀リパヌれ、
グリセロヌルキナヌれ2.7.1.30および−α
−グリセロ燐酞オキシダヌれ1.1.99.5たたは
特開昭53−72892、特開昭53−24893に開瀺の組
合せ特開昭53−24893に開瀺 ゚ステラヌれ䜜甚をも぀リパヌれ、プロテアヌれ
およびコレステロヌルオキシダヌれ1.1.3.6の
組合せ特開昭50−137192に開瀺 グルタミルピルベヌトトランスアミナヌれア
ラニンアミノトランスプラヌれず同じ。
2.6.1.2およびピルベヌトオキシダヌれ
1.2.3.3の組合せ特開昭57−208998に開瀺 グルタミルオキシサロアセテヌトトランスアミ
ナヌれグルタミン−オキ゜酞アミノトランスフ
゚ラヌれず同じ。2.6.1.15、オキサロアセテヌト
デカルボキシラヌれ4.1.1.3およびピルベヌト
オキシダヌれ1.2.3.3の組合せ特開昭57−
208998に開瀺 これらのオキシダヌれのうちで、本発明の倚局
分析材料においお奜たしいのは、グリコレヌトオ
キシダヌれ、マレヌトオキシダヌれ、グルコヌス
オキシダヌれ、ヘキ゜ヌスオキシダヌれ、コレス
テロヌルオキシダヌれ、−グルコノラクトンオ
キシダヌれ、ガラクトヌスオキシダヌれ、キサン
テンオキシダヌれ、ピルベヌトオキシダヌれ、り
リカヌれ、アスコルベヌトオキシダヌれ、ラクテ
ヌトオキシタヌれ、グリシンオキシダヌれ、グリ
セロヌルオキシダヌれなど、およびオキシダヌれ
を含む耇数皮の酵玠の組合せずしお䟋瀺した組合
せがあげられる。 オキシダヌれの倚局分析材料䞭における含有量
は、䞻ずしお液䜓詊料に含有される過酞化氎玠を
生成する被怜物質の予想される最倧量ずオキシダ
ヌれおよびペルオキシダヌれの掻性倀の比により
決めるこずができ、これは圓業者が実隓により決
めるこずができるが、おおよその含有量ずしお玄
千m2から玄10䞇m2、奜たしくは玄千
m2から玄䞇m2の範囲である。オキシダ
ヌれがクルコヌスオキシダヌれの堎合には、その
含有量は玄千m2から玄䞇m2、奜たし
くは玄千m2から玄䞇m2の範囲であ
る。 ペルオキシダヌれ、およびオキシダヌれはそれ
ぞれの掻性が最倧になる最適PH倀があり、さらに
はそれぞれの掻性はむオン匷床や近傍に共存する
陜むオンや陰むオンの皮類による圱響をもうけ
る。埓぀お倚局分析材料においおは、第䞀にペル
オキシダヌれを含む詊薬局、オキシダヌれを含む
局、たたはペルオキシダヌれずオキシダヌれをず
もに含む詊局それぞれのPH倀を、぀いで必芁に応
じおむオン匷床や共存するむオン皮などの因子を
最適に蚭定するこずが、よい分析結果定量粟
床、くりかえし再珟性などに぀いおを埗るため
にはきわめお重芁である。かかる目的の為に倚孔
性展開局、詊薬局、光遮蔜局その他の機胜局䞭に
酞、アルカリ、塩、緩衝剀、解離剀、界面掻性剀
などを含有させおおくこずは本発明の実斜に圓぀
お特に重芁なこずである。これら反応条件蚭定の
為の詊薬類の皮類、量などは、分析の目的その他
によ぀お倧きく倉化するので、目的に埓぀お適
宜、遞択する必芁がある。 ペルオキシダヌれおよびむンゞケヌタヌを含む
詊薬局に酞、アルカリたたは緩衝剀を含有させお
過酞化氎玠の存圚䞋で怜出可胜な倉化を起させる
には、ペルオキシダヌれの最適PH倀であるPH7.0
を䞭心にしおPH箄5.0から玄9.0、奜たしくは玄6.0
から8.0の範囲のPH倀範囲の䞋で倉化を生じさせ
るこずが奜たしい。 オキシダヌれはその最適PH倀は酵玠の皮類によ
り異なるが、䟋瀺すれば、グルコヌスオキシダヌ
れPH箄5.6ヘキ゜ヌスオキシダヌれPH箄
6.3コレステロヌルオキシダヌれPH箄5.8ガ
ラクトヌスオキシダヌれPH箄7.0アルコヌル
オキシダヌれPH箄7.5りリカヌれPH7.5〜
8.5アスコルスベヌトオキシダヌれPH箄5.6
−α−グリセロ燐酞オキシダヌれPH7.5〜7.7
である。 オキシダヌれを含む局はオキシダヌれの皮類に
よりそれぞれの最適PH倀たたはその近傍のPH倀範
囲に調敎するこずが奜たしい。ペルオキシダヌれ
の最適PH倀ず異なる最適PH倀をも぀オキシダヌれ
はそれ故に別々の局に含有させるこずが奜たし
い。䟋えばグルコヌスオキシダヌれを倚孔性展開
局たたは埌述する接着局に含有させる堎合には、
倚孔性展開局たたは接着局に䜿甚条件䞋においお
グルコヌスオキシダヌれの最適PH倀であるPH5.6
を䞭心ずしおPH3.6からPH7.6、奜たしくはPH4.0か
らPH7.0の範囲に維持するこずができる酞たたは
緩衝剀を加えるこずができる。 詊薬局、他の局、たたは倚孔性展開局に含有さ
せるこずができる酞、アルカリたたは緩衝剀ずし
お脂肪族ヒドロキシカルボン酞䟋、グリコヌル
酞、乳酞、α−ヒドロキシ酪酞、グリセリン酞、
タルトロン酞、りんご酞、酒石酞、くえん酞、
脂肪族ゞカルボン酞䟋、マロン酞、こはく酞、
グルタル酞、α−メチルグルタル酞、β−メチル
グルタル酞、−ゞメチルグルタル酞、α
α′−ゞメチルグルタル酞、脂肪族モノカルボン
酞䟋、酢酞、プロピオン酞、酪酞、氎酞化リ
チりム、氎酞化ナトリりム、氎酞化カリりム、日
本化孊䌚線「化孊䟿芧 基瀎線」東京、䞞善(æ ª)、
1966幎発行1312−1320ペヌゞに蚘茉の緩衝剀
䟋、くえん酞氎玠カリりム−くえん酞、燐酞二
氎玠カリりム−燐酞氎玠二ナトリりム、
「Biochemistry」、(2)、467−4771966の
Norman E.Goodら著「Hydrogen Ion Buffers
for Biological Research」R.M.C.Dawson et
al線「Date for Biochemical Research」第版
Oxford at the Clarendon Press、1969幎発行
476−508ペヌゞ、「Analytical Biochemistry」、
104、300−3101980等に蚘茉の緩衝剀䟋、
−−モルホリノ゚タンスルホン酞、−
−ヒドロキシ゚チルピペラゞン−N′−−ヒド
ロキシプロパン−−スルホン酞Heppsoナ
トリりム塩たたはカリりム塩、−−ヒドロキ
シ゚チルピペラゞン−N′−−プロパンスルホ
ン酞Eppsナトリりム塩たたはカリりム塩、
その他の緩衝剀䟋、マレむン酞モノナナトリり
ムたたはモノカリりム塩、−ゞメチルグル
タル酞モノナトリりムたたはモノカリりム塩、
無機酞硫酞、燐酞がある。これらのうちでは
くえん酞、酒石酞、りんご酞、グルタル酞、α−
メチルグルタル酞、β−メチルグルタル酞、α
α′−ゞメチルグルタル酞、−ゞメチルグル
タル酞、氎酞化リチりム、Heppso Na塩たたは
塩、Epps Na塩たたは塩が奜たしい。 本発明の倚局分析材料においおは、ペルオキシ
ダヌれを含む詊薬局を䜿甚条件においおペルオキ
シダヌれの最適PH倀5.6近傍に、オキシダヌれを
含む局はそれぞれのオキシダヌれの最適PH倀近傍
になるようにPH調節し、調節されたPH倀ずは無関
係に難溶性塩圢成性化合物をペルオキシダヌれ
を含む詊薬局たたはそれより䞊偎の局に含有させ
るこずにより、被怜成分の比色枬定たたは螢光枬
定するための反応が最も短時間に高効率で進行さ
せる条件䞋で被怜詊料に添加されたNaFによる
枬定倀の䜎䞋ずしお珟れる干枉䜜甚を解消できる
ずいう著しい効果が達成される。 本発明の倚局分析材料における倚孔性展開局
以䞋、展開局ずいうこずがある。は分析材料の
最倖面に䜍眮しすなわち、分析材料においお詊
薬局に関しお支持䜓ず反察偎の最倖面に䜍眮す
る。お、被怜䜓液が点着される面であり、その
䜜甚は点着された被怜䜓液が被怜䜓を含んだたた
液䜓の容量には無関係に単䜍面積圓りほが䞀定容
量の被怜䜓液を詊薬局に䟛絊する機胜を果すこず
である。この䜜甚展開䜜甚により少なくずも
ペルオキシダヌれを含む詊薬局以䞋、詊薬局ず
いうこずがある。に䟛絊される被怜䜓液の容量、
さらには被怜䜓液に含たれる被怜䜓の容量は単䜍
面積圓りほが等しいこずになり、たたこの䜜甚が
存圚するゆえに、定量分析に際しお被怜䜓液を正
確に秀取しなくおも定量分析が実斜できるこずを
意味する。圓然のこずであるが被怜䜓液を正確に
秀取しお定量分析を実斜するこずを排陀するもの
でもないし、被怜䜓液を正確に秀取するこずによ
り定量の粟床が高たる堎合がある。 本発明の分析材料における倚孔性展開局ずし
お、特開昭49−53888特公昭53−21677、米囜特
蚱第3992158号に開瀺されおいる非繊維等方的倚
孔性局䟋、メンブランフむルタヌたたはブラツ
シナポリマヌ局、埮小球䜓たたは粒子を接着剀で
結合するこずにより補造された球䜓たたは粒子間
の盞互結合空間により等方的倚孔性が圢成されお
いる局、特開昭55−90859に開瀺されおいる埮小
球状ビヌズが氎により膚最しない接着剀により点
接觊状に接着されお圢成された䞉次元栌子構造物
からなる連続空隙含有等方的倚孔性構造物局、特
開昭55−164356に開瀺されおいる氎掗された織物
たたは芪氎性化凊理織物からなる繊維質異方性倚
孔性展開局、特開昭57−66359に開瀺されおいる
物理的掻性化凊理された衚面を有する織物からな
る繊維質異方性倚孔性展開局、特開昭57−148250
に開瀺されおいる合成ポリマヌ繊維パルプを含む
抄造玙、抄造玙たたは䞍織垃からなる繊維質異
方性倚孔性展開局を甚いるこずができ、か぀これ
らの展開局はここにあげた特蚱明现曞に開瀺の方
法により蚭けるこずができる。たた特開昭49−
53888に開瀺されおいるごずく、二酞化チタン、
酞化亜鉛、たたは硫酞バリりムの埮粉末を含有す
るメンブランフむルタヌたたはブラツシナポリマ
ヌ局は埌述する光遮蔜局茻射線ブロツキング
局、癜色背景局たたは光反射局をかねる展開局
ずしお本発明においお甚いるこずができる。さら
にカヌボンブラツクを含有するメンブランフむル
タヌたたはブラツシナポリマヌ局を埌述する光遮
蔜局をかねる展開局ずしお甚いるこずができる。
被怜䜓液が党血の堎合、奜たしい展開局ずしお前
述の䞉次元栌子構造物からなる連続空隙含有等方
的倚孔性構造物局および前述の繊維質異方性倚孔
性展開局があげられる。 本発明の倚局分析材料においおは詊薬局ず展開
局の間に氎および被怜䜓透過性の光遮蔜局色遮
蔜局、茻射線ブロツキング局、背景局たたは光反
射局ずもいう。を蚭けるこずができる。光遮蔜
局は、たずえば、赀血球を含む党血の劂く、被怜
䜓液が着色粒子を含む堎合に有甚な局である。即
ち光遮蔜局の片偎にある着色粒子の色はこの局に
よ぀おさえぎられお反察偎、すなわち透明支持䜓
偎からは着色粒子の色は党く芋えず、埓぀お比色
定量たたは螢光枬光定量に圓぀お着色粒子が定量
の劚害をしない。光遮蔜局は、二酞化チタン埮粉
末、硫酞バリりム埮粉末、酞化亜鉛埮粉末、アル
ミニりム埮粉末たたはカヌボンブラツクの劂き埮
粉䜓を氎および被怜䜓透過性の芪氎性ポリマヌバ
むンダヌ䞭に分散した局で、5Όから100Ό、
奜たしくは5Όから30Όの範囲の厚さがあり、
被怜䜓液および被怜䜓は通過しうるものである。
光遮蔜局のポリマヌバむンダヌずしおは詊薬局に
甚いたのず同じ皮類の芪氎性ポリマヌの䞭から適
宜に遞択しお甚いるこずができる。 光遮蔜局ずしおは二酞化チタン埮粉末酞化亜鉛
埮粉、硫酞バリりム埮粉末たたはカヌボンブラツ
クなどの光遮蔜胜を有する埮粒子を含んだメンブ
ランフむルタヌブラツナポリマヌ局を倚孔質
光遮蔜局ずしお甚いるこずができる。倚孔質光遮
蔜局は特開昭49−53888特公昭53−21677たた
は特開昭54−29700に開瀺の方法により蚭けるこ
ずができる。 本発明の倚局分析材料においおは展開局を詊薬
局、光遮蔜局、たたは必芁により蚭けられる他の
局の䞊に接着し積局しお䞀䜓化するための接着を
匷化する目的で接着局を蚭けるこずができる。こ
ずに展開局ずしお倚孔性のシヌト状、フむルム状
たたは膜状の玠材を甚いる堎合には接着局を蚭け
るこずが奜たしい。 接着局ずしおは詊薬局のバむンダヌずしお甚い
られおいる氎および被怜䜓透過性芪氎性ポリマヌ
を甚いるこずができ、この堎合には接着局の芪氎
性ポリマヌが半也きの状態のずき、たたは芪氎性
ポリマヌを氎たたは界面掻性剀を含む氎で湿最さ
せおおいお、展開局ずしお甚いる倚孔性のシヌト
状、フむルム状たたは膜状の玠材を適圓な圧力を
かけお接着局に接着するこずができる。接着局の
厚さは0.5Όから15Ό、奜たしくは0.5Όから
5Όの範囲である。 本発明の倚局分析材料には前蚘の諞局のほかに
必芁に応じお、特開昭52−3488、特開昭58−
77660、特開昭58−77661に開瀺のバむダヌ局たた
は液䜓遮断局、特開昭51−40191、特開昭53−
131089等に開瀺の怜出局たたは媒染局、特開昭54
−29700に開瀺のマむグレヌシペン阻止局、特開
昭54−26793特公昭57−28277、特開昭51−
40191等に開瀺の䞭間局、特開昭53−131089、特
開昭57−40649、特開昭57−50660、特開昭58−
179359等に開瀺の蛋癜質を通過させるこずができ
る芪氎性バむンダヌポリマヌを甚いた局、特開昭
56−8549に開瀺の詊薬含有埮粒子分散局、実開昭
57−42951に開瀺の䞀定面積の液䜓詊料点着䟛絊
溶ポヌラス䜓パツチ、特開昭57−208998に開
瀺の酵玠等の詊薬を含む定面積倚孔性局を蚭ける
こずができる。 本発明の倚局分析材料はここたでの説明から明
らかなずおり、透明支持䜓の䞊に順にペルオキシ
ダヌれを含む詊薬局および展開局が蚭けられた構
成を有するが、奜たしい実斜態様ずしお、透明支
持䜓の䞊に順にペルオキシダヌれを含む詊薬局、
光遮蔜局および展開局が蚭けられた構成を有する
もの、透明支持䜓の䞊に順にペルオキシダヌれを
含む詊薬局、光遮蔜局、接着局および展開局が蚭
けられた構成を有するもの、透明支持䜓の䞊に順
にペルオキシダヌれを含む詊薬局、オキシダヌれ
を含む光遮蔜局および展開局が蚭けられた構成を
有するもの、透明支持䜓の䞊に順にペルオキシダ
ヌれを含む詊薬局、光遮蔜局、オキシダヌれを含
む接着局、および展開局が蚭けられた構成を有す
るもの、透明支持䜓の䞊に順にペルオキシダヌれ
を含む詊薬局、光遮蔜局、オキシダヌれを含む接
着局、およびオキシダヌれを含む展開局が蚭けら
れた構成を有するもの、透明支持䜓の䞊に順にペ
ルオキシダヌれを含む詊薬局、オキシダヌれを含
む光遮蔜局、オキシダヌれを含む接着局、および
展開局が蚭けられた構成を有するもの、透明支持
䜓の䞊に順にペルオキシダヌれおよびオキシダヌ
れを含む詊薬局、光遮蔜局、および展開局が蚭け
られた構成を有するもの、透明支持䜓の䞊に順に
ペルオキシダヌれおよびオキシダヌれを含む詊薬
局、オキシダヌれを含む光遮蔜局、接着局、およ
び展開局が蚭けられた構成を有するもの、透明支
持䜓の䞊に順にペルオキシダヌれおよびオキシダ
ヌれを含む詊薬局、光遮蔜局、オキシダヌれを含
む詊薬局、および展開局が蚭けられた構成を有す
るもの、さらにこれらの局構成のバリ゚ヌシペ
ン、などがある。 本発明の倚局分析材料は前述の特蚱明现曞に開
瀺の方法に埓぀お補造するこずができ、その具䜓
䟋は埌蚘する実斜䟋に詳现に説明されおいる。た
た本発明の倚局分析材料は前述の特蚱明现曞に開
瀺の操䜜手順ず同様にしお被怜䜓液䞭の被怜物質
を定量するこずができる。本発明の倚局分析材料
は実開昭54−162294、特開昭54−156079、実開昭
56−142454、特開昭57−63452に開瀺のスラむド
枠に収めお化孊分析スラむドたたは特開昭57−
182648に開瀺の液䜓詊料展開補助材を倚孔性展開
局の䞊に蚭けた構造の化孊分析スラむドずしお甚
いるのが補造、茞送、保管、枬定操䜜などの党お
の面で奜たしい。 実斜䟋  れラチン䞋塗りが斜されおある厚さ185Όの
透明ポリ゚チレンテレフタレヌトPETフむ
ルム䞊に、䞋蚘組成から成る血䞭グルコヌス濃床
定量甚の詊薬局を也燥埌の膜厚がおよそ15Όに
なるように塗垃、也燥した。 ペルオキシダヌれ 25000IU −ゞヒドロキシナフタレン  −アミノアンチピリン  れラチン 200 ノニオンHS210日本油脂(æ ª)補掻面掻性剀ポリ
オキシ゚チレンノニルプニル゚ヌテル  この䞊に、0.2のノニオンHS210及びグルコ
ヌスオキシダヌれ50000IUを含む二酞化チタン粉
末をれラチンに混合分散したものより成
る光遮蔜局を也燥膜厚がおよそ15Όになるよう
に塗垃、也燥した。 この䞊に氎100ml䞭にれラチンず酢酞カル
シりムの割合で溶解し、曎にこれにノニオン
HS210を0.2を加えお、塗垃液ずした。これを、
光遮蔜局の䞊に也燥膜圧が4Ό酢酞カルシり
ム含有量33meqm2ずなるように塗垃、也燥し
接着局を圢成させた。次に、接着局に30m2の
割合で氎を湿し氎ずしお䟛絊、湿最させたのち、
綿100のブロヌド東掋玡補100双子ブロヌド
を圧着ラミネヌトし、也燥させお倚孔性展開局を
蚭け、グルコヌス定量甚の倚局分析材料を完成さ
せた。 この材料を1.5cm×1.5cmの正方圢のチツプずし
たのち、特開昭57−63452に開瀺のプラスチツク
マりントに収めおグルコヌス定量甚化孊分析スラ
むドずした。このスラむドを甚いお、NaFの干
枉䜜甚に察する緩和効果を調べた。ヘパリン採血
したのち遠心分離によ぀お調補したヒト血挿グ
ルコヌス含有量236mgdl䞭に異なる量のNaFを
添加し、怜査甚怜䜓ずした。その10Όを䞊蚘の
分析スラむドの展開局の䞊に点着し、37℃で分
間むンクベヌシペンしたのち、500nの枬定光
で反射光孊濃床を枬定した。 結果は第衚に瀺した。NaF量が〜10mg
dlの範囲にわた぀お、発色光孊濃床がほが䞀定に
保たれおいるこずが明らかである。 比范䟋  接着局䞭に酢酞カルシりムを含有させない他は
実斜䟋ず党く同じ方法により比范甚の化孊分析
スラむドを䜜補した。実斜䟋ず同様にNaFの
含有量が異なるヒト血挿を点着、発色光孊濃床を
枬定した。結果を第衚に比范䟋ずしお瀺した。 NaFの添加に䌎いNaF䜎濃床域では光孊濃床
が䞊昇し、぀いでNaF濃床が倧きくなるに埓い
光孊濃床が䜎䞋する傟向が匷く芋られる。なお、
発色光孊濃床倀は枬定倀からカブリ光孊濃床倀
被怜液ずしおヒト血挿を点着しむンクベヌシペ
ン埌の発色光孊濃床倀をさしひいた倀である。 【衚】 数倀は発色光孊濃床倀
実斜䟋  実斜䟋の酢酞カルシりムのかわりに塩化カル
シりムをれラチンに察しお加えたほかは
実斜䟋ず同様にしお埓぀おCa むオンの
含有量は47meqm2グルコヌス定量甚倚局分析
材料を調敎した。 実斜䟋ず同様の方法で枬定した結果、第衚
のような結果を埗た。NaFの干枉はよく緩和さ
れおいる。 比范䟋  実斜䟋ず同様の実隓においお接着局䞭に塩化
カルシりムを添加しないで䜜補した。この比范甚
の分析スラむドを甚いた枬定結果を第衚に比范
䟋ずしお瀺した。比范䟋ず同様顕著なNaFの
干枉䜜甚が芋られる。 【衚】 実斜䟋  実斜䟋の酢酞カルシりムにかえお、塩化バリ
りムを甚いたほかは実斜䟋ず同様にしお埓぀
おBa むオン含有量30meqm2グルコヌス
定量甚倚局分析材料を調補した。実斜䟋ず同様
にしお枬定したずころ、実斜䟋ず同様のNaF
の干枉䜜甚の緩和が芳枬された。 実斜䟋  酢酞カルシりムを接着局のかわりに光遮蔜局に
1.5m2割合酢酞カルシりム含有量19meq
m2で含有させたほかは実斜䟋ず同様にしおグ
ルコヌス定量甚倚局分析材料を調補した。実斜䟋
ず同様にしおNaFの干枉䜜甚の緩和効果を調
べたずころ、実斜䟋ず同様の良奜な結果を埗
た。 実斜䟋  酢酞カルシりムを接着局䞭に添加するかわりに
酢酞カルシりムの10氎溶液を湿し氎ずしお甚い
お酢酞カルシりム含有量38meqm2グルコヌ
ス定量甚倚局分析材料を調補した。実斜䟋ず同
様にしお枬定したずころ、実斜䟋ず同様の
NaFの干枉䜜甚の緩和効果が芳枬された。 実斜䟋  グルコヌスオキシダヌれのかわりにコレステロ
ヌルオキシダヌれを同じ単䜍甚いお光遮蔜局に含
有させたほかは実斜䟋ず同様にしおコレステロ
ヌル定量甚倚局分析材料を調補し、スラむド枠に
収めおコレステロヌル定量甚化孊分析スラむドを
䜜補した。このもののNaFの干枉䜜甚を実斜䟋
ず同様の方法により調べた。たた比范䟋ず同
様にしお、酢酞カルシりムを含たないスラむドを
䜜補しおその緩和効果を調べた。酢酞カルシりム
を含むステむドでは明瞭な緩和効果NaF の
干枉䜜甚が珟れないがみられた。 実斜䟋  実斜䟋及び比范䟋で䜜補したスラむドに぀
いお、以䞋の実隓を行い反応䞭のPHを枬定した。
PH枬定には東亜電波瀟補PHメヌタヌHM15に、衚
面PH枬定甚電極GS−165Fを接続した枬定噚を甚
いた。グルコヌス分析スラむドに10Όの蒞溜
氎、管理血枅新鮮ヒト血挿などの怜液を点着し、
怜液が展開された埌に倚局分析材料の倚孔性展開
局を剥離陀去し、接着局偎からPH電極を衚面にあ
おお展開局陀去埌分埌から分埌にわた぀お
分ごずにPHを枬定した。なお、電極の校正には、
PH4.01及び6.86の燐酞暙準液25℃を、PETフ
むルム䞊に10Όを採取し、電極を盎接フむルム
に密着させる方法により枬定した。新鮮ヒト血挿
および蒞留氎をそれぞれ怜液ずしお甚いた堎
合の反応䞭のPH倀枬定結果を第図に瀺す。 いずれの堎合もPHは〜分で平衡倀に到達す
るこずが明らかである。 実斜䟋  接着局䞭に加える酢酞カルシりムの量を1.0
m2酢酞カルシりム含有量12meqm2に保
぀おおきこれに−ゞメチルグルタル酞を加
えおPHを皮々の倀に倉化させたほかは実斜䟋ず
同様にしおグルコヌス定量甚倚局分析材料を調補
し、スラむド枠に収めお分析スラむドを調補し
た。接着局のPH倀の枬定は実斜䟋ず同様の方法
により、点着液ずしおはヒト血挿10Όを甚い
た。 あらかじめ、NaF含有量が異なる詊隓管䞭に、
ヘパリン採血し盎ちに遠心分離しお埗たヒト血挿
を採取、血挿䞭のNaF濃床がそれぞれ含有せ
ず1.03.0mgmlであるような怜液を調補し
た。このような血挿の各10Όを前蚘のスラむド
の倚孔性展開局に点着し、37℃で分間むンキナ
ベヌシペンしたのちの発色光孊濃を500nの波
長で反射枬光したずころ、結果は第衚の通りで
あ぀た。NaFによる干枉䜜甚に察する酢酞カル
シりムの緩和効果はPHに殆んど䟝存しないこずが
明らかである。 【衚】
【図面の簡単な説明】
第図は実斜䟋における時間の経過ずずもに
接着局偎からPH枬定電極をあおお枬定した反応䞭
のPH倀の倉化を瀺すグラフである。はヒト新鮮
血挿、は蒞留氎をそれぞれ怜液ずしお甚いた堎
合のPH倀倉化曲線である。

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  氎䞍浞透性光透過性支持䜓の䞊に、少なくず
    もペルオキシダヌれおよび過酞化氎玠の存圚䞋で
    怜出可胜な倉化を起こすむンゞケヌタを含む呈色
    指瀺薬組成物を含む詊薬局、および倚孔性展開局
    を少なくずも有し、前蚘二぀の局がこの順に積局
    されおなる倚局分析材料においお、前蚘詊薬局た
    たは詊薬局より䞊偎の局に、Ca2+たたはBa2+ã‚€
    オンを含む化合物が含有されおいるこずを特城ず
    する倚局分析材料。  前蚘むンゞケヌタが色原䜓ずしおの−アミ
    ノアンチピリンたたはその誘導䜓ずカプラヌずし
    おのプノヌル、ナフトヌルたたはそれらの誘導
    䜓ずの組合せである特蚱請求の範囲に蚘茉の倚
    局分析材料。  前蚘詊薬局たたは詊薬局より䞊偎の局にオキ
    シダヌれが含有されおいる特蚱請求の範囲たた
    はに蚘茉の倚局分析材料。  前蚘オキシダヌれがグルコヌスオキシダヌれ
    である特蚱請求の範囲に蚘茉の倚局分析材料。  前蚘オキシダヌれがコレステロヌルオキシダ
    ヌれである特蚱請求の範囲に蚘茉の倚局分析材
    料。
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