JPH0469606B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、ネプラノシン（Neplanocin）Ｃを
有効成分とするヒトＴ細胞白血病ウイルス
（Human Ｔ−cell Leukemia Virus：以下、
HTLVと略す）またはエプステイン−バールウ
イルス（Epstein−Barr Virus：以下、EBVと略
す）に対する増殖抑制剤に関する。 従来の技術 ネプラノシンＣは、アンピエラリエラ
（Ampullariella）属に属するアンピエラリエラ・
エス・ピー・A11079（Ampu−llariella sp.
A11079）（FERM−ＰNo.4494）菌株の培養物から
見い出された抗生物質Ａ−11079−B₂と命名され
た物質（後日、ネプラノシンＣと命名）で、その
物性及び化学構造されている〔特開昭55−24157
号公報、英国特許第2021582B公報、カレント・
ケモトラピー・アンド・インフエクチオス・デイ
ジーズ（Current Chemotherapy and
Infeetious Disease）、VO1 、第1558頁
（1980）〕。このネプラノシンＣの作用としては、
植物病原糸状菌に対する抗菌作用および腫瘍細胞
Ｌ−1210に対する延命効果をみた制癌作用が報告
されているにすぎなかつた。 一方、ヒトＴ細胞白血病は南部日本、米国など
で散発している免疫不全を伴う白血病であり、最
近その原因ウイルスとしてHTLVが分離され、
ヒトのレトロウイルスとして確認された。
HTLVには、型、型、型が存在し、特に
HTLV型は日本における九州地方で発生して
いる成人Ｔ細胞白血病のウイルス（以下、
ATLVと略す）として知られ、さらに米国にお
けるＴ細胞悪性腫瘍患者や西インド諸島における
同様の腫瘍患者からも見い出されている。また
HTLV型は米国に特に問題となつている後天
性免疫不全症候群（AIDS）の原因ウイルス〔な
お、リンホアデノパシイーアソシエイテイド・ウ
イルス（Lymphadenopathy−associated virus）
も同一の可能性が示唆されているウイルスであ
る〕として知られている。さらにEBVは、ヘル
ペスウイルス群のDNAウイルスであり、ヒトの
バーキツトリンパ腫、上咽頭癌の原因ウイルスで
あることが確実視されている腫瘍ウイルスであ
り、これら腫瘍は東南アジア、中国などで多発し
ている。 発明が解決しようとする問題点 しかしながらこれらのHTLVやEBVに対する
有効な抗ウイルス剤の報告はなく、何んらの治療
もなし得ない現状であつた。それ故、HTLVや
EBVに対する抗ウイルス剤の出現が待たれてい
るものである。 問題点を解決するための手段 本発明者らは、鋭意研究した結果、全く意外に
も、ネプラノシンＣがHTLVおよびEBVに対し
て有効に各ウイルスの増殖を抑制することを見い
出した。 本発明は、上記の知見に基づいて完成されたも
ので、ネプラノシンＣを有効成分とするHTLV
またはEBVに対する増殖抑制剤である。 本発明の目的とするところは、HTLVまたは
EBVに対するネプラノシンＣを有効成分とする
抗ウイルス剤を提供するものである。 まず本発明におけるネプラノシンＣは、前述の
公知手段によつて製造し得るもので、簡便には、
アンピエラリエラ・エス・ピー・A11079（FERM
−ＰNo.4494）菌株の培養物から得ればよく、前述
の文献に記載の物質であり、その構造式、物性は
次下の通りである。 〔構造式〕 〔分子式、分子量〕 C₁₁H₁₃N₅O₂、279 〔融点〕 226℃（分解） 〔溶媒に対する溶解性〕 水、ジメチルスルホキサイド、ジメチルホルム
アミドに可溶性、メタノールに難溶性、酢酸エチ
ル、クロロホルム、ベンゼン、ヘキサンに不溶性
である。 〔酸塩基の区別〕 弱塩基性 またネプラノシンＣは、この遊離の形または無
機酸もしくは有機酸との塩、例えば塩酸塩、酢酸
塩、酒石酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩などの塩
の形で使用してもよい。 さらにネプラノシンＣを有効成分とするウイル
ス増殖抑制剤の調製に当つては、ネプラノシンＣ
のLD₅₀は55mg／Kg（マウス腹腔内注射）であり、
またその有効濃度としては2μｇ／ml以上である
ことから、抗ウイルス剤としての投与量はネプラ
ノシンＣとして成人、１日50〜200mg程度、好ま
しくは100mg程度であり、一般には注射用蒸類水
に無菌的に調製した５〜10mg／ml濃度の注射液と
して調製し、静脈内注射として投与すればよい。
さらに投与方法において、ネプラノシンＣと、乳
糖、澱粉、微結晶セルロースなどの賦形剤、ブド
ウ糖液、アラビアガム液、ゼラチン液、水または
エタノールなどの結合剤、炭酸カルシウム、界面
活性剤などの崩壊助剤、ステアリン酸マグネシウ
ム、ステアリン酸カルシウム、タルクなどの滑沢
剤を適宜選択して常法により圧縮成型して錠剤と
なしてもよく、また錠剤は、必要に応じて糖衣ま
たは腸溶性コーテイングしてもよく、さらに常法
によりカプセル剤となしてもよい。さらにネプラ
ノシンＣを、水性または油性の坐剤基剤に添加し
て常法により坐剤として調製してもよく、特に坐
剤の調製に当つては炭素数８〜18の脂肪酸または
そのナトリウム塩、Ｎ−アシルアミノ酸などの吸
収促進剤や塩化ナトリウムやブドウ糖の高張化剤
を添加調製、例えば英国公開特許明細書第
2092002号、同第2095994号記載を参照して行なう
ことが好ましい。またその他粉末、顆粒、内服用
液剤、軟膏、クリーム、エアゾール、点眼剤など
として適宜な基剤、添加物により投与方法に応じ
た製剤として調製することができる。 このようにして調製したネプラノシンＣを有効
成分とする製剤は、ネプラノシンＣのHTLVま
たはEBVに対する抗ウイルス剤としての有効量、
例えば成人、１日50〜200mgを１〜５日またはそ
れ以上投与すればよい。 作 用 本発明のネプラノシンＣは、HTLVに対して
ネプラノシンＣ濃度2μｇ／ml以上において良好
な増殖抑制の効果を示し、またEBVに対してネ
プラノシンＣ濃度2μｇ／mlにて増殖抑制の効果
はみられ、特に20μｇ／mlにおいては良好な増殖
抑制効果を示すものであり、このネプラノシンＣ
を有効成分とする製剤はHTLVまたはEBVに対
して良好な抗ウイルス剤を提供し得るものであ
る。 実施例 次いで本発明の実施例を挙げて具体的に述べる
が、本発明はこれらによつて何んら限定されるも
のではない。 実施例 １ （HTLVに対する作用） ATLV（HTLV型）持続感染細胞の増殖に対
するネプラノシンＣの阻害作用 10％牛胎児血清添加RPMI−1640培地にて
ATLV持続感染細胞MT−１〔Nature（London）、
294、770〜771、（1981）、“Type Ｃ virus
particles in ａ cord Ｔ−cell line derived by
co−cultivating normal human cord
leucocytes and human leukemic Ｔ−cells”〕
の２×10⁵個／mlの細胞浮遊液を調製し、これに、
同培地で調製した各種濃度のネプラノシンＣ溶液
を添加して、ネプラノシンＣ無添加対照区、0.2μ
ｇ／ml、2μｇ／ml、20μｇ／ml、200μｇ／mlとな
し、各々について37℃、５日間培養した。 なお培養の翌日から１日１回血球計算盤（改良
ノイバウエル型）を用いて細胞数を計測した。 その結果、第１図（ただし縦軸は対数目盛を示
す）に示す通りで、ネプラノシンＣの無添加の対
照区は２日目に９×10⁵個／mlと増殖してプラト
ーに達したが、ネプラノシンC20μｇ／mlでは１
日目に２×10⁴個／mlと減少死滅した。またネプ
ラノシンC200μｇ／mlにおいても１日間に４×
10⁵個／mlと減少死滅した。さらにネプラノシン
C2μｇ／mlでも２日目で５×10⁵個／mlと増殖が
抑制されたものであつた。なおネプラノシンＣの
0.2μｇ／mlの濃度では効果は認められなかつた。 これらの結果からHTLVに対するネプラノシ
ンＣの濃度としては2μｇ／ml以上で、特に20μ
ｇ／ml以上において良好な増殖抑制の効果がみら
れた。 実施例 ２ 〔EBVに対する作用〕 EBV持続感染細胞の増殖に対するネプラノシ
ンＣの阻害作用 10％牛胎児血清添加RPMI−1640倍地にて
EBV持続感染細胞P3HR−１〔Int.J.Cancer、17、
423〜428、（1976）、“Differential induction of
Epstein−Barr virus−related antigens in
human lymphoblastaid cell by virus−
mediated cell−to−cell contact”〕の２×10⁵
個／mlの細胞浮遊液を調製し、これに同倍地で調
製した各種濃度のネプラノシンＣ溶液を添加し
て、ネプラノシンＣ無添加対照区、2μｇ／ml、
20μｇ／mlとなし、各々について37℃、５日間培
養したもので、培養の翌日から１日１回血球計数
盤を用いて細胞数を計測した。 その結果、第２図（なお縦軸は対数目盛を示
す）に示す通りで、ネプラノシンＣ無添加対照区
に比べて、ネプラノシンC20μｇ／mlでは２日目
において極めて効果よく死滅せしめたもので、ま
たネプラノシンC2μｇ／mlでも対照に比べて明ら
かに増殖を阻害したものであつた。この結果から
ネプラノシンC20μｇ／ml以上で特に良好に増殖
抑制の効果がみられた。 実施例 ３ ネプラノシンC1ｇを注射用蒸留水200mlに溶解
し、これを滅菌処理し、１バイアルびん１mlづつ
充填し、これを凍結乾燥して１バイアルびん５mg
のネプラノシンＣ含有注射剤を調製した。本注射
剤について、１mlの用時溶解用溶液を添付した。 実施例 ４ ネプラノシンC50mg、澱粉50mg、乳糖40mg、微
結晶セルロース105mg、シヨ糖脂肪酸エステル2.5
mgおよびステアリン酸マグネシウム2.5mgの組成
を有する250mg錠剤とした。 実施例 ５ ネプラノシンC100mg、澱粉100mg、乳糖80mg、
微結晶セルロース210mg、シヨ糖脂肪酸エステル
５mgおよびステアリン酸マグネシウム５mgの組成
を有する500mg錠剤とした。

【図面の簡単な説明】

第１図はネプラノシンＣのATLVに対する増
殖抑制曲線を示し、第２図はネプラノシンＣの
EBVに対する増殖抑制曲線を示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ ネプラノシンＣを有効成分とするヒトＴ細胞
   白血病ウイルスまたはエプステイン−バールウイ
   ルスに対する増殖抑制剤。