JPH0477431A - インターフェロン誘起剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明はインターフェロン誘起剤に関する。

さらに詳しくは、加味逍遙散の抽出エキスを有効成分と
するインターフェロン誘起剤に関する。

［従来の技術］ インターフェロン（以下ＩＦＮと云う）は最も臨床応用
の進んだサイトカインであり、抗ウィルス剤および抗ガ
ン剤として用いられている。また、種々の物質が（内因
性）　ＩＦＮを誘起することも知られており、このよう
な物質（ＩＦＮ誘起剤）も、ＩＦＮと同様に抗ウィルス
剤および抗ガン剤として用いることができる。

漢方方剤は、比較的副作用が少ないことなどから慢性疾
患などに広く用いられているが、それら漢方方剤のうち
、小柴胡湯にＩＦＮ誘起作用のあることが報告されてい
る［医学と薬学、１０（２）　：６８７−６９３．１９
８３、日本薬学会第１０９年会講演要旨集Ｖ、８５頁、
１９８９年名古屋］。

［発明が解決しようとする課題］ 本発明者等は、小柴胡湯よりも優れたＩＦＮ誘起作用を
示す新たな漢方方剤を見い出すべく種々検討を行った。

本発明の目的は優れたＩＦＮ誘起作用を示す新たな漢方
方剤を提供することにある。

［課題を解決するための手段］ 本発明者等は種々の漢方方剤について検討した結果、従
来、不定愁訴・更年期障害など神経症状を伴う諸疾患に
用いられている加味逍遙散の抽出エキス（以下本発明の
薬剤と云う）が、上記の目的にかなうものであることを
見い出して本発明を完成させた。

本発明における加味逍遙散の構成（質量比）は当帰（２
，０〜４．０）、荀薬（２，０〜４．（１）、白Ｔｒ、
（２，ｏ〜４．０）、侠苓（２，０〜４．０）、柴胡（
２，０〜４．０）、牡丹皮（１，０〜３．０）、山楯子
（１，０〜３．０）、甘草（０，５〜３．０）、生養（
０，５〜３．０）、薄荷（１，０〜２．０）であり、特
に好ましくは当帰（３，０）、苑薬（３，の、白＊　（
３，０）、萩苓（３，０）、柴胡（３，０）、牡丹皮（
２，０）、山楯子（２，０）、甘草（１，５〜２．０）
、主要（０，５〜２．０）、薄荷（１，０）である。

本発明においては、加味逍遥散を溶剤で抽出し、濃縮エ
キスまたは乾燥エキス末として用いるのが好ましい。

本発明の薬剤は以下のようにして製造することができる
。

まず、加味逍遥散に対し、重量比で５〜２５倍、好まし
くは８〜２０倍の抽出溶剤を加え、これを通常８０〜１
００℃で３０分〜２時間加熱して抽出液を得る。抽出溶
剤は、水、水溶性有機溶剤あるいはこれらの混合溶剤で
あり、水溶性有機溶剤としてはエタノールが好ましい。

次に、抽出液を濾過あるいは遠心分離し、次いで、通常
の濃縮手段、例えば減圧濃縮し、要すればさらに通常の
乾燥手段、例えば減圧乾燥、噴霧乾燥あるいは凍結乾燥
することにより本発明の薬剤が得られる。

上述の如くして得られる本発明の薬剤はこのまま使用す
ることもできるが、必要に応じて賦形剤、崩壊剤などの
通常の医薬添加物、例えば乳糖、でんぷん、結晶セルロ
ース、カルボキシメチルセルロース　カルシウム、無水
ケイ酸、ステアリン酸マグネシウムなどを加えて常法に
より、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、錠剤、あるいは散
剤などに製剤化して用いることもできる。

本発明の薬剤は後記試験例に示す通り、侵れたＩＦＮ誘
起作用を示し、且つ、毒性も低く、ウィルス性疾患およ
びガンの予防および治療薬として用いることができる。

ウィルス性疾患としてはＢ型慢性肝炎、また、ガンでは
腎癌、多発性骨髄腫悪性黒色腫、悪性リンパ腫および成
人Ｔ細胞白血病などに用いられる。

本発明の薬剤の投与量は、患者の病態、年齢、体重など
によって一定しないが、通常、成人に対して１日当り乾
燥エキス末として０．３〜１０ｇを１度にまたは２〜３
回に分けて経口投与する。

［発明の作用効果］ 本発明の薬剤は、小柴胡湯よりも優れたＩＦＮ誘起作用
を有している（試験例１および２参照）。

なお、上記の作用が薬剤の直接作用ではなく、（内因性
）　ＩＦＮの訝起作用に基づくことは、試験例１および
２におけるＩＦＮ活性測定の際、検体試料にウサギ抗マ
ウスＩＦＮ−α／β抗体を共存させるとその活性が中和
されることから確かめられた。

また、本発明の薬剤の毒性は低い（試験例３参照）。

従って、本発明の薬剤は優れたＩＦＮ誘起剤として、ウ
ィルス性疾患およびガンの予防および治療に有効かつ安
全に使用することができる。

以下に本発明の薬剤に係る薬理試験について記載する。

試験例Ｉ ＩＦＮ誘起作用によるＩＦＮ　　　　　　　（イン・ビ
トロ）： （１）検体 実施例１の加味逍遥散乾燥エキス末（本発明の薬剤）お
よび比較例１の小柴胡湯乾燥エキス末（対照薬剤）。

（２）試験方法 Ｃ３Ｈ／Ｈｅ雌性マウス（８週齢）より牌臓細胞を採取
し、１０（Ｗ／Ｖ）％牛胎児血清（ＮＵ−３ＥＲＵＭ、
　Ｃｏｌ　１ａ−ｖｏｌａｔｉｖｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ
　Ｉｎｃ、製）および１ｋｇ／ｍｌのゲンタマイシンを
含むＲＰＭＩ−１６４０培地（日本製薬製）で２Ｘ１０
’ｃｅｌｌｓ／ｍｌの牌臓細胞浮遊液を調製した。この
細胞浮遊液０．５ｍｌに、検体２００ルｇ／ｍｌを含む
上記培地０．５ｍｌを加え、２４穴培養プレート（Ｆａ
ｌｃｏｎ　３０４７、Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏ
ｎ　Ｉｎｃ、製）にて３７°Ｃで２４時間培養後、培養
上澄を遠心処理（１０００ｒｐｍ、　１０分間）してそ
の上澄液をとり、ＩＦＮ活性測定用に供した。

検体のＩＦＮ誘起作用によるＩＦＮ活性の測定はマウス
Ｌ９２９細胞を用いた５０％細胞変性効果阻止法（イン
ターフェロンの科学、１３頁、小林茂保編、講談社）で
行った。

まず、予め９６穴培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ　３０７
２、Ｂｅ−ｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ　Ｉｎｃ、製
）にＬ９２９細胞４Ｘ１０’　／ウェルを５　（Ｗ／Ｖ
）　％　ＮＮ０−３ＥＲＯを含ムＭＥＭ培地（日本製薬
製Ｈｏｏｇｔ中で一夜培養して単層を形成させ、上記（
１）で得られたＩＦＮ活性測定用の試料溶液を０．５（
Ｗ／Ｖ）％ＮＵ−８ＥＲＵＭを含むＭＥＭ培地にて２倍
ずつ段階希釈して加え、３７°Ｃで１夜培養後、水痘性
口内炎ウィルス（Ｖｅｓｉｃｕｌａｒｓｔｏｍａｔｉｔ
ｉｓ　ｖｉｒｕｓ、家畜衛生試験所）を攻撃用ウィルス
としてＬ９２９細胞に加えた。３７°Ｃで１夜培養後、
Ｌ９２９細胞の細胞変性効果の阻止率を指標として検体
のＩＦＮ誘起作用によるＩＦＮ活性を測定した。

ＩＦＮ活性の単位は上記試験において、検体を添加しな
い場合（ＩＦＮ無処置細胞）における細胞変性効果の５
０％を示す希釈の逆数として表した。

また、ＩＦＮ活性は標準ＩＦＮ（Ｌｅｅ　Ｂｉｏ　Ｍｏ
１ｅｃｕｌａｒＲｅｓｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｉｅｓ　Ｉｎｃ、製）を同時に試験し、ＩＦＮ国際単位
［１ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　ｕｎｉｔ（ＩＵ）／ｍ
ｌ］に補正して表現した。

（３）試験結果 試験結果を試験例２（イン・ビボ）の結果とあわせて後
記第１表に示す。

試験例２ ＩＦＮ誘起作用によるＩＦＮ活性の測定（イン・ビボ）
： （１）検体 試験例１に同じ。

（２）試験方法 Ｃ３Ｈ／Ｈｅ雌性マウス（８週齢、−群３匹）の腹腔内
に検体（１００■／ｋｇ）のリン酸緩衝塩類溶液０．２
ｍｌを投与し、投与１４時間後にマウスより個別に全採
血し、その血清をＩＦＮ活性測定用に供した。

検体のＩＦＮ誘起作用によるＩＦＮ活性の測定は試験例
１と同様にして行った。

（３）試験結果 試験結果を第１表に示す。　　　　　、。

第１表 試験例３ 急性毒性試験： （１）検体および試験方法 実施例１の加味逍遥散乾燥エキス末を０．５（Ｗ／Ｖ）
％カルボキシメチルセルロース　ナトリウム水溶液に懸
濁（濃度１０００■／ｍｌ）　Ｌ／てｄｄＹ系雄性マウ
ス（６週齢、体重２６〜２９ｇ、１群１０匹）に１０ｇ
／眩宛て経口投与し、投与後２週間までの死亡数を観察
した。

（２）試験結果 投与後２週間までに全く死亡例を認めず、加味逍遥散乾
燥エキス末のＬＤ、。値は＞Ｌｏｇ／ｋｇであつた。

従って、本発明の薬剤はきわめて毒性が低い。

［実施例コ 次に実施例および比較例を挙げて本発明を説明する。

実施例１ 加味逍遥散乾燥エキス末： 当帰、荀薬、白木、萩苓、柴胡の各３．０　ｋｇ、牡丹
皮、山扼子の各２．０　ｋｇ、甘草１．５　ｋｇ、主要
０．５聴および薄荷１．０　ｋｇからなる混合生薬に水
２２０１を加えて約１００°Ｃで１時間加熱抽出した。

抽出液を濾過し、濾液を約２０１まで減圧濃縮後、噴霧
乾燥して加味逍遥散乾燥エキス末４．１　ｋｇを得た。

実施例２ 加味逍遥散出と二組粒剤： （処方） 組　　　　成　　　　　　　配合量 主薬（実施例１の乾燥エキス末）　　４．１０重量部乳
糖　　　　　　　　　　　　　　０．１４重量部トウモ
ロコシデンプン　　　　　　１．３０重量部無水ケイ酸
　　　　　　　　　　　０．３７重量部ステアリン酸マ
グネシウム　　　　０．０９重量部（操作） 上記の各成分を充分混合し、この混合物を圧縮成型機に
より板状物とした後、オシレーターで粉砕粒状とし、整
粒篩別して１ｇ中に生薬６８３■を含む加味逍遥散エキ
ス細粒剤を得た。

実施例３ 加味逍遥散エキス錠剤： （処方） 組　　　　成 生薬（実施例１の乾燥エキス末） 乳糖 トウモロコシデンプン 合成ケイ酸アルミニウム カルボキシメチルセルロース カルシウム ステアリン酸マグネシウム （操作） 上記各成分を充分混合し、 この混合物を１錠 配合量 ３．００重量部 １．００重量部 ０．５０重量部 ０．２０重量部 ０．２５重量部 ０．０５重量部 ３００ｍｇに打錠して、１錠中に主薬１８０■を含む加
味逍遥散エキス錠剤を得た。

実施例４ 加味逍遥散エキスカプセル剤： （処方） 組　　　　成　　　　　　　配合量 主薬（実施例１の乾燥エキス末）　　３．３４重量部合
成ケイ酸アルミニウム　　　　　０．１８重量部ステア
リン酸マグネシウム　　　　０．０８重量部（操作） 上記の各成分を充分混合し、この混合物の３６０■宛て
をカプセルに充填して１カプセル中に生薬３３４ｍｇを
含む加味逍遥散エキスカプセル剤を得た。

比較例１ 小柴胡湯乾燥エキス末： 柴胡７．Ｏｋｇ、半夏５．０ｋｇ　、黄苓、太棗、人参
の各３．０　ｋｇ、甘草２．Ｏｋｇおよび主要１．０　
ｋｇからなる混合生薬に水２４０１を加えて約１００°
Ｃで１時間加熱抽出した。抽出液を濾過し、濾液を約３
０１まで減圧濃縮後、噴霧乾燥して小柴胡湯乾燥エキス
末５．４　ｋｇを得た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 加味逍遙散の抽出エキスを有効成分とするインターフェ
   ロン誘起剤。